Microbiologa ambiental IIS-15 26 de agosto de 2015

CULTIVOS BACTERIANOS: PREPARACIN Y MTODOS DE AISLAMIENTO QUE PERMITEN

LA DISTINCIN DE UNA CEPA PURA.
Assia Anyeline, Dejongh Javier, Ospino Eugenia, Pardo Danay
Facultad de ingeniera, ingeniera ambiental y sanitaria, Santa Marta, Magdalena, Colombia
javidejongh@gmail.com, danayvanesaa@gmail.com, eugedejesus@gmail.com,
anyelineassia24@gmail.com
El cultivo de microorganismos consiste en proporcionarles las condiciones fsicas, qumicas y
nutritivas adecuadas para que puedan multiplicarse de forma controlada. En general, podemos
distinguir cultivos lquidos y slidos en funcin de las caractersticas del medio y cultivos
discontinuos y continuos en funcin de la disponibilidad de nutrientes en el medio.[1]
Un microorganismo necesita para crecer nutrientes que le aporten energa y elementos qumicos
para la sntesis de sus constituyentes celulares. Dependiendo de la fuente de carbono que utilizan,
los microorganismos se pueden clasificar en auttrofos si es el CO2 atmosfrico (microorganismos
que fotosintetizan) y hetertrofos si utilizan carbono orgnico. [1]
En funcin de los microorganismos que pueden crecer, los medios pueden ser generales,
selectivos cuando favorecen el crecimiento de ciertos microorganismos mientras suprimen el de
otros, diferenciales cuando alguno de sus componentes permite identificar las colonias de un tipo
de microorganismos, selectivo-diferenciales cuando combinan las dos caractersticas anteriores
(por ejemplo, el agar de MacConkey para identificar Escherichia coli), y medios de enriquecimiento
que permiten aislar un tipo determinado de microorganismo a partir de una mezcla una poblacin
mixta de gran tamao. [1]
Para la elaboracin de la experiencia, se desarrollaron cuatro tcnicas de siembra de
microorganismos: la siembra en medio lquido, que con ayuda de un asa bacteriolgica
previamente estril se tom una pequea porcin de la suspensin bacteriana (E.coli) contenida
en el tubo con agua peptonada, para luego introducir el asa con el inoculo en el tubo de ensayo
con caldo nutritivo estril; La siembra en medio inclinado, en la que se tom con la ayuda del asa
recta o de punta previamente esterilizada, el cultivo de E.coli a sembrar y se introdujo mediante
pulsin, adems que se realiz en la superficie en forma de zigzag(estra);La Siembra en
superficie dnde con ayuda de una esptula de Drigalsky se extiende el inculo hasta su absorcin
total por el medio de cultivo; y la Siembra por agotamiento en la cul con ayuda el marcador se
dividi la caja petri en tres sectores, se extrajo del tubo de ensayo un pequeo inoculo de la flora
bacteriana y Se descarg suavemente el material en el sector uno, 2 y 3 sucesivamente girando
en un ngulo de 90.[2]
Al realizar la experiencia y dejar en incubacin por 5 das los respectivos cultivos bacterianos
(principalmente escherichia coli) se evidenci, la formacin de pequeos grumos, mostrando
turbiedad en el caldo en medio lquido.
En cunto a la siembra por medio inclinado (pulsin y sembrado por estra) se observ
crecimiento tanto en la superficie del lquido como en el fondo de este.
Igualmente, en la siembra por superficie, se detall el crecimiento de las bacterias las cuales
posean un color brillante.
En el cultivo por agotamiento se observ la prevalencia de una sola especie bacteriana
(escherichia coli) que irradiaba un color translcido.

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La distribucin de desarrollo en caldo nutritivo es uniformemente distribuido (turbiedad uniforme),
desarrollo confinado a la superficie del caldo como nata o pelusa, o desarrollo que se acumula
como sedimento, que es granular o viscoso. [3]
Lo anterior, nos indica que estbamos ante el crecimiento bacteriano en el caldo nutritivo.
En cuanto al cultivo por medio inclinado, la consistencia es mantecosa o de mantequilla,
fcilmente removibles con una aguja de siembras, viscosas o filamentosas, secas y brillantes.
Asimismo al crecer tanto en la superficie como el fondo deducimos que se trata de bacterias
facultativas, que son bacterias que se desarrollan en presencia como en ausencia de oxgeno libre.
[3]

En el caso del cultivo por agotamiento, encontramos que se emple el agar de eosina de
metileno, que es un mtodo selectivo diferencial para bacterias gramnegativas no exigentes. Los
colorantes contenidos en el medio inhiben el crecimiento de las bacterias grampositivas, excepto
el de enterococo. Con ello, se permite la diferenciacin de las enterobacterias fermentadoras de la
lactosa (E.coli) de las no fermentadoras. [4]
Por lo anterior, se pudo observar el brillo metlico de la E. coli, el cul es su caracterstica
fenotpica al fermentar la lactosa.
Por ltimo, es importante mencionar que por medio de esta prctica se utilizaron las tcnicas
aprendidas durante la clase. Se aprendi cada uno de los mtodos que existen para cultivar
bacterias y de esta manera observar sus caractersticas tanto macroscpicas como microscpicas
e interpretacin de las mismas. Igualmente se analiz que para cada bacteria existen
caractersticas fenotpicas y genotpicas diferentes, siendo las fenotpicas las que se expresan por
lo que identifican y diferencian una bacteria de otra en caso de querer un cultivo puro.
BIBLIOGRAFA
1. Cap. 1 de la 8 edicin de Brock: Biologa de los microorganismos
2. Luna, F. 2012. Manual de prcticas de laboratorio: Microbiologa general y aplicada. 1
Edicin. Editorial Unimagdalena, Santa Marta, Colombia. 112 p.
3. Pelczar Michael J, Reid Roger D, Chan E.C.S. 1996. Microbiologa. 4 edicin. McgrawHill de Mxico, S.A de C.V. ciudad de Mxico , Mxico. 824 p.
4. Prats Guillem.2005. Microbiologa clnica.Panamericana. Buenos aires, Argentina. 363 P.