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DETERMINAO DE RESDUOS DE
HEXACLOROCICLOHEXANO "HCH" NO SORO SANGNEO
DE TRABALHADORES EXPOSTOS NO ARQUIVO
HISTRICO DE JOINVILLE NA DCADA DE 80
D i s s e r t a o apresentada c o m o parte
dos requisitos para o b t e n o do Grau
de Mestre e m Cincias na rea de
Tecnologia N u c l e a r - M a t e r i a i s .
Orientador:
Dr. Jos O s c a r Willian Vega Bustillos
So Paulo
2007
D i s s e r t a o a p r e s e n t a d a c o m o parte
d o s requisitos para o b t e n o d o G r a u
d e M e s t r e e m C i n c i a s na r e a de
T e c n o l o g i a N u c l e a r - Materiais.
Orientador:
Dr. J o s O s c a r W i l l i a m V e g a Bustillos
S o Paulo
2007
ipen
INSTITUTO DE PESQUISAS ENERGTICAS E N U C L E A R E S
AUTARQUIA ASSOCIADA UNIVERSIDADE DE SO PAULO
Dissertao a p r e s e n t a d a c o m o parte
d o s requisitos p a r a o b t e n o d o G r a u
d e Mestre e m C i n c i a s na r e a d e
T e c n o l o g i a Nuclear - Materiais.
Orientador:
Dr. J o s O s c a r W i l l i a m V e g a Bustillos
S o Paulo
2007
Dedico e s s e t r a b a l h o a D E U S e a t o d o s o s m e u s A n j o s d a G u a r d a , e m especial
J o o D a m a s c e n o Loiola, m e u Pai, q u e t a n t o m e apoia e a Lcia J o a n a Loiola,
m i n h a m e , q u e t a n t o s e d e d i c o u m i n h a vitria, a o s m e u s i r m o s Leni, J o o
Nilson e Cristiano q u e s e m p r e e s t i v e r a m a o m e u lado, s m i n h a s crianas q u e so
fonte d a m i n h a alegria L u c a s , Felipe, T a m i r e s , T i a g o , Natalia e A n a Carolina.
AGRADECIMENTOS
Ao
meu
orientador
Dr.
Oscar
Vega
Bustillos
pela
amizade,
dedicao
aprendizagem.
permaneci
nas
A o Instituto O c e a n o g r f i c o - U S P .
t o d o s q u e convivi no decorrer d a m i n h a a p r e n d i z a g e m .
do
f u n c i o n r i o s d o local e t a m b m na populao q u e s a b i d a m e n t e n u n c a t i v e r a m
c o n t a t o c o m o ativo, d e n o m i n a d a populao controle. A s anlises f o r a m realizadas
a p s a v a l i d a o d o m t o d o multiresduos q u e o b t m t o d o s os ativos e m u m a nica
e x t r a o e t e m d e t e c o por Cromatografia a gs c o m detector d e c a p t u r a ( G C ECD)
de
mtodo,
eltrons.
Os
resultados c o m p r o v a r a m
comprovaram
a eficincia
do
Os
HCH
Hexachlorcyciohexane
(HCH)
is an organochloride
insecticide formed by a
mixture of chemical isomers produced during its chemical synthesis, obtained after
successive inserts of chlorine atoms
on benzene
molecule. T h e s e isomers
may
contaminate both the environment and the people w h o had direct or indirect contact with
the H C H residues. O n 70's a n d 80's, its w a s used a commercial product which
contained H C H on its formula a n d w a s commercialized as Hexabel. T h e product was
used to control the xylophage insect population on the Historical Archieve of Joinville, at
Santa Catarina, Brazil. T h e o w n employees did the insecticide application and there was
an intensive manipulation of the treated material during a building change.
T h e objective of this w o r k w a s to validate a methodology to quantify the HCH
residues and its isomers o n blood plasma and analyze the employee's exposure extent
to the chemical.
It w a s done serological investigation on employees, former-employees and on
non-exposed people, w h i c h w a s classified as the control population. T h e analyses were
done after the methodology validation. T h e method w a s capable to obtain all isomers on
a
unique
extraction
and
the
detection
and
quantification
were
done
by
gas
the method, which w e r e 0,04 jag dl_" for the alpha- and g a m m a - HCH (lindana) and 0,08
1
SUMRIO
1. I N T R O D U O
14
15
1.2 X i l f a g o s
16
1.3 H e x a c l o r o c i c l o h e x a n o
17
2. O B J E T I V O
18
2.1 Objetivo G e r a l
18
18
3. R E V I S O D A L I T E R A T U R A
19
3.1 Efeitos s o b r e a s a d e h u m a n a e m e x p o s i e s o c u p a c i o n a i s a o H C H
19
3.2 Efeitos s o b r e a s a d e h u m a n a na e x p o s i o a m b i e n t a l
21
3.3 A g r o t x i c o s
23
3.3.1 Definio
23
26
3.3.3 Utilizao
27
3.3.4 G r u p o s Q u m i c o s
27
3.3.5 T o x i c i d a d e
31
3.4 A n a l i s e C r o m a t o g r f i c a
34
4. MATERIAIS E MTODOS
38
4 . 1 Matriz e s t u d a d a
38
4.2 A t i v o e s t u d a d o
38
4 . 3 Principio d o m t o d o analtico
44
44
4.4.1 E q u i p a m e n t o s
44
44
4.4.3 S o l v e n t e s e R e a g e n t e s
44
45
45
4.5.2 P r e p a r a o d a s C u r v a s d e Calibraes
45
55
4 . 7 Extrao d o s ativos n a a m o s t r a
57
62
4.9 A n a l i s e Instrumental
62
63
4 . 1 1 Critrios d e e n s a i o d e c o n f o r m i d a d e
63
4.11.1 C u r v a d e C a l i b r a o
64
4.11.2 Especificidade/Seletividade
64
4.11.3 Preciso d e M e d i o
64
4.11.4 E x a t i d o / R e c u p e r a o
64
64
4.11.6 Repetibilidade
65
4 . 1 1 . 7 Incerteza d e m e d i o
65
5 RESULTADOS
66
5.1 D a d o s d e V a l i d a o
66
66
5.1.2 Especificidade/Seletividade
73
5.1.3 Preciso d e M e d i o / E x a t i d o / R e c u p e r a o
73
82
84
7 CONCLUSO
88
8 BIBLIOGRAFIA
90
Lista de T a b e l a
T a b e l a 1 Efeitos d a e x p o s i o a o s agrotxicos.
20
31
63
Hidrognio ( H ) e Nquel ( N i ) .
35
T a b e l a 4 Limite d e D e t e c o (LOD)
64
64
65
T a b e l a 7 Eficincia d a recuperao A l f a H C H
73
T a b e l a 8 D a d o s Globais A l f a H C H
73
74
T a b e l a 10 D a d o s Globais Beta H C H
74
75
T a b e l a 12 D a d o s Globais Delta H C H
75
T a b e l a 13 Eficincia d a r e c u p e r a o G a m a H C H
76
T a b e l a 14 D a d o s Globais G a m a H C H
76
T a b e l a 15 R e s u l t a d o s - G r u p o 1 "Grupo Exposto"
79
T a b e l a 16 R e s u l t a d o s - G r u p o 2 "Grupo no Exposto"
80
Lista d e Figura
38
Figura 2 C r o m a t o g r a m a d o A l f a H C H
38
39
Figura 4 C r o m a t o g r a m a d o Beta H C H
39
40
Figura 6 C r o m a t o g r a m a d o Delta H C H
40
41
Figura 8 C r o m a t o g r a m a d o G a m a H C H - L i n a d a n a
41
48
49
50
51
52
55
Figura 16 C r o m a t o g r a m a d a R e c u p e r a o A l f a H C H + Beta H C H - 1 L O Q
57
58
Figura 18 C r o m a t o g r a m a d a R e c u p e r a o G a m a H C H + Delta H C H - 1 L O Q
59
Figura 19 C r o m a t o g r a m a d a R e c u p e r a o G a m a H C H + Delta H C H - 1 0 L O Q
60
Figura 2 0 C u r v a de C a l i b r a o - Linearidade A l f a H C H
66
66
66
Figura 2 3 C u r v a d e C a l i b r a o - Linearidade G a m a H C H
67
67
67
68
68
68
69
69
1
69
70
70
70
71
71
71
72
72
15
1. INTRODUO
definio
semntica
do
que
se
pretende
avaliar:
os
expostos,
os
intoxicados o u a m b o s .
Por definio: Expostos so todos a q u e l e s q u e tm o u t i v e r a m c o n t a t o c o m
d e t e r m i n a d o substncia. C o n s i d e r a n d o q u e o s agrotxicos f o r a m a s s u b s t n c i a s
a n t r o p o g n i c a s mais utilizadas na histria d a h u m a n i d a d e , s e n d o p o s s v e l hoje
encontra -
las e m r e g i e s to inusitadas c o m o a do
rtico e A n t r t i c a , t o d a a
p r o i b i d o e m 1985, f i c a n d o o m e s m o restrito a p e n a s a c a m p a n h a s d e s a d e p b l i c a
(Portaria d o Ministrio d a Agricultura n 3 2 9 d e 2.9.1985).
A toxicidade seletiva dos pesticidas contra o o r g a n i s m o a q u e s e p r e t e n d e
combater
a situao
ideal desejvel
para s u a utilizao; e n t r e t a n t o ,
considerar
um
pesticida c o m p l e t a m e n t e
seguro.
Essas
essas
Portanto, n o
substncias
16
1.1 A R Q U I V O H I S T R I C O D E J O I N V I L L E / S A N T A C A T A R I N A
conservar,
instituies
restaurar
governamentais
de
preservar
mbito
documentao
municipal,
bem
como,
produzida
os
por
documentos
a construir
Hoje, atravs
da
e x p e r i n c i a a c u m u l a d a d u r a n t e o transcorrer d o s a n o s , m a n t m a responsabilidade
d e r e c u p e r a r e d i v u l g a r informaes, t o r n a n d o - s e u m a instituio d i n m i c a no
d e s e n v o l v i m e n t o d e s e u p o t e n c i a l cientfico, e d u c a t i v o e cultural j u n t o sociedade.
N a s d c a d a s d e 1 9 7 0 e 1980 o " H e x a b e l " -
hexaclorociclohexano,
um
Em 1 9 8 6 ocorreu a
a n l i s e s r e a l i z a d a s e m livros. C o m e s s a e v i d n c i a , s u r g i u a suspeita d e q u e u m a
possvel intoxicao n o s f u n c i o n r i o s p o d e r i a ter ocorrido.
17
primeiro
alerta
para
periculosidade
do
produto,
mas
nenhuma
medida
de
de
1.2 X i l f a g o s
lenho
esto
presentes
muitas
substncias
nutritivas,
como
acares,
c a r b o i d r a t o s , g o m a s , r e s i n a s e amidos, q u e constituem a b a s e a l i m e n t a r d e u m a
i n f i n i d a d e d e o r g a n i s m o s , dentre os quais, f u n g o s , bactrias, insetos, m o l u s c o s e
crustceos.
Estes
organismos
que
degradam
madeira
so
conhecidos
por
bostrychideae,
lyctidae
e anobidae,
{cerambycidae,
scolytidae,
d e p o s i t a d o s no l e n h o d a s rvores o u na m a d e i r a j cortada. A p e s a r d e a l g u n s
s e r e m m u i t o p e q u e n o s (os escolitdeos e o s platipoddeos no u l t r a p a s s a m 1 m m d e
comprimento)
promovem
ataques
devastadores
na madeira:
esto
associados
18
dentro
da
ordem
simbiticos q u e
Isoptera.
Esto,
em
geral,
promovem a degradao
associados
microrganismos
enzimtica da c e l u l o s e presente
no
1.3 H e x a c l o r o c i c l o h e x a n o
1,2,3,4,5,6-hexaclorociclohexano
s u b s t n c i a q u m i c a p r o d u z i d a industrialmente, c o n h e c i d a c o m o n o m e d e
BHC
( h e x a c l o r e t o d e b e n z e n o ) . D e a c o r d o c o m as regras d a IUPAC, a d e s i g n a o
"hexacloreto d e b e n z e n o " incorreta. A p e s a r disso, a d e n o m i n a o B H C a i n d a
l a r g a m e n t e utilizada, principalmente n o mbito da agricultura, adotado, inclusive,
p e l a O r g a n i z a o d e Agricultura e A l i m e n t a o (FAO), e n q u a n t o a o r g a n i z a o
M u n d i a l da S a d e ( O M S ) , utiliza corretamente a d e n o m i n a o H C H . O H C H existe
e m oito f o r m a s q u m i c a s c h a m a d a s ismeros.
t a m b m c o n h e c i d o c o m o lindano
e lindana,
(acredita-se
que
heptaclorociclohexano).
odor
se
deva
impurezas,
principalmente
lindano
19
Sade
especiais
para
uso
tpico,
em
medicina
humana
veterinria.
em
concentraes
de
HCH
praticamente
puras
(World
Health
O r g a n i z a t i o n , 1991).
Na maioria d o s pases, o H C H deixou de ser p r o d u z i d o a partir d o final da
d c a d a de 7 0 , t e n d o deixado de ser utilizado n e s s e s pases a partir d e 1 9 8 3 a 1 9 8 5
( V a n Ert & Sullivan Jr., 1992; A g e n c y For T o x i c S u b s t a n c e s A n d D i s e a s e Registry,
1989; 1990).
No Brasil, os praguicidas o r g a n o c l o r a d o s d e alta p e r s i s t n c i a f o r a m
proibidos para uso agrcola, e m 1985, p e r m a n e c e n d o s e u uso p a r a fins d e c o m b a t e
a v e t o r e s t r a n s m i s s o r e s de doenas infecciosas (Brasil, 1985).
O Hexaclorociclohexano era sintetizado por m e i o d e a d i e s s u c e s s i v a s d e
cloro a o b e n z e n o , g e r a n d o os ismeros a, B, a, e y H C H e m d i f e r e n t e s p e r c e n t u a i s
estequiomtricos. O ismero y - H C H , de maior a o inseticida, era s i n t e t i z a d o c o m
u m percentual d e 14 a 1 5 % da mistura tcnica.
Os ismeros d o H C H p o d e m contaminar n o s o m e i o a m b i e n t e
t a m b m a p o p u l a o q u e t e n h a contato direto o u indireto c o m o s r e s d u o s .
como
Os
De a c o r d o c o m a S e c r e t a r i a
N a c i o n a l de V i g i l n c i a Sanitria, o H C H classificado c o m o C l a s s e I, e x t r e m a m e n t e
txico.
"possivelmente
carcinognico
a humanos"
(International A g e n c y f o r R e s e a r c h u m
Os ismeros do HCH so
a l t a m e n t e lipoflicos e persistentes, s e n d o a r m a z e n a d o s n o s t e c i d o s g o r d u r o s o s .
20
A s s i m , m e s m o s e n d o a b s o r v i d o s e m p e q u e n a s quantidades, s e a e x p o s i o
p r o l o n g a d a (crnica), efeitos a d v e r s o s s a d e p o d e m ser o b s e r v a d o s , c o m o por
e x e m p l o , d a n o s a o sistema n e r v o s o central ( W o r l d Health Organization, 1 9 9 1 ,
1992).
21
2. O B J E T I V O
2.1 O b j e t i v o Geral
2.2 O b j e t i v o s E s p e c f i c o s
Verificar
comportamento
de
cada
ismeros
no
momento
a r m a z e n a m e n t o , extrao e injeo no e q u i p a m e n t o , a s s i m c o m o a s
de
melhores
c o n d i e s cromatogrficas.
4) Otimizar a r a m p a cromatogrfica d a m e l h o r m a n e i r a p a r a q u e t o d o s os
ativos e l u a m t o t a l m e n t e distintos e na mesma corrida, d a c o l u n a c r o m a t o g r f i c a .
5) Realizar a v a l i d a o da metodologia analtica.
6) A n a l i s a r o s soros s a n g n e o dos f u n c i o n r i o s e e x - f u n c i o n r i o s d o A r q u i v o
Histrico de Joinville e t a m b m da populao controle, n o e x p o s t a a o H C H .
22
3. R E V I S O DA L I T E R A T U R A
3.1 Efeitos s o b r e a s a d e h u m a n a e m e x p o s i e s o c u p a c i o n a i s a o H C H
cardacas;
alteraes
prurido)
sangneas
(anemia);
efeitos sobre
pele
(irritao
Nessas circunstncias,
do uso generalizado
apenas
poucos
casos
expostos
durante
sintoma
observado
de frmacos.
exposio
do HCH, durante
de intoxicao
longos
perodos,
de natureza
na fabricao
No h provas
ao lindano
de relao,
e o aparecimento
mais de 40 anos,
ocupacional.
Nos
ou na aplicao
das enzimas
sugeridas
de anomalias
h notificao
em outras
trabalhadores
de lindano,
hepticas
o nico
metabolizadoras
publicaes,
hematolgicas"
de
entre
(World Health
O r g a n i z a t i o n , 1991 d).
Por s u a vez, s o b r e o s efeitos d a exposio o c u p a c i o n a l a o alfa-
beta-
23
hexaclorociclohexanos
o d o c u m e n t o d o IPCS, p r o d u z i d o e m 1 9 9 1 , c o n c l u i s u a s 170
as precaues
das pessoas
significaro
que
risco
recomendadas
trabalham
para
para
na fabricao
a sade
dos
reduzir
ao mnimo
do Lindano,
trabalhadores"
o alfa-
exposio
e beta-HCH
no
1991c).
Estudos realizados no Brasil, com g r u p o s o c u p a c i o n a l m e n t e e x p o s t o s ao
H C H , mostraram q u e nas exposies ocupacionais d e m d i o e l o n g o prazo, e m
c o n c e n t r a e s insuficientes para causar q u a d r o s a g u d o s d e irritao respiratria,
drmica
o u gstrica,
da
funo
heptica,
1989).
hematolgicas,
destacando-se uma
1989)
leucocitose
c o m neutrofilia e linfocitopenia.
O e s t u d o realizado c o m trabalhadores da S u p e r i n t e n d n c i a d e C o n t r o l e das
E n d e m i a s ( S U C E N ) , e m So Paulo, "cronicamente e x p o s t o s " a o H C H e D D T , levou
o mdico Francisco G o n a l v e s a concluir, e m s u a D i s s e r t a o d e M e s t r a d o , q u e :
"h desinformao
fornecimento
exposio
e uso
aos
intoxicao,
Tambm
equipamento
inseticidas,
o mesmo
no
e bioqumicos
em relao
de sangue.
ao controle.
ao controle.
Conclumos
do Trabalhador,
trabalhadores
com
expostos
proteo
no exame
diferenas
citogentico
cromossmicas
ser necessria
longo
tempo
um
e falta
de
trabalho.
relao
quadro
neurolgico
revelou
estruturais,
especfico
aumento
hematolgicos
no grupo
a inseticidas"
exposto
da freqncia
exposto
de um Programa
clnico
de
eletroencefalogrfico.
nos exames
no grupo
a implantao
Em
clnico
de seguimento
ocupacionalmente
aos inseticidas
no
significativas
Os teores de DDTe
O exame
de
foi encontrado
observado
no foram observadas
ocupacional
em
relao
de
e laboratorial,
de
Sade
para
os
( G o n a l v e s , 1991).
24
d a S a d e e S e g u r a n a O c u p a c i o n a l ( O S H A ) , c o m o o Instituto Nacional d e S a d e e
Segurana
Ocupacional
( N I O S H ) , e a C o n f e r n c i a A m e r i c a n a dos
Higienistas
3
sempre
para
oito
horas de exposio
diria, 4 0
horas
semanais.
3.2 E f e i t o s s o b r e a s a d e h u m a n a na e x p o s i o ambientai
literatura
cientfica
traz
algumas
e x p e r i m e n t a i s , r e a l i z a d o s in vivo e in vitro,
centenas
de
trabalhos
cientficos
a l g u n s e s c a s s o s informes d e c a s o s
Q u a n d o o faz, a b o r d a
contamination),
g e r a l m e n t e r e p r e s e n t a d a s pela ingesto d e r e s d u o s
exposies
descritas
n o "caso
Cidade
dos
Meninos"
especificamente
(Oliveira,
1994;
as
Oliveira,
n o se e n c o n t r a similar n a
25
esta
breve
introduo
viso
panormica
do
estado
atual
do
ser
mais
aprofundados
seguidos
no
esprito
do
portanto,
"princpio
da
26
Classificao
quanto
praga que
controla
Classificao
quanto ao grupo
qumico
Sintomas de
intoxicao a g u d a
S i n t o m a s de
intoxicao
crnica
Inseticidas
Organofosforados
e Carbamatos
- Fraqueza;
- Clicas;
abdominais;
- Vmitos;
- Espasmos
musculares;
- Convulses.
- Efeitos
neurotxicos
retardados;
- Alteraes
cromossomiais;
- Dermatites d e
contato.
Inseticidas
Organoclorados
- Nuseas;
- Vmitos;
- Contraes
musculares
involuntrios.
- Leses hepticas;
- Arritmias
cardacas;
- Leses renais;
- Neuropatas
perifricas.
Inseticidas
Piretrides
sintticos
- Irritao d a s
conjuntivas;
- Espirros;
- Excitao;
- Convulses.
- Alergias;
- A s m a brnquica;
- Irritaes nas
mucosas;
- Hipersensilidade.
Fungicidas
Ditiocarbamatos
- Tonteiras;
- Vmitos;
- Tremores
musculares;
- Dor d e c a b e a .
- Alergias
respiratrias;
- Dermatites;
- D o e n a s de
Parkinson;
- Cnceres.
Herbicidas
Dinitrofenis e
Pentaclorofenol
- Dificuldade
respiratria;
- Hipertermia;
- Convulses.
- Cnceres (PCPformao de
dioxinas);
- Cloroacnes.
Herbicidas
Dipiridilos
- Sangramento
nasal;
- Fraqueza;
- Desmaios;
- Conjuntivite.
- Leses hepticas;
- Dermatites de
contato;
- Fibrose pulmonar.
F o n t e : W H O , 1990.
27
3.3 A g r o t x i c o s
3.3.1 Definio
So utilizados nas f l o r e s t a s n a t i v a s e
nas
de substncias,
ou repelir,
vida animal
subprodutos
direta
de natureza
ou indiretamente,
ou vegetal,
e ao
qumica
qualquer
por agrotxicos
quando
forma
as substncias,
ou
destinadas
a prevenir,
destruir
de agentes
patognicos
ou
de
e animais
homem.
S e g u n d o o g r u p o de ps -
graduao em Agroecologia da
Universidade
uma conotao
pragas
e doenas,
errnea
e esconde
agrotxico
de que as plantas
os efeitos
ambiente.
O termo
agricultores
O termo
defensivo
so completamente
negativos
sade
humana
e esclarecedor,
agrcola
vulnerveis
e ao
tanto para
a
meio
os
(Informativo C R Q III, 1 9 9 7 ) .
28
d e f i n i d o s c o m o a g r o t x i c o r e c e b e a d e n o m i n a o d e pesticidas (pesticide).
O termo
e, e m m e n o r e s c a l a , t a m b m na lngua portuguesa
pelos
vendedores
insumos s o a m p l a m e n t e c o n h e c i d o s por
trabalhadores
e tcnicos
rurais.
Remdio
tem
origem
no
"veneno"ou
discurso
de
por
Food
and
Agriculture
Organization
(FAO),
Programa
da
substncias,
incluindo
ou
usadas
vetores
animais,
insetos,
de doenas
causadoras
processamento,
agrcolas,
para
estocagem,
madeiras
aracndeos
prevenir,
humanas
de
danos
transporte
e derivados,
e outras
destruir
e animais,
durante
ou
ou
substncias,
controlar
espcies
(ou
pestes
que acometem
praga
indesejadas
de
os corpos
misturas
qualquer
interferindo)
distribuio
ou
de
plantas
produo,
alimentos,
produtos
para o controle
de animais
de
de
criao.
(FAO, 2003).
D e a c o r d o c o m a Lei Federal n 7.802, e m s e u A r t i g o 2, Inciso 1 , q u e trata
s o b r e e s s e g r u p o d e s u b s t n c i a s / a g e n t e s n o pas:
produtos
e os componentes
ao
no
uso
agrcolas,
setor
de
de processos
produo,
nas pastagens,
fsicos,
qumicos
armazenamento
na proteo
Agrotxicos
de florestas
e afins so
ou biolgicos
e beneficiamento
nativas
os
destinados
de
ou implantadas
produtos
e de
29
outros
ecossistemas
finalidade
ao
do
seja alterar
danosa
produtos
e tambm
de
crescimento.
a composio
seres
empregados
em ambientes
vivos
como
urbanos,
hdricos
da flora e da fauna,
considerados
desfolhantes,
nocivos,
dessecantes,
e industriais,
a fim de preserv-la
bem
como
estimuladores
substncias
e
cuja
da
e
inibidores
30
eram
Aps a
de janeiro
de
1990,
passaram
a ser exigidas
tambm
avaliao
legislao
agrotxicos
e,
revelem
caractersticas
teratognicas,
carcinognicas
ou
mutagnicas;
d) q u e p r o v o q u e m distrbios hormonais e d a n o s a o a p a r e l h o reprodutor;
e) q u e s e revelem mais perigosos para o h o m e m d o q u e o s t e s t e s
de
31
informaes
sobre
produo/
importao
3.3.3 Utilizao
observadas
profundas
mudanas
no
processo
tradicional
do
trabalho
Novas
A s formas d e e x p o s i o d a p o p u l a o a o s agrotxicos
3.3.4 G r u p o s Q u m i c o s
Organofosforados;
Carbamatos;
Piretrides; e
32
ORGANOFOSFORADOS
S o c o m p o s t o s o r g n i c o s d e r i v a d o s do cido fosfrico, d o c i d o tiosfrico o u
do
cido
ditiofosfrico
so
eles:
paration,
m o n o c r o t o f s , m e t a m i d o f s e outros.
malation, d i a z i n o n ,
e t i o n , forato,
De acordo c o m a s u a e s t r u t u r a qumica,
inalao.
Sua
ao
se
pela
inibio
de
enzimas
colinesterases,
CARBAMATOS
S o c o m p o s t o s d e r i v a d o s do cido carbmico s e n d o os m a i s c o m u n s : aldicarb,
carbaril e c a r b o f u r a n .
Os carbamatos, especialmente quando em formulaes slidas, so pouco
absorvidos
considerada
empregados
pelo o r g a n i s m o
importante
na
biotransformado
no
produo
na
urina
humano.
A a b s o r o d r m i c a d o carbaril n o
aparecimento
industrial,
indica
dos
efeitos
entretanto
txicos
em
presena
absoro
do
composto
em
organofosforados,
os
carbamatos
indivduos
de
produto
trabalhadores
expostos.
Diferentemente
reversveis
das
dos
colinesterases,
porm
as
intoxicaes
podem
so
ser
inibidores
igualmente
graves.
PIRETRIDES
Inseticidas Piretrides so c o m p o s t o s sintticos q u e a p r e s e n t a m estruturas
semelhantes
piretrina,
substncia
existente
nas
flores
do
Chrysanthemum
33
decametrina,
cipermetrina
fenpropanato.
alta
atividade
inseticida
dos
So
S e u uso a b u s i v o n o s a m b i e n t e s d o m s t i c o s v e m
modificar
se baseou
a
na
C o m isso, v m
tomando
G e r a l m e n t e seguros p a r a m a m f e r o s , a l g u m a s s u b s t n c i a s
t e m alto "knockdown",
c o m alta mortalidade.
por microrganismos
do ambiente,
no se
tambm
registrando
Podem
A t u a m no
35
36
3.3.5 T o x i c i d a d e
impacto ambiental.
Uma v e z i n t r o d u z i d o n o m e i o a m b i e n t e , o H C H pode
O ismero beta m a i s p e r s i s t e n t e d o q u e o s outros
N o t e m odor d e s a g r a d v e l p o s s i b i l i t a n d o o u s o c o m o d o m o s sanitrio
m e n o s prejudicial as bactrias e o u t r o s m i c r o o r g a n i s m o s
O H C H b e m absorvido pelo t r a t o g a s t r o i n t e s t i n a l , p u l m e s e pele.
t r a n s p o r t a d o q u a s e q u e totalmente l i g a d o a p r o t e n a s p l a s m t i c a s e todos os
ismeros s o preferencialmente e s t o c a d o s n o t e c i d o a d i p o s o , m a s t a m b m em
outros rgos c o m o f g a d o e g l n d u l a s a d r e n a i s .
O s e u m e t a b o l i s m o heptico e
37
d i f u n d i d a d o s ismeros alfa e g a m a e m c o m p a r a o a o b e t a d e v i d o e l i m i n a o
mais rpida d e s s e s
ismeros do corpo.
Assim como
muitos
organoclorados
Em h u m a n o s , o lindano s e c o n c e n t r a p r i n c i p a l m e n t e no t e c i d o
p e l a rota solo -
minhoca -
assim,
do
A superexposio
aes
diferenciadas
dos
ismeros
do
hexaclorociclohexano
podem
nervosos e
em
diferentes e s p c i e s de animais.
O hexaclorociclohexano pode ser introduzido no m e i o a m b i e n t e a partir d e
38
de inseticida e m g u a d e s u p e r f c i e g e r a l m e n t e no atinge
agudamente
txicas
fauna
aqutica.
No
entanto
tem
alta
O s efeitos d a s b a i x a s c o n c e n t r a e s de
inseticidas
apenas
com
freqncia
relativamente longos.
aparecem
aps
perodos
de
exposio
Os efeitos d a baixa c o n c e n t r a o p o d e m d e p e n d e r d a e s p c i e e da
39
Agrotxico
Mamferos
Peixes
Aves
Insetos
Persistncia
no Ambiente
Permetrina
Piretrides
DDT
(Organoclo
rados)
Lindana
(organoclo
rados)
Etilparation
(Organofos
forados)
Malation
(Organofos
forados)
Carbaril
(Carbama
tos)
Metoprene
(Regulador
cresci men
to)
Bacilus
thuringenis
(Microbial)
Fonte: W H O , 1990.
40
3.4 Analise C r o m a t o g r f i c a
Dentre os m o d e r n o s m t o d o s d e a n l i s e q u m i c a , a c r o m a t o g r a f i a o c u p a , sem
d v i d a , u m lugar de merecido d e s t a q u e n o q u e c o n c e r n e s e p a r a o , identificao
e quantificao d e espcies qumicas.
Cromatografia
um
mtodo
fsico-qumico
de
separao,
no
qual
os
c o m p o n e n t e s a s e r e m s e p a r a d o s s o d i s t r i b u d o s entre d u a s f a s e s : u m a f a s e fixa
de g r a n d e rea superficial d e n o m i n a d a f a s e e s t a c i o n r i a , e a outra u m fluido que
percola atravs d e l a sendo, por isto, d e n o m i n a d a f a s e m v e l . (Ciola,1985).
3.4.1 C L A S S I F I C A O D O S M T O D O S C R O M A T O G R F I C O S
O s critrios para a classificao d o s diferentes m t o d o s
cromatogrficos
3.4.2 P A R M E T R O S
T e o r i a b s i c a d a c r o m a t o g r a f i a g a s o s a , c o m n f a s e e m p a r m e t r o s como:
r e a d o Pico, T e m p o de R e t e n o e P o s i o d o Pico. O s q u a i s p o d e m ser
considerados, d o ponto de vista prtico, o s f a t o r e s q u e g o v e r n a m o s u c e s s o da
s e p a r a o cromatogrfica.
3.4.3 G S DE A R R A S T E
A f u n o d o gs d e arraste levar a s m o l c u l a s d a a m o s t r a a ser separada
d o p o n t o d e injeo at o detector, p a s s a n d o p e l a c o l u n a o n d e a s e p a r a o ir
ocorrer. Idealmente, d e v e a p r e s e n t a r a s s e g u i n t e s caractersticas:
a) n o interagir c o m a f a s e e s t a c i o n r i a n e m c o m a a m o s t r a ;
b) ter baixo custo;
c) ser a d e q u a d o ao detector e m u s o .
41
3.4.4 I N J E T O R
A e s c o l h a apropriada das c o n d i e s de injeo, tais c o m o o v o l u m e da
amostra, temperatura do injetor e tipo de injeo d e p e n d e m , e m l a r g a e s c a l a , do
e s t a d o fsico d a amostra.
3.4.5 C O L U N A
A c o l u n a c o n s i d e r a d a c o m o o "o c o r a o d o s i s t e m a c r o m a t o g r f i c o " , u m a
v e z q u e nela q u e a s e p a r a o ir ocorrer.
A e s c o l h a d a c o l u n a a p r o p r i a d a para
3.4.6 D E T E C T O R
A f u n o do detector e m um sistema c r o m a t o g r f i c o a c u s a r a p r e s e n a e
medir a q u a n t i d a d e de c o m p o n e n t e s no efluente d a c o l u n a .
Dentre as diversas caractersticas desejveis p a r a u m b o m detector,
as
3.4.7 D E T E C O P O R C A P T U R A DE E L T R O N S - E C D
O detector por captura eletrnica tem s e u f u n c i o n a m e n t o b a s e a d o n a c a p t u r a
d e eltrons pela amostra, eltrons estes g e r a d o s p e l a i o n i z a o d o g s d e arraste
por u m a f o n t e radioativa.
m e d i d a e m q u e o gs de arraste ( g e r a l m e n t e n i t r o g n i o ) flu a t r a v s do
detector, u m a lmina c o n t e n d o a fonte radioativa (H o u Ni) ioniza a s m o l c u l a s do
g s e f o r m a eltrons lentos. Os eltrons so atrados p a r a o n o d o , o q u a l e n c o n t r a s e c o m + 9 0 volts e m relao ao ctodo. C o m o c o n s e q n c i a , e s t e f l u x o d e eltrons
ir gerar u m a corrente constante t a m b m c o n h e c i d a c o m o c o r r e n t e p a d r o .
Uma
42
Atravs de u m a calibrao a p r o p r i a d a p o d e - s e d e t e r m i n a r a c o n c e n t r a o da
amostra presente, c o m b a s e na q u e d a d a c o r r e n t e .
A fonte radioativa utilizada na i o n i z a o d e v e ser e s c o l h i d a a d e q u a d a m e n t e .
A p e s a r de existir u m a larga g a m a de r a d i o i s t o p o s p a s s v e i s d e uso, a p e n a s o trtio
(mais antigo) o u Ni s o utilizados e m a p a r e l h o s c o m e r c i a i s . C o m o o Ni p o d e ser
a q u e c i d o at cerca d e 3 5 0 C, a p o s s i b i l i d a d e d e d e s c o n t a m i n a o d o detector (das
sujeiras no radioativas) maior.
Por outro lado, a energia da partcula beta e m i t i d a p e l o ^ N i q u a s e quatro
v e z e s mais energtica, e s u a meia v i d a 10 v e z e s superior, o q u e a u m e n t a o risco
do operador e m c a s o d e c o n t a m i n a o d o s i s t e m a c o m o material
radioativo
6 3
(geralmente utiliza-se 8 m Ci d e N i , u m a a t i v i d a d e c o n s i d e r v e l ) .
A l g u m a s caractersticas importantes d o s d o i s istopos, a s q u a i s d e v e m ser
p o n d e r a d a s pelo usurio no m o m e n t o d a e s c o l h a d o detector, e s t o a p r e s e n t a d a s
na T a b e l a 1 .
43
Tabela
3:
Comparao
das
caractersticas
entre
fonte
radioativas
de
63
H i d r o g n i o ( H ) e Nquel ( N i ) .
Caracterstica
6 3
Ni
Meia-Vida
12,5 a n o s
125 a n o s
Tipo de decaimento
0 "
Energia d e partcula
18kev
67kev
Atividade especfica
9.800 Ci/g
5Ci/g
Estado fsico ( C N T P )
gs
Slido
220 C
350 C
no E C D
Radiotoxidez
Alta
Moderada
DESCRICO DO DETECTOR
Os eltrons
coletados
a p s a ionizao d o g s
de arraste
pela
fonte
44
4. M A T E R I A I S E M T O D O S
4.1 Matriz E s t u d a d a
- S e o d e aditivos e Pesticidas
Residuais
do
amostras
chegaram
em tubos
devidamente
identificados
lacrados
45
4.2 A t i v o E s t u d a d o
N a s figuras de
1 a 8 esto s e n d o a p r e s e n t a d a s
as formulas
qumica,
Cl
F i g u r a 1 : Formula Estrutural Alfa H C H .
F r m u l a Molecular CsHeCIs e peso molecular 2 9 0 , 8 0 g mol "
TCDTAj^AR2005\C1000002XTT
5 Hz
25C00
20C00
15C00
10000
5000
111, A
10
20
30
40
mim
46
Cl
Cl/,
Cl
Cl
F i g u r a 3: Formula Estrutural Beta H C H .
Formula Molecular CeHeCU e peso m o l e c u l a r 2 9 0 , 8 0 g m o l "
5 Hz"
25000 -
20000
15000
10000
5000
10
20
30
F i g u r a 4 : C r o m a t o g r a m a Beta H C H t e m p o d e r e t e n o 1 7 . 8 1 3 minutos.
40
min
47
Cl
ciA
A^ci
ci
F i g u r a 5: F o r m u l a Estrutural Delta H C H .
F o r m u l a Molecular CeHeCU e p e s o molecular 2 9 0 , 8 0 g mol "
F i g u r a 6: C r o m a t o g r a m a Delta H C H t e m p o d e r e t e n o 1 8 . 5 7 9 m i n u t o s .
48
F i g u r a 7: Formula Estrutural G a m a H C H - L i n d a n a .
F o r m u l a Molecular CeHsCle e peso m o l e c u l a r 2 9 0 , 8 0 g mol "
15000
-i
rP
li 1
H-*
i.
10
t
11
[
j
! , i
^i_i
'
2'0
30
40
min
F i g u r a 8: C r o m a t o g r a m a G a m a H C H - L i n d a n a t e m p o d e r e t e n o 17.827 minutos.
49
4.3 P r i n c i p i o d o m t o d o analtico
4.4 E q u i p a m e n t o s , m a t e r i a i s e s o l v e n t e s u t i l i z a d o s
4.4.1 E q u i p a m e n t o s
a) Cromatgrafo gs c o m Detector de C a p t u r a d e Eltrons, m a r c a A g i l e n t
modelo 6 8 9 0
b) Injetor automtico Agilent,
c) Software C h e m S t a t i o n ,
d) Balana Analtica, marca Sartorius,
e) Balana Semi Analtica,
f)
A g i t a d o r d e tubos,
g) L a v a d o r a ultrasnica,
h) Purificador de g u a c o m filtro Milli-Q, marca Millipore
i)
C o n c e n t r a d o r c o m fluxo de gs.
4.4.2 V i d r a r i a e o u t r o s m a t e r i a i s
a) T u b o s d e vidro c o m t a m p a esmerilhada g r a d u a d o d e 1 5 m L
b) Proveta g r a d u a d a de 5 0 m L ,
c) Balo volumtrico de 10mL,
d) Pipetas volumtricas e g r a d u a d a s d e diversos v o l u m e s ,
e) Frasco d e vidro para injetor automtico de 2 m L ,
50
4.4.3 S o l v e n t e s e R e a g e n t e s
a) g u a purificada,
b) A c e t o n a grau resduos o u similar,
c) Hexano g r a u resduos,
d) Isooctano g r a u resduos.
4.5 P r e p a r a o d a s S o l u e s
4.5.1 P r e p a r a o d a s S o l u e s d e E s t o q u e " S o l u o M e " .
1
a) Soluo A L F A : 100,0ug.mL" d e a H C H
Pesar 0,0100g de a H C H ( P a d r o Primrio) e d i s s o l v e r e m isooctano.
Transferir para balo v o l u m t r i c o d e 1 0 0 m L c o m p l e t a n d o o v o l u m e c o m isooctano.
-1
de p HCH
de A L F A
51
C o m p l e t a r o v o l u m e c o m hexano.
f)
S o l u o S l - B : "lOOOpg. uL"
de BETA
g) S o l u o S l - C : 1 0 0 0 p g . uL"
de
DELTA
h) S o l u o S l - D : 1 0 0 0 p g . u.L" d e L I N D A N A
Transferir 1 0 0 u L d a soluo G A M A " L I N D A N A " p a r a u m b a l o volumtrico de
10,0 mL. C o m p l e t a r o v o l u m e c o m hexano.
4.5.2 P r e p a r a o d a s s o l u e s p a r a o b t e n o d a s C u r v a s d e C a l i b r a e s .
C u r v a 1 - S o l u o B) A l f a H C H + Beta H C H
1
A l f a + B e t a para u m
b a l o v o l u m t r i c o e completar o v o l u m e para 1 0 m L c o m h e x a n o .
A l f a + Beta p a r a u m
52
v o l u m t r i c o e completar o v o l u m e p a r a 1 0 m L c o m h e x a n o .
f)
S o l u o (B): 1 + 2 p g uL" d e A l f a + B e t a
1
S o l u o (B) 2 + 4 p g i i L " d e
A l f a + Beta p a r a um balo
v o l u m t r i c o e completar o v o l u m e p a r a 10ml_ c o m h e x a n o .
de Alfa + Beta
1
S o l u o (B) 1 + 2 p g JJ.L" d e
A l f a + Beta p a r a um balo
volumtrico e completar o v o l u m e p a r a 1 0 m L c o m h e x a n o .
C u r v a 2 - S o l u o (A) L i n d a n a + D e l t a H C H
i)
c o m p l e t a r o v o l u m e para 1 0 m L c o m h e x a n o .
I)
S o l u o (A): 10 + 2 0 p g uL" d e L i n d a n a + D e l t a H C H
1
m) S o l u o (A): 2 + 4 p g uL" d e L i n d a n a + D e l t a H C H
1
53
u m b a l o v o l u m t r i c o e completar o v o l u m e p a r a 1 0 m L c o m hexano.
Transferir 1 m L d a
u m b a l o v o l u m t r i c o e completar o v o l u m e p a r a 1 0 m L c o m hexano.
54
Alfa H C H = 1 0 pg/uL
Beta HCH, Aldrin, Dieldrin = 20 pg/uL
Endrin, op'DDE = 4 0 pg/uL
Injection Date
Sample Name
Acq. Operator
30/07/05 06:27:33
Pad. Sol.B
Cristina Loiola
Acq. Method
Last changed
Analysis Method
Last changed
Seq. Line
Vial
Inj
Inj Volume
23
23
1
2 /il
C:\HPCHEM\2\METHODS\SORO.M
'27/07/05 16:20:58
by Cris
C:\HPCHEM\2\METHODS\USSP.M
06/08/05 12:22:14
by IRANI
(modified after loading)
ECD1 A, (AGOS2005\C1000047.D)
5 Hz
4500
4000
w
O
Q
3500
3000
2500
.-S
2000
coca
1500
1000
! J
500
10
30
20
40
Sorted By
Calib. Data Modified
Multiplier
Dilution
Signal
06/08/05
0 . 2000
1.0000
12:22:10
Signal 1: ECD1 A,
RetTime
[min]
16.857
17.486
20.437
22.853
24.778
27.203
Totals
Type
W
VP
BP
VB
VB
BB
Area
[5 Hz*s]
3894.35791
1831.14343
7403.87256
8865.91211
5962.16895
3405.65674
Amt/Area
Amount
[ug/dL]
1.41127e-3
1.26519e-2
1.84807e-3
5.40302e-3
3.38840e-3
1.40603e-2
1.09920
4.63349
2.73657
9.58054
4.04044
9.57692
Grp
Name
Alfa H C H
Beta H C H
Aldrin
op'DDE
Dieldrin
Endrin
31.66716
integrator!
***
55
Alfa H C H = 5 0 pg/uL
Beta HCH, Aldrin, Dieldrin = 100 pg/uL
Endrin, op'DDE = 200 pg/uL
Injection Date
Sample Name
Acq. Operator
30/07/05 12:31:50
Pad. Sol.B
Cristina Loiola
Acq. Method
Last changed
Analysis Method
Last changed
C:\HPCHEM\2\METHODS\SORO.M
27/07/05 16:20:58
b y Cris
C:\HPCHEM\2\METHODS\USSP.M
06/08/05 12:11:42
by IRANI
(modified after loading)
Seq.
Line
Vial
Inj
Inj V o l u m e
25
25
2
2
ixl
40
E C D 1 A", ( A G O S 2 0 0 5 \ C 1 0 0 0 0 5 4 : D J
5 Hz
9000
X
u
X
80007000
^cX
6000
ay
5000
4000
3000
2000
1000
_*
.Ju
10
20
30
External Standard
Sorted By
Calib. Data Modified
Multiplier
Dilution
Signal
06/08/05
0.2000
1.0000
Report
12:11:00
Signal 1 : ECD1 A,
RetTime
[min]
16.856
17.479
20.436
22.849
24.774
27.201
Totals
Type
VB S
MF
PB S
W
W
BB
Area
[5 Hz*s]
1.98890e4
7958.95898
3.49367e4
3.58791e4
2.54652e4
1.42804e4
Amt/Area
1.34948e-3
1.27504e-2
1.66520e-3
5.42355e-3
3.3573.0e-3
1.41350e-2
Amount
[ug/dLj
Grp
5.36798
20.29593
11.63527
38.91834
17.09887
40.37075
Name
Alfa HCH
Beta H C H
Aldrin
op'DDE
Dieldrin
Endrin
133.68714
integrator!
***
Injection Date
Sample Name
Acq. Operator
30/07/05 15:08:23
Pad. Sol.B
Cristina Loiola
Acq. Method
Last changed
A n a l y s i s Method
Last changed
C:\HPCHEM\2\METHODS\SORO.M
"27/07/05 16:20:58
by Cris
C:\HPCHEM\2\METHODS\USSP.M
05/08/05 13:51:03
by IRANI
(modified after loading)
Seq.
Line
Vial
Inj
Inj Volume
26
26
2
2
fil
ECD1 Ar(AGOS2005\C1000057:D)
5 Hz
9000
8000
7000
6000-
5000
4000
3000 {
2000 j
1000 !
JLJ.
20
10
30
40
Sorted By
Calib. Data Modified
Multiplier
Dilution
Signal
Friday, 5 5e August 5e 2005
0.2000
1.0000
13:50:5i
Signal 1: ECD1 A,
RetTime
[min]
16.870
17.477
20.460
22.855
24.782
27.203
Totals
Type
VB
W
PB
VB
VB
W
S
T
S
S
S
Area
[5 Hz*s]
Amt/Area
8.36646e4
1.54086e4
1.18671e5
7.47481e4
7.76671e4
2.83772e4
1.27630e-3
1.29886e-2
1.70951e-3
5 .41685e-3
3.07248e-3
1.43226e-2
Amount
[ug/dL]
21.35630
40.02738
40.57372
80.97984
47.72616
81.28696
Grp
Name
Alfa HCH
Beta HCH
Aldrin
op DDE
Dieldrin
Endrin
1
311.95037
integrator!
***
Injection Date
Sample Name
Acq. Operator
29/07/05 00:56:27
Pad. Sol.A
Cristina Loiola
Acq. Method
Last changed
Analysis Method
Last changed
C:\HPCHEM\2\METHODS\SORO.M
27/07/05 16:20:58
by Cris
C:\HPCHEM\2\METHODS\USP.M
05/08/05 10:19:49
by IRANI
(modified after loading)
Seq.
Line
Vial
Inj
Inj Volume
5
5
1
2 /il
E C D 1 A, (AGOS2005\C1000013:D)
Hz
1800
5
CD
Q
Q
Sc
<->a
-.
1600
1400
s5S
1200
1000
800
600
400
200
- -A
,.A.J
^AlK.-.
w-JL
iLui
2b
10
30
External Standard
Sorted By
Calib. Data Modified
Multiplier
Dilution
Signal
Friday,
0.2000
1.0000
40
min
Report
5 5e August
5e 2005
10:19:44
Signal 1: ECD1 A,
RetTime
[min]
Type
16.941
W
17.577
W
18.290 BV
24.399
W
26.668 VB
28.590 BB
Area
[5 Hz*s]
3991.02539
3512.16504
2706.07642
6407.46875
5636.79980
3320.93408
Amt/Area
2.83828e-3
2.60223e-3
6.97714e-3
3.34769e-3
7.38913e-3
8.82201e-3
Amount
[ug/dL]
Grp
2 .26553
1. 82789
3 . 77614
4 .
.29004
8 .33021
5 . 85946
Name
HCB
Lindana
Delta H C H
pp'DDE
op'DDT
pp'DDT
26 .34927
Totals :
Results obtained with enhanced
integrator!
***
HCB, L i n d a n a = 50 pg/uL
D e l t a HCH, p p ' D D E = 100 pg/uL
p p ' D D T , o p ' D D T = 200 p g / u L
I n j e c t i o n Date
Sample N a m e
Acq. Operator
29/07/05.06:08:45
Pad. Sol.A
Cristina Loiola
Acq. Method
Last changed
Analysis Method
Last changed
C:\HPCHEM\2\METHODS\SORO.M
27/07/05 16:20:58
by Cris
C:\HPCHEM\2\METHODS\USP.M
05/08/05 10:03:23
by IRANI
(modified after loading)
Seq. Line
Vial
Inj
Inj Volume
7
7
1
2 fil
ECD1 Ar(AGOS2005\CT000019;D)
5 Hz
9000
a
a
8000
7000
*r> to
6000
5000
4000
3000
2000
ill
1000
10
20
40
External Standard
Sorted By
C a l i b . Data
Multiplier
Dilution
Modified
Signal
05/08/05
0.2000
1.0000
Report
10:03:18
Signal 1: ECD1 A,
RetTime
[min]
16.936
17.575
18.283
24.394
26.669
28.587
Type
MF
MF
BV
W
MF
MF
Area
[5 Hz*s]
Amt/Area
1.70703e4
1.72466e4
1.32751e4
2.91256e4
2.64223e4
2.04276e4
2.85047e-3
2.56672e-3
6.91404e-3
3.35701e-3
7.40758e-3
8.61638e-3
Amount
[ug/dL]
Grp
9.73170
8.85344
18.35697
19.55501
39.14503
35 . 20247
Name
HCB
Lindana
Delta H C H
p p DDE
op'DDT
pp'DDT
1
130 .84462
Totals :
R e s u l t s o b t a i n e d w i t h enhanced
integrator!
***
F i g u r a 1 3 : C r o m a t o g r a m a d a C u r v a 2 - S o l u o "A" Delta H C H + G a m a H C H
1
59
Injection Date
Sample Name
Acq. Operator
29/07/05 08:44:36
Pad. Sol.A
Cristina Loiola
Acq. Method
Last changed
A n a l y s i s Method
Last changed
C:\HPCHEM\2\METH0DS\S0R0.M
27/07/05 16:20:58
by Cris
C:\HPCHEM\2\METH0DS\USP.M
05/08/05 09:52:10
by IRANI
(modified after loading)
Seq.
Line
Vial
Inj
Inj Volume
8
8
1
2
\i\
"ECD1 A,~(AGOS2005VCT0000227D)
5 Hz
caa
10000 J
8000
6000 -I
4000
2000
_s
10
.11... Jl-..
20
30
40
Sorted By
Calib. Data
Multiplier
Dilution
Signal
05/08/05
0 .2000
1.0000
Modified
09:49:52
Signal 1: ECD1 A,
RetTime
[min]
16.935
17.574
18.280
24.392
26.666
28.585
Type
MF
MF
MF
MF
MF
FM
Area
[5 Hz*s]
Amt/Area
3.50526e4
3.94247e4
91542e4
95073e4
36344e4
69071e4
2 .85285e-3
2 .53648e-3
6 .86008e-3
3 .36093e-3
7 .45791e-3
8.52749e-3
Totals
Amount
[ug/dL]
20.00000
20 . 00000
40 . 00000
40.00000
80 . 00000
80.00000
Grp
Name
HCB
Lindana
Delta H C H
pp'DDE
opDDT
pp'DDT
280.00000
integrator!
***
60
4.6 P r e p a r a o d a s A m o s t r a s
As
amostras
de
soro
sangneo
foram
enviadas
em
tubos
lacradas,
aps
retirada
da
amostra
para
a n l i s e foi
acondicionados
em
estantes
4.7 E x t r a o d o s a t i v o s n a a m o s t r a
a) Pipetar 1 ml_ da amostra de soro s a n g n e o e transferir p a r a u m t u b o de vidro
de 15 ml_.
b) Para a r e c u p e r a o fortificar a a m o s t r a b r a n c o n e s t e m o m e n t o .
c) A d i c i o n a r 5 m L d e hexano.
d) Agitar por 1 min e m agitador d e t u b o s c o m v e l o c i d a d e d e 5 0 0 0 r.p.m s e g u i d o
d e 10min e m ultrasnica na p o t n c i a m x i m a .
e) Transferir a f a s e orgnica p a r a outro t u b o d e v i d r o c o m t a m p a esmerilhada
graduado de 1 5 m L
f)
na a m o s t r a de soro
sangneo.
g) Transferir a f a s e orgnica p a r a o t u b o q u e j c o n t e m 5ml_ da
primeira
h) Injetar 2 , 0 | i L
em
GC-ECD
utilizando
os
parmetros
nas
condies
de
61
1 mL d e A m o s t r a
A d d 5ml_ d e H e x a n o
10 m i n em Ultrasnica
Transferir a f a s e
orgnica Para tubo
g r a d u a d o d e 15 m L
Repetir a extrao c o m
5 m L de h e x a n o
Concentrar a f a s e
orgnica
Injetar 2JL e m
GC-ECD
62
4.8 Fortificao d o a t i v o n a a m o s t r a
a) Nvel d e 0,04 u g d L
DELTA
A d i c i o n a r 4 0 u L e 8 0 u L d a s r e s p e c t i v a s s o l u e s S l - A e m 1,0mL d a amostra
branco e m t u b o d e 15 m L para o b t e n o d a c o n c e n t r a o final d e 0,04 jug dL"
b) Nvel de 0,4 u g d L
para A L F A e L I N D A N A e 0,8 u g d L
para B E T A e
DELTA
Adicionar 4 0 0 u L e 8 0 0 u L das r e s p e c t i v a s s o l u e s S l - A e m 1,0mL d a amostra
1
ug dL" . Proceder c o n f o r m e m t o d o d e e x t r a o .
Nas figuras 16 a 19 so a p r e s e n t a d a s o s c r o m a t o g r a m a s obtidos no e s t u d o de
recuperao d o H C H .
Injection Date
Sample Name
Acq. Operator
30/07/05 20:21:34
Ree. llq-b (E)
Cristina Loiola
Acq. Method
Last changed
Analysis Method
Last changed
C:\HPCHEM\2\METHODS\SORO.M
27/07/05 16:20:58
by Cris
C:\HPCHEM\2\METHODS\USSP.M
06/08/05 12:50:18
by IRANI
(modified after loading)
Seq. Line
Vial
Inj
Inj Volume
31
31
1
2 J.1
ECD1 Ar(AGOS2005\C10D0063:D)
5 Hz
900
800
700
Sx
600
Q
Q
500
400
300
.g
200
10
30
20
^'
40
Sorted By
Calib. Data Modified
Multiplier
Dilution
Signal
Saturday, 6 6e August 6e 2005 12:49:0
0 .2000
1.0000
Signal 1 : ECD1 A,
RetTime
[min]
16.854
17.483
20.435
22.850
24.777
27.208
Totals
Type
MM
W
W
PB
BB
BV
Area
[5 Hz*s]
1
58.57215
70.62469
147.61528
214.78360
119.33024
94 . 64943
Amt/Area
2.50526e-3
1.26377e-2
2.83803e-3
5.39570e-3
3.82031e-3
1.40387e-2
Amount
[ug/dL]
2 .93477e- 2
1 .78507e- 1
8 .37874e- 2
2 .31781e- 1
9 .11758e- 2
2 .65751e- 1
Grp
Name
Alfa HCH
Beta HCH
Aldrin
op ' DDE
Dieldrin
Endrin
8 .80350e- 1
F i g u r a 16: C r o m a t o g r a m a da R e c u p e r a o A l f a H C H + B e t a H C H
-1LOQ
64
0,8 ug/dL
Injection Date
Sample Name
Acq. Operator
30/07/05 21:13:46
Rec. lOlq-b (A)
Cristina Loiola
Acq. Method
Last changed
Analysis Method
Last changed
C:\HPCHEM\2\METHODS\SORO.M
27/07/05 16:20:58
by Cris
C:\HPCHEM\2\METHODS\USSP.M
06/08/05 12:50:18
by IRANI
(modified after loading)
Seq. Line
Vial
Inj
Inj Volume
32
32
1
2 ixl
~ECDTAnGOS2005\CT000064:Dr
5 Hz
900
a
800
700
ex
600
,ac
TI
03
500
Vi
400
300
J>> J l . J J _ J _
r
200
10
30
20
40
_mu3
Sorted By
Calib. Data Modified
Multiplier
Dilution
Signal
Saturday,
0.2000
1.0000
6 6e August
6e 2005
12:49:08
Signal 1: ECD1 A,
RetTime
[min]
16.856
17.484
20.437
22.852
24.777
27.204
Totals
Type
W
W
W
BB
PB
VB
Area
[5 Hz*s]
699.55005
415.76041
1263.85840
1677.83875
1056.07532
620.13116
Amt/Area
Amount
[ug/dL]
2.50526e-3 3.50511e-l.
1.26377e-2
1.05085
2.83803e-3 7.17375e-l
5.39570e-3
1.81062
3.82031e-3 8.06908e-l
1.40387e-2
1.74117
Grp
Name
Alfa HCH
Beta H C H
Aldrin
op'DDE
Dieldrin
Endrin
6.47744
integrator!
***
F i g u r a 17: C r o m a t o g r a m a da R e c u p e r a o Alfa H C H + B e t a H C H - 1 0 L O Q
65
Injection Date
Sample Name
Acq. Operator
29/07/05 11:20:2?
Ree. llq-a (A)
Cristina Loiola
Acq. Method
Last changed
Analysis Method
Last changed
C:\HPCHEM\2\METH0DS\S0R0.M
27/07/05 16:20:58
by Cris
C:\HPCHEM\2\METHODS\USP.M
05/08/05 13:25:33
by IRANI
(modified after loading)
Seq.
Line
Vial
Inj
Inj Volume
9
9
1
2 Lil
ECD1 A,~(AGOS2005\CT000025.D)
5 Hz
900
800
700
-i
Q
Q
600 j
500
400 i
7&
300 ;
200 r
0
>' ^
Vi
u _ .
20
10
30
External Standard
Sorted By
Calib. Data Modified
Multiplier
Dilution
Signal
Friday,
0.2000
1.0000
40
j
o
u
i
Report
5 5e August
5e 2005
12:10:40
Signal 1: ECD1 A,
RetTime
[min]
16.935
17.573
18.278
24 .390
26 .663
28.570
Type
MM
W
MM
MM
MM
MM
Area
[5 Hz*s]
81.77119
81.29852
58.37590
504.78226
92.47312
86.43648
Amt/Area
2.83782e-3
2.60221e-3
6.97707e-3
3.34735e-3
7.38861e-3
8.82289e-3
Amount
[ug/dL]
4.64104e-2
4.23112e-2
8.14585e-2
3.37936e-l
1.36650e-l
1.52524e-l
Grp
Name
HCB
Lindana
Delta HCH
pp'DDE
op'DDT
p p DDT
1
7.97290e-l
Totals :
Results obtained with enhanced
integrator!
***
F i g u r a 18: C r o m a t o g r a m a d a R e c u p e r a o G a m a H C H + D e l t a H C H - 1 L 0 Q
66
Injection Date
Sample Name
Acq. Operator
29/07/05 17:25:33
R e e . 101q-a (C)
Cristina Loiola
A c q . Method
Last changed
A n a l y s i s Method
Last changed
C:\HPCHEM\2\METH0DS\S0R0.M
27/07/05 16:20:58
by Cris
C:\HPCHEM\2\METHODS\USP.M
05/08/05 12:44:38
by IRANI
(modified after loading)
Seq.
Line
Vial
Inj
Inj V o l u m e
16
16
1
2 /il
ECD1A, "(AGOS2005\C1000032X1)
5 Hz ;
900 ;
800 :
es
o
cn.SU
700 :
2. |3
600 ;
n'
500 -i
400 J
300 ;
..A
200 i20
10
30
40
Sorted By
C a l i b . Data M o d i f i e d
Multiplier
Dilution
Signal
Friday, 5 5e August 5e 2005
0.2000
1.0000
12:10:40
Signal 1: ECD1 A,
RetTime
[min]
16.939
17.578
18 .284
24.400
26.675
28.5 92
Type
W
MM
MM
MM
VB
MM
Area
[5 Hz*s]
I
1
722 .42999
672.54633
282.64880
1524.96057
1104.25720
847.14032
Amt/Area
Amount
[ug/dL]
Grp
1
_
1
2.83782e-3 4.10026e-l
2.60221e-3 3.50021e-l
6.97707e-3 3 . 94412e-l
1.02091
3.34735e-3
1. 63179
7.38861e-3
1.49484
8.82289e-3
Name
HCB
Lindana
Delta H C H
pp'DDE
op'DDT
p p DDT
1
5.30200
Totals :
R e s u l t s obtained w i t h enhanced
integrator!
***
F i g u r a 19: C r o m a t o g r a m a d a R e c u p e r a o G a m a H C H + D e l t a H C H - 1 0 L O Q
67
4.9 Anlise I n s t r u m e n t a l
As
seguintes
condies
foram
usadas
com
sucesso
durante
d e s e n v o l v i m e n t o deste m t o d o analtico
Instrumento
Cromatgrafo G s
Deteco
Captura de Eltrons
Coluna
HP-5
G s d e Arraste
Nitrognio ultra p u r o
Fluxo d e gs d e A r r a s t e
0,900mL / min
M o d o d e injeo
"splintless"
1 min (60C) - 1 0 C / m i n (200) 1 0 m i n - 2 0 C / m i n -
Rampa
5min.
V o l u m e injetado
T e m p o T o t a l d e Corrida
2uL
Aproximadamente 40 minutos
Tempo de Reteno
A p r o x i m a d a m e n t e 16,8 m i n u t o s
Alfa
Tempo de Reteno
A p r o x i m a d a m e n t e 17,4 m i n u t o s
Beta
Tempo de Reteno
A p r o x i m a d a m e n t e 18,2 m i n u t o s
Delta
Tempo de Reteno
A p r o x i m a d a m e n t e 17,5 m i n u t o s
Gama "Lindana"
Nome do Mtodo
SORO.M
4.10 V a l i d a o d a s a d a p t a e s a o m t o d o
A avaliao
da
em
u m , o u mais
laboratrios,
diferentes
daquele
que
realizar
as
68
uma
r e v a l i d a o do mtodo.
A validao d a metodologia de anlise de resduos de a g r o t x i c o s , t e m c o m o
f u n d a m e n t o verificar a a d e q u a o dos procedimentos propostos o u e s t a b e l e c i d o s
p a r a a c o m b i n a o especfica ingrediente ativo-matriz, dentro d e
determinados
parmetros
processo
operacionais
do
laboratrio
executante.
Durante
de
do
limite d e deteco.
quantificao
O limite inferior de v a l i d a o
limite
de
se
4 . 1 1 Critrios d e e n s a i o s d e c o n f o r m i d a d e
Injetar
no
equipamento,
no
mnimo
solues-padro
de
diferentes
A o r d e m d e injeo d a s
Plotar
aceitvel
A soluo-
d e v e ser m a i o r o u igual a
A s o l u o - p a d r o de maior c o n c e n t r a o d a
deve
a m o s t r a no
69
4.11.2 E s p e c i f i c i d a d e / S e l e t i v i d a d e
4.11.3 Preciso d e M e d i o
A preciso d e t e r m i n a d a c o m b a s e n o s e x p e r i m e n t o s d e r e c u p e r a o e m
c a d a nvel estudado.
4.11.4 Exatido/Recuperao
C o n d u z i r , n o m n i m o , 5 (cinco)
4.11.5. L i m i t e d e D e t e c o ( L O D ) / L i m i t e d e Q u a n t i f i c a o ( L O Q )
O L O D d e t e r m i n a d o nas c o n d i e s e s p e c f i c a s d a a m o s t r a
e m estudo.
Calcular-se o L O D estatstico c o m o 3 v e z e s o d e s v i o - p a d r o d a s c o n c e n t r a e s
r e c u p e r a d a s no clculo d o L O Q estatstico.
S e o L O D d o e q u i p a m e n t o for maior
A m e n o r q u a n t i d a d e detectada
70
decilitros
( u g dL" ), a m d i a
( x
) e o desvio-padro
(DP) d a s
quantidades
O LOQ proposto
Caso a
T a b e l a 4 : Limite de D e t e c o ( L O D )
Se
Ento
L O D m t o d o = LODestatstico
LODmtodo = LODinstrumental
T a b e l a 5: Limite d e Q u a n t i f i c a o ( L O Q )
Se
Ento
M t o d o Qualificado
4.11.6. R e p e t i b i l i d a d e
coeficiente
de
variao
porcentual
(CV%)
em
relao
mdia
de
4.11.7 I n c e r t e z a d e m e d i o
Para
determinado
propsito
mtodo
de
determinao
analtico,
utiliza-se
da
incerteza
os conceitos
de
medio
de exatido
de
um
preciso
descrito a c i m a .
No c a s o d e a n l i s e de resduos, a certeza associada a o s
instrumentos
71
72
5. R E S U L T A D O S E D I S C U S S E S
5.1 D a d o s d a V a l i d a o
5.1.1 C u r v a d e calibrao ( L i n e a r i d a d e )
clculo
das
reas
dos
picos
obtidos,
uma
curva
foi
traada
Faixa
pg nL~
E q u a o da Curva
Coeficiente de correlao
0,1 - 1 0 0
Y=389,89 X + 64,54
0,9995
0,1 - 1 0 0
Y=90,947 X + 48,73
0,9996
0,2 - 2 0 0
Y=145,72X-35,53
0,9999
0,2 - 2 0 0
Y = 3 9 3 , 6 3 X - 93,53
0,9998
Alfa HCH
y = 389,89x + 64,541
R = 0,9995
5.000,000 -,
4.000,000
3.000,000
2.000,000
1.000,000
0,000
4
10
12
concentrao pg/uL
Beta HCH
90.947X + 48,727
R = 0,9996
2
4.000,000
3.000,000
2.000,000
1.000,000
0,000
10
15
20
25
30
35
40
45
concentrao pg/uL
Delta HCH
35.000,000
30.000,000 25.000,000
20.000,000
15.000,000
10.000,000
5.000,000 0,000
-5.000,000 0
50
100
:145,72x-35,53
R? = 0,9999
150
concentrao pg/uL
200
250
74
50.000,000
40.000,000
30.000,000
I
20.000,000
10.000,000
0,000
20
-10.000,000
40
60
100
80
120
concentrao pg/uL
S e g u e m o s c r o m a t o g r a m a s d a curva d e c a l i b r a o u m a injeo d e c a d a p o n t o .
A l f a e Beta
"_CDrA7~CAGDS2005NCTO00037Xr
5
Hz ]
450
X
i
sx
<x
400-i
350
2*?
300
250
2 0 0 !
0
-i
- l \
V
10
20
30
40
1
ECDT A7TAGOS2D05\CTDDQD40TDr
5
Hz
450
w
Q
O
X
400
x,x
350
300
*
250
y;
200
J_J_JL
10
20
1
30
40
75
^ C D rA7TGOS2005\CfD00043Xir
5Hz
900
800
700
600
o
<x
500
400
300
K
200
JLX
A
10
30
20
1
40
1
~ECm", lAT3D52OT5\CTOO46X)r
5 Hz
1800
16001400
Q
O
1200
1000
XX
800
3
600400
200
10
30
20
40
" ECDrA71AGOS2005\CtDD0D48Xfr
5 Hz
4500
4000
u
Q
Q
3500
3000
&
2500
rs
2000
1500
1000
500
JL
10
L
20
J u L u
15"
1
40
1
ECD1 A, TAGOS2005\CT000a52X>r
Q
Q
o
x
<x
,CJ
r>X
10
15"
20
-1
~ECDTA, (AGOS2005\C1000055.D)
SE
U
10
40
1
77
ECD1 ArfAGOS2005\CTOD3:D7
5Hzl
380
360 A
ECDrArAGOS200WCD005X7
ECDrArCAGOS2005\C1000007.D)
5Hz^
700
J
J
600
Q
Q
500
1
400
Q
Q
^1"
^
300
200
Q
Q
/i
\y-"f~
10
20
OO
I
30
40
1
~ECDTA71AT3OS2003\CT00011 .DT
5 Hz"
900
m
800
misx
700-
X-Sx
600
500
>~-Q
400
300
i.V..
200
30
20
10
40
1
~ECm7V7(AGOS2005\CT0000T5X>)"
w
Q
Q
'X
a
a
600 H
400
200
. I iV.^,
0
20
7o"
30
40
-1
ECDTA, (GOS2005\CT0000"fB:Dr
5 Hz
4500
c
c
4000
a
a
3500
3000
2500
H
Q
Q
2000
1500
1000
500
10
IL
20
30
1
40
1
79
a
a
cd
n.
<*t-Q
MD
10
20
30
40
ECD1 A, (AGOS2005\CTO000?ri3y
5 Hz
10000
8000
6000
4000
2000
4.11.2. E s p e c i f i c i d a d e / S e l e t i v i d a d e
No
foram
detectados
picos
interferentes
nas
amostras
branco
que
4.11.3. P r e c i s o d e M e d i o / E x a t i d o / R e c u p e r a o
80
V.R.
%
ug d l . '
ug dL"
0,04
0,030
76
0,04
0,037,
93
0,04
0,029
72
0,04
0,029
74
0,04
0,029
73
0,40
0,350
88
0,40
0,340,
85
0,40
0,340
85
0,40
0,390
98
0,40
0,403
101
91
7,6
8,4
x % mdia de recuperao
D.P. Desvio Padro
C.V. Coeficiente de variao
85%
C V G l o b a l das R e c u p e r a e s %
9,8%
Limite d e D e t e c o ( L O D )
D e a c o r d o c o m o critrio estabelecido temos:
LOD
instrumental = 0,001
ug
dL"
L O D estatstico = 0 , 0 0 9 u g dL"
11,2
8,7
L O D estatstico = 3 X 0 , 0 0 3 u g dL"
C.V.
78
L O D estatstico = 3 X D E S V P A D
D.P.
x %
T e m o s q u e : 0,001 u g dL"
Critrio a ser a d o t a d o :
< 0 , 0 0 9 u g dL"
Limite d e Q u a n t i f i c a o ( L O Q )
D e a c o r d o c o m o critrio e s t a b e l e c i d o t e m o s q u e :
L O Q estatstico = 1 0 X D E S V P A D
L O Q estatstico = 10 X 0 , 0 0 3 u g dL"
LOQ
p r o p
osto=
0 , 0 4 u g dL"
L O Q estatstico = 0 , 0 3 u g dL"
T e m o s q u e : 0 , 0 3 u g dL"
82
V.R.
%
u g dL"
ug dL"
0,08
0,096
119
0,08
0,097,
120
0,08
0,096
119
0,08
0,096
119
0,08
0,096
119
0,80
0,76
95
0,80
0,78
98
0,80
0,77
96
0,80
0,88
110
0,80
0,76
95
99
6,4
6,5
x % mdia de recuperao
D.P. Desvio Padro
C.V. Coeficiente de variao
T a b e l a i 0 : R e s u l t a d o s G l o b a i s para Beta H C H
Mdia Global das Recuperaes %
109
C V G l o b a l das R e c u p e r a e s %
3,4
Limite d e D e t e c o ( L O D )
D e a c o r d o c o m o critrio e s t a b e l e c i d o temos:
LOD
instrumental = 0,001
ug
dL"
L O D estatstico = 0 , 0 0 1 2 u g d L
0,34
0,4
L O D estatstico = 3 X 0 , 0 0 0 4 u g d L
C.V.
119
L O D estatstico = 3 X D E S V P A D
D.P.
%
E n t o : L O D = 0,0012 u g dL"
Limite d e Quantificao ( L O Q )
D e a c o r d o c o m o critrio estabelecido temos q u e :
L O Q estatstico = 10X D E S V P A D
L O Q estatstico = 10 X 0 , 0 0 0 4 u g dL"
LOQ
r o p 0
sto=
0 , 0 8 u g dL"
L O Q estatstico = 0 , 0 0 4 u g dL"
T e m o s q u e : 0 , 0 4 u g dL"
84
T a b e l a 11 : Eficincia da recuperao p a r a D e l t a H C H
V.R.
V.A.
%
ug dL-
u g dL"
0,08
0,081
0,08
0,076
0,08
0,083
104
0,08
0,076
95
0,08
0,089
111
0,80
0,637
80
0,80
0,694
87
0,80
0,651
81
0,80
0,645
81
0,80
0,604
76
95
101
6,7
6,6
81
3,9
4,8
91
C V Global das R e c u p e r a e s %
5,7
Limite de Deteco ( L O D )
D e a c o r d o c o m o critrio estabelecido t e m o s :
L O D estatstico = 3 X D E S V P A D
L O D estatstico = 3 X 0 , 0 0 5 u g dL"
instrumental = 0,01
C.V.
101
LOD
D.P.
%
ug
dL"
L O D estatstico = 0 , 0 1 5 u g dL"
T e m o s q u e : 0,01 ug dL"
< 0 , 0 1 5 u g dL"
E n t o : L O D = 0,015 u g dL"
Limite d e Quantificao ( L O Q )
D e a c o r d o c o m o critrio e s t a b e l e c i d o t e m o s q u e :
L O Q estatstico = 1 0 X D E S V P A D
L O Q estatstico = 10 X 0 , 0 0 5 u g dL"
LOQ
p r o
O S t
o=
0,08ug dL"
L O Q estatstico = 0 , 0 5 u g dL"
T e m o s q u e : 0,05ug d L "
86
T a b e l a 13: Eficincia da r e c u p e r a o p a r a G a m a H C H - L i n d a n a
V.A.
V.R.
%
ug dl-"
ug dL"
D.P.
C.V.
x %
0,04
0,042
105
0,04
0,042,
105
0,04
0,039
98
0,04
0,044
110
0,04
0,045
113
0,40
0,321
80
0,40
0,350
88
0,40
0,387
97
0,40
0,348
87
0,40
0,307
77
106
5,7
5,4
86
7,8
9,1
96
C V G l o b a l das R e c u p e r a e s %
7,3
L O D estatstico = 3 X D E S V P A D
L O D estatstico = 3 X 0 , 0 0 2 u g dL"
LOD
instrumental = 0,001
UQ
dL
- 1
L O D estatstico = 0 , 0 0 6 u g d L
- 1
T e m o s q u e : 0,001 u g dL"
Critrio a ser adotado:
< 0 , 0 0 2 u g dL"
qualificar o L O D p a r a o m a i o r v a l o r e n c o n t r a d o .
E n t o : L O D = 0,002 ug dL"
Limite de Quantificao ( L O Q )
D e acordo c o m o critrio estabelecido t e m o s q u e :
L O Q estatstico = 10X D E S V P A D
L O Q estatstico = 10 X 0 , 0 0 2 u g d L
LOQ
r o p 0
sto=
0,04ug dL"
- 1
L O Q estatstico = 0,02ug d L
88
5.2 R e s u l t a d o s G r u p o 1 e G r u p o 2.
A p o p u l a o d e e s t u d o foi c o m p o s t a p o r 5 6 p e s s o a s q u e t r a b a l h a r a m o u
t r a b a l h a m no Arquivo Histrico d e Joinville, e s t a n d o e x p o s t a s a o H C H no s e u
ambiente d e trabalho.
Faixa
Quantidade
Etria
de pessoas
Sexo
V a l o r e n c o n t r a d a u g dl_'
M.
F.
19-29anos
25
11
14
<0,04
<0,08
<0,08
<0,04
30-40anos
17
01
16
<0,04
<0,08
<0,08
<0,04
41-50anos
06
03
03
<0,04
<0,08
<0,08
<0,04
51-60anos
06
03
03
<0,04
<0,08
<0,08
<0,04
>60anos
02
02
00
<0,04
<0,08
<0,08
<0,04
Total
56
20
36
<0,04
<0,08
<0,08
<0,04
M Masculino
F Feminino
grupo
no
e x p o s t o foi f o r m a d o
por
uma
amostra
probabilstica
dos
89
T a b e l a 1 6 : G r u p o 2 - " G r u p o n o exposto"
Faixa
Quantidade
Etria
de p e s s o a s
Sexo
V a l o r e n c o n t r a d a u g dl_
M.
F.
R>
19-29anos
50
26
24
<0,04
<0,08
<0,08
<0,04
30-40anos
34
03
31
<0,04
<0,08
<0,08
<0,04
41-50anos
12
06
06
<0,04
<0,08
<0,08
<0,04
51-60anos
12
06
06
<0,04
<0,08
<0,08
<0,04
>60anos
04
04
00
<0,04
<0,08
<0,08
<0,04
Total
112
45
67
<0,04
<0,08
<0,08
<0,04
M Masculino
F Feminino
90
5.3 D I S C U S S O D O S R E S U L T A D O S
O HCH -
e o seu p a d r o
de
uso g l o b a l
resultaram
em contaminao
ambiental
epileptiformes,
enquanto
os
ismeros
alfa,
beta
delta
so
de 0 , 0 4 u g dL" p a r a A l f a H C H e L i n d a n o e 0 , 0 8 u g d L
- 1
As
substncias
qumicas
organocloradas
especificamente
91
uma
tendncia
de
progressiva
organoclorados -
incluindo e s p e c i f i c a m e n t e
reduo
HCH -
dos
nveis
no organismo
de
humano,
Essa
tendncia,
de
progressivo
declnio
da
concentrao
de
resduos
o r g a n o c l o r a d o s no o r g a n i s m o h u m a n o , e s t a a s s o c i a d a s p r o i b i e s d e f a b r i c a o
e
uso
agrcola
dos
praguicidas
organoclorados,
iniciada
nos
anos
70,
progressivamente e s t e n d i d a ao mundo.
5 - No Brasil, os t r a b a l h o s cientficos d i s p o n v e i s - a i n d a q u e n u m e r o s o s e de boa
qualidade, no so suficientes para d e l i n e a r d e m o d o a d e q u a d o u m a t e n d n c i a
t e m p o r a l de mdio e longo prazo, d a d a a falta d e s i s t e m a t i z a o de estudos
populacionais
amostralmente
representativos
historicamente
analisados.
Os
e s t u d o s disponveis g e r a l m e n t e so g e o g r a f i c a m e n t e l o c a l i z a d o s , e a b o r d a m , e m
sua
maioria,
grupos
populacionais
especficos,
com
nfase
em
exposies
o c u p a c i o n a i s e e x p o s i e s no entorno d e r e a s p o l u d a s , o u e m c o n d i e s n o estrapolveis.
6 - Por outro lado, no c a s o do Brasil, e m b o r a a p r o i b i o d o u s o agrcola dos
praguicidas clorados j v i g o r e h mais d e 15 a n o s , o q u a d r o t e m caractersticas
mais complexas, t e n d o e m vista o uso e x t e n s i v o q u e s e f e z d e p r a g u i c i d a s clorados,
p a r a o combate de v e t o r e s de d o e n a s i n f e c c i o s a s , e m e s p e c i a l a malria e a
d o e n a de Chagas.
7 - S o b r e os efeitos d a e x p o s i o ambiental a s u b s t n c i a s q u m i c a s o r g a n o c l o r a d a s
- nominalmente o H C H - s o b r e a s a d e h u m a n a , a literatura cientfica compulsada
m o s t r o u que eles d e v e m ser a n a l i s a d o s e i n t e r p r e t a d o s s e g u n d o a natureza da
92
positivos
r e s u m e m - s e a e s p c i e s a n i m a i s a l i m e n t a d a s c o m g r a n d e s q u a n t i d a d e s de H C H ,
n o existindo e v i d n c i a s idneas, d e n a t u r e z a e p i d e m i o l g i c a , q u e confirmem a
c a r c i n o g e n c i d a d e no ser h u m a n o . C o n t u d o , por a n a l o g i a c o m o q u e ocorre c o m
outras s u b s t n c i a s q u m i c a s txicas, a s i n a l i z a o experimental
n o p o d e ser
a b a n d o n a d a , p r i n c i p a l m e n t e luz d o P r i n c p i o d a P r e c a u o e n o contexto da
Vigilncia d e S a d e .
11 - Estas o b s e r v a e s a p l i c a m - s e e s p e c i a l m e n t e p a r a o c n c e r d e m a m a e,
s e c u n d a r i a m e n t e , p a r a o c n c e r d e f g a d o , e n t r e outras l o c a l i z a e s e tipo de
t u m o r e s malignos.
12 - R e c o m e n d a - s e a o Ministrio d a S a d e u m a d i s c u s s o mais p r o f u n d a d a , no
curto e m d i o prazos, s o b r e q u e s t e s c o m o :
D e s e n v o l v i m e n t o o u f o m e n t o d e e s t u d o s na d i r e o d a c o n s t i t u i o d e bancos
d e d a d o s s o b r e r e s d u o s o r g a n o c l o r a d o s e m t e c i d o a d i p o s o , o b t i d o por biopsia
intracirrgica e e m a u t p s i a s .
D e s e n v o l v i m e n t o o u f o m e n t o d e e s t u d o s n a d i r e o d a c o n s t i t u i o de bancos
d e d a d o s s o b r e r e s d u o s o r g a n o c l o r a d o s e m g o r d u r a d e leite materno.
93
A i n d a q u e t e n h a m u m espectro n a c i o n a l a b r a n g e n t e , a s
recomendaes
d o Rio d e
Janeiro
desses
observadas
foram
superiores
140mg/Kg
530mg/Kg,
94
6. C O N C L U S E S
A s principais c o n c l u s e s deste t r a b a l h o f o r a m :
1) Os resultados e n c o n t r a d o s n a v a l i d a o d o m t o d o indicam exatides
suficientes para a f i n a l i d a d e do estudo. O m t o d o c o n s i d e r a d o a d e q u a d o para as
a n l i s e s e m soro s a n g n e o e est d e n t r o d o s critrios d e c o n f o r m i d a d e definidos
atravs dos p r o c e d i m e n t o s o p e r a c i o n a i s d o laboratrio e d a s n o r m a s legais em
vigor no pas. No total f o r a m a n a l i s a d a s 168 (cento e s e s s e n t a e oito) amostras de
soro sangneo, s e n d o 5 6 d e f u n c i o n r i o s e ex-funcionrios d o A r q u i v o Histrico de
Joinville Santa C a t a r i n a e 112 da p o p u l a o controle.
2) T o d a s a s a m o s t r a s d e s o r o s a n g n e o o b t i v e r a m resultados abaixo do
1
A r a m p a c r o m a t o g r f i c a foi e s t a b e l e c i d a c o m a p r o x i m a d a m e n t e 4 0
Alfa e Beta,
uma
nica
corrida
quando
houver
necessidade
confirmao
em
Cromatografia a G s a c o p l a d a a e s p e c t r o m e t r i a d e m a s s a s ( G C - M S ) .
6) Os d a d o s a p r e s e n t a d o s n a v a l i d a o e s t o de a c o r d o com os critrios de
e n s a i o e s t a b e l e c i d o s p a r a p e s t i c i d a s no Brasil.
95
o c o r r e u h 2 0 anos, e e m b o r a e s t u d o s d e e s t a b i l i d a d e d a m o l c u l a m o s t r e m q u e ,
no o r g a n i s m o h u m a n o e meio a m b i e n t e p o d e h a v e r p e r s i s t n c i a por mais de 2 0
anos, esta estabilidade d e p e n d e d e d i v e r s o s f a t o r e s c o m o a l i m e n t a o , o b e s i d a d e ,
atividades esportivas entre outros.
Desta forma, s o necessrios e s t u d o s m a i s d e t a l h a d o s a v a l i a n d o a p r e s e n a
dos ismeros d o H C H nas clulas a d i p o s a s d a p o p u l a o e x p o s t a , u m a v e z q u e o
H C H lipoflico e poderia estar b i o a c u m u l a d o n e s t e s t e c i d o s .
PERSPECTIVAS
O caso d e possvel c o n t a m i n a o o c o r r e u h 2 0 a n o s , e e m b o r a e s t u d o s de
estabilidade da molcula mostrem q u e , n o o r g a n i s m o h u m a n o e meio a m b i e n t e
p o d e haver persistncia por mais d e 2 0 a n o s , e s t a e s t a b i l i d a d e d e p e n d e
de
necessrios
estudos
mais
detalhados
p a r a avaliar
96
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