Ambiente

Adsorcin de Cu y Cd por la biomasa miceliar de tres cepas Pleurotus, hongo de

la pudricin blanca
Adsortion of Cu and Cd by the mycelial biomass of three strains of Pleurotus white rot
fungus
Absoro de Cd e Cu pela biomassa micelial de trs cepas de Pleurotus, fungo da
podrido branca
Marco Marn-Castro1 Vctor Tamarz Flores2 Rosala Casteln Vega3
Gladys Linares Fleites4
Recibido: 19-5-15; Aprobado: 26-6-15

Resumen
La descarga de metales pesados en los diferentes ecosistemas se ha convertido en un motivo de preocupacin en el mundo
en las ltimas dcadas. Estos
contaminantes se introducen
principalmente en los sistemas
acuticos de manera significativa como resultado de operaciones industriales y generalmente
se depositan finalmente en campos agrcolas. La utilizacin de
microorganismos como biosorbentes de los metales pesados,
en los sistemas mencionados,
ofrece una alternativa potencial
a los mtodos ya existentes para
la destoxificacin y recuperacin
de metales txicos o valiosos
presentes en estas aguas. En este trabajo, se evala si el micelio
de tres cepas del hongo de la pudricin blanca pleurotus spp,
puede utilizarse como adsorbente de cadmio y cobre presentes en soluciones metlicas de laboratorio.
Palabras clave: Adsorcin, hongos, metales pesados, pudricin
blanca.

Abstract
The of heavy metals discharge in different ecosystems it has become a
world concern in recent decades. These pollutants
are mainly introduced in
aquatic systems as resulting from industrial operations and they are finally
deposited in farmland. The
use of microorganisms as
heavy metals biosorbents,
in the aforementioned systems, offers a potential alternative to existing methods for detoxification and
recovery of toxic or valuable metals present in
these waters. In this work,
we evaluate whether the
mycelium of three strains
of white rot fungus
Pleurotus spp, can be
used as adsorbent cadmium and copper present
in metal solutions laboratory.
Keyword: Adsorption,
heavy metal, white rot
fungi.

Resumo
A descarga de metais pesados
nos diferentes ecossistemas
converteu-se em um motivo de
preocupao no mundo nas ltimas dcadas. Estes contaminantes introduzem-se principalmente nos sistemas aquticos de maneira significativa como resultada de operaes industriais e geralmente se depositam finalmente em campos
agrcolas. A utilizao de microrganismos como biosorbentes dos metais pesados, nos sistemas mencionados, oferece
uma alternativa potencial aos
mtodos j existentes para a
destoxificao e recuperao
de metais txicos ou valiosos
presentes nestas guas. Neste
trabalho, avalia-se se o micelio
de trs cepas do fungo da podrido branca pleurotus spp, pode ser utilizado como adsorvente de cadmio e cobre presentes em solues metlicas
de laboratrio.
Palavras-chave: Adsoro,
fungos, metais pesados, podrido branca.

1
Quim, MSc. Instituto de Ciencias de la Benemerita Universidad Autnoma de Puebla (ICUAP). e-mail:
marco.marin@correo.buap.mx
2
Quim. Dr. Benemerita Universidad Autnoma de Puebla (BUAP). e-mail: victor.tamarz@correo.buap.mx
3
Biol. Dra. BUAP. e-mail: rosalia.castelan@correo.buap.mx
4
Mat. Dra. BUAP. e-mail: gladys.linares@correo.buap.mx

GEOMINAS, Vol. 43, N 67, agosto 2015

109

M. Marn, V. Tamariz, R. Casteln, G. Linares

Introduccin
De acuerdo a Caizares (2000),
los metales pesados constituyen
un grupo aproximado de 40 elementos de la Tabla Peridica, se caracterizan por tener densidades
mayores o iguales a 5 g/cm3. Un aspecto distintivo de la fisiologa de
estos metales, es que aun cuando
varios de ellos son esenciales para
el metabolismo celular como el Ca,
K, Fe, Mg, Na, V, Mn, Co, Zn, Ni,
Cu, y Mo, se ha reportado que tambin tienen efectos txicos sobre
las clulas, principalmente por su
capacidad para alterar o desnaturalizar las protenas. Presentan
gran movilidad en los ecosistemas
acuticos superficiales y subterraneos y conjuntamente por su alta
toxicidad debido a que fcilmente
forman iones, se les ha calificado
como los contaminantes inorgnicos ms importantes en el ambiente. No obstante que se detecten en
concentraciones mnimas, su recalcitrancia y persistencia en cuerpos de agua, implica que a travs
de procesos naturales como la biomagnificacin, su concentracin
puede llegar a ser tan elevada que
se considere txica. (Gadd, 2001)
Estos elementos son importantes
para la salud humana y aspectos
ambientales; ya que con su presencia en forma soluble, son extremadamente txicos para sistemas biolgicos, esto ha influido para que se les clasifique como substancias carcingenas y mutgenas (Diels, 2000), estos metales
no pueden ser degradados a productos incuos, por lo que permanecen en el ambiente indefinidamente. Ante esto, la bsqueda de
nuevas tecnologas que permitan
la eliminacin de metales txicos
de las aguas residuales se ha enfocado a la utilizacin de microorganismos como biosorbentes lo cual
ofrece una alternativa potencial a
los mtodos ya existentes para la
destoxificacin y recuperacin de
metales presentes en aguas residuales. Varias levaduras, hongos,
algas, bacterias y cierta flora acutica tienen la capacidad de concentrar metales a partir de soluciones acuosas diluidas y de acumularlas dentro de la estructura microbiana (Gadd, 1990), por lo que,
un enfoque biolgico de remedia110

cin cuenta con un gran potencial,

ya que no slo contribuye a la meta
sino que tambin es econmico,
debido a que las poblaciones microbianas en ambientes contaminados por metales se adaptan a
las concentraciones txicas de metales pesados, y se vuelven resistentes (Prasenjit, 2005).
Biosorcin
La biosorcin puede ser definida
como la capacidad de los materiales biolgicos vivos o muertos, para acumular metales pesados de
aguas residuales a travs de mediacin metablica por vas fsicoqumicas de captacin (Kapoor,
1995). Algas, bacterias, hongos y
levaduras han demostrado ser potenciales biosorbentes de metales.
Las principales ventajas de biosorcin sobre los mtodos de tratamiento convencionales incluyen:
Bajo costo; Alta eficiencia; Minimizacin de productos qumicos; No
se requiere nutrientes adicionales;
Regeneracin de los biosorbentes, y Posibilidad de recuperacin
de metales (Kratochvil, 1989)
Hongos de la pudricin blanca
Los hongos de la pudricin blanca
han sido estudiados ampliamente
por su capacidad de destoxificar
efluentes con altas concentraciones de compuestos xenobiticos.
Entre los hongos de pudricin blanca ms estudiados se encuentran
las especies de Phanerochaete
chrysosporium, Trametes versicolor y tambin algunas cepas de
Pleurotus y Phlebia. La biodegradacin por Basidiomycetes se considera un proceso no especfico,
oxidativo y que es llevado a cabo
fundamental mente por la accin
de tres diferentes tipos de enzimas: Lignina peroxidasa (LiPs),
Mn-Peroxidasas (Mn- Ps), las cuales dependen de perxido de hidrgeno, y lacasa, la cual depende
de oxgeno molecular (Gold y Allic,
1993; Gadd, 2001;Baldrian, 2002).
Los trabajos en cuanto a remocin
de metales pesados en aguas residuales se ha realizado, pero no en
igual magnitud que con los compuestos nombrados, estudios realizados por Iqbal (2004), indican la
eficacia de Phanerochaete
chrysosporium inmovilizado, en la

adsorcin de plomo, cobre y zinc al

obtener porcentajes de remocin
de hasta 85%. Yetis y Dolek (2004)
con este mismo hongo removieron
plomo en una concentracin de
80mg/l. Li et al. (2004) utilizando
pellets de P. chrysosporium para la
biosorcin de Cd y Pb en mezcla
en una fase acuosa demostraron
la competencia entre los iones por
los sitios de adsorcin y porcentajes de remocin cercanos al 30%.
Igualmente en un sistema de mezcla de dos metales, Kacar et al.
(2002), compararon la capacidad
de biosorcin de biomasa viva y
muerta de P. chrysosporium inmovilizada en alginato, en presencia
de mercurio y cadmio bajo diferentes condiciones de pH y temperatura reportando as remocin para
Cd de 70 mg/l y 40 mg/l para clulas vivas inmovilizadas y muertas
inmovilizadas, respectivamente;
para el caso del Hg fue de 75mg/l y
50 mg/l igualmente para clulas inmovilizadas.
Por lo tanto, si se considera el uso
de clulas vivas para un sistema
de eliminacin de metales, la toxicidad puede conducir a un envenenamiento e inactivacin de las mismas (Shumate, 1985). El uso de
biomasa muerta o productos derivados de ella elimina el problema
de la toxicidad, no slo de la provocada por metales disueltos, sino
tambin por condiciones adversas
de operacin, adems de favorecer el aspecto econmico de mantenimiento, incluyendo el suplemento de nutrientes. Sin embargo,
las clulas vivas pueden presentar
una variedad ms amplia de mecanismos para la acumulacin de metales como el transporte, la formacin de complejos extracelulares y
la precipitacin. De manera adicional, la tolerancia y resistencia a los
metales pesados son propiedades
que estn presentes en los microorganismos de todos los grupos utilizados en estos procesos
(Belliveau, 1987; Galli, 2009). Por
lo descrito anteriormente, el uso de
los hongos de la pudricin blanca
se convierten en una herramienta
biolgica en los procesos de remocin metlica, debido varias caractersticas entre las que destaca la
hipertolerancia y acumulacin de
metales pesados en su pared celu-

GEOMINAS, Vol. 43, N 67, agosto 2015

Adsorcin de Cu y Cd por la biomasa miceliar de tres cepas

lar, por lo que experimentar con el hongo Pleurotus

spp, inicialmente en laboratorio, resulta importante
para hacer propuestas posteriormente en el tratamiento de aguas residuales.
Objetivos
Evaluar y comparar la capacidad de tres cepas del
hongo Pleurotus, para retener mediante procesos de
biosorcin, concentraciones de cobre y Cadmio presentes en soluciones metlicas de laboratorio
Metodologa
Origen de las cepas
En este trabajo se utilizaron tres cepas del hongo de
la pudricin blanca Pleurotus. la cepa de Pleurotus ostreatus fue adquirida en la Universidad de Costa Rica
(UCR), la cepa de Pleurotus djamor fue colectada en
el municipio de Atlixco Puebla, Mxico, y la tercera cepa fue proporcionada por productores de hongos comestibles del estado de Tlaxcala. Las tres cepas se localizan en el laboratorio de Micologa, del departamento de Investigacin en Ciencias agrcolas de la
BUAP.
Denominacin de las cepas en el experimento
Pleurotus ostreatus, se denomin cepa G, Pleurotus djamor se denomin cepa R, Pleurotus sp, o cepa comercia se denomin cepa T
Obtencin de biomasa miceliar
A partir de los cultivos purificados, se tomaron discos
de agar de 5 mm de dimetro de cada cepa y se inocularon en matraces Erlenmeyer de 250 ml de capacidad, conteniendo 100 ml de caldo micolgico BD
Bioxon esterilizado y se incub durante 10 das a 25
0
C (Chang, 2004), al finalizar esta etapa, se decidi
someter a cada una de las cepas a condiciones nutricionales similares a las encontradas en agua residual, para lo cual se utiliz como medio de cultivo, caldo micolgico, el cual tiene como fuente de carbono y
nitrgeno mezcla de peptonas y dextrosa adicionado con soluciones metlicas a diferentes concentraciones, ofreciendo as molculas simples para el metabolismo fngico, contrarias a las ofrecidas bajo condiciones ligninolticas, y la biomasa miceliar de cada
cepa, fue separada del medio de cultivo inicial mediante decantacin en condiciones de esterilidad y depositada por triplicado en matraces Erlenmeyer de
250 ml de capacidad, conteniendo 200 ml de caldo

preparado con soluciones metlicas de Cobre y Cadmio, en concentracin de 100 ppm (100 mg/l) a pH
5.5 (Stamets, 1983; Gregori, 2007). Los matraces se
incubaron durante 12 das en estufa de incubacin a
la temperatura entre 25 y 27 C (Caizares, 2000).
Evaluacin de las isotermas de adsorcin
Para evaluar la concentracin adsorbida de cada metal por el micelio de las cepas experimentales, se extrajeron alcuotas de 5 ml de cada matraz cada 48 horas durante diez das de incubacin, cada alcuota
fue analizada mediante espectrofotometra de absorcin atmica,puesto que en este estudio se utiliz biomasa viva, con fines de observar el comportamiento
de sta frente a la presencia de metales pesados
(Iqbal, 2004; Caizares, 2000).
Resultados
Para las isotermas de adsorcin de cobre los resultados se indican en la tabla I, la cual registra la adsorcin del metal en el micelio a partir de los muestreos
cada 48 horas, por triplicado y posteriormente se indica el comportamiento de este proceso en la figura 1.
Se debe mencionar que el medio lquido con la solucin metlica inicialmente contena 100 ppm (100
mg/l) de Cadmio, esta concentracin como se aprecia en las figuras 1, 2 y 3, fue disminuyendo de la fase lquida, hasta contabilizar 62,5, 34,51 y 38,3 ppm
y aumentando en el micelio de cada cepa, R= 37,50,
T= 65,49 y G = 61,70 ppm, esta determinacin se realiz en un espectrofotmetro de absorcin atmica
VARIAN 55 B.
En la figura 1, correspondiente a la isoterma de la cepa R, se observa ligera retencin del metal en el primer muestreo dentro del rango de 10 a 20 ppm, generando adsorcin y desorcin durante los muestreos
dos y cuatro y finalmente se registra el aumento de retencin en el muestreo cinco alcanzando casi 40
ppm. En la figura dos el comportamiento de la isoterma para la cepa T, indica que la retencin del cadmio
se desarrolla en el rango de 50 a 60 ppm, registrando
adsorcin y desorcin durante los cuatro muestreos,
alcanzando en el muestreo cinco 65.4 ppm y finalmente la cepa G muestra una isoterma que alcanza
un punto mximo de adsorcin de 68 ppm en el tercer
muestreo descendiendo posteriormente hasta 61.7
ppm durante el muestreo cinco, la tabla II muestra los
porcentajes de retencin de cadmio por las tres ce-

Tabla I. Adsorcin de cadmio por las cepas de Pleurotus.

GEOMINAS, agosto 2015

111

M. Marn, V. Tamariz, R. Casteln, G. Linares

Figura 1. Isoterma de Cd
cepa R.

Figura 2. Isoterma de Cd
cepa T.

Figura 3. Isoterma de Cd
cepa G.

Tabla II. Porcentaje final de adsorcin de Cadmio por las cepas de Pleurotus.

pas de Pleurotus.
Se aplic un anlisis de varianza
para comparar el comportamiento
de las tres cepas, como se aprecia
en la tabla III.
Analizando estadsticamente el
comportamiento de las tres cepas
se puede decir que si las hiptesis
estadsticas fueron:
H0: R = T = G y Ha: Existe alguna diferente.
y si se determin que: P = 0,000
= 0,05, se rechaza Ho, lo que implica que si existe diferencia estadstica significativa entre el comportamiento de las tres cepas con
la adsorcin del metal cadmio, dado que la retencin fue mayor al 60
% en el caso de las cepas T y G, lo

que implica que estas cepas son

medianamente eficientes en retener este metal en las concentraciones ensayadas; y se puede comentar que la cepa R es la menos eficiente pero el porcentaje
que retiene de un metal tan txico
la hace adecuada para participar
en procesos de adsorcin igual
que las cepas con T y G.
Para las isotermas de adsorcin
del Cobre, los resultados se indican en la tabla IV, la cual registra la
adsorcin del metal en el micelio a
partir de los muestreos cada 48 horas.
Se menciona nuevamente que el
medio lquido con las soluciones
metlicas inicialmente contena

100 ppm de Cobre, esta concentracin como se aprecia en las figuras 4, 5 y 6, fue disminuyendo de la
fase lquida, hasta contabilizar
3,7, 2,6 y 2,1 ppm y as se increment en la biomasa de cada cepa: R= 96,27, T= 97,40 y G= 97,90
ppm, de las isotermas correspondientes a la retencin de cobre por
las cepas experimentales.
Analizando estadsticamente el
comportamiento de las tres cepas
se puede decir que si las hiptesis
estadsticas fueron:
H0: R = T = G y Ha: existe una
o media diferente
Y si se determin que: P = 0,730
= 0,05, no se rechaza Ho, lo implica que no existe diferencia esta-

Tabla III. Anlisis de varianza para la adsorcin de Cadmio.

Tabla IV. Adsorcin de Cobre por las cepas de Pleurotus.

112

GEOMINAS, Vol. 43, N 67, agosto 2015

Adsorcin de Cu y Cd por la biomasa miceliar de tres cepas

Figura 4. Isoterma de Cu cepa

R.

Figura 5. Isoterma de Cu
cepa T.

Figura 6. Isoterma de Cu
cepa g.

Tabla V. Anlisis de varianza para la adsorcin de cadmio.

dstica significativa entre el comportamiento de las

vation, Nutritional Value, Medicinal effect, and Entres cepas con la adsorcin del metal cobre; se puevironmental Impact. (Sec. Edition) CRC Press,
de concluir que la retencin fue mayor al 90 % en caInc. Boca Ratn, Florida, pp. 451.
da caso lo que implica que las tres cepas son alta- Diels, L. N. Van der Lelie, L. Bastiaens (2000). New
mente eficientes en retener este metal.
development in treatment of heavy metal contaminated soils. Rev. Environ. Sci. Biotechnol., 1: 75Conclusiones
82.
De acuerdo a los objetivos planteados y los resulta- Gadd, G. (1986). The uptake of heavy metals by fungi
dos obtenidos se puede concluir que las tres cepas
and yeasts: the chemistry and physiology of the
experimentales tienen alta tolerancia a soluciones en
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consideradas altas comparadas con las mximas perHunt (eds.). Chichester: Ellis Horwood Ltd., pp.
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ma, en este caso se comprob que la biomasa mice- Gadd,G. (1990). Hongos y levaduras para la acumuliar pudo adsorber o retener en promedio 90 ppm de
lacin de metales. En: cL Ehrlich, Brierly, (Eds), la
100 posibles, de este elemento en condiciones de larecuperacin microbiana de minerales.
boratorio, lo cual permite crear expectativas para su
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