Miguel Ascoy Saucedo

Ricardo Pando Untiveros

INTRODUCCION
En biologa, y especficamente en microbiologa, un cultivo es un mtodo para
la multiplicacin de microorganismos, tales como bacterias, hongos y parsitos,
en el que se prepara un medio ptimo para favorecer el proceso deseado. Un
cultivo es empleado como un mtodo fundamental para el estudio de
las bacterias y
otros
microorganismos
que
causan
enfermedades
en medicina humana y veterinaria
CARACTERISTICAS
Un microorganismo se puede sembrar en un medio lquido o en la superficie de
un
medio
slido
de agar.
Los medios
de
cultivo contienen
distintos nutrientes que van, desde azcares simples hasta sustancias
complejas como la sangre o el extracto de caldo de carne. Para aislar o
purificar una especie bacteriana a partir de una muestra formada por muchos
tipos de bacterias, se siembra en un medio de cultivo slido donde las clulas
que se multiplican no cambian de localizacin; tras muchos ciclos
reproductivos, cada bacteria individual genera por escisin binaria una colonia
macroscpica compuesta por decenas de millones de clulas similares a la
original. Si esta colonia individual se siembra a su vez en un nuevo medio
crecer como cultivo puro de un solo tipo de bacteria.
La principal diferencia entre un medio de cultivo slido y uno lquido es que el
medio de cultivo slido contiene un 1,52% de agar-agar, mientras que el
medio lquido no contiene agar-agar.
INDICACIONES
Muchas especies bacterianas son tan parecidas morfolgicamente que es
imposible diferenciarlas slo con el uso del microscopio. En este caso, para
identificar
cada
tipo
de
bacteria,
se
estudian
sus
caractersticas bioqumicas sembrndolas en medios de cultivo especiales. As,
algunos medios contienen un producto que inhibe el crecimiento de la mayora
de las especies bacterianas, pero no la del tipo que se desea averiguar si est
presente. Otras veces, el medio de cultivo contiene determinados azcares
especiales que slo pueden utilizar algunas bacterias. En algunos medios se
aaden indicadores de pH que cambian de color cuando uno de los nutrientes
del medio es fermentado y se generan catabolismos cidos. Si las bacterias

son capaces de producir fermentacin, generan gases que pueden ser

detectados cuando el cultivo se realiza en un tubo cerrado.
Con otros medios de cultivo se puede identificar si las bacterias producen
determinadas enzimas que digieren los nutrientes. As, algunas bacterias con
enzimas
hemolticas
(capaces
de
romper
los glbulos
rojos)
producen hidrlisis y cambios apreciables prosaicamente en las placas de
agar-sangre.
Los diferentes medios y tcnicas de cultivo son Esenciales en un laboratorio
de microbiologa de un hospital, pues sirven para identificar las bacterias
causantes de las enfermedades infecciosas y los antibiticos a los que son
sensibles esas bacterias. Los cultivos suelen usarse en medicina para
determinar la presencia de agentes patgenos en fluidos corporales (como por
ejemplo la sangre o la orina)

REQUERIMIENTOS
Los medios de cultivo, para poder ser utilizados y garantizar que los resultados
obtenidos a partir de ellos sean confiables, deben cumplir con los siguientes
requisitos:

Disponibilidad de nutrientes.

Consistencia adecuada del medio.

Presencia o ausencia de oxgeno y otros gases.

Condiciones adecuadas de humedad (mantener en frigorfico).

Luz ambiental.

pH adecuado.

Temperatura.

Esterilidad.

ANEXOS
UTILIDAD DE EXAMENES PARASITOLGICOS Y SEROLGICOS COMO
METODOD DE DIAGNSTICO DE ESTRONGILOIDIOSIS HUMANA EJERCICIO DE
METAANLISIS

PEDRO HUAPAYA1, ROXANA SUREZ

, YRMA ESPINOZA1

RESUMEN
OBJETIVO: Realizar un metanlisis revisando bibliografa publicada en los ltimos
20 aos, que comparaba directa o indirectamente los mtodos de diagnstico
serolgico y parasitolgico de infeccin por Strongyloides stercoralis. MATERIAL Y
METODOS: Se trat de construir una tabla tetracrica con la cual calcular los
valores de sensibilidad y especificidad de la serologa, teniendo a los mtodos
parasitolgicos como prueba de oro. Finalmente se seleccion aquellas referencias
que comparaban la tcnica de ELISA con los mtodos parasitolgicos, buscando
informacin que permitiera calcular los valores predictivos positivo y negativo.
RESUTADOS: Aplicando criterios de seleccin, fueron elegidas 25 referencias. Los
valores predictivos positivo y negativo resultaron 85,33% y 97,83%,
respectivamente. CONCLUSION: Estos resultados muestran la utilidad potencial del
mtodo de ELISA para el diagnstico de tamizaje de estrongiloidiosis, para facilitar
estudios en poblaciones que se encuentren expuestas a esta parasitosis
potencialmente letal.
Palabras clave: Strongyloides stercoralis; estrongiloidiasis; ELISA; diagnstico;
serologa.
USEFULNESS OF PARASITOLOGIC AND SEROLOGIC STUDIES IN THE
DIAGNOSIS OF HUMAN STRONGYLOIDIASIS. METAANALYSIS EXERCISE
ABSTRACT
OBJECTIVE: To conduct metaanalysis by reviewing bibliographic references
published during the last 20 years that directly or indirectly compared serologic and
parasitologic diagnostic methods for Strongyloides stercoralis infection. Material and
Methods: We tried to build a tetracoric table to obtain values of serology sensitivity

and specificity, choosing parasitologic methods as gold standard. Finally, those

references that compared ELISA with parasitologic methods were selected and
information was obtained to calculate positive and negative predictive values.
Results: Twenty-five references were chosen by applying selection criteria. Positive
and negative predictive values were 85,33% and 97,83%, respectively. Conclusion:
These results show the potential usefulness of ELISA method as a screening test for
strongyloidiasis, in order to facilitate studies in populations exposed to this
potentially lethal parasite.
Key words: Strongyloides stercoralis; strongyloidiasis; ELISA; diagnosis; serology.
Correspondencia: Pedro Ernesto Huapaya Herreros, Av. Oscar R. Benavides 5050. Dpto. 204 , Urb. Torres de
San Jos Torre A, Bellavista Callao 2, Per, E-mail: pedro_huapaya@latinmail.com

INTRODUCCION
Con el fin de comparar la utilidad de los diversos exmenes existentes para el
diagnstico de la infeccin por el nemtode Strongyloides stercoralis en seres
humanos, revisamos bibliografa a partir de una base de datos internacional,
buscando trabajos referidos al diagnstico de esta infeccin mediante diversas
tcnicas comparadas unas con otras. As tenemos el examen directo, concentracin
por el mtodo de Baermann, el cultivo de Harada-Mori, el cultivo en agar o en
carbn vegetal y otros mtodos serolgicos, principalmente la tcnica de
inmunoadsorcin asociada a enzimas, conocida comnmente como ELISA. Para
poder determinar cul de estos mtodos podra tener mayor valor para ser utilizado
en forma masiva para el diagnstico de tamizaje, es que realizamos un ensayo de
metaanlisis, que nos permitiera obtener una mejor idea. Adems, consideramos la
relacin costo-beneficio, que resulta importante en nuestro pas, donde los recursos
econmicos generalmente son limitados.
MATERIAL Y METODOS
Para este trabajo ubicamos, mediante la base de datos de la Biblioteca Nacional de
Medicina de los Estados Unidos de Norteamrica (PubMed-MEDLINE), un total de
797 referencias con alguna mencin a Strongyloides stercoralis. Luego, adicionamos
al grupo de estudio un total de 93 referencias de nuestro archivo personal y otras
11 provenientes de diversos investigadores amigos interesados en el tema, con las
cuales sumamos un total de 901 referencias. Despus revisamos los ttulos
rpidamente para ubicar aquellas que involucraban algn mtodo de diagnstico,
obteniendo 435. Nuevamente se revis los ttulos y parte de los resmenes y se fue
descartando aquellas que representaban reportes de casos aislados, cartas al editor
y artculos de revisin bibliogrfica; adems, aquellos realizados en animales o que
revisaban mtodos de diagnstico diversos sin efectuar una comparacin entre
diferentes tcnicas (aunque no fuera este el objetivo inicial), que utilizaban
metodologa poco prctica o no validada para el diagnstico, o que requeran
equipamiento y/o entrenamiento del personal excesivamente especializado como
para ser usados en estudios de poblacin (anlisis de ADN, endoscopia seriada,
examen de lquido peritoneal, entre otros). Hecho esto, se obtuvo 45 referencias,
de las cuales se descart todas aquellas que se encontraban en revistas
inaccesibles en nuestro pas o que estaban redactadas en idiomas distintos al
espaol, ingls o portugus (por razones logsticas). Asimismo, se excluy aquellas
referencias cuyo resumen no estaba disponible. Finalmente quedaron 32 ttulos,
cuyos resmenes fueron cuidadosamente revisados para evaluar la metodologa
utilizada.
En la Tabla 1 se resume los criterios de seleccin utilizados.

Tabla 1. Criterios de inclusin de las referencias revisadas

1.

Artculos originales dedicados a comparar mtodos de diagnstico,

excluyndose revisiones, reportes de caso, cartas al editor.

2.

Referencia de dos o ms mtodos de diagnstico en forma

comparativa(aunque no fuera el objetivo principal).

3.

Estudios realizados en seres humanos, no en animales.

4.

contener informacin suficiente que prmitiera obtener una tabla 2x2 para
calcular sensibilidad, y as completar el anlisis.

5.

Referencia a mtodos de diagnstico convenconales, es decir, se exckuy

tcnicas que no hubieran sido validades previamente.

6.

Estudios realizados dentro de los ltimos 20 aos (1981-2001).

7.

Estar redactados en espaol, ingls o portugus, por facilidad logstica.

Los 32 resmenes y/o trabajos fueron revisados detalladamente in extenso, para

estimar la posibilidad de comparar los mtodos en forma adecuada. Cumplido esto,
quedamos con 25 referencias, ya que las restantes 7 haban empleado dos o tres
mtodos, pero no cuantificaban en forma suficiente los datos de inters.
RESULTADOS
Con las 25 referencias finales (10 resmenes, 15 in extenso), revisamos y
verificamos datos para construir tablas 2x2, para as comparar los distintos
mtodos utilizados. Los datos obtenidos de sensibilidad y/o especificidad se
presentan en la Tabla 2.
DISCUSION
Se evidencia que los mtodos secundarios que son comparados con los
parasitolgicos son frecuentemente tcnicas que se han ido desarrollando en los
ltimos aos, a excepcin de las de Baermann (1) y Harada Mori (2,3) que, si bien
fueron conocidas desde hace ya largo tiempo, se las compara con fines
principalmente acadmicos. Asimismo tenemos un caso de examen directo del
fluido duodenal (4) y un coprotest (5) que, al no ser utilizados en forma
convencional, se les compara con otros mtodos mejor conocidos, con el fin de
conocer su utilidad como ayuda diagnstica. Estos mtodos, si bien son sensibles,
resultan poco prcticos, ya que no pueden ser empleados en forma rutinaria por
demandar cierta sofisticacin, que resultara restrictiva para establecimientos de
cierta complejidad. Una excepcin a este punto constituye el mtodo de cultivo con
carbn vegetal (6), que tambin mantiene una buena sensibilidad (81,7%) y
resulta sumamente mdico en comparacin con su anlogo, el cultivo en agar
nutritivo.
Si se considera el costo-beneficio, todos apuntan a enfatizar y difundir el uso del
cultivo, como mtodo complementario, al ya reconocido mtodo de Baermann, que,
si bien brinda buenos resultados, resulta insuficiente para el diagnstico cuando se
le asocia al cultivo en agar nutritivo (7-12) y ltimamente al cultivo en carbn
vegetal (6). Por ello, una conclusin de este trabajo ser difundir que el estudio
para descarte de estrongiloidiosis no ser suficiente si no se ha aplicado cuando
menos una vez el mtodo de Baermann y algn cultivo de heces, que resultan por
su costo totalmente accesibles a diversos niveles de atencin de salud, teniendo
como desventaja que demandan mayor tiempo de evaluacin del paciente, que

puede variar entre 5 y 10 das.

Pero, todos los mtodos parasitolgicos dependen del uso de muestras de heces
para poder desarrollarse. Por ello, los agrupamos para enfrentarlos con aquellos
que evitaran este material y que nos permitan estimar un diagnstico en forma
indirecta utilizando otro fluido o muestra, ya que existen circunstancias donde es
sumamente difcil obtener una muestra de heces para realizar el estudio. Por ello,
se nota un incremento en el desarrollo de estudios que buscan la posibilidad de un
estudio serolgico, bsicamente mediante la tcnica de ELISA, que en los ltimos
aos ha alcanzado preferencia de los investigadores debido a su metodologa
sencilla y que no demanda gran sofisticacin de equipos. Por eso decidimos revisar
aquellos trabajos que comparaban la tcnica de ELISA con los dems mtodos
parasitolgicos (13-24).
Revisando nuestros 25 artculos, encontramos un total de 10 con esta caracterstica
y que, adems, consignaban datos de casos negativos con los cuales establecer la
especificidad de la serologa (13-16,20-22,24,25). Dejamos de lado el estudio de
Costa-Cruz (17), que utilizaba el mtodo de inmunofluorescencia indirecta, que
tambin puede constituirse en una herramienta til para el diagnstico por la
eficacia que demostr.
Con la informacin obtenida reprodujimos los datos y tratamos de completar la
tabla 2x2, para poder calcular luego los valores predictivos positivo y negativo.
Todos ellos comparaban al menos dos de los mtodos tradicionales con el mtodo
de ELISA. As obtuvimos los valores predictivos que se presenta en la Tabla 3.

Tabla 2. Datos relevantes de los artculos revisados

N
o

Autor

Mtodo
Mtodo base
secundario(b
(a)
)

Total
Positivos

total
Negativos

(a)=150
(b)=140

(a)=66
(b)=66

Sensibilida Especificiad
d (%)
d (%)

AbdulFattah

Baermann
Cultivo 1

Elisa

Amato

Faust

Coprotest

(a)=119
(b)=115

____

96,6

____

Assefa

Directo
concentraci
n

Baermann

(a)=29
(b)=123

____

424,1

____

Bailey

Directo
Cultivo 1

ELISA

(a)=38
(b)=37

(a)=371
(b)=368

97,4

99,2

Conway

Directo
Baermann

ELISA

(a)=40
(b)=40

(a)=100
(b)=80

100,0

80,0

Carroll

Directo
Baermann

ELISA

(a)=45
(b)=38

(a)=45
(b)=45

84,4

100,0

7 Costa_Cruz

Directo
Baermann

IFI

(a)=54
(b)=51

(a)=69
(b)=45

94,4

94,2

Directo
Baermann

ELISA

(a)=3
(b)=1

(a)=65
(b)=64

33,3

98,5

Baermann

Harada Mori

(a)=121
(b)=85

(a)=244
(b)=244

70,2

100,0

De Paula

9 Dos Santos

92,7

100,0

10

Gam

Directo
Baermann

ELISA

(a)=68
(b)=57

____

83,8

____

11

Genta

Baermann
Cultivo 1

ELISA

(a)=268
(b)=260

(a)=571
(b)=542

97,0

95,0

12

Girard

Baermann

Cultivo 1

(a)=33
(b)=28

____

84,8

____

13

Goka

Directo

Fluido
duodenal

(a)=11
(b)=25

____

227,3

____

14

Jongwutive
s

Varios

Cultivo 1

(a)=191
(b)=186

____

97,4

____

15

Lindo

Baermann
Cultivo 1

ELISA

(a)=20
(b)=16

(a)=139
(b)=130

80,0

93,5

16

Mahdi

(a)=9
(b)=15

____

166,7

____

17

Mangali

Directo
Concentraci Harada Mori
n
Directo
Culitvo 1

ELISA

(a)=20
(b)=19

(a)=20
(b)=17

95,0

85,0

18 Moustafa

Directo
Baermann

Cultivo 1

(a)=27
(b)=54

____

200,0

____

19

Baermann
Cultivo 1

ELISA

(a)=51
(b)=43

____

84,3

____

20 Polderman

Baermann

ELISA

(a)=26
(b)=26

(a)=167
(b)=146

100,0

87,4

21

Salazar

Baermann

Cultivo 1

(a)=5
(b)=9

____

180,0

____

22

Sato

Baermann
Cultivo 1

ELISA

(a)=29
(b)=28

(a)=100
(b)=82

96,6

82,0

23

Sato

Baermann
Cultivo 1

Cultivo 1

(a)=256
(b)=246

____

96,1

____

24 Terashima

Baermann
Cultivo 1

Cultivo 1

(a)=170
(b)=149

____

87,6

____

25 Terashima

Baermann
Cultivo 1

Cultivo 2

(a)=169
(b)=138

____

81,7

____

Neva

Tabla 3. Valores predictivos positivos (VPP) y negativo (VPN) de ELISA, con respecto
mtodos parasitolgicos
Autor

VPP(%)

VPN(%)

Abdul-Fattah
Bailey

100,0
92,5

86,84
99,73

Carroll

100

86,54

Conway

66,7

100,0

De Paula

50,0

96,9

Genta

89,9

98,5

Lindo

64,0

97,01

Mangali

86,36

94,44

Polderman
Salto

55,32
60,87

100,0
98,8

Total

85,33

97.83

Encontramos que, de algunos estudios, se puede calcular valores predictivos poco

significativos, lo cual puede derivarse de las condiciones en que fueron realizados
los mismos. En el caso de Lindo (21), debido a la baja prevalencia de la infeccin en
Jamaica, la seleccin se realiz a partir de casos positivos de Strongyloides
stercoralis, buscando a los contactos familiares y peridomiciliarios en el vecindario,
a quienes se examin en sangre y heces para completar la metodologa de trabajo.
En cuanto a los artculos de Conway (15) y Polderman (25), los grupos de estudio
estaban conformados por ex - prisioneros de la Segunda Guerra Mundial en el
Sudeste de Asia, quienes por su condicin tuvieron un estado crnico del
parasitismo por reinfeccin continua. En cuanto a los estudios de De Paula (18) y

Sato (24), podramos atribuir el bajo valor predictivo positivo al pequeo nmero
de individuos evaluados en una zona endmica. En todos vemos que estos factores
afectaran la representatividad del grupo de estudio en la poblacin total de la que
provenan. Sin embargo, pese a estas consideraciones, podemos resumir los datos
y plantear un consolidado de valor predictivo positivo de 85,33% y negativo de
97,83%, que resultan importantes y plantearan la necesidad de realizar otro
estudio diseado para comprobar esta situacin, usando grupos representativos
tanto de una zona endmica como no endmica.
A esto ltimo debemos aadir que, si bien en nuestro pas el uso de la serologa se
est difundiendo en diversos problemas de salud, el costo y necesidad de
materiales y reactivos an constituyen limitantes para su desarrollo ptimo, pero
que podran ser eliminados difundiendo su uso en estudios de poblacin, donde
retribuiran totalmente la inversin realizada.
Finalizando, se puede plantear las siguientes conclusiones:
1. Existen diversas metodologas para el diagnstico directo e indirecto de
estrongiloidiosis humana.
2. Deben combinarse los mtodos parasitol-gicos, para poder asegurar un
diagnstico de certeza positivo o negativo.
3. Los mtodos serolgicos tienen potencial de ser utilizados como mtodos de
diagnstico poblacional o tamizaje, requiriendo ser evaluados en estudios con
diseos adecuados para este objetivo.
4. La relacin costo-beneficio de los mtodos parasitolgicos sigue siendo
favorable, ya que se encuentran muy difundidos y son accesibles a los distintos
niveles de atencin.
5. La relacin costo-beneficio de los mtodos serolgicos podra mejorarse
notablemente cuando se difunda su uso para la evaluacin de grandes poblaciones.

Evaluacin de tcnicas parasitolgicas en

el diagnstico de estrongiloidiasis
por Strongyloides stercoralis.

Efficacy of five methods for detection of Strongyloides stercoralisin human

stool specimens.

Lau Chong Carolina, Samalvides Cuba Frine1, Terashima Iwashita Anglica2

1Profesora Auxiliar del Departamento de Medicina de la Universidad Peruana Cayetano Heredia.

2Profesora Asociada del Departamento de Medicina de la Universidad Peruana Cayetano Heredia.

RESUMEN

Objetivos: Comparamos la eficacia de cinco tcnicas en el diagnstico de Strongyloides stercoralis en muestras fecales. Material y
mtodos: Se evaluaron las muestras de heces de 109 pobladores de Nagaz, Pasco (Per). Cada muestra fue sometida a 5
tcnicas parasitolgicas: examen directo, tcnica de sedimentacin espontnea en tubo, tcnica de Baermann modificada en copa
por Lumbreras, Cultivo de Dancescu y cultivo en agar. Resultados: De las 109 muestras fecales, 42 (38,5%) presentaron S.
stercoralis en al menos una de las tcnicas utilizadas. Al comparar las tcnicas entre si el cultivo en agar en placa detect la
mayora de los casos: 40, seguido del Cultivo de Dancescu con 39 casos, la tcnica de Baermann, con 25 casos, la tcnica de
sedimentacin espontnea en tubo, con 16 casos, y finalmente, el examen directo, con 2 casos. No hubo diferencia significativa
entre el cultivo en agar en placa y el Cultivo de Dancescu, pero s entre stos y el resto de las tcnicas
estudiadas. Conclusiones: A partir de estos resultados concluimos que tanto el Cultivo de Dancescu como el cultivo en agar en
placa son herramientas bastante sensibles y de bajo costo para mejorar el diagnstico de estrongiloidiasis humana por lo que
deberan ser implementadas en los laboratorios cuando esta infeccin deba descartarse. Estos mtodos podran ser utilizados en
ciertas poblaciones seleccionadas, tales como nios desnutridos, trabajadores en riesgo, alcohlicos y antes de iniciar una terapia
inmunosupresora a fin de evitar el riesgo de una hiperinfeccin. (Rev Med Hered 2005;16:11-18).

PALABRAS CLAVE: Strongyloides stercoralis, tcnica de Baermann modificada en copa por Lumbreras, cultivo de Dancescu, cultivo
en agar en placa.

SUMMARY

Objectives: We compared the efficacy of five methods for the detection of Strongyloides stercoralis in human stool
specimens. Methods and materials: We evaluated fecal samples from 109 individuals from Nagazu, Pasco (Per). Each sample
was directly tested using five parasitological techniques: simple direct smear, spontaneous sedimentation in tube, Baermann
technique modified by Lumbreras, Dancescu culture and agar plate culture technique. Results: From the 109 stool samples, 42
(38.5%) had S. stercoralis for at least one of the methods studied. Comparing techniques, the agar plate culture technique detected
the higher percentage of cases: 40, followed by 39 cases by the Dancescu culture, then 25 cases by the Baermann technique, 16
cases by spontaneous sedimentation in tube and 2 cases by simple direct smear. No significant difference was found between the
agar plate culture technique and the Dancescu culture, but it was found between those and the other techniques
studied. Conclusions: We consider that the Dancescu culture and the agar plate culture provide good sensitivity for the diagnosis
of Strongyloidiasis at a low cost and should be implemented at parasitology laboratories whenever the diagnosis is sought. This
methods could be utilized in special groups of patients such as malnourished children, immunocompromised individuals and patients
who need to be treated with immunosuppressive drugs to prevent the risk of hyperinfection. (Rev Med Hered 2005;16:11-18).

KEY WORDS: Strongyloides stercoralis, Baermann technique modified by Lumbreras, Dancescu culture, agar plate culture
technique.

INTRODUCCIN

La estrongiloidiasis es una helmintiasis producida por el nemtodo Strongyloides stercoralis. Se estima que por lo menos 100
millones de personas estn infectadas con Strongyloides stercoralis en el mundo, especialmente en regiones tropicales y
subtropicales (1,2). La estrongiloidiasis es endmica en Africa, India, Sudeste asitico, Amrica del Sur (particularmente Brasil y

Colombia), Bangladesh y Pakistn (3). En el Per, las regiones de mayor prevalencia se ubican en la selva baja (4,5) y selva central
(6,7) con prevalencias de hasta 96,5% (8,9).

Se han descrito casos autctonos en Lima de estrongiloidiasis de los cuales el 90% eran procedentes de los distritos de Lima, pero
con antecedente de viajes a la selva en el 63% de los casos (10).

La prevalencia de estrongiloidiasis depende del rea geogrfica, de las condiciones ambientales, calidad de la vivienda, status socioeconmico, estndares de higiene en la comunidad, hacinamiento y caractersticas fsicas y qumicas del suelo tales como la
temperatura, la humedad, y la vegetacin (11,12,13). Adems en pases pobres la nutricin deficiente puede ocasionar dao en la
mucosa intestinal, afectando la inmunidad humoral y celular, creando condiciones favorables para el parsito y exacerbndose las
deficiencias proteicas, calricas y vitamnicas (14).

Strongyloides stercoralis es un nemtodo especfico del hombre. Presenta varios estados: larva rabditoide o rabditiforme, larva
filariforme, adultos de vida libre, en cuya fase se identifican machos y hembras y la hembra adulta (15). La hembra partenogentica
de S. stercoralis pone muy pocos huevos al da, aproximadamente 50 (16), los que maduran a larvas rabditoides que salen con las
heces del paciente y constituyen la forma diagnstica.

En los pacientes sometidos a terapia con corticosteroides o que presentan inmunosupresin por alguna patologa puede presentarse
el cuadro de autoinfestacin interna o hiperinfeccin por Strongyloides stercoralis (17,18,19,20), que puede conducir a la
estrongiloidiasis diseminada, muchas veces

con desenlace fatal. Asimismo, la autoinfestacin permite que el paciente mantenga un curso asintomtico de estrongiloidiasis,
permaneciendo as por dcadas (21).

La infeccin de ms larga data documentada hasta hoy ha sido de 65 aos (22).El diagnstico definitivo de la estrongiloidiasis se
hace con la visualizacin directa de las larvas rabditoides. Esto tiene muchas dificultades porque depende del nmero de larvas
presentes y de la sensibilidad de los mtodos diagnsticos. Existen diversos mtodos coprolgicos para evaluar esta infeccin. El
examen directo de frotis fecal es un mtodo poco sensible para detectar estrongiloidiasis (23). La tcnica de Baermann modificada
en copa por Lumbreras fue introducida en 1955 (24) y ha demostrado su eficacia en el diagnstico de S. stercoralis (25), logrando
determinar tasas de prevalencia en la selva peruana que varan entre 8 a 96,5% (4,8,26). Este mtodo aprovecha tanto el
termotropismo como el hidrotropismo positivo de las larvas para concentrarlas biolgicamente. El Cultivo de Dancescu, tambin
conocido como de carbn vegetal, descrito en 1967, muestra una alta sensibilidad para el diagnstico de estrongiloidiasis (27). La
tcnica de sedimentacin espontnea en tubo (TSET), descrita por Tello en 1988 (28) tiene como fundamento la sedimentacin
espontnea en solucin salina fisiolgica tanto de protozoarios como de helmintos.

El cultivo en agar en placa data de 1990 (29). Consiste en colocar 2 gramos de heces en el centro de una placa petri conteniendo
agar nutritivo, dejndola reposar sellada a temperatura de ambiente por 48 horas (30). Si la muestra presenta larvas
de Strongyloides stercoralis stas se van a desplazar sobre la superficie del agar, diseminando las bacterias que van arrastrando en
su cuerpo, de manera que estos trazos aparecern marcados por las colonias de bacterias. Si las placas se dejan en incubacin ms
de 6 das, tambin se podrn diagnosticar las larvas de Uncinarias y encontrar adultos de vida libre (31).

MATERIALES Y MTODOS

El presente estudio es de tipo descriptivo comparativo transversal y se llev a cabo en la Comunidad Nativa de Nagaz, provincia de
Oxapampa, Departamento de Pasco, en los meses de julio a setiembre de 2003.

La Comunidad Nativa de Nagaz se encuentra en el Departamento de Pasco (Per), aproximadamente a 1480 m.s.n.m. Esta
comunidad fue elegida para el estudio, en virtud de que la selva central es reconocida como una poblacin endmica para S.
stercoralis (6,7). Se incluyeron las muestras fecales de 109 personas, entre 1 a 75 aos, que acudieron voluntariamente al
despistaje parasitolgico.

Se calcul el tamao muestral con ayuda del Software Epi info versin 6.4, 1996 (CDC Atlanta, USA). Se consider que la
posibilidad de infeccin por S. stercoralis en la poblacin fuera de 6l,7%. Con una de 92% a 95% y un poder -1 de 90% se
determin un tamao muestral de 109 pacientes.

Criterios de inclusin: El criterio de inclusin fue el haber residido en la zona de estudio por un mnimo de un mes, ya que el
periodo calculado entre el ingreso del parsito por la piel y la produccin de las primeros huevos es de 28 das (15), tiempo despus
del cual es posible obtener las larvas rabditoides en las heces del paciente.

Criterios de exclusin: Se excluy a todo paciente que hubiese recibido tratamiento antiparasitario con accin efectiva contra
estrongiloidiasis (Tiabendazol o Ivermectina) un mes previo al estudio.

Los datos de 200 personas fueron consignados en una ficha de encuesta epidemiolgica. A cada individuo se le entreg un envase
plstico nuevo y limpio, de boca ancha, con tapa rosca y de 250 cc de capacidad, con el fin de que colocara sus heces en ste. Se
puso especial nfasis en que la muestra debera ser del mismo da, que no se hubiese obtenido con purgantes o supositorios y que
sta perteneciera a la misma persona (ya que posteriormente recibira el tratamiento antiparasitario gratuito respectivo), con el fin
de no producir sesgos en la recoleccin de la muestra.

Cada envase fue debidamente rotulado anotndose el nombre, la edad del sujeto y la fecha y la hora de entrega del mismo. Los
envases conteniendo las muestras fecales fueron sellados cuidadosamente con cinta adhesiva e inmediatamente depositados dentro
de cajas de telgopor con la finalidad de mantener un rango de temperatura semejante a la temperatura ambiental y evitar as la
muerte de las larvas durante su transporte previo al examen. Se determin que la recoleccin de las muestras deba realizarse en
un lapso de tiempo no mayor de 2 horas, luego del cual se recogieron 143 muestras (n=143 hombres y mujeres entre 1 a 75 aos).

Se estim recolectar un 30 por ciento ms de muestras sobre el tamao muestral calculado, por la probabilidad de tener que excluir
aquellas que no cumpliesen las condiciones para ser analizadas. Todas las muestras fueron trasladadas inmediatamente al
Laboratorio de Parasitologa del Instituto de Medicina Tropical Alexander von Humboldt para su procesamiento. El procesamiento se
inici despus de 10 horas de recogidas las muestras y el tiempo que tom procesar todas las muestras fue de 2 a 3 horas. De
acuerdo al tamao muestral calculado para el estudio, se proces un nmero final de muestras de 109 (n=52 varones entre 4 a 75
aos de edad y n=57 mujeres entre 1 a 69 aos de edad). Las muestras descartadas fueron 34 (n=34 hombres y mujeres entre 5 a
60 aos de edad) debido a que eran insuficientes para realizar las cinco tcnicas (n=28), a que tenan mezclas con orina (n=3) y a
que correspondan a fichas con datos no verificables o incompletos (n=3).

Debido a que las larvas rabditoides (L1) evolucionan a filariformes (L3) en un lapso de 12 a 15 horas (32) y con el fin de evitar el
riesgo de contagio al manipular las heces, se procur que el procesamiento de todas las muestras culminase dentro de este periodo
de tiempo. Si a pesar de esto las larvas rabditoides hubieran evolucionado a filariformes no se hubiese afectado el diagnstico de
estrongiloidiasis pero s se hubiese confundido el diagnstico del estado clnico de la parasitosis.

Se proces cada muestra fecal por los mtodos: Examen directo con solucin salina fisiolgica al 0,85% y lugol, utilizando 2 mg de
heces para cada emulsin (34), tcnica de sedimentacin espontnea en tubo, utilizando de 2 a 5 gr de heces para su preparacin
(28), Tcnica de Baermann modificada en copa por Lumbreras, utilizando de 5 a 10 gr de heces para su elaboracin(9), Cultivo de
Dancescu o en carbn, utilizando de 5 a 10 gr de heces (27), cultivo en placa de agar, utilizando 2 gr de heces(30).

Las lecturas de las placas de cultivo, tanto de Dancescu como de agar, se llevaron a cabo dentro de los primeros 6 das luego de
haberse procesado stas, con el fin de no permitir el desarrollo de larvas de Uncinarias y evitar as posibles falsos positivos (31,33).

Los resultados obtenidos se expresaron en nmeros y porcentajes para la elaboracin de las tablas. Para determinar si hubo
diferencia significativa entre la eficacia de las tcnicas, se determin la razn de eficacia (dividiendo el nmero de casos positivos
por cada una de las tcnicas entre el nmero total de casos de estrongiloidiasis detectados) y luego dichas razones fueron
enfrentadas por parejas en una matriz de comparaciones. Aplicamos la prueba "z" para diferencia de dos proporciones.

Se determin la sensibilidad para cada una de las tcnicas. Para el anlisis estadstico se emple el paquete estadstico SPSS
versin 10 y el programa Win Episcope versin 2 para Windows.

RESULTADOS

Se obtuvieron 109 muestras fecales. Estas correspondieron a 52 (48%) de varones y 57 (52%) de mujeres. La poblacin de estudio
comprendi sujetos entre 1 a 75 aos (18,82 15,78 aos). De las 109 muestras fecales analizadas, 42 presentaron S.
stercoralis por al menos una de las tcnicas efectuadas (Tabla N1).

El cultivo en agar en placa permiti detectar el mayor nmero de casos de estrongiloidiasis (n=40), seguido del Cultivo de Dancescu
(n=39), la tcnica de Baermann modificada en copa por Lumbreras (n=25), la Tcnica de Sedimentacin Espontnea en Tubo
(n=16) y finalmente el examen directo (n=2) (Tabla N2).

Todas las larvas recuperadas fueron identificadas como larvas rabditoides (L1) de S. stercoralis, no obtenindose larvas filariformes
(L3) ni adultos de esa especie. La prueba "z" no demostr diferencia significativa entre el cultivo en agar en placa y el Cultivo de
Dancescu, pero s entre ellas respecto a la tcnica de Baermann, la tcnica de sedimentacin espontnea en tubo y el examen
directo (Tabla N3).

La sensibilidad de cada una las tcnicas, cuando se compararon stas con los casos positivos y negativos detectados por los cinco
mtodos fueron los siguientes: cultivo en agar en placa 95,24%, Cultivo de Dancescu 92,86%, tcnica de Baermann 59,52%,
tcnica de sedimentacin espontnea en tubo 38,09% y examen directo 4,76%.

De los 42 casos positivos por cada mtodo para detectar la presencia de Strongyloides stercoralis, se evidencia que slo 1 caso fue
positivo a travs de las cinco tcnicas utilizadas; 2 casos fueron positivos slo por el cultivo en agar en placa; 1 caso slo por el
Cultivo de Dancescu y 1 caso slo por la tcnica de Baermann. Tanto la tcnica de sedimentacin espontnea en tubo como el
examen directo no demostraron en forma aislada ningn caso de estrongiloidiasis.

DISCUSIN

En la prctica rutinaria de la mayora de laboratorios de parasitologa a nivel nacional, se utiliza el examen directo en solucin salina
y lugol con una sola muestra fecal cuando se desea realizar un examen parasitolgico de forma rpida. Slo algunos laboratorios
cuentan con facilidades para realizar alguna tcnica de concentracin (como la tcnica de Baermann o la tcnica de sedimentacin)
o los cultivos (como el cultivo en agar en placa o el Cultivo de Dancescu) para obtener un diagnstico ms confiable. Los ndices de
sensibilidad de 4,76% y 38,09% obtenidos en el presente estudio para el examen directo y la tcnica de sedimentacin espontnea
en tubo confirman la baja eficiencia que demuestran estos mtodos en el diagnstico de estos nemtodos. La baja efectividad de
estas tcnicas puede atribuirse a diversos factores, tales como la distribucin no uniforme y la intermitencia en la puesta de las
larvas.

Dichos hallazgos coinciden con los determinados por Maco y cols (31) quienes encontraron valores de sensibilidad muy bajos para
ambas tcnicas (3% y 18,2% respectivamente). Mltiples estudios haban demostrado que la tcnica de Baermann modificada en

copa por Lumbreras era una prueba de alta sensibilidad (80%, 90%) para el diagnstico de estrongiloidiasis (35,36). Sin embargo,
en el presente estudio se pudo evidenciar la baja sensibilidad de la tcnica de Baermann (59,52%) frente a los cultivos. El Cultivo
de Dancescu mostr en este estudio una sensibilidad similar al Cultivo en agar (92,86% y 95,24% respectivamente), lo cual fue
tambin demostrado por Terashima y cols (81,7%) (27).

Presumiblemente, la superioridad de este resultado se debe al hecho de haber utilizado papel filtro en el Cultivo de Dancescu. El
papel filtro, siendo una base inerte en medio acuoso, simula las condiciones adecuadas para el desarrollo del ciclo de vida libre
del Strongyloides stercoralis. El empleo del papel filtro en el Cultivo de Dancescu y un adecuado sellado de las placas contribuy
adems a mantener la humedad de la muestra y evitar la contaminacin en el laboratorio por el desarrollo de larvas filariformes
infectantes dentro de las placas.

Se encontr una sensibilidad para el Cultivo en agar de 95,24%, resultado que concuerda con el estudio de Uparanukraw y cols (37)
quienes encontraron una sensibilidad de 78 a 100%. Asimismo, Koga y colaboradores (30) compararon el cultivo en agar en placa,
la tcnica de sedimentacin en tubo usando papel filtro y el examen directo, demostrando claramente que el cultivo en agar era 1.7
veces ms eficiente que la tcnica de sedimentacin con papel filtro (96,8% y 58,1% de sensibilidad respectivamente).

Otros estudios encuentran ndices de sensibilidad menores para el cultivo en agar como son los obtenidos por Sukhavat y cols (38)
as como por Inga (39) (83,6% y 87,9% respectivamente).

A pesar de que el cultivo en agar en placa detect 40/42 casos de estrongiloidiasis y el Cultivo de Dancescu 39/42 casos, la prueba
"z" demostr que ambas tcnicas fueron igualmente efectivas, al no haber diferencia significativa entre ellas; pero s entre ellas y la
tcnica de Baermann, la tcnica de sedimentacin espontnea y el examen directo.

Cabe resaltar que la baja sensibilidad obtenida por la tcnica de Baermann podra deberse a que la cantidad recomendada para su
ejecucin es de 10 g, lo cual en nuestro caso, por la dificultad de obtener una mayor cantidad de heces en las muestras, tuvo que
realizarse con 4 a 5 g. Esto indudablemente representa un inconveniente al realizar la tcnica de Baermann, no siendo as para el
cultivo en agar, en el que puede detectarse estrongiloidiasis an existiendo poca cantidad de heces (2 g) y pocas larvas en ellas.

Con respecto a la evaluacin de costos, se determin que los costos de la placa de agar como los de Dancescu no son tan elevados
(S/.1,28 y S/.1,21 Soles cada una, respectivamente) (Tabla N 4); por lo cual, si se considera la superioridad de stas con respecto
a las dems tcnicas, sera altamente beneficioso para los pacientes. Las ventajas del Cultivo de Dancescu frente al cultivo en agar
son: la poca dificultad tcnica y la sencillez en su ejecucin y en su procesamiento, su bajo costo y su alto rendimiento; en tanto
que el cultivo en agar es un poco ms complejo, ya que requiere de mayor tiempo en su elaboracin y de una mejor
implementacin e infraestructura del laboratorio (agitador automtico, autoclave, refrigeradora) lo que puede comprometer su
aplicacin rutinaria.

Podemos considerar que tanto el cultivo en agar como el Cultivo de Dancescu deberan emplearse como mtodos de rutina para el
diagnstico de S. stercoralis, en grupos de alto riesgo (con Diabetes Mellitus, linfoma, leucemia, desnutricin, alcoholismo,
tratamiento con corticosteroides y cualquier condicin inmunosupresora), por la posibilidad de desarrollar una enfermedad
diseminada o hiperinfeccin con un pronstico fatal.

Validacin del examen en fresco, coloraciones de

May
Grunwald-Giemsa y Gram y medios de cultivo para

el
diagnostico de Trichomonas vaginalis
SIXTO RAUL COSTAMAGNA* y MARIA PRADO FIGUEROA*

VALIDATIONTESTOFCONVENTIONALWETMOUNT
EXAMINATION,MAYGRUNWALDGIEMSAANDGRAMSTAINING,
ANDCULTUREMEDIUMTESTSFORTHEDIAGNOSISOF
Trichomonasvaginalis
The goal of the present study was to determine the validity of the following five
methods used for the diagnosis of Trichomonas vaginalis in vaginal secretions at
the clinical laboratory: Gram staining; Conventional wet mount examination; May
Grunwald-Giemsa staining; Culture in a modified Diamond (Menarini) medium;
Culture in an OXOID CM 161 medium. We used 89 vaginal-secretion samples
extracted with sterile cotton swabs of female subjects between the ages of 25 and
55 at the laboratory of the Hospital de Evacuacin 181 of the city of Baha Blanca,
Province of Buenos Aires, Argentina. The samples were stained with Gram and May
Grunwald-Giemsa; observed by conventional wet mount examination; and cultured
in Diamond (Menarini) and OXOID CM 161 media and incubated for 5 days at
37C in an anaerobic condition. Results showed that, for a prevalence of disease
(Trichomonosis) of 29.21%, the Diamond (Menarini) culture medium and the
immediate conventional wet mount examination at our diagnostic lab have similar
sensitivities, predictive negative values, and global values: 80.7%, 92.64%, and
94.38%, respectively. When the four tests were conducted in parallel, the resulting
sensitivity was 99.76% with a predictive negative value of 99.90%. As for the
OXOID CM 161 medium, even though the global value of the test was similar, its
sensitivity was 76.92%, slightly lower than the results from the conventional wet
mount examination, but without a significant statistical difference. The Gram
staining showed a diagnostic sensitivity of 19.23%. We conclude that the Diamond
(Menarini) and the OXOID CM 161 culture media do not improve the etiological
diagnosis ofTrichomonas as compared to the conventional wet mount examination
and May Grunwald-Giemsa staining tests. While we do not recommend using Gram
staining for the study of T. vaginalis, we consider that, if the flagellate were to be
identified by this method, its finding could be reported without further testing.
Key words: Trichomonas vaginalis; Trichomonosis; Culture
of Trichomonas; Diagnostic.
* Ctedra de Parasitologa Clnica. Departamento de Biologa, Bioqumica y Farmacia. Universidad Nacional del
Sur. San Juan 670. 8000- Bahia Blanca. Argentina. E-mail: rcostama@criba.edu.ar

INTRODUCCION
La trichomonosis, parasitosis del tracto genitourinario producida por el
protozoo Tricho-monas vaginalis1 es una de las enfermedades de transmisin
sexual (ETS) ms difundidas en todo el mundo. No obstante an no existe un
mtodo para el diagnstico de laboratorio til para todas las circunstancias, de bajo
costo, rpido, sencillo y con valores de predictibilidad, tanto negativos como
positivos, aceptables.
Los medios de cultivos para T. vaginalis, por lo menos en nuestro medio, no han
tenido el xito que autores europeos y norteamericanos han obtenido. Los mayores
inconvenientes que restringen su uso son el costo de los mismos y el hecho de que
todos necesitan el agregado de suero de caballo, antibiticos y antimicticos, en el

momento de su uso, deben ser incubados en anaerobiosis, o bien no se encuentran

disponibles en el mercado.2-8
Para evaluar la utilidad de los mismos en nuestra ciudad, es que procedimos, en
este ensayo, a validar las siguientes metodologas comnmente utilizadas para el
diagnstico de T. vaginalis en flujo vaginal, por el laboratorio de Anlisis Clnicos: 1)
Coloracin de Gram, 2) Examen en fresco entre porta y cubreobjetos 3) Coloracin
de May Grunwald-Giemsa. 4) Cultivo en medio de Diamond modificado (Menarini)
y 5) Cultivo en medio OXOID CM-161.
MATERIAL Y METODOS
Se procesaron 89 muestras de flujo vaginal de mujeres que concurrieron al Servicio
de Laboratorio del Hospital de Evacuacin 181 de la ciudad de Baha Blanca
(Argentina), cuyas edades oscilaban entre los 25 y 55 aos, y sintomatologa
compatible con vaginitis.
Las muestras fueron extradas para ser procesadas simultneamente por los cinco
mtodos sealados, para lo cual se extrajo flujo vaginal de fondo de saco,
evaluando que fuese suficiente y significativo, con hisopos estriles.
Primeramente se efectuaron extendidos para coloraciones de Gram y de May
Grunwald-Giemsa (dos extendidos para cada uno). Posteriormente se extrajo nueva
muestra para efectuar el examen en fresco entre porta y cubreobjetos (de 24 x 24
mm) y el hisopo fue colocado en un tubo que contena 0,5 cc de solucin fisiolgica
de cloruro de sodio, el cual se mantuvo en un bao termostatizado a 37C hasta el
momento de su observacin: menos de cinco minutos para todos los casos. Se
observ con 400 aumentos por espacio de cinco minutos cada preparado, y se
inform la presencia o ausencia del protozoo.9
Finalmente se procedi a la extraccin de muestras para los cultivos: un hisopo con
flujo vaginal fue colocado en cada uno de los tubos que contenan 10 ml del medio
de cultivo correspondiente.
Los medios de cultivos utilizados fueron:
a. Medio de cultivo Diamond2 (Menarini). Cod Tric-20. Ref 1038. BarcelonaEspaa
b. Medio OXOID CM 161, Hampshire, England. Este medio fue suplementado con
suero de caballo y antibitico-antimictico, de acuerdo a instructivos del fabricante.
Ambos medios fueron incubados durante cinco das 37C, en anaerobiosis.
Para el anlisis estadstico de los resultados, en estas experiencias utilizamos el
siguiente software: Epidat, versin 2.0. OPS-OMS, 1997, para anlisis de datos
tabulados para pruebas diagnsticas simples y para combinacin de pruebas.
Definimos, para esta experiencia: los siguientes terminos:
- Sensibilidad: la proporcin de individuos con la enfermedad que tienen una
prueba positiva.
- Especificidad: la proporcin de sanos que tienen una prueba negativa.
- Valor Predictivo del Resultado Positivo: la probabilidad de que un individuo con
resultado positivo en la prueba, tenga la enfermedad.

- Valor Predictivo del Resultado Negativo: la probabilidad de que un individuo con

resultado negativo en la prueba, no tenga la enfermedad.
- Valor Global de la Prueba: la probabilidad de que un individuo sea clasificado
correctamente por la prueba.
RESULTADOS
Los resultados, para un nivel de confianza del 95%, fueron los que se muestran en
la Tabla 1.
Si las cinco pruebas se efectuaran en serie, es decir que a los sujetos con
resultado negativo en una prueba ya se los considera negativo y por lo tanto no
se lo somete a una segunda prueba, mientras que a los positivos s se les realiza
otra prueba (o la misma), para confirmar el caso, los resultados seran los
mostrados en la Tabla 2.
Si las cinco pruebas se efectuaran en paralelo, es decir que a los sujetos con
resultado positivo en una prueba ya se consideran como positivos y por lo tanto
no se someten a una segunda prueba, mientras que a los negativos se les
efecta otra prueba diagnstica, hasta llegar a la quinta en este caso, buscando de
esta manera aumentar la sensibilidad del diagnstico del laboratorio, los resultados
seran los mostrados en la Tabla 3.
La prevalencia de la enfermedad en el grupo estudiado, fue del 29,21%,
artificialmente aumentada ya que las pacientes fueron seleccionadas en funcin de
la sintomatologa que manifestaban presentar al momento de la realizacin del
examen de flujo, en el laboratorio.
Tabla 1. Sensibilidad, especificidad, VPRP, VPRN y valor global de la
prueba (VGP) obtenida para el diagnstico de Trichomonas vaginales
mediante cinco pruebas

Tabla 2. Resultados de las Sensibilidades y

VPRN de las pruebas diagnsticas para
Trichomonas vaginalis cuando son efectuadas
en serie

Sensibilidad
(en serie)

36,65% (Intervalos de confianza:

19,49-57,57)

Tabla 3. Resultados de Sensibilidad y

VPRN
de las pruebas dignsticas
paraTrichomonas
vaginalis cuando son efectuadas en
paralelo
99,76% (intervalos de
Sensibilidad
confianza:
(en paralelo)
83,61-99,74)

VPRN
(en serie)

79,27% (Intervalos de confianza:

68,42-87,24)

99,90% (intervalos de
VPRN
confianza:
(en paralelo)
92,68-99,89)

DISCUSION
Del anlisis de los resultados obtenidos en esta experiencia, podemos concluir que
el medio de cultivo Diamond (Menarini), para una prevalencia de enfermedad
(Trichomonosis) del 29,21%, en nuestro laboratorio de diagnstico, presenta una
sensibilidad, valor predictivo del resultado negativo y valor global de la prueba,
similar al examen en fresco; por esta razn es que hasta tanto se disponga de
mejores medios de cultivo comerciales, no recomendamos la utilizacin de los
mismos en la prctica diaria en nuestros laboratorios de diagnstico microbiolgico,
en contraposicin con lo expresado por otros investigadores quienes aseguraban
que si no cultivan los flujos vaginales, perdan la mitad de los diagnsticos positivos
de T. vaginalis.3
Con respecto al medio de Oxoid, si bien el valor global de la prueba es similar,
presenta una sensibilidad del 76,92%, ligeramente inferior al examen en fresco,
aunque con diferencia estadstica no significativa.
Con referencia a la coloracin de Gram, no consideramos una coloracin
recomendable para investigar T. vaginalis como nica prueba. Simplemente fue
incluida en esta validacin ya que es una coloracin que rutinariamente efectan los
bacterilogos en el estudio del flujo vaginal, y que en caso de visualizarse el
flagelado en la misma, puede informarse su hallazgo y no se necesitaran efectuar
otros exmenes.
Si bien nuestros hallazgos son coincidentes con los de otro artculo,10 es pertinente
sealar que en 351 muestras estudiadas en otro estudio, se detect T. vaginalis por
examen en fresco en el 6% de los casos mientras que si se utilizaba cultivos
acelulares anaerbicos la deteccin llegaba al 13%.11
Un autor12 otorga una eficiencia relativa del 100% al cultivo del flujo vaginal en
medio de Diamond incubado durante siete das a 37C, sin embargo, el mismo
autor manifiesta una sensibilidad del 76,9% al medio de Kupferberg13 igual a la
hallada por nosotros en esta experiencia, pese a que las muestras son diferentes. El
mismo autor,6 si bien reconoce el valor del medio de Diamond, seala que es
solamente en condiciones de anaerobiosis y con una incubacin de siete das, lo
que dificulta an ms su utilizacin en los laboratorios comunes, ya que no todos
disponen de jarras para anaerobiosis, llegndose, luego de un anlisis de
costo/beneficio, a ser descartado su uso en forma rutinaria por la mayora de los
Laboratorios de Anlisis Clnicos.
Por lo expuesto creemos que el medio de Diamond (Menarini) podra ser
recomendable para estudios de cepas axenizadas, para mantenimiento de las
mismas en laboratorio para investigacin, pero no est disponible en nuestro
medio, y su preparacin en el laboratorio insume demasiado tiempo.
Es pertinente recordar aqu, que en otros estudios14 los autores demostraron que la
coloracin fluorescente con naranja de acridina15 tena una sensibilidad muy
superior al examen en fresco, por lo que, teniendo en cuenta que los medios de
cultivo aqu ensayados no mejoran significativamente la sensibilidad respecto del
examen en fresco, los resultados aqu presentados confirman que el algoritmo para

el diagnstico de T. vaginalis por el laboratorio de Anlisis Clnicos es el que

incluye: examen en fresco, coloracin de May Grunwald-Giemsa y coloracin
fluorescente con naranja de acridina, efectuados "en paralelo".14
RESUMEN
En el presente estudio se efectu la validacin de las siguientes metodologas
utilizadas para el diagnstico deTrichomonas vaginalis en flujo vaginal, en el
laboratorio de Anlisis Clnicos: 1) Coloracin de Gram, 2) Examen en fresco entre
porta y cubreobjetos 3) Coloracin de May Grunwald-Giemsa. 4) Cultivo en medio
de Diamond modificado (Menarini) y 5) Cultivo en medio OXOID CM-161.
Se utilizaron 89 muestras de flujo vaginal extrado con hisopo estril de fondo de
saco, de mujeres que concurrieron al Servicio de Laboratorio del Hospital de
Evacuacin 181, de la ciudad de Baha Blanca (Provincia de Buenos Aires) Argentina
y cuyas edades oscilaban entre 25 y 55 aos.
Las muestras se colorearon con Gram, May Grunwald-Giemsa, se efectuaron
observaciones en fresco entre porta y cubreobjetos, y fueron sembradas en los
medios de Diamond (Menarini) y OXOID CM-161 e incubadas durante cinco das
a 37C, en anaerobiosis.
Los resultados obtenidos mostraron que el medio de cultivo Diamond (Menarini) y
el examen en fresco inmediato, para una prevalencia de enfermedad
(Trichomonosis) del 29,21%, en nuestro laboratorio de diagnstico, presentan una
sensibilidad, valor predictivo del resultado negativo y valor global de la prueba
similares: 80,7%; 92,64% y 94,38% respectivamente. Si las cuatro pruebas son
efectuadas en paralelo, la sensibilidad que se obtiene es del 99,76%, con un valor
predictivo del resultado negativo del 99,90%.
Para el medio OXOID, si bien el valor global de la prueba es similar, presenta una
sensibilidad del 76,92%, ligeramente inferior al examen en fresco, aunque con
diferencia estadstica no significativa.
La coloracin de Gram present una sensibilidad diagnstica de 19,23%.
Concluimos que los medios de cultivo Diamond (Menarini) y OXOID CM 161 no
mejoran el diagnstico etiolgico de trichomonosis con relacin al examen en fresco
y coloracin de May Grunwald-Giemsa. La coloracin de Gram no la recomendamos
para investigar T. vaginalis, no obstante, de visualizarse el flagelado por la misma,
puede informarse su hallazgo y no se necesitaran efectuar otros exmenes

Conclusion

Como se puede ver en los anexos los diferentes medios de cultivos son de
alguna manera muy tiles para determinacin de los parasitos y por ende
ayuda al diagnostico podemos dar fe de que contamos que tcnicas principales
como baermann , los de carbono y los agar .