Instituto Tecnolgico

de Villahermosa
Analisis Instrumental

Alumnos:
-Ramrez Garca Luis Fernando
-Ruiz Hernndez Edgar Ivn

Profra: M.C. Zenaida Guerra Qu

Ing. Qumica
PRACTICA

DETERMINACIN ESPECTROFOTOMTRICA
DE HIERRO EN AGUA

Villahermosa, Tabasco
06 de Marzo de 2015

Determinacin Espectrofotomtrica de Hierro

Objetivo:
Determinar la cantidad de hierro en una muestra de agua, mediante el mtodo
espectrofotomtrico.

Fundamento Terico:
La espectrofotometra es el mtodo de anlisis ptico ms usado en las
investigaciones biolgicas. El espectrofotmetro es un instrumento que permite
comparar la radiacin absorbida o transmitida por una solucin que contiene una
cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una cantidad conocida de la
misma sustancia.
Todas las sustancias pueden absorber energa radiante, aun el vidrio que parece
ser completamente transparente absorbe longitud de ondas que pertenecen al
espectro visible; el agua absorbe fuertemente en la regin del infrarrojo.
La absorcin de las radiaciones ultravioleta, visibles e infrarrojas depende de la
estructura de las molculas, y es caracterstica para cada sustancia qumica.
Cuando la luz atraviesa una sustancia, parte de la energa es absorbida; la
energa radiante no puede producir ningn efecto sin ser absorbida.
El color de las sustancias se debe a que stas absorben ciertas longitudes de
onda de la luz blanca que incide sobre ellas y solo dejan pasar a nuestros ojos
aquellas longitudes de onda no absorbida.

Naturaleza De La Radiacin Electromagntica

La Radiacin Electromagntica es una forma de Energa radiante que se propaga
en forma de ondas. En este fenmeno ondulatorio se define:
a. Longitud de onda (l): es la distancia entre dos mximos de un ciclo completo
del movimiento ondulatorio. Se expresa, segn el S.I. en nanmetros (nm) y
sus equivalencias son: 1nm = 1mm =10 A0 = 10-9 m.
b. Frecuencia (n): es el nmero de ciclos por segundo. Es inversa a la longitud
de onda. Su frmula es: n = c/l, y se mide en ciclos por segundo o hertzios.
c. Fotones: la luz est formada por fotones, y estos son paquetes discontinuos
de E. La E de un fotn depende de la frecuencia y de la longitud de onda,
segn la siguiente expresin: E = h x n = h x c/n (h = Cte. de Planck =
6,62.10-27erg/seg.). La Energa Electromagntica se mide el Ergios. La

relacin entre la longitud de onda y la Energa es inversa, por lo tanto a

menor longitud de onda mayor Energa y viceversa.
d. Espectro Electromagntico: cubre un amplio intervalo de E radiante, desde
los rayos g de longitud de onda corta hasta las ondas de radio, de longitud
de onda larga. Se divide en varias regiones, las ms interesantes para
nosotros son:
Regin Ultravioleta: l = 10-380 nm
Regin Visible: l = 380-780 nm
Regin Infrarroja: l = 780-30.000 nm
En la Regin Visible, la luz se descompone en colores. La luz blanca
contiene todo el espectro de longitudes de onda. Si interacciona con una
molcula puede ser dispersada o absorbida.

Fenmenos De Interaccin Entre Luz Y Materia

a) Fenmeno de Absorcin
Cuando una partcula que se encuentra en estado de reposo o estado fundamental
interacciona con un haz de luz, absorbe E y se transforma en una partcula en
estado excitado. La molcula absorbe la E de la onda y aumenta su energa, y ese
aumento de energa es igual a la E de la Radiacin Electromagntica absorbida (E
= h.n). La partcula en estado excitado tiende a volver de forma espontnea a su
estado de reposo desprendiendo la E absorbida en forma de calor.
Espectro de Absorcin. Cada especie absorbente, que recibe el nombre de
cromgeno, tiene un determinado espectro de absorcin. El espectro de absorcin
es un grfico donde se representa en ordenadas la Absorbancia y en abscisas la
longitud de onda. La medida de la cantidad de luz absorbida por una solucin es el
fundamento de la espectrofotometra de absorcin.
Por eso es importante trabajar a la longitud de onda a la que la sustancia estudiada
absorbe la mayor cantidad de luz (a mayor cantidad de luz, mayor cantidad de
sustancia).
b) Fenmeno de Emisin
Algunos compuestos, tras ser excitados por la luz, vuelven al estado fundamental
produciendo la emisin de energa radiante. En este caso, lo que se mide es la
energa emitida y, en este fenmeno se basa la fotometra de llama o la
fluorescencia.

Leyes de Absorcin
Cuando un haz de luz pasa a travs de un medio, se registra una cierta prdida de
intensidad, debido a la absorcin por parte de la sustancia.
Se llama TRANSMITANCIA (T) a la relacin entre la luz incidente y la luz
transmitida:
T =I s / I o ; %T =( I s /I o )x 100.
Se puede perder intensidad por la interaccin con la cubeta o el solvente. Para
evitar este error se hace una primera medida con una solucin de referencia o
BLANCO, que contiene todos los posibles compuestos que intervienen en la lectura
menos el que vamos a medir. Todas las medidas que se hagan con posterioridad
sern referidas a esta medida inicial y se harn en la misma cubeta que se utiliz
en la medida del blanco.
La Transmitancia se usa poco, se emplea ms la Absorbancia (A) porque la
relacin entre A y la concentracin de una solucin es directamente proporcional y
la de la T es inversamente proporcional.
La relacin entre la absorbancia y la transmitancia es la siguiente:
Si el %T = 100
Si el %T = 0

A = 2-log T = 2-log 100 = 0

A = 2-log 0 =

En los aparatos que se usan actualmente se presentan absorbancias, pero el

aparato lo que mide realmente es %T que luego transforma a absorbancia.

Espectrofotmetro
Se distinguen dos tipos de aparatos:
Fotmetro o Colormetro: se caracterizan porque utilizan filtros que solo permiten el
paso de una determinada longitud de onda.
Espectrofotmetros: utilizan cromadores. Con ellos se obtiene un haz de luz
monocromtico cuya longitud de onda se vara a voluntad. Los monocromadores
pueden ser de dos tipos: prismas y redes de difraccin.

Uso del espectrofotmetro. (Spectronic 20)

Paso 1: Encender equipo y esperar 15 minutos para el calentamiento de la
lmpara.

Paso 2: ajustar al 0% la Temperatura (el compartimento de la muestra debe estar

vaco y cerrar la tapa).
Paso 3: seleccionamos la longitud de onda adecuada (ejemplo: 450nm) depende
del tipo de anlisis.
Paso 4: colocar el blanco o el estndar en el compartimento de la muestra
mediante las celdas y ajustar al 100% la Temperatura y verificar que las celdas
esten completamente limpias (utilizar clinex).
Paso 5: Quite la celda del compartimento y vacie el contenido de agua.
Paso 6: enjuague dos veces la celda con pequeos volmenes de la solucin,
hacer la medida y llenarla con la solucin respectiva, igualmente verifique que su
celda este limpia.
Paso 7: lea la absorbancia de su muestra y repita el proceso en cada muestra.
-Se realizan todas las mediciones para todas las muestras que tengas con el
espectrofotmetro y se traza la curva con los valores de mxima absorbancia.
-Teniendo los valores, los tomamos y realizamos la grfica de absorbancia y de la
determinacin de hierro en ppm con las ecuaciones determinadas.
Materiales y Reactivos:
Matraces aforados de 100 ml
Tubos de ensayo
HCl 1 N
Solucin de acetato sdico saturado
Acido ascrbico al 1%
Solucin 1-10 fenantrolina al 0,1%
Solucin patrn de Hierro 100 mg/ml
Solucin hija patrn de hierro de 0,01 g/L
Procedimiento Experimental:

N de Tubos
Patrn de Hierro (0,01 g/L)
Agua destilada (ml)
Solucin de HCl, 1 N
Solucin Saturada de Acetato
Solucin de cido ascrbico
al 1%
Solucin de 1-10 fenantrolina

T
0
10
1
0.5
0.3

I
0.1
9.9
1
0.5
0.3

II
0,2
9,8
1
0,5
0,3

III
0,4
9,6
1
0.5
0.3

IV
0,6
9,4
1
0.5
0.3

V
0,8
9,2
1
0,5
0,3

VI
1,0
9,0
1
0,5
0,3

Contenido de mg de Fe/Litro

0.1

0,2

0,4

0,6

0,8

1,0

a) Preparamos la serie de tubos de ensayos numerados, de acuerdo a la tabla

indicada anteriormente, aadiendo sucesivamente cada reactivo y agitando
despus de cada adicin.
b) Dejamos reposar a temperatura ambiente por 30 minutos y lemos la
absorbancia a una longitud de onda de 510 nm.

Determinacin del hierro.

Primer punto: homogeneizar muy bien la muestra, vertir una determinada cantidad
del objeto de estudio en un sistema de filtracion, para ver como en un momento
determinado la muestra se libera de estas partculas y quedamos con la muestra
original (hierro soluble).

Pesaje del Sulfato Ferroso Amoniacal.

Utilizar un medio filtrante, prender la balanza y ponerlo all, la balanza dar un
valor y ese valor se anula.
Tomar el reactivo y aplicar en la balanza 0.07 gramos de este, vertir del medio
filtrante al Becker y agregar una pequea cantidad de agua (20ml), y con la ayuda
de un agitador de vidrio mezclamos hasta que todo el reactivo que hemos
adicionado se disuelva totalmente en el medio acuoso y una vez terminado
agregar 2,5 ml de cido sulfrico concentrado, despus vertimos la solucin al
baln aforado y queda nuestro estndar.
Se prepara el blanco para utilizar los dems matraces, tendremos dos valores, la
concentracin de hierro obtenida por la tecnica medida por el estudiante y la
concentracin de hierro obtenida por el docente.
En la muestra se va a medir el objeto de estudio y luego agregar los reactivos
formadores de color y aforar hasta 100 ml.
Despus tendremos ya las muestras de 100 ml con el respectivo blanco(agua
ionizada y cido sulfrico).
Primer reactivo que se agrega es el acetato de sodio en volumen de 8ml.
Segundo reactivo cloruro de hidroxilamina en un volumen de 1ml.
Tercer reactivo es 1-10 fenantrolina (Reactivo adicional).

Una vez que se agregan los reactivos recuerden que antes hay que aforar y una
vez que se termina el aforo incluyen el anlisis de la muestra sinttica y el anlisis
de la muestra real.
Esperar 10 minutos para que la reaccin sea suficiente (formacin de color) o
(Reacciones complejometricas).
Construir la curva espectral: es la curva que nos permitir visualizar cual es el
valor de longitud de onda de mxima absorbancia.
Elegir uno de los estndar para hacer una serie de lecturas y realizar un barrido de
longitud de onda 400nm hasta 540nm con rangos de 20nm cada medicin.
El objeto de esta determinacin es que finalmente vamos a construir una curva de
absorbancia y la longitud de onda, donde nos saldra una campana de Gauss,
encontrando la absorbancia, y a raiz de esto vamos a determinar la curva
espectral midiendo la absorbancia de cada uno de los estandares de trabajo pero
teniendo en cuenta que la longitud de onda ya no cambia y medir de igual manera
la precisin para esto seguimos eligiendo 1,2 ppm de hierro y vamos a medir la
absorbancia en diferentes replicas para revisar el nmero de datos totales. (revisar
y medir) al igual que la Exactitud.

Preparacin de la curva de calibracin

El intervalo de la curva de calibracin es de 1 a 4 mg L-1 de Fe. Loa estndares se
preparan colocando la alcuota de la solucin patrn de hierro en un vaso de
precipitado, se agrega 0,5 mL de hidroxilamina y se ajusta el pH a 4, con la ayuda
de HCl o NaOH 1 M (emplee un pHmetro para realizar la medida del pH).
Posteriormente, se agrega 2 mL de la solucin buffer de pH 4 y se trasvasa
cuantitativamente a un baln de 25 mL, donde se agrega 1 mL de la disolucin de
la o-fenantrolina, antes de aforar con agua destilada.
Para la lectura de la seal, se determina primero la longitud de onda de trabajo
haciendo un barrido de absorbancia en funcin de la longitud de onda, colocando
el blanco apropiado (agua en este caso) en la cubeta de referencia.