UNIVERSIDAD DE COLIMA

FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS

QUIMICO FARMACUTICO BIOLGO
Microbiologa.
Mdulo 3
Estructura bacteriana II

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El mdulo anterior se discuti la importancia de la pared celular y sus

diferencias entre las bacterias Gram (+) y las Gram (-). Para complementar
su estudio y empezar a ver su importancia desde el punto de vista clnico,
realice una investigacin detallada con respecto a los antibiticos inhibidores
de la pared celular. Dicho trabajo deber ser estructurado como si se tratase
de un artculo cientfico de revisin: a dos columnas, tamao de letra Times
New Roman 10, Ttulos en tamao 12 y negritas. La estructura del trabajo
deber ser: titulo, autores, resumen, investigacin y
bibliografa. La
bibliografa deber ser en formato APA. Es importante que considere dentro
de su bsqueda la siguiente informacin:
Pared celular.
Sntesis de la pared celular.
Antibiticos inhibidores de la pared celular (AIPC).
Mecanismos de accin de los AIPC.
Clasificacin de los AIPC.
Resistencia a los AIPC
Usos teraputicos y esquemas de aplicacin de los AIPC

El trabajo se entregar para el da del examen parcial, cuya fecha tentativa es

el da 14 de Septiembre del 2015.

Las clulas bacterianas, como se discuti en mdulos pasados, son

estructuras celulares sencillas con respecto a las clulas eucariotas. Sin
embargo, es importante saber con certeza cuales son dichas diferencias.
Mediante un cuadro comparativo, investigue cuales son las caractersticas
que diferencias una clula eucariotica de una procariotica. Considere que se
le pueden hacer preguntas con respecto a lo que se coloque en el cuadro
comparativo.

El material gentico de las bacterias es sencillo y su estudio actualmente

tiene un enfoque biotecnolgico por su fcil manipulacin y la factibilidad de
poder incrustar genes promotores para la produccin de protenas
recombinantes, por decir algo. Sin embargo, para la parte clnica el estudio
del genoma estriba ms que en su estructura, en su replicacin, ya que
representan otro blanco de los antibiticos usados comnmente. Para
comprender en su momento a cabalidad la funcin y los mecanismos de
algunos tipos de antibiticos, se le pide haga una indagacin con respecto a:

La estructura del cromosoma bacteriano

El cromosoma bacteriano consta de una cadena de ADN. El tamao de esta
molcula vara segn la especie de 0.1X10 9 a 8x109. El ADN est conformado
por dos cadenas con bases complementarias (A-T y G-C) unidas por puentes de
hidrgeno. En promedio de 4000 kpb. El cromosoma bacteriano se encuentra
situado en el citoplasma y se condensa para formar el nucleoide. El cromosoma
bacteriano tiene forma circular y son haploides (de cromosoma nico) y tiene
DNA extracromosmicos.(2)
Plsmidos: Son elementos extracromosmicos, molculas pequeas de
ADN que estn libres en el citoplasma. Los plsmidos llevan informacin
gentica y se replican dando lugar a nuevos plsmidos que se
incorporan a las clulas hijas en la divisin celular. Algunos de ellos
pueden integrarse en el cromosoma. Los plsmidos pueden tener
funciones diversas como el factor F cuando est en estado citoplsmico.
Episomas: Un episoma es un factor gentico bacteriano que puede
encontrarse como elemento aislado en el citoplasma o como parte
integrante del cromosoma. El factor F es un episoma porque lo
encontramos tanto como plsmido (en el citosol) como integrado en el
cromosoma.
Factor F: La conjugacin bacteriana es un proceso mediante el que unas clulas
transfieren ADN a otra clula con la que entran en contacto.
La capacidad para transferir el ADN depende de la presencia del factor F que
es un pequeo elemento de ADN circular que funciona como un mini
cromosoma de aproximadamente 100 genes. Las clulas que portan el factor F
se conocen como F+ y las que no son F-. Las propiedades del factor F son las
siguientes:
1.- El factor F puede replicarse por lo que se mantiene en una poblacin celular
que se est dividiendo.
2.- Las clulas F+ producen pili; que son tbulos proteicos que les permiten
ponerse en contacto y adherirse a otras clulas.
3.- Las clulas F+ pueden transmitir el factor F a clulas F- pero no a clulas
F+. Siempre permanece una copia en la clula donante.
4.- Ocasionalmente el factor F se integra en el cromosoma de la clula
hospedadora.(3)
La compactacin del DNA se mantiene gracias al balance de fuerzas,
incluyendo el super enrollamiento y compactacin por protenas. Existen
tambin protenas involucradas en el mantenimiento de la estructura del DNA,
a stas protenas de unin a DNA se les ha llamado protenas tipo histonas
debido a que comparten con las histonas su bajo peso molecular, alto nmero
de copias, carga electrosttica y la capacidad de unirse al DNA. Sin embargo no

queda claro si existe homologa entre ellas, ya que a nivel de secuencia y

estructura la similitud no es muy fuerte. (4)

Microfibras, Fimbrias, pelos sexuales

FIMBRIAS O PELOS

Son apndices filamentosos rectos y rgidos, ms cortos y ms finos (3-10 nm de

dimetro) que los flagelos, y que aparecen en muchas bacterias (sobre todo Gramnegativas). La mayora estn compuestos por un solo tipo de protena (la pilina), de unos
17-25 kDa, cuyas subunidades se disponen en una matriz helicoidal que deja un pequeo
hueco central.

insertados a nivel de membrana citoplasmtica.

Presentes en casi todas la bacterias Gram y algunas Gram +

Se forman por ensamblaje helicoidal de subunidades de pilina dejando un pequeo hueco

central. Crecen desde la base

Nmero variable: desde 1 a varios cientos o miles por clula.

Estn implantados a nivel de membrana citoplsmica.

Disposicin: alrededor de todo el permetro celular, y a veces, de insercin polar.

Aislamiento: por simple agitacin mecnica de las clulas, seguido de ultracentrifugacin.

Composicin: ensamblaje de subunidades de pilina, protena globular muy hidrfoba.

Ensamblaje: insercin de subunidades de pilina en la base del pelo en crecimiento, a

partir de pre-pilina, que se procesa por escisin del correspondiente pptido-lder a su
paso por la membrana citoplsmica.

FIMBRIAS ADHESIVAS

Son pelos de 4 a 7 nm de dimetro (segn especies), repartidas por toda la

superficie y que funcionan como adhesinas, es decir como estructuras para la adhesin
a sustratos vivos o inertes. Condicionan varias propiedades biolgicas, derivadas de sus
propiedades adhesivas:

microcolonias y velos (los velos son pelculas formadas por acmulos de bacterias
en medios estticos -en reposo-).
adhesin a superficies inertes
adhesin superficies vivas. En el caso de bacterias patgenas, esta capacidad
tiene que ver con su virulencia, invasividad del tejido. Ejemplos de funcin
como adhesinas:

La funcin de adhesina no reside en la pilina que constituye la inmensa mayora de la

fimbria, sino en una protena especial de la punta del
pelo. La mayora de estas protenas de la punta pertenecen
a la clase de las llamadas lectinas, es decir, protenas o
glucoprotenas capaces de unirse con gran afinidad a
cadenas laterales de polisacridos presentes en la
membrana citoplsmica de las clulas del hospedador a las
que se adhieren.
Aspectos genticos:

Los genes codificadores de las protenas de los pelos adhesivos son de localizacin
cromosmica.

En muchas bacterias patgenas se da un fenmeno de variacin de fase: se trata de

cambios rpidos y reversibles por los que clulas piliadas (Fim+) pueden convertirse en no
piliadas (Fim--), y viceversa. El significado adaptativo es que los individuos Fim+ son los
ms capaces de iniciar la colonizacin del animal hospedador, pero son ms sensibles a
la fagocitosis, mientras que una vez que han colonizado el epitelio, el cambio a
Fim-- permite que los individuos resistan mejor la fagocitosis.

Pero adems, existe otro interesante mecanismo adaptativo: las clulas Fim + de algunas
especies experimentan fenmenos de variacin antignica, es decir, por una serie de
mecanismos genticos, cambian la especificidad antignica de su pilina, lo que supone

una estrategia de evitacin contra el sistema inmune del hospedador (un caso ms de esa
carrera de armamentos evolutiva que se libra entre microorganismos y organismos
superiores).

PELOS SEXUALES DE BACTERIAS GRAM-NEGATIVAS

Son ms largos y ms gruesos (unos 10 nm de dimetro) que las

fimbrias adhesivas. Aparecen en menor nmero (de 1 a 10 por clula), y
su funcin es la de permitir los contactos iniciales en la conjugacin,
como rgano de reconocimiento entre la bacteria donadora, dotada del
pelo sexual, y la receptora, carente de l. Sus genes son de
localizacin plasmdica.
Hay dos clases principales de pelos sexuales: los de de tipo F y
los de tipo I, cada uno con un tipo de protena distinta (genricamente
conocida como pilina sexual). Son usados como receptores especficos
por parte de algunos fagos.

Superenrollamiento y organizacin del ncleo bacteriano

Se le llama superenrollamiento a al enrollamiento de la doble hebra de ADN (ya
enrollada as misma) que se encuentra regulado por la accin de
topoisomerasas.
La conformacin relajada es la que adopta el ADN en su forma B (10.5 pb por
vuelta) que corresponde a un estado estable de mnima energa.
Las topoisomerasas producen el superenrollamiento mediante el corte
transitorio de una o ambas hebras, introducen un aumento o una disminucin
en el nmero de vueltas de hlice. En ambos casos se produce una tensin
estructural debida a un plegamiento local de las hebras y a una posicin
relativa de los nucletidos diferentes de su geometra energticamente ms
estable. Esa tensin se contrarresta mediante el giro de la cadena de DNA
sobre si misma del mismo modo que las bases puedan disponerse de nuevo del
modo ms prximo a la conformacin del B-DNA.

Si se reduce el nmero de vueltas de hlice, la tensin se libera formando una

sper hlice a la que se le asigna un valor negativo de superenrollamiento.
Si aumenta el nmero de vueltas de hlice, la tensin se libera formando una
sper hlice en sentido opuesto, con un superenrollamiento positivo.(5)
Se han encontrado protenas HU y HI en el cromosoma bacteriano. El dmero
HU que tal vez condensa la estructura del DNA en una estructura similar a una
burbuja y la HI se une al DNA participando tal vez en la condensacin de este.
Los efectos de deleciones en cualquiera de las dos protenas no ejercen efectos
en la viabilidad, debido a la redundancia.
Duplicacin el cromosoma bacteriano
La duplicacin es el proceso mediante el cual se replica el DNA. Es
semiconservadora, es decir, requiere una cadena molde para sintetizar una
cadena hija complementaria.
La duplicacin exige la separacin de las dos cadenas dplex progenitoras y
posteriormente se unen. La estructura helicoidal doble se rompe para formar la
horquilla de replicacin. La duplicacin implica el movimiento de la horquilla de
duplicacin a lo largo del DNA progenitor, de modo que hay un
desenrrollamiento del DNA progenitor y un enrrollamiento del DNA hijo. Las
helicasas separan las cadenas de DNA dplex.(6) La DNA polimerasa avanza a
travs de la horquilla de duplicacin sintetizando la cadena de DNA hija. La
DNA polimerasa tiene tambin actividad 3-exonucleasa; que permite eliminar
dNTPs errneos.(5)
Para iniciar la replicacin se requiere de un cebador, que es una hebra
aportadora de nucletidos que aporte un grupo 3-OH libre. Los sustratos son
dNTP que incorporan un dNMP al DNA. Se requiere de un in metlico divalente
como cofactor para esta reaccin. Finalmente se requiere un molde o plantilla,
que viene dado por la complementariedad de bases.(5)
La replicacin siempre inicia en secuencias especficas del DNA, en las
procariotas este origen de replicacin se denomina Ori-c. Las helicasas se unen
al Ori-c produciendo la separacin de las hebras y las protenas de unin a
hebra sencilla que evitan el reapareamiento de la hebra. Las topoisomerasas
impiden el superenrollamiento de las hebras (este detendra el avance de la
horquilla). La primasa es una polimerasa de RNA dirigida por el DNA que
sintetiza el cebador o primer.(5)
TRANSCRIPCIN Y TRADUCCIN

Durante la transcripcin, las reglas del apareamiento de bases son aplicadas por la ARN
polimerasa para sintetizar un producto complementario a una cadena del ADN usada como
molde, que es el ARN. Una de las clases mas importantes de ARN es el llamado mensajero
(ARNm), que porta la informacin para la sntesis de protenas. La ARN polimerasa
bacteriana, es distinta de la que tienen las clulas eucariotas; de hecho, algunos
antibiticos que tienen como sitio blanco de accin la ARN polimerasa (por ejemplo la
rifampicina) son efectivos
exclusivamente ante clulas procariotas.

La ARN polimerasa reconoce un sitio especfico en el ADN, llamado promotor, al cual se une
iniciando la transcripcin. Un mismo transcripto, ARNm, puede contener la informacin
correspondiente a ms de un gen, por lo tanto se traducir luego en ms de un polipptido.
El conjunto de genes que son transcriptos en un nico ARNm y que por tanto se expresan
en conjunto se denomina opern. Los genes procariotas no poseen intrones como los
eucariotas, es decir que una vez transcripto el ARNm, ste ser traducido directamente en
una secuencia polipeptdica, sin necesidad de realizar ningn procesamiento despus de la
transcripcin.
Otra diferencia importante con la expresin de los genes eucariotas, es que como las
bacterias no tienen un compartimento nuclear definido, los procesos de transcripcin y
traduccin estn acoplados. Es decir que mientras se est sintetizando una molcula de
ARNm, el ARN naciente puede tomar contacto con los ribosomas e iniciar la sntesis proteica
(verfigura 5). sto es una ventaja para la bacteria y constituye una importante causa de su
elevada capacidad para adaptarse a diferentes ambientes, porque le permite responder
rpidamente a
los estmulos sintetizando las protenas necesarias, en el momento adecuado.

La traduccin es un proceso por el cual el ARN ribosmico, el ARN de

transferencia (ARNt) y muchas protenas ribosomales, realizan la lectura
del cdigo gentico. Dicho cdigo est escrito en tripletes de nucletidos o
codones portados por el ARNm; de la escritura de la secuencia
correspondiente de aminocidos, surge el producto polipeptdico. El
ribosoma desempea un rol fundamental, reuniendo al ARNm y a los ARNt
cargados de aminocidos. La estructura y composicin de los ribosomas
procariotas (ARN y protenas), difiere en cierta medida de los ribosomas
eucariotas. Tienen menor masa y por lo tanto, menor coeficiente de
sedimentacin (la subunidad mayor 50 S y la menor 30 S, ambas suman 70
S). Estas diferencias entre los ribosomas procariotas y eucariotas, igual que
otras diferencias en la expresin gnica (polimerasas, topoisomerasas,
protenas, mecanismos regulatorios y factores de elongacin), tienen una

serie de implicancias. Una de stas es la sensibilidad diferencial de

procariotas y eucariotas a toxinas y antibiticos. Por ejemplo los macrlidos,
los aminoglucsidos, el cloramfenicol y otros son antibiticos que actan en
el ribosoma bacteriano o en el proceso de sntesis proteica; en cambio,
algunas toxinas bacterianas como la diftrica, actan selectivamente en la
sntesis proteica eucariota. Existen dos sitios en el ribosoma: el aceptor (sitio
A), donde los ARNt cargados se asocian en primer lugar y el sitio peptdico
(sitio P), donde se sujeta la cadena polipeptdica en crecimiento. En cada
adicin de aminocidos, el ARNm avanza un codn y el nuevo aminocido se
traslada del sitio A al P, incorporndose a la protena en formacin.

Lea el captulo anexo en su correo para su discusin en el saln.

Bibliografa
(2)
http://es.slideshare.net/regina_estrella_14/unidad-iv-geneticabacteriana
(3) http://cienciaybiologia.com/organizacion-material-genetico/
(4) Bacterial Chromosome Organization and Segregation, Esteban Toro
and Lucy Shapiro, Cold Spring Harb Perspect Biol 2010.
(5) Luque Jose, Herraes Angel. (2006) Texto ilustrado de Biologa
Molecular e Ingeniera Gentica, Conceptos, Tcnicas y Aplicaciones en
Ciencias de la Salud. Harcourt.
(6) Lewin Benjamin (2008) Genes IX. Novena edicin. McGrawHill.