RECEPTORES ACOPLADOS

A TIROSINA-QUINASAS
Dra. Mara Marta Bonaventura
Dra. Victoria Lux-Lantos
IBYME-CONICET, Bs As, Argentina

HORMONAS
Las hormonas son mensajeros qumicos que actan localmente o a
distancia para regular la actividad de una clula blanco.
Son liberadas por una clula y provocan una respuesta en la misma
clula o en otra, aun cuando no alcancen la circulacin general
Son producto de glndulas endocrinas en respuesta a cambios en la
homeostasis.
Grupos importantes de agentes hormonales:
- hormonas pep,dicas
- hormonas esteroideas
- hormonas 1roideas

- factores de crecimiento
- citoquinas
- neurotransmisores

Lugar de accin: clula blanco

- Efecto endcrino: clula alejada, llega a travs de circulacin gral.
- Efecto parcrino: clulas vecinas
-Efecto yuxtcrino: clula yuxtapuesta (pegada)
-Efecto autcrino: misma clula

Vaso
sanguneo

Transduccin
de la seal

Unin especfica del ligando (hormona) al

receptor

transduccin de la seal al interior de la

clula

amplificacin de la seal

Activacin enzimtica
modulan la actividad de enzimas intracelulares
preexistentes.
principal mecanismo: fosforilacin y desfosforilacin
Ej: glucgeno sintasa se inactiva por fosforilacin
Efectos en la
clula blanco

Efectos en membrana
regulan el movimiento de molculas (iones,
metabolitos, etc) a travs de la membrana
Ej: insulina aumenta la captacin de glucosa
v

Activacin de la transcripcin gnica

incrementan el n de copias de mRNA especficos
aumenta los niveles de las protenas codificadas por stos
Ej: Prolactina activa la transcripcin del gen de casena
v

RECEPTORES
Las hormonas ejercen sus efectos interactuando con receptores
especficos.
Receptores hormonales
Receptores de superficie
vse

ubican en la membrana celular

vtraducen

una seal extracelular en una

intracelular
vHormonas

proteicas y polipeptdicas

vNeurotransmisores

noradrenalina)

(Ej: Adrenalina y

Receptores intracelulares
vse

ubican dentro de la clula

va c t a n

como reguladores
directos de la expresin gnica
vHormonas

esteroideas

vHormonas

tiroideas

RECEPTORES DE MEMBRANA
Cul es la funcin de los receptores de membrana?
Transmitir la seal que viene del medio externo al interior de la
clula, de manera que la clula pueda responder a dicho estmulo
Las hormonas proteicas no pueden atravesar membrana
plasmtica. Se unen a dominios extracelulares del receptor y la
seal se transmite a los dominios citoplasmticos, desencadenando
la respuesta celular.

DOMINIO DE
UNIN A LIGANDO

MEDIO EXTRACELULAR

DOMINIOS
TRANSMEMBRANA
DOMINIO EFECTOR
REGULADO POR LIGANDO

CITOPLASMA

Podemos clasificar a las hormonas segn el tipo de receptor a que

se unen
Estos receptores se diferencian en la manera de trasmitir la seal
al interior de la clula

TIPOS DE RECEPTORES
A) Receptores acoplados a sistema de segundos mensajeros
Receptores acoplados a Protenas G
Receptores con actividad Guanilato Ciclasa

TIPOS DE RECEPTORES
B) Receptores relacionados con actividad de quinasa
Con actividad Tirosina quinasa intrnseca
Con actividad Serina/Treonina quinasa intrnseca
Que se unen a Tirosina quinasas

TIPOS DE RECEPTORES
C) Receptores acoplados a canales inicos.
Canales de cationes (sodio, potasio y calcio)
Canales de aniones (cloruro)

B) HORMONAS Y RECEPTORES QUINASA/FOSFATASA

Qu funcin cumple una enzima con actividad de quinasa?
Fosforila residuos aminoacdicos especficos.
Tyr-quinasa: fosforila residuos tirosina
Ser/Thr-quinasa: fosforila residuos serina y/o treonina
Y una enzima con actividad de fosfatasa?
Desfosforila residuos aminoacdicos especficos.
Tyr-fosfatasa: desfosforila residuos tirosina
Ser/Thr fosfatasa: desfosforila residuos serina y/o treonina

B) HORMONAS Y RECEPTORES QUINASA/FOSFATASA

Motivos: secuencia de aminocidos del sustrato, cercanos al residuo
(aa) a fosforilar/desfosforilar.
De esta forma las enzimas reconocen que aa fosforilan/desfosforilan.
Dada su alta especificidad, el nivel de fosforilacin de un aa estar
dado por un balance entre la actividad de su quinasa y de su
fosfatasa.
Tyr

Tyr

Tyr-quinasa

Tyr-fosfatasa

Tyr-P

Tyr-P

B) HORMONAS Y RECEPTORES CON ACTIVIDAD DE

QUINASA/FOSFATASA
1. Con actividad Tirosina quinasa

I) EGF
II) Insulina / IGF
Interleuquinas

2. Que se unen a Tirosina quinasas

GH
Prl

3. Con actividad Serina/Treonina quinasa

TGF-

4. Con actividad de tirosina fosfatasa

CD45

B.1) RECEPTORES CON ACTIVIDAD TIROSINQUINASA

Son protenas transmembrana con:
Grupo NH2 externo
Un solo dominio transmembrana
Varios motivos estructurales extracelulares (regiones ricas en
cistena y/o dominios relacionados a Igs)
Un dominio cataltico citoplasmtico ms conservado. Posee
2 lbulos:
- uno une Mg2+/ATP
- uno forma el loop cataltico: con actividad de quinasa
Ejemplos: Receptor de EGF, PDGF, FGF, NGF, Insulina, IGF-1.
Todos estos son factores de crecimiento

Estos receptores poseen dimerizacin hormono-dependiente que es

crucial para la transduccin de seales.
Algunos ligandos son dmeros (PDGF) y otros son monmeros
(EGF).

Mecanismo de accin:
La unin del ligando al receptor (R) induce la dimerizacin del R.
Como consecuencia ocurre auto- o trans- fosforilacin del dominio
citoplasmtico y reclutamiento de sustratos con afinidad por el R
tirosinfosforilado.

Reclutamiento de sustratos:
Los sustratos de estos R son protenas con un dominio llamado
SH2 que reconoce sitios con fosfotirosina.
a) Algunas de estas protenas son fosforiladas por el R y pueden
servir de efectores en la transduccin de seales.
Ej: PI-3-Kinasa, protena Syp, fosfolipasa C (PLC), protena
activadora de GTPasa.
b) Otras actan como adaptadores moleculares: se unen al R
fosforilado por el dominio SH2 y a otras protenas celulares
mediante dominios SH3 (reconoce sitios ricos en Prolina)
Ej: Grb2, Nck, Crk.
En este caso reclutan otras protenas que sern las efectoras (Ej:
Ras).

a) Protenas efectoras

b) Protenas adaptadoras:

SH2
SH3

b) Protenas adaptadoras:

Caso I: RECEPTOR DE EGF

EGF: Epidermal Growth Factor
Participa en la proliferacin, diferenciacin y supervivencia celular.
Su principal efecto biolgico consiste en la modulacin de la
proliferacin celular.
Sus clulas blanco o diana son las clulas epiteliales y fibroblastos.
Ej: cicatrizacin de heridas, regeneracin y proteccin de la mucosa
gstrica.
Aplicaciones mdicas: cicatrizacin de heridas, artrosis,
regeneracin sea, implantes dentarios, rejuvenecimiento facial.
Se obtiene a partir de muestras de sangre del propio paciente.

Se trata de un receptor con un dominio transmembrana que une

EGF como monmero.
1. La unin de EGF causa un cambio en la conformacin que
induce dimerizacin del R
2. Esto activa la tirosinquinasa intrnseca y cada R se
transfosforila en varias tirosinas.
3. A estos residuos fosforilados se unen protenas con dominios
SH2.
4. Dependiendo de los aa adyacentes a las fosfo-Tyr, la afinidad
de las protenas con dominio SH2 ser distinta.

Dependiendo de qu protena (dominio SH2) se una al receptor

fosforilado, la seal se propagar por mecanismos distintos:

Conduce una molcula efectora hacia la membrana donde

estar cerca de su molcula blanco.

Dispara un cambio conformacional que puede activar a las

protenas con dominio SH2

Puede posicionar a las protenas con dominio SH2 para que

puedan ser fosforiladas y activadas.

Segn qu ocurra, se activarn distintas vas o cascadas de

sealizacin

La unin de EGF al receptor activa:

1.
2.
3.

La va de las MAP Kinasas

PLC-
Fosfoinositol-3-kinasa (PI-3-Kinasa)

Estas vas conducen a la fosforilacin y activacin de diversos

factores de transcripcin que modifican la expresin gnica
Tambin pueden modular la actividad de diversas protenas

I.1- VA DE LAS MAP KINASAS

1. Cuando el R de EGF es fosforilado, se une Grb2 (Growth
Factor Receptor Binding Protein 2).
2. Grb2 recluta a la protena SOS cerca de la membrana y prxima
a Ras (que est anclada en la membrana).
3. SOS convierte Ras-GDP en Ras-GTP.
4. Ras-GTP activa Raf Kinasa, que activa a MEK, quien activa
MAPK
5. MAPK fosforila al efector final que regula el crecimiento o
metabolismo celular (ELK, SAP, Jun)

Raf quinasa

MEK

Existe un camino alternativo en el que interviene una protena llamada

Shc.

MEK

Existen caminos paralelos de MAPKinasas con distintas

MAPKs y MEKs. La especificidad para estos caminos
proviene de la unin inicial de las protenas con dominio SH2.

I.2- VIA DE LA PLC-

1. Cuando el R se fosforila, se une PLC- (protena con
dominio SH2)
2. Se ubica cerca de la membrana, adyacente a los
fosfatidilinositoles (insertos en la membrana)
3. El R activa por fosforilacin a PLC-.
4. PLC- produce la hidrlisis del fosfatidilinositol en IP3 y
DAG.
5. La sealizacin posterior sigue el mismo camino que la de
los R asociados a protena Gq.

+
PKC
Liberacin de Ca2+

I.3- VIA DE PI-3-KINASA

1. El R se fosforila por unin del ligando.
2. El R fosforila a sustratos de tirosina-quinasa
3. Estos sustratos se unen a la subunidad regulatoria de PI-3K
4. Se produce un cambio conformacional en la subunidad
cataltica y se activa la PI-3K
5. PI-3K fosforila PIP2 (anclados en membrana) a PIP3 (estos
PIP son distintos a los de la va de PLC)
6. PIP3 recluta a Akt y PDK1 y se ubican en membrana
7. PDK1 fosforila y activa Akt
8. Akt que es el principal efector de la cascada

Genera fosfoinositoles diferentes

de IP3.

Caso II: RECEPTOR DE INSULINA Y DE IGF

Caso II: RECEPTOR DE INSULINA Y DE IGF

Insulina:
Funciones metablicas: es la hormona anablica por excelencia
Promueve la incorporacin de glucosa en msculo y tej. adiposo
Promueve la sntesis de glucgeno y lpidos
Promueve la sntesis proteica
Funciones mitognicas: promueve la sntesis de DNA
Estimula el crecimiento y la diferenciacin celular
Estimula el crecimiento fetal
IGF: Insulin like Growth Factor
Casi todos los tejidos son sensibles a IGF-I.
Es mitognico y promueve el crecimiento y diferenciacin celular
Estimula el crecimiento de hueso, msculo y cartlago
Es neurotrfico: estimula e desarrollo y crecimiento de neuronas

El receptor de insulina es un heterotetrmero:

2 subunidades y
2 subunidades ,
unidas por puentes disulfuro

La unin de insulina a su R produce:

1.

Transfosforilacin del R en varios residuos Tyr

2.

A estos residuos fosforilados se unen protenas

adaptadoras con dominios SH2 (clsicamente IRS1-4)

3.

El R fosforila a IRS, el cual recluta otras protenas

adaptadoras o efectoras

4. Protenas con dominio SH2 (como Grb2 y PI-3K) se unen

a IRS fosforilado.
5.

Las protenas adaptadoras reclutan las protenas efectoras

que activan diversas vas de sealizacin.

La unin de insulina al receptor activa:

1.

La va de las MAP Kinasas: en general relacionada con las

funciones proliferativas de insulina

2.

La va de la PI-3-Kinasa: relacionadas con las funciones

metablicas de insulina.

Especificidad: depende de que protenas se unen a IRS

Akt

MAPK

REGULACIN POR FOSFORILACIN MULTISITIO

La autofosforilacin en determinados residuos puede tener efectos
de regulacin positiva o negativa.
Regulacin positiva:
-La autofosforilacin de tyr en el dominio tirosinquinasa del IR
incrementa la actividad y estabiliza la kinasa. La actividad
cataltica se mantiene aun despus de la disociacin de la hormona.
- En el R de EGF la autofosforilacin en un sitio dentro del
extremo COOH terminal incrementa la actividad kinasa.

Estos R pueden ser fosforilados en Serina y Treonina por

kinasas extrnsecas al R
Disminuye la autofosforilacin en Tyr y la actividad
tirosinquinasa del R.
Regulacin negativa:
- PKC fosforila el R de EGF en serina y disminuye la actividad
tirosinkinasa
- PKC y/o JNK fosforila en serina al R de insulina. Esto
disminuye la actividad tirosinquinasa y la accin de la Insulina.
- La prolongada estimulacin con Insulina tambin incrementa
la fosforilacin en serina del R

Otro tipo de regulacin se da por cambios conformacionales.

El extremo COOH terminal de la subunidad del R de Insulina
puede regular la sealizacin del R por plegamiento, bloqueando
la actividad kinasa.
Esta regulacin ofrecera un mecanismo para disminuir la
actividad kinasa basal y podra hacer posible un mayor aumento
en la sealizacin con la activacin por la unin de la hormona.
Otros posibles moduladores:
Protenas y pptidos que pueden modificar la respuesta a hormonas
por activacin o inhibicin de la actividad tirosinquinasa del R.

B) HORMONAS Y RECEPTORES CON ACTIVIDAD DE

QUINASA/FOSFATASA
1. Con actividad Tirosina quinasa

EGF
Insulina / IGF
Interleuquinas

2. Que se unen a Tirosina quinasas

I) GH
II) Prl

3. Con actividad Serina/Treonina quinasa

TGF-

4. Con actividad de tirosina fosfatasa

CD45

B.2) RECEPTORES SIN ACTIVIDAD TIROSINA QUINASA

INTRNSECA
Se asocian a protenas que son tirosinkinasas: familia Src y Janus
Kinasa (JAK):
1. JAK (JAK 1-3 y TyK 2) posee dominios SH2 y SH3.
2. El receptor posee motivos BOX-1 y BOX-2.
3. Ambas protenas se asocian a travs de la interaccin entre stos
4. El ligando se une al R e induce la dimerizacin del mismo
5. La dimerizacin del R hace que las JAK se aproximen
permitiendo la fosforilacin cruzada y activacin.
6. Adems, JAK fosforilan al receptor

Las vas de sealizacin que se activan son:

Ras-Raf-MAPK
protenas Stat

VIA DE STAT
El camino contina con la activacin de protenas Stat (Signal
Transduction and Activation of Transcription):

Dos monmeros de Stat se unen a residuos Tyr fosforilados

del R

Las Stat son fosforiladas por JAK

Las dos Stat se separan del R y dimerizan a travs de sus

dominos SH2

El dmero trasloca al ncleo donde se une al DNA para

regular la transcripcin de genes

Ejemplos: R de Interleuquinas, interferones, eritropoyetina, GH y

Prolactina.

La especificidad de la seal estara dada por varios factores:

Momento de la activacin
Cuales protenas Stat se encuentran activadas
Estado de fosforilacin de otras protenas
Unin de otros reguladores de la transcripcin

Ejemplos: GH y Prolactina
GH: Growth Hormone (hormona de crecimiento)
Estimula la diferenciacin del cartlago
Estimula la mitosis y actividad de osteoblastos, promoviendo el
desarrollo del hueso
Aumenta la captacin de aa y sntesis de protenas en msculo
Estimula el crecimiento y actividad de varios rganos y tejidos
Prolactina:
Estimula el crecimiento y desarrollo de la glndula mamaria
Influye en el comportamiento reproductivo
Mantiene el cuerpo lteo (en roedores)
En machos es necesaria para la sntesis de Testosterona

Caso I: RECEPTOR DE GH
1. Un molcula de GH cataliza la dimerizacin del R (dos cadenas
de R unen una de GH)
2. El R es fosforilado por JAK 2
3. JAK fosforila Stat 1 y Stat 3, o
4. La va de las MAPK tambin es activada por interaccin de Shc
con el R fosforilado o con JAK 2

Dos cadenas del R unen una molcula de GH.

Altas concentraciones de GH inhiben la dimerizacin y la
subsecuente respuesta biolgica.

Caso II: RECEPTOR DE Prolactina

Resumiendo....
Transduccin de seales de receptores con actividad
tirosinkinasa o que se acoplan a tirosinkinasas:

B) HORMONAS Y RECEPTORES CON ACTIVIDAD DE

QUINASA/FOSFATASA
1. Con actividad Tirosina quinasa

EGF
Insulina / IGF
Interleuquinas

2. Que se unen a Tirosina quinasas

GH
Prl

3. Con actividad Serina/Treonina quinasa

TGF-

4. Con actividad de tirosina fosfatasa

CD45

B.3) RECEPTORES CON ACTIVIDAD SERINA Y

TREONINA KINASA
Son protenas con un dominio transmembrana y un dominio serina/
treonina kinasa en la parte citoslica. Ejemplos: R de TGF-,
Activina, Inhibina.
TGF-: tiene muchos efectos, a veces opuestos, en funcin del
tejido afectado y del dao producido. Por ej:
Clulas epiteliales: inhibe el crecimiento
Fibroblastos: disminuye la degradacin de la matriz celular
(promueve fibrosis e inflamacin crnica)
RECEPTOR DE TGF-
Existen 3 tipos de R:
- Tipo I y tipo II: estn involucrados en la sealizacin.
- Tipo III: juega un rol en el almacenamiento o clearance de TGF-.

 El R-II es el que une al ligando

El R-I es el que transmite la seal.
Es indispensable la co-expresin de ambos para lograr la respuesta
biolgica

El ligando se une al R-II

R-II recluta al R-I y lo fosforila en Serina y Treonina

R-I se activa y fosforila a Smad (1,2,3,5,8)

Smad dimeriza con Smad4 y trasloca al ncleo

Se asocia a protenas de unin a DNA

Se activa o inhibe la transcripcin de genes regulados por TGF

B) HORMONAS Y RECEPTORES CON ACTIVIDAD DE

QUINASA/FOSFATASA
1. Con actividad Tirosina quinasa

EGF
Insulina / IGF
Interleuquinas

2. Que se unen a Tirosina quinasas

GH
Prl

3. Con actividad Serina/Treonina quinasa

TGF-

4. Con actividad de tirosina fosfatasa

CD45

B.4) RECEPTORES CON ACTIVIDAD TIROSINA

FOSFATASA
Son protenas con un dominio transmembrana, con dominios
extracelulares similares a NCAM (fibronectin or neural celladhesion molecule) y un dominio citoplasmtico con actividad
tirosina fosfatasa.
Ejemplo: CD45. En un receptor glicoproteico que se encuentra
en linfocitos T y B y regula la sealizacin del receptor de
antgenos (recepcin antignica)
Regula varios procesos celulares como crecimiento,
diferenciacin y mitosis y est involucrado en la transformacin
oncognica

ALGUNAS PATOLOGAS ASOCIADAS

RECEPTORES CON ACTIVIDAD TIROSINA KINASA
Receptor de Insulina
Existen al menos 3 sndromes de resistencia extrema a la insulina
resultado de defectos genticos en el R o en la sealizacin del
mismo:
1. Sndrome tipo A: caracterizado por resistencia extrema a la
insulina e hiperandrogenismo.
Los desrdenes que lo producen son heterogneos: mltiples
defectos en la biosntesis del R o disminucin de la actividad
tirosina kinasa.
Todos debidos a diferentes mutaciones en el gen del R

2. Leprechaunismo: Tambin es heterogneo en origen.

Caracterizado por retardo en el crecimiento intrauterino e
hipoglucemia de ayuno que puede ser fatal en el primer ao
de vida.
Poseen respuesta disminuda a IGF-1, EGF y otros factores
de crecimiento, lo que sugiere defectos en caminos comunes
de transduccin de seales.
3. Diabetes Mellitus tipo II: Resistencia a la insulina en
individuos obesos y no obesos, de causas multifactoriales.
Poseen disminucin del nmero de R, disminucin de la
actividad tirosinkinasa del R y defectos en la sealizacin
intracelular

Mutaciones en el receptor de insulina asociados con sindromes

clnicos de insulino resistencia

RECEPTORES CON ACTIVIDAD SERINA/TREONINA

KINASA
Receptor de TGF- tipo II
El R tipo II es el que une ligando
Se han descripto mutaciones inactivantes en lneas celulares
obtenidas de cncer de colon humano.
Receptor de activina tipo II
La disrupcin de ambas copias del gen en ratones produce
infertilidad en el animal adulto
Se debe a los bajos niveles de FSH en circulacin

RECEPTORES QUE SE ASOCIAN A TIROSINA

KINASAS
Receptor de GH
Existen varias mutaciones inactivantes, en general ocurren en el
dominio extracelular
Producen disminucin de la expresin del R, disminucin de la
unin de GH o falla de los R para dimerizarse
Se observan en el enanismo tipo Laron, caracterizados por baja
estatura, resistencia a GH, niveles sricos elevados de GH y bajos
de IGF-1.

MUCHAS GRACIAS

RECREO POR FAVOR !!!