Prof.

: Wendel Silveira
Aula 05: Crescimento e Regulao do Metabolismo
Microbiano

Aula 05: Crescimento e Regulao do Metabolismo

Microbiano Parte I

Ao final da aula, voc dever ser capaz de:

Definir o crescimento microbiano;

Descrever o processo de diviso celular por fisso binria;
Identificar os parmetros cinticos do crescimento microbiano;
Descrever as fases do crescimento microbiano;
Definir o crescimento diuxico;

Explicar, usando o modelo do operon lac, a regulao

da sntese de enzimas induzidas;
Descrever os mecanismos de regulao da atividade de
enzimas;
Descrever os fatores ambientais que afetam o crescimento de
micro-organismos.

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Microbiano Parte I

Crescimento microbiano

resultado do aumento da densidade

populacional, isto nmero ou massa
de clulas.

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Microbiano Parte I

O crescimento depende de uma srie de reaes metablicas

ULTRAESTRUTURAS

Montagem

MACROMOLCULAS

Biossntese
Polimerizao

ENERGIA:
ATP

Anabolismo

Nutriente

Catabolismo

UNIDADES
MONOMRICAS

Hidrlise
e
oxidao

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Microbiano Parte I

Diviso celular por fisso binria

Tempo de
gerao

Fonte: Madigan et al., 2004 Microbiologia de Brock 10 edio

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Microbiano Parte I

Perodo de gerao

Durante o perodo de gerao o

crescimento dito balanceado.

Os constituintes celulares aumentam

proporcionalmente.

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Microbiano Parte I

Cintica de crescimento
Progresso geomtrica de quociente 2 do crescimento populacional bacteriano
tg

N0

tg
tg

20 N0

tg

2N0
21 N0

tg

4N0
22 N0

8N0 . . .
23 N0 . . . 2n N0

tg

Equao geral do crescimento exponencial: N= 2n N0

Onde: N = Nmero total de clulas na populao
n = Nmero de geraes
N0 = Nmero inicial de clulas na populao

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Microbiano Parte I

Cintica de crescimento
Resolvendo a equao:
N = 2n N0
log N = n log 2 + log N0
n= T
tg

log N = T log 2 + log N0

tg

log N = log 2 T + log N0

tg

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Microbiano Parte I

Cintica de crescimento
log N = log2 T + log N0
tg

(Expresso do crescimento na fase log)

Relao linear entre log N X T

log N

(h- 1)

Tempo (h)

Velocidade especfica de
crescimento () = coeficiente
angular da reta tangente= log2/tg

Aula 05: Crescimento e Regulao do Metabolismo

Microbiano Parte I

Fases do crescimento microbiano

Curva de crescimento
(Fase lag, fase exponencial, fase estacionria e fase de morte)
log N
Fase
estacionria
Fase
lag

Fase
de
morte

Fase
exponencial
(log)

Tempo (h)

Aula 05: Crescimento e Regulao do Metabolismo

Microbiano Parte I

Quais fatores limitam o crescimento

bacteriano em uma cultura em batelada?
Consumo de nutrientes;
Limitao de oxignio;
Acmulo de metablitos.

Aula 05: Crescimento e Regulao do Metabolismo

Microbiano Parte I

Crescimento de E. coli em glicose e lactose

lactoseediuxico
Crescimento
diuxico
log de N

Concentrao de
acar
Lactose
Glicose

Atividade
de Betagalactosidase

Tempo

Represso
catablica

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Microbiano Parte II

Regulao da sntese enzimas

Lactose

Induz a transcrio dos genes do operon da

lactose, que codificam enzimas de assimilao
de lactose.

Aula 05: Crescimento e Regulao do Metabolismo

Microbiano Parte II

Regulao da sntese de enzimas

E. coli no consome lactose na presena de glicose.

No ocorre induo do operon lac na presena
de glicose.

Como ocorre a represso por glicose?

Aula 05: Crescimento e Regulao do Metabolismo

Microbiano Parte II

Enzimas Induzidas e Enzimas Constitutivas

Enzimas Induzidas

Enzimas constitutivas

Enzimas de fonte
alternativa a glicose,
como por exemplo as
de assimilao de
lactose.

Enzimas das vias

metablicas centrais,
como por exemplo,
de catabolismo de
glicose.

Aula 05: Crescimento e Regulao do Metabolismo

Microbiano Parte II

Regulao da atividade de enzimas

Modificaes no covalentes de enzimas alostricas
Modificaes covalentes de enzimas
Propriedades cinticas de enzimas

Aula 05: Crescimento e Regulao do Metabolismo

Microbiano Parte II

Regulao da atividade de enzimas alostricas

Stio
ativo

Substrato
Stio
Efetor alostrico
alostrico
positivo

Stio
ativo
Substrato

Enzima alostrica

Enzima alostrica
Stio
alostrico

Efetor
alostrico
negativo

Aula 05: Crescimento e Regulao do Metabolismo

Microbiano Parte II

Regulao da atividade de enzimas alostricas

Fosfofrutocinase

Frutose-6-P

ATP

ADP

[ADP e AMP]
[ATP]

[Frutose-6-P]

Frutose 1-6-P

Aula 05: Crescimento e Regulao do Metabolismo

Microbiano Parte II

Regulao da atividade de enzimas: modificao

covalente e propriedades cinticas
Acetil-CoA
Oxaloacetato

Acetil-CoA
Malato

citrato

Acetato

Isocitrato
liase

No fosforilada

Isocitrato
Glioxilato

Succinato

Ciclo de Krebs

Isocitrato
desidrogenase

Desvio do
glioxilato

Fosforilada

CO2

-cetoglutarato
Succinil-CoA

CO2

[Isocitrato]

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Microbiano Parte III

Fatores ambientais que afetam o crescimento microbiano

Temperatura

pH

Disponibilidade de gua
Disponibilidade de oxignio

Aula 05: Crescimento e Regulao do Metabolismo

Microbiano Parte III

Taxa de crescimento

Efeito da temperatura no crescimento microbiano

Reaes
enzimticas com
velocidade
crescente

tima

Reaes
enzimticas com
velocidade
mxima

Desnaturao de
protenas;
Colapso da membrana
plasmtica;
Lise celular
Mnima

Solidificao da membrana;
Diminuio do transporte de substncias;
Paralizao do crescimento

Mxima

Temperatura (C)

Aula 05: Crescimento e Regulao do Metabolismo

Microbiano Parte III

Classificao dos micro-organismos quanto

temperatura de crescimento
Termfilos
Ex: Bacillus
stearothermophilus

Taxa de crescimento

Mesfilos
Ex: Escherichia coli

Hipertermfilos
Ex: Thermococcus
celer

Psicrfilos
Ex: Flavobacterium
sp

-10

10

20

30

40

50

60

70

Temperatura (C)

80

90

100

110

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Microbiano Parte III

Classificao dos micro-organismos quanto faixa

de pH de crescimento
Neutrfilos
Ex: Escherichia coli
Acidfilos
Ex: Acidithiobacillus sp
Taxa de crescimento

Alcaliflicos
Ex: Bacillus sp

3,5

pH

14

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Microbiano Parte III

Classificao dos micro-organismos quanto

concentrao de NaCl requerida para o crescimento

Taxa de crescimento

No halfilos
Ex: Escherichia coli

Halfilos
Ex: Vibrio fischeri

Halfilos extremos
Ex: Halobacterium
salinarium

Halotolerantes
Ex: Staphylococcus
aureus

Concentrao salina (NaCl)

Aula 05: Crescimento e Regulao do Metabolismo

Microbiano Parte III

Por que os halotolerantes, halfilos e halfilos

extremos crescem em meio com baixa
atividade de gua?
So eficientes para produzir ou acumular solutos
compatveis no citoplasma, no intuito de evitar a
perda de gua para o meio e manter a clula em
um equilbrio aquoso positivo.

Aula 05: Crescimento e Regulao do Metabolismo

Microbiano Parte III

Efeito da disponibilidade de oxignio no crescimento

microbiano
Formas txicas de oxignio

Causam danos s clulas

Reaes (formao de formas txicas de oxignio)

O2 + e-

O2- (nion superxido)

O2- + e- + 2H+
H2O2- + e- + H+

H2O2 (perxido de hidrognio)

OH (radical hidroxila)

Aula 05: Crescimento e Regulao do Metabolismo

Microbiano Parte III

Por que alguns micro-organsimos toleram a

presena de oxignio e outros no?
Mecanismos de destoxificao: enzimas que eliminam
as formas txicas.
2 O2- + 2H+ Superxido dismutase

O2 + H2O2

2 H2O2 Catalase 2 H2O + O2

H2O2 + NADH + H+ Peroxidase 2 H2O + NAD+

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Microbiano Parte III

Classificao dos micro-organismos quanto

disponibilidade de oxignio requerida para crescimento
Aerbios Microaerfilos Anaerbios
estritos
estritos

Anaerbios
Anaerbios
facultativos aerotolerantes

1= Zona xica; 2= Zona micro-xica; Zona anxica.