DOCTORADO EN MEDICINA TROPICAL

UNIVERSIDAD DE CRDOBA-SUE-CARIBE.

MURCILAGOS COMO RESERVORIOS DE FLAVIVIRUS Y LYSSAVIRUS EN

CRDOBA Y SUCRE.

DOCUMENTO PARA ACCEDER AL EXAMEN DE CANDIDATURA PARA EL

DOCTORADO EN MEDICINA TROPICAL.

ALFONSO CALDERN RANGEL. MVZ. M. Sc.

ESTUDIANTE DE DOCTORADO, UNIVERSIDAD DE CRDOBA.

DIRECTOR: SALIM MTTAR V. Ph. D.

CARTAGENA DE INDIAS, 8 DE AGOSOTO DE 2015.

Resumen.
Introduccin. Las enfermedades infecciosas zoonticas emergentes y re-emergentes
constituyen una amenaza para la salud pblica y el 75% de las que han surgido durante las
dos ltimas dcadas han tenido su origen en la fauna silvestre. Los murcilagos contribuyen
a la sostenibilidad ambiental como controladores de poblaciones de insectos, propagadores
de semillas y polinizadores. No obstante, los quirpteros tambin son reservorios de varias
zoonosis de alto impacto en salud pblica. Los murcilagos como portadores brindan un
escenario ecoepidemiolgico importante y ofrecen la oportunidad del mantenimiento,
propagacin e intercambio de material gentico viral intra e interespecies. Los quirpteros
trasmiten virus por la orina infectada, aerosoles generados durante la defecacin y la
contaminacin de las frutas inoculadas, durante su alimentacin. Estas caractersticas
despiertan el inters de muchos investigadores para conocer el potencial zoontico de los
murcilagos y su relacin con la salud pblica. En Colombia, el estudio de los quirpteros
se ha enfocado sobre su diversidad y dinmica poblacional. No obstante, los estudios de
estos mamferos como portadores de virus de importancia en salud pblica son escasos, con
excepcin del virus de la rabia en los murcilagos hematfagos. La presencia de
enfermedades emergentes y re-emergentes junto a las malas condiciones socioeconmicas
de la poblacin y al deterioro de la vigilancia en salud pblica, son elementos
fundamentales para el incremento de las enfermedades infecciosas trasmitidas por vectores.
Estos escenarios brindan la posibilidad para que se realicen estudios ecoepidemiolgicos en
mamferos voladores silvestres para comprender el rol de los quirpteros en algunas
enfermedades zoonticas. Objetivo. Estudiar la ecoepidemiologa de los quirpteros
frugvoros e insectvoros como hospederos de flavivirus y reservorios de lyssavirus en
Crdoba y Sucre. Materiales y mtodos. Se llevar a cabo un estudio de tipo descriptivo
prospectivo, con un muestreo no probabilstico por conveniencia donde se utilizarn redes
de niebla para la captura de murcilagos. Se escogern 13 puntos geogrficos en Crdoba y
Sucre que comprendan las subregiones ecolgicas de cada departamento. El tamao de la
muestra ser como mnimo de 260 murcilagos de las especies consideradas de mayor
abundancia. Los especmenes sern identificados taxonmicamente por caractersticas
morfomtricas estndares. Los aspectos ticos incluirn la eutanasia farmacolgica para
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evitar el sufrimiento animal y se realizar la necropsia en campo con el propsito de

obtener diferentes rganos como: sangre, sistema nervioso central, corazn, pulmn,
hgado, rin, bazo, hisopados salival y rectal. Los tejidos sern conservados en crioviales
estriles con Trizol y RNA latter a -180oC en N2, hasta la extraccin del ARN. Los
flavivirus y lyssavirus se detectarn por medio de la transcripcin reversa de la reaccin en
cadena de la polimerasa (RT-PCR). Para Flavivirus los primers Flavi1+ y Flavi1-, Flavi2+
y Flavi2 que codifican para el gen NS5. Las muestras positivas para Flavivirus se les
establecer la especie de flavivirus. Para dengue los iniciadores D1_Mod, D2_Mod que
codifican para una regin C-PrM/M y TS1_Mod, TS2_Mod, TS3_Mod y TS4_Mod para
los 4 serotipos. Para fiebre amarilla, los iniciadores JM2249 y JM2751 y WNV WNV
primers FU1 PMF y cFD3PMR para el gen NS5 y WN1816A, WN1751 WN1751 y
WN2504 para la envoltura. Tambin se amplificarn parcialmente los genes N y G del virus
de la rabia. Los especmenes positivos (amplicones) tanto para Flavivirus y Lyssavirus
sern secuenciados para establecer las relaciones filogenticas con las reportadas en
Genbank u otros bancos genmicos. Resultados esperados. Se espera determinar la
distribucin ecoespacial de los flavivirus y lyssavirus en los murcilagos de Crdoba y
Sucre.

3. HIPTESIS.
Los quirpteros frugvoros e insectvoros de Crdoba y Sucre actan como hospederos y
reservorios de Flavivirus y Lyssavirus.
4. OBJETIVOS.
4.1 Objetivo general.
Estudiar la ecoepidemiologa de los quirpteros frugvoros e insectvoros como hospederos
de Flavivirus y reservorios de Lyssavirus en Crdoba y Sucre.
4.2 Objetivos especficos.
Detectar molecularmente en quirpteros frugvoros e insectvoros Flavivirus y Lyssavirus
en Crdoba y Sucre.
Establecer las relaciones filogenticas de Flavivirus y Lyssavirus en Crdoba y Sucre con
otras cepas reportadas en otros bancos genmicos.
Determinar la distribucin espacial de los virus Flavivirus y Lyssavirus en quirpteros de
Crdoba y Sucre.
Reconocer factores de riesgo en humanos que habitan zonas cercanas a murcilagos en
Crdoba y Sucre.
Conformar un banco de tejidos de quirpteros frugvoros e insectvoros de Crdoba y Sucre
que permita adelantar estudios posteriores en enfermedades infecciosas de importancia en
salud pblica.

METODOLOGA PARA LA DETERMINACIN DE FLAVIVIRUS Y LYSSAVIRUS

EN QUIRPTEROS DE CRDOBA Y SUCRE.

SNC

SANGRE

2R
2T