EFECTO DEL EXTRACTO ETANOLICO DE Passiflora ligularis

Juss. granadilla EN EL CRECIMIENTO DE UNA CEPA

BACTERIANA DE Staphylococcus aureus

RESUMEN

Un problema actual que afronta la medicina es la resistencia que vienen adquiriendo

microorganismos patgenos, una bacteria Staphylococcus aureus muestra un claro
ejemplo de ello. Es as que la presente investigacin busco determinar si el extracto
de granadilla tiene la capacidad de inhibir el crecimiento de una cepa de S. aureus
en condiciones de laboratorio, adems de determinar su toxicidad. Para ello se
prepar un extracto etanlico de las hojas de granadilla, y haciendo uso del mtodo
de difusin en disco Bauer se evalu el dimetro de inhibicin. Los Grupos C3 (100
mg/ml) y C4 (200 mg/ml), los de mayor concentracin, fueron los nicos que
mostraron diferencias significativas en relacin al grupo control (C) con un nivel de
significancia p<0.05. En el bioensayo con Artemia salina se encontr que los
tratamientos C, D Y E presentan diferencias significativas con respecto al grupo
control con un nivel de significancia p<0.05, sin embargo el tratamiento B cuya
concentracin fue de 1 g/ml no mostro significancia alguna respecto al grupo control
(A).
Se concluye que el extracto de P. ligulares es moderadamente toxico y que posee un
reducido potencial de inhibicin frente al crecimiento de S. aureus.
Palabras claves: Passiflora ligularis, Staphylococcus aureus, inhibicin, toxicidad,
Artemia salina.

I.

INTRODUCCIN

Las plantas medicinales han acompaado al ser humano desde la ms remota

antigedad, no hay cultura que no haya desarrollado su propia flora medicinal, la
cual es generalmente transmitida por tradicin oral (Salaverry y Cabrera, 2014). Ya
desde tiempos inmemoriales numerosas poblaciones indgenas de todo el mundo,
algunas de niveles culturales muy elevadas, tuvieron como base de supervivencia el
uso de diversos productos que extraan de los bosques que constituan su habitad.
Entre tales productos se encuentran los empleados con fines medicinales (Vattuone
y col., 2010). Dentro de su flora Per cuenta con especies vegetales muy variadas,
con propiedades medicinales, las cuales no se han difundido debido al escaso
conocimiento cientfico que se tiene de ellas y al poco apoyo que en general se le
brinda a la investigacin.
Actualmente el consumo de frutas y verduras est ganando la atencin de
todo el mundo por los beneficios para la salud que incluye propiedades
cardioprotectoras, contra el cncer, anti-diabticas y anti-obesidad. Los compuestos
bioactivos como polifenoles, incluyendo los flavonoides, taninos, catequinas,
vitaminas C y E, -caroteno, etc., y varios otros confieren estos beneficios
protectores de la salud. La mezcla de estos compuestos puede proporcionar una
mejor proteccin debido a sus efectos sinrgicos (Saravanan y Parimelazhagan,
2014).
El gnero Passiflora constituye una enorme riqueza, tanto a nivel
econmico, como nutricional y de recursos genticos. Algunas pasifloras tienen
propiedades sedativas, antiespasmdicas y "antibacteriales". Es bien conocido por
sus usos comerciales, muchas especies son ampliamente cultivadas para la
produccin de frutas. Otras especies se utilizan como plantas ornamentales por sus
flores de colores vivos. El conocimiento farmacolgico del gnero Passiflora indica
1

fITOQUMICA|INFORME DE INVESTIGACION

su potencial para el desarrollo de frmacos ansiolticos y sedantes. Un nmero

significativo de especies ha sido utilizado en la medicina popular tradicional en
muchos pases, como remedio para tratar la ansiedad, el insomnio, la histeria, la
epilepsia, los espasmos y el dolor (Carvajal de Pabn y col., 2011).
P. ligularis es una planta originaria de Amrica Tropical, nativa y cultivada
por los antiguos peruanos debido a sus deliciosos frutos; es una especie trepadora
mediante zarcillos, completamente glabra, con tallos cilndricos de varios metros de
longitud, cultivada en los Valles Interandinos, Regin Andina y Sierra peruana
ubicados entre los 800 2500 m.s.n.m. (Mostacero y col., 2009). Dada las
propiedades curativas de esta planta, se utilizan tanto las hojas como el fruto en la
industria qumica y farmacolgica. Se trata de una fruta con propiedades diurticas
y digestivas, la infusin de las hojas de la planta se utiliza para controlar la fiebre y
la tifoidea (Medina, 2006). La decoccin del tallo y la cascara del fruto se usa en
patologa digestiva, respiratoria y afecciones hepticas. La infusin y tintura de las
hojas y tallos es til para tratar hipertensin, diabetes, cistitis, anemia y diarrea.
Hojas y tallo en decoccin, para baos externos, son tiles en afecciones de la piel.
El fruto, las hojas tiernas y las flores tienen propiedades analgsicas, diurticas,
contra el dolor abdominal, sedante, baja la fiebre, expulsa parsitos intestinales,
fluidifica el moco bronquial y es cicatrizante (Restrepo de Fraume y col., 2005).
Por sus propiedades medicinales, los frutos del gnero Passiflora son una
alternativa para el control de enfermedades digestivas, por lo cual tienen un alto
potencial de mercado. Estudios recientes mostraron que las partes herbales (hojas y
flores) de este gnero poseen propiedades bioactivas y farmacolgicas altamente
efectivas (Li y col., 2011), una de ellas es la actividad ansioltica encontrada en los
extractos de la flor (Pallo, 2012). Dhawan y col., (2004) en P. edullis y P. incarnata
2

fITOQUMICA|INFORME DE INVESTIGACION

determinaron la presencia de compuestos activos como alcaloides, fenoles,

cianogenicos y flavonoides glicosilados. Por otra parte indican que los alimentos
ricos en compuestos polifenlicos tienen alta relacin con la capacidad antioxidante;
igualmente Bisignano y col., (1999) encontraron que la actividad antimicrobiana
est estrechamente ligada a los compuestos bioactivos presentes en las partes
herbales de las plantas.
A pesar del desarrollo de numerosos medicamentos antimicrobianos en los
ltimos aos, la incidencia de resistencia a los frmacos mltiples por
microorganismos patgenos ha aumentado. Hoy en da las propiedades teraputicas
de polifenoles vegetales tambin han demostrado efectos antimicrobianos por
causar dao estructural o funcional a la membrana celular bacteriana. Varios
estudios tambin han demostrado que las frutas ricos en polifenoles ejercen tanto los
efectos antioxidantes y antimicrobianos (Saravanan y Parimelazhagan, 2014).
Staphylococcus aureus es el mayor patgeno humano causante de
infecciones a la piel y tejidos, neumona, septicemia e infecciones por dispositivos
asociados. La emergencia de cepas resistentes a meticilina y otros agentes
antibacteriales ha llegado a ser una preocupacin mayor especialmente en el
ambiente hospitalario, esto es por la alta mortalidad debido a las infecciones
sistmicas ocasionadas por Staphylococcus aureus (Mamani y col., 2006).
Desde el primer aislamiento de S. aureus resistente a la oxacilina (SAOR)
obtenido en Inglaterra en 1961, se ha ido incrementando el nmero de casos de
aislamientos resistentes hasta llegar a la actualidad. Tanto es as, que en la
actualidad SAOR constituye un patgeno en la que este microorganismo se
encuentra distribuido en todo el mundo en porcentajes variables hospitalario

fITOQUMICA|INFORME DE INVESTIGACION

frecuente, que produce estancias en el hospital ms largas y costos de salud

crecientes, con una proporcin de mortalidad alta (Perazzi y col., 2010).
En este contexto y por lo expuesto anteriormente la presente investigacin
tiene como finalidad evaluar en el laboratorio el efecto inhibitorio que produce el
extracto etanlico de Passiflora ligularis en el crecimiento de una cepa de
Staphylococcus aureus, y determinar mediante el bioensayo de toxicidad en Artemia
salina si dicho extracto es inocuo para la salud.

II.

MATERIAL Y METODOS
rea de estudio

fITOQUMICA|INFORME DE INVESTIGACION

La investigacin se realiz en la ciudad de Trujillo, siendo los anlisis de la

marcha fitoqumica, el bioensayo de toxicidad en Artemia salina y la prueba de
antibiograma con una cepa bacteriana, desarrollados en el Laboratorio de
Fitoqumica del Departamento Acadmico de Qumica biolgica y Fisiologa
Animal de la Universidad Nacional de Trujillo.

Planta y preparacin del extracto etanlico

Las hojas de Passiflora ligularis granadilla se colectaron en los jardines de
la Ciudad Universitaria. Se lavaron en agua potable y agua destilada y se dejaron
secar a temperatura ambiente. Para la preparacin del extracto se cortaron las hojas
en trozos muy pequeos y se coloc 70 gr de la muestra a macerar en 350 ml de
etanol de 96 durante un periodo de 7 das a temperatura ambiente, agitando el
envase por 5 minutos dos veces al da. Al cabo de ese tiempo, se procedi a reflujar
el macerado por 1 hora y media, el sobrenadante se filtr en caliente, se verti en
una placa Petri y se sec por per-vaporacin hasta que se logre una consistencia
pastosa. El extracto seco se mantuvo en refrigeracin hasta su posterior uso.

Marcha fitoqumica preliminar

fITOQUMICA|INFORME DE INVESTIGACION

Para la determinacin de los distintos grupos de fitoconstituyentes del

extracto se realiz la marcha fitoqumica propuesta por Lock de Ugaz (1994) con
ligeras modificaciones (Figura 2).

Bioensayo de toxicidad en Artemia salina

Los nauplios de Artemia salina fueron obtenidos de un acuario de la ciudad
de Trujillo, una vez en laboratorio estos fueron colocados en un recipiente que
estuvo sometido a un constante burbujeo con una bomba de oxgeno. Para la
preparacin de las distintas concentraciones se disolvi 20 mg de la muestra
(extracto) en 2 mL agua de mar (previamente filtrada). A partir de esta solucin, se
prepararon diluciones de 1000, 100, 10 y 1 g/mL, transfiriendo a cada vial 500, 50,
5 y 0.5 L respectivamente. Fueron 3 viales por cada concentracin (9 en total). Se
hizo tambin un grupo control que contuvo solo agua de mar. En cada vial se
colocaron 10 nauplios y se agreg agua de mar hasta completar 5 mL por vial.
Luego de 24 horas se contaron el nmero de individuos muertos en cada vial.

Ensayo in-vitro de actividad antibacterial

fITOQUMICA|INFORME DE INVESTIGACION

La actividad antimicrobiana en los extractos de P. ligularis se determin

utilizando el mtodo de difusin en disco Bauer (1966). Para la preparacin del
medio de cultivo, en 200 ml de agua destilada se diluyeron 4.2 gr de medio Mller
Hinton y 3 gr de Agar-agar Oxoid. Se verti aprox. 10 ml de medio de cultivo en
placa Petri y posterior a la solidificacin del medio se inocul con una suspensin
bacteriana de Staphylococcus aureus (Gram-positiva). En la superficie del medio
inoculado fueron dispuestos discos de antibiticos de 5 mm de dimetro
previamente impregnados con el extracto a distintas concentraciones (200 mg/ml,
100 mg/ml, 50 mg/ml y 25 mg/ml). Las placas Petri fueron llevados a incubacin
durante 24 h a una temperatura de 37 C. Se utiliz adems un control con agua
destilada. Se realizaron tres repeticiones para cada tratamiento. La medicin de la
inhibicin microbiana de los extractos frente a la de los controles se determin
midiendo el dimetro de los halos.

III.

RESULTADOS
Fitoconstituyentes del extracto

fITOQUMICA|INFORME DE INVESTIGACION

Tabla 1. Presencia o ausencia de los distintos grupos de metabolitos secundarios en

el extracto etanlico de las hojas de Passiflora ligularis.
Fitoconstituyentes
Flavonoides
Taninos
Esteroides
Cardenlidos
Alcaloides

cantidad
+
+++
++
+
+

(+)=Baja cantidad; (++)=Mediana cantidad; (+++)=Alta cantidad

Bioensayo de toxicidad
Tabla 2. Nmero de individuos vivos, muertos y porcentaje de letalidad en nauplios
de Artemia salina expuestos a diferentes concentraciones del extracto etanlico de
Passiflora ligularis.

A (control)

B (1 g/ml)

C (10
g/ml)

D (100
g/ml)

E (1000
g/ml)

Vivos

Muertos

Letalidad
(%)

6.7

10

50*

76.6*

90*

* p<0.05 = existe diferencia significativa entre la comparacin de medias del grupo control respecto
a los dems grupos.

Actividad antimicrobiana del extracto

fITOQUMICA|INFORME DE INVESTIGACION

Tabla 3. Dimetro de los halos de inhibicin del crecimiento de Staphylococcus

aureus luego de 24 h. expuestos a las diferentes concentraciones de extracto
etanlico de Passiflora ligularis.

C (control)

C1 (25
mg/ml)

C2 (50
mg/ml)

C3 (100
mg/ml)

C4 (200
mg/ml)

Dimetro
de
inhibicin
(cm)

0.9

1.3

1.2

1.7*

2.5* a, b

S2

0.16

0.01

0.01

0.14

* p<0.05 = existe diferencia significativa entre la comparacin de medias del grupo control respecto
a los dems grupos.
a

IV.
9

p<0.05 = existe diferencia significativa entre la comparacin de medias del grupo C4 y el grupo
C1.

p<0.05 = existe diferencia significativa entre la comparacin de medias del grupo C4 y el grupo C2.

DISCUSION
fITOQUMICA|INFORME DE INVESTIGACION

El anlisis fitoqumico preliminar indica que en las hojas de Passiflora

ligularis se hallan una gran cantidad de compuestos fenlicos tales como taninos y
flavonoides, una moderada cantidad de esteroides y la presencia de cardenlidos y
alcaloides. Pallo (2012) obtuvo resultados que se asemejan a los nuestro sealando
que esta especie posee una gran cantidad de flavonoides y taninos, adems al ser su
anlisis mucho ms amplio que el nuestro pudo determinar la presencia de una
buena cantidad de compuestos lactnicos y quinonas. En efecto son estos
compuestos qumicos con acciones farmacolgicas, los denominados principios
bioactivos, que constituyen muchas veces los ingredientes primarios utilizados por
laboratorios farmacuticos como punto de partida en el desarrollo de formas
comerciales que sern patentadas para su uso teraputico (Lopez, 2012).
Nuestros resultados en el bioensayo con Artemia salina sugieren que el
extracto de las hojas de granadilla posee una moderada toxicidad. Tambin se
verifica en la Tabla 2 que los tratamientos C, D Y E presentan diferencias
significativas con respecto al grupo control con un nivel de significancia p<0.05, sin
embargo el tratamiento B cuya concentracin fue de 1 g/ml no mostro significancia
alguna respecto al grupo control (A). Esto quiere decir que a partir de la concentracin de
10 g/ml hacia adelante el extracto mostr un marcado porcentaje de letalidad frente a los
nauplios de A. salina y que el porcentaje de letalidad es directamente proporcional al
aumento de la concentracin del extracto. Rojas y Diaz (2009) en condiciones

experimentales, determinaron que la administracin oral a dosis repetidas durante

28 das del extracto metanlico de las hojas de Passiflora edulis, en ratas, no mostr
toxicidad fisiolgica, morfolgica, neurolgica, de comportamiento, bioqumica

10

fITOQUMICA|INFORME DE INVESTIGACION

sangunea ni a nivel anatomopatolgico. El hecho de que ambas especies

pertenezcan a la misma familia y gnero brinda informacin necesaria para poder
sugerir que las plantas del gnero Passiflora no contienen en su composicin
metabolitos que le confieran toxicidad a estas especies, de ser as la toxicidad podra
llegar a ser considerada nicamente moderada.
En cuanto a la capacidad de P. ligularis para inhibir el crecimiento
bacteriano de una Gram positiva los resultados se muestran en la Tabla 3. Las cepas
de Staphylococcus aureus expuestas a las diferentes concentraciones del extracto P.
ligularis mostraron una mayor inhibicin en su crecimiento con respecto al grupo
control, sin embargo los grupos C3 (100 mg/ml) y C4 (200 mg/ml), los de mayor
concentracin, fueron los nicos que mostraron diferencias significativas en
relacin al grupo control (C) con un nivel de significancia p<0.05 la exposicin de
la cepa a concentraciones menores, grupo C1 (25 mg/ml) y C2 (50 mg/ml)
prcticamente inhibi en absoluto el crecimiento de la bacteria. Cabrera y col.
(2014) determinaron que los extractos de Passiflora ligularis tienen la capacidad
para inhibir el crecimiento de cepas Gram negativa como E. coli y de Gram positiva
como S. aureus, siendo en la primera el efecto mucho mayor que en la segunda.
Resultados similares fueron obtenidos por Kannan y col. (2010) al exponer las
mismas bacterias frente al extracto de P. mollisima.
Tavares (2000) consideran que la posible causa de este efecto en el
crecimiento de E. coli son las alteraciones en la membrana celular en contacto con
extracto de Passiflora, debidas al efecto de las las saponinas que se encontraron en
dicha especie sobre la doble capa de lpidos presente en la membrana de las
bacterias Gram negativas. Los polifenoles vegetales tambin han demostrado
efectos antimicrobianos por causar dao estructural o funcional a la membrana
11

fITOQUMICA|INFORME DE INVESTIGACION

celular bacteriana. Varios estudios tambin han demostrado que las frutas ricos en
polifenoles ejercen tanto los efectos antioxidantes y antimicrobianos (Saravanan y
Parimelazhagan, 2014). Otros estudios tambin han confirmado la capacidad
inhibitoria de los extractos de Passiflora sobre distintos microorganismos
patgenos, Bendini y col. (2006) mostraron la presencia de actividad antimicrobiana
en extractos metanolicos de hojas de P. nitida y P. foetida sobre la cepa E. coli.
Alam Ripa y col. (2009) encontraron que los extractos cloroformicos de hojas y
tallos de P. edulis tienen efecto antimicrobiano sobre S. aureus y E. coli. Por ltimo
Saravanan y Parimelazhagan (2014) indican que los frutos de P. ligularis posee
actividad antibacteriana contra bacterias Gram (+) y bacterias Gram (-), adems
inhibe las cepas de hongos Candida albicans y Aspergillus niger presentando halos
de inhibicin de 14,85 mm y 13,91 mm respectivamente en el mtodo de difusin
en disco.
Con base en los resultados obtenidos podemos afirmar que el extracto de P.
ligularis mostr un reducido potencial inhibitorio con respecto a la cepa de
Staphylococcus aureus debido a que en nuestros resultados solo se observaron halos
de inhibicin a concentraciones muy elevadas del extracto. Aun as presenta una
buena actividad antibacteriana contra otras cepas Gram negativas y una marcada
actividad antifngica. Es as como estos resultados para P. ligularis, posicionan a
esta especie vegetal como una posible potencial fuente de sustancias biocidas para
determinadas tipos de microorganismos patgenos con posible utilidad a nivel
comercial o como uso para tratamientos alternativos por lo que cabe considerar a
V.

12

esta especie como un interesante objeto de estudio.

CONCLUSIONES

fITOQUMICA|INFORME DE INVESTIGACION

Se encontr que Staphylococcus aureus fue una bacteria muy resistente ante
el efecto inhibitorio del extracto de Passiflora ligularis, As como tambin en el
bioensayo de toxicidad frente a Artemia salina se determin que el extracto de las
hojas de esta especie fue moderadamente toxico.

VI.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
Alam Ripa, F., Haque, M., Nahar, L. e Islam, M. (2009). Antibacterial, Citotoxic
and Antioxidant Activity of Passiflora Edulis Sims. Europ. J. Sci. Res, 31(4), 592 598.
Bisignano, G., Tomaino, R., Lo Cascio, G., Crisafi, G., Uccela, N., y Saija, A.
(1999). On the in-vitro antimicrobial activity of oleurepein and hydroxytyrosol. J.
Pharmacol, 31, 971 - 974.
Cabrera, S., Sandoval, A. y Forero, F. (2014). Potencial antioxidante y
antimicrobiano de extractos acuosos e hidroalcohlicos de granadilla (Passiflora
ligularis). Acta Agronmica, 63(3), 1 - 11.
Carbajal de Pabn, L., Turbay, S., Rojano, B., Alvarez, L., Restrepo, S.,
Alvarez, J., Bonilla, K., Ochoa, C. y Snchez, N. (2011). Algunas especies
de Passiflora y su capacidad antioxidante. Plant Med, 16(4).

13

fITOQUMICA|INFORME DE INVESTIGACION

Dhawan, K., Dhawan, S., y Sharma, S. (2004). Passiflora: a review update. J.

Ethnoph, 94 (1), 1 - 23.
Kannan, S., Parimala Devi, B., y Jayakar, B. (2010). In-vitro antibacterial activity
of variuos extracts on the leaves of Passiflora mollisima. J. Chem. Pharmac. Res. 5
(2), 225 - 228.
Li, H., Zhou, P., Yang, Q., Shen, Y., Deng, J., Li, L., y Zhao, D. (2011).
Comparative studies on anxiolytic activities and flavonoid compositions of
Passiflora edullis flavicarpa. J. Ethnophar, 133 (3), 1085 - 1090.
Lock de Ugaz. (1994). Investigacion fitoquimica Mtodos en de productos
naturales. Lima: Fondo Editorial de la Pontifica Universidad Catlica del Per
Lopez, M. (2012). Manual de plantas medicinales para Guinea Ecuatorial. Espaa:
Fund. de Religiosos para la salud.
Mamani, E., Lujn, D. y Pajuelo, G. (2006). Perfil de sensibilidad y resistencia de
Staphylococcus aureus. Experiencia en el Hospital Nacional Hiplito Unanue.
Anales de la Facultad de Medicina, 67(2), 120-124.
Medina, G. (2006). Evaluacin del efecto ansioltico del extracto hidroalcohlico
de flor de granadilla (Passiflora ligularis). Tesis. Escuela Superior Politcnica de
Chimborazo, Ecuador.
Mostacero, J., Meja F., Gamarra, O. (2009). Fanergamas del Per: Taxonoma,
Utilidad y Ecogeografa. Trujillo-Per: Concytec.
Pallo, M. (2012). Evaluacin del efecto ansioltico del extracto hidroalcohlico de
flor de granadilla (passifloraligularis) en ratones (mus musculus)
(Perazzi y col., 2010).
Restrepo, M., Quintero, P., Fraume, N. (2005). El milagro de las plantas
aplicaciones Medicinales y Orofarngeas. Bogot: San Pablo.
Rojas, J. y Diaz, D. (2009). Evaluacin de la toxicidad del extracto metanlico de
hojas de Passiflora edulis Sims (maracuy), en ratas. Anales de la Facultad de
Medicina, 70(3), 175-180.
Saravanan, S., y Parimelazhagan, T. (2014). In vitro propiedades antioxidantes,
antimicrobianas y anti-diabticos de polifenoles de Passiflora ligularis Juss. pulpa
de fruta. Food Science and Human Wellness, 3(2), 56 - 64.
Salaverry, O. y Cabrera, J. (2014). Florstica de algunas plantas medicinales. Rev
Peru Med Exp Salud Publica, 31(1), 165-168.

14

fITOQUMICA|INFORME DE INVESTIGACION

Tavares, W. (2000). Bacteria gram positivas problemas: resistencia do estafilococo,

do enterococo e de pneumococo aos antimicrobianos. Rev. Soc. Bras. Med. Trop.
33,3.
Vattuone, M., Martinez, R. y Corzo, A. (2010). Actividad antimicrobiana de
extracto de hojas de Caesalpinia paraguariensis, Par. Burk, Guayacan.

ANEXOS
15

fITOQUMICA|INFORME DE INVESTIGACION

ANEXO 1

PREPARACION DEL EXTRACTO ETANOLICO

Figura 1. Obtencin del macerado y puesto a secar

16

fITOQUMICA|INFORME DE INVESTIGACION

ANEXO 2

MARCHA FITOQUIMICA

17

fITOQUMICA|INFORME DE INVESTIGACION

Figura 2. Marcha fitoqumica preliminar

18

fITOQUMICA|INFORME DE INVESTIGACION

Figura 3. Reacciones de identificacin de metabolitos secundarios

ANEXO 3

19

fITOQUMICA|INFORME DE INVESTIGACION

BIOENSAYO DE TOXICIDAD

Figura 4. Diluciones a diferentes concentraciones preparadas a partir del extracto para el

bioensayo en Artemia salina

Figura 5. Colocacin de los nauplios en cada vial

ANEXO 4

20

fITOQUMICA|INFORME DE INVESTIGACION

ACTIVIDAD ANTIBACTERIAL

Figura 6. Diluciones a distintas concentraciones preparados a partir del extracto para el

ensayo de inhibicin de Staphylococcus aureus

Figura 7. Placas con medio de cultivo listas para sembrar

21

fITOQUMICA|INFORME DE INVESTIGACION

Figura 8. Inoculacin de las bacterias en las placas

Figura 9. Observacin y medicin del dimetro de los halos de inhibicin

22

fITOQUMICA|INFORME DE INVESTIGACION