Bacterias no fermentadoras

Fac. Cs. Qs. Dpto.
De MICROBIOLOGA
LABORATORIO DE BACTERIOLOGA II
Q.F.B
BENEMRITA UNIVERSIDAD AUTNOMA DE PUEBLA

FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS
LICENCIATURA: QUMICO FARMACOBILOGO
REA ESPECFICA DE:
NOMBRE DE LA ASIGNATURA:
MICROBIOLOGA
LABORATORIO DE BACTERIOLOGA I
CDIGO:
FAR 331L
FECHA DE ELABORACIN:
MARZO 2001
NIVEL EN EL MAPA CURRICULAR:
FORMATIVO
TIPO DE ASIGNATURA:
DISCIPLINARIA
PROFESORES QUE PARTICIPARON EN SU ELABORACIN:

MSP CARLOS CABRERA MALDONADO
MSP JESS LUZURIAGA GALICIA
MC. GLORIA LEN TELLO
MSP JUAN MANUEL ALVAREZ LOPEZ
MC CARLOS TLLEZ OSORIO
QFB MARA SUSANA PREZ FERNANDEZ
HORAS DE TEORA: 4
HORAS PRCTICA: 3
CRDITOS: 11
Fac. Cs. Qs. Dpto. De MICROBIOLOGA

Q.F.B
REGLAMENTO DEL LABORATORIO

1. La asistencia al laboratorio deber ser del 100 %
2. La hora de entrada tiene 10 minutos de tolerancia, despus de ese tiempo,
se tomar como retardo, cada retardo equivale a medio punto menos en la
calificacin final del laboratorio.
3. En el laboratorio se deber portar la bata limpia y abotonada.
4. Las mochilas no se debern colocar sobre la mesa de trabajo.
5. Lavarse las manos antes y despus de iniciar la sesin prctica.
6. No comer ni fumar en el laboratorio, ni introducir ningn objeto en la boca.
7. Limpiar y desinfectar el rea de trabajo antes y despus de trabajar.
8. No pasear entre las mesas del laboratorio, el trabajo debe realizarse
sentado.
9. Hablar solo lo necesario con los compaeros.
10. Antes de iniciar la prctica, leer cuidadosamente las instrucciones y si no
entiende pregunte al profesor.
11. Se tendr que traer algn material necesario para poder llevar a cabo las
prcticas como: asa, guantes, cinta adhesiva, algodn, as como material
para limpieza como jabn y benzal.
12. El asa utilizada para el cultivo de microorganismos, se deber esterilizarse
en la flama del mechero antes y despus de su uso.
13. Informe al profesor de cualquier accidente que ocurra.
14. Todo el material que se va a incubar o desechar, deber colocarse en el
sitio indicado por el profesor.
15. Ser cuidadoso con el material y equipo que se le proporcione, el material de
desecho no contaminado depositarlo en los botes de basura, el material
contaminado no lavarlo y depositarlo donde le indique el profesor sin
etiquetas.
16. Etiquetar todo el material que se va a incubar
17. Para tener derecho a la calificacin del laboratorio se deber cumplir con el
100% de asistencia, tener el manual al corriente y aprobar el examen final
que corresponder al 20% de la calificacin final de la teora.

Q.F.B
INDICE
NMERO
DE LA
PRCTICA
Practica 1
Practica 2
Practica 3
Practica 4
Practica 5
Practica 6
Prctica 7
Practica 8
Practica 9
Practica 10
Practica 11
Practica 12
Practica 13
Practica 14
Practica 15
Practica 16
TITULO DE LA PRCTICA
INTRODUCCIN AL TRABAJO DE LABORATORIO EN
BACTERIOLOGA
APLICACIN DE LOS CRITERIOS DE COWAN Y STEEL PARA LA
IDENTIFICACIN DE BACTERIAS
CARACTERIZACIN DE BACTERIAS NO FERMENTADORAS
CARACTERIZACIN DE BACTERIAS DE LOS GNEROS Haemophilus
Y Brucella
CARACTERIZACIN DE BACTERIAS DE LOS GNEROS Neisseria Y
Moraxella
CARACTERIZACIN DE ENTEROBACTERIAS: COLIFORMES Y
Proteus
CARACTERIZACIN DE ENTEROBACTERIAS DE LOS GNEROS
Salmonella Y Shigella
CARACTERIZACIN DE BACTERIAS DE LOS GNEROS
Campylobacter Y Helicobacter
CARACTERIZACIN DE BACTERIAS DE LOS GNEROS
Streptococcus Y ENTEROCOCCUS
CARACTERIZACIN DE BACTERIAS DEL GNERO Staphylococcus
CARACTERIZACIN DE BACILOS GRAM POSITIVOS: Bacillus Y
Gardnerella
CARACTERIZACIN DE BACILOS CIDO ALCOHOL RESISTENTES
(BAAR)
CARACTERIZACIN DE CLAMYDIAS
CARACTERIZACIN DE BACTERIAS SIN PARED CELULAR
CARACTERIZACIN DE BACTERIAS ANAEROBIAS
EVALUACIN DEL LABORATORIO
PGINA
4
5
7
9
10
11
11
12
13
15
16
17
18

Q.F.B
PRACTICA 1
INTRODUCCIN AL TRABAJO DE LABORATORIO EN BACTERIOLOGA
OBJETIVO: Valorar los recursos actuales del laboratorio de microbiologa para poder
realizar la identificacin de bacterias.
INTRODUCCIN: El laboratorio bacteriolgico es el espacio fsico donde se efecta
gran diversidad de procedimientos mdicos, cientficos, tcnicos, etc. Que en conjunto
representan un valioso recurso de la clnica al documentar el estado de salud
(medicina preventiva) o de enfermedad (medicina curativa). La razn por la que el
mdico enva al paciente al laboratorio es slo una: necesita informacin para tomar
decisiones adecuadas. Los estudios microbiolgicos tienen la caracterstica de ser
eminentemente etiolgicos, lo cual permite brindar al paciente el tratamiento
especfico, generando un impacto significativo en la humanidad.
El laboratorio bacteriolgico ha tenido una evolucin de varios siglos, desde el
surgimiento del microscopio hasta el advenimiento de la biologa molecular, la cual se
ha ido ampliando gradualmente.
DESARROLLO:
Mostrar cada uno de los medios con que cuenta el laboratorio de para la identificacin
de las bacterias, explicar su funcionamiento, as como reafirmar el reglamento del
laboratorio para evitar cualquier accidente.
CUESTIONARIO:
1.- Cul es la importancia de cumplir un reglamento dentro de un laboratorio
prctico?

Q.F.B
PRACTICA 2
APLICACIN DE LOS CRITERIOS DE COWAN Y STEEL PARA LA
IDENTIFICACIN DE BACTERIAS
OBJETIVO: Realizar tomando como base los criterios establecidos por Cowan y Steel,
las pruebas bioqumicas fundamentales, que permiten la identificacin presuntiva de
las bacterias de inters mdico.
INTRODUCCIN: La identificacin de una bacteria es su asignacin a un taxn segn
una clasificacin dada y consiste en la determinacin de las caractersticas fenotpicas
y/o genotpicas y la comparacin de estas caractersticas con los diferentes taxones de
la clasificacin considerada. Las caractersticas a determinar y su nmero depende
principalmente del tipo de bacteria y del fin que se persigue en la identificacin.
Cowan y Steel establecen un grupo de pruebas, denominadas pruebas primarias, con
las cuales se puede determinar el gnero, grupo de gneros o en algn caso familia a
la que pertenece un aislamiento. Dichas pruebas son:
1.- Tincin de gram
2.- Tincin de Shaeffer-Fulton (slo en caso de tener BGP)
3.- Tincin de Zielh-Nelssen (slo en caso de tener BGP)
4.- Metabolismo (O/F/I)
5.- Produccin de catalasa
6.- Produccin de oxidasa
7.- Movilidad
8.- Requerimientos de aerobiosis
9.- Requerimientos de anaerobiosis
10.- Produccin de cido a partir de glucosa
Tambin se pueden incluir pruebas secundarias y terciarias a efectos de llegar a
especie. Estas dependern del gnero o familia determinado. (ej: produccin de
pigmentos, produccin de indol a partir de triptofano, produccin de coagulasa, de
fenilalanina deaminasa, etc.)
DESARROLLO:
Tomar una cepa problema a la cual se le realizar lo siguiente:
1.- Tincin de gram
2.- Tincin de Shaeffer-Fulton (slo en caso de tener BGP)
3.- Tincin de Zielh-Nelssen (slo en caso de tener BGP)
4.- Inocular por estra cruzada una placa de agar
5.- Inocular por picadura el medio O/F
6.- Inocular por picadura el medio MIO
7.- Inocular por picadura una base de CTA con un carbohidrato
8.- Incubar todos los medios a 37C por 24 horas
9.- Leer morfologa colonial de la placa
10.- Del crecimiento en placa realizar las pruebas de oxidasa y catalasa
11.- Leer bioqumicas
12.- Comparar los resultados en tablas
13.- Identificar familia o gnero
CUESTIONARIO:
1.- Cul es la importancia de los criterios de Cowan y Steel?
2.- Cmo se realiza la tincin de Gram y cul es su fundamento?
3.- Para que sirve la tincin de Zielh-Nelseen y cul es su fundamento?

Q.F.B
4.- Cul es el fundamento de la prueba de oxidasa y cmo se realiza en el

laboratorio?
5.- En que medios se puede realizar la prueba de movilidad y cmo se interpreta?
6.- Cul es el fundamento de la prueba de catalasa?
7.- De cada uno de los criterios de Cowan y Steel efectuados a la cepa de estudio
durante la prctica, realiza dibujos y menciona tus resultados.

Q.F.B
PRACTICA 3
CARACTERIZACIN DE BACTERIAS NO FERMENTADORAS
OBJETIVO: Comprobar por medio de anlisis de laboratorio, el comportamiento
caracterstico de cepas bacterianas no fermentadoras de carbohidratos.
INTRODUCCIN: Este grupo abarca microorganismos aerobios, no esporulados, que
no utilizan a los carbohidratos como fuente de energa o los utilizan a travs de vas
metablicas diferentes a la fermentacin.
La importancia de estas bacterias radica fundamentalmente en su capacidad para
infectar hospederos inmunocomprometidos, por lo que cobran especial inters a nivel
intrahospitalario, donde adems es comn la presencia de cepas con marcadas
caractersticas de resistencia a los antimicrobianos de uso convencional. Dentro de
este grupo se encuentran los siguientes gneros: Pseudomonas, Acinetobacter,
Moraxella, AlcalgenesFlavobacterium, Agrobacterium, entre otros.
Algunos de los indicios tempranos para detecta al un microorgnismo no fermentador
seran los siguientes:
1.- Falta de evidencias de fermentacin de la glucosa
2.- Positiva de la prueba de oxidasa
3.- Carencia de desarrollo en el agar de Mac Conkey
En la rutina bacteriolgica es necesario rapidez y bajo costo en la identificacin de
este grupo de bacterias, por lo que se sugiere se sigua el esquema de King-Weaver
para su identificacin, el cual se basa en 4 pruebas (ver tabla):
1.- Utilizacin de glucosa (fermentador (F), oxidador (O) o no sacaroltico (NS))
2.- Capacidad de crecer en Mac Conkey
3.- Produccin de citocromo oxidasa
4.- Movilidad
Caractersticas de algunos gneros gramnegativos no fermentadores
CREC
OTRAS
GNERO
METABOLISMO MOVILIDAD OXIDASA
MAC
CARACTERSTICAS
CONKEY
+
flagelos
Desnitrifican nitratos
Pseudomonas
O
+
+
polares
a N2
Acinetobacter
O NS
Parecen diplococos
Flavobacterium
V
algunos
presentan
flagelos
pertricos
Escaso o
negativo
Requieren complejo
B
Bordetella
Moraxella
O NS
Escaso o
negativo
Escaso o
negativo
Requiere factores de
crecimiento
Cocobacilar, difcil
de crecer

Q.F.B
Xanthomonas
Alcaligenes
O NS
+
un solo
flagelo
+
flagelos
pertricos
Requiere factores de
crecimiento.
Patgeno de plantas
Aerobio estricto
DESARROLLO:
1.- Sembrar por estra cruzada los medios en placa, procurando perforar el medio en la
parte del estriado masivo, en el caso del agar sangre carnero.
2.- Sembrar por picadura los medios O/F y MIO
3.- Incubar 24 horas a 37 C
4.- Leer morfologa colonial
5.- Realizar a partir de una colonia aislada, las pruebas de catalasa, oxidasa y tincin
de gram
6.- Leer pruebas bioqumicas
CUESTIONARIO:
1.- Por qu es importante identificar a los BGNnF?
2.- Qu gneros conforman el grupo de los BGNnF?
3.- Cules son las pruebas claves para sospechar de un BGNnF?
4.- Mencione un esquema diferente al de King-Weaver para identificar a los BGNnF
5.- De los BGNnF que gneros dan la prueba de oxidasa negativa, quines movilidad
negativa y quines son capaces de crecer en Mac Conkey?
6.- De la cepa problema responde lo siguiente con ayuda de dibujos:
a) Morfologa colonial
b) Tincin de Gram
c) Pruebas de catalasa y oxidasa
d) Pruebas bioqumicas
e) Establecer si la cepa pertenece al grupo de BGNnF

Q.F.B
PRCTICA 4
CARACTERIZACIN DE BACTERIAS DE LOS GNEROS Haemophilus Y Brucella
OBJETIVO: Identificar los gneros Haemophilus y Brucella
INTRODUCCIN: Los miembros del gnero Haemophilus son bacilos gramnegativos
pequeos, inmviles, que requieren de factores de crecimiento presentes en la sangre
como el factor X, que son un grupo de compuestos tetrapirrlicos termoestables, como
la hemina mientras que el factor V es el dinucletido de nicotinamida adenina (NAD).
Estos dos factores estn contenidos en los eritrocitos, por lo tanto el agar chocolate es
un buen medio para la recuperacin de Haemophilus. Las especies de Haemophilus
humanos, estn vinculadas en su mayora con infecciones del tracto respiratorio
superior a excepcin de H. ducreyi que es un patgeno de tracto genital.
El gnero Brucella abarca un grupo de microorganismos que son cocobacilos
diminutos de tincin dbil y desarrollo lento en agar sangre. Son responsables de la
brucelosis, la cual es difcil de diagnosticar, debido al amplio espectro de
manifestaciones clnicas asociadas.
DESARROLLO PARA Haemophilus:
1.- Sembrar por estra cruzada una placa de agar chocolate
2.- Incubar 48-72 horas a 37 C
de gram
5.- Realizar pruebas de identificacin de especie en agar soya tripticasa con
sensidiscos impregnados de los factores V y X
DESARROLLO PARA Brucella
1.- Sembrar en botellas para hemocultivo
2.- Incubar a 35 C durante 4-6 semanas
3.- Hacer subcultivos en agar sangre y chocolate
4.- Identificar especies, mediante pruebas bioqumicas como necesidad de CO2,
produccin de ureasa y sensibilidad a los colorantes fucsina bsica, tionina y azul de
tionina.
CUESTIONARIO
1.- Cul es la importancia clnica de Haemophilus?
2.- Existe algn agar comercial para el aislamiento de Haemophilus?
3.- Menciona la(s) especies de Haemophilus que requieran el factor V, la(s) que
requiera el factor X y la(s) que requiera ambos factores.
4.- Cul es la importancia clnica del gnero Brucella?
5.- Qu especies de Brucilla requieren C02 para crecer, cuales producen H2S y
cuales ureasa?

Q.F.B
PRCTICA 5
CARACTERIZACIN DE BACTERIAS DE LOS GNEROS Neisseria Y Moraxella
OBJETIVO: Identificar los gneros Neisseria y Moraxella
INTRODUCCIN: Los miembros del gnero Neisseria son microorganismos
gramnegativos cocoides o baciliares que pueden encontrarse en pares o en cadenas
cortas. Son inmviles, no forman esporas y producen cido a partir de carbohidrato lo
que permite identificar especies.
Antes llamada Neisseria catarrhalis ahora conocida como Moraxella catarrhalis, puede
ser responsable de infecciones respiratorias principalmente en nios y ancianos, crece
en agar chocolate y agar nutritivo, no produce cido a partir de glucosa, maltosa,
fructosa, sacarosa no lactosa.
DESARROLLO PARA Neisseria:
1.- Sembrar una placa de Tayer Martin en forma de Z y luego estriar
de gram
5.- Realizar pruebas de identificacin de especie en bases de CTA con diferentes
carbohidratos
DESARROLLO PARA Moraxella
1.- Sembrar en agar chocolate y agar nutritivo
4.- Realizar a partir de una colonia aislada, las pruebas de catalasa, oxidasa, tincin
de gram y DNasa
CUESTIONARIO
1.- Cul es la importancia clnica de Neisseria gonorrhoeae?
2.- Que tipo de medio es el Tayer Martin y porque?
3.- Menciona las especies de Neisseria y su comportamiento frente a los diferentes
carbohidrato
4.- Cul es la importancia clnica de Moraxella catarrhalis?
10

Q.F.B
PRCTICA 6 y 7
CARACTERIZACIN DE ENTEROBACTERIAS: COLIFORMES Y Proteus
NOTA: Estas prcticas se realizarn en dos sesiones diferentes.
OBJETIVO: Determinar por medio de ensayos de laboratorio las caractersticas
bioqumicas que definen a la familia Enterobacteriaceae
INTRODUCCIN: La familia Enterobacteriaceae est conformada por un nmero
importante de especies, que incluyen bacilos gramnegativos, con metabolismo
fermentador, anaerobios facultativos, catalasa positivos, oxidasa negativos, la mayora
son mviles, reducen los nitratos a nitritos, y no presentan condiciones nutritivas
exigentes, crecen muy bien en agar Mac Conkey.
Tienen como nicho ecolgico el tracto intestinal de gran variedad de seres vivos,
incluyendo al hombre, lo cual facilita su presencia prcticamente en todo lugar.
Solamente un nmero reducido de gneros son considerados patgenos primarios
como es el caso de Salmonella spp., Shigella spp., Yersinia spp. y algunas cepas de
E. coli. Las dems son parte importante de la microbiota intestinal, comportndose
como patgenos solo en el caso de pacientes inmunocomprometidos (patgenos
oportunistas).
Con el objeto de facilitar la caracterizacin de esta familia se ha dividido con base a la
capacidad de fermentar lactosa en dos grupos: lactosa (+), los que la fermentan y los
lactosa (-) los que no poseen el sistema enzimtico que les permite llevar a cabo el
proceso. Tambin es necesario el empleo de pruebas bioqumicas y fisiolgicas para
establecer el grupo bacteriano.
DESARROLLO:
1.- Sembrar por estra cruzada placas de Mac Conkey y SS
2.- Inocular pruebas bioqumicas
3.- Inocular galeras
4.- Incubar
5.- Leer morfologa colonial, pruebas bioqumicas, realizar tincin de gram, catalasa,
oxidasa
6.- Comparar resultados con tablas y establecer gnero y especie.
CUESTIONARIO
1.- Cul es la importancia de las enterobacterias?
2.- Qu gneros se encuentran en la familia Enteobacteriaceae?
3.- Las enterobacterias se han clasificado en dos grupos: lactosas (+) y lactosas (-),
que gneros se encuentran en cada uno de estos grupos?
4.- Menciona a las enterobacterias inmviles y a las que son capaces de producir H2S?
5.- Cules son las pruebas bioqumicas que permiten identificar a las enterobacterias
y menciona el fundamento de cada una de ellas?
b) Tincin de Gram
d) Pruebas bioqumicas
e) Establecer gnero y especie de la cepa problema
11

Q.F.B
PRCTICA 8
CARACTERIZACIN DE BACTERIAS DE LOS GNEROS Campylobacter Y
Helicobacter
OBJETIVO: Identificar a los microorganismos que pertenecen a los gneros
Campylobacter y Helicobacter
Los microorganismos del gnero Campylobacter son bacilos curvos gramnegativos,
con metabolismo inerte, catalasa y oxidasa positiva, movilidad positiva por la presencia
de 1 a 2 flagelos en cada polo crecen en condiciones de microaerofilia. Algunas
especies que se conocen de este gnero son C. jejuni, C. fetos y C. coli. Este gnero
se relaciona con problemas gastrointestinales.
Helicobacter tambin es un bacilo curvo gramnegativo, de metabolismo inerte,
catalasa y oxidasa positivas, movilidad positiva por la presencia de 4-8 flagelos
polares. El gnero lo comprenden ms de 24 especies pero Helicobacter pylori es la
especie tipo y se ha aislado de mucosa gstrica intestinal.
DESARROLLO:
1.- Sembrar medios selectivos para estos gneros como: Skirrow o Campy-Bap
5.- Leer morfologa colonial, pruebas bioqumicas, realizar tincin de gram, catalasa,
oxidasa
6.- Comparar resultados con tablas y establecer gnero y especie.
CUESTIONARIO
1.- Menciona la importancia clnica de estos dos gneros
2.- Dibuja tus observaciones de la tincin de gram
3.- Indica el resultado de tus pruebas bioqumicas y establece gnero y especie
12

Q.F.B
PRCTICA 9
CARACTERIZACIN DE BACTERIAS DE LOS GNEROS Streptococcus Y
Enterococcus
OBJETIVO: Caracterizar bioqumicamente a las especies ms importantes del gnero
INTRODUCCIN: Los miembros de este gnero se caracterizan por ser cocos
grampositivos agrupados en pares o cadenas, generalmente inmviles, catalasa
negativos en general, no esporulados, aerobios y anaerobios facultativos con
metabolismo fermentativo en el que producen cido lctico, frmico, etanol y CO2,
crecen ptimamente a 37 C.
Es el gnero de mayor inters mdico. Algunas especies forman parte de la flora
normal del hombre y otras estn relacionadas con cuadros clnicos de amigdalitis,
celulitis, erisipela, faringitis, rinitis, Hypoderma, fiebre escarlatina, sepsis puerperal,
neumona, endocarditis bacteriana, caries, meningitis, infecciones en vas urinarias y
heridas, fiebre reumtica, glomrulo nefritis y conjuntivitis purulenta.
METODOLOGA PARA LA IDENTIFICACIN DE Streptococcus
HEMLISIS
ALFA
Soluble en bilis
Sensible a optoquina
BETA
Sensible a bacitracina: S. pyogenes
NO HEMLISIS
(GAMA)
Crece en 6.5% NaCl
Ennegrece la bilis-esculina
CAMP +
Hidrlisis del hipurato +: S. agalactiae
S. pneumoniae
Grupo D
DESARROLLO:
1.- Sembrar por estra cruzada una placa de agar sangre carnero
2.- Realizar pruebas de CAMP
3.- Realizar pruebas de sensibilidad a bacitracina
4.- Realizar pruebas de sensibilidad a optoquina
5.- Realizar tincin de gram y observar al microscopio
6.-Incubar
8.- Interpretar resultados
13

Q.F.B
CUESTIONARIO
1.- Cul es la definicin del gnero Streptococcus?
2.- Cul es el fundamento de la prueba de CAMP?
3.- Para que se utiliza la prueba de sensibilidad a bacitracina y optoquina?
b) Tincin de Gram
d) Otras pruebas
e) Establecer si la cepa en estudio pertenece al gnero de Streptococcus, de ser
positiva la respuesta, menciona la especie
14

Q.F.B
PRCTICA 10
CARACTERIZACIN DE BACTERIAS DEL GNERO Staphylococcus
OBJETIVO: Observar las caractersticas ms relevantes del gnero, resaltando
aquellas que permiten su diferenciacin con otros cocos grampositivos de cercana
filiacin.
INTRODUCCIN: Este gnero est constituido por cocos grampositivos, agrupados
en racimos, catalasa positiva con metabolismo fermentativo. Son responsables
principalmente de infecciones supurativas de la piel y tejidos blandos. As como de
infecciones oportunistas. Se reconocen 3 especies: Sta. aureus, Sta. epidermidis, Sta.
saprophyticus.
DIFERENCIACION DE LAS ESPECIES DE Staphylococcus
PRUEBAS DE
LABORATORIO
Color de las colonias
Hemlisis en agar sangre
Crecimiento anaerobio
Coagulasa
Fermentacin de la glucosa
Fermentacin del manitol
Novobiocina
S. aureus
Amarilloblanco
+
+
+
+
+
Sensible
S. epidermidis S. saprophyticus
Blanco
+/+
+
Sensible
Blanco
+/+
Resistente
DESARROLLO:
1.- Sembrar por estra cruzada una placa de agar sangre y una de Sal y manitol
2.- Incubar
3.- Leer morfologa colonial y microscpica
4.- Realizar pruebas de identificacin de especie
CUESTIONARIO:
1.- Cul es la definicin del gnero de Staphylococcus?
2.- Qu prueba permite diferenciar entre el gnero de Streptococcus y
Staphylococcus?
3.- Cul es el fundamento de la prueba de coagulasa y cmo se realiza en el
laboratorio?
4.- Cules son los ingredientes del agar de sal y manitol y por qu es importante
utilizarlo para la identificacin de este gnero y no de otros?
b) Tincin de Gram
d) Otras pruebas
e) Establecer si la cepa en estudio pertenece al gnero de Staphylococcus, de ser
positiva la respuesta, menciona la especie.
15

Q.F.B
PRCTICA 11
CARACTERIZACIN DE BACILOS GRAM POSITIVOS: Bacillus Y Gardnerella
OBJETIVO: Identificar por pruebas de laboratorio a los integrantes de estos dos
gneros.
INTRODUCCIN: Los microorganismos del gnero Bacillus son bacilos grampositivos,
formadores de endosporas, catalasa positivos, son mviles excepto B. anthracis y hemolticos excepto B. anthracis. Este gnero es ubicuo en la naturaleza ya que posee
endosporas y stas pueden permanecer en campos contaminados por periodos de 10
hasta 30 aos. B. anthracis es el agente causal de ntrax en animales principalmente
vacas y ovejas.
Gardnerella vaginalis es un cocobacilo gram variable, fermentados catalasa, oxidasa y
movilidad negativos, requiere de medios especficos para crecer como medios
enriquecidos, en gelosa sangre humana produce -hemlisis, fermentar a la glucosa,
almidn y galactosa y es sensible al metronidazol. Esta involucrada con la vaginosis
bacteriana.
DESARROLLO PARA Bacillus e incubar a 37 C
1.- Inocular una placa de agar sangre carnero
2.- Inocular un tubo de caldo nutritivo e incubarlo a 42 C
3.- Inocular un tubo con gelatina e incubarlo a 4 C por 7 das
4.- Leer morfologa colonial, buscar hemlisis, hacer tincin de gram y Shaeffer-Fulton
DESARROLLO PARA Gardnerella
1.- Inocular una placa de agar chocolate
2.- Leer morfologa colonial, realizar catalasa, oxidasa y tincin de gram
3.- Inocular la colonia sospechosa en agar sangre humana y buscar -hemlisis
4.- Hacer pruebas de fermentacin de carbohidratos
CUESTIONARIO:
1.- Cul es el fundamento de la tincin de Shaeffer-Fulton y cmo se realiza en el
laboratorio?
2.- Menciona otras pruebas para diferenciar especies de Bacillus
3.- Cul es la importancia clnica de Gardnerella vaginalis?
b) Tincin de Gram
d) Otras pruebas
16

Q.F.B
PRCTICA 12
CARACTERIZACIN DE BACILOS CIDO ALCOHOL RESISTENTES (BAAR)
OBJETIVO: Conocer la forma de trabajo de los Bacilos cido alcohol resistentes en el
laboratorio mediante un seminario debido a no contar con las medidas de seguridad.
INTRODUCCIN: Este gnero incluye parsitos obligados, saprfitos y formas
intermedias que se diferencian por sus requerimientos nutricionales. Las cepas
saproftas crecen en sus sustratos que son muy simples, otras requieren de medios
complejos o suplementos para su crecimiento; y otras que no han sido cultivadas in
vitro
Las especies difieren en su actividad de amidasa, catalasa y otras actividades
enzimticas; todas son aerobias aunque algunas especies crecen nicamente por
debajo de la superficie del medio de cultivo. El contenido de lpidos de las clulas es
alto, especialmente en la pared celular, los pigmentos difusibles son raros.
Las micobacterias que ms frecuentemente causan tuberculosis en el humano son M.
tuberculosis y M. Boris, adems existen otras micobacterias como M. kansasii, M.
marinum, M. scrofulaceum, M. xenopi, M. avium, M. intracellulare y M. fortuitum.
CUESTIONARIO:
1.- Cul es la importancia clnica de las Mycobacterias?
2.- Cmo han sido clasificadas?
3.- Cmo se realiza y para que sirve la baciloscopia?
3.-Menciona al menos 5 pruebas de laboratorio para diferenciar especies as como su
fundamento.
17

Q.F.B
PRCTICA 13,14 Y 15
CARACTERIZACIN DE CLAMYDIAS
CARACTERIZACIN DE BACTERIAS SIN PARED CELULAR
CARACTERIZACIN DE BACTERIAS ANAEROBIAS
OBJETIVO: Conocer las pruebas de laboratorio que se realizan para estos
microorganismos mediante un seminario debido a no contar con los medios
necesarios.
CUESTIONARIO:
1.- Menciona las nuevas tcnicas para la identificacin de las Clamidias
2.- Cul es la importancia clnica de las bacterias sin pared celular y cmo se
diagnostican en el laboratorio?
3.- Cmo se pueden generar las condiciones de anaerobiosis en el laboratorio?
4.-Menciona algn gnero anaerobio estricto y su importancia clnica.
18

Bacterias no fermentadoras

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4.- Cul es el fundamento de la prueba de oxidasa y cmo se realiza en el

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Sensible a bacitracina: S. pyogenes

Fac. Cs. Qs. Dpto. De MICROBIOLOGA

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