Clase terica

Gentica y Experiencia I

Dr. Pablo H. H. Lopez

Ctedra de Psicobiologa Experimental

2015

Dicotomas
genotipo ambiente
innato adquirido
naturaleza cultura
genes conducta
genes

genes

ambiente

conducta ambiente

ambiente

conducta
2

Mensaje (prrafo)
dentro de una
pgina:
instruccin para
una protena

El genotipo es el contenido gentico de un individuo, en forma de ADN.

El fenotipo es la expresin del genotipo en un determinado ambiente.

Genoma humano completo (2003)

Secuencia del ADN de todos los genes humanos

El ADN es una doble hlice formada

de polmeros de nucletidos
El ADN y protenas llamadas histonas estn enrollados y
empaquetados para formar los cromosomas
La cromatina es el conjunto de ADN, histonas y protenas
no histnicas que se encuentra en el ncleo de las clulas
eucariotas y que constituye el cromosoma de dichas clulas.

ADN (gen)

ARN
preliminar
con intrones

Exones / Intrones
Los exones no representan
ms del 2% o 3% del ADN
ARN
maduro
sin intrones

Los exones se pueden transcribir de distintas formas (ej. 1-2-3

omite el 4; 1-4 omite el 2 y 3; etc), lo que resulta en varias
protenas posibles a partir de un mismo gen. Notar que esto
derrumb el dogma previo de la gentica:
1 gen = 1 protena
7

Todas las clulas del cuerpo poseen

la misma informacin gentica
Cerebro

Intestino

Hgado

Rin

Lo que las diferencia es la expresin

diferencial de sus genes
8

Regulacin de la expresin gnica

Gen/Genes

Fenotipo

Alelos: formas alternativas de un gen

Relacin alelos y fenotipo
recesivo vs dominante
Variaciones de alelos: color de
ojos

Un alelo >> muchos fenotipos

Varios alelos distintos >> 1
fenotipo (fenilcetonuria)

10

FENOTIPO

GENOTIPO
1

Gen

Protena

FENOTIPO

ENDOFENOTIPO

GENOTIPO

FENOTIPO

11

MODELO CLSICO (cobayo, rata)

Resalta al gen Sry como iniciador de un proceso complejo en el que
intervienen influencias tanto genticas como ambientales

Genes Gnadas Hormonas (fetal / post-natal) Desarrollo dimrfico

Ovarios
XX
XY

Testculos
Sexo gonadal

Sexo cromosmico

MODELOS ANIMALES: cobayo y rata

Todos estamos genticamente programados
para desarrollar un cuerpo femenino. En los
varones este programa es anulado.

Ambiente
hormonal:
Estrgenos
Andrgenos
Sexo hormonal
rganos sexuales (internos y
externos

Sistema nervioso
Conducta
12

Fenotipo sexual

Esquema del cromosoma sexual Y

y ubicacin del gen Sry

Ratn de la derecha: los genitales externos de un ratn XX

(genticamente hembra) pero al cual se le insert el gen Sry
y fue convertido as en un animal transgnico, son genitales
de macho, indistinguibles de los genitales de un macho XY
normal (ratn de la izquierda). Koopman et al., 1991

13

Sexo del cocodrilo y del pez payaso: depende del ambiente

Pelaje de los conejos

de los Himalayas
depende del ambiente
(temperatura)

14

FENOTIPOS MONOGNICOS Y MULTIGNICOS

1 locus, pero posibles
numerosos alelos
rasgo monognico
monognica = mendeliana =
enfermedades de un solo gen

Varios loci. Diversos alelos

El
fenotipo puede
consistir en un rasgo
claramente detectable
y categorizable (no
siempre)

rasgo polignico

polignicas = multifactoriales = complejas

Los fenotipos suelen

extenderse en un
contnuo, sin formas
discretas claras
15

OMS (2005):

OMS

Los conocimientos de genmica obtenidos en las dos ltimas dcadas ha

hecho evidente que la categora tradicional llamada "enfermedad
gentica" representa solo aquellos trastornos en los que la contribucin
gentica es particularmente notable, pero en realidad las enfermedades
se pueden ordenar a lo largo de un espectro que representa la
contribucin variable de genes y el ambiente.
-- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -

Trastornos genticos:
Trastornos monognicos (ej. fibrosis qustica, hemofilia)
Trastornos cromosmicos (ej. sndrome de Down)
Trastornos multifactoriales (polignicos, con fuerte interaccin de
factores genticos y ambientales, no se han considerado
tradicionalmente como trastornos genticos:
Malformaciones congnitas (ej. defectos del tubo neural)
Trastornos con predisposicin gentica (ej. enfermedades crnicas
[hipertensin, diabetes, depresin, trastorno bipolar]
16

Varios loci. Diversos alelos

rasgo polignico

polignicas = multifactoriales = complejas

Los fenotipos suelen

extenderse en un
contnuo, sin formas
discretas claras

Problema: entender de qu manera los fenotipos complejos dependen de la

interaccin entre genes y ambiente
Estudios de gemelos y adopcin
Estudios de ligamiento (linkage studies)
Estudios de asociacin (association studies)
Estudios de asociacin con rastreo genmico amplio (gene-wide association
studies). Genmica con chips de ADN (DNA microarrays]
17

Patrones comportamentales que tienen un componente gentico

pero en donde la influencia del ambiente es importante

Probabilidad de riesgo de padecer esquizofrenia en relacin al

grado de parentesco con enfermos de esquizofrenia.

18

AMBIENTE Y MANIFESTACIN DE FENOTIPOS 1

Lo que nos interesa es el FENOTIPO (ej. salud / enfermedad)

19

Un nico gen modifica el fenotipo de

conducta inducido por el ambiente

C. Elegans

Conducta de alimentacin inducida por la presencia de alimento

20

Fenilcetonuria
Ausencia de fenilalanina en la dieta

Dieta rica en fenilalanina

POLIFENISMO: significa fenotipos
alternativos irreversibles provocados
por el ambiente. El polifenismo es
dado por el ambiente. (el
polimorfismo es dado por el genotipo)

Sin anomalas, o
con anomalas
leves

Retraso de las
habilidades sociales
Tamao de la cabeza
considerablemente por
debajo de lo normal
Hiperactividad
Movimientos
espasmdicos de brazos y
piernas
Retraso mental
Convulsiones
Erupcin cutnea
Temblores
Postura inusual de las
manos
21

Fenilcetonuria

Conducta
materna
Cambio
epigentico

Hijo

La epigentica hace referencia al estudio de todos aquellos factores no genticos

que intervienen en la determinacin del desarrollo de un organismo, desde el vulo
fertilizado hasta su senescencia. Es la regulacin heredable de la expresin gnica
sin cambio en la secuencia de nucletidos.
22

Regulacin de la expresin gnica

Gen/Genes

Fenotipo

23

Preguntas de la epigenmica
La pregunta ms general es cmo se activan y desactivan los genes
frente a las distintas seales de inters, durante el desarrollo, la accin
de estmulos ambientales de distinto tipo (ej. estresores), a causa del
efecto de frmacos (tanto en la teraputica como en la adiccin a
drogas), etc.
Ofrece un marco conceptual para entender las diferencias observadas
en gemelos idnticos (en conducta, personalidad, enfermedades [ej.
enfermedades mentales]), y permite hacerse preguntas sobre la
etiologa de enfermedades mentales o de otro tipo.

Cmo se transmiten caractersticas fenotpicas de una generacin a

otra que fueron inducidas en una de las generaciones por efectos que
no alteran la secuencia del ADN.

24

25

26

Epigenetic programming by maternal behavior

Ian C G Weaver1,2, Nadia Cervoni3, Frances A
Champagne1,2, Ana C DAlessio3, Shakti Sharma1,
Jonathan R Seckl4, Sergiy Dymov3,Moshe Szyf2,3 &
Michael J Meaney1,2
Nature Neuroscience 2004

Un trabajo de investigacin cientfica sobre la interaccin

genes-ambiente. En este caso se muestra de qu manera el
ambiente puede producir cambios epigenticos que modulan
la expresin de un gen importante para la respuesta al estrs.

27

Comportamiento maternal
Contactos intermitentes
Cuidado de crias
Acicalamiento y lamida

pup licking and grooming (LG) and arched-back nursing (ABN)

Madres con
Bajo (low)-LG-ABN.

Madres con
Alto (high)-LG-ABN

28

Sensibilidad de cras al stress

Madres con
Bajo (low)-LG-ABN.

respuesta modesta
al stress

Madres con
Alto (high)-LG-ABN.

Alta respuesta
al stress

29

Liu D et al science 277 1997

Sensibilidad de cras al stress

Madres con
Bajo (low)-LG-ABN.

respuesta modesta
al stress

Madres con
Alto (high)-LG-ABN.

Alta respuesta
al stress

30

Liu D et al science 277 1997

Expresin aumentada del mRNA del receptor

de glucocorticoides (GR) en el hipocampo

WISH

Alta expresin del GR en el hipocampo de cras provenientes de

madres con buenos cuidados maternos (high-LG-ABN mothers)

31
Liu D et al science 277 1997

Efectos epigenticos duraderos del estilo de conducta materna (rata)

Manipulacin
de ratas
neonatales
(per. crtico)

AMBIENTE
Estilo
materno:
Madres
cuidadosas

Mejor regulacin de hormonas que participan en la

respuesta al estrs.
conducta exploratoria

rpta a estm estresores

EPIGENOMA

Rcp glucocorticoides
en hipocampo de la
cra

Mejor regulacin de
hormonas que
participan en la
respuesta al estrs

Influencia de genes maternos + respuesta de las cras

32

Esquema del mecanismo postulado

La conducta de las madres LG-ABN+ produce lo siguiente:

actividad serotoninrgica en el hipocampo de las cras

cAMP y de la protena cinasa dependiente de cAMP
Expresin del factor de transcripcin NGFI-A (prot A inducible por NGF)
Unin de NGFI-A al 1er exn del RGC
Expresin del RCG
El estado de metilacin del
sitio de unin de NGFI-A es
plstico perinatalmente.
La metilacin impide la
unin de NGFI-A

NGFI-A

NGFI-A
exn del RGC

exn del RGC

H
H

La acetilacin de las
histonas abre el ADN y
permite un mejor acceso

33

Esquema del mecanismo postulado

34

NGFI-A: Protena A inducible por el Factor de Crecimiento Neural.

Por qu tu ADN no es
tu destino
Enero 2010

35

Mapeo del exn 1 del gen del receptor

de glucocorticoides

NGFI-A: Protena A inducible por el Factor de Crecimiento Neural.

CpG: doblete de nuclotidos CG, blancos de metilacin.

36

Mapeo del promotor del gen del

receptor de glucocorticoides
GR EXON 17 promoter sodium bisulfite mapping

NGFI Binding site

Crias de madres
con high-LG-ABN
Cras de madres
con low-LG-ABN

muy baja metilacin en la regin 5 CpG

de union al factor NGFI-A
alta metilacin en la regin 5 CpG
de unin al factor NGFI-A

37

Madres sustitutas y marcas epigenticas

El patter de metilacin de DNA es establecido a travs de una

programacin dependiente del comportamiento animal.
38

El efecto del cuidado maternal en la

metilacin del DNA es sensible al tiempo

El pattern de metilacin del DNA se establece durante la primera

semana de vida y permanece constante durante la adultez
39

Resumen 1
El cuidado maternal puede producir una metilacin diferencial
durante la primer semana de vida la cual es mantenida en la adultez
Cuidado maternal

High-LG-ABN

No hay metilacin en el
sitio de unin de NGFI-A

Respuesta moderada
al stress

Low-LG-ABN

Alta metilacin en el
sitio de unin de NGFI-A

Alta respuesta
al stress

40

Por qu tu ADN no es
tu destino
Enero 2010

41

Caracterizacin de la cromatina y el sitio de

unin de NGFI-A al promotor del GR
ChIP
PCR
Southern

Histone H3-K9 acetylation associated with greater binding of NGFI-A protein to

the hippocampal exon 17 GR promoter in the adult offspring of high-LG/ABN
42

Es reversible la programacin epigentica?

ChIP
PCR
Southern

Un inihibidor especfico de las deacetilasas de histonas (TSA) revierte el efecto

del pobre cuidado maternal sobre la metilacin de DNA, acetilacin de histonas y
la unin de NGFI-A al promotor del gen del receptor de glucocorticoides.
43

Resumen 2
GR Locus Exon17
High-LG-ABN GR Exon17
(metilacin baja)

Low-LG-ABN GR Exon17
(metilacin alta)

Alta acetilacin de la histona H3 K9

Alta unin del NGFI-A al promotor
Baja acetilacin de la histona H3 K9
Baja unin del NGFI-A al promotor

Reversin del efecto epigentico asociado con el cuidado maternal

Inhibidor
TSA

HDAC
Low-LG-ABN GR
Disminucin de la metilacin

Alta unin de NGFI-A al

promotor del gen del GR

44

Efecto de la inhibicin de las deacetilasas en la

respuesta del eje HPA al stress

La inhibicin del proceso de deacetilacin produce una respuesta moderada al stress

45

Conclusin
Cuidado maternal

Low-LG-ABN

High-LG-ABN
HACT

HDAC

H3
CpG me

H3
CpG me

H3
CpG me

Baja expresin del receptor GR

NGFI

H3
CpG me

46
Alta expresin del receptor
GR

Conclusin
Cuidado materno

Low-LG-ABN

Baja expresin del

receptor GR

High-LG-ABN

Alta expresin del

receptor GR

STRESS

corticoides

Persistencia del stress

corticoides

Control del stress

47