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7 INFORME DE BIOQUIMICA
PRACTICA DE
LIPIDOS
DOCENTE : Cordero Azabache Jorge Eduardo
INTEGRANTES:
SECCION:
BI10
03
COMENTARIOS
A O-
2013
Informe de Bioqumica
TABLA DE CONTENIDO
1.
INTRODUCCION
2.
OBJETIVOS
2.1 Objetivo General
2.2 Objetivos Especficos
3. MARCO TEORICO
3.1 Lpidos
3.2 Prueba de solubilidad
3.3 Tincin con Sudn III
3.4 Obtencin de lpidos en cerebro de pollo
3.5 Prueba de la emulsin.
4.
METODOLOGIA/TECNICAS
4.1 Lugar de ejecucin
4.2 Instrumental
4.3 Procedimientos
5.
RESULTADOS
6.
DISCUSIN
7.
CONCLUSIONES
8.
RECOMENDACIONES
9.
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
9.1 Bibliografas
9.2 Anexos
10. CUESTIONARIO
|Pgina
Informe de Bioqumica
INTRODUCCI
ON
|Pgina
Informe de Bioqumica
2. OBJETIVOS
2.1 Objetivo General
|Pgina
Informe de Bioqumica
MARCO TERICO
LPID
OS
Los lpidos son un grupo heterogneo, son propios de los seres
vivos, o derivados de estos. Van desde ser fuente de energa
hasta la formacin de membranas. Aun as, los lpidos tienen una
definicin qumica muy general: son molculas orgnicas solubles en
alta proporcin en disolventes no polares como ter di etlico,
cloroformo, tetra cloruro de carbono o benceno. Estos disolventes se
usan para extraer lpidos de sus vecinos ms polares: sales,
protenas,
carbohidratos
y cidos nucleicos. Un componente
estructural clave de todos los lpidos es la elevada proporcin de
enlaces carbono carbono y carbono hidrgeno. Esto hace que estos
compuestos sean hidrofbicos (temerosos del agua) en vez de
hidroflicos, como lo son casi todos los carbohidratos, protenas y
cidos nucleicos. Los procesos oxidativos de las grasas producen
ms caloras que los hidratos de carbono y protenas. Las
funciones ms importantes de los lpidos son servir como vehculo de
vitaminas liposolubles y como precursores de hormonas y otras
molculas de sealizacin celular. Existe la clasificacin de lpidos
polares y no polares, lpidos saponificables y no saponificables, lpidos
simples y complejos.
Lpidos no polares: son aquellos con poco o ningn enlace polar.
Como por ejemplo las grasas y aceites, las ceras y ciertos
esteroides.
Lpidos polares: tienen enlaces tanto polares como no polares, lo
cual permite una
solubilidad limitada en disolventes polares y no polares.
Ejemplo los fosfo- y esfingolpidos.
Lpidos saponificables: son aquellos que pueden sufrir hidrlisis
en presencia de una base como NaOH o KOH. Las grasas, aceites y
ceras, as como los fosfo- y enfingolpidos, son saponificables.
Lpidos no saponificables: no se hidrolizan en presencia de base.
Casi todos los
esteroides son no saponificables.
estructuras; se pueden
descomponer en varios compuestos ms sencillos. Como
por ejemplo los esfingolpidos.
Los lpidos en forma de triglicridos son clave en el metabolismo,
como sustancias fundamentales para el almacenamiento de energa
en el organismo. Suponen una
|Pgina
Informe de Bioqumica
6 |Pgina
Informe de Bioqumica
Distribucin
metabolismo
7 |Pgina
Fuent
es:
Qumica organica: conceptos y aplicaciones Philip S. Bailey,
Christina A. Bailey
pg. 476
Bases de la alimentacin humana Vctor Manuel Rodrguez
Rivera, Edurne Simn
Magro 1 ed., pg 315
Nutricin diettica para tecnlogos de alimentos Rafael
Moreno Rojas pg. 63
METODOLO
GA
Materiales:
MATERIALES
DE
LABORATORIO
Vaso
precipitado de
250
mL.
Pipetas
graduadas
5 tubos de
ensayo
Estufa de
cultivo
IMAGE
N
DESCRIPCIN
Recipiente cilndrico
de vidrio fino que
se utiliza muy
comnmente en el
laboratorio, sobre
todo, para preparar
o
calentar
sustancias y
Un instrumento
volumtrico de
laboratorio que
permite medir
alcuota de
lquido con
bastante precisin.
Suelen ser de
vidrio.
Son de forma
cilndricas
de vidrio por lo
general,
cerrado por
un
extremo, hay de
varios
tamaos
.
Se coloca en la
Instrumento que
sirve para poder
calentar
compuestos o
ponerlos en bao
mara.
Balanza
electrnica
Gradill
a
Instrumento que
nos sirve para
poder triturar.
Mortero con
Pistn
Tipo de
sujecin
ajustable,
generalmente de
metal, que forma
parte del
equipamiento de
laboratorio,
mediante la cual se
pueden sujetar
Es una mquina
que
pone en rotacin
una muestra para
separar por
fuerza centrfuga
sus componentes
o fases
(generalmente
Pinz
a
Centrfuga
MUESTRAS
5 grs. de cerebro
de pollo
IMAGE
DESCRIPCIN
El cerebro de pollo en
nuestro informe es
utilizado para la
obtencin de lpidos.
Es
una
secrecin nutritiva de
color
blanquecino
opaco
producida por las
glndulas
mamarias
de
las hembras
de
Lech
e
Producto utilizado
para limpieza e
higiene de las
personas. Producido
por la glicerina.
Jabn lquido
Aceit
e
REACTIVOS
Acetona
IMAGE
N
DESCRIPCIN
Compuesto qumico
que es miscible en
el agua.
10 | P g i n a
ter
de
petrl
eo
Agua
destila
da
Etanol
95%
Sudn III
Mezcla lquida de
diversos compuestos
voltiles, de los
hidrocarburos
saturados o alcanos, y
no a la serie de los
teres como
errneamente indica su
nombre.
Se emplea
Es indispensable para
lavar, y dilatar todos los
licores que se hayan de
ensayar, como tambin
los cuerpos slidos,
polvos, sales.
Conocido como alcohol
etlico, es un alcohol que
se presenta en
condiciones normales
de presin y temperatura
como un lquido incoloro e
inflamable con un punto
de ebullicin de 78 C.
Es un tinte soluble en
grasa usado para
manchar de triglicridos
en secciones congeladas,
y algunos lpidos y
lipoprotenas.
Procedimientos:
EXPERIMENT
O 1:
PRUEBA DE
1.- Colocar en un tubo de ensayo 2
mL. De aceite y aadir 2 mL. De
un disolvente apolar (por ejemplo
cloroformo o ter de petrleo).
EXPERIMENT
O 2:
TINCIN CON
1.- Poner 2mL. De aceite en un
tubo, aadir 2mL. De agua y dejar
reposar. Una vez formadas las dos
fases, dejar caer unas gotas de
Sudn III y agitar. Dejar de
reposar el tubo y anotar los
resultados.
EXPERIMENTO 3:
PRUEBA DE
EMULSIN
1.- Poner 2 mL. de aceite en
un tubo, aadir 10 mL. de
agua,
agitar
fuertemente,
espesar unos minutos y anotar
lo sucedido.
EXPERIMENT
O4
OBTENCIN DE LPIDOS EN
CEREBRO DE POLLO
1.Se
pesan
los
frascos,
etiquetndolos como fraccin 1
ala 3. Solo se pesa en papel
aluminio 2.5 gramos de cerebro,
este se tritura y se coloca en un
tubo de centrfuga, adicionndole
acetona, 1 mL. por cada 0.5 grs.
de
cerebro, se homogeniza el
tejido por 1 minuto y se centrifuga
a 3000 rpm. Se decanta el
sobrenadante en el frasco Fraccin
I, al residuo se le aade 2 mL. de
acetona
y
se
homogeniza
nuevamente, se centrifuga y se
vuelve a colocar el sobrenadante
con la Fraccin I, (fraccin I es
colesterol).
sobrenadante se colecta en el
frasco de la
Fraccin III, la cual vienen hacer
glucolpidos, y se har otra vez la
3.- Se calcula el volumen de la extraccin con 3 mL. De etanol.
Fraccin A y
se agrega 2 volmenes de acetona,
se homogeniza y se centrifuga (al
mismo
tiempo
y
rpm);
el
sobrenadante se coloca con la
Fraccin I; al residuo se adiciona 3
mL. De ter y se agita por 4
minutos y despus se centrifuga,
el sobrenadante se coloca en el
frasco Fraccin II (fosfolpidos), esta
extraccin se repite dos veces
4.- En cada frasco se coloca dos
perlas de ebullicin y se evapora a
sequedad todos los frascos sobre la
parrilla, no deben quemarse los
residuos. Por ltimo se pesa los
frascos nuevamente y se calcula la
cantidad obtenida de cada fraccin.
RESULTAD
OS
RESULTADO DEL
EXPERIMENTO 1:
PRUEBA DE
DESCRIPCI
N
Podemos notar que en el tubo
donde se encuentra el aceite y el
disolvente
apolar
(ter
de
petrleo) se ha diluido por
completo.
Y en el segundo tubo donde hay
aceite y
agua se ha formado dos fases. El
aceite se encuentra en la parte
superior porque posee una menor
densidad que el agua.
DESCRIPCIN
RESULTADO DEL
EXPERIMENTO 3:
PRUEBA DE
EMULSIN
1
2
3
DESCRIPCIN
28.90
29.57
0.67
27.98
29.15
1.17
28.92
28.99
0.07
Rendimiento (gr.) =Peso final del frasco Peso inicial del frasco
Luego de realizar todos los procedimientos obtuvimos como resultado
que
en 2.5gr de cerebro de pollo se puede encontrar
aproximadamente 0.67 gr de Colesterol, 1.17 gr de Fosfolpidos y
0.07gr de Glucolpidos. Las fracciones varan de acuerdo a la cantidad
de cerebro utilizado, el peso del tubo de centrfuga y sobre todo de un
procedimiento correcto y minucioso
M T O D O S
MATERIALES:
-Muestra
Tinta china roja.
Aceite de oliva.
-Material de vidrio
Tubos de ensayo
Gradilla
Varillas de vidrio
Mechero
Cocina elctrica
Rejilla de asbesto por cocina
Vasos de precipitado de 150 250 ml
Pipetas
-Reactivos
Solucin de NaOH al 20%
Solucin de Sudn III
ter, cloroformo o acetona
I V . M E T O D O L O G A
SOLUBILIDAD:
Discusin de Resultados 1:
En cuanto al procedimiento de la prueba de solubilidad, observamos que es el mismo y que
adems se usan las mismas cantidades, en cuanto a los resultados observamos que tambin
son equitativos, puesto que en la mezcla aceite con sustancia apolar (ter de ptroleo) se
form un sistema unifsico (una mezcla homognea) y en el caso agua aceite un sistema
difsico (dos fases, lquidos inmiscibles), as como lo observamos en la fotografa del
informe discutido. Entonces llegamos a la conclusin que nuestros resultados son vlidos
puesto que los procedimientos son correctos.
Informe de Bioqumica
M T O D O S
MATERIALES:
-Muestra
Tinta china roja.
Aceite de oliva.
-Material de vidrio
Tubos de ensayo
Gradilla
Varillas de vidrio
Mechero
Cocina elctrica
Rejilla de asbesto por cocina
Vasos de precipitado de 150 250 ml
Pipetas
-Reactivos
Solucin de NaOH al 20%
Solucin de Sudn III
ter, cloroformo o acetona
I V . M E T O D O L O G A
TINCIN:
Disponer en una gradilla 2 tubos de ensayo colocando en ambos 2mL de aceite.
Aadir a uno de los tubos 4-5 gotas de solucin alcohlica de Sudn III
Al otro tubo aadir 4-5 gotas de tinta roja.
Agitar ambos tubos y dejar reposar.
Observar los resultados: en el tubo con Sudn III todo el aceite tiene que aparecer
teido, mientras que en el tubo con tinta, sta se ir al fondo y el aceite no estar
teido.
20
|Pgina
Informe de Bioqumica
Discusin de Resultados 2:
En cuanto a los materiales, notamos que usaron adems de Sudn III, tinta roja
para detectar la presencia de lpidos, adems hicieron uso de dos tubos; nosotros hicimos
uso de adems de Sudn III leche, agua y HCl y nosotros solo uno, por lo que es evidente
que los procedimientos son distintos. Respecto a los resultados comprobamos en ambos
informes que el Sudn III tie a los lpidos de color rosa a rojo oscuro, por lo cual su
deteccin es fcil, la tinta roja no tie a los lpidos; adems en nuestros resultados
mostraron un sistema trifsico compuesto en la parte superior por las grasas teidas por el
Sudn III, en la parte intermedia el agua y lactosa disuelta, y en la parte inferior las
protenas desnaturalizadas de la leche, los ltimos dos se deben a la reaccin producida por
el HCl y calor.
La explicacin a la formacin de las tres fases es porque existe diferente densidad de las
sustancias, donde el aceite es ms ligero que el agua y lactosa, y las protenas
desnaturalizadas presentan mayor densidad que los dos anteriores.
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|Pgina
Informe de Bioqumica
OBJETIVOS
Trataremos de obtener la totalidad de los lpidos de cerebro y fraccionarlos de acuerdo a su
solubilidad en diferentes solventes orgnicos.
MATERIAL
ml
ml
Biolgico
1 cerebro de pollo (2.5 gramos)
Reactivos
Acetona
ter
Etanol 95%
METODOLOGA
Se pesan los frascos, etiquetndolos como fraccin 1 a la 3. Solo pesaremos en papel
aluminio 2.5 gramos de cerebro, este se picara y se colocara en un tubo de centrfuga,
adicionndole acetona, 1ml por cada 0.5 g. de cerebro, se homogeniza el tejido por 1 minuto
y s centrfuga a 3000 rpm. Se decanta el SN en el frasco fraccin I, y al residuo se le
aadir 2 ml de acetona y se homogeniza nuevamente, se centrfuga y se vuelve a colocar el
SN con la fraccin I, (fraccin I es colesterol).
Por 5 minutos se dejara el residuo a temperatura ambiente para evaporar la acetona. Se
adicionan 3 ml de ter al residuo, esto s centrfuga por 2 minutos a 3000 rpm; el SN se
colecta en otro tubo de centrfuga con la leyenda fraccin A, esto contiene fosfolpidos,
nuevamente se har otra extraccin con ter y se junta el SN en la fraccin A. Ahora
quitaremos los residuos de ter dejando que le d un poco de aire, entonces se adicionaran 3
ml de etanol al 95% caliente (70), agitando y despus centrifugando (2 min. a 3000
rpm), el SN se colecta en el frasco de laFraccin III, la cual son glucolpidos, y se har otra
vez la extraccin con 3 ml de etanol.
22
|Pgina
Informe de Bioqumica
23
|Pgina
Informe de Bioqumica
Como se puede observar en la tabla 2, el contenido de los diversos lpidos varia en un cierto
rango, es por eso que se necesita sacar el promedio del contenido y sumar lo que se localiza
tambin en la materia gris como en la blanca, dado que en la obtencin se utilizaron
ambas. Los valores tericos de la tabla 2 son solo promedios de la variacin en el contenido
de los mismos, por lo que el resultado del colesterol se encuentra dentro del rango aunque el
porcentaje parece que excede el contenido propio.
Discusin de Resultados 4:
Los materiales y la metodologa utilizada en este informe y el nuestro es el mismo,
con excepcin de que nosotros solo calculamos el porcentaje de cada una de las
fracciones (Colesterol, Fosfolpidos y Glucolpidos) y no calculamos los valores de la tabla 2.
Respecto a los resultados existe una variacin en las cantidades del peso inicial y final del
frasco, por ende el rendimiento es diferente en ambos informes. Las diferencias de pesos se
debe al peso del tubo de centrifuga utilizado.
Entonces llegamos a la conclusin de que nuestro experimento fue correcto.
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|Pgina
Informe de Bioqumica
CONCLUSIO
NES
Con la prueba de solubilidad podemos concluir que el agua y
Informe de Bioqumica
Actividades
complementarias
CUESTIONA
RIO
Indica las distintas funciones de los lpidos
en los seres vivos.
1.
adems de ser
26
|Pgina
Informe de Bioqumica
4.
Inicio
2.1-GENERALIDADES.
Los cidos grasos esenciales (AGEs) son componentes
nutricionales vitales ya que son necesarios para llevar a cabo
innumerables funciones. He distinguen dos formas de
cidos grasos alimentarios, Omega 3 y Omega 6.
Omega 3: a este grupo pertenece el cido alfa linolnico;
otros cidos grasos pertenecientes a la forma Omega 3 son el
cido eicosapentanoico (AEP) y el cido docosahexaenoico
(ADH), ambos se sintetizan con la intervencin del cido alfa
linolnico.
Dr Illingworth (Oregon Health Services University):...los cidos
grasos omega 3 son molculas de cadena larga procedentes del
cido linolnico...cuando los animales consumen y metabolizan
vegetales ricos en cido linolnico, dan lugar a la sntesis de
Omega 3.
Omega 6: La forma ms comn de Omega 6 es el cido
gamma linolnico (AGL). Este cido graso facilita la prdida de
peso en los pacientes con sobrepeso, inhibe la agregacin
plaquetaria (coagulacin anormal), mejora los sntomas de
depresin y esquizofrenia, alivia los sntomas del sndrome
premenstrual, es beneficioso en el manejo de la adiccin al
alcohol.
5.
Encontramos los
siguientes tipos:
- Glicerolpidos
a) Gliceroglucolpidos
b) Glicerofosfolpidos (fosfolpidos)
- Esfingolpidos
a) Esfingoglucolpidos
b) Esfingofosflpidos
27 | P g i n a
Informe de Bioqumica
1.- Glicerolpidos.
Poseen dos molculas de cidos grasos mediante enlaces ester a dos
grupos alcohol de la glicerina (posiciones
y
). Segn sea el
sustituyente unido al tercer grupo alcohol de la glicerina se forman
los:
a) Gliceroglucolpidos. Si se une un glcido. Lpidos que
se encuentran en membranas de bacterias y clulas
vegetales.
b) Fosfolpidos. Se une el cido fosfrico y constituye el cido
fosfatdico.
2.- Esfingolpidos. Todos ellos poseen una estructura derivada de la
ceramida (formada por un cido graso unido por enlace amida a la
esfingosina)
Pueden ser de dos clases:
a)Esfingoglucolpidos. Resultan de la unin de la ceramida
y un conjunto de monosacridos como la glucosa y galactosa
entre otros.
b) Esfingofosfolpidos. El grupo alcohol de la ceramida se une a
una molcula
de cido ortofosfrico que a su vez lo hace con otra de etanolamina
o de colina.
6.
Las ceras son steres de los cidos grasos con alcoholes primarios
de cadena larga y responden a la formula general:
28
|Pgina
Informe de Bioqumica
Limone
no
El retinol o vitamina A1 y el deshidro-3-retinol o vitamina A2 son
diterpenos parcialmente ciclados, mientras el fitol es un diterpeno lineal.
29 | P g i n a
Informe de Bioqumica
Vitamina A o
retinol
Son tambin terpenoides la vitamina E o -tocoferol y los derivados
quinnicos, como las ubiquinonas, la plastoquinona y las vitaminas K.
Vitamina E o tocoferol
Vitamina K1o
filoquinona
Los carotenoides son derivados poliisoprnicos de 40 tomos de
carbono (tetraterpenos). Por ejemplo, el
-caroteno:
30
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Informe de Bioqumica
Colesterol
Estradiol
Progesterona
Testosterona
31
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Informe de Bioqumica
Aldosterona
Cortisol
32
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Vitamina D3 o
colecalciferol
sn-glicerol-3-fosfato
cido fosfatdico
1,2-diacil-sn-glicerol-3-fosfato
33
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Informe de Bioqumica
Familia
Grupo A
Fosfatidilcolinas
(lecitinas)
Fosfatidiletanolaminas (cefalinas)
Fosfatidilser
inas
colina
etanolamina
serina
Fosfatidilinositoles
mioinositol
Fosfatildilglic
eroles
glicerol
Cardiolipinas
Fosfatidilglicerol
34
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Informe de Bioqumica
Esfingosina
Ceramida
Glucocerebrsido
Galactocerebrsido
Sulftido
35
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