Prctico N 3

Nombre: Anala Bertn.

Grupo: 6 Fsico- Matemtico.
Subgrupo: A
Fecha de inicio: 18/04/2013
Fecha de entrega: 25/04/2013
Objetivo: Establecer reacciones de coloracin y
precipitacin.

Materiales

Tubos de ensayo.

cido actico.

Un huevo.

Solucin de cloruro de sodio.

Solucin de NaOH al 40%

solucin.

Agua destilada.

Goteros.

Solucin de sulfato cprico.

Pipetas.

cido ntrico concentrado.

Peras de goma.

cido sulfrico concentrado.

Mecheros.

Acetato de plomo.

Pinzas.

Alcohol etlico.

Papel de filtro.

cido pcrico.

Embudo.

Reacciones de coloracin
1.

Reaccin de Biuret

- Preparar la solucin de protena en agua colocando la clara en

aproximadamente 250 mL de agua agitando enrgicamente para luego filtrar
dejndolo para su uso posterior.
- Colocar 3 mL del filtrado en un tubo y aadir 0,5 mL de solucin de NaOH al
40%.
- Agitar suavemente.
- Agregar 3 o 4 gotas de sulfato cprico y volver a agitar. Anotar las
observaciones.

2.

Reaccin Xantoproteica

- En un tubo de ensayo colocar 2 mL del filtrado y aadir 1 mL de cido ntrico

concentrado, calentndolo con cuidado durante un minuto.

- Dejar enfriar y aadir lentamente 1 o 2 mL de solucin de NaOH al 40 %.

- Observar y anotar el cambio.

3.

Reconocimiento de aminocidos con azufre

- Colocar 3 mL de filtrado en un tubo de ensayo.

- Agregar 3 o 5 gotas de solucin de acetato de plomo al 5% y una cantidad de
NaOH al 40% como para redisolver el precipitado que se forma.
- Hervir y si hay un aminocido que contiene azufre se encontrar una
coloracin negra de sulfuro de plomo.

4.

Reaccin de Hopking- Cole

- Colocar 5mL del filtrado.

- Agregar unas gotas de cido sulfrico y unas gotas de cido glioxlico.
- Agitar y luego por la pared del tubo, lentamente, agregar ms cido sulfrico
que ser llevado al fondo con pipeta.
- Observar y anotar.

Reacciones de precipitacin
1.

Accin de calor

- Colocar en un tubo de ensayo 3 mL del filtrado. Agregar 5 gotas de cido

actico diluido.
- Agregar 1 o 2 gotas de solucin de cloruro de sodio al 5 %.
- Hervir suavemente.
- Observar y anotar.

2.

Accin de los cidos

- Colocar en un tubo 4 mL del filtrado.

- Aadir solucin de cido pcrico (1 mL). Anotar las observaciones.

3.

Accin del alcohol

- Colocar en un tubo de ensayo 5 mL del filtrado y una gota de cido

clorhdrico.
- Agregar 2 mL de alcohol etlico.
- Observar la turbidez y anotar.

4.

Accin de sales de metales pesados

- Colocar 5 mL del filtrado en un tubo.

- Agregar 2 o 3 gotas de acetato de plomo.
- Observar y anotar.

Explique a qu se debe lo ocurrido en cada reaccin.

Fundamento terico
Protenas
Las protenas estn formadas, total o parcialmente, por la unin peptdica de
aminocidos, es decir, son macromolculas resultantes de la unin de largas

cadenas polipeptdicas. Su masa molecular es muy elevada y no puede ser

determinada por lo mtodos corrientes de determinacin.

Clasificacin
Segn su comportamiento frente a la hidrlisis se clasifican en:
Protenas simples: son las que por hidrlisis dan solo aminocidos. Por
ejemplo la ovoalbmina (protena de la clara del huevo), la queratina del
cabello, etc.
Protenas conjugadas: son aquellos que adems de -aminocidos,
contienen una proporcin significativa de otros componentes. La fraccin no
aminoacdica se llama grupo prosttico, y puede ser un azcar, un lpido, un
cido nucleico o una sustancia inorgnica. La protena en ausencia de su grupo
prosttico se llama apoprotena, y en presencia de l se llama holoprotena.
Son protenas conjugadas la hemoglobina, la mioglobina, los citocromos, etc.
De acuerdo al tipo de grupo prosttico, las protenas conjugados pueden
clasificarse a su vez en:

Nucleoprotenas: tienen el grupo prosttico de los cidos nucleicos.

Glucoprotenas: son combinaciones de protenas simples con glcidos

comunes o nitrogenados y cidos glucurnico, actico, sulfrico, etc.

Lipoprotenas: contienen un grupo prosttico lipoide.

Cromoprotenas: contienen un metal al que deben sus colores

caractersticos. Estn unidos a un grupo prosttico, generalmente la
porfirina.

Fosfoprotenas: su grupo prosttico es el cido orto- fosfrico (H 3PO4),

combinado con el hidroxilo de algunos aminocidos que lo contienen,
especialmente la serina.

Las protenas simples tambin se dividen segn su

comportamiento en cuanto a la solubilidad, en:

Solubles o globulares: se caracterizan por ser solubles en agua o en

soluciones acuosas de cidos, bases y sales; como por ejemplo la
ovoalbmina.
Insolubles o fibrosas: son aquellas que son insolubles en los disolventes
comunes, pero son solubles en cidos y bases fuertes, como las protenas de
la seda, lana, pelo, etc.
Protenas solubles:

Albminas: protenas que son solubles en agua o en disoluciones salinas

diluidas.

Globulinas: son protenas que requieren concentraciones salinas ms

elevadas para permanecer en disolucin.

Histonas: presentan reaccin alcalina, por la elevada proporcin de cidos

diaminados que contienen.

Protaminas: son ms bsicas que las histonas. Son polipptidos sencillos,

muy solubles en agua.

Prolaminas: protenas solubles en alcohol.

Glutelinas: protenas que slo se disuelven en disoluciones cidas o bsicas.

Protenas insolubles o escleroprotenas: Son protenas insolubles en la gran
mayora de los disolventes. Algunas de ellas son los colgenos, osena,
elastinas, queratinas, etc.

Estructura de las protenas

La estructura tridimensional de una protena es un factor determinante en su actividad
biolgica. Tiene un carcter jerarquizado, es decir, implica unos niveles de complejidad
creciente que dan lugar a 4 tipos de estructuras: primaria, secundaria, terciaria y
cuaternaria.

Cada uno de estos niveles se construye a partir del anterior.

Estructura primaria
Est representada por la sucesin lineal de aminocidos que forman la cadena
peptdica y por lo tanto indica qu aminocidos componen la cadena y el orden en que
se encuentran. El ordenamiento de los aminocidos en cada cadena peptdica, no es
arbitrario sino que obedece a un plan predeterminado en el ADN.
Esta estructura define la especificidad de cada protena.

Estructura secundaria
Es la disposicin de la secuencia de aminocidos en el espacio. Los aminocidos, a
medida que van siendo enlazados durante la sntesis de protenas y gracias a la
capacidad de giro de sus enlaces, adquieren una disposicin espacial estable, la
estructura secundaria.

Existen dos tipos:

1. La hlice
2. La hoja plegada
Esta estructura se forma al enrollarse
helicoidalmente sobre s misma la
estructura primaria. Se debe a la
formacin de enlaces de hidrgeno entre
el -C=O de un aminocido y el -NH- del
cuarto aminocido que le sigue.
El tipo de hoja plegada es una disposicin
en la cual las molculas de protena se colocan lado a lado y se mantienen unidas por
puentes de hidrgeno entre las cadenas

Estructura terciaria
En algunas protenas, por ejemplo las globulares, la estructura helicoidal genera
disposiciones, enrollndose de varias maneras, y existiendo zonas de conformacin al
azar.

Desde el punto de vista funcional, esta estructura es la ms importante pues, al

alcanzarla es cuando la mayora de las protenas adquieren su actividad biolgica o
funcin.
Estructura cuaternaria
Est representada por el acoplamiento de
varias cadenas polipeptdicas, iguales o
diferentes, con estructuras terciarias
(protmeros) que quedan auto ensambladas
por enlaces dbiles, no covalentes. Esta
estructura no la poseen, tampoco, todas las
protenas. Una que s la presenta es: la
hemoglobina.

Propiedades de las protenas

Desnaturalizacin
La desnaturalizacin de una protena se refiere a la ruptura de los enlaces de
hidrgeno y de otras fuerzas secundarias que mantenan unidas sus estructuras
cuaternaria, terciaria y secundaria, conservndose solamente la primaria. El resultado
de la desnaturalizacin es la prdida de muchas propiedades biolgicas de la
protena.

Los agentes que pueden desnaturalizar a una protena pueden ser: calor excesivo,
cambio del pH, cambio de solvente, la radiacin y reactivos como cidos fuertes,
sales de metales pesados, detergentes, agentes oxidantes y reductores.
La desnaturalizacin puede ser reversible (renaturalizacin) pero en muchos casos es
irreversible. Un ejemplo de desnaturalizacin irreversible, por cambio en la
temperatura, es la coccin de la clara de huevo.
Capacidad amortiguadora
Las protenas tienen un comportamiento anftero y esto las hace capaces de
neutralizar las variaciones de pH del medio, ya que pueden comportarse como un
cido o una base y por tanto liberar o retirar protones (H +) del medio donde se
encuentran.
Especificidad
Es una de las propiedades ms caractersticas y se refiere a que cada una de las
especies de seres vivos es capaz de fabricar sus propias protenas (diferentes de las
de otras especies) y, an, dentro de una misma especie hay diferencias proteicas

entre los distintos individuos. Esto no ocurre con los glcidos y lpidos, que son
comunes a todos los seres vivos.

Reacciones de reconocimiento
Reacciones de coloracin
Se producen al reaccionar la estructura primaria y sirven para identificar el
enlace peptdico o los restos de aminocidos que posee.

Reactivo de Biuret: Las sustancias que contienen dos o ms enlaces

peptdicos producen un color violeta amatista al ser tratadas con sulfato de
cobre II (CuSO4) diluido y bases fuertes (NaOH).
El color es debido a la formacin de un complejo entre el ion cobre II y varios
de los enlaces peptdicos de la protena.

Reactivo de Millon: Es el nitrato de mercurio II, Hg(NO3)2 en solucin

nitroso- ntrica.
Reconoce residuos fenlicos, o sea aquellas protenas que contengan
tirosina. Al tratar una solucin de protena con este reactivo se produce un
cogulo blanco que por calentamiento pasa a rojo carne.

Reactivo Glioxlico o de Hopkins-Cole: En presencia de cido sulfrico

concentrado el cido glioxlico se condensa con compuestos indlicos para
formar compuestos coloreados.
Si se agrega a una solucin de protena, cido glioxlico y una o dos gotas de
sulfrico, se agita y luego por la pared del tubo, lentamente, ms sulfrico se
formar un anillo violeta en la superficie de separacin, siempre que existan
restos indlicos.

Reactivo Xantoproteica
Reconoce grupos aromticos, o sea aquellas protenas que contengan tanto
tirosina como fenilalanina, con el cual el cido ntrico forma compuestos
nitrados amarillos.

 Reacciones de precipitacin
Se producen al destruir o desparecer las estructuras secundaria, terciaria y
cuaternaria e implican, la desnaturalizacin de la protena, proceso, en
general irreversible.

Accin de calor: Se destruye la capa de molculas de agua que rodea a la

protena y las micelas coloidales se asocian formando un cogulo.

Etanol o propanona: Cumplen un doble papel: deshidratante y cambio se

solvente. A causa de ello la protena se coagula, ya que es soluble en agua
pero no en disolventes orgnicos como el etanol o la propanona.

cidos fuertes: No se utiliza cido ntrico (reaccin xantoproteica) sino

clorhdrico o sulfrico y tambin se observa un cogulo blanco.

Sales de metales pesados: Las sales de mercurio, plomo o plata hacen

precipitar a la protena formando sales insolubles.

Conclusin
En este prctico realizamos reacciones de coloracin, observando los
diferentes colores que tomaba la protena (clara de huevo) al agregarle
determinadas sustancias.
Tambin pudimos ver de manera clara la desnaturalizacin de las protenas
mediante las reacciones de precipitacin.

Bibliografa

Vila- Romano; Principios de Qumica General, 6 ao. Editorial

Monteverde. Uruguay, 2000.

Hemerografa

http://www.um.es/molecula/prot06.htm

http://recursos.cnice.mec.es/biosfera/alumno/2bachillerato/biomol/conten
idos16.htm