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SALMONELLA

CARACTERSTICAS DO MICROORGANISMO
Salmonella sp. est amplamente dispersa na natureza, podendo ser encontrada em uma
grande variedade de hospedeiros, dentre eles mamferos e aves pertencem famlia
Enterobacteriaceae, so bastonetes Gram negativos, no formadores de esporos, anaerbios
facultativos. Crescem numa faixa de temperatura de 5C a 46C, entretanto, a temperatura
tima de 35C a 43C. Crescem bem em pH entre 3,8 a 9,5, sendo 7 o pH ideal.
Podem medir de 2 a 4 micra por 0,5 mcron, mveis (fazem exceo a Samonella
gallinarum e a Salmonella pollorum), de crescimento fcil nos meios de cultura de uso
rotineiro, definidos por caractersticas bioqumicas comuns: no fermentam a lactose e a
sacarose, no fluidificam gelatina e com exceo da Samonella Typhi e da Samonella
gallinarum fermentam glicose e o monitol com produo de gs; no crescem na presena
de certos gases, reduzem nitratos a nitritos e quase todos os sorotipos produzem H2S.
O gnero Salmonella dividido em duas espcies, Salmonella bongori com 23
sorovares (Variedades de espcies em bactrias) conhecidos e Salmonella enterica,
subdividida em seis subespcies denominadas por Salmonella enterica subespcie enterica,
Salmonella entrica subespcie salamae, Salmonella enterica subespcie arizonae,
Salmonella entrica subespcie diarizonae, Salmonella enterica subespcie houtenae,
Salmonella enterica subespcie indica, tendo sido descritos ao todo 2.587 sorovares.
CARACTERSTICA DA DOENA
As doenas causadas por Salmonella costumam ser subdivididas em grupos: A febre
tifide, causada por Salmonella Typhi, as febres entricas, causada por Salmonella Paratyphi
(A, B, e C) e as enterocolites (ou salmoneloses), causada pelas demaissalmonelas.
Os alimentos contaminados so as fontes mais comuns de infeco para os seres
humanos. Aps a ingesto do alimento infectante, as salmonelas, na luz intestinal penetram no
epitlio do intestino delgado provocando inflamao. O perodo de incubao mdio de 18
horas. Embora usualmente a doena ocorra entre 12 e 36 horas, os sintomas podem se
manifestar a partir de 6 horas da ingesto do alimento contaminado ou at aps 72 horas.
As manifestaes clnicas comumente so: vmito, nuseas, diarria, cefalia, calafrios. Este
quadro pode persistir por 1 a 2 dias, e a recuperao normalmente acontece aps 3 dias do
incio da infeo, os prazos podem ter variaes dependendo da dose infectante ingerida e das
condies do prprio hospedeiro. Em lactentes, idosos e enfermos o risco de infeco maior

A febre tifide s acomete o homem, e normalmente transmitida por gua e


alimentos contaminados com material fecal humano. Os sintomas so muito graves, e incluem
septicemia (multiplicao de Salmonella no sangue), febre alta, diarria e vmitos. O
reservatrio de S. typhi o homem. Algumas pessoas se tornam portadoras durante muito
tempo, mesmo aps a eliminao dos sintomas. Esses portadores costumam ser a principal
fonte de contaminao de guas e alimentos. Alguns casos de febre tifide foram associados
ao consumo de leite cru, mariscos e vegetais crus.
As febres entricas so semelhantes febre tifide, mas os sintomas mais brandos.
Geralmente ocorre septicemia, febre, vmito e diarria. Enquanto a febre tifide pode durar
de uma a oito semanas, as febres entricas duram, no mximo, trs semanas. Estas doenas
tambm podem ser causadas por consumo gua e alimentos, especialmente leite cru, vegetais
crus, mariscos e ovos.
As salmoneloses caracterizan-se por sintomas que incluem diarria, febre, dores
abdominais e vmitos. Os sintomas aparecem, em mdia, 12 a 36 horas aps o contato com o
microrganismo, durante um e quatro dias. Nas crianas pequenas e recm-nascidas, as
salmoneloses podem ser bastante graves, j que a Salmonella pode atingir a corrente
circulatria e provocar leses em outros rgos.
MECANISMO DA DOENA
De acordo com o sorovar envolvido, da quantidade do inculo, dos fatores de
virulncia expressos pelo agente e do estado imunolgico do hospedeiro, Salmonella pode
ocasionar desde uma infeco gastrintestinal branda at uma infeco sistmica. No entanto,
para ser capaz de desenvolver doena, necessrio que est se encontre em ambiente
adequado, para que possa se estabelecer, replicar e expressar seus fatores de virulncia.
A contaminao por Salmonella pode ocorrer atravs da pele lesionada, pelo trato digestivo,
trato respiratrio e pela conjuntiva, no entanto a via fecal-oral considerada a principal via de
transmisso.
Aps a contaminao por via oral, as salmonelas aderem-se e proliferam no intestino
delgado, invadem a mucosa intestinal no somente pela destruio da camada epitelial,
mediada por metablitos bacterianos, mas tambm pelo transporte atravs do epitlio intacto.
Na mucosa intestinal, vrios tipos de clulas podem ser encontrados como as clulas Paneth,
clulas M, entercitos absortivos e as clulas crpticas. As clulas M, agrupadas sobre placas
de Peyer e os entercitos absortivos so considerados como as principais portas de entrada
para o patgeno.

Infeco causada por Salmonella enterica na maioria dos casos permanece localizada,
dando origem apenas a uma patologia gastroentrica. Entretanto, dependendo da virulncia do
sorovar envolvido, o quadro pode generalizar-se. Neste caso, o patgeno ultrapassa a mucosa
intestinal, invade fagcitos e ativa mecanismos de virulncia que permitem sua sobrevivncia
e replicao no interior dos mesmos. A migrao dos fagcitos infectados para rgos do
sistema reticuloendotelial, como o bao e fgado, facilita a disseminao da bactria,
desenvolvendo septicemia e podendo levar morte.
A habilidade da salmonela de resistir aos mecanismos de defesa do hospedeiro, como
por exemplo, pH estomacal, aumento de temperatura, baixa tenso de oxignio, alta
osmolaridade, ao da bile, o peristaltismo, as lisozimas, as lactoferrinas, a microbiota local,
baseia-se na sua capacidade de modular a expresso dos seus genes de virulncia em resposta
a estas condies.
EPIDEMIOLOGIA
Pode-se considerar atualmente a Salmonella como sendo um dos microrganismos mais
freqentes envolvidos em casos de doenas de origem alimentar pelo mundo. Hbitos
alimentares influenciam a epidemiologia das salmoneloses. A preparao e o armazenamento
de grandes quantidades de alimentos, manuseio e controle inadequados, e ainda temperaturas
desfavorveis so condies que propiciam o aparecimento de contaminaes deste tipo, e
favorecem o processo multiplicativo daSalmonella.
Estudos da revista HIGIENE ALIMENTAR avaliaram a qualidade da carne moda em feiraslivres e supermercados em Campina Grande PB, revelando a presena de Salmonella em
100% das 90 amostras analisadas. Este fato pode ser atribudo s precrias condies
higinico-sanitrias dos locais de abate, armazenamento, aos portadores dessas bactrias que
manuseiam o referido produto.
Tambm relatam um surto alimentar ocorrido na cidade de Curitiba-PR, no ano de
1985, com 443 pessoas afetadas e 128 hospitalizadas por apresentarem quadro clnico
considerado grave. O agente detectado foi a Salmonella Enteritidis, e o alimento responsvel,
o creme de maionese.
De acordo com a Secretaria de Vigilncia Sanitria/ MS, durante o perodo de 1999 a
2008, foram notificados 6.062 surtos ocasionados por DVAs, envolvendo 117.330 pessoas
doentes e 64 bitos. Observou-se que os principais agentes etiolgicos destes surtos foram s
bactrias (84%), seguidas dos vrus (13,6%). A Salmonella spp. foi considerada o agente

etiolgico causador de surtos mais freqentes neste perodo, num total de 2.974 surtos, ela foi
responsvel por 1.275, o que equivale a 42,9% destes.
Todos estes, causados pela ingesto de alimentos de origem animal ou seus derivados
contaminados, manipulados e/ou preparados na grande maioria das vezes no ambiente
domstico.
MEDIDAS DE CONTROLE E PREVENO
Entre as medidas de controle e preveno destacam-se: evitar riscos de contaminao
cruzada; assegurar um aquecimento suficiente dos alimentos, seguidos de uma refrigerao
rpida quando armazenados e evitar deix-los muito tempo temperatura ambiente;
comprovar que os manipuladores de alimentos no so portadores de salmonelas; controlar os
roedores, pssaros e insetos nas fbricas e terrenos adjacentes; incrementar a vigilncia e
deteco de salmonelas sobre todos os alimentos cozidos.
Quanto contaminao de gneros alimentcios, o controle de Sade Pblica
realizado atravs da higiene da produo, tratamentos seguros e de estocagem; quando a
contaminao ocorre no ambiente do preparo dos alimentos, imprescindvel que seja
efetuado de maneira correta a limpeza dos equipamentos, utenslios e superfcies.
Em produtos base de carne de aves, o controle da Salmonella feito atravs da chamada
excluso competitiva. Neste processo, impede-se que Salmonella colonize o trato
gastrintestinal das aves ainda na fase inicial de suas vidas. Os animais recm-nascidos so
submetidos a um tratamento com culturas microbianas mistas contendo bactrias incuas, que
vo ocupar os stios de adeso das salmonelas, excluindo-as da flora intestinal dos animais.
MTODO DE ANLISE
SANGUE
O hemocultivo reveste um interesse especial no caso de febre tifoide e paratifoide,
porm no constantemente positivo. Os percentuais de positividade, na ausncia de
tratamento prvio com antibiticos, so de 90% durante a primeira semana de evoluo, de
75% na segunda, de 40% na terceira e de 10% na quarta semana. Os hemocultivos so
negativos nas infeces transmitidas por meio dos alimentos (infeces gastrintestinais),
determinadas pela maioria dos sorovares, podendo causar septicemia em indivduos
imunocomprometidos.
1- Principais cuidados para coleta: A coleta deve ser realizada antes da utilizao de
antimicrobianos devendo-se efetuar a desinfeco da superfcie dos frascos de cultivo (lcool

70GL) e assepsia do stio de puno (lcool 70GL ou soluo iodada) em movimentos


concntricos do centro para a extremidade.
2-

Volume para cultura: Nos adultos, o volume dever ser de duas coletas de 10mL com
intervalo de uma hora, os quais so inoculados em dois frascos de meio de cultura (inocular
10mL/100mL de meio enriquecido, acrescido de anticoagulante SPS Polianetolsulfonato
sdico). Para crianas, mantendo a proporo (1mL/10mL de meio enriquecido, acrescido de
SPS), devem ser tomados volumes variveis de acordo com o peso (< 1,5kg a < 4kg 1mL;
4kg a 13kg 3mL; 13kg a 25kg 10mL; > 25kg 20mL). No processamento das amostras de
sangue por hemocultura tradicional, os frascos devem ser incubados a 35C e avaliados por
sete dias e deve ser empregada, paralelamente, semeadura direta em meio seletivo-indicador.
A partir do crescimento de colnias com morfologia tpica, dever ser efetuado o isolamento e
subsequente identificao bioqumica e antignica. No caso de recebimento de sangue
coagulado, dilacerar o cogulo, por meio de uma pipeta e, em sequncia, semear em meio de
enriquecimento e, paralelamente, em meio seletivo-indicador.
FEZES
A procura de uma metodologia ideal para o isolamento de Salmonella spp. tem sido
constante entre os pesquisadores, o que tem trazido melhorias na especificidade e na
sensibilidade, bem como simplicidade e rapidez na execuo dos exames bacteriolgicos.
Numerosos mtodos e tcnicas clssicas e moleculares vm sendo descritos, visando ao
isolamento de diferentes sorovares de Salmonella spp. procedentes de distintas fontes de
infeco. Nas amostras clnicas, se um espcime apropriadamente obtido na fase aguda da
doena, no necessria a utilizao de meios de enriquecimento, tendo em vista a presena
de grande nmero de clulas. Contudo, na forma crnica ou mesmo na identificao de
portadores, indicada a utilizao de meios de enriquecimento e de meios seletivos para
facilitar seu isolamento.
As fezes devem ser coletadas durante a fase aguda, antes de iniciar o tratamento com
antibiticos. Em pacientes com infeco ativa, do mesmo modo que para crianas ou
indivduos com dificuldade de obteno de amostras, deve ser priorizada a utilizao de
swabs retais. Em pacientes com suspeita de febre tifoide, a pesquisa de Salmonella Typhi nas
fezes indicada a partir da segunda semana da doena, assim como na fase de convalescena
e na deteco de portadores.
Fezes de emisso espontnea devem ser coletadas em pequenos recipientes, de vidro
ou polietileno, de boca larga, limpos e/ou esterilizados. O material dever ser analisado at

duas horas aps a coleta, quando mantido temperatura ambiente. Deve ser colhida de 0,5g a
2g de fezes e, quando da presena de sangue ou de muco, essa deve ser a poro selecionada
para a avaliao laboratorial. Evitar a coleta de espcimes fecais a partir das roupas do
paciente, da superfcie de camas e/ou cho.
No caso de espcimes retais, umedecer o swab em soluo fisiolgica ou em gua
destilada esterilizada e introduzir na ampola retal do paciente ou comunicante, comprimindoo em movimentos rotatrios suaves por toda a extenso dessa regio. O processamento
laboratorial deve ser efetuado at duas horas aps a coleta e, caso no seja possvel, introduzir
o swab retal ou fecal impregnado de fezes no meio de conservao Cary e Blair. Nessa
condio, as salmonelas sobrevivem por uma a duas semanas em temperatura de refrigerao.
Podem ser utilizadas tiras de papel-filtro, tipo xarope ou mata-borro, com dimenses
de 2,5cm de largura por 6,0cm de comprimento. As fezes diarreicas ou suspensas em gua
devem ser espalhadas em dois teros de uma das superfcies do papel, com auxlio de um
fragmento de madeira (palito individual) ou de qualquer outro material semelhante, disponvel
no momento. Em sequncia, devem ser acondicionadas em invlucros plsticos aps dessecar
naturalmente. Sob essas condies, a Salmonella se mantm vivel por um perodo
aproximado de 30 dias.
O Exame direto de fezes avaliao presuntiva uma ferramenta que pode ser usada
para orientar o profissional de laboratrio na metodologia a ser adotada. Os resultados podem
ser individualizados da seguinte forma: a presena de picitos e clulas mononucleares
indicam processo inflamatrio; a presena de polimorfonucleares indicativa de sndrome
disenteriforme ou colite determinada por patgenos invasivos; e a presena de clulas
mononucleares predomina em pacientes com febre tifoide. 1. Metodologia Utilizar soluo de
azul de metileno de Loeffler, misturada em igual quantidade com as fezes; essa mistura deve
ser colocada sobre lmina, coberta por lamnula e examinada com microscpio tico (objetiva
de 10x e 40x).

REFERNCIAS

AGENCIA NACIONAL DE

VIGILANCIA SANITARIA (Brasil).

Procedimentos

laboratoriais: da requisio do exame a analise microbiolgica. Modulo III. 45 p. Disponvel


em:

<http://www.anvisa.gov.br/divulga/eventos/biosseguranca/publicacoes/ggtes>.

Acesso

em: 16/09/2015
BESSA, M.C. Caracterizao fenotpica e genotpica de amostras de Salmonella entrica
sorovar Typhimurium isoladas de sunos no Rio Grande do Sul. 2006. Faculdade de
Veterinria, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Porto Alegre. Disponvel em:
http://biomedicinaemacao-unip.blogspot.com.br/. Acesso em: 14/09/2015
FORSYTHE, S. J. Microbiologia da segurana alimentar. Porto Alegre: Artmed, 2012.
ISENBERG, H. D. Livro de mo dos procedimentos em microbiologia clnica. 2nd . ed.
Washington, ASM Press, 2004. v.1.
TORTORA G.J; FUNKE B.R; CASE C.L. Microbiologia. 6. ed. Porto Alegre: ArTmed;
2000.

CENTRO DE ENSINO PROFISSIONAL GRAZIELA REIS DE SOUSA

ARIDALVA DOS SANTOS DE SALES


CASEMIRO FERNANDES CARDOSO
CLIA FERREIRA RAMALHO
JSSICA RAYANE R. NASCIMENTO
RENATA KELLY DE SOUZA COSTA
VANESSA TIELLY DA S. MIRANDA

SALMONELLA

MACAP
2015

ARIDALVA DOS SANTOS DE SALES


CASEMIRO FERNANDES CARDOSO
CLIA FERREIRA RAMALHO
JSSICA RAYANE R. NASCIMENTO
RENATA KELLY DE SOUZA COSTA
VANESSA TIELLY DA S. MIRANDA

SALMONELLA

Seminrio com o tema Salmonella apresentado a


professora Josiane dos Passos Duarte como requisito
avaliativo da disciplina: Anlises Microbiolgicas, do
curso Tcnico em Anlises Clnicas no CEP Graziela
Reis de Sousa.

MACAP
2015

SALMONELLA

Seminrio com o tema Salmonella apresentado a


professora Josiane dos Passos Duarte como requisito
avaliativo da disciplina: Anlises Microbiolgicas, do
curso Tcnico em Anlises Clnicas no CEP Graziela
Reis de Sousa.

Avaliado por:
___________________________________________________________________
Prof: Josiane dos Passos Duarte
Nota:______
Data:__/__/____

MACAP
2015