Abstracto

Los intereses de la yerba mate se ha incrementado en los ltimos aos debido a

su alto contenido de compuestos bioactivos relacionadas con beneficios para la
salud. Extractos acuosos antioxidantes de la yerba mate fueron atrapados en una
sacarosa matriz por co-cristalizacin. Los productos se caracterizaron en
trminos de su morfologa, atrapamiento rendimiento, capacidad de carga, la
actividad del agua, contenido de humedad, actividad antioxidante,
comportamiento trmico, la solubilidad e higroscopicidad. Se encontr que el
proceso de co-cristalizacin dio lugar a un alto rendimiento de atrapamiento y
mantenido la actividad antioxidante del extracto de yerba mate hacia radical
DPPH. Adems, la co-cristalizacin polvos Lized mostraron valores de actividad
de agua, contenido de humedad, higroscopicidad y fluidez indicador tiva de las
buenas propiedades de manejo alta estabilidad y. El contenido total de polifenoles
del co-cristalizado productos se mantuvo casi constante a lo largo del
almacenamiento a 75% HR y 20 C, sin embargo, las fluctuaciones en su
Se observaron DPPH actividad de eliminacin de radicales
Introduccin

La yerba mate (Ilex paraguariensis) es altamente consumido como infusin

en varios pases de Amrica del Sur y ha sido reconocido por FDA como GRAS
(generalmente reconocido como seguro). El extracto de yerba compaero podra
ser considerado como un antioxidante natural para conservar los alimentos
por el deterioro retardar, la ranciedad, o decoloracin y adems, tiene
la ventaja de ser eficaces a concentraciones muy bajas ( De Campos et al.,
2007; Valerga et al., 2013). Variosfarmacolgicaactividades inherentes al
extracto de yerba mate se han atribuido a su contenido de polifenoles,
flavonoides y xantinas incluyendo cido cafeico, cido clorognico, la rutina, la
cafena y la teobromina (Anesinietal,2012;.Bravoetal.,2007;Jaiswaletal,
2010. ). Recientes estudios han demostrado que los compuestos fenlicos actan
en el prevencin y tratamiento de trastorno de salud debido a su accin
antioxidante, hepatoprotector, colertico, diurtico, hipocolesterolmico, antireumtica, antitrombtico, antiinflamatorio, agente antiobesidad y antipropiedades de envejecimiento (Bracescoetal,2011;.MarquesyFarah,2009).
Los antioxidantes naturales pueden aadirse a una amplia gama de alimentos,
tales como productos horneados, galletas, chicles, aperitivos secos, bebidas de
frutas, mayonesa, productos crnicos, frutos secos, aceites y grasas, entre otros.
Sin embargo, es bien sabido que los extractos acuosos obtenidos a partir de
plantas, presentan una baja estabilidad y algunos de ellos tienen un desagradable
sabor, por lo tanto, slo unos pocos extractos se emplean actualmente en el

industria de alimentos ( Kosarajuetal.,2008; MakrisyRossiter,2000;

Wanasundara y Shahidi, 2005)
Tecnologas de encapsulacin se convierten en una eleccin real aplicado a
preservar y / o proteger numerosos ingredientes del ambiente adverso
condiciones ambientales (luz, humedad y oxgeno) y para prevenir interacciones
indeseables con la matriz alimentaria portador (Gouin,2004; Onwulata
2011 ). Recientemente, Fang y Bhandari (2010) y Munin y Edwards-Lvy
(2011) publicinteresantescomentariossecentraronen las tcnicas empleadas
para la encapsulacin de polifenoles tales como secado por pulverizacin,
coacervacin, el atrapamiento de liposomas, la inclusin complejacin, cocristalizacin, nanoencapsulacin, secado por congelacin y emulsin. El secado
por pulverizacin es el proceso ms ampliamente aplicado principalmente para la
preparacin de aditivos alimentarios, estables secas y sabores ( DesaiyJinPark,
2005). Co-cristalizacin ofrece una econmica y alternativa flexible para la
incorporacin de compuestos activos en los alimentos en polvo. En este proceso,
la estructura cristalina de la sacarosa se modifica de ser perfecto para cristales
aglomerados irregulares, para proporcionar una matriz porosa en la que un
segundo ingrediente activo se pueden incorporar. Estos aglomerados tienen una
esponja-como apariencia, con un considerable espacio vaco y un aumento de la
superficie rea (AwadyChen,1993;Chenetal.,1988 ). Co-cristalizacin
con sacarosa podra mejorar la solubilidad, dispersabilidad, wettabildad,
antiaglomerante, antiestticos, antiseparation, homogeneidad, flowabildad y la
estabilidad de los materiales alimenticios. Sin embargo, pocos estudios han
ha llevado a cabo sobre esta tcnica se trata de sabores, ex naturales tractos,
aceites esenciales, miel, glucosa y fructosa (AstolfiFilho et al., 2005; Beristain et
al., 1996; Bhandari et al., 1998; Bhandari y Hartel, 2002; Maulny et al.,
2005; Sardar y Singhal, 2013)
Productos co-cristalizado Anteriormente, hemos obtenidos de trabajo con sales
minerales y extracto de yerba mate liofilizado que resultados demostr que la cocristalizacin era una buena alternativa para el manejo de estos
materiales (Deladinoetal.,2007, 2010). Sonnecesariosmsestudiosparaco
cristalizacinparaalcanzaraplicaciones industriales. En este sentido, las
simplificaciones del co etapas de cristalizacin favoreceran la ampliacin del
proceso. en el trabajo presente, una mejora en la produccin de la cocristalizacin polvos Lized se llev a cabo: el extracto acuoso de yerba mate
se emple como el disolvente de la solucin sobresaturada de sacarosa cin. La
caracterizacin fisicoqumica del POWER se antioxidante ders se realiz y su
estabilidad durante el almacenamiento era evaluado, tambin.

2. Materiales y mtodos
2.1. Preparacin del extracto de yerba mate
Diferentes cantidades (3, 5 y 10 g) de la yerba mate comercial (Las Maras,
Corrientes, Argentina) se mezclaron con 100 ml de agua destilada y se coloca en
un bao termosttico (Vikingo, Argentina) a 100 C durante 40 minutos. Una vez
obtenidos, los extractos se filtraron, se enfriado y conservado en frascos oscuros
hasta su uso.
2.2. Preparacin de los productos co-cristalizado
Una mezcla de sacarosa comercial (50 g) (Ledesma, Argentina) y extracto de
yerba mate (10 ml) se calent a 132 C en una placa caliente y se agita con un
agitador vertical (IKA Labortechnik, Staufen, Alemania muchos). Cuando se
detect una ligera turbidez en el jarabe, indicando el inicio de proceso de
cristalizacin, se retir la mezcla por el calor, manteniendo la
agitacin. Entonces, cristaliz co-productos se secaron en un horno de
conveccin (Sanjor, Argentina) a 40 C durante 15 h, molidas y transferidas a
bolsas de polietileno para almacenamiento edad en desecadores con gel de slice
hasta su uso. Tres lotes de polvos cristalizados se prepararon como se ha descrito
anteriormente. Un super solucin de sacarosa saturada sin el compuesto activo
fue pro sar de la misma manera como se describi anteriormente para actuar
como un control.
Los aglomerados se tamizaron con un conjunto de mallas entre 2 y 0,250 mm. Se
calcul la distribucin del tamao de los aglomerados por el peso del polvo
retenido en cada tamiz. Especficamente, Se utilizaron las partculas retenidas en
las mallas de 0,5 y 1 mm para determinar la solubilidad, fluidez, higroscopicidad
y la estabilidad qumica durante el almacenamiento.
2.3. Contenido de polifenoles totales
Total contenido en polifenoles (TPC) se determin por el Folin Ciocalteu
( Singletonetal.,1999). Brevemente, 2 ml de Na2 Colorado 3
Se mezclaron (2 g / 100 ml) (anedra, Argentina) con 200 l L de la muestra y 200 l
L de reactivo de Folin-Ciocalteu (anedra, Argentina, 1: 1 diluida). Despus de 30
min, la muestra absorbancia se midi a 725 nm en un espectrofotmetro
(Shimadzu, UV-mini 1240, Japn). El cido clorognico (Fluka, EE.UU.) se
utiliz como estndar.
2.4. Capacidad de carga y rendimiento de atrapamiento
Capacidad de carga (L c ) Se calcul como la TPC de la yerba extracto de yerba
cargado en 1 g de material co-cristalizado. El atrapamiento rendimiento cin (%
EY) se calcul de la siguiente manera:
% EY

L
c
L
0
100
1
donde L
0
es el TPC inicial del extracto de yerba mate por gramo de prima
mezclar.
2.5. La actividad antioxidante de los polvos co-cristalizado de yerba mate
La actividad antioxidante se determin midiendo la libre
la actividad de eliminacin de radicales hacia la 1,1-difenil-2-picrylreactivo hydrayl (DPPH
LA
) (Sigma-Aldrich, EE.UU.) de acuerdo con la
mtodo descrito por BrandWilliamsetal. (1.995). Un gramo de
producto de co-cristalizado se disolvi en 10 ml de agua destilada.
Una alcuota de 100
l
L de disolucin se mezcl con 3,9 ml de DPPH
LA
solucin de etanol (25 mg DPPH
LA
/ L). La absorbancia se determin a
517 nm hasta que la reaccin alcanz una meseta. La actividad antioxidante
se expres como el porcentaje de inhibicin (I%) del DPPH
LA
gratis
radical, calculada con la siguiente ecuacin:
Yo %
Abdominales
b
Abs
s
Abdominales
b
100
2
donde Abs

b
es la absorbancia de la reaccin de control (sin el muestreo
PLE) y Abdominales
s
es la absorbancia de la muestra.
2.6. Caracterizacin de los productos co-cristalizado
2.6.1. La microscopa electrnica de barrido (SEM)
El anlisis morfolgico fue realizado por SEM usando un FEI,
Quanta 200 microscopio (Pases Bajos). Las muestras se adjuntan a
stubs utilizando una cinta adhesiva de dos caras, a continuacin, recubiertas con
una capa de
de oro (40-50 nm) y examinados utilizando un voltaje de aceleracin
de 20 kV.
2.6.2. Atributos de color
El color se midi usando un colormetro triestmulo Minolta
Se inform (Konica Minolta CR-400, Japn) y en escalas CIELab
(L
*
, Una
*
yb
*
valores), donde L
*
se utiliza para denotar ligereza, una
*
rojoness y verdor, y b
*
amarillez y azulados. Chroma y
los valores de ngulo de tono se calcularon usando las Ecs. (3)y(4),
respectivamente.
Chroma
2
b
2

1=2
3
ngulo Hue bronceado
A1

b
LA
=A
LA

4
2.6.3. El contenido de humedad y actividad de agua
Contenido de humedad (%) se midi gravimtricamente mediante secado
las muestras puestas a tierra en un horno de vaco a 70 C, hasta que la constante
peso (AOAC,1,998). Los valores de actividad de agua (a
w
) Fueron deterextrado usando un equipo AquaLab Serie 3 TE (EE.UU.).
2.6.4. Solubilidad
Solubilidad se determin mediante la mezcla de 1 g de co-cristalizado
polvo con 10 ml de agua destilada a temperatura ambiente con
agitacin (agitacin IKA RH1 magntica, Alemania) continua. Las alcuotas
se retiraron en diferentes momentos y la masa de sacarosa disuelta en
la solucin se determin utilizando un refractmetro digital HI96801
(Hanna Instruments, EE.UU.).
2.6.5. Pruebas de fluidez
La fluidez de los polvos co-cristalizado se determin por
tanto, el ngulo dinmico de reposo y la relacin de Hausner (H). El ngulo
de reposo se determin con una cmara cilndrica giratoria,
que se inclina gradualmente hasta deslizamiento ocurrido y el ngulo
medidos (manejo de slidos banco de estudio, CEN, Armfield, Estados
Unido) ( Geldartetal.,2006 ).
El valor de H se calcul por la relacin de la mayor parte del grifo densidad de la densidad aparente suelta ( Hausner,1.967). La den- mayor floja
sidad se determin mediante el vertido de una masa conocida de co-cristalizado
producto entregado libremente por gravedad en un cilindro de medicin,
y se calcula dividiendo la masa por el volumen aparente.
La densidad aparente comprimida se calcula a partir del peso de polvo de
contenido en el cilindro despus de haber sido mano girada en 100 veces
ms o menos 60 grifos / min ( Pordesimoetal.,2009). Todas las mediciones
se realizaron al menos por triplicado.
2.6.6. La calorimetra diferencial de barrido (DSC)
El equipo utilizado fue un DSC Q100 (TA Instruments, EE.UU.),
calibrado con un estndar de indio. Las muestras de 3-5 mg eran
colocados en bandejas de aluminio hermticamente cerrados y una bandeja vaca

se utiliz como referencia. Las muestras se calentaron desde 25 C a

250 C a una velocidad de calentamiento de 10 C / min.
2.6.7. Espectroscopia infrarroja por transformada de Fourier (FT-IR)
Productos co-cristalizado con y sin extracto de yerba mate
fueron analizados. El equipo empleado fue un Nicolet IS-10
(Thermo Scientific, EEUU) y el anlisis espectral se realiz
con la versin Omnic sotfware 8,1 (Thermo Scientific, Inc., EEUU).
Discos (7 mm) se obtuvieron mediante la molienda de 1 mg de muestra con
100 mg de KBr y se analizaron en el modo de transmisin, teniendo
64 lecturas por experimentar con una resolucin de 4 cm
A1
.
2.6.8. Ganancia de Agua, higroscopicidad y estabilidad qumica durante el
almacenamiento
Placas de Petri llenas con los polvos co-cristalizado se colocaron
en desecadores de vidrio hermticamente sellado que contiene sobresaturada
solucin de NaCl (75% HR), y se almacen a 20 C. Las muestras se
retira a cabo en diferentes tiempos y su aumento de peso se determin
hasta que el valor constante. Higroscopicidad (HG%) se expres como la ficontenido de humedad final alcanzado despus de exponer el polvo bajo la
condiciones mencionadas anteriormente. Valores de% HG se calcularon a partir
modificado JayayDas(2004) ecuacin para calcular la ganancia va- agua
ues en base seca de la siguiente manera:
DAG%
bH
H
100
5
donde b (g) es el aumento de peso, a (g) es el peso inicial de la muestra
y H es el contenido inicial de agua del polvo (g).
La estabilidad qumica se control a travs de la poli- totales
fenoles contenido y la actividad antioxidante durante 120 das. Una vez que
las muestras alcanzaron el contenido de agua de equilibrio, que eran
mantenido en las mismas condiciones y se analizaron a diferentes
veces.
Cromatografa de lquidos de alta resolucin (HPLC) fue empleados para determinar los principales compuestos fenlicos y cafena
en la co-cristalizado extracto de yerba mate slo antes y despus
Almacenamiento de 120 das. El anlisis se realizaron utilizando un lquido HP
1100
cromatgrafo (Hewlett Packard, US) equipado con un binario

bomba, un compartimento de columna con termostato, inyector automtico,

desgasificacin
Ser y detector de red de diodos (DAD) conectado a un trabajo Agilent
estacin. Una columna Zorbax 300 SB-C18 (4,6 250 mm; 5
l
m)
conectado a una columna de seguridad se utiliz. Un mtodo modificado a partir
de
Chandra y Gonzlez de Mejia (2004) sellevacabocomosigue:
consistieron las fases mviles '' A '' y '' B '' de una mezcla de agua,
metanol y cido frmico (79,7 / 20 / 0,3) y una mezcla de metanol
y cido frmico (99,7 / 0,3), respectivamente. Un gradiente de elucin escalonada
programa de la al 0,9 mL / min prepar como sigue: 0% B / 15 min,
40% B / 15 min; 75% B / 10 min; 100% de B / 5 min, se emple. Comisin
normas comerciales (Sigma-Aldrich, Argentina) de cido clorognico,
Se han usado cido cafeico, la rutina y la cafena. Las soluciones madre de cada
uno
estndar (0,25 mg / ml) se prepararon en 50% de metanol-milli-Q
agua. Las curvas de calibracin en cuatro niveles de concentracin diferentes
fueron realizados. Cada nivel se puso a prueba por duplicado. La retencin
tiempos (t
R
) Y DAD coincidencia espectral absorbancia fueron utilizados para
fines de identificacin. Sobre la base de los mximos de absorcin, la
longitudes de onda seleccionadas para cada compuestos fueron
afena, 330 nm para clorognico y cafeico cidos y 360 nm para
rutina.
2.7. El anlisis estadstico
El anlisis de los datos se realiz con el software SYSTAT INC.
(Evenston, EE.UU.. El anlisis de la varianza (ANOVA) y la media de
comparacin
hijos se llevaron a cabo. Salvo que se indique, un nivel de 95% de confianza
(
la
= 0,05) se utiliz.
3. Resultados y discusiones
3.1. Atrapamiento rendimiento, capacidad de carga y la actividad antioxidante
de la
co-cristalizado productos
Polvos co-cristalizado antioxidantes se obtuvieron de la li-

extractos quid preparados con 3, 5 y 10 g de yerba mate / 100 ml

y llam CC-YM3, CC-YM5 y CC-YM10, respectivamente. Valores
de rendimiento de atrapamiento de alrededor del 85% se obtuvieron en todos los
casos, incluso
trabajar a altas temperaturas, tales como 132 C. Deladinoetal. (2007)
trabajar con co-cristalizado extracto de yerba mate liofilizado observada
contenida un rendimiento promedio de 72%. En el presente estudio, el uso de liextracto de quid en lugar de polvo liofilizado aument el rendimiento de
el proceso; y tambin podra haber mejorado el compuesto activo
distribucin en la matriz. LaFig. 1 muestra una relacin entre la
capacidad de carga y la actividad antioxidante frente a DPPH
LA
radical
de los productos co-cristalizado. ANOVA mostr que el polypheconcentracin NOLS del extracto de yerba mate en bruto fue un significativo
factor de la capacidad de carga de polvos co-cristalizado (p <0,05).
En este sentido, el valor ms alto de Lc se obtuvo para CC-YM10.
Este parmetro es importante para el clculo de la masa de la yerba mate
polvos necesarias para llegar a un nivel de polifenoles determinado en un
formulacin de alimentos. Adems, un aumento en la actividad antioxidante
(DPPH
LA
porcentaje de inhibicin) se observ con el aumento de loadcapacidad ing de polifenoles de yerba mate ( Fig. 1 ).
Con el fin de comparar la medida DPPH
LA
inhibicin (%) con el
valor esperado para el extracto lquido, una correlacin lineal entre
el DPPH
LA
inhibicin (%) y el contenido de polifenoles de la libre
(no encapsulado) se obtuvo el extracto de yerba mate (R
2
= 0.98).
El DPPH esperado
LA
porcentajes de inhibicin se extrapolaron
usando el contenido de polifenoles real del ducto co-cristalizado
ductos. Valores similares de lo esperado y medido DPPH
LA
inhibicin

Se obtuvieron porcentajes ( Fig. 1). Por lo tanto, estos resultados indicaron

que el proceso de co-cristalizacin no modific el antioxidante
actividad del extracto de yerba mate.
capacidad de carga
(mg de cido clorognico / g de polvo)
0.0
0.3
0.6
0.9
1.2
15
1.8
DP
P
H
inhibicin radical
ion (
%
)
0
10
20
30
40
50
60
70
80
Esperado I (%)
Medido I (%)
CC-YM3
CC-YM5
CC-YM10
Fig. 1. Capacidad de carga frente a DPPH
LA
porcentaje de inhibicin de la co-cristalizado
polvos. I%: Porcentaje de inhibicin hacia DPPH
LA
radicales libres