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Equipo 7:
Caldern Sauri Ingrid Sttephy
De Arrigunaga Arceo Jos Mara
Martnez Castellanos Karla Margarita
Ortegn Gallareta Rodrigo
Vargas Azar Valentina
Xacur Hernndez Maria Isabel
3B
Objetivo:
Identificacin de bacterias patgenas en el tracto urinario.
Introduccin:
El examen general de orina, enfocado en la evaluacin fsica, qumica y microscpica de
la misma, nos permite encontrar y medir la presencia de ciertos compuestos, sustancias toxicas o
microorganismos infecciosos que reflejan el estado de salud de una persona por medio de 2
tcnicas, una es el uso de tiras reactivas - de la cual se hablar ms tarde - y la otra es a travs de
un examen microscpico. Aunado a esta funcin, igualmente nos permite evaluar el
funcionamiento renal, nivel de glucosa y otros problemas del metabolismo. Es una herramienta
til para el pre diagnstico de infecciones urinarias y signos iniciales de diferentes afecciones en
riones, vejiga o prstata. (Salud y Medicina, 2015)
En el anlisis microscpico del examen general de orina, se analiza el sedimento urinario,
en el cual se espera encontrar principalmente la presencia de clulas, cilindros y cristales con
diferente utilidad diagnostica (Vease el anexo 1). Tiene como propsito identificar elementos
formados o insolubles en la orina, los cuales son provenientes de la sangre, rin, vas urinarias y
contaminacin externa. Algunos de estos elementos son considerados normales en cantidades
bajas a menos que se identifiquen en cantidades ms elevadas, y otros no son de importancia
clnica. Nos enfocaremos en dos elementos: cilindros y cristales. (Cavagnaro, s.f)
Los cilindros son elementos provenientes nicamente del rin. Son estructuras
longitudinales que se forman en los tbulos distales y colectores del rin a partir de la matriz de
mucoprotena de Tamm-Horsfall (Strasinger, 2010). Estos pueden formarse por dos mecanismos:
por la precipitacin o gelificacin de la protena o por agrupacin de clulas en los tbulos en la
matriz de la protena. Segn Quesada, (2013); algunos factores que pueden influir en la
formacin de cilindros son: pH del medio donde se disuelven, soluciones concentradas,
proteinuria renal o pre-renal y estasis de la orina. Los principales tipos de cilindros son:
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llamadas cristales. Segn Cavagnaro (s.f), los cristales estn formados por de sales en orina, esto
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Cristales de cido hiprico: No son de importancia clnica, sin embargo se han encontrado
en pacientes con estado febril agudo y enfermedades hepticas.
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Cristales de leucina y tirosina: son poco frecuentes y se encuentran en orinas acidas. Son
productos del metabolismo proteico y estn asociados a pacientes con necrosis o
degeneramiento tisular.
10. Cristales de cistina: Podemos encontrarlas en orinas acidas y en pacientes con desordenes
metablicos hereditarios.
Adems del examen general de orina, existen otras pruebas diagnsticas, como lo es el
urocultivo o cultivo de orina, mtodo realizado en el laboratorio de microbiologa clnica que nos
permite identificar la presencia de bacterias en la orina, su cantidad, especie y sensibilidad a los
antibiticos. Su utilidad es detectar bacterias patgenas en la orina que pueden confirmar o
descartar una infeccin de las vas urinarias (Seguro Social de Salud del Per, 2015)
Segn Ruiz, et al. (2010) Los patgenos implicados comnmente en infecciones del tracto
urinario, los cuales son identificados en un urocultivo, son los siguientes:
1. Escherichia coli
2. Proteus mirabilis
3. Klebsiela spp
4. Sthaphylococcus saprophyticus
5. Enterococcus faecalis
6. Staphylococcus aureus
Material:
Exmen General de Orina
Material de Laboratorio
Urocultivo
Material de Laboratorio
- tiras reactivas
- 2 tubos de ensayo
- portaobjetos
- cubreobjetos
Muestra Biolgica
- 2 muestras de orina en frasco
estril
Material Biolgico
- 2 muestras de orina en frasco estril
- Muestra problema (Klebsiella)
Procedimiento:
**Antes de comenzar a trabajar, extiende sobre tu mesa de trabajo papel estraza previniendo
salpicaduras o derrames. **
Exmen General de Orina
1. Despus de haber sembrado las muestras, tomar una alcuota de orina y verter en un tubo
de ensayo limpio y seco. (aprox. 5-6ml)
2. Cuidadosamente, introducir una tira reactiva procurando se humedezca por completo cada
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seccin.
Retirar la tira y escurrir el exceso sobre un papel absorbente. Esperar 30 segundos y leer.
Centrifugar las muestras de orina 5min. a 2000 RPM.
Decantar el sobrenadante.
Resuspender el sedimento con el lquido que resbala por las paredes internas del tubo.
Colocar una gota de sedimento en un portaobjetos y cubrir con el cubreobjetos.
Observar al microscopio en objetivo 40X y anotar sus resultados.
Urocultivo
1. Sin abrir el frasco, homogenizar la muestra mezclando levemente evitando mojar la tapa.
2. Tomar una azada de la muestra (segn la tcnica vista para muestras de orina) y sembrar
en agar CLED.
3. Repetir este procedimiento para la segunda muestra de orina.
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Resultados:
Exmen General de Orina
A pesar de que la primera prueba que se realiz a los dos sujetos en cuestin fue la
qumica con las tiras reactivas, se exponen en primer lugar los resultados obtenidos en la
microscopa.
Segn lo observado en el microscopio, en ambas muestras de orina se determin que no
haba ningn microorganismo o situacin que nos indicara algn patrn de relevancia clnica, a
continuacin se expone lo poco que pudimos observar en ellas.
Tanto el sujeto 1 como el 2 se observaron residuos de clulas epiteliales las cuales pueden
ser indicio de una higiene que no fue lo suficientemente eficiente o que salieron por arrastre
debido a la longitud de la uretra. Adems, al ser en cantidades mnimas no indican que haya
algna patologa. (Gmez, 2013)
De igual manera en ambos sujetos observamos uratos amorfos muy escasos cuya
presencia se explicaba al saber que la orina de ambos compaeros fue levemente cida con un pH
de seis, ya que estos cristales son comunes en orinas cidas o neutras. Por lo antes mencionado,
se afirma que estos cristales no tienen relevancia clnica. En cuanto a los cilindros, no hubo
presencia de ellos en las muestras. (Laso, 2002)
La nica diferencia que se observo en los sedimentos de nuestros sujetos fue que en la
muestra del sujeto 1 se pudieron observar 3 leucocitos por campo lo cual se considera dentro de
los parmetros normales al no alcanzar los 20 leucocitos por campo, los cuales son considerados
SUJETO 1
SUJETO 2
SG
1,015
1,015
pH
LEU
negativo
negativo
NIT
positivo
positivo
PRO
negativo
negativo
GLU
normal
normal
KET
negativo
negativo
UBG
normal
normal
BIL
negativo
+1
ERY
negativo
negativo
Hb
negativo
negativo
-Nitrito: si el nitrito es positivo es indicio de infeccin sin embargo hay situaciones en las
que se originan falsos positivos como las bacterias que en una muestra mayor a 4 horas
convierten el nitrato en nitrito, un incorrecto almacenamiento de las tiras, que estas esten
expuestas por mucho tiempo al aire, esta ltima consideramos que es el motivo de que ambas
pruebas dieran positivo ya que las sacamos del tubo mucho antes de utilizarlas.
-Protenas: la excrecin de protenas en orina significa que hay dao renal por lo tanto la
prueba dar un resultado negativo al encontrarse por debajo de 10 mg/dl.
-Glucosa: los valores en la primera orina <20 mg/dl y en la orina del da <30 mg/dl para
que el resultado sea normal, en caso de dar positivo puede servir para un diagnstico temprano de
diabetes mellitus entre otras patologas
-Cetonas: el resultado siempre debe ser negativo en caso de no ser as refleja un error del
metabolismo.
-Urobilingeno: el resultado ser normal si hay 0.4 mg/dl, en caso de ser positivo de
alguna forma esto refleja un dao heptico.
-Bilirrubina: sirve para detectar dao heptico los valores sern negativos si hay <0.2
mg/dl y positivos a partr de 0.5 mg/dl dar resultados positivos sin embargo en ciertas ocasiones
este resultado se puede dar a partr de 0.2 0.4 mg/dl lo cual creemos que es lo que ocurrio en
nuestro sujeto nmero 2 ya que su resultado fue +1.
-Eritrocitos: pueden significar que hay dao en vias urinarias, insuficiencia renal, piedras
en el rin e incluso tumores, el resultado ser negativo entre 0-5 eritrocitos / microlitro.
-Hemoglobina: solo aparece en caso de haber aproximadamente 10 eritrocitos / microlitro.
Urocultivo
En esta parte realizamos un cultivo de cada sujeto en agar CLED, agar sangre y agar Mac
Conkey (para estos ltimos 2 se dividi la placa por la mitad) se podra decir que no hubo
proliferacin ya que en el agar Mac Conkey hubo un crecimiento de 3 y 4 colonias
respectivavente para cada sujeto, sin embargo esto no es de relevancia clnica lo cual explica que
ambos sujetos sean asintomticos. (Chvez, 2015)
El nico agar en donde hubo una proliferacin notoria fue en la muestra problema
cultivada en el agar CLED. En sta, hubo un crecimiento bacteriano de color amarillo opaco que
es caracterstico de dos bacterias para ese agar que son la Klebsiella y la E. coli, al principio igual
se penso en S. aureus sin embargo se descart ya que el color de las colonias en el agar CLED es
de un amarillo potente. La diferencia principal y notoria en la cual nos basamos para decidir cual
era la bacteria que habimos cultivado fue que E. coli se presenta en colonias de aspecto slido y
secas en cambio la Klebsiella tiene un aspecto mucoso muy evidente (Figura 3.) Una vez
analizados todos estos fctores se concluy que el crecimiento en ese agar era por colonias de
Klebsiella. (Winn et al, 2013)
Cuestionario:
1. A qu se debe que el patgeno mayormente asociado a las ITU sea E. coli?
R: Las ITU usualmente son causadas por E. coli, porque son bacterias del tracto digestivo que
se encuentran regularmente en la piel alrededor de las reas del recto y de la vagina. La cercana
De acuerdo con Ruz (s.f), es fundamental la higiene previa, la cual consta de limpieza en los
genitales con solucin antisptica en forma de chorro. Cmo en adultos es preciso obtener, de ser
posible, el chorro medio.
En caso de no ser posible la obtencin de la muestra por el mtodo de la bolsa colectora de
orina, siguiendo con lo propuesto por el autor antes citado, se opta por la puncin suprapbica la
cual es realizada directamente por el peditra. Dicha tcnica se realiza insertando una aguja en la
vejiga del nio, la cul contendra muestra estril.
tienen gran relevancia clnica, sin embargo, los cristales de cistina, leucina, tirosina,
colesterol y bilirrubina si son de importancia diagnostica. Indica en qu
circunstancias o a que patologas podemos relacionar estos cristales.
R: Segn Graff en (2007) estos cristales van a estar asociados a dos factores
-Asociado a lito:
-
Conclusin Grupal:
Despus de habernos preparado para la elaboracin de la prctica, regresamos al
laboratorio para continuar con el programa de la materia Laboratorio de microbiologa y
parasitologa. En esta prctica tenamos como objetivo observar e identificar las bacterias
patgenas en el tracto urinario.
Durante el transcurso de esta prctica se not mucho el entusiasmo de cada uno de los
integrantes debido a la participacin de cada uno y por los aportes de ideas que cada quien daba.
Debido a los conocimientos adquiridos por el equipo, la previa y correcta preparacin en realizar
los procedimientos pedidos, dio como consecuencia buenos resultados. Al finalizar esta prctica,
todos los integrantes de nuestra mesa nos sentimos muy satisfechos con respecto al desempeo
del equipo por la buena organizacin y comunicacin entre nosotros.
En esta prctica se cometieron muy pocos errores, estos no fueron determinantes para
alterar nuestros resultados por lo tanto no nos perjudicaron. Aunque estos errores hayan sido
pequeos hay que tenerlos en cuenta debido a que en prximas prcticas los resultados pueden
cambiar con la presencia mnima de estos yerros.
Un aspecto muy importante durante la prctica es el momento de discutir los resultados.
Al observar nuestros crecimientos en los diferentes agares, cada quien dio su punto de vista
conforme los resultados que obtuvimos. Al principio haba ideas divididas pero despus de la
discusin de resultados el equipo lleg a una misma conclusin el cual fue correcto.
Al haber finalizado esta prctica enriquecimos ms nuestro conocimiento debido a la
experimentacin y discusin de resultados obtenidos. Esperamos con ansias las prximas
prcticas para poder seguir creciendo y seguir con el programa de esta materia que nos lleva al
desarrollo de nuestra profesin.
Conclusiones Personales:
Como no creci nada en nuestras muestras, tuve que usar como referencia para observar el
crecimiento de las posibles bacterias patgenas del tracto urinario las muestras de la maestra, y
comet el muy grave error de olerla fuertemente cuando la destap. Casi me vomito. Pero
logramos distinguir entre ellas basndonos en las caractersticas que sabamos.
equipo para evitar cualquier error posible. A pesar de pocos errores yo creo que la prctica y
nuestro desempeo en ella fue un xito no solo por los resultados tambin los conocimientos que
me lleve de ella.
Espero que en las prximas prcticas, al igual que mis compaeros espero que haya la
disposicin con la que siempre llegamos y con los conocimientos necesarios para poder realizar
la prctica lo mejor posible y obtener resultados ms evidentes y as enriquecer nuestro
conocimiento en esta materia.
comentaron lo til que llega a ser esta materia, mi motivacin aumento y estoy decidida a
aprender lo mas que pueda.
Referencias:
Cavagnaro, F. (s.f). Anlisis de Orina. Pontifica Universidad Catlica de Chile. Recuperado el 24
de octubre de 2015 de:
http://escuela.med.puc.cl/paginas/publicaciones/manualped/AnalOrina.html