DIVISO CELULAR:

1. Por bipartio, ou gemulao: procariotas e organelos

2. Por mitose: Os eucariotas tm uma diviso mais complexa, por
terem muitos cromossomas e organelos.
Centrmero: Constrio primria; cinetcoro (espcie de "disco de
protenas" formado no final da prfase); sequncias especficas
Funcionamento interno: Comer; manter; crescer; dividir
Precursores de molculas: marcados com radioatividade permitem
ver as clulas em fase posterior depois de serem ativados.
Citodensitometria: medir a quantidade de DNA existente numa
clula.
Estudo de mutantes: no se reproduzem, no entanto tm de ser
capazes de se dividir. Crescem a 25 C e depois introduzem-se genes
da diviso celular. Ex: ciclo celular de leveduras.
Ciclo celular:

Interfase (Fase G1, fase S, fase G2 e fase G0), em que a fase

G0 a fase do ciclo celular onde a clula permanece
indefinidamente na interfase. Dependendo do tipo de clula,
pode acontecer uma estimulao e o retorno do ciclo celular.
Este tipo de fase acontece entre a citocinese anterior e a fase
G1.

Fase mittica (prfase, metfase, anfase, telfase e

citocinese)
Ciclinas = substncias cuja concentrao oscila em
sincronia com o ciclo celular; so sintetizadas somente
em fases especficas, de acordo com a necessidade, e
destrudas aps a sua utilizao. Ligam-se s CDKs para
que possam juntas exercer suas funes.
CDKs (Cinases Dependentes de Ciclina) = Esto
presentes durante todo o ciclo celular, mas s so
ativadas em determinadas fases, quando ligadas s
ciclinas. Este complexo CDK-ciclina fosforila protenas
especficas.
Estrutura do ncleo de uma clula:

Molcula de DNA:
constituda por monmeros, bases azotadas, glicose
(acares) (na sua estrutura) e duas cadeias polinucleotdicas
antiparalelas, ou seja, com sentidos de crescimento inversos e
dispostas helicoidalmente. Esta dupla hlice mantem-se unida
devido complementaridade das bases azotadas, que
estabelecem entre si ligaes qumicas por pontes de
hidrognio. A adenina do nucletido de uma cadeia emparelha
com a timina de um nucletido da outra cadeia e a citosina
emparelha sempre com a guanina. Nas clulas eucariticas, o
DNA permanece no interior do ncleo, existindo tambm no
interior de determinados organelos, como as mitocndrias e os
cloroplastos.
Replicao do DNA:
O processo de replicao assegura tanto a produo de clulas
geneticamente idnticas como a passagem da informao
gentica ao longo das geraes, em todos os organismos.
Nos eucariontes, a replicao tem lugar no interior do ncleo
das clulas, mas nos procariontes tem lugar no citoplasma.
Ligao molcula de DNA de um complexo enzimtico, a DNApolimerase O complexo desfaz a dupla hlice e destri as
pontes de hidrognio Provoca a separao das duas cadeias
antiparalelas a DNA-polimerase vai ligando a cada uma das
cadeias nucletidos livres, de acordo com a complementaridade
das bases e no sentido de 53.

Assim, cada cadeia nucleotdica da molcula antiga serve de

molde nova cadeia antiparalela que se vai formando
passagem do complexo
enzimtico.
No final deste
processo, obtm-se
duas molculas de DNA
exactamente iguais,
com os nucletidos
dispostos na mesma
sequencia em que
estavam dispostos na
molcula original.
Cada uma das
molculas fica com
uma das cadeias da molcula original que serviu de molde, pelo
que o processo designado por replicao
semiconservativa.

DNA vs. RNA

A pentose a desoxirribose
Possui nucletidos de timina
As bases complementares so: AT;C-G
Estrutura em dupla hlice
Armazena a informao gentica

A pentose a ribose
Possui nucletidos de uracilo
As bases complementares so: AU;C-G
Estrutura simples
De acordo coma funo que
desempenha, entre outros, o RNA
pode ser:
mRNA (mensageiro);
tRNA (transferncia);
rRNA (ribossmico).

Trs origens de replicaes diferentes; comeam a replicar-se e

no fim ligam-se uns aos outros (imagem do power point)
Eucariotas: muitos replices em cada clula;
Procariotas: apenas um replico em cada clula;
O licenciamento das origens apenas durante a fase G1
impede a replicao repetida de um mesmo replico.

Replicao em procariotas:
3

1. Helicase (abre/separa a cadeia)

2. Topoisomerase I (relaxa a tenso/ alivia a tenso mecnica
antes das helicases)
3. Protenas ssb (protenas que mantm a cadeia aberta)
4. Complexo polimerase III
5. Complexo de iniciao (para cadeia atrasada)
6. Polimerase I (editar)
7. Ligase

Para fazer replicao so utilizadas DNA-polimerases em

qualquer organismo, em todas as molculas:
Os primers so fitas de DNA, com mais ou menos 20 bases (A, T,
C, G) complementares, isto se ligam por complementaridade ao
incio da sequncia de DNA que se quer multiplicar. Quando uma
molcula de DNA vai ser multiplicada deve-se separar a dupla fita,
formando assim duas fitas diferentes mas complementares entre
si. Cada fita servir de molde para a duplicao, por isso,
precisamos de dois tipos de primers diferentes.

Problema: a

incorporao de

nucletidos
da
cadeia que est a ser utilizada
pela polimerase
s se d num lado da cadeia; DNAfsforos esto ligados no
carbono 5; com os
nucletidos acontece o mesmo.
Replicao nos eucariotas:
A molcula
vai crescer do lado 5 para o
lado 3 -> n de carbonos das pentoses.
Old strand: cadeia antiga
Lagging strand: cadeia atrasada
Leading strand: cadeia avanada
PCNA: uma protena que atua como
um fator de processabilidade para a
DNA-polimerase em clulas eucariticas.
Isto conseguido circundando a
processabilidade, DNA, criando assim
uma ligao topolgica do genoma. A
protena codificada por este gene
encontrada no ncleo e um cofactor de
DNa-polimerase delta. A protena
codificada, atua como um homotrmero e
ajuda a aumentar a processabilidade de
sntese da cadeia principal durante a replicao do DNA.

Matriz celular: estrutura residual complexa, de natureza

predominantemente proteica, obtida apartir de ncleos de
hepatcitos atravs de tratamento sequencial com altas
concentraes salinas, detergentes e nucleases.
Cromatina: complexo de DNA e protenas que se encontra dentro do
ncleo celular nas clulas eucariticas.

A zona de origem liga-se matriz de origem; origem da

replicao e surgem molculas filhas

Telmeros: protenas telomerases: constroem cromossomas para

fora: aumentam cromossomas antes da replicao; apenas serve de
suporte para ter o primer, sendo que no final existe replicao de
DNA. Este processo s se realiza num dos lados, geralmente na
cadeia atrasada; tem como funo proteger os cromossomas e no
deixar as pontas das cadeias soltas. Julga-se que o envelhecimento se
deve ao encurtamento dos cromossomas.

Alguns conceitos importantes a saber (a negrito):

A replicao semi-conservativa do DNA exige que duas cadeias polinucleotdicas que
formam a hlice do DNA se separem, de modo a expor as bases que iro orientar o
emparelhamento dos nucleotdeos para formao das novas cadeias complementares s
cadeias moldes. A separao de duas cadeias da hlice do DNA ocorre medida que as novas
cadeias vo sendo sintetizadas. A regio de separao das cadeias tem a forma de uma letra Y
e denominada forquilha de replicao.
Os experimentos mostraram que ambas as cadeias filhas so sintetizadas na forquilha de
replicao por um complexo de enzimas que inclui a polimerase III do DNA. Como, no entanto,
as duas cadeias moldes so antiparalelas, em uma delas a sntese da cadeia complementar
ocorre no sentido 5 => 3, mas na outra cadeia essa sntese teria que se dar no sentido
inverso, ou seja, 3 => 5. No entanto, as duas cadeias so sintetizadas pela polimerase III do
DNA, que s catalisa o crescimento da cadeia no sentido 5 => 3.
A explicao para esse paradoxo que, na forquilha de replicao, uma das cadeias
sintetizada continuamente por uma polimerase que se move no mesmo sentido do
deslocamento da forquilha. J a cadeia com polaridade inversa sintetizada no sentido inverso
ao do deslocamento da forquilha de replicao, portanto, tambm no sentido 5 => 3. Isso
possvel porque, nesse ltimo caso, a polimeraze sintetiza segmentos polinucleotdicos curtos,
que so, posteriormente, unidos para formar a nova cadeia contnua. A cadeia que cresce no
mesmo sentido que o deslocamento da forquilha de replicao, e cuja sntese ocorre
continuamente, chamada de cadeia leading.
A cadeia que cresce no sentido oposto ao deslocamento da forquilha de replicao, e cuja
sntese ocorre descontinuamente, chamada de cadeia lagging.
Esse modo de replicao do DNA, em que uma das cadeias sintetizada continuamente e a
outra, descontinuamente, chamado de sntese semidescontnua. Costuma-se dizer tambm
qua a sntese do DNA na forquilha de replicao assimtrica, pois em uma das cadeias
(cadeia leading) ela ocorre continuamente, enquanto que na outra (cadeia lagging) ela ocorre
de modo descontnuo, em fragmentos. Esses fragmentos so denominados fragmentos de
Okazaki.

Origem de replicao: so regies especficas na sequncia

nucleotdica de molculas de DNA, nas quais determinadas protenas
se ligam para abrir a dupla hlice deste cido nuclico, permitindo o
incio da biossntese (replicao) de novas molculas de DNA.

Replico: uma regio do DNA que se duplica como uma unidade

individual. Essa duplicao ocorre na interfase, fase na qual o
material gentico precisa ser duplicado para que ocorra
posteriormente a diviso celular. Os organismos procariotas
apresentam apenas um replico, enquanto os organismos eucariotas
possuem vrias unidades de replicao atuando simultaneamente
durante a fase 'S' da interfase.
Telomerase: enzima que tem como funo adicionar sequncias
especficas e repetitivas de DNA extremidade 3' dos cromossomos,
onde se encontra o telmero. Esta enzima uma transcriptase
reversa, tendo na sua estrutura um modelo em RNA que utiliza para
sintetizar o DNA telomrico, em eucariotas.

Reconhecer o problema da replicao dos telmeros em

cromossomas lineares, e a forma como as clulas eucariotas
resolvem esse problema:
A replicao dos telmeros facilitada pelo tipo de sequncia de
nucletidos presente nessa regio cromossmica. Os telmeros dos
cromossomas humanos so constitudos por repeties de um
conjunto de 6 nucletidos (sequncia TTAGGG) e a telomerase
reconhece a extremidade dessa sequncia, estabelece ligao com o
DNA e estende a fita molde na direo de 5'para 3' , acrescentando
uma nova repetio TTAGGG de cada vez. A telomerase uma
enzima com uma caracterstica nica: possui no seu interior uma fita
de RNA, que serve de molde para a extenso dos telmeros. De certo
modo essa enzima faz uma "transcrio reversa" pois a partir do
molde de RNA constri um novo segmento de DNA na extremidade do
cromossomo.
Sem atividade da telomerase, os cromossomos tornam-se menores, a
cada ciclo de replicao, por perda de parte da regio telomrica.
Com o tempo os telmeros so totalmente perdidos e as delees
passam a ocorrer sobre regies codificantes. Esse encurtamento
progressivo dos cromossomos considerado um dos fatores que
limita ou impossibilita a diviso celular contnua e est associado
provavelmente ao processo normal de envelhecimento (de clulas,
tecidos e consequentemente do organismo como um todo).
Controlo do ciclo celular:

Fase G1: Nesta fase sintetizam-se muitas protenas, enzimas e RNA,

verifica-se tambm a formao de organitos celulares e,
consequentemente, a clula cresce.
Fase S: nesta fase que ocorre a auto-replicao das molculas de
DNA (diz-se no plural porque para cada cromossomo existe uma
molcula de DNA). A partir deste momento os cromossomas passam
a possuir dois cromatdeos ligados por um centrmero.
Fase G2: Neste perodo d-se a sntese de molculas necessrias
diviso celular (como os centrolos).
As fases G e S possuem estas denominaes em decorrncia de
abreviaes do ingls - G para gap (intervalo) e S para synthesis
(sntese).
denominada fase G0 quando uma clula permanece
continuamente durante a interfase interrompendo a diviso.
possvel atravs de estmulos externos retornar a clula para seu
ritmo normal.
Fase M (mittica): fase onde ocorre a mitose, esta divide-se em
prfase, metfase, anafase, telfase e citocinese.
Mitose
: A mitose um processo contnuo mas geralmente
consideram-se, por uma questo de facilidade, quatro etapas:
Prfase, Metfase, Anfase e Telfase. No decorrer destas etapas, o
material gentico sintetizado na fase S do ciclo celular dividido
igualmente por dois ncleos filhos. Este processo est associado
diviso de clulas somticas.
9

A mitose iniciada apenas em presena de um fator promotor da

mitose (MPF) proteico citoplasmtico, que provoca a condensao
dos cromossomas. As variaes de concentrao de MPF esto
relacionadas com as variaes de uma outra protena conhecida por
ciclina. Aparentemente, quando a ciclina atinge uma certa
concentrao no citoplasma, o MPF ativado. Durante a mitose a
ciclina rapidamente destruda, aumentando novamente durante o
ciclo seguinte.
Um dos primeiros sinais do prximo incio da mitose o surgimento
de uma faixa relativamente densa de microtbulos logo abaixo da
membrana citoplasmtica. Esta faixa envolve o ncleo num plano que
corresponder ao plano equatorial do fuso acromtico mittico. Esta
faixa desaparece aps a formao do fuso acromtico mas
corresponder ao local onde se forma a separao entre as duas
clulas filhas.

IMPORTANTE:

Uma protena-cinase catalisa a reao de adio desse grupamento

fosfato e essa reao unidirecional, com o ATP sendo quebrado para
produzir a energia necessria para a reao. Uma protena-fosfatase,
faz exatamente a reao inversa das cinases, ela remove um
grupamento fosfato, ou seja, faz a desfosforilao. As clulas contm
vrias protenas-cinases e protenas-fosfatases cada uma sendo
responsvel por agir em um determinado grupo ou uma determinada
protena. As protenas-cinases pertencem a uma grande famlia de
enzimas que compartilham uma sequncia de 290 aminocidos.
Algumas sequncias especficas de aminocidos permitem que as
cinases reconheam grupamentos especficos nas protenas a serem
fosforiladas.

Expresso gnica nos eucariontes e procariontes (diferenas):

As diferenas bsicas entre os sistemas de regulao procarionte e
eucarionte so:
- as bactrias possuem apenas um tipo de RNA polimerase, ao passo
que as clulas eucariontes possuem 3 tipos (RNApol I, RNApol II e
RNApol III);
- os RNA mensageiros so processados nas clulas eucariontes,
sofrendo modificaes em suas extremidades;
- a RNApol II, responsvel pela sntese do mRNA, tem um grau de
10

complexidade funcional muito maior em eucariontes que em

procariontes, como ilustrado na figura abaixo.

Algumas protenas especiais so necessrias para a transcrio em

eucariontes, sendo os principais elementos associados ao processo de
regulao da transcrio. Estas protenas so os fatores
transcricionais. Os fatores trasncricionais so capazes de modular o
funcionamento gentico por apresentarem uma das seguintes
capacidades:
- Presena de domnios de ligao ao DNA;
- presena de dominios de interao a protenas que se ligam ao DNA;
- presena de domnios funcionais associados condensao do DNA.

Transcrio e traduo:

11

nucletidos
o

Transcrio: o processo pelo qual uma

molcula de RNA sintetizada a partir da
informao contida na sequncia de
de uma molcula de DNA de fita dupla;
processo pelo qual uma molcula de RNA
sintetizada a partir de
um gene.

Complexo
RNA polimerase: A RNA polimerase faz a
transcrio do
DNA com vista formao de rRNA
(RNA ribossmico).
Esta composta por 12
subunidades
proteicas (polipptidos);
executa 80% de toda
a transcrio que ocorre na
clula. O processo
de transcrio pela RNA polimerase tem
pouca
regulao (o rRNA para os
ribossomas
sempre necessrio em grandes
quantidades).
Consequentemente, a transcrio
por esta um processo comparativamente simples, com poucos
passos que requerem regulao. Devido simplicidade da transcrio
pela RNA polimerase, a mais rpida das polimerases atuantes.

Processamento do mRNA:

12

Fases da transcrio:

INCIO

quando
ocorre

reconhecimento de

sequncia especfica no DNA;

ALONGAMENTO quando os ribonucletidos so sucessivamente
incorporados;
TERMINAO quando sequncias no DNA so reconhecidas e a
sntese interrompida.

Traduo: processo biolgico no qual a sequncia nucleotdica de

uma molcula de mRNA (RNA mensageiro) utilizada para ordenar a
sntese de uma cadeia polipeptdica, cuja sequncia de aminocidos
determinam uma protena.

13

Neste processo,

molculas de
operam a

RNA transportador (tRNA)

traduo reconhecendo
as sequncias nucleotdicas do
mRNA e correlacionando-as com a sequncia que corresponde a
determinados aminocidos. A molcula que fornece a informao
gentica a ser traduzida o RNA mensageiro. Este contm uma
sequncia de nucleotidos que lida, pelo RNA transportador (que
possui uma srie de anticodes) de trs em trs bases. Cada trinca de
bases do RNA mensageiro representa um codo e est relacionada a
um aminocido especfico. A insero de aminocidos na cadeia
polipeptdica crescente ocorre na mesma ordem em que os seus
respetivos codes aparecem na molcula de RNA mensageiro.
Na clula a traduo processada em estruturas chamadas de
ribossomas, que posicionam corretamente RNAs transportadores com
RNAs mensageiros e catalisam as ligaes peptdicas entre
aminocidos para a sntese de protenas. Os ribossomas so
compostos por duas subunidades e agem de maneira a percorrer a
totalidade da cadeia de RNA mensageiro. O papel do RNA
transportador nesse processo seria o de conectar os codes do RNA
14

mensageiro com os devidos aminocidos espalhados pelo citoplasma.

Ao efetuar tal processo, o ribossoma far a ligao peptdica entre os
codes transportados pelo RNA transportador, gerando a fita proteica.

Promotor TATA box:

O TATA box um dos principais promotores eucariticos conhecidos e
encontra-se a 5' do ponto de incio da transcrio da grande maioria
dos genes.
Ele foi descoberto aps a realizao de vrios estudos de footprinting,
onde observava-se a ligao da enzima RNA polimerase II logo acima
(upstream) do ponto de incio da transcrio, em uma sequncia que
era conservada entre diversos organismos. Essa sequncia localizase, normalmente, cerca de 25 nucletidos antes do local de incio da
transcrio e foi chamada de TATA box. A sequncia consenso
consiste de um heptanucleotdeo composto por As e Ts e est
presente em praticamente todos os genes de eucariontes que levam
a produo de RNAs mensageiros.
O TATA box semelhante sequncia consenso 10 de procariontes
(TATAAT) e frequentemente flanqueado por regies ricas em G e C.
Mutaes nessa sequncia diminuem bastante a eficincia do
promotor e diminuem a taxa de transcrio do gene. Mesmo
mutaes que mudem As para Ts podem gerar problemas, indicando
que no s a percentagem desses nucletidos importante, como
tambm a sequncia especfica.
Spliceossoma: um complexo de RNA e de subunidades proteicas
que removem sequncias no-codificantes (intres) do mRNA
percursor, um processo normalmente designado por splicing;
composto por cinco pequenas ribonucleoprotenas nucleares (snRNP)
e por um conjunto de factores proteicos associados.
Cadeia sense: aquela que ocorre no sentido: 5' para 3'.
15

Cadeia antisense: aquela que ocorre no sentido de 3 para 5.

Codo: sequncia de trs bases.
Anticodo: Conjunto de trs nucletidos (tripleto) do tRNA,
complementar do codo do mRNA, que se liga por uma ligao
covalente a um aminocido especfico

16