Es un agente alquilante que se une a compuestos con hidrgenos lbiles como los que tienen grupos carboxilos, amino,

sulfhidrilos, hidroxilos, etc.Es

utilizado en la esterilizacin gaseosa, generalmente en la industria farmacutica. Destruye todos los microorganismos incluso virus.
Sirve para esterilizar material termosensible, como el descartable (goma, plstico, papel, etc.), equipos electrnicos, bombas cardiorrespiratorias, metal,
tubuladuras, etc. Es muy peligroso por ser altamente inflamable y explosivo, y adems cancerigeno.
Con aldehdos:
Son agentes alquilantes que actan sobre las protenas, provocando una modificacin irreversible en enzimas e inhiben la actividad enzimtica. Estos
compuestos destruyen las esporas. Glutaraldehdo:

Consiste en preparar una solucin alcalina al 2% y sumergir el material a esterilizar de 20 a 30 minutos, y luego un enjuague de 10 minutos.
Este mtodo tiene la ventaja de ser rpido y ser el nico esterilizante efectivo fro. Puede esterilizar plstico, goma, vidrio, metal, etc. Formaldehdo:Se
utilizan las pastillas de paraformaldehido, las cuales pueden disponerse en el fondo de una caja envueltas en gasa o algodn, que despus pueden ser
expuesta al calor para una rpida esterilizacin (accin del gas formaldehdo). Tambin pueden ser usadas en Estufas de Formol, que son cajas de doble
fondo, en donde se colocan las pastillas y se calienta hasta los 60 C y pueden esterilizar materiales de ltex, goma, plsticos, etc.Las pastillas de formalina
atemperatura ambiente esterilizan en 36 hs.
Esterilizacin por gas-plasma de Perxido de Hidrgeno:

Es proceso de esterilizacin a baja temperatura la cual consta en la transmisin de perxido de hidrgeno en fase plasma (estado entre lquido y gas), que
ejerce la accin biocida.* Ventajas: No deja ningn residuo txico. Se convierte en agua y oxgeno al final del proceso. El material no precisa aireacin. El
ciclo de esterilizacin dura entre 54 y 75 minutos.
*Desventajas:No se pueden esterilizar objetos que contengan celulosa, algodn, lquidos, humedad, madera o instrumental con lmenes largos y estrechos.
Es el mtodo de esterilizacin ms caro de entre los descritos.
Los materiales que se esterilizan son metales, plsticos, textiles, etc.* Mtodos fsicosCalor:La utilizacin de este mtodo y su eficacia depende de dos
factores: el tiempo de exposicin y la temperatura.Todos los microorganismos son susceptibles, en distinto grado, a la accin del calor. El calor provoca
desnaturalizacin de protenas, fusin y desorganizacin de las membranas y/o procesos oxidantes irreversibles en los microorganismos. Calor Hmedo:El
calor hmedo produce desnaturalizacin y coagulacin de protenas. Estos efectos se debe principalmente a dos razones: *El agua es una
especie qumica muy reactiva y muchas estructuras biolgicas son producidas por reacciones que eliminan agua. *El vapor de agua posee un coeficiente de
transferencia de calor mucho ms elevado que el aire.Autoclave

Se realiza la esterilizacin por el vapor de agua a presin. El modelo ms usado es el de Chamberland.Esteriliza a 120 a una atmsfera de presin (estas
condiciones pueden variar)y se deja el material durante 20 a 30 minutos.Equipo:Consta de una caldera de cobre, sostenida por una camisa externa
metlica, que en la parte inferior recibe calor por combustin de gas o por una resistencia elctrica, esta se cierra en la parte superior por una tapa de
bronce. Esta tapa posee tres orificios, uno para el manmetro, otro para el escape de vapor en forma de robinete y el tercero, para una vlvula
de seguridad que funciona por contrapeso o a resorte.Funcionamiento:Se coloca agua en la caldera, procurando que su nivel no alcance a los objetos que
se disponen sobre una rejilla de metal. Se cierra asegurando la tapa, sin ajustar los bulones y se da calor, dejando abierta la vlvula de escape hasta que
todo el aire se desaloje y comience la salida de vapor en forma de chorro continuo y abundante.
TyndalizacinEsterilizacin por accin discontinua del vapor de agua, se basa en el principio de Tyndal. Las bacterias que resisten una sesin de
calefaccin, hecha en determinadas condiciones, pueden ser destruidas cuando la misma operacin se repite con intervalos separados y en varias
sesiones.Se efecta por medio del autoclave de Chamberland, dejando abierta la vlvula de escape, o sea funcionando a la presin normal. Puede
tambin realizarse a temperaturas ms bajas, 56 u 80 ocpara evitar la descomposicin de las sustancias a esterilizar, por las temperaturas elevadas.
*Ventajas del calor hmedo: Rpido calentamiento y penetracin Destruccin de bacterias y esporas en corto tiempo No deja residuos txicos Hay un bajo
deterioro del material expuesto Econmico *Desventajas: No permite esterilizar soluciones que formen emulsiones con el agua Es corrosivo sobre ciertos
instrumentos metlicos.
Los materiales que se pueden esterilizar son textiles y metales.
Calor seco:El calor seco produce desecacin de la clula, es esto txicos por niveles elevados de electrolitos, fusin de membranas. Estos efectos se
deben a la transferencia de calor desde los materiales a los microorganismos que estn en contacto con stos.La accin destructiva del calor sobre
protenas y lpidos requiere mayor temperatura cuando el material est seco o la actividad de agua del medio es baja.Estufas

Doble cmara, el aire caliente generado por una resistencia, circula por la cavidad principal y por el espacio entre ambas cmaras, a temperatura de 170
C para el instrumental metlico y a 140 C para el contenido de los tambores.Se mantiene una temperatura estable mediante termostatos de metal, que al
dilatarse por el calor, cortan el circuito elctrico. *Ventajas del calor seco: No es corrosivo para metales e instrumentos. Permite la esterilizacin de
sustancias en polvo y no acuosas, y de sustancias viscosas no voltiles.
*Desventajas: Requiere mayor tiempo de esterilizacin, respecto al calor hmedo, debido a la baja penetracin del calor.
Los materiales que se pueden esterilizar son polvos, sustancias viscosas y metales.
Radiaciones Su accin depende de: El tipo de radiacin El tiempo de exposicin La dosis
Ionizantes:Producen iones y radicales libres que alteran las bases de los cidos nucleicos, estructuras proteicas y lipdicas, y componentes esenciales para
la viabilidad de los microorganismos. Tienen gran penetrabilidad y se las utiliza para esterilizar materiales termolbiles (termosensibles) como jeringas
descartables, sondas, etc. Se utilizan a escala industrial por sus costos. Rayos Ultravioletas:

Afectan a las molculas de DNA de los microorganismos. Son escasamente penetrantes y se utilizan para superficies, se utilizan para la esterilizacin en
quirfanos.Rayos Gamma:
Su empleo esta basado en los conocimientos sobre la energa atmica. Este tipo de esterilizacin se aplica a productos o materiales termolbiles y de gran
importancia en el campo industrial. Puede esterilizar antibiticos, vacunas, alimentos, etc.

FiltracinSe usan membranas filtrantes con poros de un tamao determinado. El tamao del poro depender del uso al que se va a someter la muestra. Los
filtros que se utilizan no retienen virus ni micoplasmas, estos ltimos estn en el lmite de separacin segn el dimetro de poro que se utilice. La filtracin
se utiliza para emulsiones oleosas o soluciones termolbiles. Su usa para esterilizar aceites, algunos tipos de pomadas, soluciones oftlmicas, soluciones
intravenosas, drogas diagnsticas, radiofrmacos, medios para cultivos celulares, y soluciones de antibiticos y vitaminas.Existen tres tipos bsicos de filtros:
Filtros profundos o Filtros de profundidad:Consisten de un material fibroso o granular prensado, plegado, activado, o pegado dentro de los canales de flujo.

En este tipo de filtros la retencin de las partculas se produce por una combinacin de absorcin y de retencin mecnica en la matriz. Membranas
filtrantes: Tienen una estructura continua, y la retencin se debe principalmente al tamao de la partcula. Partculas ms pequeas al tamao del poro
quedan retenidas en la matriza del filtro debido a efectos electrostticos. Filtros de huella de nucleacin (Nucleoporo):Son pelculas muy delgadas de
policarbonato que son perforadas por un tratamiento conjunto con radiacin y sustancias qumicas. Son filtros con orificios muy regulares que atraviesan la
membrana verticalmente. Funcionan como tamices, evitando el paso de toda partcula con un tamao mayor al del poro.
Testigos y controles

Controles de Esterilizacin:
Son controles que se realizan sobre el mtodo de esterilizacin. Monitorean o controlan si el proceso de esterilizacin funciona correctamente.
Controles Biolgicos:Utiliza indicadores biolgicos como controles del proceso de esterilizacin. Estos indicadores son preparaciones estandarizadas de
microorganismos relativamente resistentes al mtodo de esterilizacin que se emplea. Los indicadores se procesan en forma conjunta con el material a
esterilizar y el nmero de microorganismos presentes en el indicador es mayor que el que se encuentra en el material.
Una vez concluido el proceso de esterilizacin los indicadores son inoculados en medios de cultivo adecuados e incubados durante un determinado
perodo de tiempo. Si el proceso de esterilizacin fue correctamente empleado y funciona bien no debe observarse desarrollo del indicador incubado.

Testigos biolgicos:
Es un Indicador Biolgico autocontenido para utilizar en ciclos de esterilizacin por xido de Etileno y Vapor.
Cada unidad est compuesta por un tubo plstico, una ampolla de vidrio rompible con medio de cultivo, y un disco de papel inoculado con esporas.
El diseo de la tapa permite la penetracin del agente esterilizante dentro del testigo y a su vez evita la contaminacin de su contenido luego del proceso de
esterilizacin. Es un producto apto para uso hospitalario e industrial.
. Para usar en procesos por xido de Etileno: 600mg/L, 54C, 60%RH.. Contiene esporas de Bacilus atrophaeus 10.6 (ATCC N 9372). Incubacin en 48
hs.
. Para usar en procesos por Vapor: en ciclos por gravedad a 121C, y ciclos de prevaco entre 121C y 135C.. Contiene esporas de Geobacilus
stearothermophilus 10.5 y Geobacilus stearothermophilus 10.6.. Incubacin en 24 hs.
Indicadores de autocultivo.
Son los nicos controles que garantizan una esterilizacin efectiva.
Contienen microorganismos altamente resistentes a la esterilizacin (stearothermophilus) en ampollas con caldo de cultivo incorporado.
Lectura en incubadoras especiales:
o Negativos = esterilizacin correcta.
o Positivos = reesterilizar de nuevo.

Tiras de esporas.
Papel inoculado con esporas en sobres.
Lectura en servicio de microbiologa.
Estos controles deben realizarse a diario en centrales de esterilizacin y a nivel industrial. En autoclaves pequeos deben realizarse cada cierto tiempo.
ActivacinDespus que el testigo biolgico se ha enfriado, hay que romper la ampolla de vidrio del interior apretando los lados del tubo plstico. La unidad
se encontrar correctamente activada una vez que el medio de cultivo haya sido liberado de la ampolla de vidrio y haya entrado en contacto con el disco
de papel inoculado con esporas.
EtiquetadoCada unidad cuenta con una etiqueta que detalla: nmero de lote, fecha de vencimiento, fabricante y tipo de proceso de esterilizacin al que
est destinado su uso. La etiqueta posee espacio para que el usuario marque la fecha, nmero de autoclave y configuracin de la carga. La etiqueta
incorpora un indicador de proceso para facilitar la distincin entre los testigos procesados de los no procesados.
CertificacinCada lote tiene certificacin de poblacin, especies, valor-D, valor-z (si fuera aplicable), pureza y vencimiento. Su vida estante es de 18 meses
a partir de la fecha de fabricacin.
Control: el testigo debe conservar su color original para considerar la carga del ciclo como estril. Si el testigo no muestra signos de crecimiento se debe
considerar el test como invlido.
Test: un ciclo de esterilizacin fallido se indica mediante turbidez y/o un cambio de color hacia el amarillo. Un testigo que permanece con su color original
indica que los parmetros del ciclo de esterilizacin han sido alcanzados satisfactoriamente.
Controles fisicoqumicos:
Termocuplas: son mtodos directos que registran la temperatura a la que se desarrolla la esterilizacin.
Sustancias de punto de fusin conocido: se utilizan en autoclaves generalmente, son sustancias con un punto de fusin similar al de la temperatura de
esterilizacin del proceso. Estas sustancias estn mezcladas con un colorante y al fundir indican si se alcanz la temperatura ptima de esterilizacin y el
tiempo que se mantuvo.
Cinta testigo: cinta de papel crepado indicadora del proceso de esterilizacin con vapor. La impresin cambia de blanco a negro al ser sometida a
condiciones de esterilizacin de ciclo corto. Se puede escribir sobre ella. Excelente adhesin al papel, tela, vidrio, metal y plstico. Est formulada con un
adhesivo no manchante y no se transfiere a los substratos.Aplicaciones Cinta testigo del proceso de esterilizacin en autoclaves de vapor en clnicas
mdicas, dentales y hospitales. Muy til para sujetar paquetes con una variedad de instrumentos mdicos en el proceso de esterilizacin. Esta cinta est
diseada para utilizarse en el ciclo corto de esterilizacin con vapor.

Controles qumicos:
Los controles qumicos son dispositivos especiales impregnados de compuestos qumicos sensibles al cumplimiento de los parmetros de esterilizacin
(tiempo, presin y temperatura).
-

Viran de color si se cumplen los parmetros fsicos del autoclave.

Deben ubicarse en la cmara, interior o exterior del paquete de material.

Validar su "viraje" o cambio de color antes de usar el material.

Tipos de controles qumicos de esterilizacin:

Test de Bowei and Dick: deteccin de bolsas de aire. Debe realizarse al inicio del da o tras reparaciones o mal funcionamiento.
Control qumico externo: en la superficie de cada paquete.
Control qumico interno: sueltos o incorporados en los envases.
Controles de Esterilidad :
Permite controlar en forma probabilstica si el material qued completamente esterilizado pues se testea un porcentaje representativo de todo el material.
Transferencia Directa a Medios de Cultivo:Se transfiere una parte de la muestra a medios de cultivos apropiados que permitan el crecimiento de cualquier
contaminante.
Tioglicolato para anaerobios y aerobios (37C)

Tripticasa-Soja para aerobios (25C)

Las muestras representativas se incuban en estos medios durante un perodo de 14 das, al cabo del cual no se debe observar ningn tipo de crecimiento.
Puede ocurrir que la muestra no se encuentre estril pero que no se produzca crecimiento durante la incubacin por algn motivo inherente al medio o a la
muestra, por ejemplo presencia de algn inhibidor, etc.
Test de Promocin del CrecimientoEs un testigo del control de esterilidad. Son testigos que se utilizan para los medios de crecimiento del control ya que
estos medios tienen capacidad de promover el crecimiento. Para estos testigos se utilizan microorganismos con exigencias nutricionales. Los medios
deben ser inoculados con un bajo nmero de microorganismos, se incuban durante 7 das, al cabo de los que se debe observar un abundante crecimiento.
Test de BacteriostasisEs un control que se realiza para determinar si la muestra supuestamente estril no posee propiedades bacteriostticas. De esta
forma se previenen falsos negativos pues no se produce crecimiento habiendo en la muestra microorganismos viables. Para este test se toman los medios
de cultivo con microorganismos de ensayo y se siembran en las muestras a testear. Se incuban durante 7 das. Si se produce crecimiento esto indica que el
material no contena inhibidores.
Filtracin por Membranas:Se utiliza para determinar la esterilidad de medios de cultivo, soluciones de antibiticos, etc.
Se filtran los medios y se procesa el filtro como en un control de esterilidad para determinar si hay microorganismos presentes.
Desinfectantes y antispticos
* Los antispticos son agentes qumicos que se usan para reducir el nmero de microorganismos que se encuentran en la piel y en las membranas
mucosas, sin producirles irritacin o dao. Adems de eliminar o matar los microorganismos, es posible que los antispticos tambin impidan el crecimiento
o el desarrollo de algunos tipos de microorganismo.
Se emplean los antispticos para:

Preparar la piel, la crvix o la vagina antes de un procedimiento clnico

Lavarse quirrgicamente

Lavarse las manos en situaciones de alto riesgo, tal como antes de un procedimiento invasivo o de contacto con usuarios que tengan alto riesgo de
infectarse (p.ej. los recin nacidos o los usuarios inmunodeprimidos).
Los antispticos no se usan para con materia inerte, tales como los instrumentos y las superficies. Los antispticos estn hechos para reducir o destruir los
microorganismos de la piel o de las membranas mucosas sin hacerles dao a los tejidos. Normalmente los antispticos tienen menos potencia que las
sustancias qumicas utilizadas para desinfectar los objetos inanimados. Por eso, nunca se deben usar soluciones antispticas para desinfectar materia
inerte tales como instrumentos y guantes reutilizables. Adems, nunca se deben dejar a remojo en soluciones antispticas tales objetos como pinzas,
tijeras, bisturs y agujas de sutura.
Antispticos comunes y cmo usarlos para preparar a los usuarios

Yodo Povidona, esta libre de toxicidad, generalmente el uso continuo, sin enjuague, provoca irritacin en la piel. Debe mantenerse en recipientes
opacos y al abrigo de la luz.
Clorhexidina de 4% (p.ej. Hibiclens). Aplicar, quitar el exceso con gasa esterilizada o algodn esterilizado. No es recomendable para el lavado de manos
quirurgico.

Yodo de 1-3%, seguido de alcohol de 60-90% (etlico o isoproplico). Aplicar, dejar que se seque al aire.
Clorhexidina con cetrmido (p.ej. Savlon). Aplicar, quitar el exceso con gasa esterilizada o algodn esterilizado.
Alcohol Iodado, es una combinacin de Yodo con alcohol al 70% , se lo utiliza para la preparacin de la zona operatoria de la piel. Debe mantenerse en
recipientes opacos y tapados para evitar la evaporacin y la alteracin de su concentracin inicial.
Alcohol, es una alternativa para la antisepsia de la piel en los pacientes sensibles al Yodo, con un tiempo no inferior a los 60 segundos.
El alcohol etlico al 70% (etanol), es el mas frecuente en el ambiente hospitalario.
El Alcohol isoproplico al 70 o 90% (isopropanol), es mas potente que el etlico, ambos alcoholes resecan la piel, lesionan el epitelio y provocan dolor
cuando se aplican sobre heridas abiertas.
El alcohol al 70% con el agregado de emolientes en forma de gel, puede utilizarse como lavado antisptico. Son inflamables y deben ser guardados en un
lugar limpio, fresco y bien ventilados y hermticamente cerrados.

PERXIDO DE HIDROGENO (Agua oxigenada)

Ha sido reconocido como germicida desde hace ms de 100 aos atrs.
Ha sido empleado durante aos para promover la limpieza y debridamiento de las heridas.
Tiene un dbil efecto germicida y fcilmente se degrada a oxgeno molecular y agua. Es muy importante su estabilidad, (6-10%), lo que es muy difcil de
garantizar en nuestros mercados en relacin al tiempo de almacenamiento. Su accin es mecnica, las burbujas de oxgeno desprenden tejido muerto y las
bolsas de bacterias ayudan a eliminarlas de la herida. Tiene inconvenientes, puede crear ampollas llenas de aire en los nuevos epitelios, separndolos del

tejido subyacente. Por consiguiente, el perxido de hidrgeno no debe utilizarse cuando la herida est adecuadamente debridada y se est formando
epitelio nuevo. Tras su aplicacin, debe eliminarse de la herida con solucin fisiolgica. Tampoco debe emplearse en ciertas heridas profundas ni en la
cavidad peritoneal, pues podra provocar un mbolo gaseoso en los capilares y vasos linfticos.
Se ha demostrado que es bactericida, virucida y fungicida. La inmersin de material limpio en una solucin estabilizada al 6% proporcionara una
desinfeccin de alto nivel en treinta minutos.
Su estabilidad no est garantizada en nuestro medio, por lo que no se la recomienda. Corroe metales como el cobre, aluminio y zinc. Debe mantenerse al
abrigo de la luz.
EVITE el uso de lo siguiente:
Perxido de hidrgeno (de 0,3%), disponible en preparaciones antispticas para impedir infecciones en cortaduras, quemaduras y raspaduras menores.
Estos productos no son apropiados para el lavado quirrgico y la preparacin de la piel de usuarios.
Productos que contengan compuestos de amonio cuaternario, tales como cloruro de benzalconio (p.ej. Zephiran). Como estos productos son
desinfectantes, no se deben utilizar en lugar de antispticos. Se contaminan estos desinfectantes en la presencia de bacterias comunes, son incompatibles
con el jabn y se desactivan fcilmente si se usan con gasa de algodn.

Compuestos que contengan el mercurio (tal como el laurel mercrico). No se deben usar porque son extremadamente txicos, producen ampollas y
cuando se aspiran, causan trastornos del sistema nervioso central (tales como el entumecimiento, la sordera y dificultades del habla) o la muerte. Adems, se
pueden absorber a travs de la piel y a las mujeres embarazadas que se expongan a cantidades reducidas se les puede producir defectos de nacimiento
en el feto.
Cmo evitar que se contaminen las soluciones:
No deje nunca a remojo en soluciones antispticas el algodn, la gasa o las esponjas. Si se meten las pinzas o los dedos en el recipiente una y otra vez
para agarrar los objetos, se contaminar tanto la solucin como los objetos mismos.
No deje nunca a remojo en soluciones antispticas el algodn, la gasa o las esponjas. Si se meten las pinzas o los dedos en el recipiente una y otra vez
para agarrar los objetos, se contaminar tanto la solucin como los objetos mismos.
Echar en un recipiente pequeo la cantidad de antisptico que se necesite y mojar el algodn o la gasa all. Despus de preparar al/a la usuario/a, tire
todo el antisptico que quede en este recipiente ms pequeo. O
Echar del recipiente el antisptico directamente al algodn o a la gasa. No toque el borde del recipiente con el algodn o la gasa, para evitar que el
recipiente se contamine.

Los antispticos estn hechos para reducir o eliminar los microorganismos que se encuentran en la piel o en las membranas
mucosas. No utilice nunca los antispticos para desinfectar los objetos o instrumentos y jams deje el instrumental a remojo en soluciones antispticas.
* Se denomina desinfectante a un proceso fsico o qumico que mata o inactiva agentes patgenos tales como bacterias, virus y protozoos inhibiendo el
crecimiento de microorganismos patgenos en fase vegetativa que se encuentren en organismos vivos.
Los desinfectantes reducen los organismos nocivos a un nivel que no daan la salud ni la calidad de los bienes perecederos.
Los desinfectantes se aplican sobre objetos inanimados, como instrumentos y superficies, para tratar y prevenir las infecciones.

Clasificacin de los elementos y niveles de desinfeccin

Clasificacin de los elementos:
De acuerdo al riesgo potencial de producir una infeccin durante su uso, los materiales se dividen en:
a) Crticos: Constituido por instrumental u objetos que se introducen directamente dentro del torrente sanguneo o dentro de reas normalmente estriles
del cuerpo (Ej.: instrumental quirrgico, catteres cardacos, implantes, etc.)
Tienen GRAN RIESGO DE PRODUCIR INFECCIONES
b) Semicrticos: Constituido por elementos que estn en contacto con las membranas mucosas intactas del paciente o piel lesionada . Generalmente no
penetran en cavidades estriles del cuerpo (Ej.: endoscopios rgidos y flexibles no invasivos, tubos endotraqueales, citoscopios, etc.)
Tienen GRAN RIESGO DE PRODUCIR INFECCIONES
c) No crticos: Son aquellos elementos que habitualmente no tocan al paciente o tocan la piel intacta (Ej.: muletas, mesa del paciente, tensimetro,
estetoscopio, etc.)
Tienen POCO RIESGO DE PRODUCIR INFECCIONES
Niveles de desinfeccin:
a) Alto nivel: Destruye todos los microorganismos con excepcin de un gran nmero de esporas bacterianas (bacterias, casi todas las esporas de hongos,
bacilo de TBC, pequeos virus)
b) Nivel intermedio: Inactiva bacterias vegetativas, hongos, casi a todos los virus, pero no a endosporos bacterianos.
c) Bajo nivel: Destruyen a la mayora de las bacterias, algunos virus, algunos hongos, pero no afectan organismos ms resistentes como bacilo de TBC o
endosporos bacterianos.
CLASIFICACIN DE ELEMENTOS
NIVELES DE DESINFECCIN

DESINFECTANTES DE USO COMN EN HOSPITALES Y/O CENTROS ASISTENCIALES

AMONIOS CUATERNARIOS (Cl. de Benzalconio: Tersotyl M.R.) (DG6 M.R.)
Estos compuestos tuvieron amplio uso desde su inicio como germicida en el ao 1935.
Son buenos agentes de limpieza, pero actualmente no se recomiendan como antispticos de piel y tejidos, ya que diversos estudios han documentado que
en ellos sobreviven y desarrollan bacterias Gram (-), que han podido relacionarse con brotes de infecciones hospitalarias. Materiales como el algodn y las
gasas disminuyen su actividad, porque absorben los ingredientesactivos.
No se los debe utilizar para la desinfeccin de elementos crticos o semicrticos. Solamente para el tratamiento de materiales no crticos.
No eliminan esporas ni determinados virus, como por ejemplo el de la Hepatitis B.
Debe usarse con cuidado, ya que se ha visto que algunas soluciones permiten el crecimiento de Pseudonomas.
COMPUESTOS MERCURIALES (Merthiolate M.R.)
Son antispticos que inactivan rpidamente en presencia de protenas. Se requieren altas concentraciones de mercuriales para alcanzar un efecto
bactericida: son desinfectantes de bajo nivel y prcticamente no cumplen ningn rol en las estrategias modernas de desinfeccin.
Usado sobre materiales o superficies debe recordarse que corroe los metales.
FORMALDEHDO
Inactiva microorganismos a travs de la alcalinizacin de las protenas.
Se presenta en concentraciones del 40%. La solucin acuosa es bactericida, tuberculicida, fungicida, esporicida y virucida.
Segn su dilucin actuar como esterilizante, luego de un tiempo prolongado o como desinfectante de alto nivel.
Se lo utiliza para la inactivacin de bacterias en los sistemas de distribucin de agua tratada de los servicios de Hemodilisis.
Si se lo emplea en la reutilizacin de membranas su concentracin ser del 4%, con un tiempo de contacto de 24 Hs. como mnimo. Debe tenerse
presente que los filtros deben ser enjuagados cuidadosamente antes de usarse. Resultan convenientes monitoreos peridicos de formaldehdo residual.
Los vapores de formaldehdo tienen efectos txicos e irritantes, por lo que es necesaria la utilizacin de elementos protectores durante su manipulacin.
(Mscaras respiratorias, protectores oculares, guantes resistentes y delantales impermeables). El ambiente de trabajo debe contar con un
adecuado sistema de recambio de aire. Concentraciones ambientales de 2 p.p.m. han ocasionado efectos txicos.
Las pastillas de formalina no deben utilizarse en cajas de instrumental, guantes, etc. Su accin germicida solo se produce en la vaporizacin por calor.
Actualmente se desaconseja su uso en quirfanos o habitaciones de pacientes, por ser no solo un procedimiento riesgoso (efecto carcinognico) sino
tambin ineficaz.
Por las razones expuestas, su uso queda limitado a los servicios de Hemodilisis.
GLUTARALDEHDO AL 2%
Es una solucin estable, bactericida de amplio espectro, eficaz contra virus, de efectiva accin esporicida. Resulta activo ante presencia de materia
orgnica. Algunas publicaciones indican que no es corrosivo para los metales, gomas y lentes, mientras que otras indican presencia de corrosin a largo
plazo. No tiene efectos deletreos sobre cementos y lentes de endoscopios. Se debe evitar la corrosin por contacto, debida a la presencia de dos
metales diferentes en presencia de un electrolito conductor: agua. (Ej.: No mezclar acero inoxidable con instrumental de nquel).
Acta afectando las lipoprotenas de la membrana celular y el citoplasma de las formas bacterianas vegetativas, altera el sistema enzimtico y el dao en
la membrana permite la salida de sustancias y componentes intracelulares y facilita la entrada directa del desinfectante al citoplasma.
Entre los factores que influencian su actividad, se debe tener en cuenta: (Ver factores que influyen en los procedimientos de desinfeccin)
- Ph: Solucin alcalina. 7.9
- Concentracin: al 2%
- Temperatura: ambiente
- Materia orgnica: Tratar de disminuir su presencia en los materiales a desinfectar. Uno de los factores ms importantes es la limpieza previa del material,
requisito sin el cual el proceso de desinfeccin fracasara. El glutaraldehdo es incrustante de la sangre.

Recientes estudios han podido demostrar que concentraciones de glutaraldehido disminuyen del 2,1% (Ph 8.5) al 1,3% (Ph 7.4) a lo largo de un perodo
de 28 das a temperatura ambiente.
El glutaraldehido tiene una vida media entre 14 y 28 das. Los preparados comerciales tienen una solucin "activadora", un inhibidor de corrosin y
glutaraldehido al 2%. La solucin "activadora" se coloca en el momento de preparar el producto para usar por primera vez. Debe tenerse la precaucin de
mezclar muy bien la preparacin, para evitar obtener una solucin parcialmente activada.
MATERIALES QUE SE PUEDEN DECONTAMINAR, DESINFECTAR Y ESTERILIZAR CON GLUTARALDEHIDO AL 2%.
Aluminio, zinc, acero de carbono, carburo de tungsteno, acero inoxidable, acero cromado, cloruro de polivinlico, policarbonato, polietileno, poli propileno,
sondas de neopreno, silicn, tubos de ltex, tubos de Krotn, y nylon rgido.
Resulta de utilidad para materiales especiales, como LARINGOSCOPIOS, ELECTROBISTURIES, ENDOSCOPIOS, LUCES PTICAS, etc., que por su
calidad no pueden ser sometidos a procedimientos de decontaminacin habituales o por calor, como por ej. el autoclavado y a los que el Hipoclorito de
sodio ya sea al 1 o al 10% les produce con el tiempo un importante deterioro.
Se debe controlar diariamente, hasta que se establezca un promedio para el uso y duracin del glutaraldehido "activado", con tiras medidoras de Ph. y con
tiras medidoras del porcentaje de concentracin, que debe mantenerse siempre al 2%. La capacidad germicida de la solucin vara segn el uso del
producto activado. A mayor uso diario, se produce una disminucin de la vida media del mismo. Se recomienda su medicin y no el uso estandarizado
durante 14 ( endoscopios, por ej., por posibilidad de bacilo de Koch ) o 28 das. Algunas marcas comerciales de este producto ofrecen tiras reactivas
destinadas a medir la concentracin del mismo, Es por ello que conviene tener en cuenta las especificaciones del fabricante. Hay varias marcas
comerciales disponibles en el mercado.
La contaminacin de la solucin con materia orgnica influenciar en la prdida de la actividad. Materias orgnicas como sangre o pus, podran actuar
protegiendo especies microbianas o compitiendo con la molcula desinfectante, reduciendo su actividad.
Se ha comprobado disminucin en la actividad del glutaraldehido cuando se diluye con agua.
Cuando se lo utiliza como DESINFECTANTE DE ALTO NIVEL en instrumentos sometidos a limpieza previa, la mayora de los estudios sugieren un tiempo
de contacto no menor a 10 minutos. Cuando la finalidad es la DECONTAMINACIN el tiempo se extender a 30 minutos y cuando el objetivo es la
ESTERILIZACIN: 10 HORAS o ms.
Los objetos sometidos a desinfeccin con glutaraldehido se sometern a previa limpieza manual. (Realizada con guantes y proteccin ocular).
La limpieza manual se realiza cepillando la superficie de los instrumentos con cepillos duros (no de metal). Ej. cepillo de dientes o de uas, bajo chorro de
agua fra.
No se debe usar agua a ms de 45 grados centgrados, pues coagula la albmina y hace ms difcil la limpieza.
Las superficies no deben frotarse con polvos limpiadores domsticos, abrasivos, lana de acero, esponjas de metal, cepillo de alambre, porque estos rayan
los metales, aumentando las posibilidades de corrosin.
Los cepillos de limpieza, una vez usados, deben ser lavados, desinfectados (Hipoclorito al 1%) y secados para evitar que se contaminen.
Los detergentes empleados en la limpieza, no deben ser abrasivos ni custicos ni precipitar en aguas duras. Instrumentos acanalados, huecos o con
cualquier tipo de luz, deben ser lavados en su interior mediante presin por medio de una jeringa o similar.
Este procedimiento tambin es vlido cuando se sumerge el elemento en el glutaraldehido, a efectos de que el desinfectante contacte con todas las partes
del instrumental a desinfectar.
Despus de la limpieza manual, el enjuague es muy importante, ya que se debe retirar todo resto de detergente antes de sumergir el instrumental en la
solucin desinfectante. (No menos de dos minutos).
Resulta por lo expuesto relativamente fcil el uso de glutaraldehido, pero si bien es de baja irritabilidad y toxicidad, puede tener algunos efectos txicos
para el personal que lo manipula, ya sea en procesos de desinfeccin, decontaminacin o esterilizacin.
Del mismo modo, puede resultar txico para el paciente expuesto al instrumental tratado, que en algunos casos puede involucrar el contacto con la
sangre.
Algunas investigaciones mostraron que los plsticos y las gomas absorben el 10% del glutaraldehido y lo liberan despus de 24 Hs.
La absorcin de glutaraldehido depende del tiempo de contacto entre el enjuague del material. Esta investigacin sugiere la inmersin del material en agua
estril en tres baos diferentes, agitando frecuentemente el material (2 minutos en total ). Tener en cuenta el enjuague a presin con jeringa en
instrumental con luz interior.
El glutaraldehido es levemente irritante de la piel, severamente irritante de los ojos y membranas mucosas. Se han documentado dermatitis de contacto en
asistentes dentales y enfermeras del quirfano por no adoptar medidas de bioseguridad. La inhalacin de aldehdos tambin resulta txica.
Debe utilizarse en un ambiente exclusivo, con buena aireacin.
El Personal que lo utilizar debe estar entrenado en su correcto manejo y debe conocer las medidas de bioseguridad que debe emplear para su
manipuleo.
La vestimenta de los operadores consistir en:
Barbijo, Proteccin ocular (Antiparras o gafas, para evitar riesgo de salpicaduras en los ojos) y guantes resistentes. Dado que no se puede medir la
cantidad de partculas por milln que se encuentran presentes en la atmsfera del lugar donde se utiliza el producto, se recomienda que los operadores no
trabajen en dicho lugar durante ms de quince o veinte minutos continuos.
Si el ambiente cuenta con extractor de aire, a la altura de las mesadas de trabajo, el riesgo de toxicidad para los operadores disminuye. Se recomienda
mantener los contenedores de glutaraldehido activado correctamente tapados, salvo en el momento en que se realizan los procedimientos.
HIPOCLORITO DE SODIO
Conocido popularmente como agua lavandina, cloro, leja, agua de Javel o agua Jane es un compuesto qumico, adems de un fuerte oxidante qumico
cuya frmula es NaClO.
Contiene el cloro en estado de oxidacin +1 y por lo tanto es un oxidante fuerte y econmico. Debido a esta caracterstica se aprovechan sus propiedades
de desinfectantes.
En disolucin acuosa slo es estable a pH bsico. Al acidular en presencia de cloruro libera cloro elemental. Por esto debe almacenarse alejado de
cualquier cido.
Se utiliza como desinfectante en el ambiente hospitalario, ya sea por aplicacin directa en mesadas desinfectando los lavabos gracias a su poder fungicida
y bactericida, o elementos no crticos como chatas y orinales, se recomienda el uso diluido con agua (12,5 ml. de Hipoclorito por cada 100 ml. de Agua.
En parasitologa puede ser utilizado para la esporulacin invitro de Ooquistes de protozoos del phylum apicomplexa en el mtodo denominado de
Cawthorn.

Manejo del material estril

El campo estril siempre debe estar lo mas lejos posible del personal de salud que lo va a manipular, al depositar el material en el campo estril debe
haber mucha precaucin, como por ejemplo, separar las manos del cuerpo, abrir el paquete y tirar el material en el campo estril, se considera que los 2
cm. que rodean al campo estril esta contaminado. Si se nos cayera el paquete tocado en el campo estril se debe volver a preparar el campo estril y
utilizar todo como material limpio o volverlo a esterilizar.
METODO PARA LA ESTERILIZACION DE MATERIAL
- Una limpieza exhaustiva del material utilizado
- El empaquetado ha de ser de tela o papel + plstico

- Medios de esterilizacin, autoclave (calor hmedo), poupinel (calor seco)

- Controles de esterilizacin, qumicos, fsicos (autoclave), tiras reactivas que viran de color a una determinada temperatura, biolgico (esporas).
- Almacenaje, no ha de variar la T, que este protegido de la contaminacin del aire, poner ultravioletas para proteger el mal esterilizado.
- Ante la sospecha de que no este bien esterilizado utilizar como limpio.

Conclusin
Esterilizacin
La esterilizacin es una tcnica de saneamiento preventivo para conseguir la asepsia, o sea, la destruccin de todos los microorganismos y sus formas de
resistencia que puedan existir en la superficie o en el espesor de un objeto cualquiera. Obtiene como resultado la ausencia de todo germen vivo
consiguiendo material estril. Se debe considerar como inadecuados los siguientes trminos por ser falsos: esterilizacin por ebullicin (slo se trata de
desinfeccin); esterilizacin por antispticos (en la piel y mucosas no se puede conseguir esterilizacin por ellos y en cuanto a los procedimientos de
inmersin en desinfectantes son muy escasos y requieren tiempo y pH adecuados), y esterilizacin del intestino (slo podemos ejercer con antibiticos y
quimioterpicos un efecto bacteriosttico o bactericida de algunos de los grmenes en l contenidos, pero no de toda su flora bacteriana). La esterilizacin
se puede conseguir por procedimientos fsicos y qumicos, siendo ms usados los primeros, aunque en los ltimos aos se estn desarrollando los
qumicos.
Se denomina desinfeccin a una tcnica de saneamiento que tiene por objeto destruir los microorganismos patgenos, productores
de enfermedades transmisibles, actuando sobre personas, animales, ambiente y superficies de locales, objetos y excretas que son portadores de aqullos,
evitando as su propagacin; esta accin germicida puede ser bactericida, viricida, fungicida o esporicida. Se dice que un objeto es infectante cuando en
su superficie o en su masa lleva grmenes de alguna enfermedad transmisible; para que deje de serlo se emplea la desinfeccin o la esterilizacin, siendo

la primera la tcnica de saneamiento, que utiliza la medicina preventiva, para destruir los grmenes patgenos, mientras que utiliza la esterilizacin cuando
no solamente se destruyen los grmenes patgenos, sino cualquier forma elemental de vida patgeno o saprofita e incluso las formas de resistencia. Un
objeto puede estar desinfectado, pero no esterilizado, mientras que todo objeto estril est desinfectado. Si se acta con material que no posee germen
vivo alguno, ni siquiera en sus formas de resistencia, se dice que dicho material es asptico y que se trabaja con asepsia. Si se acta en personas, heridas
infectadas, mediante productos bacteriostticos o germicidas (antispticos), se realiza antisepsia.

Bibliografa
MANUAL DE ENFERMERIA DE LA UNIVERSIDAD DE ROSARIO / 2 EDICION, ESTERILIZACION.
APUNTES DE LA FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS ( UNLP)
www.microbiologia.com.ar
www.wikipedia.org
www.ramosmejia.org

www.higiene.edu.uy
www.saludymedicinas.com

Leer ms: http://www.monografias.com/trabajos78/fundamentos-enfermeria-esterilizacion/fundamentos-enfermeria-esterilizacion2.shtml#ixzz3kEfxZnw5

Microbiologa General y Bucal

Prctica 1: El laboratorio de
Microbiologa
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Descripcin
Un laboratorio de Microbiologa es un lugar habilitado para manejar y estudiar microorganismos.
El trabajo debe realizarse de acuerdo con los estndares tcnicos y de seguridad propios de un laboratorio de
Microbiologa Clnica.
Es importante recordar que la finalidad es determinar los microorganismos presentes en la muestra por lo que
es preciso extremar las precauciones para evitar contaminaciones que den lugar a resultados errneos.
Todas las muestras deben ser manejadas con precaucin por su potencial patogenicidad.
Para deshacerse del material contaminado se deben utilizar recipientes adecuados que deben ser esterilizados
posteriormente.
Nunca se puede tirar nada contaminado por el fregadero o al cubo de la basura comn sin haber sido
esterilizado previamente.
El el laboratorio deben existir unas recomendaciones generales de limpieza y en caso de vertidos:
Procedimientos de limpieza de superficies externas mediante papel humedecido con solucin
desinfectante (alcohol 70%, desinfectante fenlico diluido, etc.). Aclarar con agua los restos de
desinfectante.
En caso de usar soluciones de hipoclorito en zonas metlicas, limpiar posteriomente para evitar el efecto
corrosivo.
En caso de derramamientos de material peligroso o formacin de aerosoles: evitar inspiraciones de esos

aerosoles, esperar 30 minutos hasta que las partculas se hayan depositado y limpiar con mascarilla,
guantes y otros tiles protectores.
En caso de vertido de materiales, cubrir la superficie con desinfectante y posteriormente cubrir con papel
humedecido con desinfectante. Dejar durante 15 minutos y limpiar. En caso necesario aclarar con agua.
En caso de derramamientos menores limpiar el material vertido mediante papel humedecido y
posteriormente aclarar, cuando sea necesario.

Los laboratorios debern disponer de los aparatos e instrumental necesario para el correcto desarrollo de su
actividad.
Debe existir un procedimiento de control de calidad en el laboratorio de Microbiologa Clnica que implique la
monitorizacin de los medios e instrumentos, con el fin de asegurar la adecuada realizacin de los aislamientos,
identificacin y caracterizacin de los patgenos y la realizacin precisa de las pruebas de sensibilidad a los
antimicrobianos como referencia teraputica. El sistema de la calidad deber contemplar la existencia de
registros de formacin de personal.
es imprescindible la existencia de un procedimiento sobre medidas de proteccin personal en el manejo de
equipos y aparatos.
Los equipos del laboratorio deben funcionar de forma que se asegure la reproducibilidad de los resultados de
las pruebas diagnsticas.

El laboratorio deber estar bajo la direccin y responsabilidad de un facultativo con la especialidad

correspondiente, legalmente capacitado para realizar aqullas determinaciones clnicas que el laboratorio tenga
autorizadas.

El personal tcnico y sanitario del laboratorio deber disponer la titulacin adecuada para las funciones que
desarrolla
de
conformidad
con
la
legislacin
vigente.
Estructura de un laboratorio de Microbiologa Clnica
rea administrativa
rea de recepcin de muestras
rea de extraccin que deber:
Disponer de material de un solo uso para contacto con muestras biolgicas.
Disponer de un rea de extracciones y toma de muestra, una sala de espera para los pacientes y los
servicios
de
higiene
correspondientes.
Disponer
de
personal
legalmente
autorizado
para
la
toma
de
muestras.
Disponer de un manual de extraccin, toma y transporte de muestras.
El manual antedicho deber ser elaborado por el responsable
rea de trabajo: anlisis y procesado de muestras
El

puesto

de

trabajo

debe

debe

de

estar

limpio

ordenado

El material necesario debe prepararse antes de empezar a trabajar y colocarse de forma adecuada para que se
facilite su utilizacin asi se evitarn accidentes y se minimizar el riesgo de contaminacin
Nunca se debe pipetear con la boca. Utilizar siempre elementos manuales o automticos.

Todo el material utilizado debe estar estril.

1. Elementos y materiales ms frecuentes de un laboratorio de Microbiologa Clnica
1.1. Mesas de laboratorio y fregadero

1.2. Vitrinas y armarios

1.3. Mechero Bunsen

Todas las manipulaciones deben realizarse en un radio de 10-15cm de la llama del mechero (zona
asptica).
En caso de utilizar mechero nunca se debe coger material por encima de la llama
Antes de comenzar a trabajar se procurar disponer de todo el material necesario para el
procesamiento de la muestra
Tomar las medidas necesarias para evitar la contaminacin de las muestras o/ y cultivo por
microorganismos
ambientales
1.4. Gradillas

1.5. Estufa de incubacin

Es

una

cmara

de

temperatura

controlada

para

cultivo

de

microorganismos.

Se utiliza para facilitar el desarrollo de los microorganismos a su temperatura ptima de

crecimiento
(generalmente
35-37).

1.6. Frigorfico o cmaras refrigeradas

Se utilizan para conservar tanto materiales (medios de cultivo, reactivos) como microorganismos.
Generalmente estn a una temperatura fija de 4C.

1.7. Congeladores
Se utilizan para la conservacin de reactivos y microorganismos a temperaturas inferiores a 0C,
llegando a -80C (los ms frecuentes son -20, -40 y -80).

1.8. Microscopio ptico

1.9. Centrfuga
Aparato que aplica sobre los tubos una fuerza centrfuga lo que permite la separacin de los
distintos componentes de la muestra mediante la precipitacin en el fondo del tubo de las partculas
en suspensin.

1.10. Cmaras de seguridad biolgica (ver practica 2)

1.11. Desionizador de agua.

La mayor parte de los trabajos que se realizan en un laboratorio de Microbiologa Clnica necesitan
la utilizacin de agua pura con el fin de evitar cualquier tipo de interferencia. Entre otra
caractersticas debe: estar exenta de materiales en suspensin o un pH comprendido entre 5,0 y
7,5. Durante aos se ha utilizado agua destilada, en la actualidad losdestiladores se han ido
abandonando para dar paso a desionizadores que funcionan con resinas de intercambio inico.
Tambin
se
pueden
utilizar
otras
tcnicas
como la
smosis
inversa.

1.12. Contador de colonias: Es un aparato que mediante la iluminacin de la placa y una lupa, nos
permite observar con mayor nitidez las colonias y por tanto facilita su recuento.

1.13. Balanzas

1.14. Baos termostticos: son recipientes que contienen agua y un sistema de regulacin de la
temperatura. Se utilizan para atemperar medios de cultivo o incluso para incubar cultivos de
microorganismos.

1.15. Agitador/ mezclador

vortex

agitador horizontal

1.16. Jarras de anaerobios:

Recipientes que se usan para conseguir una atmsfera libre de oxgeno para el cultivo de
microorganismos anaerobios.

1.17. Asas de siembra:

Se utilizan para sembrar. Pueden ser metlicas o de plstico, curvas o rectas (para la siembra por
picadura).

1.18. Ph-metros:

1.19. Material fungible

Placas de Petri: recipientes para la preparacin de medios de cultivo slidos

Placas de Petri con medio slido

Tubos con medio lquido

Tubos con medio slido

Pipetas de vidrio, de plstico y pipeteadores.

Pipetas

Pipeteador automtico

Pipeteador manual

Pipetas automticas (micropipetas) y puntas de pipeta:

Se utilizan para pipetear pequeas cantidades de lquidos.
Se utilizan con puntas desechables de distinto tamao y color segn la micropipeta. Existen cuatro
tamaos: de 0,5-2m; de 2-20 m; de 20-200 m y de 200-1000 m.

Asas acodadas o Asas de Digralsky:

Se utilizan para la extensin de microorganismos sobre la superficie de un medio de cultivo en
placa Petri.

Portas y cubres
Para realizar las observaciones al microscopio.

Vasos de precipitados y matraces

Cucharas y esptulas:
Se utilizan para pesar muestras o medios de cultivo.

rea de limpieza de material y eliminacin de residuos

Zona donde se procede a la esterilizacin mediante autoclave del material utilizado. El material desechable se
elimina y con el material reciclave se procede a la eliminacin de residuos y lavado. De esta manera el material
queda
dispuesto
para
ser
utilizado.
rea de esterilizacin

Procedimiento por el que se consigue la muerte de todos los organismos vivos y formas de resistencia en un
objeto o producto tratado.
Autoclave
Es el equipo ms utilizado.

Es un procedimiento de esterilizacin mediante calor hmedo. Se realiza en al autoclave durante 15 20

min, segn el volumen, a 115C 121C, segn la naturaleza del material que se desee esterilizar.
Autoclavado: es un procedimiento en el que se emplea vapor a presin (a 1 atmsfera). Como tiene gran poder
de penetracin la temperatura y el tiempo utilizados son menores que los que se emplean con el horno Pasteur
(121 C, 15-20 minutos).

Se utiliza para esterilizar: Medios de cultivo, ropa, material de plstico resistente al calor hmedo, objetos
de metal que no se alteren con la humedad y sobre todo material de vidrio.

Horno de Pasteur: emplea altas temperaturas (160-180 C) durante un tiempo prolongado (1.5 a 3 horas).
Debido a su poca capacidad de penetracin se usa para esterilizar vidrio y metales. Acta principalmente
desnaturalizando las protenas y secundariamente oxidando los compuestos celulares.

rea de preparacin de medios

Almacn
rea de seguridad microbiolgica

de

reactivos

Debe ser una zona diferenciada y aislada para la manipulacin de microorganismos susceptibles de formar
aerosoles potencialmente infecciosos.