Conteo de Conidias Y BACTERIAS

UNIVERSIDAD NACIONAL SAN LUIS GONZAGA DE ICA.
FITOPATOLOGIA GENERAL
CONTEO DE CONIDIAS DE
HONGOS
INTRODUCCION
Para realizar esta prctica se hace con la ayuda de un contador de esporas
llamado Hemacitmetro (Improved Neubauer). Y un microscopio biolgico
compuesto.
El conteo de esporas se realiza de la siguiente manera: De una o varias cajas
de Petri con micelio bien desarrollado del hongo, se deposita en un matraz
Erlenmeyer con agua destilada estril. El contenido se licua y forma una
solucin concentrada de esporas.
Con una pipeta se toma una alcuota y se deposita en el portaobjeto graduado
del Hemacitometro. Las esporas observadas se contaran en los ocho cuadros
ms grandes se suman y se dividen entre ocho y el resultado se multiplica por
10,000, obteniendo as la concentracin de esporas por mililitro.
OBJETIVOS:
Tener nociones en tcnicas de observacin y conteo de conidias.
Conocer el uso de Hemacitmetro (Improved Neubauer) ,asi como su formula.
FACULTAD DE AGRONOMIA - ICA

REVISIN DE
LITERATURA
Los hongos son organismos eucariotas, constituyen uno de los mayores grupos
de seres vivos, hasta ahora se han descrito unas 80000 especies pero se
estima que el nmero real llega al milln y medio de especies, hay muchas
especies que no presentan diferencias morfolgicas, sino que son
genticamente diferentes.
(Cubas, 2007) La micologa es la ciencia que se encarga del estudio de los
hongos, tradicionalmente ha sido una disciplina de la botnica, a pesar de que
los anlisis filogenticos indican que los hongos estn ms relacionados con
los animales que con las plantas.
Sin embargo, los hongos producen esporas sexuales o asexuales para su
reproduccin y multiplicacin, lo que no ocurre en animales. (Cubas, 2007)
Esporas son los elementos de perpetuacin de la especie.
De acuerdo a la morfologa reciben distinto nombre: alantospora con forma de
banana, aleuriospora con base plana, dictiospora con septos longitudinales y
transversales, didimospora con un tabique, equinulada como un erizo,
escolescospora como un gusano, estaurospora como una estrella, feospora de
color obscuro, fragmospora con tabiques transversales, fusiforme como un
huso, helicospora como una espiral, hialospora de color claro y translcido,
planospora mvil, verrucosa con verrugas, zoospora con flagelos.
Las balistosporas son proyectadas violentamente una vez maduras. Las
hipnosporas son aqullas capaces de permanecer con vida latente por largo
tiempo. (Carrillo, 2003) Las esporas pueden ser de origen asexuado
(mitosporas) o sexuado (meiosporas), y por su ubicacin relativa internas
oexternas.
Las mitosporas seoriginan en las estructuras anamrficas y las meiosporas en
las teleomrficas. (Carrillo, 2003) Esporas o conidios ms bien grandes,
multicelulares, con tabiques transversales y longitudinales. La forma de los
conidios es caracterstica, vara de claviforme a elipsoidal y frecuentemente
presentan un apndice apical simple o dividido (de longitud hasta 20 m).
2

Paredes gruesas con la superficie lisa o verrugosa, de color
marrn plido
3. u oscuro.
A menudo con una pequea cicatriz en la base. El nmero de clulas de los
conidios vara segn la especie. (Carrillo, 2003) La cmara de recuento o
cmara de Neubauer es un aprato de precisin hecho de vidrio ptico
especial.
Se utiliza para contar clulas u otras partculas en suspensiones bajo el

microscopio.
Las cmaras de recuento se utilizan principalmente para el anlisis de sangre
(recuento de leucocitos, eritrocitos, trombocitos) y recuento de clulas en el
liquor. Adems las cmaras de recuento sirven para contar bacterias, esperma
y esporas de hongo. (Marienfield, 2007).
CONTEO DE CONIDIAS DE HONGOS
Para determinar el nmero de conidias por volumen contenidas en una
determinada suspensin ,
Se utiliza un hematocimetro o cmara de Neubauer. El hematocimetro es una
lamina de vidrio que tiene dos camars de 1 mm2 . la superficie cubre un rea
total de 9mm2 . adicionalmente ,el cuadro del centro esta subdividido en cinco
por cinco cuadrados agrupados de 0.2 mm de lado y una superficie de
0.04mm2 cada uno.
Los cuadrados del centro a su ves estn subdivididos en 16 cuadrados mas
peueos de 0.0025mm2 cada uno. Cinco de estos cuadrados se utilizan para
el conteo de conidias .
Se debe dar especial atencin al hecho de que la cmara se encuentra
delimitada por tres lneas blancas entre los cuadrados. Esto es importante para
definir cuales son las conidias que se encuentran en el limite y que deben ser
contadas .
Generalmente se cuentan las conidias que estn en la primera lnea de arriba y
de la derecha , no asi las conidiasque se encuentran en la lnea de abajo y de
la izquierda.
PROCEDIMIENTO:

1. Preparar una suspensin de conidias en agua destilada
con tween 80 al 0.1%.
2. Con una pipeta pasteur llenar la cmara con la suspensin de conidias y
cubrirla con el cubreobjetos.
3. Observar al microscopio utilizando el aumento conveniente de acuerdo

al tamao de la estructura (40x es un aumento adecuado).
Cmara NEUBAUER vista al microscopio.
Cuadrado 1
rea = 1 mm x 1mm = 1 mm2
Volumen = 1 mm2 x 0,1 mm = 0,1 mm3 = 1 x 10-4 ml

GENERAL
Concentracin = FITOPATOLOGIA
Total Clulas
Contadas x 10.000
Nmero de Cuadrados
Cuadrado 2
Concentracin =
Total Clulas Contadas x 160.000

Nmero de Cuadrados
rea = 0,25mm x 0,25mm = 0,0625 mm2

Volumen = 0,0625mm2 x 0,1 mm = 6,25 x 10-3 mm3 = 6,25 x 10-6 ml
Cuadrado 3
Concentracin =
Total Clulas Contadas x 250.000

Nmero de Cuadrados
rea
=
0,2
mm
x
0,2
mm
=
0,04
mm2
Volumen = 0,04mm2 x 0,1 mm = 4 x 10-3 mm3 = 4 x 10-6 ml
Cuadrado 4
1/16th de Cuadrado 3, slo NEUBAUER improved rejilla central
rea
=
0,05
mm
x
0,05
mm
=
0,0025
mm2
Volumen = 0,0025mm2 x 0,1 mm = 2,5 x 10-4 mm3 = 2,5 x 10-7 ml

Concentracin =
FITOPATOLOGIA
GENERAL
Total Clulas
Contadas x 4 x10^6
Nmero de Cuadrados
4. Contar las conidias presentes en los cuadrados elegidos (generalmente

se cuentan en los cuadrados de los cuatro angulos y e centro ,o en
forma diagonal empezando por el pimero de la parte superior izquierda .
tambin se deben contar las conidias que estn ubicadas tocando la primera de
las tres lneas que se encuentran circundando el cuadrado,las que se
encuentran en la parte superior y la derecha del cuadrado .se cuentan en total
10 cuadrados ,cinco en cada cmara ( cinco arriba y cinco abajo).
5. Determinar el numero de conidias or ml y el numero total de conidias
utilizando la siguiente formula :
Conidias/ml = de conidias contadas x 25000 x factor de dilucin .
Conidias total = conidias/ml x Vol . de la suspensin original de conidias .

Sector de la cmara de NEUBAUER, que se debe contar.

CARACTERIZACION FISIOLOGICA
Esta carcaterizacion se basa en la evalucaion de rendimiento en numero de
conidias y viabilidad d las mismas(porcentaje de germinacin).
Numero de conidias
1. Sembrar 10 ul de suspensin de conidias con una concentracin de
106 conidias /ml en medio de PDA y distribuirla uniformemente en la
2.
3.
4.
5.
6.
placa con la ayuda de una esptula de DRIGALSKI .

Incubas a 20C durante 15 dias .
Realizar diluciones seriadas con un factor de 0.1.
Cartgar la cmara de Neubauer y contar el numero de conidias /ml.
Realizar por los menos cuatro repeticiones por aislamiento .
Realziar los clculos respectivos para obtener la informacin.
Viabilidad de conidias
7

1. Sembrar 5 alicuotas de 5ul de una suspensin de conidias
6
con una concentracin de 10 /ml en medio de PDA.
2. Incubar a 20|C durante 24hr.
3. Agregar azul de alctofenol para deterner la germinacin y distribuirlo
uniformemente.
4. Cortar la porcin de agar conteniendo la alcuota de la suspensin de
conidias y colocarlas sobre una lamina de portaobjetos . cubrir con un
cubre objetos.
5. Registrar el numero de onidiad germinadas (aquellas cuyo tubo
germinativo sea dos veces mayor al dimetro de la conidia.).
6. Por cada asilamiento no se dene hacer menos de cinco repeticiones.
En caso de que el rendimiento sea muy bajo, debido a la perdida de sus
caractersticas por ser un aislamiento muy viejo ,se recomienda reactivarlo
en el insecto hospedante.
CONSERVACION DE HONGOS
La conservacin de los hongos consiste en mantenerlos viables, eliminando
la necesidad de que piques frecuentes ,impidiendo as las mutaciones en
general, una de cuyas consecuencias es la perdida de virulencia. En la
actualidad existen varios mtodos para conservar los hongos por periodos
prolongados, los mismos que implican el uso de material variado.
Existen dos principios de conservacin ;
1). Donde se reduce el metabolismo
2). Donde se induce la dormancia de las conidias o esporas.
La reduccin del metabolismo ,incluye la conservacin mediante bajas
temperaturas ,uso del aceite mineral ,agua esteril ,suelo esteril ,etc.
En la induccin de la dormancia ,se incluye el secado sobre slica gel, la
liofilizacio y el uso de nitrgeno liquido (la criogenia,o sea el mantenimiento
a temperaturas por debajo del punto de congelacin).
Estos ltimos mtodos requieren de aparatos especiales y de insumos
costosos, por ello hemos considerado en esta publicaion solo los que
pueden estar al alcance de la mayora de investigadores en regiones en
vas de desarrollo. Hay otros emtodos mas econmicos ,como el uso de
aceite mineral ,pero no es seguro porque el hongo puede seguir creciendo
en condiciones de desventaja ,adems no esta garantiada su pureza.

CONCLUSIONES :
He podido conocer que el conteo de conidias que se da por medio de la lamina
de vidrio subdividiendo los cuadros que presenta para realizar el conteo.
Tambin Utilizando el Hematocimetro o cmara de Neubauer se puede
establecer un promedio de conidias en suspensin en ml de agua. El mtodo
de recuento en la caja de Neubauer es muy efectivo para establecer un
promedio en este caso de conidias .
RECOMENDACIONES
Al mezclar la muestra de cultivo en el agua procurar revolverla bien para que
esta libere todas las esporas que se encuentran en ella. Tener cuidado al
colocar el agua en la caja Neubauer para que esta no se desborde.
Establecer qu cuadros se van a contar, preferiblemente los de las esquinas y
centro para que sea al azar.
BIBLIOGRAFIA :
1.
http://www.celeromics.com/es/resources/Technical%20Notes/neubauerchamber-cell-concentration/formula-camara-neubauer-concentracion1.php#
2. RENATO ANDRADE CEVALLOS,2013, OBSERVACIN Y CONTEO DE
ESPORAS DE HONGOS AISLADOS DEL AMBIENTE AIRE, SUELO,
AGUA. ESCUELA POLITCNICA DEL EJRCITO CARRERA
INGENIERA AGROPECUARIA - SANTO DOMINGO REPUBLICA
DOMINICANA.
http://es.slideshare.net/tato762/observacin-y-conteo-de-esporas-de-hongosaislados-del-ambiente-aire-suelo-agua
3. PDF:http://es.slideshare.net/jloveuas/manual-micologia
4. VERONICA CAEDO,TERESA AMES.2004.CONTEO DE CONIDIAS EN
CAMARA DE NEUBAUER. Manual de Laboratorio para el Manejo de
Hongos Entomopatgenos.CENTRO INTERNACIONAL DE LA
PAPA.LIMA-PERU.
https://books.google.com.pe/books?
id=lFfNuqTeit8C&pg=PA40&lpg=PA40&dq=conteo+de+conidias+en+camara+d
e+neubauer&source=bl&ots=XAF3yKGQg2&sig=FU0n5K9Eszcyfy_IRyBnSqmHUc&hl=es419&sa=X&ved=0CCYQ6AEwAmoVChMI6Lyp8br3yAIVh20mCh2eoARE#v=on
epage&q=conteo%20de%20conidias%20en%20camara%20de
%20neubauer&f=true

CONTEO BACTERIANO
INTRODUCCION
El conteo bacteriano seala la magnitud de la poblacin total bacteriana.
En ese sentido se puede determinar por diversas tcnicas que se basan en
algunos de los siguientes tipos de medida:
cuenta celular (directamente al microscopio o mediante un contador
electrnico de partculas o indirectamente con la cuenta de colonias), masa
celular (en forma directa pesando el contenido celular del nitrgeno o
indirectamente por turbidimetra, proporcional al nmero de clulas) y actividad
celular (indirectamente relacionando el grado de actividad bioqumica al tamao
de la poblacin bacteriana).
Existen muchos medios diferenciales, en la prctica rutinaria se usan los
siguientes:
Tipos de conteo bacteriano
Conteo en caja de Petri

Mtodo ms usado para contar bacterias. Un caldo de cultivo con
microorganismos es diluido y posteriormente muestras del mismo son
distribuidas en la caja de petri contenedora de agar.
Conteo por filtracin
Es realizado cuando la cantidad de bacterias es muy pequea, como en casos
de lagos y arroyos relativamente puros.
Mtodo del nmero ms probable (NMP)
Es una tcnica de estimacin estadstica basada en el hecho que a mayor
nmero de bacterias en una muestra, mayor ser la dilucin necesitada para
reducir la densidad hasta el punto en que ninguna bacteria se le permita crecer
en la serie de tubos de dilucin.
Mtodo de turbidez
Para algunos experimentos, es necesario estimar turbidez, ya que es una
forma prctica de monitorizar el crecimiento bacteriano. Como una bacteria se
multiplica en un medio lquido, ste se torna turbio o de aspecto nublado por las
clulas. El instrumento usado para medir la turbiedad es un espectrofotmetro
(colormetro.
Determinacin del peso seco en las clulas
Es el mtodo ms directo para las mediciones cuantitativas de la masa celular
y probablemente el ms fcilmente realizable y reproducible, aunque se debe
aplicar slo en suspensiones celulares muy densas y las clulas deben ser
lavadas muy bien para removerles todo material extra. Se utiliza para bacterias
filamentosas y mohos.
OBJETIVOS:
10

Tener nociones de los diferentes mtodos existentes para el conteo

bacteriano.
Conocer y estudiar la parte literaria para que se nos haga ms fcil y
tranquilo ejecutarlo en prctica.
REVISION LITERARIA
Replicacin bacteriana: fisin binaria o biparticin De una clula madre se
originan dos clulas hijas idnticas.
Crecimiento ordenado de todos los constituyentes y estructuras celulares.
Aumento exponencial en el nmero de clulas.
Tipos de crecimiento
CRECIMIENTO INDIVIDUAL
La bacteria alcanza un tamao y peso fijo. Constituye el paso previo a la
divisin celular.
CRECIMIENTO POBLACIONAL
Es el incremento en el nmero de clulas como consecuencia del crecimiento y
divisin clula.
CONTEO DE CELULAS VIABLES
La clula viable es aquella capaz de dividirse y formar una colonia en el

medio de cultivo
Se basa en que cada colonia surge de una simple clula.
Cada colonia contiene una sola especie bacteriana.
11

El nmero de bacterias viables por muestra se expresa en :
UNIDADES FORMADORAS DE COLONIAS (UFC).
Representa cada colonia contada y su numero total representa el numero total
de bacterias viables en la muestra.
METODO EXTENDIDO DEN PLACA
Es el mtodo de eleccin para anaerobios facultativos y cultivo de

microaeroflos.
METODO DE VERTIDO EN PLACA

Esta tcnica se usa generalmente para bacterias aerobias obligadas
12

Medicin del crecimiento Microbiano (bacterias )
Determinacin del nmero de microorganismos en una muestra.
Determinacin de la actividad metablica, biomasa y protenas.
13
til para la tcnica

de vertido en placa
o extensin en
placa.
Se siembra
volumnes
conocidos de
cada dilucin .
Luego se incuba
a 35-37C
durante 24-48
horas

TECNICAS DE RECUENTO
Finalizado el tiempo de incubacin ,se realiza el recuentro .
Se toman en cuenta nicamente aquellas cajas de Petri que tengan entre

30 y 300 colonias.
Este numero de colonias es estadsticamente representativo.
Aquellas placas que tengan mas de 300 colonias se reportan como

INCONTABLES.
PARA EL RECUENTRO BACTERIANO SE UTILIZA UN CUENTACOLONIAS.
RECUENTRO CON CUENTACOLONIA

Puede ser contada toda la placa o por cuadrantes
Cuando la carga bacteriana es alta ,se tomna en cuenta un cyadrante con
carga alta ,un cuadrante con carga media y un cuadrante con carga baja.
Se realiza la sumatoria de los tres cuadrantes y se saca el promedio.
Finalmente el promedio se multiplica por 65.
N. COLONIA =( CA + CM + CB/3)* 65
14

OBTENCION DE RESULTADOS
Terminado el conteo por cualquier mtodo se debe aplicar siguiendo formula
para obtener el N. DE UFC/ml o UFC/g.
C
u
a
n
d
o
se
15

realiza mas de una dilucin para cada uno de los parmetros

se garantiza los resultados obtenidos.
Este mtodo disminuye el margen de error y abaliza la calidad de las
pruebas.
Para obtener los resultados por duplicado se aplica la siguiente formula:
EJEMPLO 1.
Dilucin A: 5600.0000
Dilucin B: 6 000.000
Resultado: 5 600.000 + 6 000.000/2= 5 800.000 UFC/ml FLORA TOTAL.
EJEMPLO 2.
Dilucin A: 1 245. 647
Dilucin B: 2 340.500
Resultado: 1 245. 647+ 2 340.500/2= 1 793.074UFC/ml FLORA COLIFORME.
MAS Mtodos para el conteo de microorganismos
viables
Cuenta en placa
Vaciado en placa
Extendido en placa
Asa calibrada
Miles y Mirsa
Filtracin
Nmero ms probable (NMP)
Mtodos para el conteo de microorganismos totales
Recuento microscpico
Cuenta de Breed
Cmara de Neubauer
Cmara de Prettof Hausser
Turbidimetra
16

Mtodos para el conteo de microorganismos viables
Estos mtodos se basan en poner en evidencia la presencia de los

microorganismos vivos.
Requieren al menos 24 horas para el cultivo y la interpretacin de
resultados.
Se emplean medios de cultivo generales, enriquecidos selectivos y
diferenciales dependiendo de los microorganismos a cuantificar.
Cuenta en placa
Se determina el nmero de microorganismos en una muestra en relacin a las
colonias que forman, las UFC (Unidades Formadoras de Colonias). Se
emplean soluciones diluidas o diluciones de una muestra concentrada para que
cada colonia formada provenga de un solo microorganismo aunque algunas
agrupaciones no pueden ser separadas por las diluciones. Se utilizan
principalmente para la cuantificacin de bacterias, levaduras y hongos
filamentosos. Se reporta como:
UFC ****/unidad de volumen o peso .
17

Diluciones y cuenta en placa
MILES Y MISRA
Involucra la preparacin de diluciones seriadas de una suspensin bacteriana.
Las placas son divididas en sectores separados.
18

Se inocula cada sector una gota empleando una Pipeta Pasteur
calibrada o bien micropipetas inoculando 0.02mL. Las placas se incuban de 18
a 24 horas a la temperatura adecuada (37C).
Se toman en cuenta los sectores donde hay menos de 20 UFC. El nmero de
bacterias viables se obtiene calculando la media de cada dilucin en las
repeticiones realizadas.
ASA CALIBRADA
La utilizacin de agujas o asas calibradas permite tomar volmenes pequeos,
que son inoculados en la superficie del agar mediante la tcnica de siembra
masiva.
Las colonias son contadas y se multiplican por el factor de dilucin del asa
empleada.
El uso ms frecuente de est mtodo es en el urocultivo. Se determinan las
UFC/g o mL de muestra.
FILTRACION
19

La membrana de celulosa
retiene a los
microorganismos en su
malla con poros de 0.250.45mm. Esta membrana se
transfiere a un medio de
cultivo para el desarrollo de
colonias.
NMERO MS PROBABLE (NMP)

Tambin llamada tcnica de dilucin en tubo, proporciona una estimacin
estadstica de la densidad microbiana presente con base a que la probabilidad
de obtener tubos con crecimiento positivo disminuye conforme es menor el
volumen de muestra inoculado.
Nmero Ms Probable (NMP)

20

10-19-95 NORMA Oficial Mexicana NOM-112-SSA1-1994, Bienes y servicios.

Determinacin de
bacterias coliformes. Tcnica del nmero ms probable.
Cochran, W. C. (1950). Estimation of bacterial densities by means of the most
probablenumber Biometrics 6, 105-116.
21

ANALISIS MICROBIOLOGICO DEL AGUA

22

Mtodos para el conteo de microorganismos totales
23

Estos mtodos se basan en poner en evidencia la presencia de
los microorganismos vivos y muertos los cuales no se pueden distinguir.
Son rpidos pero se requiere contar en algunos casos con curvas de
calibracin.
RECUENTO MICROSCPICO
24

CMARAS DE PETROFF-HAUSSER Y DE NEUBAUER
25

Limitaciones:
Es muy tedioso, no es
prctico para un gran
nmero de muestras.
No es muy sensible, se
necesitan al menos 106
bacterias/mL para que sean
observadas al microscopio.
No distinguen clulas vivas
de muertas.
CUENTA DE BREED
Muestra a evaluar (directa o diluida)

Microscopio
Objetivo micromtrico
Asa calibrada o micropipeta
Portaobjetos
Colorantes de Gram u otros colorantes.
26

CUENTA DE BREED
EXTRA :USO DEL EQUIPO MICROMETRICO

27

NEFELOMETRIA (TURBIDIMETRIA)
28

La turbidez producida por el crecimiento microbiano de
microorganismos unicelulares puede ser medida de acuerdo a la capacidad de
absorber la luz. La muestras a determinar son generalmente translcidas
cuando no presentan crecimiento microbiano.
Longitud de onda (l)
Bacterias 540nm
Protozoarios 580nm
Levaduras 600nm
TURBIDEZ
La turbidez se determina
por la densidad ptica (DO)
que puede ser expresada
como Absorbancia, % de
Transmitancia o Unidades
Klett (UK).
ESCALA DE MC FARLAND
Klett-Summerson Colorimeter
29

30

PESO SECO Y DETERMINACIN DE PROTENA
El peso seco (contenido de slidos) de las clulas bacterianas que se

encuentran en una suspensin se obtiene por el secado de un volumen en
un horno a 105C hasta peso constante.
Es til para grandes volmenes. La desventaja de este mtodo es que

componentes voltiles de la clula pueden perderse por el secado y puede
existir alguna degradacin. La muestra seca puede recobrar humedad
durante el pesado, principalmente si el ambiente tiene una humedad relativa
alta.
La protena se relaciona al crecimiento, por lo que un incremento en la
cantidad de protena en el paquete celular indica que hay mayo
concentracin de clulas.
Curva patrn
para la
determinacion de
protenas por el
mtodo de Lowry
Curva de crecimiento Viables vs Totales
31

CONCLUSION:
Los diversos mtodos que existen para el conteo de clulas bacterianas , nos
ayuda y facilita en la obtencin del nmero de bacterias viables por muestra se
expresa en :
UNIDADES FORMADORAS DE COLONIAS (UFC).
Todo ello empleado para fines de investigacin y anlisis .
BIBLIOGRAFIA
1. NATALIA IZURIETA 2011. Laboratorio no. 4 recuento bacteriano.
LABORATORIO DE BACTERIOLOGIA Y MICOLOGIA.
http://es.slideshare.net/nataliaizurieta/laboratorio-no-4-recuentobacteriano-7723447
2. PDF.
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/U4b_MedicionCrecimiento_19
837.pdf
3. WIKIPEDIA .
https://es.wikipedia.org/wiki/Conteo_bacteriano#Determinaci.C3.B3n_dire
cta_por_microscopio
32

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Se utiliza para contar clulas u otras partculas en suspensiones bajo el

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3. Observar al microscopio utilizando el aumento conveniente de acuerdo

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Total Clulas Contadas x 160.000

rea = 0,25mm x 0,25mm = 0,0625 mm2

Total Clulas Contadas x 250.000

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4. Contar las conidias presentes en los cuadrados elegidos (generalmente

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Sector de la cmara de NEUBAUER, que se debe contar.

placa con la ayuda de una esptula de DRIGALSKI .

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Tipos de conteo bacteriano

Conteo en caja de Petri

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Tener nociones de los diferentes mtodos existentes para el conteo

La clula viable es aquella capaz de dividirse y formar una colonia en el

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METODO EXTENDIDO DEN PLACA

Es el mtodo de eleccin para anaerobios facultativos y cultivo de

METODO DE VERTIDO EN PLACA

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Determinacin del nmero de microorganismos en una muestra.

Determinacin de la actividad metablica, biomasa y protenas.

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til para la tcnica

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Finalizado el tiempo de incubacin ,se realiza el recuentro .

Se toman en cuenta nicamente aquellas cajas de Petri que tengan entre

Este numero de colonias es estadsticamente representativo.

Aquellas placas que tengan mas de 300 colonias se reportan como

PARA EL RECUENTRO BACTERIANO SE UTILIZA UN CUENTACOLONIAS.

RECUENTRO CON CUENTACOLONIA

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realiza mas de una dilucin para cada uno de los parmetros

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Mtodos para el conteo de microorganismos viables

Estos mtodos se basan en poner en evidencia la presencia de los

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Diluciones y cuenta en placa

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