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Aula Prtica 01

Citologia

AULA PRTICA NO 01
UTILIZAO DO MICROSCPIO DE LUZ
1 INTRODUO
O estudo sobre as clulas progride em paralelo ao aperfeioamento dos mtodos de
investigao. O microscpio tico o instrumento mais importante para o estudo das clulas
e o tipo de aparelho mais comum e normalmente utilizado em anlises de rotina o
microscpio de campo claro. Cada aparelho explora alguma das inmeras particularidades
da luz e/ou lentes, permitindo a formao de imagens distintas sendo utilizado de acordo
com os objetivos de trabalho e com o tipo de material biolgico a ser estudado.
O microscpio tico constitudo de uma parte mecnica que serve de sustentao e
uma parte ptica, formada por trs sistemas de lentes: o condensador, a objetiva e as
oculares. Neste instrumento de observao microscpica, a luz atravessa o objeto
observado e o conjunto de lentes, antes de atingir o olho, formando uma imagem
bidimensional. A seguir encontramse descritas cada parte do microscpio ptico binocular
de iluminao embutida. Outros tipos de microscpios podem apresentar variaes que os
tornam mais especializados.
1.1 Descrio dos Componentes do Microscpio ptico
A P ou Base: a pea que sustenta todas as outras, o suporte do microscpio.
B Brao ou Corpo: Liga a base parte superior do microscpio. Sustenta os tubos, a
mesa, o portacondensador, o espelho e os mecanismos macro e micromtricos.
C Fonte de Luz: Alguns aparelhos possuem fonte prpria de luz, que fica sobre o p do
microscpio, enquanto outros apresentam espelhos (cncavo e plano) que captam a luz do
meio ambiente.
D Filtro: Pea de formato circular de vidro colorido (azul, verde, etc.) que fixada a um
receptculo, torna a luz mais adequada observao do material. O filtro azul usado para
transformar a luz amarelada da lmpada utilizada na fonte, em luz branca favorecendo a
observao e aumentando o poder de resoluo.
E Condensador: um conjunto de lentes localizado abaixo da platina, que concentra e
torna paralelo o feixe luminoso, em direo lente frontal da objetiva, fornecendo a luz
necessria iluminao uniforme do objeto em estudo. O parafuso do condensador, situado
lateralmente no brao do microscpio, permite a movimentao das lentes condensadoras
que devem ser mantidas na posio mais elevada para obteno de uma iluminao
uniforme. possvel, portanto, aumentar a quantidade de luz que atravessa o objeto, tanto
no caso da luz ser fraca, como no caso em que o aumento da objetiva exija raios mais
intensos.
F Diafragma ou ris: uma pea associada ao condensador, regulvel, que permite a
passagem total ou parcial da luz at a platina. A regulagem adequada deste diafragma
oferece uma imagem com melhor contraste.
G Mesa ou Platina: Possui um formato retangular ou arredondado com um orifcio central
para a passagem dos raios luminosos, e est disposta paralelamente direo da base do
microscpio, destinandose a recepo da lmina preparada para estudo. Associada
platina, normalmente, encontrase uma pea denominada charriot cuja funo
movimentar a lmina no plano horizontal. Os dois parafusos dispostos lateralmente platina
promovem a movimentao do charriot. O parafuso mais externo (de menor dimetro)
permite o deslizamento da lmina da esquerda para direita e viceversa. O parafuso de

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dimetro maior responsvel pelo movimento da lmina para frente e para trs. Acoplada
ao charriot, h uma presilha que permite o encaixe e fixao da lmina.
H Parafuso Macromtrico: Situado na lateral do brao, encontramse dois parafusos,
geralmente, encaixados um no outro. O de maior dimetro o parafuso macromtrico, que
permite grandes avanos ou recuos da platina em relao objetiva, promovendo uma
focalizao grosseira do material observado.
I Parafuso Micromtrico: Apresenta um menor dimetro, podendo estar prximo ou
associado ao parafuso macromtrico permitindo pequenos avanos ou recuos da platina,
resultando numa focalizao refinada e uma maior nitidez da imagem.
J Trava: Junto ao brao do microscpio pode existir uma alavanca que trava o movimento
do parafuso macromtrico em uma determinada posio, impedindo a movimentao da
platina e protegendo as objetivas contra possveis choques.
K Revlver: Est localizado abaixo do canho, constituindo uma pea de formato circular
dotada de movimento de rotao, onde encontram-se inseridas as lentes objetivas. No disco
do revlver encontra-se um envoltrio de borracha com ranhuras para realizao de
mudana da objetiva. Quando a objetiva entra em posio de trabalho, aps a mudana,
ouve-se um click caracterstico.
L Objetivas: O microscpio possui, geralmente, quatro lentes objetivas. Cada uma traz
gravado o aumento que proporciona ao objeto observado, estando gravado com caracteres
maiores. J o nmero gravado com caracteres menores referese a abertura numrica da
lente, um detalhe da ptica. Toda lente objetiva fornece uma imagem invertida e ampliada
do objeto, procurando corrigir os defeitos e aberraes de luz que por ela passa.
Aumento da objetiva
10/ 0,25
160

Abertura Numrica
Correo para tubo de 160 mm

Objetivas a seco (4, 10, 40X)

100/1,25
160/ 0,17

Correo para
lamnula de 17mm

Objetiva de imerso (100X)

M Tubo ou Canho: a parte superior do microscpio dotado de movimento de rotao,


constitudo por uma pea semiesfrica, que recebe em sua extremidade superior as lentes
oculares e, na inferior, o mecanismo para troca de lentes objetivas. Os tubos podem
apresentar trs dispositivos de controle: a) ajuste para as diversas distncias interpupilares;
b) um dispositivo giratrio em uma das duas oculares (esquerda ou direita) que possibilita
correo quando os olhos exibirem distncias focais diferentes; e c) movimento de rotao
de 360 graus, para maior comodidade do observador.
N Ocular - a lente superior do microscpio que se encaixa no canho. Toda ocular traz
indicado o aumento que proporciona imagem do objeto observado. As oculares ampliam
apenas a imagem formada pela objetiva, no tornando mais ntidas as estruturas do objeto a
ser estudado. No seria lgico trabalhar com aparelhos que possuem lentes objetivas de
pouco aumento prprio e lentes oculares de grande poder de ampliao. Tambm no se
pode aconselhar o uso simultneo de objetivas e oculares de forte aumento, pois, o campo
visual seria pouco ntido as estruturas das clulas, por exemplo, se apresentariam
apagadas, quase no haveria luminosidade e o campo tico seria mnimo. A resoluo final
da imagem obtida depende exclusivamente da lente objetiva e da iluminao adequada.

O Charriot Dispositivo que, por intermdio dos parafusos do charriot, permite o


deslocamento da lmina histolgica sobre a mesa.
P Parafuso do Charriot a estrutura responsvel por movimentar o charriot nas
diversas direes.
Q Presilha Estrutura associada ao Charriot. Prende a lmina ao mesmo.

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R Potencimetro - Estrutura que permite ajustar a intensidade luminosa da fonte


de luz.
1.2 Procedimento Correto Para a Focalizao
1. Destrave o microscpio movimentando a alavanca. Verifique a posio da alavanca
quando est travada e destravada.
2. Abaixe a mesa totalmente usando o parafuso macromtrico. Gire o revlver,
encaixando a objetiva de menor aumento (4X). Verifique pelo rudo caracterstico do
encaixe se a objetiva est realmente encaixada.
3. Pegue a lmina, segurandoa pelas bordas.
4. Abra a presilha e coloque a lmina sobre a platina, encaixandoa ao charriot. Solte
a presilha e verifique se a lmina est bem encaixada. Centralize o material no
orifcio da platina, utilizando os parafusos do charriot.
5. Acenda a luz do microscpio e regule o potencimetro.
6. Verifique se o diafragma est aberto, olhando lateralmente se h passagem de luz
atravs do orifcio da platina. Caso seja necessrio, abra o diafragma, movimentando
a alavanca correspondente.
7. Certifique se o condensador encontrase em posio mais elevada.
8. Levante a platina movimentando o parafuso macromtrico at o seu ponto mximo.
9. Observando atravs da ocular, com os dois olhos abertos e utilizando o parafuso
macromtrico, abaixe lentamente a mesa, at que o material a ser observado seja
visto. Assim que visualizar o objeto, corrija a focalizao utilizando o parafuso
micromtrico.
10. Movimentando os parafusos do charriot com uma das mos e o parafuso
micromtrico com a outra, explore o material. Coloque sempre o material a ser
analisado no centro do campo de observao, antes de passar para a objetiva de
aumento imediatamente superior.
11. Encaixe a objetiva de 10X e faa o ajuste da focalizao, utilizando apenas o
parafuso micromtrico. Faa a observao do campo atentamente.
12. Selecione uma determinada rea do material, centralizea, e encaixe a objetiva de
40X. Faa o ajuste da focalizao, utilizando somente o parafuso micromtrico.
13. Terminando a observao, desligue a luz, gire o revlver para encaixar a objetiva de
menor aumento (passando pela objetiva de 10X) e retire a lmina.
OBS: Nunca movimente a mesa do microscpio com a objetiva de maior aumento encaixada.

2 OBJETIVOS
-

Identificar e citar as funes de cada componente do microscpio de luz.


Relacionar a imagem formada e os aumentos obtidos com funcionamento do
sistema ptico.
Manusear corretamente o microscpio.

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3 ATIVIDADE
3.1 Componentes do Microscpio ptico
a. Observe o esquema referente ao microscpio de luz e preencha o quadro com as
informaes solicitadas.

Figura 1 - Representao esquemtica de microscpio ptico.

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COMPONENTE

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FUNO

1 _______________

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2 _______________

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3 _______________

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