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Conteo, observacin y crecimiento radial de

hongos.
Mercado-Gmez LE, Villalpando-Reyes CE, Rodrguez N, Lpez-Barreras JM,
Angulo B
Instituto Tecnolgico de Sonora
Departamento de Biotecnologa y Ciencias Alimentarias
Av. Antonio caso s/n Fraccionamiento Villa ITSON, Cd. Obregn Son.
CP 85130, TEL/Fax (644) 4100923/4100910
RESUMEN
El estudio se llev a cabo a un cultivo de hongo aislado mediante tcnicas
microbiolgicas, la cepa contaba con 8 das previos de incubacin, esto con el objetivo de
produccin de esporas. Se realiz una tincin en fresco, en la cual se pueden observar
los tallos del microorganismo, confirmando la viabilidad del cultivo puro. Con la seguridad
del cultivo, se coloc un crculo con un asa de punta redonda en el centro de una caja
Petri con 20 ml del medio Agar Dextrosa de Papa, para as, medir el crecimiento radial de
hongo. Como acto seguido en la observacin del hongo, realizamos la recoleccin de
esporas, con ayuda de perlas de vidrio y tween 80 al 0.02%, agitando suavemente las
perlas dentro del tubo con el cultivo, terminado ste paso, se hicieron diluciones de 10 -1, a
la 10-3 mostrando la disminucin de esporas en las muestras ms diluidas.

INTRODUCCION
Es difcil definir a los hongos en trminos sencillos, ya que varios organismos poco
comunes, adems de los hongos tpicos, se incluyen en esta amplia categora. Sin
embargo, los hongos tpicos presentan varias caractersticas que los separan de otros
organismos.
Los hongos son por lo comn filamentosos. Los filamentos individuales se denominan
hifas y estn rodeados por una pared que a menudo, pero no siempre, contiene quitina
como componente principal. Las hifas crecen slo en sus extremos, por lo que los hongos
presentan crecimiento apical, y se ramifican peridicamente detrs de los pices, dando
como resultado una red de hifas que se denomina micelio. Requieren materia orgnica
preformada que utilizan como fuente de energa y de carbono para la sntesis de
estructuras celulares. Debido a la rgida pared celular, no pueden fagocitar el alimento;
ms bien, absorben nutrientes simples y solubles que obtienen mediante la degradacin
de polmeros complejos con enzimas extracelulares que liberan al medio.

Los hongos son eucariotes, en otras palabras, los hongos tienen ncleos y organismos
rodeados por una membrana, se reproducen sexualmente, como asexualmente, pero en
cualquier caso forman esporas como producto final.
La mayora de los hongos son mesfilos: crecen a temperaturas moderadas en un
intervalo de 10 a 40C, estando la ptima entre 25 a 35C. Sin embargo, pocos hongos
son termfilos y crecen en un intervalo de 20 a 50C, con una ptima de 40 C y un lmite
de 60 a 62C.
Por supuesto que se encontraran excepciones a algunos de estos aspectos generales, no
obstante, se puede definir a los hongos como: organismos eucariotes hetertrofos, con un
micelio caracterstico y nutricin por absorcin.
Los hongos se aprovechan directamente como alimento e indirectamente en la
elaboracin de cerveza, vino y pan. Adems de la produccin de alimentos, los hongos se
utilizan en varios procesos industriales importantes.
Aprender tcnicas de observacin microscpica de hongos para diferenciar sus
caractersticas morfolgicas, asi como el crecimiento radial y conteo de esporas en
cmara de Neubauer.

METODOLOGIA
La observacin del hongo se llev a cabo
bajo la tcnica de preparacin en fresco,
colocando una gota por separado de
NaOH 10%, azul de metileno, lugol y
safranina sobre un portaobjetos, se tom
una muestra de hongo con un asa en
forma de gancho y se deposit sobre las
gotas, como acto, seguido se coloc un
cubre objetos sobre el medio. Se observ
el microorganismo con el objetivo 40 y
100.
La medida de crecimiento radial se
realiz en cajas Petri con 20 ml de Agar
Dextrosa de Papa. Se tom una muestra
de hongo aislado y se coloc un crculo
en el centro de la caja con ayuda de un
asa en forma de gancho. Las cajas se
incubaron a dos temperaturas, 30C y
temperatura ambiente durante un periodo
de 3 das, en los cuales el hongo cubri

toda la caja. Se midi el radio de las


cajas cada 24 horas.
Para la recoleccin de esporas fue
necesario un cultivo puro de hongos con
8 das previos de incubacin a una
temperatura de 35C. Como primer paso,
se adicionaron al tubo con el cultivo
perlas de vidrio y 50 ml de tween 80 al
0.02%, se agit suavemente y se vaco el
contenido en un matraz Erlenmeyer con
la ayuda de un embudo y una gasa para
detener las perlas de vidrio, repitiendo el
procedimiento tres veces. De la
suspensin de esporas se tom un
mililitro y se realizaron diluciones de 10 -1
a la 10-3. Como acto seguido se contaron
las esporas con ayuda de la cmara de
Neubauer.
RESULTADOS
Preparacin en fresco. Se observ e
identifico
exitosamente
el

microorganismo,
mostrando
las
caractersticas sobre salientes de los
hongos, por ejemplo, la observacin de
tallos, como se observa en la figura 1.

Crecimiento radial.
Recoleccin de esporas. A medida que
se hizo el conteo de esporas de las
diluciones, de menos diluida a mas
diluida (partiendo de la muestra y
terminando en 10-3), se observ la
disminucin del nmero de esporas
como se muestra en tabla 1.

DISCUCIN

REFERENCIAS

Imagen 1. Preparacin en fresco observado


con objetivo 100

Deacon, J.W. (1988). Introduccin a la


Micologa Moderna, Departamento de
Microbiologa,
Universidad
de
Edimburgo. Noriega editores.

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