1ire S

THEME : OBSERVER

TP

Chapitre 5 : La chimie des couleurs

Chromatographie sur colonne dun sirop de menthe

La
situation
Pour prparer un gteau un cuisinier a besoin dun colorant alimentaire jaune de
tartrazine (E102). Or dans sa rserve il ne lui en reste plus.
Cependant son assistant chimiste le rassure et lui dit quil peut obtenir ce colorant
partir de sirop de menthe.
Comment identifier et recueillir les colorants partir de sirop de menthe ?

La
dmarche
Le sirop de menthe est un mlange de sirop de glucose, de sirop de fructose, de
sirop de saccharose, deau, darme naturel de menthe et de colorants.
Vous devez dabord extraire les colorants du sirop de menthe cause du sucre qui
va gner dans vos expriences.
On procde alors en deux tapes :
1) La fixation se fait en milieu acide
Dans un bcher verser le sirop et ajouter sous la hotte, de l'acide
thanoque concentre 2 mol/L. Ajouter les brins de laine et faire bouillir
5 minutes. Sortir la laine du bcher l'aide de pinces mtalliques et rincer
l'eau.
2) Lextraction se fait en milieu basique
Il faut faire dgorger les colorants qui se sont fixs sur la laine.
Placer les brins de laine dans un bcher contenant une solution basique
d'ammoniaque 0,1 mol/L. Retirer la laine.
Quel est laspect de la laine aprs chaque tape ?
Quel est le rle de lacide ? quel est le rle du rinage ? quel est le rle de
lammoniaque ?
Identification des colorants du sirop de menthe :
Vous disposez :
- de quatre colorants alimentaire : le rouge de cochenille, le bleu de patent,
le jaune de tartrazine et le jaune-orang
- du colorant vert extrait du sirop de menthe

- dun spectrophotomtre
En tenant compte du matriel votre disposition, indiquer un protocole
exprimental permettant didentifier le ou les colorants prsents dans le sirop de
menthe.
Raliser votre exprience et conclure en faisant apparaitre vos rsultats.
Sparation des colorants du sirop de menthe :

Aide :
Pour sparer les colorants du sirop de menthe, on utilise :
Phase fixe
Gel de silice

Eluants
er

1 : eau
2ime : thanol

Rvlation
visuelle

Plus une molcule est soluble dans un luant plus elle est entrane avec lluant
vers le bas de la colonne.
Le gel de silice retient plus ou moins bien les molcules selon leur structure
molculaire. On dit que le gel de silice adsorbe les molcules.

Schmatiser la colonne en cours dlution et classer les fractions colores suivant

leur aptitude se lier avec leau dune part et avec le gel de silice dautre part.
Expliquer le droulement dune chromatographie sur colonne laide des mots
suivants :
phase fixe phase mobile adsorbant (substance qui retient) luant
constituants dun mlange analyser affinit sparer recueillir

 Proposer et raliser une autre exprience permettant de vrifier que les colorants
recueillis sont bien identiques aux colorant alimentaires trouvs prcdemment.
Document annexe : Raliser une chromatographie sur colonne
1) Prparation de la colonne :
On utilisera une pipette pasteur en guise de colonne de chromatographie.
Maintenir la colonne verticale laide du dispositif disponible.
La colonne contient un morceau de coton dans ltranglement et du gel de silice par
dessus.
Ajouter, avec un compte-goutte, le premier luant pour mouiller le gel de silice.
Avec le pipeteur pousser lentement sur le piston pour imprgner tout le gel de
silice de lluant. Ajouter de lluant si besoin, et continuer pousser jusqu
obtenir un coulement goutte goutte la base de la colonne. La colonne est prte
quand le niveau de lluant arrive la limite suprieure du gel de silice.

luant

2) Dpt de lchantillon (phase dlicate)

Dposer trs doucement avec une pipette pasteur 3 gouttes du produit analyser
au sommet de la colonne (sans toucher les parois du tube).
Pousser lentement avec le pipeteur pour imprgner le produit analyser dans le gel
de silice.

3) Elution
Ajouter rgulirement de lluant et pousser avec le pipeteur. Continuer ainsi
jusqu recueillir le premier composant du produit analyser dans un petit bcher.

Ajouter progressivement le deuxime luant en haut de la colonne et pousser avec

le pipeteur. Continuer ainsi jusqu recueillir le second composant dans un autre
petit bcher.
Document annexe : Raliser une chromatographie sur colonne
1) Prparation de la colonne :
On utilisera une pipette pasteur en guise de colonne de chromatographie.
Maintenir la colonne verticale laide du dispositif disponible.
La colonne contient un morceau de coton dans ltranglement et du gel de silice par
dessus.
Ajouter, avec un compte-goutte, le premier luant pour mouiller le gel de silice.
Avec le pipeteur pousser lentement sur le piston pour imprgner tout le gel de
silice de lluant. Ajouter de lluant si besoin, et continuer pousser jusqu
obtenir un coulement goutte goutte la base de la colonne. La colonne est prte
quand le niveau de lluant arrive la limite suprieure du gel de silice.

luant

2) Dpt de lchantillon (phase dlicate)

Dposer trs doucement avec une pipette pasteur 3 gouttes du produit analyser
au sommet de la colonne (sans toucher les parois du tube).
Pousser lentement avec le pipeteur pour imprgner le produit analyser dans le gel
de silice.

3) Elution

Ajouter rgulirement de lluant et pousser avec le pipeteur. Continuer ainsi

jusqu recueillir le premier composant du produit analyser dans un petit bcher.
Ajouter progressivement le deuxime luant en haut de la colonne et pousser avec
le pipeteur. Continuer ainsi jusqu recueillir le second composant dans un autre
petit bcher.
Professeur :Douadi
Nabil
TP

THEME : OBSERVER
Chapitre 5 : La chimie des couleurs

Chromatographie sur colonne dun sirop de menthe

Comptences attendues :
- Pratiquer une dmarche exprimentale
mettant en
uvre une extraction et une chromatographie.

Dans une chromatographie, la diffrence daffinit de chaque

constituant du mlange pour la phase fixe : ladsorbant et pour la phase
mobile : lluant confre une vitesse de migration propre chacun ; ceci
permet donc de les sparer.
Dans une chromatographie sur colonne on peut recueillir les
constituants sparment en bas de la colonne :
mlange
constituant A

constituant B

Dans le sirop de menthe, le colorant jaune est recueilli en premier : il

est plus entran par leau et moins adsorb par le gel de silice que le
colorant cyan.

Professeur :Douadi Nabil

Paillasse lve

1 cuve chromatographie + couvercle

1 couche de silice
1 sche cheveux
3 petits bchers
1 pipette en plastique
Colonne de gel de silice + potence
Propipette verte
Solution dammoniaque 0,1 mol/L

Paillasse prof

sirop de menthe
colorants bleu (E131), jaune (E102), rouge
de cochenille, azorubine et bleu brillant
acide actique 2 mol/L
thanol
luant (mlange deau sale 70% + thanol
30%)
alcali
cure-dents
4 grands bchers
Pince mtallique
brins de laine
couches de silice
Hotte + bec bunsen + allumettes
Spectrophotomtre + EXAO + ordinateur
portable

La
situation
Le sirop de menthe est un mlange de sirop de glucose, de sirop de fructose, de
sirop de saccharose, deau, darme naturel de menthe et de colorants.
Vous disposez des diffrents colorants alimentaires :
- le rouge de cochenille
- le bleu de patent
- le jaune de quinoline
- le jaune de tartrazine
Quelles sont, parmi les colorants prcdents, ceux prsents dans un sirop
de menthe ?
La
dmarche
Il sagit de sparer et recueillir les colorants alimentaires prsents dans un sirop de
menthe puis les identifier par spectrophotomtrie.

Comme le sucre gne la chromatographie, vous devez dabord extraire les colorants
du sirop de menthe
On procde alors en deux tapes :
1) La fixation se fait en milieu acide
Dans un bcher verser le sirop et ajouter sous la hotte, de l'acide
thanoque concentre 2 mol/L. Ajouter les brins de laine et faire bouillir
5 minutes. Sortir la laine du bcher l'aide de pinces mtalliques et rincer
l'eau.

2) Lextraction se fait en milieu basique

Il faut faire dgorger les colorants qui se sont fixs sur la laine.

Placer les brins de laine dans un bcher contenant une solution basique
d'ammoniaque 0,1 mol/L. Retirer la laine.

Quel est laspect de la laine aprs chaque tape ?

Quel est le rle de lacide ? quel est le rle du rinage ? quel est le rle de
lammoniaque ?

Aide :
Pour sparer les colorants du sirop de menthe, on utilise :
Phase fixe
Gel de silice

Eluants
er

1 : eau
2ime : thanol

Rvlation
visuelle

Plus une molcule est soluble dans un luant plus elle est entrane avec lluant
vers le bas de la colonne.
Le gel de silice retient plus ou moins bien les molcules selon leur structure
molculaire. On dit que le gel de silice adsorbe les molcules.

Schmatiser la colonne en cours dlution et classer les fractions colores suivant

leur aptitude se lier avec leau dune part et avec le gel de silice dautre part.
Expliquer le droulement dune chromatographie sur colonne laide des mots
suivants :
phase fixe phase mobile adsorbant (substance qui retient) luant
constituants dun mlange analyser affinit sparer recueillir
Indiquer un protocole exprimental permettant didentifier les deux colorants
recueillis par spectrophotomtrie puis le raliser et conclure en faisant apparaitre
vos rsultats.
Proposer et raliser une autre exprience permettant de vrifier que les colorants
recueillis sont bien identiques aux colorant alimentaires trouvs prcdemment.