Professional Documents
Culture Documents
Espectroscopia de absorcin
molecular UV-visible.
ndice
I.
Introduccin
1. La absorcin de radiacin UV o visible3
2. Tipos de especies absorbentes que contienen electrones , o n 3
3. Aplicaciones de las medidas de absorcin5
II.
Mtodos directos
1. MLR : Regresin lineal mltiple...5
2. Redes neuronales artificiales.5
III.
Mtodos de indicacin
1. Instrumentacin de las valoraciones fotomtricas.6
2. Curvas de valoracin..6
IV.
Mtodos de deteccin
1. Deteccin espectrofotomtrica...7
2. Separaciones cromatogrficas...11
3. Electroforesis capilar-SIA.12
V.
Bibliografa
I.
Introduccin
Las medidas de absorcin de radiacin UV-Visible sirven para la identificacin y determinacin de una
enorme cantidad de especies inorgnicas y orgnicas. Las aplicaciones estn limitadas al anlisis
cualitativo, ya que se producen bandas anchas que se solapan.
Existen tres mtodos cuantitativos:
a. Mtodos directos: anlisis cuantitativo.
b. Mtodos de indicacin: valoraciones fotomtricas.
c. Mtodos de deteccin: tcnicas de flujo, separaciones cromatogrficas y electroforesis capilar.
Las magnitudes de las absortividades molares pueden aparecer desde compuestos que no absorben en
UV a los que s absorben en UV hasta valores del orden de 105. El valor de la absortividad molar es de
8,7 1019 Pa . Aparecen las especies absorbentes, que intervienen en el proceso.
1. La absorcin de radiacin UV o visible.
La absorcin de radiacin UV o visible, por una especie atmica o molecular M, se puede considerar
como un proceso en dos etapas:
A. Excitacin electrnica, donde
el producto M* es una especie
excitada electrnicamente.
M + h
M*
D
Transiciones , , n
Transiciones d y f.
Transferencias de carga
La absorcin de UV-visible se realiza a > 185 nm, de onda larga, est registrada a un nmero limitado
de grupos funcionales, llamados cromforos, que contienen electrones de valencia con una energa de
excitacin bastante baja. Los cromforos suelen relacionarse con grupos funcionales no saturados.
Ejemplos de ellos seran: carbonilo, alqueno, alquino, carboxilo, etc. Los disolventes polares tienden a
rebajar el nivel de energa de los electrones n .
Aparecen una serie de transiciones electrnicas en las que intervienen tanto iones y molculas orgnicas
e inorgnicas. Suelen ser transiciones entre los 200-700 nm. A continuacin, vamos a ver una serie de
ejemplos:
Transiciones n * :
La Energa en estas transiciones es baja. Aparece un desplazamiento hipsocrmico ( o hacia el azul )
con disolventes polares. Los disolventes polares se ensalzan en el nivel n y pasan de no enlazante a
enlazante, obteniendo este desplazamiento hipsocrmico. Normalmente ocurre cuando aumenta la
polaridad del disolvente (agua, alcohol ) y se solvata el par de electrones libre no enlazante,
disminuyendo la energa del orbital n.
Transiciones * :
La Energa en estas transiciones es baja. Aparece un desplazamiento batocrmico con disolventes
polares. Las fuerzas de polarizacin atractivas entre el disolvente y el absorbente tienden a disminuir
los niveles de energa tanto del estado excitado y no excitado. Sim embargo, el efecto sobre el estado
excitado es mayor, por lo que las diferencias de Energa son menores cuando aumenta la polaridad
del disolvente. Es decir, la polaridad del disolvente rebaja la energa de los electrones antienlazantes.
El efecto de la conjugacin de los cromforos, se explica a travs de la teora de los OM, donde los
electrones estn deslocalizados por conjugacin. El efecto de esta deslocalizacin produce el descenso
del nivel de energa del orbital *, dndole menos carcter antienlazante. Como consecuencia, los
mximos de absorcin se desplazan hacia longitudes de onda ms largas. Aparecen multicromforos, que
para ser absorbidos deben estar separados entre s por un enlace sencillo. Esto se refiere a la conjugacin
de los cromforos.
Adems, los espectros UV de los hidrocarburos aromticos se caracterizan por tres grupos de bandas
cuyo origen son las transiciones *. Aparecen dos bandas caractersticas: una banda dbil ( E2 ) y
una banda an ms dbil ( B ). A veces, los compuestos aromticos tienen unos picos agudos que se
deben a la superposicin de las transiciones vibracionales sobre las transiciones electrnicas bsicas. En
alguna ocasin, los disolventes tienden a reducir esta estructura fina como lo hacen ciertos tipos de
sustitucin. Aparecen los auxocromos , grupos funcionales del sistema cromtico que no absorbe en la
regin UV pero puede desplazar los picos del cromforo hacia longitudes de onda ms larga o
incrementar sus intensidades. Aumenta a su vez su absortividad molar. Los OH- y NH2 tienen un efecto
auxocrmico sobre el cromforo benceno. Los sustituyentes auxocrmicos tienen un par de electrones
capaces de interaccionar con electrones de anillo. Ello disminuir la energa, y aparecer un
desplazamiento batocrmico.
A su vez, algunos aniones inorgnicos presentan picos de absorcin UV que son consecuencia de las
transiciones n * y ejercen el proceso de absorcin. Algunos ejemplos seran el ion nitrato, el
carbonato, el nitrito, etc. Encontramos tambin que iones lantnidos y actnidos, donde su proceso de
absorcin est en las transiciones electrnicas de los electrones 4f y 5f.
Otro tipo de absorcin sera por transferencia de carga, donde las especies que intervienen tienen
absortividades molares muy elevadas. Son muy sensibles para la deteccin y determinacin de especies
absorbentes. Para que un complejo de transferencia (complejo inorgnico) presente un espectro de
transferencia de carga, es necesario que:
4
La transferencia de un electrn desde el dado hasta un orbital que est asociado con el dador es lo que se
necesita para que exista la absorcin de la radiacin. Como consecuencia de ello, el estado excitado es el
resultado de un proceso REDOX interno. Un ejemplo de transferencia de carga seria el complejo Fe (III)
/ tiocianato.
3. Aplicaciones de las medidas de absorcin:
En cuanto a las aplicaciones cualitativas, las aplicaciones de la espectroscopia UV y visible
cualitativamente est limitada, ya que el nmero de mximos y mnimos de absorcin es pequeo.
Adems, es til para la deteccin de ciertos grupos funcionales que actan como cromforos.
En el caso de las aplicaciones cuantitativas, utiliza los mtodos de determinacin, siendo verstiles,
sensibles, selectivos y precisos. Realiza la determinacin de especies: absorbentes (cromforos,
compuestos orgnicos, etc.), con espectros solapados a travs de la derivatizacin (azocompuestos ) y a
travs de la formacin de complejos coloreados.
II.
Existen diferentes tipos de mezclas de sustancias absorbentes. Un tipo serian aquellas mezclas sin
solapamiento en su espectro de dos muestras, y el otro tipo serian aquellas mezclas con solapamiento en
el espectro. En esta ltima mezcla utiliza la ley de aditividad para determinar la absortividad molar. Para
ello utiliza unas tcnicas de anlisis multivariable que explicaremos a continuacin.
Las tcnicas de anlisis multivariable son:
1. MLR : Regresin lineal mltiple
Utiliza reactivos criognicos que forman complejos
polvoreados. Aplica algunos mtodos de calibrado como
son el mtodo del patrn nico o el mtodo del
promedio. Se puede aplicar a muestras homogneas.
2. Redes neuronales artificiales
Una red neuronal con neuronas con una serie de entradas con interconexiones emite una
salida. La salida viene dada por tres funciones: a) Seal de entrada: Las intensidades de
color son proporcionales a cada valor de longitud de onda. b) Capa de neuronas de salida o
capa oculta. c) Capa de 3 salidas (o 3 concentraciones), donde conocemos las seales de
entrada y con los patrones, conoceremos las concentraciones de salida producindose una
transferencia y a cada transferencia, le dar un peso. Calculo la funcin de transferencia
hasta que las salidas tengan la misma concentracin que los patrones, obteniendo los
coeficientes. A continuacin, se inserta la muestra con los patrones ya calibrados, y
obteniendo los resultados. Se pueden utilizar mezclas no homogneas.
III.
1. INSTRUMENTACIN
IV.
Mtodos de deteccin.
1. DETECCIN ESPECTROFOTOMETRICA.
Es una tcnica de flujo no separativa cuyo mtodo instrumental es el ms utilizado. Realiza mtodos
directos y valoraciones termomtricas para la deteccin con derivadas. Para el mtodo de deteccin
puede elegir entre el sistema FIA, SIA o el sistema multibomba.
A continuacin, se proponen diferentes sistemas para la deteccin de diferentes especies en disolucin.
Determinacin de nitritos, nitratos y nitrgeno total.
I.
II.
Determinacin en FIA (Anlisis por Inyeccin en flujo) de NO2-, NO3- y nitrgeno total.
Sample
Resine
ml min-1
Photorreactor
Sample
0.20
R1
DB
0.36
0.36
Thermostatic
bath
VS2
R2
H 2O
1.2
H2O
R3
RC1
VS1
(40 C)
VI
1.2
1.2
W
RC2
El mtodo FIA en este caso tiene 2 bombas peristlticas con 2 vlvulas de conmutacin.
Adems tiene un fotorreactor (lmpara de Hg) y un termostato. El R1 es persulfato sdico,
R2 hidrazina y el R3 es el reactivo de Griess. Para la determinacin de las diferentes
especies se sigue el siguiente procedimiento:
Column
Columna
Muestra
Mu
Cd-Cu
Agua
Detector
Reactivo cromognico
Reactivo cromognico
Al hablar de una reduccin homognea, seria con el reductor hidrazina con el que podemos
pasar de nitratos a nitritos. Se mezclaba as una disolucin acuosa de nuestra muestra con
una disolucin acuosa de hidrazina.
Otra forma de reducir nitratos a nitritos, seria con la columna de Cadmio cuprerizado (CdCu). Encontramos una gran rea de cadmio que se sumerge en una disolucin de sulfato de
cobre (CuSO4), donde el cadmio se reduce de Cu2+ a Cu0. El cobre se depositar en la
columna. Actuar como una reduccin heterognea, por donde pasar nuestra muestra
lquida por una columna slida. A medida que vayan pasando los nitratos por la columna
sern reducidos a nitritos. La columna acta como un catalizador.
8
I.
II.
Sistemas multibomba (MPS) inteligente para la determinacin de Fe(II) y Fe(III) con y sin
preconcentracin.
Para este sistema se colocan una serie de filtros acompaados de una resina acomplejante.
Se le indica al ordenador que aspire la muestra con la ayuda de la vlvula solenoide. Se
mezcla la muestra con tiocianato, formando un complejo coloro que posteriormente se
enviar al detector. Con estos datos, se obtienen diferentes espectros.
Dependiendo de la concentracin de hierro en la muestra,
se puede observar un pico que se encuentra dentro de la
curva de calibrado. El ordenador mide la altura del pulso y
enviar dos seales ms, determinando as la especie
Fe(III) en la muestra.
Si el pico es muy grande, se debe diluir. En cambio, si el pico es muy bajo, prcticamente
parecido al blanco, el ordenador directamente preconcentra la muestra. El ordenador enva
la muestra con un volumen muy grande (2-5 ml) que se ir preconcentrando en la resina.
Una vez preconcentrada la muestra, se protona con HNO3 y se libera FE(III) dando picos
buenos.
Ya hemos determinado la especie Fe(III). Para determinar la especie Fe(II) se repite todo el
proceso pero con la adicin de H2O2, que transforma todo el Fe2+ en Fe3+. Con esta tcnica,
se consigue realizar una especiacin obteniendo cada especie por separado.
Determinacin de sulfuros.
I.
10
I.
2. SEPARACIONES CROMATROGRFICAS
I.
11
3. ELECTROFORESIS CAPILAR-SIA.
Dentro de un capilar con un dimetro estrecho (100 m) se le introduce una disolucin
tampn para que el sistema sea conductor elctricamente. A continuacin, se procede a
introducir la muestra en un extremo. Aunque para este mtodo existen dos problemas cuyas
causas son: a) La introduccin reproducible de la muestra dentro del capilar suele ser
deficiente. b) La falta de sensibilidad.
Para solucionarlo, el procedimiento a seguir consistira en utilizar un sistema multijeringa,
con el que poder aspirar automticamente varias muestras a travs de un sistema SIA, donde
previamente se aspirar una disolucin tampn rellenndose el capilar con el fin de formar
un detector espectrofotomtrico.
A continuacin, se aspira la muestra y se enva hacia la vlvula que tiene un tubo de
silicona. El problema aparece cuando el volumen a introducir en el capilar es de nanmetros.
Al ser difcil su insercin, el tubo de silicona se hinchar y ayudar a su introduccin dentro
del capilar, todo ello con la vlvula cerrada. Durante el tiempo donde la vlvula est cerrada,
se inyecta la muestra y posteriormente se abrir. Con el tiempo transcurrido se puede
calcular el volumen de muestra que se ha inyectado en el capilar. Adems, gracias al
autovoltaje, los iones de la muestra irn migrando dentro del campo elctrico, y en funcin
de su velocidad irn llegando al detector.
El funcionamiento del detector consiste en un LED
(funciona dentro de la zona UV) que incide una
radiacin sobre el capilar. sta pasa por una fibra
ptica, llegando finalmente al detector. Se medir en
funcin de su absorbimetra.
La radiacin debe entrar justo en el dimetro del
capilar. Para poder focalizar la radiacin se debe
colocar previamente al capilar una hoja de aluminio
con una incisin.
12
V.
Bibliografa
D.A. Skoog, F.J.Holler, T.A. Nieman, Principios de Anlisis Instrumental, 2001.
M.A. Sogorb, E. Vilanova, Tcnicas Analticas de contaminantes qumico, 2004.
Temario de la asignatura Anlisis Instrumental, impartida por V. Cerd, UIB. 2015-16.
13