Manual Veterinário Colheita de Amostras PDF

Manual Veterinrio
de Colheita e Envio
de Amostras
2010
Sade Pblica Veterinria
Centro Pan-Americano de Febre Aftosa
Manual Veterinrio
de Colheita e Envio
de Amostras
2010
permitida a reproduo parcial ou total desta obra,

desde que citada a fonte. A responsabilidade pelos direitos
autorais de textos e imagens do autor.
Tiragem: 5.000 exemplares
1a edio. Ano 2010
Impresso no Brasil / Printed in Brazil
Distribuio e informaes
MINISTRIO DA AGRICULTURA, PECURIA E ABASTECIMENTO
Departamento de Sade Animal
Coordenao Geral de Combate a Doenas
Esplanada dos Ministrios, Bloco D, Anexo A,
3 andar, Sala 301
CEP 70043-900 Braslia, DF
www.agricultura.gov.br
0800 - 7041995
Este Manual foi realizado no mbito do Termo de Cooperao Tcnica (TCT) com o Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento (MAPA) e o Centro Pan-Americano de
Febre Aftosa (PANAFTOSA) da Organizao Pan-Americana
da Sade (OPAS)/ Organizao Mundial da Sade (OMS).
Manual veterinrio de colheita e envio de amostras:

manual tcnico. Cooperao Tcnica MAPA/OPASPANAFTOSA para o Fortalecimento dos Programas de
Sade Animal do Brasil. Rio de Janeiro: PANAFTOSA OPAS/OMS, 2010.
218p.: il. Color.; 15 cm. (Srie de Manuais Tcnicos, 13)
ISSN 0101-6970
1. Colheita de amostras - manuais. 2. Doenas dos
animais - diagnstico. I. Centro Pan-Americano de
Febre Aftosa - OPAS/OMS. II. Ministrio da Agricultura,
Pecuria e Abastecimento. III. Ttulo. IV. Sries.
Crditos
Coordenao
Guilherme Henrique Figueiredo Marques - DSA/SDA/MAPA
Jlio Csar Augusto Pompei OPAS/PANAFTOSA
Mnica Martini - OPAS/PANAFTOSA
Reviso Tcnica
Jlio Csar Augusto Pompei OPAS/PANAFTOSA
Mnica Martini - OPAS/PANAFTOSA
Gilfredo Darsie - OPAS/PANAFTOSA
Guilherme Henrique Figueiredo Marques DSA/SDA/MAPA
Ana Cristina Gonalves Pinto da Rocha CGAL/SDA/MAPA
Elaborao: Grupo Tcnico
Edviges Maristela Pituco IB/SP
Josete Garcia Bersano IB/SP
Claudia Del Fava IB/SP
Claudia Pestana Ribeiro IB/SP
Simone Miyashiro IB/SP
Ricardo Spacagna Jordo IB/SP
Adriana Hellmeister de Campos Nogueira IB/SP
Antonio Guilherme Machado de Castro CAPTAA/SP
Renato Lus Luciano CAPTAA/SP
Ana Maria Iba Kanashiro CAPTAA/SP
Ana Lcia S. P. Cardoso CAPTAA/SP
Eliana Neire Castiglioni Tessari CAPTAA/SP
rica Weinstein Teixeira APTA/SP
Dejair Message UFV/MG
Reviso Bibliogrfica
Astrid Rocha Pimentel
Colaborao
IB/SP: Alessandra Figueiredo de Castro Nassar, Elenice
Sequetin Cunha, Eliana De Stefano, Eliana Roxo,
Eliana Scarcelli Pinheiro, Liria Hiromi Okuda, Margareth
lide Genovez e Wilter Ricardo Russiano Vicente.
MAPA: Jos Carlos de Souza
CDA/SP: Armando Salvador da Silva (In memoriam)
Departamentos de Clnica Veterinria e de Reproduo
Animal da FMVZ/ USP
Apresentao
A Cooperao Tcnica entre o
Centro Pan-Americano de Febre Aftosa e o Ministrio da Agricultura,
Pecuria e Abastecimento tem possibilitado aes efetivas para o fortalecimento dos Programas de Sade
Animal do Brasil, investindo principalmente no aprimoramento das
aes tcnicas e na valorizao dos
prossionais envolvidos na manuteno do patrimnio representado
pela Sanidade Animal.
Este Manual Veterinrio de Colheita e Envio de Amostras foi elaborado para preencher uma lacuna
na bibliograa especializada e sua
proposta servir de guia para consulta rpida e objetiva por veterinrios de campo do servio ocial ou
autnomos. Visa assim, aprimorar a

qualidade da amostra colhida e assegurar sua correta conservao e
envio, facilitando rede laboratorial
a realizao de diagnsticos rpidos
e conclusivos, no mbito dos Programas Nacionais de Sanidade Animal.
nosso desejo que este Manual,
alm de ser utilizado no campo por
prossionais da medicina veterinria, seja tambm um valioso instrumento de capacitao, uso e referncia para os Servios de Sanidade
Animal.
Jamil Gomes de Souza

Departamento de Sade
Animal - Diretor
Ottorino Cosivi
Centro Pan-Americano de
Febre Aftosa Diretor
Prefcio
O Manual Veterinrio de Colheita e Envio de Amostras foi elaborado de forma simples, prtica e com uma viso atualizada dos
aspectos mais importantes da colheita de
amostra para o diagnstico das principais
doenas dos animais. Os autores deram especial nfase queles pontos que, com base
em sua experincia, consideram de maior interesse, particularmente para os Programas
de Sade Animal do Brasil.
Em seus captulos, divididos de acordo
com os aspectos de biossegurana e com a
colheita de amostras para o diagnstico de
doenas de ruminantes, equdeos, sudeos, aves e abelhas Apis mellifera, o manual
pretende fornecer um apoio ao mdico veterinrio de campo quanto correta colheita
de material da espcie afetada e ao sistema
comprometido, para que as amostras colhidas de eleio no levem em considerao
apenas a doena suspeita quando da realizao do exame clnico, o que impossibilitaria
os diagnsticos diferenciais.
6
O Manual no pretende esgotar todos os

assuntos nele abordados, mas abre a possibilidade de uma discusso focada e atualizada e dar ensejo a futuras contribuies, revises e complementaes. Espera-se que os
usurios deste Manual o apliquem em suas
atividades no dia-a-dia, esclarecendo dvidas e promovendo mudanas que resultem
em melhorias na ateno veterinria.
Agradecimentos
Expressamos nossos sinceros agradecimentos ao Ministrio da Agricultura, Pecuria
e Abastecimento (MAPA) pelo apoio na elaborao deste Manual e equipe de autores
pelo excelente trabalho realizado.
7
Sumrio
Captulo 1
Biossegurana
15
1. Equipamentos de proteo individual (EPI)
16
2. Equipamentos para conteno dos animais
18
3. Identicao do animal e da amostra
20
4. Descarte de material
5. Acondicionamento para remessa de amostras
para diagnstico
6. Requisio de exames
Tabela de medidas de agulhas
46
Tubos para colheita de sangue
47
Pele e mucosas
48
Material para colheita de amostras para

diagnstico de doenas de pele e mucosas
50
22
Amostras para diagnstico de doenas

de pele e mucosas
52
24
Lquido e tecido epitelial vesicular
52
28
Lquido esofgico-farngeo (LEF)
54
Exsudato (secrees)
56
Bipsia de pele e mucosa
58
Raspado de pele
60
Sangue
62
Captulo 2
Ruminantes, Equdeos e Sudeos
35
Sangue
36
Sangue
38
Colheita de sangue com sistema a vcuo
40
Colheita de sangue com seringa e agulha
42
Boas prticas de colheita para preveno

da hemlise
44
Boas prticas ps-colheita para preveno

da hemlise
45
Sistema respiratrio
64

diagnstico de doenas do sistema respiratrio
66

do sistema respiratrio
68
Pulmo e linfonodos
68
Secrees
70
Sangue
72
Sistema gastrintestinal
diagnstico de doenas do sistema gastrintestinal
Amostras para diagnstico de doenas do sistema
gastrintestinal
74
Sistema circulatrio e linftico
108
76
Material para colheita de amostras para diagnstico

de doenas do sistema circulatrio e linftico
110
78

circulatrio e linftico
rgos - sistema nervoso central, fgado, bao,
pulmo, rim, corao, linfonodos e
intestino delgado e grosso
112
Contedo ruminal
78
Fezes
80
Alimentos para nutrio animal
82
Sangue capilar e venoso
116
Sangue
84
Sangue
118
112
Sistema osteoarticular
120
Sistema reprodutor e urinrio
86

de doenas do sistema reprodutor e urinrio

diagnstico de doenas do sistema osteoarticular
122
88

reprodutor e urinrio

osteoarticular
124
90
Lquido sinovial
124
Feto de at 2 Kg
90
Sangue
126
Feto e natimorto com mais de 2 Kg
92
Placenta
94
Sistema nervoso central (SNC)
128
Smen
96
Muco prepucial tcnica do suabe
98

de doenas do sistema nervoso central (SNC)
130

nervoso central (SNC)
132
Muco prepucial tcnica do lavado prepucial
100
Muco cervicovaginal
102
SNC inteiro
132
Urina
104
Pores do sistema nervoso central (SNC)
134
Sangue
106
Outros rgos - fgado, bao, pulmo, rim,

corao, linfonodos, intestino delgado e grosso
138
Sangue
142
Captulo 3
Captulo 4
Aves
145
Principais doenas que acometem as aves
146

diagnstico de doenas das aves
148

das Aves
150
Sangue (para obteno do soro)
150
rgos
154
Suabe de traquia
158
Suabe de cloaca
160
Suabe de arrasto - a) gaze ou esponja e b) prop
162
Fundo de caixa
164
Papel ou cepilho que forra a caixa

de transportes de aves de 1 dia
166
Fezes frescas
168
Mecnio
170
Ovos bicados
172
Abelhas Apis mellifera
175

diagnstico de doenas de abelhas Apis mellifera
176
Garantindo a segurana
178
Reconhecendo as partes de uma colmeia
179
Identicando os indivduos da colnia, clulas

de operrias, clulas de zango e realeira
180
Abrindo e inspecionando uma colmeia
182
Fases do desenvolvimento das abelhas
186
Diferentes anomalias na fase de cria
188
Principais doenas, intoxicaes e parasitoses que

afetam Crias de Abelhas Apis mellifera
190
Amostras para diagnstico das principais doenas

que afetam Crias de Abelhas Apis mellifera
Amostra 1
Amostra 2
Amostra 3
Amostra 4
194
194
196
198
200
Principais doenas, intoxicaes e parasitoses que

afetam Abelhas Adultas Apis mellifera
202

que afetam Abelhas Adultas Apis mellifera
Amostra 1
Amostra 2
Amostra 3
Amostra 4
Amostra 5
Bibliografia
204
204
206
208
210
212
214
Captulo 1
BIOSSEGURANA
Autores
Edviges Maristela Pituco
Ricardo Spacagna Jordo
Adriana Hellmeister de Campos Nogueira
Centro de P & D de Sanidade Animal
Instituto Biolgico (APTA/SAA-SP)
14
15
Biossegurana um conjunto de
procedimentos destinados a prevenir, controlar,
reduzir ou eliminar riscos inerentes s
atividades suscetveis de comprometer a sade
humana, animal e o ambiente
culos
Touca
Luvas com
o de ao
Mscara
1 - Equipamentos de proteo individual (EPI)

Utilizar vestimentas de proteo apropriadas
de acordo com o risco, tais como macaco,
avental ou cala e jaqueta impermeveis.
Luvas
de ltex
Luvas nitrilica
- neoprex
Luvas tricotadas
pigmentadas
Botas
Avental
impermevel
16
Avental
Macaco
17
2 - Equipamentos para conteno dos animais

Verifique com antecedncia se as instalaes e
equipamentos esto disponveis, limpos e em boas
condies de uso. Utilize equipamentos e materiais
de boa qualidade.
Uma boa conteno pode ser obtida pelo

uso de argola nasal
Imobilizador nasal
tipo formiga
Abre boca
Cachimbo
Para prevenir acidentes e fazer uma boa colheita de

amostras para diagnstico, muito importante que
o animal esteja bem imobilizado. Isto deve ser feito
preferencialmente no tronco de conteno.
Muitas vezes necessrio o uso de
peias, principalmente quando h
risco de acidentes (com coices) ou
quando os animais ficam inquietos.
18
19
3 - Identicao do animal e da amostra

Os mtodos de identificao animal mais comuns so:
tatuagem, brinco (visual ou eletrnico) e marcao a fogo.
Brincos
Brincos: aplique o
brinco na parte central
da orelha e entre
as duas nervuras
principais.
Aplicador
de brincos
O alicate aplicador
deve ficar na posio
vertical (em p), evite
a posio horizontal
(deitado).
A identificao da amostra
comea com a identificao
do animal. Essa etapa
crucial para que no final do
processo, seja garantida a
rastreabilidade. No momento
da colheita da amostra de
cada animal, o nmero do
animal dever ser conferido e
anotado no rtulo do frasco e
no formulrio de colheita. Na
impossibilidade de se obter
a identificao do animal,
identificar o lote ou ncleo,
a colmeia, entre outros.
NOTA
Registrar a id
enticao
do animal no
recipiente de
colheita, prefer
encialmente
em rtulo de
esparadrapo
com caneta es
ferogrca.
Para substitui
r essa
forma de iden
ticao,
necessrio
que
a alternativa
a ser
empregada se
ja
previamente
testada.
Animal com brinco

bem posicionado
20
21
4 - Descarte de material
Outros materiais
Seringas,
luvas, gorro,
mscara, avental
ou macaco
descartvel,
gaze, algodo e
outros materiais
potencialmente
infectantes
devem ser
descartados em
saco branco de
lixo, devidamente
identificado
para substncia
infectante.
Material
perfuro-cortante
Agulhas, lminas
de bisturi, tubos
quebrados, tubos
de vidro contendo
uido devem ser
descartados em
caixas coletoras
prprias para
material perfurocortante. Na falta
dessas, utilizar
recipientes de
paredes rgidas
com tampa (latas
de leite em p
ou similares).
NOTA
ndo os
Os recipientes conte
ente infectantes
lm
resduos potencia
s como
do
za
ali
sin
r
devem se
ados para
Infectante e destin
lar ou algo
coleta de lixo hospita
o-se as
nd
equivalente, respeita
acionais
ern
int
e
is
na
cio
normas na
nimizar
mi
e
que tm por nalidad
os
ri
nit
sa
is,
nta
riscos ambie
.
ais
ion
ac
e ocup
22
NOTA
priedade, todos os
Antes de sair da pro
:
na colheita, tais como
materiais utilizados
as
ulh
ag
s),
s (formiga
sondas, imobilizadore
,
ro ser desinfetados
ve
de
,
tas
bo
e
s
ica
metl
s,
co
fsi
micos ou
com desinfetantes qu
po de contato e as
tem
o
e
o-s
nd
observa
situao. Os demais
da
ca
indicaes para
macaces, devero
materiais, como os
cos plsticos para
sa
ser colocados em
o e lavagem.
posterior desinfec
23
5 - Acondicionamento para remessa

de amostras para diagnstico
O sistema de embalagem, inclusive para transporte
terrestre, deve ser envasamento triplo: um recipiente
primrio, uma embalagem secundria e uma
embalagem externa obrigatoriamente rgida
(embalagem terciria).
3 Passo
Acondicionar dentro de outro recipiente resistente
(embalagem secundria). Como alternativa de
embalagem secundria, pode ser utilizada lata de
leite em p ou de achocolatado, por exemplo.
1 Passo
Acondicionar o
recipiente que
contm a amostra
(recipiente primrio),
identificado de forma
clara e legvel, em
saco plstico vedado
hermeticamente.
2 Passo
Envolver este conjunto
em manta absorvente,
prevenindo possveis
vazamentos.
Importante: Deve-se realizar a desinfeco externa em todas

as etapas do processo de acondicionamento da amostra,
desde o recipiente primrio com a amostra, o saco plstico
e a embalagem secundria at a caixa isotrmica
24
NOTA
Se forem colo
cados vrios
recipientes pr
imrios frge
is
em uma mes
ma embalage
m
secundria, el
es devem ser
envolvidos in
dividualmente
ou
separados de
forma que se
evite o contat
o entre eles
25
4 Passo
Acomodar o recipiente na caixa isotrmica (embalagem
intermediria), que dever, por sua vez, ser colocada
na embalagem terciria (externa). Utilizar gelo reciclvel
em quantidade
compatvel com o
tamanho da amostra e
o tempo para chegada
ao laboratrio (como
alternativa, garrafa pet
bem fechada, com gua
congelada). Preencher
o espao vazio com
enchimentos macios
(ocos de isopor, jornal,
papel toalha).
5 Passo
Na parte externa da tampa
da caixa isotrmica, afixar
a requisio de exame,
devidamente preenchida e
colocada num saco plstico
transparente. Fechar bem
a caixa isotrmica e colocla dentro da embalagem
terciria, que dever ser
rotulada de acordo com
as normas nacionais e
internacionais. Em lados
opostos, colocar a orientao
de embalagem:
Este lado para cima.
Use caixas isotrmicas

resistentes e em boas condies
NOTA
O transporte de amostras que tenham

probabilidade insignicante de conter substncias
infecciosas, como soro e sangue para inquritos
soroepidemiolgicos ou que os agentes patognicos
tenham sido neutralizados ou inativados de forma a
no mais representar qualquer risco sade, no
est sujeito a esta regulamentao, devendo apenas
garantir que a embalagem primria seja estanque e
a prova dgua. A embalagem secundria pode ser
um saco plstico hermtico e a marca externa deve
apenas conter a expresso Amostra Animal
Isenta de Agente Infeccioso.
26
NOTA
Para o transporte, as embala

gens de
material biolgico referente
a espcime
diagnstico devem ser iden
ticadas com:
Nome, endereo e telefone
do
remetente e do destinatrio
Telefone para emergncias
A marca UN 3373 colocad
a na
superfcie externa da embala
gem
terciria, de modo que seja
fcil de ver
e ler. A designao ocial de
transporte
Substncia Biolgica, categor
ia B
dever gurar ao lado da ma
rca
27
6 - Requisio de exames
S PARA REMESSA
MAS NECESSRIA
INFORMAES MNI
Nome da Propriedade:
Nome do Proprietrio:
Endereo:
CEP:
Caixa Postal:
Fone:
DE
DIAGNSTICO
AMOSTRAS PAR A
1 - Localizao da propriedade
1.1 Nome completo (sem abreviaes) e endereo do proprietrio do
animal suspeito.
1.2 Nome completo da propriedade ou estabelecimento onde
foi colhida a amostra.
1.3 Localizao que facilite o acesso propriedade citada.
Cidade/Estado:
e-mail:
Celular:
rinrio
Dados do Mdico Vete
Nome:
Celular:
Fone:
do resultado:
Endereo para envio
Cidade/Estado:
s
CEP:
Dados das Amostra
[ ]
central
[ ] Sistema nervoso
[ ]
pele
e
es de mucosa
Infec
]
[
[ ]
Sistemas
stinais
[ ] Infeces gastrinte
afetados:
[ ]
diagnstico e
[ ] Confirmao de
[ ]
a
nci
vigil
do
Finalidade
[ ] Movimentao
o
ida
eval
exame:
o/r
[ ] Requisito certifica
E-mail:
Infeces vasculares
ares
Infeces steo-articul
Infeces do aparelho
rio
respirat
Monitoramento
_____
Outra:______________
___
Tipo de Amostras:
__________
[ ] Soro
A [ ] Outro: ________ ____________
coagulante: [ ] EDT
________________
[ ] Sangue Total - Anti
_
da leso/tecido_____
sitio
________________
car:
o:
ecifi
re
Esp
Sec
]
[
[ ] Bipsia
[ ] Smen
[ ] Fezes
_____________
____
____
[ ] Contedo gstrico
____
ne
________________
[ ] Placenta/cotildo
[ ] rgos:_________
[ ] Fludo cavitrio
[ ] Feto
[ ] Embrio
________________
____
____
____
as
____
[ ] Outr
________
________________
Especificar:_________
entares:
Informaes Complem
:
)
Informaes Clnicas
cos mais significativos
ente os achados clni
(descrever objetivam
s etc)
os relevantes:
Dados epidemiolgic ma doena infecciosa, pessoas envolvida
(rea endmica de algu
o:
Diagnstico presuntiv
Identificao
da amostra
Identificao
do animal
Data da colheita:
eita:
Responsvel pela colh
28
o de colheita
Formulrio detalhad
Sexo
Idade
Espcie
Data do envio:
Pontos importantes no preenchimento

da Requisio de Exames
Tipo de
amostra
Principal
sistema afetado
2 - Identicao do remetente da amostra

2.1 Nome completo (sem abreviaes) e endereo do responsvel
pelo encaminhamento da amostra. Dever constar um nmero
de telefone para casos de emergncia.
2.2 O responsvel pelo preenchimento do formulrio e envio
da amostra dever ser um prossional devidamente habilitado
para trabalhar com materiais de risco biolgico.
3 - Descrio do animal suspeito, rebanho e da amostra
3.1 Informar a data da colheita, nome ou nmero do animal
suspeito, idade, sexo, raa e espcie.
3.2 Preencher a nalidade do exame (ex. conrmao de
diagnstico, movimentao, monitoramento). Em caso de
conrmao de diagnstico, descrever quais os sinais clnicos
apresentados pelo animal, e a data provvel de incio da doena
e em caso de necropsia, descrever os achados mais signicativos.
Para conrmao de diagnstico deve-se preencher uma
requisio de exames para cada animal
3.3 Informar o nmero de animais existentes na propriedade,
quantos animais apresentaram sinais clnicos semelhantes e
quantos vieram a bito (informar vacinao, vermifugao).
3.4 Informar quais amostras foram remetidas e conservante utilizado.
4 - Informaes complementares
Esse espao reservado para qualquer outra informao
que o tcnico considere pertinente (suspeita de zoonoses
informar se h pessoas envolvidas, etc.)
29
ROLGICA
A SNDROME NEU
DE EXAMES PAR
O DE REQUISIO
- dezembro/2009)
(UF)
(verso atualizada
N ________/____
FORMULRIO NIC
2Registro
1Responsvel
amostra:
envio:
3Responsvel pelo
Fax:
Endereo:
Municpio/UF:
E-mail:
Alguns pontos importantes no preenchimento da

Requisio de Exames Para Sndrome Neurolgica
Profissional
n
nal
Registro Profissio
n
Telefone:
pela colheita da
(
(
)
)
2Propriedade:
Municpio/UF:
(
Telefone:
(
Fax:
1Proprietrio:
3Coordenadas:
4Localizao:
)
)
E-mail:
Ovina
_______) Eqdea
ra
de origem: ____
Silvestres (cita
do citar o pas
MNH Animais
bovino importa
Bovdea (para
Felina MH
ina
Can
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Caprina
Hospital
o
cria
___)
de
espcie: ________
Estabelecimento
________)
icar: ____________
ruminante):
F
Outro (especif
M
amostra (para
2Local de origem da
______ Sexo:
o de animais
es Raa:______
Feiras/aglomera
Idade:______mes
veterinrio
al:
3Identificao do anim
nda
faze
gico ou na
_____
Registro geneal
________________
a
tria
ular idade (par
Cronologia den
____)
4Mtodo para estip
icar: ____________
_________
Outro (especif
Quando:_______
ruminante):
Sim
No
________________
da vida?
Quais?__________
o em alguma fase
_)
(___
Sim
tos
mor
5O animal ingeriu ra
No
doentes (_____)
cies afetadas?
Leptospirose
_____)
Havia outras esp
Cinomose
__
no rebanho (___
Clostridiose
________________
6Nmero de animais:
Raiva
____ Quando?
foi vacinado
Outras ________
7O animal morto j
lismo
Botu
__
para:
o:____/____/__
Data da Notifica
Vigilncia
D
Terceiro
_/____
1Origem da
Proprietrio
doena: ____/___
da
o
inci
do
l
notificao:
Data provve
____/____/____
2Data da 1 visita:
eriores
dos membros post
s (assinalar):
Paralisia flcida
cos apresentado
riores
em
3Tipos de sinais clni
alag
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dos membros ante
Movimento de
Paralisia flcida
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Morte sbita
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Con
Alte
Sialorria
Depresso
obia
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Dism
Fotofobi
Agressividade
Ataxia
Tremores
Midriase
ta
Tetania
Paralisia, mas aler
Nistagmo
Opisttono
res
Priapismo
cula
mus
s
smo
Tenesmo
Espa
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Cegueira
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Apetite an
Sacrificado: Sim
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Durao dos sina
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_______________
eita da(s) amo
1Tipo de amostra enc
Quais?__________
Dia e hora da colh
s __:___
_
____/____/____
vel da morte:
________________
____
em:
iado
Dia e hora prov
Material env
_
________
___/___/___ s __:_
o do material:
fixa
a
e
eita
colh
Tempo entre a
1Espcie:
hora(s)
Observaes
____
Local/Data:______
/____/____
____________,____
__________
________________
________________
mbo
Assinatura e cari
30
A - Identicao do remetente da amostra:

Nome completo do responsvel pela colheita e/ou pelo envio da
amostra com o n do registro prossional, caso seja veterinrio
ocial, o n da matrcula e nome da instituio.
B - Localizao da propriedade onde foi colhida a amostra:
Nome completo do proprietrio do animal e da propriedade ou
estabelecimento onde foi colhida a amostra. Se possvel, registrar
as coordenadas da propriedade e localizao que facilite o acesso.
C - Descrio do animal suspeito e do rebanho em que se
encontrava:
Marcar a espcie animal e no caso de animal silvestre
especicar o nome vulgar. Marcar MH (morcego hematfago)
e MNH (morcego no hematfago). Ruminante: colocar o local
de origem da amostra no item 2 e preencher o item 5, referente
a ingesto de protenas, concentrados, rao e suprimento
mineral protico. Informar o rebanho existente, n de animais
com sintomas clnicos e mortos, para animais de companhia
ou silvestre desconsiderar essa informao.
D - Aes na propriedade suspeita e os sinais clnicos
apresentados.
Colocar a origem da noticao, data da 1 visita e a data
provvel do inicio da doena.
E - Informaes sobre a colheita, acondicionamento e
conservao da amostra
Pode ser marcado mais de um quadrculo, desde que as
amostras pertenam ao mesmo animal. Especicar as amostras
encaminhadas, sempre quando vsceras/outros for marcado.
F Observaes.
Colocar outras informaes pertinentes, inclusive informando
agresses a pessoas, caso tenham ocorrido.
31
DE AMOSTRAS
S PARA REMESSA
MAS NECESSRIA
INFORMAES MNI
LHAS Apis mellifera
ABE
DE
S
NA
DOE
DE
PAR A DIAGNSTICO
Nome da Propriedade:
de:
Endereo da Proprieda
(apicultor):
Nome do Proprietrio
Endereo:
Cidade/Estado:
CEP:
e-mail:
Caixa Postal:
Celular:
rinrio
Fone:
Dados do Mdico Vete
1 - Localizao da propriedade
1.1 Nome da propriedade ou estabelecimento onde
foi colhida a amostra.
1.2 Endereo da propriedade ou estabelecimento onde foi
colhida a amostra (incluir localizao que facilite o acesso
propriedade citada).
1.3 Nome completo (sem abreviaes) e endereo e telefone
do proprietrio do apirio.
E-mail:
Nome:
Celular:
Fone:
do resultado:
Endereo para envio
Cidade/Estado:
s
CEP:
Dados das Amostra
da colheita:
aspecto no momento
seu
e
idas
colh
Amostras
Aspecto:
[ ] Abelhas do alvado.
de cria. Aspecto:
[ ] Abelhas da rea
. Aspecto:
[ ] Abelhas do cho
[ ] Crias. Aspecto:
lizao na colmeia.
[ ] Favo de mel. Loca
ecificar:
[ ] Outros dados. Esp
eia
Informaes da colm
2 - Identicao do remetente da amostra

2.1 Nome completo (sem abreviaes), endereo e telefone do
responsvel pelo encaminhamento da amostra.
eia:
identificao aqui)
Identificao da colm de forma permanente e escreva essa
(identifique a colmeia
Condio da colmeia:
[ ] Forte. Obs:
[ ] Mdia. Obs:
[ ] Fraca. Obs:
es.
[ ] Outras condi
entares
Informaes complem
arar a origem.
)? Especificar e decl
(energtica ou protica
ano?
do
a
Em que poc
ia? Para que local?
ementar
Adota alimentao supl
atr
Pratica apicultura migr
visitada.
eias na propriedade
Nmero total de colm
das, etc.):
:
icas
Cln
es
ero de colmeias afeta
Informa
comportamento, nm
(sintomas observados,
o de colheita
Formulrio detalhad
stra
Identificao da amo
Data da colheita:
eita:
Responsvel pela colh
32
Pontos importantes no preenchimento

da Requisio de Exames
eia
Identificao da colm
Data do envio:
Tipo de amostra
3 - Dados das Amostras

3.1 Preencher um formulrio por colmeia.
3.2 Informar todos os tipos de amostras colhidas em cada
colmeia, com as observaes pertinentes.
No esquecer de indicar o local no interior da colmeia
onde o pedao de favo de mel foi colhido.
4 - Informaes da colmeia
4.1 Caso o apicultor no adote marcao permanente nas
colmeias, fazer marcao em cada uma das colmeias de
onde foram colhidas as amostras.
5 - Informaes complementares
5.1 Detalhar o manejo de alimentao suplementar adotado
pelo apicultor (incluindo poca de fornecimento s abelhas).
5.2 Caso o apicultor pratique apicultura migratria, indicar os locais
para os quais as colmeias so deslocadas em cada poca do ano.
5.3 Informar se outros apicultores tm colmeias na mesma
propriedade.
5.4 Utilizar o verso do formulrio para outras observaes
que considerar importantes e no contempladas pelos
itens mencionados (ex.: histrico do problema etc.)
33
Captulo 2
RUMINANTES,
EQUDEOS E
SUDEOS
Autores
Edviges Maristela Pituco
Claudia Del Fava
Claudia Pestana Ribeiro
Josete Garcia Bersano
Simone Miyashiro
Centro de P & D de Sanidade Animal
Instituto Biolgico (APTA/SAA-SP)
34
35
Sangue
O sangue representa cerca de 8% do peso corporal de um
animal. As anlises do sangue so importante apoio ao
diagnstico clnico. Pode ser colhido com seringa e agulha
e transferido para recipientes de diferentes capacidades,
com ou sem anticoagulante, ou colhido em tubos a vcuo
que, por serem hermticos, garantem a esterilidade da
amostra, o que desejvel em toda puno venosa. Para
serem representativas, as amostras de sangue devem ter
sua composio e integridade mantidas durante as fases
pr-analticas de colheita, manuseio, transporte e eventual
armazenagem. Antes da colheita de sangue para a
realizao de exames laboratoriais, importante conhecer,
controlar e, se possvel, evitar algumas variveis que podem
interferir na exatido dos resultados. Classicamente, so
referidas como condies pr-analticas variao na dieta
e uso de medicamentos. Outros aspectos, como o uso de
gel separador, anticoagulantes e conservantes e a hemlise
podem tambm ser causa de variao dos resultados.
36
37
1. Material
Sangue
2. Onde colher
a) Veia jugular;
b) Veia coccgea;
c) Veia mamria; e
d) em sunos, veia
cava cranial
3. Como colher
Utilizar sistema a vcuo
ou seringa e agulha
a) Obteno de soro
b) Sangue total
Colher o sangue em tubo sem

anticoagulante; manter o tubo
inclinado em temperatura
ambiente at o sangue
coagular e retrair o cogulo,
exsudando o soro (30 a 60
min). Transferir o soro para
outro tubo (tampa com rosca
ou tipo Eppendorf).
Se for utilizado tubo com
gel separador,
ser necessrio
centrifugar o
sangue no
mnimo
30 minutos
aps a
colheita e
no mximo
2 horas e enviar
o soro no prprio tubo.
O sangue dever ser

colhido e enviado
em tubo com
anticoagulante (EDTA
k2). Homogeneizar
suavemente,
invertendo o tubo
(cerca de 6 vezes)
a) Pesquisa de anticorpos
4. Recipiente e quantidade
a) Tubo de ensaio
sem anticoagulante:
capacidade 10 mL.
b) Tubo de ensaio
com EDTA K2:
capacidade 5 mL
5. Exames
b) Pesquisa direta
do agente
6. Temperatura da amostra para transporte

a e b) Refrigerada (+2C a +8C)
7. Tempo crtico para chegada ao laboratrio

At 48 horas
38
39
Colheita de sangue com

Sistema a Vcuo
PASSO A PASSO
1. Rosquear a agulha no adaptador. Retirar a capa
protetora da agulha somente no momento da
puno; (figuras a e b)
2. Realizar antissepsia do local escolhido para
puno; passar algodo embebido em lcool a
70%, na direo do pelo;
c
d
3. Retirar a capa da agulha e fazer o garrote;

4. Puncionar a veia; (figura c)
5. Introduzir o tubo no adaptador, pressionando-o
at o limite; (figuras d e e)
6. Esperar o sangue parar de fluir para dentro
do tubo, s ento retirar o tubo, assegurando a
devida proporo sangue/anticoagulante; (figura f)
7. Soltar o garrote e s depois retirar o tubo e em
seguida a agulha;
e
f
8. Separar a agulha do adaptador e descart-la

em recipiente para perfuro-cortantes.
40
41
Colheita de sangue com

Seringa e Agulha
PASSO A PASSO
1. Encaixar a agulha na seringa, sem retirar a capa
protetora. Certificar-se de que a agulha esteja bem
encaixada; (figura a)
2. Movimentar o mbolo da seringa (para frente e para
trs) para retirar o ar; (figura b)
3. Fazer a antissepsia do local escolhido para puno;

passar algodo embebido em lcool a 70%, na direo
do pelo;
4. Retirar a capa da agulha e fazer o garrote;
5. Introduzir a agulha na veia e puxar o mbolo da seringa
lentamente, para que o sangue possa fluir; (figura c)
6. Colher aproximadamente 10 mL de sangue;
7. Soltar o garrote aps a venopuno;
d
e
8. Separar a agulha da seringa. Descartar a agulha em

recipiente para perfuro-cortantes (figura d).
Lembre-se: Nunca reencapar as agulhas.
9. Transferir o sangue da seringa para um tubo de ensaio
com ou sem anticoagulante. Para evitar hemlise, o
sangue deve fluir lentamente pela parede do tubo; (figura e)
10. Descartar a seringa em saco plstico apropriado ou
no mesmo recipiente em que foi descartada a agulha.
42
43
44
BOAS PRTICAS DE COLHEITA

PARA PREVENO DA HEMLISE
BOAS PRTICAS PS-COLHEITA

PARA PREVENO DA HEMLISE
Antes de iniciar a puno, deixar que o lcool

utilizado na antissepsia seque.
Evitar usar agulhas de menor calibre.
No colher sangue de rea com hematoma
ou equimose.
Em colheitas de sangue a vcuo, puncionar a veia do
animal com o bisel voltado para cima. Perfurar a veia
com a agulha em um ngulo oblquo de insero, de
30 graus ou menos. Esse procedimento visa a prevenir
o choque direto do sangue na parede do tubo, o que
pode hemolisar a amostra, e tambm a evitar o refluxo
do sangue do tubo para a veia do animal. Esperar
o sangue parar de fluir para dentro do tubo, antes
de trocar o tubo por outro, assegurando a devida
proporo sangue/ anticoagulante.
Tubos com anticoagulante com volume insuficiente ou
com excesso de sangue alteram a proporo correta
de sangue/aditivo, podendo levar a hemlise e a
resultados incorretos.
Em colheitas com seringa, verificar se a agulha
est bem adaptada, a fim de evitar a formao de
espuma; no puxar o mbolo da seringa com muita
fora. Descartar a agulha, passar o sangue, fazendo-o
deslizar cuidadosamente pela parede do tubo e
cuidando para que no haja contaminao do bico da
seringa com o anticoagulante ou ativador de cogulo
contido no tubo.
No espetar a agulha na tampa do tubo, para
transferncia do sangue da seringa para o tubo,
porque pode ocorrer uma presso positiva, o que
provoca, alm da hemlise, o deslocamento da
rolha do tubo.
O sangue colhido no deve ficar exposto a

temperaturas muito elevadas ou mesmo exposio
direta luz, para evitar hemlise e/ou degradao.
Homogeneizar a amostra de sangue com
anticoagulante suavemente por inverso de 5 a 10
vezes, no agitar o tubo.
O sangue total nunca deve ser congelado, se
necessrio estocar, manter refrigerado, lembrando
que dever chegar no laboratrio dentro de 48 horas.
O soro poder ser congelado a - 20C, por at um
ms. Nunca congelar soro com cogulo em tubo sem
gel separador.
No deixar o sangue em contato direto com gelo.
No centrifugar a amostra de sangue em tubo para
obteno de soro antes do trmino da retrao do
cogulo, pois a formao do cogulo ainda no est
completa, podendo levar ruptura celular.
Quando utilizar um tubo primrio com gel separador,
a separao (centrifugao) do soro deve ser efetuada
dentro de no mnimo 30 minutos e no mximo 2 horas
aps a colheita.
Tubos com gel separador no podem ser centrifugados
em baixas temperaturas, uma vez que as propriedades
de fluxo do gel relacionam-se com a temperatura. A
formao da barreira de gel pode ser comprometida
caso o tubo seja resfriado antes ou durante a
centrifugao. Para otimizar o fluxo e evitar aquecimento,
ajustar as centrfugas refrigeradas a 25 C.
No usar o freio da centrfuga com o intuito de
interromper subitamente a centrifugao dos tubos,
pois esta brusca interrupo pode provocar hemlise.
45
TABELA DE MEDIDAS DE AGULHAS
Centrifugao
(1500-2000g/10min), no mnimo 30 minutos e no mximo
2 horas aps a colheita
Cogulo
Soro separado por Gel
Pesquisas de anticorpos
Tampa amarela
Repouso 30 a 60 min.
Cogulo
Soro
TUBOS
TUBOS PARA COLHEITA DE SANGUE
CREME
VERDE
PRETO
VIOLETA
Pesquisas de anticorpos
27 5G 1/2
Tampa verde
0,38 X 13
Centrifugao
26G 1/2
Sangue total
Plasma
0,45 X 13
Exames Bioqumicos
e toxicolgicos
24G 3/4
Tampa branca
0,55 X 20
Centrifugao
No mximo em at 2
horas aps a colheita
22G 1
22G 1 1/4
Sangue total
Plasma
Anel de Leuccitos
0,70 X 25
0,70 X 30
Isolamento
Biologia Molecular
21G 1
21G 1 1/4
21G 1 1/2
Centrifugao
0,80 X 25
0,80 X 30
0,80 X 40
Sangue total
Plasma
Anel de Leuccitos
19G 1
19G 1 1/4
Isolamento
Biologia Molecular
1,00 X 25
1,00 X 30
TUBO
TUBO
SILICONIZADO SILICONIZADO
COM GEL
SEPARADOR
PREPARO
18G 1
18G 1 1/2
HEPARINA
PRODUTO FINAL
1,20 X 25
1,20 X 40
EDTA K2
DIPOTSSICO
COM GEL
SEPARADOR
EXAMES
16G 1 1/2
Tampa lils
BRANCO
EDTA K2
DIPOTSSICO
ROSA
1,60 X 40
Indicaes de uso
Puno venosa: Branca bovinos e bubalinos; Rosa bovinos, equdeos, sudeos e
pequenos ruminantes; Creme pequenos ruminantes; Verde pequenos ruminantes
Puno articular: verde, violeta, castanho e cinza; Aves preto e verde
46
TUBOS SEM
ANTICOAGULANTE
TUBOS COM ANTICOAGULANTE
Tampa vermelha
Cor do Canho
A cor do canho define
o dimetro da agulha
CASTANHO
Gauge/
Polegadas
CINZA
Mtrico
(mm)
47
Pele e mucosas
A etiologia das enfermidades que afetam a pele
muito variada, incluindo, entre outras, causas
parasitrias, bacterianas, fngicas, virais, neoplsicas,
nutricionais, txicas, fsicas, congnitas e genticas.
O diagnstico no to fcil, pois a pele est exposta
a fatores externos (contaminao e efeito do sol)
que modificam substancialmente o aspecto e a
evoluo das leses. Das doenas que acometem
as mucosas, a principal a estomatite, que abrange
o complexo de enfermidades vesiculares, tais como
a febre aftosa, a estomatite vesicular e a varola
bovina, que tm em comum a propriedade de
provocar nas espcies afetadas a formao de
vesculas contendo lquido incolor ou ligeiramente
sanguinolento, tpico dessas doenas. O diagnstico
se baseia em informaes clnicas, epidemiolgicas
e laboratoriais. O diagnstico deve ter sempre
um carter diferencial. Os materiais de eleio
para diagnstico so fragmentos de epitlio e de
mucosas e exsudato (lquido vesicular) provenientes
de leses linguais, bucais, podais ou de bere. Alm
disso, para pesquisa direta de agente em possveis
portadores do vrus de febre aftosa, utiliza-se material
esofgico-farngeo. A pesquisa de anticorpos em
soro tem sido utilizada para demonstrar ausncia
de infeco, determinar a prevalncia em estudos
soroepidemiolgicos, avaliar a resposta humoral aps
vacinao e desafio para os programas de erradicao
e vigilncia. Em raras situaes, a sorologia pode ser
utilizada como ferramenta de diagnstico definitivo.
48
Principais doenas de pele

e mucosas e espcies acometidas
ESPCIES ACOMETIDAS
DOENAS
Febre aftosa
Estomatite vesicular
Lngua azul
Varola/vaccnia
(orthopoxvirus)
Pseudovarola
Ectima contagioso
Rinotraqueite
infecciosa bovina/
vulvo vaginite
postular infecciosa
Diarria viral bovina
Doena Vesicular
do suno
Exantema Vesicular
do suno
49
Material para colheita de

amostras para diagnstico de
doenas de pele e mucosas
Tubos (Tipo Falcon) com
meio conservante
Coletor
universal
com meio
conservante
Porta-lminas
Punch
para bipsia
Luvas
Lmina de bisturi
Papel-toalha
Tubo tipo KMA

(tampa com rosca)
Tubos
com tampa
com rosca
50
Lmina de bisturi
Pina
Microtubos tipo
Eppendorf
Tubos a vcuo para

colheita de sangue,
com gel separador, sem
e com anticoagulante
Suabes e meios
conservantes
para transporte
Coletor de raspado
esofgico-farngeo
(copo de Probang)
Cabo de bisturi
Tesoura cirrgica
Agulha para colheita

de sangue a vcuo
Sistema para colheita

de sangue a vcuo
Coletor universal
Lmina para
microscopia
Seringa e agulhas
51
Amostras para diagnstico

de doenas de Pele e Mucosas
3. Quantidade
a) Todo o contedo
b) Cerca de 2 g de
da vescula
epitlio (1 a 2 cm2)
1. Material
Lquido e tecido
epitelial vesicular
a) Nenhum
b) Lquido de Valle com pH 7,4 a 7,8; ou
2. Como colher
a) Lquido Vesicular.
Caso as vesculas estejam

ntegras (no rompidas),
colher o lquido vesicular,
com o auxlio de seringa
e agulha estril
Colhendo lquido ves

icular de um
bovino afetado po
r febre aftosa
Colher, com tesoura ou bisturi

e pina estril, fragmentos de
epitlio vesicular, incluindo
as bordas das leses das
regies oral, nasal, podal e
de glndula mamria
a) Tubo de ensaio
b) Tubo de ensaio estril

contendo meio apropriado em
quantidade suficiente para que
as amostras fiquem submersas
Refrigerada (+2C a +8C)

Extensa leso de boca em um
bovino afetado por febre aftosa
As patas e beres, antes da colheita, devem ser

lavados com gua limpa para remoo de sujeiras
(no utilizar nenhum tipo de sabo ou antissptico)
52
5. Recipiente
NOTA
pao
Leses no es
o
de um bovin
interdigital
Meio Eagle 2 vezes concentrado, com

antibitico e pH 7,2-7,6
a
estril com tampa
com rosca (5 mL)
b) Tecido Epitelial Vesicular.
4. Meio
Leses no te
to de vaca, pr
ovocadas
pelo vrus da
varola bovin
a

IMPORTANTE
No caso de suspeita de doe

na
vesicular, o servio oficial dev
er
ser imediatamente informa
do.
As amostras s devem ser colh
idas
por profissionais do servio
oficial
e enviadas sob condies de
segurana para laboratrios
autorizados, para prevenir a
disseminao da doena.
At 48 horas
8. Exames
Pesquisa direta
do agente
53
1. Material
trizes
as dire e
NOTA
m
o
c
o
sa d
ord
De ac gramas de material
e
o
r
dos p a colheita d ver
l,
de
a
o
e
anim
ng
ico-far omente pelo
g
f
o
s
s
e
a
Oficial.
alizad
ser re Veterinrio
o
Servi
Lquido esofgico farngeo (LEF)
2. Onde colher
Mucosa da regio farngea

e anterior do esfago
Introduo do coletor na
boca do
animal
3. Como colher
54
Volume de muco
(ideal: 15 mL, mnimo:
5 mL) diludo em igual
volume de meio
5. Meio
Earle 2 vezes
concentrado, com
antibitico e pH 7,4-7,6
6. Recipiente
Frasco de boca
larga, com tampa de
rosca, esterilizado

FOTO: LUS DAS
Antes da colheita, os
animais devero permanecer
em jejum, se possvel, por um
perodo de 12 horas;
Uma hora antes da colheita, Realizao dos movimentos
administrar gua para eliminar para a colheita do LEF
eventuais restos alimentares;
Colher as amostras de LEF por meio de
coletores (copo Probang) previamente
esterilizados, utilizando um para cada
animal. Se no houver um nmero
suficiente de coletores, realizar a lavagem
em gua limpa e desinfetar em gua
fervente antes de colher amostra em
outro animal e assim sucessivamente.
Transf
Introduzir o coletor por sobre a lngua do animal conteerir o
do do
pressionando-o levemente na glote at o copo ser copo coletor
engolido pelo animal (certificar que o coletor no para frasco de
esteja na traquia, situao em que o animal ir boca larga
tossir, tentando expelir o objeto);
Realizar o raspado da mucosa esofgica-farngea, fazendo
movimentos suaves com o coletor (at 5 vezes) e retir-lo com
cuidado para no derramar o contedo;
Transferir o material LEF para frasco de boca larga e adicionar
uma quantidade igual de Meio Earle 2X;
Fechar o frasco, agitar e realizar a desinfecao externa.
4. Quantidade
Refrigerada (+2C a +8C); ou Congelada (-20C)

NOTA
Amostras para ensaios

com fins legais devem ser
lacradas ou seladas de
modo que o acesso a elas
seja possvel somente pelo
rompimento do lacre ou selo
.
At 48 horas
9. Exames
Pesquisa direta do agente
(Febre Aftosa)
55
1. Material
Exsudato (secrees)
rio
Solicitar ao laborat
o.
iad
pr
ro
ap
io
o me
3. Como colher
b) Pesquisa de bactrias
a) Pesquisa de vrus
5. Meio
2. Onde colher
Mucosas oral, nasal ou
outro tecido afetado por
um processo inflamatrio
4. Exames
NOTA
Meios conservantes
para transporte da
amostra (Tioglicolato
de sdio, BHI e Eagle)
a) Eagle 2 vezes
concentrado, com
antibitico e 10% Soro
Fetal Bovino (pH 7,4-7,6)
b) Tioglicolato
de sdio
6. Recipiente
Colher com suabe estril,

friccionando energicamente o local
Tubo de ensaio esterilizado
Acondicionando
suabe em
meio Tioglicolato
de sdio
7. Temperatura da amostra
para transporte

NOTA
Utilizar um suabe para

cada amostra.
56

At 48 horas
57
1. Material
5. Quantidade
a e b) Fragmentos com, no mnimo,

0,5 cm de dimetro por 0,3 cm de espessura
Bipsia de pele e mucosa
2. Onde colher
De preferncia na rea de
transio com e sem leso
a) 3 mL de Eagle
ou soluo salina
fisiolgica - (NaCl
0,9%) estril
3. Como colher
6. Meio
b) Formol tamponado 10%
(Volume de formol, pelo menos,
10 vezes maior que o volume de
tecido a ser fixado)
Com punch, tesoura,

pina e bisturi
a) Tubo de ensaio esterilizado,
capacidade de acordo com o

tamanho do fragmento
Realizar tricotomia e antissepsia;

a. Inserir o punch, gir-lo e retirar
fragmento;
b. Com auxlio de pina e tesoura,
cortar o fragmento para a bipsia;
c. Fragmento extrado;
d. Submergir um fragmento
em meio Eagle (ou em soluo
salina); e
e. outro fragmento em formol 10%.
4. Exames
a) Pesquisa direta do agente

58
7. Recipiente
b) Frasco, capacidade
de acordo com o

a) Refrigerada
(+2C a +8C)
b) Ambiente ou Refrigerada
(+2C a +8C). Nunca congelar
d
e
b) Histopatolgico
a) At 48 horas
b) Remeter no mesmo tempo que as

amostras refrigeradas. Os fragmentos
em soluo de formol 10%, mesmo
no completamente fixados, podem
ser enviados ao laboratrio.
59
1. Material
5. Meio
Raspado de pele
Nenhum
6. Recipiente
Coletor universal
2. Onde colher
Na periferia das
reas lesionadas
Nonononon
nonon non
3. Como colher
Fazer o raspado
profundo com
lmina de bisturi
7. Temperatura da
amostra para transporte
Refrigerada
(+2C a +8C)
8. Tempo crtico
4. Quantidade
para chegada
ao laboratrio
At 48 horas
Cerca de 1 g
9. Exames
60
61
1. Material
Sangue
2. Onde colher
a) Veia jugular;
b) Veia coccgea;
c) Veia mamria; e
d) em sunos, veia
cava cranial
3. Como colher
ou seringa e agulha
a) Obteno de soro
b) Sangue total

ou tipo Eppendorf).
gel separador,
ser necessrio
centrifugar o
sangue no
mnimo
30 minutos
aps a
colheita e
no mximo
2 horas e enviar
O sangue dever ser

colhido e enviado
em tubo com
k2). Homogeneizar
suavemente,
invertendo o tubo
(cerca de 6 vezes)
a) Tubo de ensaio
sem anticoagulante:
capacidade 10 mL.
b) Tubo de ensaio
com EDTA K2:
capacidade 5 mL
5. Exames
b) Pesquisa direta
do agente


At 48 horas
62
63
Sistema respiratrio
As doenas respiratrias so multifatoriais e provocam
mortalidade, especialmente em animais jovens.
Alteraes climticas, manejo zootcnico e instalaes
inadequadas estressam e debilitam o animal,
predispondo-o a infeces. O diagnstico deve
basear-se no conjunto de informaes, tanto clnicas
quanto epidemiolgicas e na confirmao laboratorial.
O material clnico de eleio para o diagnstico
diferencial deve incluir tecido pulmonar e linfonodos
regionais e secrees respiratrias e oculares. O soro
sanguneo pode auxiliar no diagnstico.
64
Principais doenas do sistema

respiratrio e espcies acometidas
ESPCIES ACOMETIDAS
DOENAS
Tuberculose
(Mycobacterium
bovis) e outras
micobacterioses
Linfadenite caseosa
Pleuropneumonia
contagiosa
(Micoplasmose,
Actinobacilose)
Pneumonia
causada por
agentes piognicos
Doena de Aujeszky
Rinite atrfica
(Bordetella
bronchiseptica
e Pasteurella
multocida)
Influenza
Vrus Sincicial
Respiratrio
Mormo
Rinopneumonite
equina
Arterite viral equina
Maedi-Visna
65

doenas do sistema respiratrio
Tbua para
corte de rgos
Coletor universal estril
Tesoura
para
destrinchar
ossos
Pedra para
afiar facas
Tubos a vcuo para
colheita de sangue,
com gel separador, sem
Meios para transporte de

amostras (BHI, A3XB, Eagle)
Microtubos tipo
Eppendorf
Facas
Tesouras cirrgicas
Tubos
com tampa
com rosca
Suabe estril (Comercial)

de sangue a vcuo

de sangue a vcuo
66
Tubo tipo
KMA
(tampa
com rosca)
Pina dente
de rato
Cabo de bisturi
Lmina de bisturi
Cary Blair
67
Amostras para diagnstico de

doenas do sistema respiratrio
5. Quantidade
a) Fragmentos de 20 g e, pelo b) Fragmentos de 3x1x1 cm

menos, um linfonodo regional
de cada rgo
1. Material
Pulmo e
linfonodos
6. Meio
a) Nenhum
b) Formol tamponado 10% (volume

de formol, pelo menos 10 vezes maior
que o volume de tecido a ser fixado)
2. Onde colher
rgo acometido e
linfonodos regionais
3. Como colher
Leses caseosas em pulmo de

animal acometido por tuberculose
Com tesoura e
pina estril, colher
fragmentos das
reas com leses
(caseosa, purulenta,
marmorizada, outras)
7. Recipiente
a) Coletor
universal estril
b) Frasco, capacidade de acordo

com o tamanho do fragmento

a) Refrigerada
(+2C a +8C)
b) Ambiente ou
NOTA
Fragmento de leso o
material de eleio para
diagnstico de tuberculose.
4. Exames
a) Pesquisa direta do agente
68

a) At
48 horas
b) Histopatolgico
b) Remeter no mesmo tempo que a amostra
refrigerada. Os fragmentos em soluo de

formol 10%, mesmo no completamente
fixados, podem ser enviados ao laboratrio
69
5. Meio
1. Material
a) Submergir o suabe
Secrees
b) Submergir o suabe
em 2 mL de: A3XB para
Mycoplasma spp; e
Tioglicolato de sdio, BHI
ou Cary Blair para outras
bactrias
em 2 mL de Eagle
2 vezes concentrado,
com antibitico
2. Onde colher
Narinas
a
Meio Eagle
3. Como colher
b Meio BHI
Limpar o local com gaze estril

umedecida em soluo fisiolgica,
retirando crosta, se houver. Colher
com suabe estril, friccionando
energicamente o local, utilizando
um suabe para cada narina.
Submergir o suabe no meio para
transporte indicado.
6. Recipiente
Tubo de ensaio
estril com meio
apropriado
para transporte
NOTA
4. Exames
a) Pesquisa de vrus
70
b) Pesquisa de bactrias
Soro sanguneo pode auxiliar

no
diagnstico de algumas doe
nas
respiratrias; por esse motivo,
enviar
o soro junto com o material par
a
pesquisa direta do agente.
Refrigerada
(+2C a +8C)
8. Tempo crtico
para chegada
ao laboratrio
At 48 horas
71
1. Material
Sangue
2. Onde colher
a) Veia jugular;
b) Veia coccgea;
c) Veia mamria; e
d) em sunos, veia
cava cranial
3. Como colher
ou seringa e agulha
a) Obteno de soro
b) Sangue total

ou tipo Eppendorf).
gel separador,
ser necessrio
centrifugar o
sangue no
mnimo
30 minutos
aps a
colheita e
no mximo
2 horas e enviar
O sangue dever ser

colhido e enviado
em tubo com
k2). Homogeneizar
suavemente,
invertendo o tubo
(cerca de 6 vezes)
a) Tubo de ensaio
sem anticoagulante:
capacidade 10 mL.
b) Tubo de ensaio
com EDTA K2:
capacidade 5 mL
5. Exames
b) Pesquisa direta
do agente


At 48 horas
72
73
Sistema gastrintestinal
Dada a importncia da alimentao nos animais de
produo e a alta incidncia de problemas com ela
relacionados, faz-se necessria uma avaliao do
manejo e das instalaes, assim como uma inspeo
dos alimentos, armazns e reas de pastoreio. As
caractersticas da alimentao e seu manejo podem
ser a origem de muitos problemas, principalmente
digestivos e metablicos. Para pesquisar a causa
do distrbio, alm do exame clnico geral, testes
complementares de amostras de alimento, do suco
ruminal, do sangue e/ou das fezes so de grande
valor no reconhecimento e na diferenciao de
doenas dos rgos digestivos.
74

gastrintestinal e espcies acometidas
ESPCIES ACOMETIDAS
DOENAS
TGE Gastrenterite
Transmissvel
Enterites bacterianas
(Colibacilose,
salmonelose,
campilobacteriose)
Disenteria suna
(Brachyspira
hyodysenteriae)
Enterotoxemia
(Clostridium
perfringens)
Isosporose
(Isospora suis)
Verminoses
ou Helmintoses
Rotavirose em
animais jovens
Diarria Viral Bovina
Febre Catarral
Maligna
Intoxicaes
75

doenas do sistema gastrintestinal
Saco plstico
estril
Tubos a vcuo
para colheita de
sangue, com gel
separador, sem e
com anticoagulante
(EDTA e heparina)
Luvas de
palpao
Coletor
universal
estril
Tubo tipo
KMA (tampa
com rosca)
Tubo com
tampa
com rosca
Adaptadores
para colheita
de sangue a
vcuo
Luvas
de ltex
Sonda
gstrica
Agulha para colheita de sangue a vcuo
Microtubos tipo
Eppendorf

de sangue a vcuo
Seringa e agulhas esterilizadas

76
77
3. Quantidade

doenas do sistema gastrintestinal
Cerca de 10 mL
1. Material
4. Meio
Contedo ruminal
Nenhum
2. Como colher
Por sonda gstrica ou ruminocentese
Introduzir a sonda gstrica via oral e retirar o lquido ruminal,
criando vcuo por um sistema manual ou bomba eltrica.
No caso de ruminocentese, a puno feita no abdmen
esquerdo do animal, no ponto mdio entre a ltima costela e
articulao femorotibiopatelar.
Fazer tricotomia e antissepsia numa rea de 5cm x 5cm.
Fazer aplicao subcutnea de 2 a 3 mL de lidocana 2%.
Introduzir a cnula ventrocranial e aspirar o contedo
com seringa de 20 mL. Se ocorrer obstruo da agulha,
injetar ar com outra seringa. Obter de 3 a 10 mL de lquido
ruminal. Antes de retirar a agulha, introduzir 5 mL de soluo
fisiolgica estril, para evitar aderncia. Finalmente, retirar
seringa e agulha, de forma suave e conjunta.
5. Recipiente
Frasco estril
6. Temperatura
da amostra
para transporte

ou Congelada (-20C)
NOTA
Resfriar ou congelar o
mais
rpido possvel aps a
colheita
fazendo chegar ao lab
oratrio,
nessas condies.
7. Tempo crtico
para chegada
ao laboratrio
At 48 horas
8. Exames
Toxicolgicos
78
79
1. Material
Fezes
3. Quantidade
20 g de fezes por animal. No caso de
rebanhos, colher 10 a 15 amostras de cada
faixa etria. Utilizar um frasco por animal.
2. Como colher
Diretamente do
reto (utilizando
luva) ou da poro
central do bolo fecal
(utilizando esptula),
imediatamente
aps defecao
4. Meio
Nenhum
5. Recipiente
Coletor universal estril
NOTA
Em caso de material de necrps

ia,
enviar um fragmento de ala
intestinal
com o contedo fecal, amarran
do as
extremidades com barbante.
Alm disso, enviar fragmentos
de
fgado e rim, uma parte refrigera
da
para exames toxicolgicos e
outra
parte em formol a 10% para exa
mes
histopatolgicos.
A identificao de substncia
txica
nestes rgos pode auxiliar no
diagnstico da causa morte.
80


At 48 horas
8. Exames
81
1. Material
Alimentos para nutrio animal
2. O que colher
Rao comercial, gros, forragens frescas e conservadas
(silagem e feno), restos de cultura, palhadas e suplementos
3. Como colher
Retirar amostras parciais de cada alimento a ser
analisado, colhidas em diferentes pontos do local de
interesse: campo, armazm, sacarias, cocho, silos etc.
Dessa amostra mdia, aps homogeneizao, retirar
uma nica amostra, que deve ser representativa da
mdia do material a ser analisado.
NOTA
um nico
Nunca retirar a amostra de
entativa
res
rep
ser
no
s
poi
ponto,
quanto
es
clus
e no permitir con
o.
dut
pro
do
qualidade
4. Quantidade
a) 1 kg para
b) 2 kg para alimentos volumosos,

raes, gros e
como silagem, feno e para alimentos
concentrados,
que tem tendncia separao como
entre outros
raes e concentrados contendo uria,
alimentos.
farelo de algodo, entre outros produtos.
NOTA
Efetuar as colheitas em
ente
vrios pontos, principalm
para produtos que
no apresentam uma
a ou que
homogeneidade perfeit
arao.
sep
cia
tenham tendn
5. Recipiente
Sacos plsticos
resistentes para
produtos slidos
Frascos de polietileno
para produtos lquidos
(melao, gordura)

a) Ambiente (material seco)
b) Refrigerada
(+2C a +8C) para
material verde ou mido

At 48 horas
8. Exames
Anlise qumica e pesquisa de agente
(toxinas e bactrias, entre outros agentes)
82
83
1. Material
a) Obteno de soro
ou tipo Eppendorf).
gel separador,
ser necessrio
centrifugar o
sangue no
mnimo
30 minutos
aps a
colheita e
no mximo
2 horas e enviar
Sangue
2. Onde colher
a) Veia jugular;
b) Veia coccgea;
c) Veia mamria; e
d) em sunos, veia
cava cranial
3. Como colher
ou seringa e agulha
a) Pesquisa
a) Tubo de
ensaio sem
anticoagulante:
capacidade 10 mL
b e c) Sangue total
b) Tubo de
ensaio com
EDTA K2:
capacidade
5 mL
de anticorpos
c) Tubo de
ensaio com
heparina:
capacidade
de 5 a 10 mL
b) Pesquisa direta
do agente
O sangue dever
ser colhido e
enviado em tubo
com anticoagulante
(EDTA ou heparina).
Homogeneizar
suavemente,
invertendo o tubo
(cerca de 6 vezes)
EDTA
Heparina
5. Exames
c) Toxicolgicos
e bioqumicos

a, b e c) Refrigerada (+2C a +8C)

At 48 horas
84
85
Sistema reprodutor e urinrio

Os problemas reprodutivos esto associados
a repetio de cio, infertilidade, descarte prematuro
de reprodutores, abortamento, mumificao fetal,
nascimento de bezerros com malformao
e fracos, entre outros fatores. A etiologia das
doenas da reproduo multifatorial, podendo
a causa ser infecciosa ou no infecciosa, e requer
diagnstico diferencial para identificao do agente.
Para tanto, devem ser examinadas prioritariamente
amostras de tecidos fetais refrigerados e fixadas
em formol, secrees cervicovaginal e prepucial.
A pesquisa de anticorpos no soro sanguneo pode
auxiliar no diagnstico.
86
Principais doenas do sistema reprodutor

e urinrio e espcies acometidas
ESPCIES ACOMETIDAS
DOENAS
Brucelose
Leptospirose
Campilobacteriose
Genital
Micoplasmose
Neosporose
(raro)
Tricomonase
Genital Bovina
Rinotraquete
infecciosa bovina/
Vulvo vaginite
postular infecciosa
Toxoplasmose
Parvovirose
Doena de Aujeszky
Peste suna clssica
Sndrome Reprodutiva e Respiratria

dos Sunos (SRRS)
Circovirose
Clamidiose
Arterite viral equina
Aborto equino
por herpesvirus
X
87
Material para colheita de amostras

para diagnstico de doenas do
sistema reprodutor e urinrio
Coletor
universal estril
Saco plstico
Tbua para
corte de rgos
Suabe estril
Suabe estril
Suabe acoplado
em pipeta de
inseminao artificial
Pipeta de
inseminao artificial
Tesoura
para
destrinchar
ossos
Pedra para
afiar facas
Facas
Tubo com
tampa
com rosca

de sangue a vcuo
Microtubos tipo
Eppendorf

de sangue a vcuo
Papel
toalha
Meios para transporte
de secrees (BHI,
A3XB, Eagle e Lactopep)
88
Tubos a vcuo para colheita de

sangue, com gel separador,
sem e com anticoagulante
Tubo tipo
KMA (tampa
com rosca)
Gaze
Palhetas
de smen
89
3. Recipiente

doenas do sistema reprodutor
e urinrio
Saco plstico
(no mnimo,
3 sacos para
cada feto)
1. Material
Fetos de at 2Kg
2. O que colher
4. Temperatura
da amostra para
transporte
Feto bovino
Feto inteiro
5. Tempo crtico
Feto ovino
Feto caprino
para chegada
ao laboratrio
At 48 horas
NOTA
No congelar.
O laboratrio ir necropsiar e colher

as amostras para os diversos exames.
Colher soro sanguneo da fmea
que abortou.
Fetos sunos
90
6. Exames
Pesquisa direta
e indireta do
agente e exame
histopatolgico
91
5. Quantidade
1. Material
a1) Fragmentos de cada rgo b) Fragmento de cada
Feto e natimorto
com mais de 2 Kg
com cerca de 20 g
a2) 3 mL de cada fluido
6. Meio
2. O que colher
7. Recipiente
Colhendo contedo gstrico
3. Como colher
Necropsiar e colher os fragmentos de rgos com pina
e tesoura esterilizadas. Escolher parte do rgo com
leso, se no houver leso, colher aleatoriamente. Colher
os fluidos corporais com seringa e agulha esterilizadas
a1) Pesquisa direta do agente

a2) Anticorpos
Fluido
tracoabdominal
92
b) rgos fixados com formol

tamponado 10% (volume de formol,
pelo menos 10 vezes maior que o
volume de tecido a ser fixado).
a) Nenhum
Fgado, pulmo, bao,

sistema nervoso central,
corao, rim, timo e
fluidos corporais
(lquido toracoabdominal
ou pericrdico e
contedo gstrico)
4. Exames
rgo com cerca de

3x3x1 cm
b) Histopatolgico
a1) rgos: saco plstico

ou coletor universal.
a2) Fluido: tubo de ensaio
esterilizado ou coletor universal
b) Frasco; capacidade
de acordo com o
a) Refrigerada
(+2C a +8C)
b) Ambiente ou
Refrigerada (+2C a +8C).
Nunca congelar
a) At
48 horas

93
1. Material
4. Quantidade
a) 20 g
Placenta
b) Fragmento de 3x3x1 cm
2. Como colher
Escolher sempre reas de transio do tecido com e sem
leso. Nos ruminantes, colher algumas carnculas
5. Meio
a) Nenhum
b) Formol tamponado 10% (Volume

de formol, pelo menos 10 vezes maior
que o volume de tecido a ser fixado)
a) Saco plstico
ou coletor universal
b) Frasco; capacidade
de acordo com o
tamanho da pea
3. Exames
a) Pesquisa direta do agente b) Exame histopatolgico
a) Refrigerada
(+2C a +8C)
b) Ambiente ou
Refrigerada (+2C a +8C).
Nunca congelar
a) At
48 horas
94
6. Recipiente

95
1. Material
3. Quantidade
Smen in natura: 0,5 mL
Smen industrializado:
10 palhetas de 0,5 mL
Smen
2. Como colher
4. Recipiente
Excitar o touro
com fmea ou
manequim, ou usar
eletroejaculador.
Colher o smen,
utilizando vagina
artificial
OA
para transporte
FOTO: CRVLAG
FOTO: CRVLAGOA
Palheta ou
tubo de ensaio
esterilizado
NOTA
O volume de sm
en a ser
enviado ao labor
atrio depende
das anlises que
sero realizadas;
na dvida, consult
ar o laboratrio.
Identificar individu
almente
as amostras.
6. Tempo crtico
para chegada
ao laboratrio
At 48 horas
7. Exames
96
97
NOTA
1. Material
Muco prepucial
2. Onde colher
Cavidade prepucial
nter o touro
Antes da colheita, ma
nimo 07 dias.
m
no
l
em repouso sexua
do muco com
Evitar contaminao
urina.
her primeiro
Quando for o caso, col
is proceder
po
o suabe prepucial e de
ao lavado.
Solicitar ao laboratrio
s.
os meios apropriado
3. Como colher
a) Pesquisa
de vrus
98
a) Submergir
c) Submergir o
b) Submergir o
o suabe
suabe em 2 mL suabe em 10 mL
em 2 mL de
de Lactopep
de: Tioglicolato
Eagle 2 vezes
de sdio ou BHI (0,5 g de Lactopep
concentrado,
para 10 mL
(Campylobacter spp),
com antibitico
A3xB Mycoplasma de soluo salina
0,85%)
spp) e Cary Blair
(outras bactrias)
c
Tcnica do suabe:
Fazer a tricotomia do stio
prepucial e lavar externamente
o prepcio, utilizando apenas
gua, e enxugar com
papel toalha. Colher muco,
introduzindo no fundo de saco
da cavidade prepucial um suabe
estril acoplado a uma pipeta de
inseminao artificial. Friccionar
o suabe nas mucosas prepucial
e peniana. Retirar o suabe
e submergi-lo no meio para
transporte apropriado. Utilizar
um suabe para cada amostra.
4. Exames
5. Meio
b) Pesquisa de
bactrias
6. Recipiente
Tubo de ensaio

c) Pesquisa de
Tritrichomonas foetus
c) Ambiente

a e b) At 48 horas
c) At 6 dias
99
1. Material
Muco prepucial
2. Onde colher
Cavidade prepucial
3. Como colher
Tcnica do lavado prepucial:
Fazer a tricotomia do stio
prepucial e lavar externamente
o prepcio utilizando apenas
gua. Enxugar com papel toalha.
Proceder lavagem da cavidade
prepucial, utilizando uma pipeta de
inseminao artificial acoplada a um
tubo flexvel ligado a uma seringa
com 40 mL de soluo salina estril
0,85%. Introduzir a pipeta at o
fundo de saco da cavidade prepucial
e injetar o volume total da soluo
salina. Retirar a pipeta e obliterar
o stio prepucial com uma das
mos e, com a outra, massagear
vigorosamente o prepcio por um
minuto. Liberar o stio prepucial
e recolher o lquido no frasco
contendo meio Lactopep (em p).
Homogeneizar e completar o volume
com soluo salina, at obter 40 mL.
100
ro
r o tou
mante
,
s.
a
ia
it
d
e
0
da colh al de 07 a 1
s
te
n
A
exu
o
ouso s
o muc
em rep
ao d
in
m
ta
on
Evitar c
a.
in
r
u
s, no
com
olheita
ias 3 c e 7 dias,
r
s
s
e
c
d
So ne m intervalo sexual.
uso
o, co
o
im
p
e
n
r
m
o
ndo-se
mante
NOTA
4. Quantidade
40 mL de soluo
salina 0,85%
5. Meio
Lactopep (proporo:
2 g/40 mL de soluo salina)
6. Recipiente
Tubo cnico
7. Temperatura
da amostra para
transporte
Ambiente

At 06 dias
9. Exame
Pesquisa de Tritrichomonas foetus
101
NOTA
1. Material
O perodo ideal pa
ra colheita
de muco vaginal
nos dias
subsequentes ao
estro (evitar colhe
ita
logo aps a cpu
la).
Muco cervicovaginal
2. Onde colher
O uso de espcu
lo fundamenta
l
para obteno de
amostra de muc
o
cervicovaginal de
boa qualidade.
Cavidade vaginal
3. Como colher
Lavar a regio vulvar apenas com gua e secar com papel
toalha. Adaptar o suabe a uma pipeta de inseminao
artificial e com auxlio de um espculo, introduzir o suabe
na vulva at a crvix. Friccionar a mucosa, retirar o suabe e
submergir em tubo de ensaio contendo meio de transporte.
Utilizar um suabe para cada amostra.
4. Exames
a) Pesquisa
de vrus
b) Pesquisa de
bactrias
b) Submergir o
c) Submergir o
o suabe
suabe em 10 mL
suabe em 2 mL de:
de Lactopep
Tioglicolato de
em 2 mL de
Eagle 2 vezes
sdio ou BHI (0,5 g de Lactopep
para 10 mL
concentrado, (Campylobacter spp),
com antibitico A3xB (Mycoplasma de soluo salina
0,85%)
spp) e Cary Blair
(outras bactrias)
102
Tubo de ensaio
esterilizado contendo
meio apropriado
c) Pesquisa de
Tritrichomonas foetus
5. Meio
a) Submergir
6. Recipiente

a e b) Refrigerada
(+2C a +8C)
c) Ambiente

a e b) At 48 horas
c) At 6 dias
103
1. Material
Urina
2. Onde colher
A amostra de urina pode ser obtida da mico
espontnea, de mico induzida, por puno vesical
ou mediante cateterismo uretral em fmeas.
3. Como colher
Antes da colheita, higienizar a regio da vulva ou
prepcio com gua e sabo, enxaguar e secar com
papel toalha.
Colher o jato intermedirio da urina com coletor
universal estril.
H vrios procedimentos para induzir a mico:
- A obstruo dos olhos e boca em pequenos
ruminantes, durante uns segundos, tanto em fmeas
como em machos, estimula a eliminao de urina.
- Induo da mico em touros por massagem suave
e rtmica no stio prepucial e, em vacas, massagem
na vulva. Alertamos que esses mtodos s funcionam
quando a bexiga est cheia.
- Uso de furosemida (diurtico) por via intravenosa
favorece a mico dentro de 10 a 15 minutos, porem no
deve ser utilizado em animais suspeitos de urolitase
4. Exames
a) Pesquisa para b) Pesquisa para

c) Tcnicas de
Leptospira spp.
Brucella spp. biologia molecular
104
5. Meio e quantidade
a) Meio de Fletcher.
Colocar 1 mL de urina
em 9 mL de soluo
salina tamponada,
pH 7,2 e inocular 2 mL
dessa diluio em
tubo contendo meio
de Fletcher.
a e b) Tubo de ensaio
contendo meio apropriado
b) BHI.
Colocar 1 mL
da urina em
3 mL em tubo
contendo meio
de transporte
(BHI).
c) Nenhum.
Enviar o
restante de
urina, cerca
de 20 mL.
6. Recipiente
c) Coletor universal estril
NOTA
Os meios
especficos so
fornecidos pelo
laboratrio.


At 48 horas
105
1. Material
Sangue
2. Onde colher
a) Veia jugular;
b) Veia coccgea;
c) Veia mamria; e
d) em sunos, veia
cava cranial
3. Como colher
ou seringa e agulha
a) Obteno de soro
b) Sangue total

ou tipo Eppendorf).
gel separador,
ser necessrio
centrifugar o
sangue no
mnimo
30 minutos
aps a
colheita e
no mximo
2 horas e enviar
O sangue dever ser

colhido e enviado
em tubo com
k2). Homogeneizar
suavemente,
invertendo o tubo
(cerca de 6 vezes)
a) Tubo de ensaio
sem anticoagulante:
capacidade 10 mL.
b) Tubo de ensaio
com EDTA K2:
capacidade 5 mL
5. Exames
b) Pesquisa direta
do agente


At 48 horas
106
107
Sistemas circulatrio e linftico

Doenas do sistema circulatrio e linftico produzem
sinais clnicos diversos, tais como edema subcutneo,
colorao anormal de mucosas (palidez, cianose,
congesto e ictercia), hemorragias (petquias e
sufuses) na pele e nos rgos internos, edema de
rgos, principalmente do pulmo e do crebro. Esses
sinais so decorrentes da ao de alguns patgenos
que lesionam o endotlio e podem causar dificuldade
respiratria, cansao, anorexia, apatia e prostrao no
animal. O diagnstico diferencial utiliza fragmentos de
rgos refrigerados e fixados em formol, sangue com
anticoagulante e soro sanguneo.
108
Principais doenas dos sistemas

circulatrio e linftico e espcies acometidas
ESPCIES ACOMETIDAS
DOENAS
Peste Suna Clssica
Peste Suna Africana
Circovirose
Carbnculo
Hemtico (Antrax)
Hemoglobinria
bacilar
Leptospirose
Erisipela
Doena do Edema
Babesiose
(protozorios
sanguneos)
Anaplasmose
Prpura
hemorrgica
Anemia
infecciosa equina
109

para diagnstico de doenas dos
sistemas circulatrio e linftico
Potes de plstico, de boca

larga e tampa de rosca, com
capacidade para
diferentes volumes
Tubos a vcuo para colheita de

sangue, com gel separador, sem
Agulhas para
colheita de
sangue a vcuo
Seringa e
agulha estreis
Tubo
com
tampa
com
rosca
Porta-lminas
redondo

de sangue a vcuo
Saco plstico
Serrote de arco
Tubo tipo
KMA (tampa
com rosca)
Tbua
para corte
de rgos
Frasco de formol
35-40% (para
utilizao, diluir
uma parte de
formol em 9
partes de gua)
Microtubos tipo
Eppendorf
Cizalha
Porta-lminas
Tesoura
para
destrinchar
ossos
Pedra para
afiar facas
Facas
110
Talhadeira
Gancho
Marreta
Faca
Machado
111
3. Exames

doenas dos sistemas circulatrio
e linftico
a Pesquisa direta do agente
Rim
Pulmo
Corao
1. Material
rgos - sistema nervoso central, fgado, bao,
pulmo, rim, corao, linfonodos e intestino delgado
e grosso
Fgado
Bao
2. Como colher
Linfonodo
Necropsiar o animal e colher os fragmentos com tesoura

ou bisturi e pina esterilizados, evitando danos ao tecido
durante a retirada. Escolher parte do rgo com leso;
se no houver leso, colher aleatoriamente. Selecionar
a poro do intestino delgado com contedo, ligar e
seccionar. Colher linfonodos regionais.
Fragmentos de
rgos que sero
remetidos ao
laboratrio, sob
refrigerao
Ala
intestinal
ligada
um dos
hemisfrios
cerebrais
cerebelo
Medula
cervical
112
Fatia do
tlamo
113
b Exame histopatolgico
Pulmo
Rim
Bao
Intestino
delgado
5. Meio
a) Nenhum
b) Formol tamponado 10% (volume de

formol, pelo menos 10 vezes maior que o
volume de tecido a ser fixado)
Fgado
Corao
Linfonodos
leo terminal
Fragmentos de rgos
que sero remetidos
ao laboratrio, fixados
em formol
6. Recipiente
b) Frasco; capacidade de acordo
a) Saco plstico
com o tamanho do fragmento
ATENO
Outro hemisfrio cerebral
go
Embalar cada r
para
te
en
individualm
tes
en
ag
de
a
uis
pesq
a Fragmentos de SNC e
Tronco
enceflico
outros rgos, embalados

em sacos plsticos
esterilizados (refrigerados)
Metade do cerebelo
(+2C a +8C)
a1) Fragmentos de 20 g
de cada rgo
a2) 10 a 30 cm de
intestino delgado
(ala ligada)
114
b1) Fragmentos de 3x1x1cm

de cada rgo
b2) 10 cm de rgo tubular
(leo com placas de Peyer)
fixados
em formol
a) Refrigerada
4. Quantidade
b Tecidos
(+2C a +8C)

a) At
48 horas

115
1. Material
Preparao de um esfregao de
sangue a campo, imediatamente
aps a colheita da amostra.
Sangue capilar e venoso
2. Onde colher
1. Manter a lmina horizontalmente entre o polegar

e o indicador.
2. Colocar uma pequena gota de sangue sem
anticoagulante na extremidade da lmina. (figura a)
3. Colocar uma segunda lmina (extensora) contra
a superfcie da lmina, em frente gota de sangue,
formando um ngulo de 45.
4. Movimentar a lmina para trs, de modo que entre em
contato com a gota de sangue, pressionando-a at que a
gota se espalhe por toda a borda da lmina. (figura b)
5. Impelir a lmina, mantendo sempre o mesmo ngulo,
num s movimento firme e uniforme, sem separar uma
lmina da outra. Forma-se ento uma delgada camada
de sangue. (figura c)
6. Secar rapidamente ao ar e identificar com lpis.
7. Fixar por dois minutos em lcool metlico, retirar e secar.
8. Enviar ao laboratrio em porta-lminas.
NOTA
A sensibilidade da tcnica pode ser aumentada com

a confeco de esfregaos sanguneos a partir da
puno de capilares na ponta da orelha.
116
Trs lminas por animal
5. Meio
Preferencialmente sangue
perifrico a partir da
puno de capilares na
ponta da orelha
3. Como fazer o esfregao de sangue
4. Quantidade
Nenhum
6. Recipiente
Transportar em caixas ou
frascos com paredes rgidas e
com ranhuras prprias para a
fixao das lminas
7. Temperatura
da amostra para
transporte
Ambiente

At 48 horas
9. Exames
Pesquisa de hemoparasitas
117
1. Material
Sangue
2. Onde colher
a) Veia jugular;
b) Veia coccgea;
c) Veia mamria; e
d) em sunos, veia
cava cranial
3. Como colher
ou seringa e agulha
a) Obteno de soro
b) Sangue total

ou tipo Eppendorf).
gel separador,
ser necessrio
centrifugar o
sangue no
mnimo
30 minutos
aps a
colheita e
no mximo
2 horas e enviar
O sangue dever ser

colhido e enviado
em tubo com
k2). Homogeneizar
suavemente,
invertendo o tubo
(cerca de 6 vezes)
a) Tubo de ensaio
sem anticoagulante:
capacidade 10 mL.
b) Tubo de ensaio
com EDTA K2:
capacidade 5 mL
5. Exames
b) Pesquisa direta
do agente


At 48 horas
118
119
Sistema osteoarticular
A avaliao de problemas osteoarticulares deve
considerar a possibilidade de alteraes do
encfalo e do aparelho locomotor, tendo em
vista que os sinais clnicos podem ter sua origem
em anomalias de um ou de outro sistema. No
diagnstico diferencial, deve-se considerar artrose
e artrite sptica, malformaes das extremidades,
traumatismos no parto ou causados por acidentes.
O material clnico de eleio para pesquisa de
agentes infecciosos o lquido sinovial. O soro
sanguneo pode auxiliar no diagnstico.
120

osteoarticular e espcies acometidas
ESPCIES ACOMETIDAS
DOENAS
CAE (artriteencefalite caprina)
Maedi-Visna
Brucelose
Chlamidofilose
(Chlamydophila
psittaci e pecorum)
Tuberculose
Micoplasmose
Erisipela suna
Artrites causadas
por bactrias
piognicas e
enterobactrias
121

sistema osteoarticular
Algodo
Produto para
antissepsia
Seringa e agulhas
Material para
tricotomia

de sangue a vcuo

de sangue a vcuo
Tubo tipo
KMA (tampa
com rosca)
Tubos a vcuo para

colheita de sangue, com
gel separador, sem e com
anticoagulante
Microtubos tipo
Eppendorf
Suabe estril
Suabe estril
122
123
Amostra para diagnstico

de doenas do sistema
osteoarticular
NOTA
O soro sanguneo pode

auxiliar no diagnstico
de algumas doenas
osteoarticulares.
1. Material
Lquido sinovial
2. Onde colher
Articulaes acometidas
- escapulo-umeral,
coxofemoral e articulaes
do carpo e do tarso
3. Como colher
1 Sedar o animal;
2 Fazer a tricotomia e a
desinfeco da regio
da puno; 3 Conter o
animal, a fim de evitar
Puno da articulao do carpo
movimentos bruscos;
em ovino acometido de artrite
4 Puncionar a
articulao acometida,
utilizando seringas com agulhas de 0,8 mm
de dimetro e 40 mm de comprimento para
articulaes escapulo-umeral e coxofemoral e
com agulhas mais curtas para articulaes do
carpo e do tarso;
5 Posteriormente, dividir a amostra entre um
tubo com anticoagulante, para estudo citolgico
e outro tubo sem anticoagulante, para pesquisa
direta de agente;
6 Retirar a agulha e aplicar um curativo no local.
124
4. Quantidade
Mnimo 1,5 mL
5. Recipiente
Tubo estril
O lquido sinovial
normal incolor
e muito viscoso
6. Temperatura
da amostra para
transporte
Refrigerada
(+2C a +8C)
Lquido sinovial
de aspecto
sanguinolento em
um caso de artrite
NOTA
7. Tempo crtico
Se a leso estiver
supurada,
colher o exsudato
com suabe,
utilizando meios
especficos
para cada situa
o.
para chegada
ao laboratrio
At 48 horas
8. Exames
Pesquisa direta do agente e citolgico

125
1. Material
Sangue
2. Onde colher
a) Veia jugular;
b) Veia coccgea;
c) Veia mamria; e
d) em sunos, veia
cava cranial
3. Como colher
ou seringa e agulha
a) Obteno de soro
b) Sangue total

ou tipo Eppendorf).
gel separador,
ser necessrio
centrifugar o
sangue no
mnimo
30 minutos
aps a
colheita e
no mximo
2 horas e enviar
O sangue dever ser

colhido e enviado
em tubo com
k2). Homogeneizar
suavemente,
invertendo o tubo
(cerca de 6 vezes)
a) Tubo de ensaio
sem anticoagulante:
capacidade 10 mL.
b) Tubo de ensaio
com EDTA K2:
capacidade 5 mL
5. Exames
b) Pesquisa direta
do agente


At 48 horas
126
127
Sistema nervoso central (SNC)

A importncia das doenas do sistema nervoso central
(SNC) cresceu aps o aparecimento da encefalopatia
espongiforme bovina (EEB), por se tratar de uma
zoonose. Desde ento, o conhecimento sobre essas
doenas aumentou exponencialmente. A patologia
do sistema nervoso complexa, devido grande
variabilidade anatmica de suas estruturas: encfalo
(crebro, tronco enceflico e cerebelo) e medula
espinhal, que atuam de forma integrada para controlar
as funes do organismo. Agentes bacterianos, virais,
parasitrios e prinicos, tumores, substncias txicas
ou traumatismos podem afetar direta ou indiretamente
o SNC e produzirem sinais clnicos que permitem
identificar disfuno neurolgica e, em alguns casos, a
localizao da leso.
O envolvimento do SNC evidenciado por alteraes
nas funes sensitivas, motoras, reflexas, sensoriais e
comportamentais. Para confirmar a causa de doena
neurolgica necessria a realizao de diagnstico
diferencial. As estruturas do encfalo e de outros rgos
para pesquisa direta de agentes devem ser colhidas
e mantidas sob refrigerao at sua chegada ao
laboratrio; para exame histopatolgico, devem ser
fixadas em formol 10%. A pesquisa de anticorpos no
soro sanguneo pode auxiliar no diagnstico.
128
Principais doenas do sistema nervoso central

e espcies acometidas
ESPCIES ACOMETIDAS
DOENAS
Raiva
Encefalopatia
Espongiforme
Bovina (EEB)
Scrapie
Encefalite
Herptica Bovina
Febre Catarral
Maligna
Doena de Aujeszky
(Pseudoraiva)
Listeriose
Botulismo
Intoxicaes
(arsnico, chumbo,
organofosforados,
carbamatos e
plantas txicas)
Encefalite
Herptica equina
Encefalomielite
equina do
leste, oeste e
venezuelana
Polioencefalomalcia
Leucoencefalomalcia equina
X
129

sistema nervoso central (SNC)
Agulhas
para
colheita de
sangue a
vcuo
Seringa e
agulha estreis
Potes de plstico,
de boca larga e
tampa de rosca,
com capacidade
para diferentes
volumes
Frasco de
formol 3540% (para
utilizao,
diluir uma
parte de
formol em
9 partes
de gua)
Tubos a vcuo
para colheita
de sangue,
com gel
separador,
sem e com
anticoagulante
Saco plstico

de sangue a vcuo
Microtubos
tipo
Eppendorf
Tbua para
corte de rgos
Serrote
de arco
Coletor
universal estril
Tubo tipo
KMA (tampa
com rosca)
Cizalha
Talhadeira
Gancho
Pedra para
afiar facas
Facas
130
Tesoura
para
destrinchar
ossos
Marreta
Machado
Faca
131

doenas do sistema nervoso
central (SNC)
1. Material
SNC inteiro
2. Como colher
1 passo: com faca e auxlio de um
gancho, retirar a pele e msculos da
calota craniana
2 passo: cortar o osso com machado,
serra ou talhadeira e marreta
3 passo: seccionar com tesoura
a duramater e retirar o encfalo
cortando os nervos cranianos
4 passo: enviar o encfalo inteiro
com a medula espinhal cervical e o
conjunto hipfise, trigmeos e rede
admirvel carotdea (capilares ao
redor da hipfise)
NOTA
Nunca congelar, pois o laborat

rio
ir dividir as pores para os
diferentes exames e, inclusive
, fixar
uma parte em formol.
3. Meio
Nenhum
4. Recipiente
Saco plstico ou
frasco; capacidade
de acordo com o
tamanho do rgo
5. Temperatura
da amostra para
transporte
6. Tempo crtico
para chegada
ao laboratrio
At 48 horas
7. Exames
Pesquisa direta do agente e exame histopatolgico
132
133
4. Passo a passo para separar o SNC
1. Material
Separando o cerebelo
Pores do sistema nervoso central (SNC)
2. Como colher
Dissecar a pele e os msculos da cabea. Cortar a calota
craniana, utilizando serrote, machado ou talhadeira e
marreta. Com tesoura e pina, seccionar a duramater e os
nervos cranianos. Retirar o encfalo e a medula espinhal
cervical. Separar as pores para anlise laboratorial.
3. Pores anatmicas do SNC

Encfalo e medula
espinhal cervical
a - hemisfrios
cerebrais;
b - cerebelo;
c - tronco
enceflico;
d - medula
espinhal
cervical
Seccionar os
pednculos
cerebelares,
um por vez,
introduzindo
uma lmina
cortante, rostral
e horizontalmente
entre o tronco
enceflico e o
cerebelo
Separando o tronco enceflico

Seccionar o tronco enceflico do
resto do encfalo, na altura do
tlamo, de ambos os lados
Encfalo
a
b
Medula espinhal cervical

134
d
135
5. Exames
a Pores do SNC para pesquisa direta do agente
b Pores do SNC para exame histopatolgico

1
4
3
Separar em:
1 - hemisfrio cerebral;
2 - metade do cerebelo;
3 - medula espinhal cervical;
4 - tlamo
6. Meio
a) Nenhum
formol, pelo menos 10 vezes maior que

o volume de tecido a ser fixado).
136
4
Separar em:
1 - hemisfrio cerebral; 2 - metade do cerebelo;
3 - conjunto de hipfise, rede admirvel
carotdea e gnglio do nervo trigmeo ;
4 - tronco enceflico; 5 - medula espinhal cervical
7. Recipiente
a) Saco plstico
a) Refrigerada
(+2C a +8C)
b) Ambiente ou

b) Frasco de boca larga com
tampa de rosca; capacidade de

acordo com o tamanho da pea
a) At
48 horas

137
Pulmo
1. Material
Outros rgos fgado, bao,
pulmo, rim, corao,
linfonodos, intestino
delgado e grosso
NOTA
Em casos de morte sbita

e crepitao muscular,
colher tambm fragmentos
de msculo alterado.
2. Como colher
Colher os fragmentos com tesoura ou bisturi e pina
esterilizados, evitando danos ao tecido durante a
retirada. Escolher parte do rgo com leso; se no
houver leso, colher aleatoriamente. Para o intestino
delgado, selecionar a poro com contedo, ligar e
seccionar. Colher linfonodos regionais.
Rim
NOTA
Enviar ao laboratrio pelo

menos um fragmento de
cada rgo refrigerado e
um em formol.
Fgado
Bao
Corao
138
139
Ala intestinal ligada
Poro do
intestino
delgado
5. Meio
a) Nenhum

formol, pelo menos 10 vezes maior que o
volume de tecido a ser fixado).
a) Saco plstico
leo terminal
(placas de Peyer)
Linfonodos
3. Exames
a) Pesquisa direta do agente b) Exame histopatolgico
4. Quantidade
a1) Fragmentos de 20 g
de cada rgo
a2) 10 cm a 30 cm
de intestino delgado
(ala ligada).
140
b) Frasco; capacidade de acordo

com o tamanho do fragmento.
NOTA
Embalar cada rgo

individualmente para
pesquisa de agentes
Fragmentos de SNC
e outros rgos
Tecidos fixados em formol
a) Refrigerada
(+2C a +8C)
b1) Fragmentos de
3x1x1cm de cada rgo
b2) 10 cm de rgo
tubular (duodeno, jejuno e
poro terminal do leo)
6. Recipiente
(+2C a +8C)
a) At
48 horas

141
1. Material
Sangue
2. Onde colher
a) Veia jugular;
b) Veia coccgea;
c) Veia mamria; e
d) em sunos, veia
cava cranial
3. Como colher
ou seringa e agulha
a) Obteno de soro
b) Sangue total

ou tipo Eppendorf).
gel separador,
ser necessrio
centrifugar o
sangue no
mnimo
30 minutos
aps a
colheita e
no mximo
2 horas e enviar
O sangue dever ser

colhido e enviado
em tubo com
k2). Homogeneizar
suavemente,
invertendo o tubo
(cerca de 6 vezes)
a) Tubo de ensaio
sem anticoagulante:
capacidade 10 mL.
b) Tubo de ensaio
com EDTA K2:
capacidade 5 mL
5. Exames
b) Pesquisa direta
do agente


At 48 horas
142
143
Captulo 3
AVES
Autores
Antonio Guilherme Machado de Castro
Renato Lus Luciano
Ana Maria Iba Kanashiro
Ana Lcia S. P. Cardoso
Eliana Neire Castiglioni Tessari
Centro Avanado de Pesquisa Tecnolgica
do Agronegcio Avcola (CAPTAA)
Instituto Biolgico, Descalvado, SP (APTA/SAA-SP)
144
145
Principais doenas
que acometem as aves
A avicultura industrial caracteriza-se por possuir um
sistema de criao intensivo, com as aves alojadas em
galpes, para se obter o mximo de produtividade.
Essa particularidade torna necessria a adoo de
medidas de biosseguridade, visando a obter elevados
ndices de produo, alm da preveno das doenas.
Por essa razo imprescindvel o diagnstico e o
monitoramento freqente do status sanitrio dos
plantis avcolas.
As principais doenas que acometem as aves so:

Salmonelose
Micoplasmose
Influenza Aviria
Doena de Newcastle
Bronquite Infecciosa
Laringotraquete
Doena de Gumboro
Anemia Infecciosa
Colibacilose
Coccidiose
Clostridiose
A maioria delas no ocorre isoladamente, havendo
uma interao entre diversos patgenos, com a
possibilidade de ocorrerem associaes simultneas
entre vrias doenas, dentro de um mesmo lote,
acarretando elevadas perdas econmicas.
IMPORTANTE
Em casos de suspeita de
Doena de Newcastle e
Influenza Aviria de alta
patogenicidade, o Servio
Veterinrio Oficial no estado
dever ser imediatamente
notificado, sendo somente
competncia do mesmo a
colheita das amostras
146
147

para diagnstico de doenas das aves
Frasco para remessa histopatolgico

Tesoura
Tesoura
trinchante
Pina
Frasco com
gua peptonada
Plstico
Bolsa de amostras
com gua peptonada
Frasco coletor
Luvas
Suabe
Gaze
Gaze para
suabe de arrasto
Caneta
Palitos
esterilizados
Seringa
e agulha
Frascos para
colheita de sangue
Bolsa plstica
para colheita
Prop
148
Pipeta pasteur
Microtubos tipo
Eppendorf
149
Amostras para diagnstico

de doenas das aves
1. Material
Sangue
(para obteno de soro)
2. Onde colher
Aves adultas:
puno cardaca ou veia
ulnar (asa)
Aves de 1 dia:
puno cardaca ou veia
jugular (decapitao)
3. Como colher sangue para obteno do soro

AVES ADULTAS
Veia ulnar (asa): Colocar a ave em decbito lateral,
para que a colheita seja feita na veia ulnar (veia da
asa). Colher o sangue usando seringa descartvel
de 5 mL atravs da puno venosa; transferir para
frascos de vidro ou tubo de ensaio de 10 mL, limpos e
secos, sem anticoagulante.
AVES DE 1 DIA
Decapitao: Aps a insensibilizao do animal, com
o auxlio de tesoura, proceder tcnica de seco
da primeira vrtebra cervical (decapitao). Colher o
sangue em frasco de vidro ou tubo de ensaio (10 mL),
limpo e seco, sem anticoagulante.
AVES ADULTAS E AVES DE 1 DIA
Puno cardaca: Realizar a conteno da ave com a
imobilizao das pernas e asas com uma das mos e
puncionar no meio da regio da quilha (base do
esterno), onde h um vazio, tendo o cuidado para no
atingir o pulmo. Inserir a seringa com agulha no peito
da ave de maneira perpendicular ao ponto de entrada
e paralelo coluna vertebral, at atingir o corao.
Puxar lentamente o mbolo at obter a quantidade
desejada. Transferir para frascos de vidro ou tubo de
ensaio de 10 mL, limpos e secos, sem anticoagulante.
Aps colheita do sangue da ave atravs de puno
cardaca, venosa ou outros mtodos de prtica; manter
o frasco ou tubo inclinado a temperatura ambiente
para que o sangue coagule e libere o soro;
transferir a amostra de soro para microtubo tipo
Eppendorf ou outro frasco de vidro.
150
151
4. Quantidade
Sangue para
obteno do soro:
4,0 mL por ave
Soro: 1 mL por ave
5. Recipiente
Tubo de ensaio ou
frasco de vidro (para
sangue); e
microtubo tipo
Eppendorf (para
sangue ou soro)
NMERO DE AMOSTRAS
ELISA: mdia 25 soros/lote

Soroagltinao Rpida (SAR):
sma
100 soros/lote para Mycopla
synoviae (MS) e Salmonella
s/
pullorum (SP) e 150 ou 300 soro
ticum
isep
gall
sma
opla
Myc
a
par
lote
vigente
(MG). Consultar a legislao
cial
ofi
a
itori
mon
de
o
em cas
NOTA
Para se obter um soro sem

hemlise, ao transferir o sangue
da
seringa para o tubo, deve-se
faz-lo
cuidadosamente, deixando que
o
sangue escorra pela parede
lateral
do tubo . Nunca esgotar o san
gue
de forma brusca e nem no fund
o
do tubo. Evitar mexer os frascos
ou
tubos enquanto o sangue est
em
descanso para separar o soro
.
6. Exames
Sorolgico para pesquisa de anticorpos
a) Soroaglutinao
rpida (SAR)
b) Teste de inibio da
hemaglutinao (HI),
ELISA, Soroneutralizao,
Soroaglutinao lenta e
Imunodifuso em Gel de gar
a) Refrigerada
(+ 2C a + 8C).
Nunca congelar
b1) Refrigerada
(+ 2C a + 8C);
ou
b2) Congelada
(- 20C)
a) At 24 horas
152
b1) At 24 horas; ou b2) At 48 horas

153
1. Material
rgos
2. O que colher
fgado
Traquia, pulmo, orofaringe, corao, fgado, bao,

rim, bursa, crebro, cerebelo, nervo citico, proventrculo,
moela, pncreas, tonsilas cecais, duodeno e ceco.
3. Como colher
Utilizar luvas. Com o auxlio de uma tesoura de
destrinchar aves, realizar a abertura da cavidade
abdominal e torcica, em ave recm sacrificada;
Colher cuidadosamente rgos ou fragmentos de
eleio, utilizando-se de tesouras e pinas esterilizadas;
Cortar fragmentos com espessura mxima de 2,0 cm,
dos tecidos com alteraes;
Evitar encostar as mos nos rgos, mesmo com luvas,
para evitar a contaminao.
Agrupar os rgos em 4 conjuntos e coloc-los em
recipientes separados, sendo:
1. Traquia, pulmo e orofaringe;
2. Corao, fgado, bao e rins;
3. Crebro, cerebelo e nervo citico; e
4. Proventrculo, moela, bursa,
duodeno, pncreas, tonsilas
NOTA
ve ser
cecais e ceco.
1. Traquia de
a.
gr
te
n
a
mantid
ultas
ad
Para o histopatolgico, colher
es
av
Em
2.
sexual), a
fragmentos de todos os rgos
(maturidade
a atrofia
acima descritos em um nico
bursa sofre um mais
o
nd
se
frasco com formol a 10%.
a,
fisiolgic
aves jovens.
Incluir o nervo citico.
em
te
en
id
ev
154
bao
corao
moela
pulmo
proventrculo
testculo
duodeno
rim
tonsilas
cecais
ceco
pncreas
bursa
nervo citico
155
4. Quantidade
Somente para mdicos

veterinrios do Servio Oficial
Para o diagnstico da doena
de Newcastle e Influenza Aviria,
os rgos devem ser colhidos
separadamente, sendo cada
rgo de cada ave acondicionado
em um nico recipiente.
rgos de no mnimo 5 aves/lote, sendo 3 aves

com sintomas e 2 aves aparentemente sadias
5. Exames
a) Bacteriolgico
b) Isolamento viral e biologia molecular
c) Histopatolgico
6. Meio
a) Nenhum
NOTA
O volume ideal de formol para

cada recipiente cerca de
10 vezes o volume do material.
7. Recipiente
a e b) Frasco coletor ou tubos tipo Falcon, agrupados

segundo descrito no item 3.
b) MEM (Meio Essencial Mnimo) com 10% de soro

bovino (ou 10% de soro fetal bovino) com soluo de
antibiticos (0,5X); BHI com soluo de antibiticos
(0,5X); Caldo Triptose Fosfato Tamponado (TPB) com
soluo de antibiticos (0,5X)
a e b) Refrigerada (+ 2C a + 8C);
c) Soluo de formol 10% (100 mL de formaldedo
c) Ambiente. Nunca congelar
a 37% e 900 mL de gua v/v)

a) At 24 horas;
b) At 48 horas;
c) Remeter no mesmo tempo que as demais
amostras. As amostras em soluo de formol 10%,

mesmo no completamente fixadas, podem ser
enviadas ao laboratrio
156
157
NOTA
1. Material
Suabe de traquia
2. Como colher
Ao passar o suabe na traquia, devese tomar o cuidado de verificar se ele

est sendo introduzido no local correto.
Muitas vezes, pode-se confundir a
traquia com o esfago. A traquia
localiza-se na poro VENTRAL. Uma
dica tracionar um pouco a lngua
da ave, de modo que a traquia seja
projetada em direo cavidade bucal,
podendo ento ser visualizada.
Abrir o bico da ave,

abaixar a lngua,
introduzir o suabe
esterilizado na traquia
e esfregar em toda a circunferncia,
evitando tocar o suabe nas mucosas
da boca, para evitar contaminao;
Passar um suabe por ave e, em
seguida, cortar a extremidade do
suabe que estava em contato com
a mo e mergulhar o restante
no frasco que contm o meio
de transporte.
Ateno: no momento da colheita,
sempre usar luvas descartveis e
abrir a embalagem com o suabe
pelo lado que est o cabo, evitando
tocar no algodo.
3. Exames
a) Isolamento viral
b) Isolamento bacteriolgico
ou tcnica de biologia
molecular para Micoplasma
4. Quantidade
b) Suabes de 20
aves/lote, agrupados
em um recipiente
a) Suabes de 30 aves/
lote, agrupando 10 suabes

em cada recipiente
a) Soluo salina adicionada
de antimicrobianos especficos
5. Meio
b) Caldo Frey
esfago
6. Recipiente
traquia
a e b) Bolsa de amostra ou frasco com tampa rosca

a) Refrigerada
(+ 2C a + 8C)
b1) Refrigerada (+ 2C a + 8C); ou

b2) Congelada (- 20C)
a) At 24 horas
158
b1) At 24 horas; ou
b2) se demorar mais de 24 horas

159
1. Material
Suabe de cloaca
2. Como colher
Colher amostra com suabe estril, realizando
movimentos circulares no orifcio da cloaca. Passar o
suabe na ave; em seguida, cortar a extremidade do
suabe que estava em contato com a mo e mergulhar o
restante no frasco que contm o meio para transporte.
Ateno: no momento da colheita, sempre usar luvas
descartveis e abrir a embalagem do suabe pelo lado
onde fica o cabo, evitando tocar no algodo.
3. Exames
a) Bacteriolgico
b) Isolamento viral, tcnica
para salmonela
de biologia molecular
a) 50 suabes, sendo um
suabe para cada 2 aves,
total de 100 aves por
ncleo. Todos os suabes
agrupados em um
mesmo recipiente
4. Quantidade
b) 30 suabes, sendo um
suabe por ave, total de 30
aves por ncleo. Agrupar
cada 10 suabes em um
mesmo recipiente
(3 recipientes/ncleo)
NOTA
vigente
legislao
Consultar a onitoria oficial
em
em caso d
a) gua peptonada
tamponada esterilizada
5. Meio
b) Soluo salina adicionada

de antimicrobianos especficos
6. Recipiente
Bolsa de amostra ou frasco esterilizado

a) Refrigerada
(+ 2C a + 8C)
b1) Refrigerada (+ 2C a + 8C); ou

b2) Congelada (- 20C)
a) At 24 horas
b1) At 24 horas; ou
b2) se demorar mais de 24 horas

160
161
1. Material
4. Quantidade
Suabe de arrasto
a) gaze ou esponja
esterilizada
b) prop esterilizado
2. Onde colher
Galpo
2 suabes por galpo do ncleo

NOTA
Gaze ou esponja
esterelizada
descartveis, abrir a
embalagem do suabe
de arrasto dentro do
galpo a ser amostrado.
Segurar o suabe pelo
cordo e caminhar pelo
galpo, arrastando-o sobre
a cama, principalmente
entre comedouros e
bebedouros. Colocar o
suabe dentro do recipiente
com o meio para transporte,
cortando fora o cordo.
b) Calar o prop esterilizado
sobre a bota e caminhar pelo

galpo, principalmente entre
comedouros e bebedouros.
Retirar o prop utlizando luvas
descartveis e colocar dentro
do recipiente com o meio
para conservao.
162
5. Meio
gua peptonada
3. Como colher
a) Usando luvas
Caso o laboratrio fornea

um palito estril, utiliz-lo
tro
para colocar o suabe den
do recipiente.
Prop esterelizado
6. Recipiente
Bolsa de amostra
ou frasco esterilizado

8. Tempo crtico
para chegada
ao laboratrio
At 24 horas
9. Exame
Bacteriolgico para Salmonela
163
4. Quantidade
1. Material
de 4 caixas analisadas/lote,
agrupando todos os suabes
do lote num mesmo recipiente
2. Onde colher
Caixa de transporte de aves de 1 dia
NOTA
gente
legislao vi
Consultar a
cial
ofi
ria
ito
mon
em caso de
3. Como colher
a) Suabe: usando luvas
descartveis, esfregar gaze

esterilizada por toda a
superfcie interna da caixa,
preferencialmente sobre
fezes, e coloc-la depois
em recipiente adequado.
b) Fundos de no
mnimo 4 caixas,
agrupados por lote em
um mesmo recipiente
a) 1 suabe/2 caixas. Mnimo
Fundo de caixa
b) Fundo da caixa:
usando luvas descartveis,
dobrar o fundo das caixas,
de modo que o lado sujo
com fezes fique para
dentro, e coloc-lo depois
em recipiente adequado
a) gua peptonada
5. Meio
b) Nenhum
6. Recipiente
b) Sacos
a) Bolsa de
plsticos
resistentes
amostra
ou frasco
esterilizado

a) Refrigerada
(+ 2C a + 8C)
b ) Ambiente

a e b) At 24 horas
9. Exames
Bacteriolgico e Micolgico
164
165
1. Material
5. Meio
Papel ou cepilho
que forra a caixa de
transporte de aves de 1 dia
Nenhum
6. Recipiente
2. Onde colher
Sacos plsticos resistentes
Caixa de transporte de aves de 1 dia
3. Como colher
Usando luvas descartveis, transferir
o material que forra a caixa para
sacos plsticos resistentes
4. Quantidade
Forro de caixa de transporte

de no mnimo 4 caixas,
agrupados por lote em um
mesmo recipiente
NOTA
Consultar a legislao vigente

em caso de monitoria oficial
7. Temperatura da
Ambiente

At 24 horas
9. Exames
Bacteriolgico e Micolgico
166
167
1. Material
Fezes frescas
a) Bacteriolgico
4. Exames
b) Isolamento viral, tcnica
de biologia molecular
2. Onde colher
No Galpo
a) 1 pool de 100 amostras/ncleo,

colocadas num mesmo recipiente
3. Como colher
Usando luvas descartveis
e com auxlio de esptula
esterilizada, recolher as
amostras de fezes frescas
de vrios pontos do galpo,
coloc-las em uma mesma
embalagem por lote
5. Quantidade
b) 50 a 100g/lote
NOTA

a) Nenhum
6. Meio
b) Soluo salina adicionada de

antimicrobianos especficos
7. Recipiente
a) Sacos plsticos
resistentes
b) Bolsa de amostra ou
frasco esterilizado


a e b) At 24 horas
168
169
1. Material
Mecnio
4. Quantidade
50 mL/ncleo de reprodutoras no vacinadas contra
Salmonella enteritidis
Mecnio de 200 pintos/ ncleo de reprodutoras
vacinadas contra Salmonella enteritidis,
apenas no primeiro nascimento
2. Onde colher
No incubatrio
3. Como colher
Usando luvas
descartveis,
colher o
mecnio
diretamente
em recipiente
apropriado
depois de a ave
excret-lo sob
leve presso
NOTA

5. Meio
Nenhum
6. Recipiente
Bolsa de amostra ou
frasco esterilizado
7. Temperatura da
8. Tempo crtico
para chegada
ao laboratrio
At 24 horas
9. Exame
Bacteriolgico para Salmonela
170
171
4. Quantidade
1. Material
Ovos bicados
2. Onde colher
20 ovos/ncleo de reprodutoras no vacinadas contra

Salmonella enteritidis
150 ovos do primeiro nascimento/ncleo de
reprodutoras vacinadas contra Salmonella enteritidis
No incubatrio
5. Meio
3. Como colher
Nenhum
Usando luvas
descartveis, retirar
do nascedouro ovos
bicados no nascidos
6. Recipiente
Embalagens plsticas
resistentes

ou
a1) Refrigerada
(+2C a +8C);
a2) Congelada (-20C)
a1) At 24 horas;
ou
a2) Acima de 24 horas, at a
entrega no laboratrio
9. Exames
Bacteriolgico
172
173
Captulo 4
ABELHAS
Apis mellifera
Autores
rica Weinstein Teixeira
Agncia Paulista de Tecnologia dos Agronegcios
(APTA, SAA-SP)
Dejair Message
Universidade Federal de Viosa (UFV)
174
175
Material para colheita

de amostras para diagnstico
de doenas que afetam
Abelhas Apis mellifera
Saco plstico
Caixa isotrmica
com gelo reciclvel
IMPORTANTE
Kit EPI Equipamento

de proteo individual
cas e
ar formo, fa
Sempre utiliz
fetados,
sin
de
te
en
am
pinas devid
rios
i
ap
tre
e en
entre colmeias
bo, realizar
sa
e
ua
g
(lavar com
pois
ecnica e de
esfregao m
)
%
70
ol
co
l
submergir em
Pina
Lpis e caneta
esferogrfica
Luvas de ltex
Jornal
Fumigador
Pincel/ trincha
Tubos tipo Eppendorf
Etiquetas
Envelope
Espuma
Papel
Formo
Faca
Caneta do tipo marcador permanente
176
Pote plstico
universal
Pote plstico
universal perfurado
Pote plstico
de 500 mL
177
Garantindo a segurana
Antes de dirigir-se ao apirio, o profissional
dever vestir-se adequadamente com o
equipamento de proteo individual (EPI),
acender o fumigador e pegar o formo
Reconhecendo as partes
de uma colmeia
Tampa
Chapu
DUPLA
HAR EM
TRABAL
ever
e colheita d
O trabalho d
em
re
p
m
se
do
ser executa
rolando
divduo cont
dupla, um in
dor e
com fumiga
as abelhas
tras
os
m
do as a
outro colhen
Mscara/Vu
Melgueira
Macaco
Tela excluidora
Ninho
Alimentador
Fundo
Luvas de
borracha
Protetor contra
formiga
Formo
Fumigador
O fumigador
imprescindvel, pois a
fumaa, na quantidade
certa, permite controlar a
defensividade das abelhas.
178
Cavalete
Alvado (entrada da colmeia)
Botas
Luvas de
algodo (usar
opcionalmente,
por baixo
das luvas de
borracha)
Colmeia Langstroth ou padro,

despovoada, em cavalete de madeira
179
Identificando os indivduos da
colnia, clulas de operrias,
clulas de zango e realeira
Clula de
operria
operculada
Clula de zango
desoperculada
Clula de zango
operculada
Operria
Realeira
aberta
Clula de
operria
desoperculada
Zango
Rainha
Operrias fazendo
corte rainha
Realeira fechada
180
181
Abrindo e inspecionando
uma colmeia
1 Passo
Abrindo a colmeia e controlando o
comportamento defensivo das abelhas
Certificar-se de que
a rainha no est
na tampa
Fazer fumaa no alvado;

Levantar a tampa;
Fazer fumaa paralela
superfcie dos quadros;
Fechar a colmeia por
1 minuto;
Manter o fumigador
cerca de 15 cm
da colmeia
Abrir a tampa
novamente e fazer
fumaa paralela
superfcie
dos quadros;
182
Apoiar a tampa no cho com a parte interna

para cima, colocando sobre ela a(s) melgueira(s)
ou qualquer outro aparato utilizado pelo apicultor
(Ex.: Alimentador de topo, coletor de plen, coletor
de prpolis, tela excluidora etc.).
183
2 Passo - Inspecionando a rea de cria;
Realizar a inspeo dos

quadros da rea de cria.
Certificar-se de que a
rainha no est presente
nesse quadro e, caso esteja,
transferi-la cuidadosamente
para outro quadro ou
permitir que ela o faa
espontaneamente.
NOTA
Localizao
mais provvel
ia.
da rea de cr
Ninho
Com o auxilio
do formo,
descolar os
quadros do
ninho (devido
propolizao);
retirar um
quadro da rea
de cria.
184
Para facilitar a visualizao

das crias, se necessrio, chacoalhar o quadro
suavemente para dentro da colmeia ou utilizar um
pequeno ramo de planta para afastar as abelhas
adultas que esto cobrindo a rea de cria.
185
Fase de pupa
Durante seu ciclo de vida, as abelhas passam por quatro

diferentes fases: ovo, larva, pupa e inseto adulto
DIFERENTES FASES DO DESENVOLVIMENTO

DAS ABELHAS CRIAS NORMAIS
M. Elias-Neto, FFCLRP/ USP
Pupa
Fases do desenvolvimento
das abelhas
Diferentes estgios da fase de pupa (pupa de olho branco,

pupa de olho rosa, pupa de olho rosa-escuro e pupa de olho
marrom com pigmentao torcica de leve a forte).
H.M.Takada, PRDTA-VP/APTA, SAA, SP
Ovo
No primeiro dia,
encontra-se na posio
vertical, no segundo dia
inclinada e, no terceiro
dia, passa a ficar na
posio horizontal
Larva
Pr-pupa
Diferentes sub-estgios do desenvolvimento

larval, incluindo pr-pupa
Diferentes estgios
da fase larval. Crias
desoperculadas
e operculadas
186
M. Elias-Neto, FFCLRP/ USP
Fase larval
Pr-pupa e pupa em diferentes estgios,

desoperculadas, para permitir a visualizao.
Crias sadias normalmente so vigorosas e apresentamse na fase larval no fundo dos alvolos, em forma de
C (desoperculadas). Aps 5 a 6 dias, essas larvas
so operculadas com cera, mudando constantemente
a sua posio at ficarem retas nos alvolos, com o
dorso do corpo na parede lateral do alvolo (pr-pupa).
Nessa fase, ela cessa seus movimentos e passa por
modificaes, transformando-se em pupa. Desde ovo,
passando por todos os estgios de larva, at o estgio
inicial de pupa, a cria apresenta-se com colorao
branco-prola em todo o corpo. Ao longo da fase de
pupa, ocorrem mudanas gradativas na pigmentao
dos olhos e dos segmentos do corpo.
187
Para reconhecer os sintomas das doenas importante

estar familiarizado com as caractersticas das diferentes
fases do desenvolvimento das crias e com a aparncia de
um favo com crias saudveis.
Quadro com rea

de cria normal
Exemplos de possveis alteraes

na aparncia das crias
Bart Smith, BRL/ARS/USDA
Diferentes anomalias
na fase de cria
Cria mumificada
Cria com alterao de

cor e/ou ressecada
Cria contorcida na
parede do alvolo
com alterao de
cor e murcha
Cria no fundo da clula com

alterao de cor e murcha
Quadro com rea
de cria falhada
Cria com alteraes de

consistncia (aquosa)
188
189
Cria Giz
Principais doenas, intoxicaes

e parasitoses que afetam
CRIAS DE ABELHAS - Apis mellifera
Agente causador
Fungo Ascosphaera apis
Fase de desenvolvimento da cria afetada
Crias j operculadas, pr-pupa e pupa
(ficam mumificadas)
Cria Ptrida Americana

ou Loque Americana
Cria Ptrida Europia ou Loque Europia

Agente causador
Bactria Melissococcus plutonius
Geralmente larva desoperculada em fase de
alimentao; algumas vezes cria operculada
190
BART SMITH, BRL/ARS/USDA
VIRGINIA WILLIAMS, BRL/ARS/USDA

Pr-pupa e pupa
Agente causador
Bactria Paenibacillus larvae
Cria Ensacada
Agente causador
Vrus SBV (Sac Brood Virus)
Fase de desenvolvimento
da cria afetada
Pr-pupa (no consegue
passar para pupa)
191
Cria Ensacada Brasileira

Agente causador
Plen da planta barbatimo (Stryphnodendron spp)
Agente causador
Causa indeterminada

Pr-pupa (no consegue passar para pupa)

Pupa
Cria com asa deformada
192
Crias Anmalas
Varroatose
Agente causador
Vrus DWV (Deformed Wing Virus), ou, eventualmente,
Varroa (por ao fsica)
Agente causador
caro ectoparasita Varroa destructor
(na fase de reproduo)

Pupa, prximo emergncia ou nascimento
(quando o sintoma evidente)
Fase de desenvolvimento
da cria afetada
Cria j operculada
193

que afetam CRIAS DE ABELHAS - Apis mellifera
Antes de iniciar a colheita de amostra, faa uma
observao minuciosa dos favos na rea de cria.
Nos quadros que apresentarem falhas (conforme
apresentado na pgina 188), procure detectar a
presena de crias com alteraes na cor (mudana de
branco-prola para marrom claro a escuro); murchas;
contorcidas nas paredes dos alvolos ou mumificadas.
Colheita de crias para anlise

Para diagnstico da doena, colher 4 amostras diferentes
Amostra 1
1. Onde colher
No ninho
2. O que colher
Com a faca, entre os arames

do quadro, cortar pedaos
de favo em uma regio com
crias suspeitas
194
Pedaos de favo contendo

o mximo possvel de crias
anormais 3 a 5 pedaos de
favo de aproximadamente
3x3 cm a 3x10 cm,
preferencialmente entre os
arames do quadro. Pode
tambm ser o favo inteiro
5. Recipiente
Envolver as amostras de favo em papel jornal
ou outro tipo de papel no encerado.
Ateno: Nunca envolver em plstico ou papel
alumnio, nem colocar em frasco fechado
NOTA
de
Realizar as colheitas
a
luv
o
nd
iza
util
amostras
sobre as
descartvel de ltex
-la, entre
de borracha e descart
saco
em
uma e outra colmeia,
uida.
seg
em
o-o
nd
de lixo, fecha
Favos falhados e com crias anormais, sem mel
3. Como colher
4. Quantidade

Ambiente

At 48 horas
8. Exames
Isolamento/identificao
Anlise microscpica e/ou molecular, se o material
estiver preservado
195
Amostra 2
1. Onde colher
No ninho
2. O que colher
5. Recipiente
Envolver os pedaos
de favo em papel
jornal ou outro tipo de
papel no encerado.
Ateno: nunca envolver
em plstico ou papel
alumnio, nem colocar em
frasco fechado
Favos contendo
crias operculadas
(preferencialmente, sem
mel e com pupas mais
velhas, de olho escuro)
3. Como colher
Com uma faca,
cortar um pedao de
favo com crias

Ambiente
4. Quantidade
Pedao de favo de
aproximadamente
3x10 cm (contendo
pelo menos 100 crias
operculadas)

At 48 horas
8. Exames
Avaliao da taxa de infestao de crias por
Varroa destructor (varroatose)
196
197
Amostra 3
1. Onde colher
b) Papel ofcio comum
- esmagar a amostra
ao dobrar o papel
(colocar o papel dentro
de um envelope)
No ninho
2. O que colher
Crias anormais
3. Como colher
Com uma pina,
colher, individualmente,
crias anormais
4. Quantidade
Efetuar colheita individual de aproximadamente
20 crias ou todas, se forem menos de 20
5. Recipiente
Dividir as amostras em 2
partes iguais e colocar em:
a) Tubos tipo Eppendorf
de 1,5 ou 2,0 mL - colocar

uma cria suspeita por tubo
198

a) Congelada (-20C). Congelar
imediatamente as amostras,
mantendo o material em freezer
at o envio para o laboratrio
b) Ambiente

At 48 horas
8. Exames
Anlise microscpica, microbiolgica e/ou molecular
199
Amostra 4
Detalhe do favo
contendo mel
operculado e plen
armazenado no
alvolo (tambm
chamado
de po de abelha)
1. Onde colher
No ninho
2. O que colher
Pedao de favo contendo
mel operculado
(na parte superior de favos
de cria - caso no encontre,
colher mel desoperculado)
3. Como colher
Com uma faca, cortar
a parte superior do
favo contendo mel
(entre o arame e a
madeira do quadro)
Plen armazenado
Mel operculado
5. Recipiente
Colocar as amostras em frascos plsticos de
500 g a 1 kg. Fechar bem, colocando em seguida
cada frasco em saco plstico

Ambiente

At 48 horas
4. Quantidade
Quatro pedaos de
aproximadamente
3X7 cm (a amostra
pode conter plen)
200
8. Exames
Anlise para esporos de P. larvae
e presena de plen de barbatimo
201
Sintomas clnicos
Diarria, quando causada por N. apis;
Sintoma inespecfico, quando causada por N. ceranae
Acariose
Agente causador
caros endoparasitas, Acarapis woodi,
dentre outras espcies
Sintomas clnicos
Inespecfico
Varroatose
Agente causador
caro ectoparasita, Varroa destructor
Constatao visual
da presena do caro
sobre as abelhas
202
Agente causador
Cerca de 18 diferentes vrus podem infectar abelhas,
dentre os quais podem ser citados Black Queen Cell
Virus (BQCV) - Filamentous Virus (FV) - Deformed Wing
Virus (DWV) - Chronic Bee Paralysis Virus (CBPV) - Acute
Bee Paralysis Virus (ABPV) - Israeli Acute Paralysis Virus
(IAPV) e Cloud Wing Virus (CWV)
Sintomas clnicos
Inespecficos, muito embora, alguns sintomas tenham sido associados a viroses, tais como: abelhas
com asas deformadas
dentro e na frente da
colmeia, abelhas sem
pelos e com aspecto
brilhoso, abelhas com
asas opacas e abelhas
com tremores
Intoxicaes por agrotxicos

Agente causador
Constituintes qumicos de
inseticidas e de outros
defensivos agrcolas
Sintomas clnicos
Grande quantidade de
abelhas mortas fora
e/ou dentro da colmeia
Osmar Malaspina, CEIS/UNESP
Nosemose
Agente causador
Microspordeos, Nosema apis e/ou Nosema ceranae
Viroses
Yanping Chen, BRL/ARS/USDA
Principais doenas, intoxicaes

e parasitoses que afetam
ABELHAS ADULTAS - Apis mellifera
203
2. O que colher

que afetam ABELHAS ADULTAS - Apis mellifera
Em abelhas adultas, geralmente, no ocorrem
sintomas caractersticos de cada doena. O que se
observa comumente a presena de algumas abelhas
adultas moribundas na entrada da colmeia (alvado)
ou no cho, rastejando at morrerem. Quando ocorre
mortalidade por algum tipo de inseticida, observa-se
maior quantidade de abelhas mortas no cho na frente
da colmeia e, algumas vezes, no fundo da colmeia.
Eventualmente, certas viroses e parasitas podem
produzir sintomas especficos (asas deformadas,
ausncia de pelos, entre outros)
Colheita de abelhas
adultas para anlise
Para diagnstico das doenas e intoxicaes de
abelhas adultas, colher 5 amostras diferentes
Abelhas adultas ainda vivas

e moribundas (rastejando e
sem conseguir voar)
3. Como colher
NOTA
tes
Se possvel, um dia an
par
lim
ar/
pin
ca
,
ita
he
da col
de
nte
fre
2 a 3 metros na
ilitar a
cada colmeia, para fac
que
as
elh
ab
visualizao das
s
da
un
rib
esto mo
Com o auxilio de
uma pina, colher as
abelhas moribundas
4. Quantidade
Cerca de 30 abelhas
ou mais por colmeia
5. Recipiente
Frascos de plstico tipo universal

perfurado na tampa e nas laterais
para transporte
Ambiente
Amostra 1

At 48 horas
1. Onde colher
Na frente da colmeia (no solo) e na
entrada da colmeia (alvado)
204
8. Exames
Deteco de esporos de Nosema spp.,
caros endoparasitas e protozorios
205
4. Quantidade
Amostra 2
Cerca de 30
abelhas ou mais,
por colmeia
1. Onde colher
Na entrada da colmeia (alvado)
2. O que colher
Abelhas adultas campeiras que esto chegando
3. Como colher
5. Meio
lcool 70%. No
frasco, deixar
5mm de lcool
acima das
amostras de
abelhas
6. Recipiente
Fechar a entrada da
colmeia (alvado) com
uma tira de espuma
comum e colher as
abelhas que esto
chegando dentro de
um frasco plstico
tipo universal,
contendo lcool 70%
Frasco plstico tipo universal (contendo lcool 70%)

Ateno: fechar bem o frasco, colocando cada frasco
em um saco plstico. Em seguida, colocar em caixa de
papelo com divisrias entre os frascos

NOTA
Para a colheita de abelhas

no alvado, pode-se sug-las,
utilizando-se um sugador de
abelhas ou, alternativamente,
varr-las com um pincel/
trincha comum (de pintura) de
4 a 5 cm de largura
Ambiente

At 72 horas
9. Exames
Deteco de esporos de Nosema spp., caros
endoparasitas e protozorios
206
207
Amostra 3
1. Onde colher
Dentro da colmeia
2. O que colher
4. Quantidade
Cerca de 10 abelhas
por colmeia
5. Recipiente
Frascos plstico
tipo universal
Abelhas adultas que esto cobrindo a rea de cria
3. Como colher
Suspender um favo de cria. Com o auxlio de um
frasco de plstico tipo universal, posicionado
obliquamente e arrastado de baixo para cima,
colher as abelhas dentro do frasco
6. Temperatura
da amostra
para transporte
Congelada (-20C).
Congelar imediatamente
as amostras, mantendo
o material em freezer
at o envio para o
laboratrio

At 24 horas
8. Exames
Anlise molecular
208
209
Amostra 4
4. Quantidade
Cerca de 200 a 300 abelhas por colmeia
1. Onde colher
Dentro
da colmeia
2. O que colher
Abelhas
adultas que
esto cobrindo
a rea de cria
3. Como colher
Suspender um
favo de cria. Com
o auxlio de um
frasco de plstico
de 500 mL contendo
250 mL de lcool
70%, posicionado
obliquamente e
arrastado de baixo
para cima, colher
as abelhas dentro
do frasco
210
5. Meio
lcool 70%. No frasco, deixar 5mm de
lcool acima das amostras de abelhas.
6. Recipiente
Frasco plstico de 500 mL
(contendo lcool 70%)
Ateno: fechar bem o frasco,
colocando cada frasco em
um saco plstico. Em seguida,
colocar em caixa de papelo com
divisrias entre os frascos
7. Temperatura da
Ambiente

At 72 horas
9. Exames
Determinao da taxa de infestao
de caros ectoparasitas
211
4. Quantidade
Amostra 5
Cerca de 300 a
500 abelhas nas
proximidades de
cada colmeia
1. Onde colher
OSMAR MALASPINA, CEIS/U
NESP.
Na frente e/ou
no fundo de
cada colmeia
2. O que colher
Abelhas adultas
moribundas e/ou
mortas
3. Como colher
Com o auxlio de
uma pina ou
com a prpria
mo utilizando
luvas descartveis,
colher as abelhas
moribundas e/ou
recentemente mortas
212
Frasco plstico com capacidade de 1 kg

OSMAR MALASPINA, CEIS/UNESP.
Importante: Colher
abelhas mortas
somente se a
mortalidade tiver
ocorrido um dia
antes da colheita
5. Recipiente
Congelada (-20C). Congelar

imediatamente as amostras,
mantendo o material em freezer at
o envio para o laboratrio

At 24 horas
8. Exames
Deteco de inseticida e outros defensivos agrcolas
213
Bibliografia
Antn, J. J. R.; Mayayo, L. M. F. La exploracin clnica del ganado ovino y
su entorno. Zaragoza: Servet, 2007. 422 p.
ASSOCIAO BRASILEIRA DE NORMAS TCNICAS. NBR 7.500: smbolos de
risco e manuseio para o transporte e armazenamento de material. Rio de
Janeiro, maro de 2000.
BERCHIERI JNIOR, A.; MACARI, M. Doenas das aves. Campinas: FACTA,
2000. 800 p.
BRASIL. Conselho Nacional do Meio Ambiente. Resoluo n 6, de 19
de setembro de 1991. Dispe sobre a incinerao de resduos slidos
provenientes de estabelecimentos de sade, portos e aeroportos. Dirio
Oficial Unio, Braslia, DF, 30 out. 1991. Disponvel em: <http://e-legis.anvisa.
gov.br/leisref/public/showAct.php?id=1156> Acesso em: 14 dez. 2009.
BRASIL. Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento. Controle da raiva
dos herbvoros: manual tcnico. Braslia: MAPA/SDA/DSA, 2005. 104 p.
BRASIL. Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento. Portaria N 48,

de 17 de fevereiro de 2006. Submete consulta pblica, por um prazo de
30 (trinta) dias, a partir da data de publicao desta Portaria, o Projeto de
Instruo Normativa, que aprova o Plano Nacional de Controle e Preveno
da Doena de Newcastle e de Preveno da Influenza Aviria. Dirio Oficial
da Unio, Braslia, DF, 21 fev. 2006,Seo1,p.6.
BRASIL. Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento. Portaria 108
de 04 de setembro de 1991. Aprova os mtodos analticos para controle
de alimentos para uso animal. Dirio Oficial Unio, Braslia, DF, 17 set.
1991. Disponvel em: < http://extranet.agricultura.gov.br/sislegis-consulta/
servlet/VisualizarAnexo?id=12750>. Acesso em: 16 out. 2009.
BRASIL. Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento. Instruo

Normativa N 17 de 07 de abril de 2006. Aprovar, no mbito do Programa
Nacional de Sanidade Avcola, o Plano Nacional de Preveno da Influenza
Aviria e de Controle e Preveno da Doena de Newcastle. Dirio Oficial
da Unio, Braslia, DF, 10 abril 2006,Seo1,p.6.
BRASIL. Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento. Portaria

N 126, de 03 de novembro de 1995. Normas de credenciamento e
monitoramento de laboratrios de diagnstico das salmoneloses
avirias (S. enteritidis, S. gallinarum, S. pullorum e S. typhimurium).
Dirio Oficial da Unio, Braslia, DF, 06 nov. 1995, Seo 1, p. 17694.
Disponvel em: < http://extranet.agricultura.gov.br/sislegis-consulta/
servlet/VisualizarAnexo?id=12698 >. Acesso em: 14 dez. 2009.

Normativa N 32, de 14 de maio de 2002. Aprova as normas tcnicas de
vigilncia para doena de Newcastle e Influenza Aviria, e de controle e
erradicao para a doena de Newcastle. Dirio Oficial da Unio, Braslia,
DF, 14 maio 2002.Seo1,p.28.
BRASIL. Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento.

Portaria N 182 de 08 de novembro de 1994. Aprova as Normas de
Credenciamento e Monitoramento de Laboratrios de Diagnstico da
Doena de Newcastle. Dirio Oficial da Unio, Braslia, DF, 11 nov.
1994,Seo1,p.17003.

Normativa N 44 de 23 de agosto de 2001. Aprova as normas tcnicas para
o controle e a certificao de ncleos e estabelecimentos avcolas para a
Micoplasmose Aviria (Mycoplasma gallisepticum, synoviae e melleagridis).
Dirio Oficial da Unio, Braslia, DF, 24 ago. 2001,Seo1,p.68.
BRASIL. Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento. Procedimentos

para colheita, transporte, recepo e conservao de amostras de
soros para diagnstico sorolgico de febre aftosa. Braslia: MAPA/DSA/
DDA, 2004.13 p.
BRASIL. Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento. Instruo Normativa

N 78, de 03 de novembro de 2003. Aprova as normas tcnicas para controle e
certificao de ncleos e estabelecimentos avcolas como livres de Salmonella
gallinarum e de Salmonella pullorum e livres ou controlados para Salmonella
enteritidis e para Salmonella typhimurium. Dirio Oficial da Unio, Braslia, DF,
05 nov. 2003, Seo1, p.3. Disponvel em: < http://extranet.agricultura.gov.br/
sislegis-consulta/servlet/VisualizarAnexo?id=11080>. Acesso em: 14 dez. 2009.
214
BRASIL. Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento. Plano de

ao para febre aftosa: volume I atendimento notificao de suspeita
de doena vesicular. Braslia: MAPA/SDA/DSA, 2009. 96 p.
BRASIL. Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento. Procedimentos

para o diagnstico das doenas do sistema nervoso central de bovinos.
Braslia: MAPA/DSA/DDA, 2003. 50 p.
BRASIL. Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento. Secretaria
de Defesa Agropecuria. Programa Nacional de Sanidade Avcola.
Procedimentos operacionais de atividades de campo: manual tcnico.
Braslia, DF: MAPA, 2002. 85 p.
215
BRASIL. Ministrio da Sade. Secretaria de Cincia, Tecnologia e Insumos

Estratgicos. Diretrizes gerais para o trabalho em conteno com
material biolgico. Braslia, DF: Ministrio da Sade, 2004. 60 p. (Srie A.
Normas e Manuais Tcnicos).
BRASIL. Ministrio dos Transportes. Portaria n 204, de 20 de maio de 1997.
Aprova as instrues complementares aos regulamentos dos transportes
rodovirios e ferrovirios de produtos perigosos. Dirio Oficial Unio, Braslia,
DF, 26 maio 1997. Suplemento n 98.
CLINICAL AND LABORATORY STANDARDS INSTITUTE. Control of preanalytical
variation in trace element determinations; approved guideline.
Pennsylvania: NCCLS, 1997. (NCCLS document C38-A).
CLINICAL AND LABORATORY STANDARDS INSTITUTE. Tubes and additives
for venous blood specimen collection; approved standard. 5th ed.
Pennsylvania: NCCLS, 2003. (NCCLS document H01-A5).
Koerich, P. K. V.; ZUFFO, J. P.; BACK, A.; PEREIRA, R. A. Guia de coleta e
envio de materiais para diagnstico laboratorial. 2. ed. Xanxer, SC:
News Print Grfica e Editora Ltda, 2007. 165p.
McGavin, M. D.;Zachary, J. F. Pathologic basis of veterinary disease.
4th ed. Maryland: Elsevier, 2007. 1488 p.
Sociedade Brasileira de Patologia Clnica/ Medicina Legal; BD Diagnostics
Preanalytical Systems. Recomendaes da Sociedade Brasileira de Patologia
Clnica / ML para coleta de sangue venoso. So Paulo: SBPC/ML, 2005. 76 p.
UNITED NATIONS. UN recommendations on the transport of dangerous goods
- model regulations. 13th ed. rev. Disponvel em: <http://www.unece.org/trans/
danger/publi/unrec/rev13/13files_e.html>. Acesso em: 30 out. 2009.
World Health Organization. Guidelines for the safe transport of
infectious substances and diagnostic specimens. Genebra: WHO, 1997.
(WHO/EMC/97.3). Disponvel em: <http://www.who.int/csr/emc97_3.pdf>
Acesso em: 29 maio 2009.
World Health Organization. Laboratory biosafety manual. 2nd rev.
Geneva: WHO, 2003. Disponvel em: <http://www.who.int/csr/resources/
publications/biosafety/Labbiosafety.pdf>. Acesso em: 29 maio 2009.
World Health Organization. Laboratory biosafety manual. 3nd
ed. Geneva: WHO, 2004. Disponvel em: <www.who.int/csr/resources/
publications/biosafety/Biosafety7.pdf>. Acesso em: 29 maio 2009.
WORLD ORGANIZATION FOR ANIMAL HEALTH. Manual of diagnostic tests and
vaccines for terrestrial animals. 5th ed. Paris: OIE, 2004. Disponvel em: <http://
www.oie.int/eng/normes/mmanual/A_00055.htm> Acesso em: 30 out. 2009.
216
217
Ministrio da Agricultura, Pecuria e

Abastecimento - MAPA
Departamento de Sade Animal
Esplanada dos Ministrios Bloco D, Anexo A,
Sala 301
70043-900 - Braslia, DF - Brasil
Tel.: 00 55 61 3218-2701 Fax: 00 55 61 3226-3446
http://www.agricultura.gov.br
0800 - 7041995
Organizao Pan-Americana
da Sade OPAS/OMS
Centro Pan-Americano de Febre Aftosa PANAFTOSA
Av. Presidente Kennedy, 7778 CEP: 25040-004
Duque de Caxias, Rio de Janeiro Brasil
Tel.: 00 55 21 3661-9003 Fax: 55 21 3661-9001
http://www.panaftosa.org.br

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