CINCIAS DE ALIMENTOS

REVISES
/ REVIEWS
Resduos agroindustriais
para produo
biotecnolgica de xilitol

Resduos agroindustriais para produo biotecnolgica de xilitol1

Agro-industrial residues in biotechnological production of xylitol
Carolina Tamanini2; Maria Celia de Oliveira Hauly3*
Resumo
Resduos lignocelulsicos tais como bagao de cana-de-acar, palha de arroz, casca de aveia e resduos
florestais representam fontes abundantes e no dispendiosas de carboidratos (celulose e hemicelulose)
com potencial aplicao em processos de converso qumica ou microbiana em produtos de interesse
comercial. Xilose, o acar predominante na frao hemicelulsica pode ser convertido em xilitol. O xilitol
um poliol com propriedades fsico-qumica importantes para as indstrias alimentcia e farmacutica.
um composto com doura semelhante da sacarose, anticariognico, tolerado por diabticos e
recomendado para pessoas obesas. Este poliol produzido ,em grande escala, por hidrogenao cataltica
da xilose presente em hidrolisados lignocelulsicos, porm as solues obtidas por este processo
requerem onerosos passos de purificao para obteno do xilitol puro. Alternativamente, pode ser
produzido por mtodos biotecnolgicos utilizando leveduras e/ou enzimas. Tais processos consistem
na fermentao de hidrolisados hemicelulsicos de resduos agroindustriais, e podem competir com o
tradicional processo qumico. O presente trabalho teve como objetivo a realizao de uma reviso
bibliogrfica sobre xilitol destacando os aspectos estruturais, as vias de obteno e aplicaes, principais
substratos hemicelulsicos empregados em sua produo, hidrlise cida e tratamento do hidrolisado
hemicelulsico para utilizao como substrato na obteno de xilitol por via microbiana.
Palavras-chave: Resduos lignocelulsicos, hidrlise cida, hidrolisado hemicelulsico, tratamento do
hidrolisado, fermentao, xilitol.

Abstract
Lignocellulosic residues, such as sugarcane bagasse, rice and oat straw and forest cuttings, are abundant
and inexpensive sources of carbohydrates (cellulose and hemicellulose) with potential application in
several conversion processes. Xylose, the predominant sugar in the hemicellulose fraction can be
converted to xylitol. Xylitol is a polyol with some interesting properties that can make it an important
product for the food and pharmaceutical industry. It is a compound with sweetness similar to that
sucrose, is non-cariogenic, tolerated by diabetics and recommended for obese people. This polyol is
currently produced by chemical catalysis of the xylose from lignocellulosic residues. However, this
process needs expensive purification steps to obtain pure xylitol. Alternatively, it can be produced by
biotechnological methods, using microorganisms, specially yeasts. These processes consist of
hemicellulosic hydrolysate fermentation from agro-industrial residues, wich could compete with the
traditional chemical method. The present work aims the accomplishment of a review about xylitol detaching
Parte da monografia apresentada ao Departamento de Bioqumica e Biotecnologia da Universidade Estadual de Londrina, em
2003, para obteno do ttulo de Especialista em Bioqumica Aplicada.
2
Bacharel em Qumica, Especialista em Bioqumica Aplicada e aluna do Programa de Ps-graduao em Biotecnologia (nvel:
mestrado), Universidade Estadual de Londrina.
3
Docente do Departamento de Bioqumica e Biotecnologia da Universidade Estadual de Londrina, Caixa Postal 6001, CEP 86051990, Londrina-PR, E-mail: mcoh@uel.br
* Autor para correspondncia.
1

Recebido para publicao 02/07/04 Aprovado em 25/11/04

Semina: Cincias Agrrias, Londrina, v. 25, n. 4, p. 315-330, out./dez. 2004

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the structural aspects, ways of attainment and applications; main hemicellulosic substrates used in its
production; acid hydrolysis and treatment of the hemicellulosic hydrolysate for use as substrate to
produce xylitol by microbial way.
Key words: Lignocellulosic residues, acid hydrolysis, hemicellulosic hydrolysate, hidrolysate treatment,
fermentation, xylitol.

Introduo
O Brasil conhecido por seu grande potencial de
produo de recursos renovveis tais como produtos
agrcolas, florestais e resduos como o bagao de
cana-de-acar, a palha de arroz, a palha de trigo, a
casca de aveia e as aparas de madeira. A produo
de resduos agroindustriais de aproximadamente
250 milhes de toneladas/ano. A utilizao adequada
destes resduos ajuda a minimizar problemas
ambientais e energticos, alm disso, pode gerar
produtos com relevantes aplicaes na indstria
farmacutica e de alimentos (ROBERTO et al.,
1995; SOUZA; SANTOS, 2002).
Estes resduos agrcolas, em geral, contm cerca
de 20 a 60% de celulose, 20 a 30% de hemicelulose
e 15 a 30% de lignina. O bagao de cana, farelo de
trigo e de arroz, por exemplo, contm cerca de 25 a
40% de celulose, 20 a 35% de hemicelulose e 15 a
35% de lignina (OLIVEIRA; CARVALHO;
SCHUWAN, 2003). Estes materiais podem ser
utilizados como substratos para processos
fermentativos pois mais de 70% da matria seca
constituda de carboidratos. A maior parte celulose,
uma (1-4) glucana que pode ser convertida em
glicose. As hemiceluloses so heteropolmeros de
pentoses e hexoses e correspondem de 10 a 40% da
matria seca dos resduos lignocelulsicos. Esta
frao pode ser convertida em acares
monomricos, principalmente xilose, em temperaturas
abaixo de 200 C na presena de cidos diludos
(NEUREITER et al., 2002). A xilose pode ser
diretamente convertida em xilitol por vias
biotecnolgicas utilizando leveduras (ROBERTO;
MANCILHA; SATO, 1999).
O xilitol um carboidrato natural com poder
adoante semelhante ao da sacarose. Apresenta
propriedades anticariognicas e seu metabolismo em

humanos independente de insulina. Este poliol

produzido em larga escala por hidrogenao cataltica
de solues ricas em xilose, um processo oneroso
pelo nmero e tipos de etapas de purificao
requeridas. A via biotecnolgica apresenta-se como
alternativa via qumica de obteno de xilitol em
funo do alto custo do processo qumico (PARAJ;
DOMNGUEZ; DOMNGUEZ; 1998a) e da
capacidade de microrganismos fermentarem a xilose
presente nos hidrolisados. O metabolismo de xilose
em leveduras consiste em sua reduo a xilitol atravs
da enzima xilose redutase que requer como cofator
o NADPH + H+, seguida da oxidao xilulose pela
enzima xilitol desidrogenase que requer como cofator
o NAD+ (FELIPE et al., 2003).
Um aspecto interessante na produo
biotecnolgica de xilitol o fato de que durante o
processo de hidrlise cida do resduo agroindustrial,
alm da liberao dos acares, comum ocorrer a
formao de compostos txicos provenientes da
degradao de hexoses e pentoses, como 5hidroximetilfurfural e furfural, respectivamente ou da
lignina, como compostos aromticos, fenlicos e
aldedicos. Tambm comum a liberao de
substncias da prpria estrutura lignocelulsica como
o cido actico ou dos equipamentos de hidrlise como
ons ferro, cromo, nquel e cobre (MUSSATO;
ROBERTO, 2002). Estes compostos, quando
presentes no hidrolisado, so inibidores potenciais do
metabolismo microbiano (ALVES et al., 1998). O
efeito inibitrio pode ser superado submetendo-se o
hidrolisado a tratamentos adequados que incluem
alteraes do pH do meio com adio de cidos e
bases e utilizao de carvo ativo.
Esta reviso bibliogrfica sobre xilitol tem como
objetivo destacar os aspectos estruturais, as vias de
obteno e aplicaes, principais substratos
hemicelulsicos empregados em sua produo,

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hidrlise cida e tratamento do hidrolisado

hemicelulsico para utilizao como substrato na
obteno de xilitol por via microbiana.

Reviso Bibliogrfica
Propriedades fsico-qumicas do xilitol
O xilitol um polilcool de cinco carbonos que
pode ser encontrado na natureza em muitas frutas e
vegetais tais como alface, couve flor, ameixas,
framboesas, morangos, uvas, bananas, assim como
em leveduras, liquens e cogumelos porm, em
quantidades inferiores a 0,9 g/100g (PARAJ;
DOMNGUEZ; DOMNGUEZ, 1998a).
Sua frmula emprica C5H12O5 e sua massa
molecular 152,15 g.mol-1. Trata-se de um p branco,
cristalino, sem odor, altamente solvel em gua (64,2 g/
100 mL) e apresenta ponto de fuso na faixa de 93,4 a
94,7C (AGUIAR; OETTERER; MENEZES, 1999).
O xilitol um intermedirio do metabolismo de
carboidratos em mamferos. Um homem adulto
produz de 5 a 15g deste polilcool por dia (PARAJ;
DOMNGUEZ; DOMNGUEZ, 1998a). O fato de
ser lentamente absorvido no trato gastrintestinal e
de seu metabolismo ser independente da insulina
possibilita sua utilizao como adoante para
diabticos (WINKELHAUSEN; KUSMANOVA,
1998). O poder edulcorante de 0,8 a 1,1 vezes a da
sacarose e valor calrico de 2,4 kcal/g. Este poliol
2,4 vezes mais doce do que o manitol e 2 vezes mais
que o sorbitol. Entretanto, o poder adoante pode
variar com o pH, concentrao de sais e
temperatura. Apresenta ainda uma agradvel
sensao refrescante devido ao valor negativo do
calor especfico de dissoluo (-34,8 cal/g)
(AGUIAR; OETTERER; MENEZES, 1999). Outra
propriedade importante do xilitol o fato de no ser
fermentado pela maioria dos microrganismos da
cavidade bucal humana exercendo efeito
anticariognico e inibindo a desmineralizao do
esmalte dos dentes (BIRKHED, 1994).

Aplicaes do Xilitol
Pode ser empregado isoladamente ou em
associao com outros adoantes em produtos de
panificao, gelias, marmeladas, gelatinas,
sobremesas, gomas de mascar, refrigerantes e
sorvetes. Tambm pode ser utilizado em produtos
farmacuticos e de higiene oral (WINKELHAUSEN;
KUSMANOVA, 1998). O uso mais significante,
entretanto, na substituio do acar presente em
produtos altamente aucarados, como o leite
condensado, que podem caramelizar durante o
processamento ou a estocagem. A reao de Maillard,
ou seja, reao qumica entre acares e protenas
acelerada por altas temperaturas e que provoca
escurecimento, no ocorre com o xilitol pois este
acar no tm grupos aldedicos nem cetnicos
(AGUIAR; OETTERER; MENEZES, 1999).
Tambm pode ser utilizado na preveno ou
tratamento de doenas como diabetes, obesidade,
insuficincia da enzima glicose 6-fosfatodesidrogenase, otite, osteoporose e fibrose cstica
(RODRIGUES et al., 2003a).

Obteno do xilitol
A obteno de xilitol pode ser realizada de 3
maneiras: extrao lquido-slido, reduo qumica
da xilose e converso biotecnolgica de solues
contendo xilose (DOMNGUEZ et al., 1999). Tanto
o processo qumico quanto o biotecnolgico se iniciam
com solues de xilose oriundas da hidrlise de
materiais lignocelulsicos ricos em xilanas (CRUZ
et al., 2000).
Extrao lquido-slido: o xilitol presente em frutas e
vegetais bem como em leveduras, liquens, algas e
cogumelos pode ser recuperado por extrao lquidoslido, mas como ocorre em baixas quantidades, menos
que 0,900 g/100 g, este processo se torna
economicamente invivel (PARAJ; DOMNGUEZ;
DOMNGUEZ, 1998a).
Reduo qumica da xilose: a produo de xilitol
em escala comercial realizada por um processo

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qumico patenteado em 1977 por Asko Melaja e

Lauri Hamalainen (LIMA; BERLINCK, 2003).
Este processo inclui quatro etapas bsicas: 1.
Obteno da xilose por hidrlise cida de material
vegetal rico em xilana; 2. Purificao da xilose
obtida; 3. Hidrogenao cataltica da xilose
formando xilitol e 4. Cristalizao do composto.
O rendimento do processo qumico e a qualidade
do xilitol dependem da pureza da soluo inicial
de xilose, j que a presena de impurezas interfere
na reao cataltica. So necessrias operaes
de purificao (como troca inica, descolorao
e fracionamento cromatogrfico) para obteno
de uma soluo de xilose de elevada pureza. Aps
a remoo do catalisador por filtrao e troca inica,
a soluo de xilitol concentrada, fracionada por
cromatografia e cristalizada para obteno do produto
puro. As etapas de purificao aumentam o tempo
do processo e encarecem o produto (LIMA;
BERLINCK, 2003).
Converso biotecnolgica de solues contendo
xilose: o xilitol pode ser produzido
biotecnologicamente utilizando leveduras e/ou
enzimas. Este processo consiste na fermentao
de hidrolisados hemicelulsicos obtidos de
resduos agroindustriais e pode competir com o
tradicional processo qumico (FAVERI et al.,
2003). O xilitol um intermedirio do metabolismo
de D-xilose em leveduras, como pode ser
observado na figura 1 onde representado um
esquema simplificado do metabolismo desta
pentose nestes microrganismos.

XILOSE
NAD(P)H+H+

Xilose Redutase

NAD(P)+

XILITOL
NAD+

Xilitol
Desidrogenase

NADH+H+

Xilulose
ATP

ADP

Reaes no oxidativas
(converso das pentoses
fosfato a triose e hexose

Gliceraldedo 3P

Via das
fosfopentoses

Reaes oxidativas
(regeneraao do NADPH)

Frutose 6P

Via glicoltica
Piruvato

NADH+H+
NAD+

Ciclo do cidos
tricarboxlicos

Etanol + CO2

Figura 1. Esquema simplificado do metabolismo de xilose

em leveduras.
Fonte: Paraj, Domnguez e Domnguez (1998a). Adaptado.

A xilose redutase NADPH dependente e xilitol

desidrogenase NAD+ dependente. A regenerao
do NADPH ocorre na via das pentoses fosfato e a
regenerao do NAD+ ocorre somente na cadeia
respiratria com o oxignio como aceptor final de
eltrons. Porm, sob suprimento limitado de oxignio,
no ocorre a completa reoxidao do cofator, levando
a um desequilbrio redox. Uma baixa concentrao
de NAD+ diminui a taxa de oxidao do xilitol mas
no afeta sua produo na mesma extenso, induzindo
sua excreo no meio de cultivo. Um alto grau de
aerao favorece o crescimento celular, prejudicando
o acmulo do xilitol (AGUIAR JR et al., 2002). A
fosforilao da D-xilulose a D-xilulose-5-fosfato
catalisada pela enzima xilulose quinase e envolve
gasto de energia na forma de ATP. A D-xilulose-5fosfato formada pode ser convertida a piruvato
atravs da conexo com a via das pentoses fosfato.

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Resduos agroindustriais para produo biotecnolgica de xilitol

O piruvato obtido pode ser descarboxilado a

acetaldeido e reduzido a etanol ou a acetil-CoA pode
entrar no ciclo dos cidos tricarboxlicos que acoplado
cadeia de transporte de eltrons, regenera NAD+
e ATP (MUSSATO; ROBERTO, 2002).

Resduos lignocelulsicos
A utilizao de resduos provenientes da
explorao da biomassa lignocelulsica para obteno
de bioprodutos uma alternativa para a produo de
energia e de alimentos pois a madeira e os resduos
da agroindstria constituem reservas naturais
renovveis disponveis em grandes quantidades
(ALVES, 2001). Os materiais lignocelulsicos
incluem vrios resduos agrcolas (palhas, cascas,
cavacos), madeiras duras provenientes de rvores
de folhas decduas (dicotiledneas), madeiras moles
provenientes de conferas e resduos das indstrias
de papel. A composio destes materiais bastante
varivel. O maior componente a celulose (35-50%)
seguida pela hemicelulose (20-35%) e lignina (1025%) (SAHA, 2003).
A celulose um homopolissacardeo linear
formado de unidades de glicose unidas por ligaes
glicosdicas do tipo (1-4). As cadeias de celulose
agregam-se formando fibrilas e apresentam pontes

de hidrognio entre os grupamentos hidroxila intra e

intercadeias, o que resulta na cristalinidade da
celulose. Essas regies cristalinas, nas quais as
cadeias esto ordenadas paralelamente, so
separadas por regies menos ordenadas, conhecidas
como amorfas (GALDEANO, 2001) enquanto as
hemiceluloses so compostas pelos acares glicose,
manose e galactose (hexoses) e xilose e arabinose
(pentoses), podendo ainda apresentar quantidades
variveis de cidos urnicos, grupos acetila e desoxihexoses em alguns tipos de madeira. Esses acares
apresentam-se na forma de polmeros ramificados,
de menor massa molecular que a celulose e podem
ser homoplmeros ou heteropolmeros (FERRAZ,
2001). A lignina um polmero vegetal derivado dos
lcoois hidroxicinamlicos p-coumarlico, coniferlico
e sinaplico, tambm chamados de monolignis
(ENDT et al., 2000) e atua como ligante das fibras
de celulose, contribuindo para a resistncia e rigidez
do tecido da madeira (SHREVE; BRINCK JR,
1977). Existe ainda uma frao menor da madeira,
formada basicamente por compostos fenlicos e
resinas, que comumente so chamados de extrativos
(solveis em solventes orgnicos e gua) e
compreendem cerca de 2 a 4% (FERRAZ, 2001).
A Tabela 1 mostra a composio qumica de
alguns resduos lignocelulsicos.

Tabela 1. Composio qumica parcial de alguns resduos lignocelulsicos.

Resduos
Lignocelulsicos
Farelo de cevada
Sabugo de milho
Folhas de milho
Eucalyptus globulus
Bagao de cana
Palha de arroz
Palha de trigo
Casca de aveia
Eucalyptus grandis
Palha de sorgo

Celulose
(%)
23,0
31,7
37,6
46,3
40,19
43,5
33,81
30,51
40,20
34

Hemicelulose
(%)
32,7
34,7
34,5
17,1
26,42
22
31,83
28,63
15,67
44

Lignina
(%)
24,4
20,3
12,6
22,9
25,15
17,2
20,12
23,09
26,9
20

Referncia
Cruz et al., 2000
Cruz et al., 2000
Cruz et al., 2000
Cruz et al., 2000
Neureiter et al., 2002
Mussato; Roberto, 2002.
Cndido; Canilha, Silva, 2002
Felipe et al., 2003
Canettieri; Silva; Carvalho Jr, 2003
Herrera et al., 2004

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Tamanini, C.; Hauly, M. C. O.

A populao humana produz milhes de toneladas

de resduos agroindustriais anualmente. A Amrica
Latina, por exemplo, produz aproximadamente 500
milhes de toneladas/ano de subprodutos
agroindustriais, sendo que o Brasil produz quase a
metade deste montante (SOUZA; SANTOS, 2002).
Na maioria das vezes, esses rejeitos so dispensados
no meio ambiente, provocando um acmulo excessivo
de matria orgnica. Embora este tipo de poluente
seja biodegradvel, torna-se necessrio um tempo
mnimo para ser mineralizado e, em virtude da intensa
atividade humana na terra, observa-se a cada dia
um aumento na dificuldade de reciclagem natural
desses nutrientes (BAS; ESPOSITO, 2000). Estes
resduos podem ser convertidos em energia, produtos
qumicos e alimentos. Entretanto, devido sua
natureza polissacardica, no so diretamente
utilizados pelos microrganismos de interesse industrial,
sendo necessrio hidrolis-los para os respectivos
monmeros (GARCIA; PRATA, 1998).

Hidrlise cida de materiais lignocelulsicos

cidos diludos podem ser utilizados para hidrlise
parcial de materiais lignocelulsicos. Este
procedimento, chamado pr-hidrlise, consiste na
hidrlise da frao hemicelulsica, que mais
susceptvel ao tratamento cido, sendo que as fraes
de celulose e lignina permanecem inalteradas
(AGUILAR et al., 2002) podendo ser utilizadas para
a produo de solues de glicose ou na fabricao de
polpa de papel (HERRERA et al., 2001). cidos tais
como sulfrico, clordrico e actico so comumente
empregados como catalisadores nestes processos.
De acordo com Sun e Cheng (2002) h dois tipos
de tratamentos de hidrlise com cidos diludos: alta
temperatura (maior que 160 C), processo contnuo
e baixa carga de slidos (5 a 10% massa de substrato/
massa da mistura reacional) e baixa temperatura
(menor que 160 C) processo em batelada e alta carga
de slidos (10 a 40%). Estes tratamentos permitem
alcanar elevados rendimentos sendo que em
temperaturas elevadas h favorecimento da hidrlise

da celulose enquanto que sob condies mais brandas

h maior converso de xilanas em xilose.
Os cidos utilizados como catalisadores nos
processo de hidrlise liberam prtons que atuam nas
ligaes glicosdicas entre os monmeros de acar
nas cadeias polimricas. O rompimento destas
ligaes libera uma srie de compostos,
principalmente acares como xilose, glicose e
arabinose (AGUILAR et al., 2002). So liberados
tambm produtos indesejveis para o processo
fermentativo tais como furfural, proveniente da
degradao de pentoses e 5-hidroximetilfurfural (5HMF) oriundo da desidratao de hexoses, havendo
ainda formao de cido frmico pela degradao
de compostos derivados do furano (furfural ou 5HMF) e de cido levulnico produzido a partir da
degradao de 5-HMF (PALMQVIST; HAHNHGERDAL, 2000). So gerados ainda cido
actico proveniente dos grupos acetil, compostos no
estruturais correspondentes frao extrativa e
produtos de degradao da lignina (CRUZ et al.,
2000) (fenis e outros compostos aromticos) e
metais pesados como cromo, cobre, ferro e nquel
provenientes da corroso dos equipamentos de
hidrlise (RODRIGUES et al., 2001). Uma vez
presentes no hidrolisado, estes compostos so
inibidores potenciais do metabolismo microbiano
(ALVES et al., 1998), pela inibio das enzimas xilose
redutase e xilitol desidrogenase (ALVES et al., 2002),
limitando o consumo da fonte de carbono e
interferindo na cintica de crescimento (MORITA;
SILVA; MAUGERI, 2003).

Mecanismo de hidrlise cida de materiais

lignocelulsicos
De acordo com Herrera et al. (2001) as reaes
de hidrlise dos polmeros de acares com cidos
diludos so bastante complexas uma vez que o
substrato est em fase slida e o catalisador em
fase lquida.
O mecanismo de hidrlise consiste em:

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Resduos agroindustriais para produo biotecnolgica de xilitol

1. difuso dos prtons atravs da matriz

lignocelulsica mida;
2. protonao do oxignio da ligao ter entre os
monmeros de acar;
3. quebra da ligao ter e gerao de um
carboction como intermedirio;
4. solvatao do carboction com gua;
5. regenerao do prton e cogerao do monmero
de acar, oligmero ou polmero, dependendo da
posio da ligao ter rompida;
6. difuso dos produtos na fase lquida (se for
permitido por sua forma e tamanho);
7. reincio do processo a partir do passo 2.

Tratamento do hidrolisado cido para ser

utilizado na bioconverso de xilitol
Vrios tratamentos fsico-qumicos tm sido utilizados
com o objetivo de minimizar o efeito txico dos
hidrolisados sobre a fermentao tanto por
transformao dos inibidores em compostos inativos
quanto pela sua remoo (PARAJ; DOMNGUEZ;
DOMNGEZ, 1998b). Dentre os diversos tratamentos
utilizados para minimizar a concentrao dos inibidores,
a neutralizao, a adsoro com carvo ativo e o uso
de resinas de troca inica so os mais empregados
(MORITA; SILVA; MAUGERI, 2003).
De acordo com van Zyl (1988 apud MARTON,
2002) a elevao do pH do hidrolisado inicialmente
cido a valores maiores que 7,0 utilizando lcalis,
resulta na precipitao de componentes txicos como
ons de metais pesados, acetatos, taninos e terpenos.
Este precipitado ento removido por centrifugao
e o pH do meio ajustado at que se obtenha uma
condio de pH adequada para a atividade microbiana
no processo fermentativo (ROBERTO;
MANCILHA; SATO, 1999; FELIPE et al., 2003).
O tratamento com carvo ativo se fundamenta
na capacidade deste material poroso, de origem
natural, de adsorver sobre sua superfcie diferentes
tipos de molculas atravs de foras fracas

denominadas de Van der Waals. Estas foras so

resultantes de uma atrao intermolecular de tal modo
que seu potencial , basicamente, uma funo da rea
superficial do material que varia de 600-1600 m2
dependendo da matria prima empregada para sua
fabricao (COSIDINE, 1974 apud ALVES, 2001).
Alves et al. (1998) utilizaram um planejamento
fatorial de 25-1 para avaliar as condies de tratamento
do hidrolisado de bagao de cana-de-acar para
remoo dos compostos txicos assim como o tempo
de fermentao. Foram verificadas a influncia da
base (CaO ou Ca(OH) 2), do cido (H 2SO 4 ou
H3PO4), do pH final do tratamento bsico (7,0 ou
10,0), da utilizao ou no de carvo ativo 3% (p/v)
e do tempo de fermentao (45 ou 63 h). Depois de
feitas as anlises estatsticas, os fatores com efeitos
significativos foram utilizados para experimentos
adicionais com auxlio de uma modelagem estatstica
de 2 2 para obteno de um modelo matemtico
representativo desse processo fermentativo. O maior
rendimento na bioconverso de xilose em xilitol
(0,79 g/g) foi obtido quando o pH do hidrolisado foi
alterado de 0,5 para 7,0 com CaO e depois reduzido
para 5,5 com H3PO4 e em seguida tratado com 2,4%
de carvo ativo a 200 rpm, por 1 h a 30 C e
correspondeu uma produtividade de 0,47 g/L.h
depois de 63 h de fermentao utilizando a levedura
Candida guilliermondii.
O processo de evaporao vcuo do hidrolisado
baixa presso com o objetivo de aumentar a
concentrao de xilose no meio reduz as
concentraes de compostos txicos volteis como
cido actico e furfural (RODRIGUES et al., 2003b).
Morita, Silva e Maugeri (2003) verificaram reduo de
56,5% de cido actico, 81,79% de fenis e de mais de
90% dos aldedos furanos no hidrolisado de bagao de
cana-de-acar tratado com carvo ativo e concentrado
vcuo em relao ao hidrolisado original.
A utilizao de carvo ativo apresenta a
desvantagem de provocar uma perda considervel
de xilose. Este problema pode ser superado realizando
a neutralizao e/ou purificao de hidrolisados
hemicelulsicos com resinas de troca inica que, alm

Semina: Cincias Agrrias, Londrina, v. 25, n. 4, p. 315-330, out./dez. 2004

321

Tamanini, C.; Hauly, M. C. O.

de evitarem a perda de xilose, removem

eficientemente a cor, compostos fenlicos, cidos
orgnicos e inorgnicos, compostos furnicos e metais
(NPOLES et al., 1998 apud VERDE, 2001).

Obteno de xilitol a partir de diferentes resduos

lignocelulsicos
Cruz et al. (2000) utilizaram trs resduos agrcolas
com alto contedo de xilanas (farelo de cevada,
sabugos e folhas de milho) que foram hidrolisados
em autoclave com solues diludas de cido sulfrico
sob uma variedade de condies operacionais com o
objetivo de obter solues de xilose apropriadas para
serem utilizadas como meio de fermentao para
Debaryomyces hansenii.
As condies de hidrlise foram selecionadas com
base no modelo cintico de gerao de xilose e na
quantidade de subprodutos txicos formados. Os
hidrolisados foram suplementados com nutrientes e
utilizados como meio de cultivo sem nenhum
tratamento prvio de destoxificao. Os resultados
obtidos com os trs resduos em estudo foram
comparados com os resultados de Eucalyptus globulus,
um resduo muito utilizado em processo de pr-hidrlise
que j tinha suas condies de hidrlise estabelecidas
(3% de H2SO4, 130 C, relao madeira: soluo cida
1:8 e tempo de reao de 1 h).
Os hidrolisados obtidos foram neutralizados com
CaCO3 at pH 6,5 e o precipitado de CaSO4 foi
removido por filtrao sendo os sobrenadantes
clarificados e, depois de suplementados com
nutrientes e esterilizados, foram utilizados como meio
de fermentao.
A Tabela 2 apresenta as condies timas de
hidrlise assim como a composio dos hidrolisados
antes da neutralizao (A), aps concentrao por
evaporao e esterilizao (B) e depois de terminada
a fermentao (C). A Tabela 3 traz os parmetros
fermentativos obtidos na fermentao dos hidrolisados
de farelo de cevada, sabugos de milho, folhas de milho
e madeira de eucalipto.

Foi observado que nos hidrolisados de farelo de

cevada, sabugos de milho e folhas de milho, 95 % da
xilose havia sido consumida depois de 81 h de
fermentao enquanto no hidrolisado de madeira de
E. globulus o consumo foi de 80%. A produo de
xilitol foi fortemente inibida no meio de hidrolisado
de madeira de E. globulus cuja concentrao foi de
apenas 1,5 g/L apresentando baixos valores de
parmetros fermentativos. Por outro lado, a produo
de xilitol foi satisfatria nos meios constitudos dos
hidrolisados de farelo de cevada, sabugos de milho e
folhas de milho. Depois de 81 h, as concentraes
de xilitol variaram entre 21,2 a 29 g/L sendo os valores
de parmetros fermentativos razoveis,
considerando-se a ausncia de tratamentos de
destoxificao dos hidrolisados.
Canilha (2001) estudou a influncia da
temperatura, concentrao cida e relao massa
seca: soluo cida na hidrlise da palha de trigo
mediante um planejamento fatorial para identificar
os fatores importantes para o processo. A varivel
analisada foi a concentrao de xilose presente no
hidrolisado, que foi mais elevada quando a palha de
trigo foi tratada com 1% de soluo cida, na
proporo de 1:15 de palha seca: soluo cida,
temperatura de 140 C e tempo de 20 minutos.
Canilha, Cndido e Silva (2002) utilizaram o
hidrolisado hemicelulsico de palha de trigo
concentrado, tratado, autoclavado a 111 C por 15
minutos e suplementado com 1 g/L de sulfato de
amnio e 5g /L de extrato de arroz como meio de
cultivo para Candida guilliermondii para a
produo de xilitol. A fermentao foi conduzida em
biorreator utilizando inculo de 0,5 g de clulas/L, a
30 C, com agitao de 300 rpm e aerao de 0,4
vvm. Amostras foram retiradas periodicamente para
monitorar o consumo de xilose e produo de xilitol.
A maior eficincia de converso (96%) foi obtida
aps 54 h de fermentao e apresentou os seguintes
parmetros fermentativos: produtividade de 0,503 g/L.h,
rendimento de 0,889 g de xilitol/ g de xilose e produo
de xilitol de 27,86 g/L.

322
Semina: Cincias Agrrias, Londrina, v. 25, n. 4, p. 315-330, out./dez. 2004

Resduos agroindustriais para produo biotecnolgica de xilitol

Tabela 2. Condies timas de hidrlise e composio qumica parcial dos hidrolisads de farelo de cevada, sabugos de
milho, folhas de milho e madeira de eucalipto.
Resduo

Condies de
hidrlise
H2SO4 3%
15 minutos
1:8

A
(g/L)
xilose: 35,6
glicose: 5,9
arabinose: 7,1
ac.actico: 2,4
furfural: 0,3
HMF: < 0,1

B
(g/L)
xilose 45,4
glicose: 7,5
arabinose: 9,1
ac.actico: 3,1
furfural: 0,1
HMF: < 0,1

Sabugos de milho

H2SO4 2%
15 minutos
1:8

xilose: 35,3
glicose: 3,2
arabinose: 4,6
ac.actico: 3,7
furfural: 0,3
HMF: < 0,1

xilose: 42,9
glicose: 3,9
arabinose: 5,6
ac.actico: 4,5
furfural: 0,2
HMF: < 0,1

Folhas de milho

H2SO4 3%
15 minutos
1:16

xilose: 22,5
glicose: 2,0
arabinose: 3,6
ac.actico: 2,3
furfural: 0,3
HMF: < 0,1

xilose: 48,1
glicose: 4,3
arabinose: 7,7
ac.actico: 4,6
furfural: 0,1
HMF: < 0,1

Madeira de E.
globulus

H2SO4 3%
60 minutos
1:8

xilose: 17,1
glicose: 1,7
arabinose: 2,1
ac.actico: 5,2
furfural: 0,5
HMF: < 0,1

xilose: 41,9
glicose: 3,2
arabinose: 5,1
ac.actico: 12,6
furfural: 0,1
HMF: < 0,1

Farelo de cevada

C
(g/L)
xilose: 1,1
glicose: 0,3
arabinose: 2,2
ac.actico: 0,5
furfural : < 0,1
HMF: < 0,1
xilitol: 26,6
etanol: 6,7
xilose: 2,2
glicose: 0,7
arabinose: 4,7
ac.actico: 2,0
furfural: < 0,2
HMF: < 0,1
xilitol: 21,2
etanol: 2,0
xilose: 2,6
glicose: 0,5
arabinose: 5,8
ac.actico: 1,6
furfural: < 0,1
HMF: < 0,1
xilitol: 21,2
etanol: 5,4
xilose: 3,5
glicose: 2,1
arabinose: 1,5
ac.actico: 12,3
furfural: < 0,1
HMF: < 0,1
xilitol: 1,5
etanol: 9,7

Composio dos hidrolisados antes da neutralizao (A), aps concentrao por evaporao e esterilizao (B) e
depois de terminada a fermentao (C).
Fonte: Cruz et al. (2000).
Tabela 3. Parmetros fermentativos obtidos na fermentao dos hidrolisados de farelo de cevada, sabugos de milho,
folhas de milho e madeira de eucalipto por Debaryomyces hansenii.

Farelo de cevada

Resduo

P (g/L)
26,6

Q p (g/L.h)
0,33

YP/S (g/g)
0,61

qp (g/g.h)
0,032

Sabugos de milho

21,2

0,26

0,52

0,025

Folhas de milho

29,0

0,36

0,64

0,036

Madeira de E. globulus

1,5

0,018

0,044

0,006

P: produo mxima de xilitol; Qp: produtividade; YP/S: rendimento em produto; qp: taxa de formao de produto especfico
Fonte: Cruz et al. (2000).

Semina: Cincias Agrrias, Londrina, v. 25, n. 4, p. 315-330, out./dez. 2004

323

Tamanini, C.; Hauly, M. C. O.

Canettieri, Silva e Felipe (2001) avaliaram a

bioconverso de xilose em xilitol por Candida
guilliermondii a partir de hidrolisado hemicelulsico
de Eucalyptus grandis obtido por hidrlise com cido
sulfrico. O hidrolisado foi obtido de cavacos de
eucaliptos com dimenses de 20 x 10 x 5 mm com
29% de umidade. A relao (p/v) cavacos: soluo
de H2SO4 0,35% foi de 1: 4,5, a temperatura 156 C
e o tempo 27 minutos. O hidrolisado foi trs vezes
concentrado sob vcuo a 75C e sua composio foi
determinada antes e depois deste processo como
pode ser observado na Tabela 4.
Tabela 4. Composio qumica parcial do hidrolisado
hemicelulsico de Eucalyptus grandis original e concentrado
Componentes
Glicose
Xilose
Arabinose
cido actico
Fenis

Hidrolisado
original (g/L)
2,54
19,21
0,41
5,03
---

Hidrolisado
concentrado (g/L)
6,50
59,21
0,98
6,33
1,25

Fonte: Canettieri; Silva e Felipe (2001).

O pH do hidrolisado foi elevado de 1,9 para 7,0

com CaO e depois acidificado com H3PO4 at pH
5,5. Em seguida foi submetido adsoro com carvo
ativo 10% sob agitao de 200 rpm, por 1 hora a 30
C. Depois deste tratamento a quantidade de xilose
era de 15 g/L aps a primeira concentrao e 45 g/L
aps a terceira concentrao.
Para ser utilizado como meio de cultivo para
produo de xilitol, o hidrolisado teve o pH e
concentrao de xilose ajustados e adio de sulfato
de amnio e farelo de arroz de acordo com um
modelo fatorial de 24.Os coeficientes de regresso
demonstraram que o pH e a concentrao de xilose
tiveram efeito significativo e positivo na produo de
xilitol enquanto o sulfato de amnio teve efeito
significativo porm negativo. J o farelo de arroz no
apresentou efeito significativo na produo do xilitol e
por isso foi utilizado em pequena quantidade (5g/L).
O modelo matemtico obtido previa uma produo
de xilitol de 8,34 g/L utilizando hidrolisado contendo

60 g/L de xilose, suplementado com 1,1 g/L de sulfato

de amnio e pH inicial 8,0. Nestas condies de
cultivo a produo de xilitol foi de 10,0 g/L, valor que
est de acordo com o modelo previsto considerando
o desvio padro.
Mussato e Roberto (2002) utilizaram a palha de
arroz como substrato na produo de xilitol. Para
tanto a mesma foi submetida a um processo de
hidrlise cida (H 2SO4, 1% p/v) sob condies
brandas (120 C, 30 minutos). Em seguida o
hidrolisado foi concentrado sob vcuo a 70 C com
vistas a aumentar a concentrao de xilose e tratado
com carvo ativo em p na proporo de 1g de
carvo: 40 g de hidrolisado em pH 2,0, agitao de
150 rpm, por 60 minutos a 45 C. Este hidrolisado foi
caracterizado fsico-quimicamente em suas formas
original, concentrado e tratado para determinao dos
teores de glicose, xilose, arabinose, furfural,
hidroximetilfurfural (HMF) e cido actico e
estimativa dos produtos de degradao de lignina
(PDL) conforme pode ser observado na Tabela 5.

Tabela 5. Caracterizao fsico-qumica do hidrolisado

hemicelulsico de palha de arroz original, concentrado e
tratado com carvo ativo.

Componentes Original Concentrado Tratado

Glicose
3,29
19,80
18,75
Xilose
18,33
119,90
117,39
Arabinose
3,40
22,90
21,78
Furfural
0,10
0,07
0,00
*HMF
0,17
0,32
0,11
cido actico
1,05
2,28
1,97
0,16
0,52
0,38
**PDL
pH
1,22
0,40
0,40
*Hidroximetilfurfural **Produtos de Degradao da Lignina
Fonte: Mussato e Roberto (2002).

A anlise da Tabela 5 mostra que o processo de

hidrlise foi capaz de promover o fracionamento
seletivo dos acares presentes na frao
hemicelulsica da palha de arroz, liberando dentre
estes, a xilose como principal constituinte. O processo
fermentativo foi realizado com Candida

324
Semina: Cincias Agrrias, Londrina, v. 25, n. 4, p. 315-330, out./dez. 2004

Resduos agroindustriais para produo biotecnolgica de xilitol

guilliermondii durante 116 h tendo rendimento de

0,72 g de xilitol/ g de xilose e produtividade de 0,57
g/ L.h sem nenhuma suplementao do hidrolisado.
Herrera et al. (2004) avaliaram o efeito da
concentrao de cido clordrico na hidrlise da palha
de sorgo sob presso atmosfrica. As hidrlises
foram conduzidas a 100 C utilizando solues de

HCl a 2, 4 ou 6% (p/v) e uma relao de 1g de palha:

10 g de soluo cida. Aps 20, 40, 60, 180 e 300
minutos foram retiradas amostras do meio reacional
para determinao da composio fsico-qumica do
hidrolisado conforme pode ser observado na Tabela
6 onde o tempo de reao refere-se ao momento em
que foi obtida a mxima concentrao de xilose.

Tabela 6. Composio fsico-qumica parcial do hidrolisado de palha de sorgo.

[HCl] (m/v)
2
4
6

Xilose
17,3
19,9
19,7

Composio (g/L)
Glicose
Furfural
3,8
1,0
5,1
1,1
5,3
1,7

cido actico
2,5
3,6
3,6

Tempo (min)
300
300
180

Fonte: Herrera et al. (2004).

O modelo matemtico obtido no estudo prev

mxima concentrao de xilose (21,3 g/L) utilizando
HCl 6% com tempo de hidrlise de 83 minutos.
Felipe et al. (2003) hidrolisaram casca de aveia
utilizando relao de 1:4,5 para casca de aveia:
soluo de H2SO4 0,35% temperatura de 156 C
durante 27 minutos. O hidrolisado hemicelulsico foi
tratado a partir do ajuste do pH inicial 2,22 para pH
7,0, com CaO comercial seguido do abaixamento para
pH 2,5 com H3PO4. Em seguida este foi submetido
adsoro em carvo ativado (1%) em frascos
agitados a 200 rpm, 60C por 30 minutos. A
composio do hidrolisado aps este tratamento pode
ser observada na Tabela 7.

Tabela 7. Composio qumica parcial do hidrolisado

hemicelulsico de casca de aveia aps tratamento com
CaO, H3PO4 e carvo ativo.

Componentes
Xilose
Glicose
Arabinose
cido actico
Furfural
Hidroximetilfurfural

A produo de xilitol por Candida guilliermondii

neste hidrolisado suplementado com (NH4)2SO4
(2 g/L), soluo de extrato de farelo de arroz (20 g/
L) e CaCl2.2H2O (0,1 g/L) teve rendimento de 0,54
g/ g de xilose e produtividade de 0,34 g/L. h aps 46
horas de cultivo.

Comparao da produo de xilitol a partir de

diferentes resduos agroindustriais
Na Tabela 8 esto apresentadas as condies e
hidrlise cida e parmetros fermentativos da
produo de xilitol a partir dos diferentes resduos
agroindustriais apresentados anteriormente. Podem
ser observadas grandes variaes nestes parmetros
em funo das condies de hidrlise, do tipo de
tratamento aos quais foram submetidos os
hidrolisados e dos diferentes microrganismos e
condies de cultivo empregadas.

Composio (g/L)
32,33
1,61
3,03
3,63
0,47
0,22

Fonte: Felipe et al. (2003).

Semina: Cincias Agrrias, Londrina, v. 25, n. 4, p. 315-330, out./dez. 2004

325

Tamanini, C.; Hauly, M. C. O.

Tabela 8. Condies de hidrlise cida e alguns parmetros fermentativos da produo de xilitol utilizando diferentes
resduos agroindustriais
Matria prima

[H2SO4]

Temp.
(C)

R/A

Tempo
(minutos)

[xilose]
(g/L)

[xilitol]
(g/L)

Rend. em
produto
(g/g)

Prod.
Volumtrica
(g/L.h)

Bagao de cana
Farelo de cevada
Sabugo de milho
Folhas de milho
Eucalyptus globulus
Eucalyptus grandis

100 mg/g ms
3% (m/v)
2% (m/v)
3% (m/v)
3% (m/v)
130 mg/g ms
1 % (m/v)
0,35% (m/v)
0,35% (m/v)

121
130
130
130
130
156
140
120
156

1:10
1:8
1:8
1:16
1:8
1:4,5
1:15
__
1:4,5

10
15
15
15
60
27
20
30
27

15,7
45,4
42,9
48,1
41,9
19,21
15,33
18,33
32,33

__
26,6
29,0
21,2
1,5
10,0
27,86
__
__

__
0,33
0,26
0,36
0,018
__
0,889
0,72
0,34

0,47
__
__
__
__
__
0,503
0,57
0,54

Palha de trigo
Palha de arroz
Casca de aveia

[H2SO4] = concentrao de cido sulfrico

Temp (C) = temperatura C
[xilose] = concentrao de xilose (g/L)
[xilitol] = concentrao de xilitol (g/l)

Referncia

Alves et al., 1998

Cruz et al., 2000
Cruz et al., 2000
Cruz et al., 2000
Cruz et al., 2000
Canettieri; Silva; Felipe, 2001
Canilha, 2001
Mussato; Roberto, 2002
Felipe et al., 2003

Prod volumtrica = produtividade volumtrica (g/L.h)

mg/g ms = mg de H2SO4/ g de matria seca
Rend. em produto = rendimento em produto (g/g)
R/A = relao massa seca : soluo cida

Recuperao do xilitol do meio fermentado

A recuperao do xilitol o passo mais complexo
de todo o processo fermentativo devido baixa
concentrao do produto e complexa composio do
caldo fermentado. A literatura sobre recuperao de
poliis de meios fermentados bastante escassa
(FAVERI et al., 2002).
Gurgel et al. (1995) desenvolveram uma
metodologia para recuperao do xilitol produzido por
fermentao do hidrolisado hemicelulsico de bagao
de cana-de-acar. A melhor condio de
recuperao consistia na clarificao do meio com
carvo ativado (25g/100mL de meio fermentado) a
80 C, pH 6,0 durante 60 minutos. O meio clarificado
foi tratado com resinas de troca inica, um
procedimento que no se mostrou eficiente para
purificao. Em seguida a soluo foi concentrada e
submetida cristalizao a 15C monitorada por
cinco semanas. Como durante este perodo no
houve a formao de cristais visveis, utilizou-se xilitol
comercial na concentrao de 1 g/L como semente
de cristalizao. Aps uma semana a 15C os
cristais foram formados. Entretanto, apresentavamse envoltos em uma soluo viscosa e rica em
impurezas provenientes do caldo fermentado e que
no foram removidas pelo tratamento com carvo

ativado ou com resinas de troca inica. Apesar disto,

anlises dos cristais mostraram serem estes bastante
puros, com forma e cor uniformes.
Faveri et al. (2002) descrevem a recuperao do
xilitol por cristalizao de solues de solues
sintticas e de hidrolisados hemicelulsicos
fermentados. O processo consistia na evaporao
da soluo a baixa presso at super saturao,
resfriamento da soluo e separao dos cristais
obtidos por centrifugao e filtrao. Os melhores
resultados, em termos de rendimento de cristalizao
(0,56) ou grau de pureza (1,00), foram obtidos em
soluo contendo 730 g/L a uma temperatura de 5
C. Os autores concluram que a recuperao do xilitol
de hidrolisados hemicelulsicos fermentados por
cristalizao um processo promissor.

Consideraes finais
O interesse na obteno e aplicaes do xilitol
tm aumentado nos ltimos anos e como
conseqncia tem-se procurado diminuir os custos
de produo. O processo qumico tradicionalmente
utilizado em sua obteno bastante oneroso pois
necessita de extensivas operaes de purificao,
as quais elevam custos e demandam tempo. O

326
Semina: Cincias Agrrias, Londrina, v. 25, n. 4, p. 315-330, out./dez. 2004

Resduos agroindustriais para produo biotecnolgica de xilitol

processo biotecnolgico representa uma alternativa

promissora, uma vez que utiliza microrganismos
especficos para obteno deste poliol e que no
exigem a purificao requerida no processo qumico.
Em adio contribui com a melhoria das condies
do meio ambiente pois so utilizados resduos
agroindustriais como fonte de xilose para a
bioconverso deste produto.

Referncias
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