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UNIVERSIDADE FEDERAL DE SO CARLOS

CENTRO DE CINCIAS EXATAS E TECNOLOGIA


DEPARTAMENTO DE QUMICA
PROGRAMA DE PS-GRADUAO EM QUMICA

ESTUDOS FSICO-QUMICOS DO EFLUENTE PRODUZIDO POR


FOSSA SPTICA BIODIGESTORA E O IMPACTO DO SEU USO NO
SOLO

Adriana Soares Faustino*

Dissertao apresentada ao Departamento de


Qumica da Universidade Federal de So
Carlos como parte dos requisitos para obteno
do ttulo de Mestre em Qumica, rea de
concentrao: Qumica Analtica.

Orientadora: Dra. Ana Rita de Araujo Nogueira


Co-orientador: Dr. Wilson Tadeu Lopes da Silva
* Bolsista CNPq
So Carlos
2007

Ficha catalogrfica elaborada pelo DePT da


Biblioteca Comunitria da UFSCar

F268ef

Faustino, Adriana Soares.


Estudos fsico-qumicos do efluente produzido por fossa
sptica biodigestora e o impacto do seu uso no solo /
Adriana Soares Faustino. -- So Carlos : UFSCar, 2007.
121 f.
Dissertao (Mestrado) -- Universidade Federal de So
Carlos, 2007.
1. Efluente. 2. Anlise espectral. 3. Matria orgnica. 4.
cido hmico. I. Ttulo.
CDD: 543 (20a)

A necessidade ensina a lebre a correr.


(Provrbio gacho)

Deus por iluminar meus caminhos,

Aos meus amados pais Antnio e Margarida, pilares da minha vida; aos meus
queridos irmos Ademir e Alexandre pelo apoio e incentivo.

Dedico

AGRADECIMENTOS
Dra. Ana Rita de Arajo Nogueira pela orientao, sugestes e auxlios na realizao deste
trabalho.
Ao Dr. Wilson Tadeu Lopes da Silva pela orientao, amizade e confiana durante a
realizao deste trabalho.
Ao Dr. Antnio Pereira Novaes pelo atencioso acompanhamento durante o trabalho.
Ao Dr. Marcelo Luiz Simes, Dr. Joaquim Arajo de Nbrega, Dra. Dbora Marcondes
Bastos Pereira Milori, Dr. Ladislau Martin-Neto pelas sugestes e auxlio na realizao deste
trabalho.
Ao Ren e Godoy, pela valiosa e pronta ajuda sempre que necessitei.
Dra. Maria Olmpia de Oliveira Rezende e ao pessoal do laboratrio de Qumica Ambiental
do IQSC-USP pela contribuio nas medidas de carbono.
Llian, pela valiosa ajuda no laboratrio.
Ao Marcos e Gilberto Batista, da Embrapa Pecuria Sudeste, pelas medidas de macro e
micronutrientes no solo.
Cristina, da Embrapa Pecuria Sudeste, pelo auxlio no laboratrio.
Aos Srs. Gilberto Morsseli e Paulo, responsveis pelo Stio Aparecida e pela Fazenda Morro
Verde, respectivamente, onde foram coletadas as amostras da Fossa Sptica Biodigestora.
Sobloco Construtora S.A., em especial ao Engenheiro Agrnomo Loureno Chermam
Salles da Fazenda Santa Cndida, onde foram coletadas as amostras de solo.
s secretrias do Programa de Ps-graduao da UFSCar, Cristina, Aryane e Luciane, pela
ateno, simpatia e ajuda.
Aos meus velhos amigos Daniela D., Eduardo, Marcus, Nilva, Sheila, Shirlei, Tnia, Tereza e
Thatiane, que mesmo distantes, nunca deixaram de estar presentes. Obrigada pelo carinho.
Aos novos, Kelly, Eveline, Ursula, Fernanda, Llian, Daniel e Andr pela pacincia,
companheirismo, boas conversas e risadas, que tornaram mais agradvel minha estadia em
So Carlos, muito obrigada.
Aos colegas e amigos de trabalho Aline, Ana Flvia, Andr, Bruno, Clber, Danielle, Edilene,
Fernanda, Fernando, Kelly, Larissa, Lilian, Lucimar, Robson e Ursula.
Aos colegas e amigos de trabalho do GAIA, Eveline, Carla, Silvria, Rodolfo, Edivan, Mrio,
Fernanda, Wladiana, Alexandra, Daniela pelas sugestes e auxilio no laboratrio.
Embrapa Instrumentao Agropecuria e Embrapa Pecuria Sudeste por possibilitar a
realizao deste trabalho.
Universidade Federal de So Carlos, em especial ao Departamento de Qumica.

Ao Conselho Nacional de Desenvolvimento Cientfico e Tecnolgico (CNPq) pela bolsa


concedida.
Ao Ministrio do Desenvolvimento Agrrio pelo apoio financeiro.
minha querida famlia: Pai, Me, Mimi e Sandro pelo amor.
Ao MUR onde conheci pessoas maravilhosas, verdadeiros anjos de Deus na minha vida, que
me ensinaram a SONHAR.
JESUS, amigo de todas as horas, fonte de inspirao e vida, por no me deixar desistir duas
vezes no mesmo dia, meu eterno agradecimento e espera.
E a todos que de alguma forma contriburam significativamente para a realizao deste
trabalho, obrigada.

SUMRIO

LISTA DE FIGURAS............................................................................................................... I
LISTA DE TABELAS ........................................................................................................... IV
LISTA DE ABREVIATURAS E SIGLAS ............................................................................ V
RESUMO................................................................................................................................ VI
ABSTRACT .......................................................................................................................... VII
CAPTULO 1 INTRODUO ............................................................................................ 1
CAPTULO 2 REVISO DE LITERATURA....................................................................3
2.1 TRATAMENTO DE ESGOTO .............................................................................................. 3
2.1.1 Tratamento de Esgoto na rea Rural..................................................................... 4
2.2 Processos Biolgicos................................................................................................. 5
2.2.1 Digesto Anaerbia ............................................................................................ 6
2.3 FOSSA SPTICA BIODIGESTORA ...................................................................................... 7
2.4 PROPRIEDADES QUMICAS DO SOLO................................................................................ 9
2.5 MATRIA ORGNICA DO SOLO ..................................................................................... 11
2.5.1 Substncias Hmicas............................................................................................ 12
2.5.1.1 Modelo Macromolecular para as Substncias Hmicas ................................ 12
2.5.1.2 Modelo Supramolecular para as Substncias Hmicas ................................. 14
2.6 DISPONIBILIDADE DE NUTRIENTES NO SOLO ................................................................. 15
2.7 DISPOSIO DE RESDUOS NO SOLO.............................................................................. 16
2.8 EFEITO DA ADIO DE RESDUOS ORGNICOS NAS CARACTERSTICAS QUMICAS E
FSICAS DO SOLO ................................................................................................................... 17
2.9 MTODOS ESPECTROSCPICOS ..................................................................................... 18
2.9.1 Espectroscopia de Infravermelho com Transformada de Fourier (FTIR)...........18
2.9.2. Espectroscopia de Ressonncia Paramagntica Eletrnica (RPE) .................... 20
2.9.3 Espectroscopia de Ressonncia Magntica Nuclear (RMN) ............................... 22
2.9.4 Espectroscopia de Fluorescncia em Soluo ..................................................... 26
2.9.4.1 Modalidade de Emisso................................................................................. 28
2.9.4.2 Modalidade Sincronizada .............................................................................. 30
2.9.5 Espectroscopia de Fluorescncia Induzida por Laser (FIL)................................ 31
2.10 ESPECTROMETRIA DE EMISSO TICA COM PLASMA ACOPLADO INDUTIVAMENTE (ICP
OES) ..................................................................................................................................... 33
2.11 COMPOSIO ELEMENTAR .......................................................................................... 34
CAPTULO 3 OBJETIVOS ............................................................................................... 36
CAPTULO 4 MATERIAIS E MTODOS...................................................................... 37
4.1 PARTE 1: AMOSTRAS DE EFLUENTE .............................................................................. 37
4.1.1 Amostragem e Preparo do Material da Fossa Sptica Biodigestora................... 37
4.1.2 Anlises do Efluente ............................................................................................. 40
4.1.2.1 Parmetros Fsico-qumicos .......................................................................... 40
4.1.2.2 Condutividade e pH ....................................................................................... 40

4.1.2.3 Anlise Elementar e Teor de Cinzas.............................................................. 40


4.1.2.4 Determinao de Macro e Micronutrientes no Efluente por Espectrometria de
Emisso tica com Plasma Acoplado Indutivamente (ICP OES) ...............................41
4.1.2.5 Anlises Espectroscpicas............................................................................. 41
4.1.2.5.1 Espectroscopia de Infravermelho com Transformada de Fourier (FTIR)
.................................................................................................................................. 41
4.1.2.5.2 Espectroscopia de Ressonncia Paramagntica Eletrnica (RPE) ......... 41
4.1.2.5.2 Espectroscopia de Ressonncia Magntica Nuclear............................... 42
4.2 PARTE 2: AMOSTRAS DE SOLO ...................................................................................... 43
4.2.1 Amostragem e Preparo de Solo ............................................................................ 43
4.2.2 Anlises do Solo ................................................................................................... 44
4.2.2.1 Condutividade e pH do Extrato do Solo........................................................ 44
4.2.2.2 Anlise de Macro e Micronutrientes Disponveis no Solo ............................ 44
4.2.2.3.1 Extrao de Macronutrientes (Ca, Mg, K, P) com Mistura de Resinas
Trocadora de ons ..................................................................................................... 44
4.2.2.3.2 Extrao de Micronutrientes (Cu, Fe, Mn, Zn) Usando Soluo de DTPA
em pH 7,3 ................................................................................................................. 45
4.2.2.3 Determinao do Carbono Orgnico Total....................................................46
4.2.2.4 Espectroscopia de Fluorescncia Induzida por Laser (FIL) ..........................46
4.3 PARTE 3: AMOSTRAS DE CIDOS HMICOS EXTRADOS DO SOLO ................................ 47
4.3.1 Extrao e Fracionamento de cidos Hmicos do Solo ...................................... 47
4.3.2 Anlises dos cidos Hmicos ............................................................................... 48
4.3.2.1 Anlise Elementar e Teor de Cinzas.............................................................. 48
4.3.2.2 Anlises Espectroscpicas............................................................................. 48
4.3.2.2.1 Espectroscopia de Infravermelho com Transformada de Fourier (FTIR)
.................................................................................................................................. 48
4.3.2.2.2 Espectroscopia de Ressonncia Paramagntica Eletrnica (RPE) ......... 48
4.3.2.2.3 Espectroscopia de Ressonncia Magntica Nuclear (RMN)..................49
4.3.2.2.4 Espectroscopia de Fluorescncia em Soluo ........................................ 49
CAPTULO 5 RESULTADOS E DISCUSSO ...............................................................51
5.1 CARACTERIZAO DO EFLUENTE ................................................................................. 51
5.1.1 Parmetros Fsico-qumicos ................................................................................ 51
5.1.2 Anlise Elementar ................................................................................................ 53
5.1.3 Macro e Micronutrientes do Efluente................................................................... 55
5.1.4 Anlises Espectroscpicas.................................................................................... 56
5.1.4.1 Espectroscopia de Infravermelho com Transformada de Fourier (FTIR) .....56
5.1.4.2 Espectroscopia de Ressonncia Paramagntica Eletrnica (RPE) ................ 60
5.1.4.3 Espectroscopia de Ressonncia Magntica Nuclear (RMN)......................... 62
5.2 IMPACTO CAUSADO PELA ADIO DE EFLUENTE NO SOLO ........................................... 73
5.2.1 Condutividade e pH .............................................................................................. 73
5.2.2 Macro e Micronutrientes Disponveis no Solo ..................................................... 74
5.2.3 Carbono Orgnico Total (COT)........................................................................... 75
5.2.3 Espectroscopia de Fluorescncia Induzida por Laser (FIL)................................ 76
5.3 MATRIA ORGNICA DO SOLO (CIDOS HMICOS)...................................................... 77
5.3.1 Anlise Elementar ................................................................................................ 77
5.3.2 Anlises Espectroscpicas.................................................................................... 79
5.3.2.1 Espectroscopia de Infravermelho com Transformada de Fourier (FTIR) .....79
5.3.2.2 Espectroscopia de Ressonncia Paramagntica Eletrnica (RPE) ................ 81
5.3.2.3 Espectroscopia de Ressonncia Magntica Nuclear (RMN)......................... 84
5.3.2.4 Espectroscopia de Fluorescncia em Soluo ............................................... 87

5.3.2.4.1 Modalidade de Emisso.......................................................................... 87


5.3.2.4.2 Modalidade Sincronizada ....................................................................... 92
CAPTULO 6 CONCLUSES .......................................................................................... 95
CAPTULO 7 REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS .....................................................97

LISTA DE FIGURAS
FIGURA 2.1 A. Fossa rudimentar mostrada em um contexto ambiental. B. Esquema de uma fossa rudimentar 4
FIGURA 2.2 Esquema da via de degradao anaerbia da matria orgnica ...................................................... 6
FIGURA 2.3 Esquema do sistema da fossa sptica biodigestora (NOVAES et al., 2002)................................... 8
FIGURA 2.4 Modelo de estrutura para AH proposto por SCHULTEN e SCHNITZER (1993)........................ 13
FIGURA 2.5 Modelo tridimensional de AH proposto por SCHULTEN e SCHNITZER (1997). Carbono : azul;
Oxignio: vermelho; Nitrognio: preto e Hidrognio: branco. As letras A, B e C indicam os espaos vazios
presentes, provavelmente, na estrutura das SH ............................................................................................ 14
FIGURA 2.6 Esquema de estrutura das SH proposto por SIMPSON et al. (2002), unidades vermelhas: ctions
metlicos; unidades pretas: polissacardeos; unidades azuis: polipeptdios; unidades verdes: cadeias
alifticas e unidades marrons: fragmentos aromticos................................................................................. 15
FIGURA 2.7 A. Esquema simplificado do fenmeno de RPE, mostrando o efeito Zeeman para um sistema com
I = ; B. caracterstica do espectro de absoro; e C. a primeira derivada do espectro de absoro, a qual
normalmente detectada nos espectrmetros de RPE, indicando os parmetros: fator g, largura de linha do
sinal (H) e intensidade do sinal (I)............................................................................................................. 20
FIGURA 2.8 Esquema da estabilizao do radical livre do tipo semiquinona (SENESI e SCHNITZER, 1977)
..................................................................................................................................................................... 21
FIGURA 2.9 Espectro tpico de RPE de cido hmico mostrando o sinal do radical livre do tipo semiquinona
..................................................................................................................................................................... 22
FIGURA 2.10 Dois nveis de energia dos hidrognios, como descritos pela mecnica quntica, em um campo
magntico de magnitude B0. N a populao. A direo do campo magntico () est para cima,
paralelo ordenada, e B0 aumenta para a direita.......................................................................................... 23
FIGURA 2.11 Na rotao no ngulo mgico, a amostra gira fazendo um ngulo de 54,74 com a direo do
campo magntico (B0) aplicado. O movimento rpido sobre este ngulo promedia em zero as interaes
dipolo-dipolo e as anisotropias do deslocamento qumico (ATKINS, P. e PAULA, J. 2004)..................... 25
FIGURA 2.12 Espectro RMN de 13C tpico de AH mostrando os grupos funcionais associados s bandas
correspondentes (SKJEMSTAD et al., 1998) .............................................................................................. 26
FIGURA 2.13 Nveis vibracionais e eletrnicos de uma molcula orgnica, e caminhos de decaimento
radiativos e no radiativos (NARIMOTO, 2006)......................................................................................... 27
FIGURA 2.14 Espectro de emisso de fluorescncia de AH extrados de solo tratado com lodo de esgoto,
obtido segundo metodologia de ZSOLNAY et al., (1999). Comprimento de onda de excitao exc= 240
nm (NARIMOTO, 2006) ............................................................................................................................. 29
FIGURA 2.15 Espectro de emisso de fluorescncia de AH extrados de solo tratado com lodo de esgoto,
obtido segundo metodologia de MILORI et al., (2002). Comprimento de onda de excitao exc= 465 nm
(NARIMOTO, 2006) ................................................................................................................................... 30
FIGURA 2.16 Espectro de varredura sincronizada de AH extrados de solo tratado com lodo de esgoto, obtido
segundo metodologia de KALBITZ et al., (2000). = 55 nm (NARIMOTO, 2006) ............................... 31
FIGURA 2.17 Montagem experimental para realizao de anlises de fluorescncia induzida por laser
(NARIMOTO, 2006) ................................................................................................................................... 32
FIGURA 2.18 A. Pastilhas de solo usadas para obteno dos espectros. B. laser incidindo sobre uma pastilha
de solo.......................................................................................................................................................... 33

ii

FIGURA 4.1 Sistema da fossa sptica biodigestora instalado no Stio Aparecida So Carlos/SP .................. 37
FIGURA 4.2 Sistema da fossa sptica biodigestora instalado na Fazenda Morro Verde Itirapina/SP ............ 38
FIGURA 4.3 Sistema da fossa sptica biodigestora instalado na Fazenda Santa Cndida So Carlos/SP ...... 38
FIGURA 5.1 Espectros de FTIR do material liofilizado das trs caixas do sistema da fossa sptica biodigestora.
O inoculado com esterco Ovino; Os nmeros iniciais 1, 2 e 3 referem-se, respectivamente, ordem de
coleta das amostras (10/2005; 07/2006 e 10/2006) e os seguintes letra, s caixas 1, 2 e 3 do sistema ..... 57
FIGURA 5.2 Espectros de FTIR do material liofilizado das trs caixas do sistema da fossa sptica biodigestora.
B inoculado com esterco bovino; Os nmeros iniciais 1,2 e 3 referem-se, respectivamente, ordem de
coleta das amostras (10/2005; 07/2006 e 10/2006) e os seguintes letra, s caixas 1, 2 e 3 do sistema ..... 58
FIGURA 5.3 Concentrao de radicais livres do tipo semiquinona em spin g-1C-1 obtida para as amostras do
material liofilizado das trs caixas do sistema da fossa sptica biodigestora. O inoculado com esterco
Ovino; B inoculado com esterco Bovino; 2FSC3 - Fazenda Santa Cndida. Os nmeros iniciais 1, 2 e 3
referem-se, respectivamente, ordem de coleta das amostras (10/2005; 07/2006 e 10/2006)..................... 62
FIGURA 5.4 Espectro de RMN de 13C de amostras de efluente liofilizado. O inoculado com esterco Ovino;
Os nmeros iniciais 1, 2 e 3 referem-se, respectivamente, ordem de coleta das amostras (10/2005;
07/2006 e 10/2006) e os seguintes letra, s caixas 1, 2 e 3 do sistema...................................................... 65
FIGURA 5.5 Espectro de RMN de 13C de amostras de lodo liofilizado. L2O lodo do sistema inoculado com
esterco Ovino coletado em 07/2006; Os nmeros seguintes letra referem-se s caixas 1, 2 e 3 do sistema
..................................................................................................................................................................... 66
FIGURA 5.6 Espectro de RMN de 13C de amostras de efluente liofilizado. B inoculado com esterco Bovino;
Os nmeros iniciais 1, 2 e 3 referem-se, respectivamente, ordem de coleta das amostras (10/2005;
07/2006 e 10/2006) e os seguintes letra, s caixas 1, 2 e 3 do sistema...................................................... 67
FIGURA 5.7 Espectro de RMN de 13C de amostras de lodo liofilizado. L2B lodo do sistema inoculado com
esterco Bovino coletado em 07/2006; Os nmeros referem-se s caixas 1, 2 e 3 do sistema ...................... 68
FIGURA 5.8 Espectro de RMN de 13C de amostras de efluente (A) e lodo (B). 2FSC3 Fazenda Santa
Cndida, caixa 3, coleta 2; L2FSC3 lodo da caixa 3 do sistema da Fazenda Santa Cndida coletado em
07/2006 ........................................................................................................................................................ 68
FIGURA 5.9 Porcentagem dos grupos funcionais obtidas atravs dos espectros de RMN de 13C com
VACP/MAS das amostras de efluente de cada caixa e nas trs coletas. O inoculado co esterco ovino; B
inoculado com esterco Bovino; Os nmeros iniciais 1, 2 e 3 referem-se, respectivamente, ordem de
coleta das amostras (10/2005; 07/2006 e 10/2006) e os seguintes letra, s caixas 1, 2 e 3 do sistema ..... 69
FIGURA 5.10 Mdia da porcentagem dos grupos funcionais obtidas atravs dos espectros de RMN de 13C com
VACP/MAS das amostras de efluente em cada coleta. O sistema inoculado com esterco ovino; B
sistema inoculado com esterco Bovino; Os nmeros iniciais 1, 2 e 3 referem-se, respectivamente, ordem
de coleta das amostras (10/2005; 07/2006 e 10/2006) ................................................................................. 70
FIGURA 5.11 Porcentagem dos grupos funcionais obtidas atravs dos espectros de RMN de 13C com
VACP/MAS das amostras de lodo coletado em 07/2006. L2O lodo do sistema inoculado com esterco
ovino; L2B lodo do sistema inoculado com esterco Bovino; Os nmeros seguintes letra referem-se s
caixas 1, 2 e 3 do sistema............................................................................................................................. 71
FIGURA 5.12 Porcentagem dos grupos funcionais obtidas atravs dos espectros de RMN de 13C com
VACP/MAS das amostras de efluente e lodo. 2FSC3 Fazenda Santa Cndida, caixa 3, coleta 2; L2FSC3
lodo da caixa 3 do sistema da Fazenda Santa Cndida coletado em 07/2006 ........................................... 71
FIGURA 5.12 Concentrao de macro e micronutrientes disponveis no solo. A e B macronutrientes; C e D
micronutrientes; CE: solo adubado com efluente; NPK: solo com adubao mineral base de nitrognio,
fosfato e potssio; M: solo de mata. As numeraes referem-se s profundidades amostradas 1: 0-10 cm;
2: 10-20 cm e 4: 20-40 cm ........................................................................................................................... 74

iii

FIGURA 5.13 Porcentagem de carbono total em amostras de solo. CE: solo adubado com efluente; NPK: solo
com adubao mineral base de nitrognio, fosfato e potssio; M: solo de mata ....................................... 75
FIGURA 5.14 ndice de humificao (HFIL) obtido atravs da fluorescncia induzida por laser de amostras de
solo dividido pela porcentagem de carbono orgnico das mesmas. CE: solo adubado com efluente; NPK:
solo com adubao mineral base de nitrognio, fosfato e potssio; M: solo de mata ............................... 77
FIGURA 5.15 Espectros de FTIR de AH extrados de amostras de solos adubados com efluente (CE), solo com
adubao mineral a base de nitrognio, fsforo e potssio (NPK) e solo de mata....................................... 80
FIGURA 5.16 Comcentrao de radicais livres do tipo semiquinona em spin g-1C-1 obtida para as amostras de
AH extrados de solos adubados com efluente (CE), com adubao mineral a base de nitrognio, fsforo e
potssio (NPK) e de solo de mata (M) ......................................................................................................... 83
FIGURA 5.17 Espectros de RMN de 13C dos AH extrados do solo. CE: solo adubado com efluente; NPK: solo
com adubao mineral base de nitrognio, fosfato e potssio; M: solo de mata. As numeraes referemse s profundidades amostradas 1: 0-10 cm; 2: 10-20 cm e 4: 20-40 cm.................................................. 84
FIGURA 5.18 Porcentagem da rea total das bandas nos espectros de RMN de 13C com VACP/MAS das
amostras de AH. CE: solo adubado com efluente; NPK: solo com adubao mineral base de nitrognio,
fosfato e potssio; M: solo de mata. As numeraes referem-se s profundidades amostradas 1: 0-10 cm;
2: 10-20 cm e 4: 20-40 cm ........................................................................................................................... 86
FIGURA 5.19 Espectros de emisso de fluorescncia de AH extrados do solo, medidos com comprimento de
onda de excitao ex = 465 nm. CE solo adubado com efluente; NPK solo com adubao mineral a
base de nitrognio, fsforo e potssio; M solo de mata ............................................................................ 88
FIGURA 5.20 ndice de humificao, A465, obtido segundo metodologia de MILORI et al., (2002) para os AH
extrados do solo. CE solo adubado com efluente; NPK solo com adubao mineral a base de
nitrognio, fsforo e potssio; M solo de mata ......................................................................................... 89
FIGURA 5.21 Espectros de emisso de fluorescncia de AH extrados do solo, medidos com comprimento de
onda de excitao ex = 240 nm. CE solo adubado com efluente; NPK solo com adubao mineral a
base de nitrognio, fsforo e potssio; M solo de mata ............................................................................ 90
FIGURA 5.22 ndice de humificao, A4/A1, obtido segundo metodologia de ZSOLNAY et al., (1999) para os
AH extrados do solo. CE solo adubado com efluente; NPK solo com adubao mineral a base de
nitrognio, fsforo e potssio; M solo de mata ......................................................................................... 91
FIGURA 5.23 Espectros de varredura sincronizada de AH extrados do solo, medidos com diferena de
comprimento de onda de emisso e excitao = 55 nm. CE solo adubado com efluente; NPK solo
com adubao mineral a base de nitrognio, fsforo e potssio; M solo de mata..................................... 93
FIGURA 5.24 ndice de humificao, I456/I374, obtido segundo metodologia de KALBITZ et al., (2000) para os
AH extrados do solo. CE solo adubado com efluente; NPK solo com adubao mineral a base de
nitrognio, fsforo e potssio; M solo de mata ......................................................................................... 94
FIGURA 5.25 Correlao entre as metodologias de fluorescncia propostas para avaliar o ndice de
humificao das substncias hmicas: A. MILORI e ZSOLNAY; B. ZSOLNAY e KALBITZ e C.
MILORI e KALBITZ .................................................................................................................................. 94

iv

LISTA DE TABELAS
TABELA 2.1 Bactrias presentes no rumem bovino (RUIZ, 1992)..................................................................... 9
TABELA 2.2 Bandas no infravermelho do cido hmico descritas por NIEMEYER et al., (1992) ................. 19
TABELA 4.1 Nomenclatura adotada para as amostras de efluente.................................................................... 39
TABELA 4.2 Nomenclatura adotada para as amostras de lodo de esgoto ......................................................... 40
TABELA 4.3 Nomenclatura adotada para as amostras de solo.......................................................................... 43
TABELA 5.1 Parmetros fsico-qumicos das amostras de efluente da caixa 3*............................................... 51
TABELA 5.2 Composio elementar e teor de cinzas em amostras de efluente liofilizado* ............................ 53
TABELA 5.3 Razes atmicas C/N e H/C das amostras de efluente liofilizado* ............................................. 54
TABELA 5.4 Composio mineral das amostras de efluente liofilizado da caixa 3* ........................................ 55
TABELA 5.5 Concentrao de radicais livres do tipo semiquinona nas amostras de efluente liofilizado* ....... 61
TABELA 5.6 Porcentagem dos grupos aromticos e alifticos nas amostras de efluente e lodo obtidas atravs
dos espectros de RMN de 13C* .................................................................................................................... 72
TABELA 5.7 Valores de pH e condutividade para as amostras de solo* .......................................................... 73
TABELA 5.8 Composio elementar (carbono, nitrognio, hidrognio, enxofre e oxignio) e teor de cinzas em
amostras de AH extrados do solo*.............................................................................................................. 77
TABELA 5.9 Razes atmica C/N e H/C das amostras de amostras de AH extrados do solo ......................... 78
TABELA 5.10 Concentrao de radicais livres do tipo semiquinona e largura de linha das amostras de AH
extrados do solo CE, NPK e M, fornecidas por RPE*................................................................................ 82
TABELA 5.11 Porcentagem dos grupos aromticos e alifticos nas amostras de AH obtidas atravs dos
espectros de RMN de 13C............................................................................................................................. 87

LISTA DE ABREVIATURAS E SIGLAS


ACF

rea do Espectro de Emisso de FIL

AF

cidos Flvicos

AH

cidos Hmicos

CEPAL

Comisso Econmica para a Amrica Latina e o Caribe

CETESB

Companhia de Tecnologia de Saneamento Ambiental

CONAMA

Conselho Nacional do Meio Ambiente

COT

Carbono Orgnico Total

CP

Polarizao Cruzada

CTC

Capacidade de Troca Catinica

CSA

Anisotropia do Deslocamento Qumico

Da

Daltons

DBO

Demanda bioqumica de Oxignio

DQO

Demanda Qumica de Oxignio

FIA

Anlise por Injeo em Fluxo

FIL

Fluorescncia Induzida por Laser

FTIR

Infravermelho com Transformada de Fourier

HU

Humina

IBGE

Instituto Brasileiro de Geografia e Estatstica

ICP OES

Espectrometria de Emisso tica com Plasma Acoplado Indutivamente

IHSS

Sociedade Internacional de Substncias Hmicas

MAS

Rotao Segundo o ngulo Mgico

MO

Matria Orgnica

MOS

Matria Orgnica do Solo

OD

Oxignio Dissolvido

ONU

Organizao das Naes Unidas

PNUD

Programa das Naes Unidas para o Desenvolvimento

rf

Radiofreqncias

RMN

Ressonncia Magntica Nuclear

RPE

Ressonncia Paramagntica Eletrnica

SH

Substncias Hmicas

SSF

Slidos Suspensos Fixos

SST

Slidos Suspensos Totais

SSV

Slidos Suspensos Volteis

TMS

Tetrametilsilano

TFSA

Terra Fina Seca ao Ar

VA

Amplitude Varivel

vi

RESUMO
A gerao de efluente a partir do tratamento de esgoto vem se incrementando, e sua
disposio final representa uma questo a ser resolvida. Assim uma das alternativas
encontradas sua utilizao na agricultura como adubo orgnico, podendo substituir parte da
adubao mineral. Essa prtica, alm de benfica do ponto de vista da reciclagem de
nutrientes, representa uma economia de gua no setor agrcola, que cerca de 70% do
consumo total no Brasil. Este trabalho visou conhecer as caractersticas do efluente produzido
pela Fossa Sptica Biodigestora, um sistema anaerbio de tratamento de esgoto desenvolvido
pela Embrapa Instrumentao Agropecuria, bem como de avaliar o impacto da aplicao do
efluente no solo. Foram feitas trs coletas do material das caixas das diferentes cmaras
biodigestoras, em sistemas inoculados com esterco ovino e bovino. Este material foi analisado
em seu estado bruto (lquido) em algumas anlises para a determinao de parmetros como
condutividade, pH, DBO, DQO e teores de slidos. Para as demais anlises utilizou-se o
slido obtido aps liofilizao do lquido. As concentraes de macro e micronutrientes
presentes no efluente foram estimadas usando a tcnica de ICP OES. A matria orgnica
presente no efluente foi caracterizada segundo as espectroscopias de FTIR, RMN de 13C e
RPE alm da anlise elementar. O efluente produzido apresentou carter alcalino e
concentraes significativas de sais nos dois sistemas analisados. Tambm foram observadas
quantidades elevadas de N-NH4+ e baixas de N-NO3-, tpico de sistemas anaerbios. A anlise
elementar do slido, obtido aps liofilizao do lquido, mostrou que no h uma tendncia na
variao da composio elementar (C, H, N) ao longo do processo de biodigesto, os quais
foram semelhantes tanto para o sistema inoculado com esterco ovino quanto bovino, assim
como nas diferentes coletas. O efluente apresentou quantidade significativa de nutrientes em
sua composio mineral. Atravs da caracterizao espectroscpica da matria orgnica do
material liofilizado foi possvel notar que no ocorreram muitas variaes nos grupamento
funcionais observados atravs dos espectros de FTIR, no decorrer do processo de biodigesto.
A RMN de 13C possibilitou informaes cerca dos grupamentos aromticos e alifticos das
amostras, mostrando que o efluente possui carter bastante aliftico. O efluente foi aplicado
no solo durante trs anos, sendo este solo classificado como Latossolo Vermelho-Amarelo
fase arenosa utilizado no cultivo de goiaba. Foram comparados os efeitos da adubao pelo
efluente com adubao mineral do tipo NPK. Tambm foi analisado o solo de mata da regio.
Foram feitas anlises de pH, condutividade, macro e micronutrientes, COT e FIL utilizando o
solo intacto. Fez-se a extrao dos AH dos solos. Os AH foram caracterizados segundo a
composio elementar, FTIR, RMN de 13C, RPE e Fluorescncia em soluo. A adio do
efluente proporcionou um aumento no pH do solo, observado principalmente na camada
superficial. Foi observado um incremento nas concentraes de nutrientes no solo sob uso do
efluente em comparao com o solo com adubao mineral NPK. Alteraes na frao
hmica do solo com efluente em relao aos solos com adubao NPK e de mata foram
observadas. Atravs das tcnicas de RMN de 13C e RPE foi possvel notar diminuio na
aromaticidade e no grau de humificao da matria orgnica, respectivamente, devido
incorporao da matria orgnica do efluente, de carter bastante aliftico. Nas tcnicas de
FIL e Fluorescncia em soluo, o grau de humificao para as amostras do solo com efluente
foram muito similares do solo com adubao mineral, no sendo observados, atravs destas
tcnicas, efeitos da adio do efluente. O efluente tambm forneceu macro e micronutrientes
em quantidades significativas ao solo, no sendo observado efeito de salinizao nas
profundidades analisadas. Os resultados indicam o efeito benfico do uso do efluente tratado
pela Fossa Sptica Biodigestora na fertilidade do solo.

vii

ABSTRACT
The generation of effluent from the sewage treatment is daily increasing then its final
disposition represents a mandatory question to be answered. An alternative is its agricultural
utilization such as organic fertilizer as a partial substitute of mineral fertilizer. This practice,
beyond inherent benefits due to nutrients recycling promotes agricultural water reuse, which
is responsible of around 70% of the total water consumption in Brazil. It was developed a
research following the stages of the domestic sewage treatment in the anaerobic system called
Septic Cesspool Biodigester, developed by Embrapa Agricultural Instrumentation, and also
the impact observed in the soil after the application of the treated effluent. Three samplings
were done in the different biodigestion chambers which were inoculated with either ovine or
bovine manure. These effluents were analyzed according to its original state (liquid),
regarding to the determination of some parameters such as conductivity, pH, OBD, OCD and
solids content. Other analyses of the effluent were done in the solid obtained after freeze
drying of the raw treated effluent. There were determined the mineral composition of the
effluent, using the ICP-OES technique. The effluent organic matter was characterized by
FTIR, 13C-NMR and EPR spectroscopies and, elemental analysis. The effluent presented
alkaline character and significant salts concentration for both systems, high quantity of NNH4+ and low content of N-NO3-, characteristic of anaerobic systems. The elemental analysis
of the solid obtained after the liquid freeze drying, showed that there was not a variation
tendency in the percentages of C, H and N during biodigestion process. These values were
similar to the either ovine or bovine inoculated systems, and to the different samplings. The
effluent presented a quantity of macro e micro nutrients. Through the spectroscopic
characterization of the organic matter present in the freeze dried material, it was possible to
observe that there were not noticeable variations in the FTIR spectra in the course of the
process monitoring. The 13C NMR supplied information about aromatic and aliphatic groups,
showing that the effluent presented a high aliphatic content. The soil, classified as Yellowredish Lattosoil with sandy phase, was submitted to the effluent application during three years
and was used for the goiaba orchard. Thus, there were compared the effects effluent in
comparison of the NPK mineral fertilization as well as the soil of the native forest at the side
of the orchard. Determinations of pH, conductivity, macro and micro nutrients content, TOC
and LIF were done for the intact soil. Soil HA were extracted and characterized according to
their elemental composition, FTIR, 13C NMR, EPR and solution fluorescence. The application
of the treated effluent produced an increment in the pH value, mainly in the superficial layer.
There was observed nutrients increment in soil submitted to the effluent application when
compared with the NPK fertilized soil. Alterations in the humic fraction of the analyzed soil
(after effluent application) were observed when compared with the forest and NPK samples.
Results obtained by 13C NMR and EPR detected a general diminution of the aromaticity and
the humification degree of organic matter, as a consequence of the aliphatic character of the
organic matter present in the effluent. The humification degree of HA extracted from the
applied effluent soil, determined by LIF and solution, were very similar to the ones observed
in the mineral fertilized soil. The effluent supplied macro e micro nutrients in significant
quantities to the soil, and it was not observed salinization effect in the analyzed depths. These
results show the benefic effect of the utilization of Septic Cesspool Biodigester effluent
regarding to the soil fertility.

_________________________________________________________________________ 1

CAPTULO 1 INTRODUO

O Brasil regrediu na tarefa de reduzir pela metade a proporo da populao rural sem
acesso a saneamento adequado. Quase dois teros dos brasileiros que vivem fora de reas
urbanas ainda no contam com servio bsico. Isso significa que mais de 20 milhes de
pessoas o dobro da populao de uma cidade como So Paulo correm maiores riscos de
contrair doenas infecciosas ou parasitrias, que so adquiridas principalmente pelo contato
com o esgoto no tratado e / ou atravs da gua do lenol fretico, contaminada pelo uso de
fossas rudimentares (fossa negra, poo, buraco). Em toda Amrica Latina e Caribe, o Brasil
o quarto pior em saneamento rural. Os dados so do estudo Objetivos de Desenvolvimento
do Milnio Uma viso a partir da Amrica Latina e do Caribe, divulgado em 2005 pela
Comisso Econmica para a Amrica Latina e o Caribe (CEPAL). Trata-se do mais amplo
levantamento sobre o tema j feito na regio, que envolveu a participao de doze agncias da
Organizao das Naes Unidas (ONU), incluindo o Programa das Naes Unidas para o
Desenvolvimento (PNUD) (PNUD, 2005).
O relatrio mostra que a proporo da populao rural brasileira com acesso a
saneamento adequado caiu de 37 % em 1990 para 35 % em 2002. O desempenho foi o pior da
Amrica Latina e fez com que o Brasil retrocedesse 6,3 % em relao ao que deveria alcanar
para reduzir pela metade at o ano de 2015 a populao rural carente de esgotamento sanitrio,
segundo os Objetivos do Desenvolvimento do Milnio, propostos pela ONU.
Um sistema desenvolvido pela Embrapa Instrumentao Agropecuria apresenta-se
como uma forma de viabilizar o tratamento de esgoto domstico em reas rurais, sendo um
sistema simples e de baixo custo para a populao rural. Denominado de Fossa Sptica
Biodigestora, o sistema promove o tratamento anaerbio de fezes e urina atravs de duas
cmaras de fermentao compostas por caixas dgua de 1000 L interligadas por sistema de
sifo e uma caixa coletora de efluentes. O inoculante que transforma este material o esterco
bovino ou ovino recm coletado, cuja microflora tem capacidade de digerir qualquer tipo de
alimento contido nestes dejetos, transformando o efluente obtido isento de germes
patognicos (salmonellas, shigellas e outros) e tambm de odores desagradveis.
Devido a sua capacidade fertilizante, o efluente vem sendo indicado no preparo de
solos e na adubao de pomares, apresentando efeito comparvel ao da adubao qumica
inorgnica base de nitrognio, fsforo e potssio, a um custo praticamente zero. O retorno
ao solo desse lquido deve ser priorizado, pois transforma um resduo de disposio

Captulo 1 Introduo 2
problemtica em insumo de grande valor para a agricultura, j que o efluente fornece
macronutrientes e micronutrientes s plantas, atua como condicionador do solo e dessa forma
contribui para uma agricultura sustentvel.
Para as condies brasileiras, a reciclagem agrcola de esgoto apresenta vrios
aspectos positivos em funo da influncia de um clima tropical, que expe o solo intensa
atividade intemprica, proporcionando uma rpida mineralizao da matria orgnica.
Considera-se a matria orgnica como um conjunto de substncias altamente heterogneas
que inclui numerosos compostos de carbono, variando de aucares, protenas e outros
constituintes biolgicos, cidos orgnicos de baixas massas moleculares, como cidos actico
e oxlico, quase todos facilmente mineralizveis, at um conjunto complexo de produtos
recalcitrantes resultantes de transformaes qumica e microbiana da matria orgnica do solo
(MOS) (BUDZIAK et al., 2004). Essa mineralizao disponibiliza uma gama de nutrientes ao
meio, podendo ainda contribuir para a elevao do pH do solo e a reduo da acidez potencial
(SIMONETE et al., 2003).

CAPTULO 2 REVISO DE LITERATURA

2.1 Tratamento de Esgoto


O saneamento no Brasil ainda apresenta grandes problemas, conforme foi identificado
pelas pesquisas realizadas pelo Instituto Brasileiro de Geografia e Estatstica (IBGE) no
perodo de 1992-2002. Os dados referentes ao esgotamento sanitrio so crticos, revelando
ndices de cobertura da populao urbana, por redes coletoras de 51,6 % e um percentual
desse esgoto coletado que passa por algum tratamento de cerca de 35 % (IBGE, 2004). O
tratamento desse esgoto em geral feito por combinao de processos fsicos, qumicos e
biolgicos, que reduzem a carga orgnica do esgoto antes do seu lanamento em corpos
dgua. So considerados como tratados os esgotos sanitrios que recebem, antes de serem
lanados nos corpos dgua receptores, pelo menos o tratamento secundrio, com a remoo
do material mais grosseiro, da matria orgnica particulada, e de parte da matria orgnica
dissolvida do efluente. Considera-se como forma de tratamento do esgoto sistemas como filtro
biolgico, o lodo ativado, as lagoas aerbia, anaerbia, facultativa, de estabilizao, aerada,
mista e de maturao, o vale de oxidao, a fossa sptica e o reator anaerbio (IBGE, 2004).
A escolha do sistema de tratamento funo das condies estabelecidas para a qualidade da
gua dos corpos receptores determinadas pelo Conselho Nacional do Meio Ambiente
(CONAMA).
O esgoto urbano composto por resduos domsticos e efluentes industriais sendo que
se estes forem txicos devem ser tratados em unidades da prpria indstria. A composio do
esgoto bastante varivel, sendo que a matria orgnica, especialmente as fezes humanas,
confere ao esgoto sanitrio suas principais caractersticas, mutveis com o decorrer do tempo,
pois sofre diversas alteraes at sua completa mineralizao ou estabilizao.Enquanto o
esgoto sanitrio causa poluio orgnica e bacteriolgica, o industrial geralmente produz
poluio qumica.
Como resultado do baixo percentual de esgoto tratado tem-se que as Regies
Metropolitanas e grandes cidades concentram grandes volumes de esgoto, os quais so
despejados sem tratamento nos rios e mares que servem de corpos receptores. Em
conseqncia, a poluio das guas que cercam as maiores reas urbanas bastante elevada,
dificultando e encarecendo, cada vez mais, a prpria captao de gua para o abastecimento.
Os corpos dgua podem se recuperar da poluio, ou depurar-se, pela ao da prpria
natureza, desde que sejam respeitados os limites de descarga poluidora em funo da vazo do

Captulo 2 Reviso de Literatura 4


corpo receptor. Freqentemente, os mananciais recebem descargas de efluentes muito
elevadas para sua vazo e no conseguem se recuperar pela autodepurao, havendo a
necessidade da depurao artificial ou tratamento do esgoto. O tratamento do efluente pode,
inclusive, transform-lo em gua para diversos usos, como a irrigao, por exemplo, (SOUSA
et al, 2001; ORON et al., 1999).

2.1.1 Tratamento de Esgoto na rea Rural


O tratamento de esgoto em reas urbanas no Brasil ainda no suficiente para atender
a crescente demanda da populao, no entanto, apresenta-se num estgio avanado quando se
considera a situao da populao na rea rural.
Segundo dados do IBGE (2002), na rea rural do Brasil h cerca de 32 milhes de
habitantes, que em sua maior parte carecem de sistemas de saneamento bsico.
Aproximadamente 16 % dessa populao possuem rede coletora de esgotos e/ ou fazem uso
de fossas spticas. Contudo, a grande maioria (41%) utiliza-se de fossas rudimentares, mais
conhecidas como fossas negras, como soluo final para o esgoto domstico gerado (IBGE,
2004).

A.

B.

FIGURA 2.1 A. Fossa rudimentar mostrada em um contexto ambiental. B. Esquema de uma fossa rudimentar

Essas fossas rudimentares so as principais responsveis pela contaminao das guas


subterrneas que abastecem os poos caipiras. Na Figura 2.1A apresentado um esquema
mostrando uma fossa rudimentar em um panorama ambiental. O esgoto gerado na residncia
depositado na fossa, que consiste de uma simples escavao feita no solo, sem qualquer
revestimento interno de suas paredes (Figura 2.1B). No interior da fossa ocorrem reaes na

Captulo 2 Reviso de Literatura 5


matria orgnica presente nas fezes, em virtude da intensa atividade microbiana, com a
liberao de um lquido de odor desagradvel e tambm com altas concentraes de nitrato
(NO3-) e coliformes fecais, denominado chorume. Este lquido se infiltra nas paredes da fossa
e percola atravs do solo podendo atingir e contaminar as guas subterrneas.
No Estado de So Paulo, verificaram-se alteraes nas concentraes naturais de NO3em guas subterrneas. Dos poos analisados, 3% apresentaram concentraes de NO3superiores a 10 mg L-1. Ainda, segundo o relatrio da CETESB (2004) foi registrado um
aumento nas concentraes mnimas e mximas detectadas no perodo de 2001-2003,
indicando um progressivo aporte de nitrato nesses poos atribudo, principalmente,
contaminao por esgoto domstico. No mesmo relatrio, tambm so mencionadas
contaminaes biolgicas das guas subterrneas, registrando a presena de coliformes fecais
em concentraes na faixa de 1 a 5 % nos aqferos analisados.

2.2 Processos Biolgicos


Os processos biolgicos usados em tratamento de esgotos so aqueles onde os
microrganismos utilizam a matria orgnica biodegradvel em um reator biolgico para
obteno de energia para as suas atividades e como fonte de matria prima para a sua
reproduo. Nestes processos, duas reaes principais ocorrem, a de respirao, em que os
microrganismos utilizam a matria orgnica para a obteno de energia, gerando os chamados
produtos finais da respirao (CO2 e H2O) e a reao de sntese e reproduo em que a
matria orgnica utilizada como matria prima para a reproduo dos microrganismos.
Ainda pode-se considerar que na falta de uma fonte externa de matria orgnica, os
microrganismos consomem matria orgnica de sua prpria composio, atravs de uma
reao denominada respirao endgena.
No processo biolgico, as reaes de respirao podem ser pela via aerbia, quando os
microrganismos utilizam oxignio dissolvido (OD) para converter a matria orgnica
biodegradvel em dixido de carbono e gua. Na ausncia de OD, porm com a presena de
nitrato (N-NO3), em uma condio denominada anxica, este pode ser utilizado em
substituio ao OD para a reao de respirao, resultando tambm, como produtos finais da
respirao dixido de carbono e gua e liberao de N-gasoso, em uma reao denominada de
desnitrificao. Na ausncia de OD e de N-NO3, a reao de respirao anaerbia e tem
como produtos finais dixidos de carbono e gs metano (ALEM SOBRINHO, 2001).

Captulo 2 Reviso de Literatura 6


2.2.1 Digesto Anaerbia
O processo de digesto anaerbia conhecido desde o final do sculo XIX,
caracterizando-se pela estabilizao da matria orgnica em ambiente livre de oxignio
molecular (Figura 2.3). Devido robustez e alta eficincia, a digesto anaerbia est presente
desde em simples fossas spticas domsticas at em estaes completamente automatizadas
servindo a grandes regies metropolitanas. Dentre os objetivos do processo anaerbio esto as
seguintes funes:
- reduo substancial dos slidos volteis;
- reduo significativa dos organismos patognicos;
- estabilizao de substncias instveis presentes no esgoto.
Normalmente, a digesto anaerbia opo preferida de estabilizao, devido ao seu
baixo custo operacional. A digesto anaerbia gera como produtos da estabilizao o gs
carbnico e o gs metano, incentivando ainda mais esta opo de tratamento devido ao
potencial energtico gerado.

Molculas Orgnicas Complexas

I
Bactrias Hidrolticas
Acidognicas
cidos orgnicos,
Compostos neutros

II
Bactrias
Heteroacetognicas
H2 e CO2

Acetato

IIIa
Bactrias Metanognicas
Utilizando H2 e CO2

IIIb
Bactrias Metanognicas
Utilizando CH3COOH

H2O e CH4

CO2 e CH4

FIGURA 2.2 Esquema da via de degradao anaerbia da matria orgnica

Captulo 2 Reviso de Literatura 7

A digesto anaerbia um processo bioqumico de mltiplos estgios, capaz de


estabilizar diferentes tipos de matria orgnica. O processo anaerbio ocorre basicamente em
seis estgios principais (JEYASEELAN, 1997):
1) Hidrlise de biopolmeros orgnicos complexos (protenas, carboidratos e lipdeos)
em monmeros (aminocidos, aucares e cidos graxos de cadeia longa) por bactrias
hidrolticas (grupo I) (acidognicas);
2) Fermentao de aminocidos e aucares por bactrias hidrolticas (grupo I);
3) Oxidao anaerbia de cidos graxos volteis e lcoois pelas bactrias
heteroacetognicas (grupo II);
4) Oxidao anaerbia de produtos intermedirios tais como cidos graxos volteis
pelas bactrias heteroacetognicas (grupo II);
5) Converso de hidrognio a metano pelas bactrias metanognicas utilizando
hidrognio e dixido de carbono (grupo IIIa);
6) Converso de acetato a metano pelas bactrias metanognicas utilizando acetato
(grupo IIIb).
No biodigestor coexistem trs grupos de bactrias mutuamente dependentes entres si:
bactrias acidognicas hidrolticas, bactrias acetognicas e bactrias metanognicas. Esta
populao permanece em equilbrio dinmico, variando sua concentrao de acordo com as
condies operacionais de cada biodigestor. Outros organismos encontrados e que podem
desempenhar papel fundamental no processo de digesto so as bactrias redutoras de sulfato
e as bactrias desnitrificantes (ALEM SOBRINHO, 2001).

2.3 Fossa Sptica Biodigestora


O sistema denominado Fossa Sptica Biodigestora foi desenvolvido na Embrapa
Instrumentao Agropecuria, com o objetivo de promover o tratamento de esgoto em reas
rurais, onde segundo IBGE (2004) cerca de 84 % da populao fazem uso de fossas
rudimentares e/ ou no possuem qualquer tipo de captao/ tratamento do esgoto domstico.
O sistema de fossa biodigestora contribui para a viabilizao do tratamento de esgoto
domstico e conseqente produo de efluentes desinfetados. Consiste em um tratamento
biolgico do esgoto por ao de digesto fermentativa, utilizando-se de esterco bovino/ ovino
como meio inoculante de bactrias (Tabela 2.1). O sistema baseia-se no processo de
biodigesto de resduos orgnicos (protenas, carboidratos, lipdeos) atravs da sua

Captulo 2 Reviso de Literatura 8


decomposio anaerbia por bactrias (BOLZONELLA et al., 2005) produzindo resduos
desinfetados, evitando dessa forma, a proliferao de doenas veiculadas pela gua poluda
por esgoto domstico (NOVAES et al., 2002).
Um esquema do sistema mostrado na Figura 2.2. O sistema composto por duas
caixas de fibrocimento de 1000 litros cada, conectadas exclusivamente ao vaso sanitrio (pois
as guas do chuveiro e da pia no apresentam potencial patognico e sabo ou detergente
possuem propriedade antibiticas que inibem o processo de biodigesto) e uma terceira caixa
de 1000 litros que serve para coleta do efluente (adubo orgnico).

FIGURA 2.3 Esquema do sistema da fossa sptica biodigestora (NOVAES et al., 2002)

As tampas das caixas devem ser vedadas com borracha e unidas entre si por tubos e
conexes de PVC de 4, com curva de 90o longa no interior das caixas e T de inspeo para
o caso de entupimento do sistema. Os tubos e conexes devem ser vedados na juno com a
caixa com cola de silicone e o sistema deve fica enterrado para manter o isolamento trmico.
Inicialmente, a primeira caixa deve ser preenchida com aproximadamente 20 litros de uma
mistura 1:1 de gua e esterco bovino (ou ovino) fresco. O objetivo desse procedimento
aumentar a atividade microbiana e conseqentemente a eficincia da biodigesto, devendo ser
repetido a cada 30 dias com 10 litros da mistura gua / esterco atravs da vlvula de reteno.
A Tabela 2.1 apresenta os principais microrganismos existentes no esterco de bovinos, que
atuam em simbiose na degradao dos substratos encontrados nas fezes humanas
(carboidratos, protenas, gorduras entre outros). O sistema possui duas chamins de alvio
colocadas sobre as duas primeiras caixas para descarga do gs acumulado (CH4). A coleta do
efluente feita atravs do registro de esfera de 60 mm instalado na caixa coletora.

Captulo 2 Reviso de Literatura 9


O dimensionamento do sistema indicado para uma famlia de no mximo cinco
pessoas e permite que o material depositado nas caixas fermente por aproximadamente trinta
dias, perodo suficiente para uma completa biodigesto (SCHOKEN-ITURRINO et al., 1995).
TABELA 2.1 Bactrias presentes no rumem bovino (RUIZ, 1992)

Tipos de Bactrias

Celulolticas

Hemiceluloltica

Nomes
Bacterides succinogenes, Ruminococus flavefaciens, Ruminococus
albus, Ruminococus Butyrivibrio fibrisolvens
Butyrbrio fibrisolvens, Bacteride rumincola, Ruminococus sp.
Butyvbrio fibrisolvens, Bacterides rumincola, Lachnospira

Pectinolticas

multiparus, Succinivibrio dextrinosolvens, Treponema bryantii,


Streptococus bovis

Amilolticas

Ureolticas

Bacteride amylophilus, Streptococus bovis, Succimimonas


Amylolitica, Bacteride rumincola
Succinivibrio dextrinosolvens, Selenomonsas sp., Bacteride
rumincola, Ruminococus bromii, Butivibrio sp., Treponema sp.

Aps o processo de desinfeco, o efluente gerado pode ser disposto em solo. Dentre
os principais sistemas de disposio de guas residurias no solo (irrigao, infiltrao/
percolao e escoamento superfcie) a irrigao de culturas tem sido o mtodo mais
acessvel (FEIGIN et al., 1991) e eficiente (DARWISH et al., 1999), particularmente, nos
pases em desenvolvimento onde no h uma poltica para o custo de tratamento das guas
residurias (FRIEDEL et al., 2000).

2.4 Propriedades Qumicas do Solo


O solo, apesar de sua importncia vital para a humanidade constitui um material ainda
pouco compreendido. O estudo de sua organizao leva em conta os aspectos morfolgicos e
estruturais, isto , estuda seus constituintes (minerais e orgnicos), suas dimenses e o modo
como estes se encontram organizados. Envolve tambm a anlise dos espaos vazios (poros),
reflexo da organizao de seus constituintes. Trata-se de um estudo esttico que se baseia na
caracterizao do chamado perfil do solo. Os perfis se diferenciam atravs de horizontes,

Captulo 2 Reviso de Literatura 10


segundo uma organizao vertical, sendo os superiores mais ricos em matria orgnica
(horizonte O) e os inferiores sobretudo em minerais (horizontes E, B e C). Tais horizontes se
distinguem pela cor, textura, estrutura e comportamento.
O solo em boas condies para o crescimento de plantas constitudo em seu
horizonte superficial (horizonte A), por aproximadamente 50 % de material slido, 25 % de
gua e 25 % de ar. A proporo de gua e de ar no solo pode variar de maneira bastante
acentuada e muito rapidamente, estando associada principalmente ao tamanho e quantidade de
poros existente, disponibilidade de gua e drenagem do terreno. A fase slida, ao contrrio,
mais constante (MELFI e MONTES, 2001). Essas condies influenciam diretamente as
propriedades fsico-qumicas do solo.
So muitas as propriedades qumicas do solo, sobretudo as relacionadas aos aspectos
de fertilidade e nutrio de plantas. A troca inica uma delas, e est relacionada presena
de cargas superficiais, sendo entendida como um processo reversvel, pelo qual ons retidos na
superfcie so substitudos por quantidades equivalentes de outros ons, estejam estes em
soluo ou ligados a uma outra fase slida em contato com a primeira.
Nos solos, os mais importantes ctions trocveis so o Ca2+, Mg2+, H+, K+, Na+ e
NH4+. Entre os nions, os mais importantes so o SO42-, Cl-, NO3-, H2PO4-, HPO42-, HCO3- e
os nions dos cidos hmicos.
Uma outra propriedade qumica a capacidade de troca catinica (CTC), que define a
habilidade do solo em reter e adsorver ctions. Est relacionada presena de cargas
negativas na superfcie das partculas coloidais (argilominerais, xidos e oxihidrxidos de Fe
e Al e compostos orgnicos hmus).
A CTC depende da textura do solo e, mais particularmente, do teor de argila e matria
orgnica, pois tanto a argila quanto a matria orgnica apresentam grandes superfcies
especficas, e portanto so materiais bastante reativos, da possurem CTC elevada. Destas
duas, a matria orgnica, normalmente presente em menor quantidade, apresenta CTC cerca
de cinco vezes quela das argilas, podendo tambm apresentar grande variao em funo da
concentrao dos grupos COOH (MELFI e MONTES, 2001).
O pH outra propriedade qumica essencial, pois determina sob que forma os
elementos qumicos estaro nas solues que percolam o solo. Em funo do pH do solo e do
pKa dos elementos, pode-se prever sua existncia sob uma forma catinica (ou aninica), sob
forma de hidrxidos ou ainda sob forma de sais, sendo possvel definir a mobilidade dos
elementos em determinado solo, se conhecida a solubilidade dos produtos formados.

Captulo 2 Reviso de Literatura 11

2.5 Matria Orgnica do Solo


A matria orgnica (MO) um importante constituinte do solo, sendo um componente
fundamental na qualidade dos sistemas agrcolas em razo de seu contedo e sua qualidade
serem os mais importantes fatores que mantm a fertilidade dos solos e a sustentabilidade dos
agroecossistemas (MARTIN-NETO et al., 2004; REEVES, 1997).
Segundo STEVENSON (1994), a matria orgnica do solo consiste de uma mistura de
compostos em vrios estgios de decomposio, que resultam da degradao biolgica de
resduos de plantas e animais, e da atividade sinttica de microrganismos, denominado hmus.
Este material complexo pode ser dividido operacionalmente, em substncias hmicas (cidos
hmicos, cidos flvicos e humina) e no hmicas (protenas, aminocidos, polissacardeos,
cidos orgnicos de baixa massa molar ceras e outros).
As substncias no hmicas pertencem a grupos bem conhecidos da qumica orgnica
e suas caractersticas fsicas e qumicas so bem conhecidas. Geralmente correspondem aos
compostos facilmente degradados por microrganismos, tendo, normalmente, tempo curto de
vida nos solos e sedimentos. Por sua vez, as substncias hmicas (SH) so os maiores
constituintes da frao orgnica dos solos, sendo que no apresentam estrutura nem massa
molar definidas.
Quando se pensa em matria orgnica destaca-se que um constituinte do solo que
pode representar at menos de 1 % do total em massa, em muitos solos, mas que pelas
caractersticas qumicas, envolvimento com as atividades biolgicas, importncia para a
fertilidade do solo e nutrio das plantas, papel na agregao das partculas do solo, e
reatividade com os demais constituintes endgenos e at exgenos ao solo (como pesticidas e
metais pesados) tem papel muito relevante. Dentre as funes que a MO desempenha no solo,
pode-se destacar:
- biolgica: regula as atividades da microflora e dos organismos da microfauna;
- nutritiva: serve como fonte de nutrientes para o crescimento das plantas, retendo e
fornecendo tanto os macronutrientes (N, P, K, Ca, Mg e S) quanto micronutrientes (Zn, Fe,
Mn e Cu), impedindo a perda por lixiviao e arraste dos fertilizantes qumicos;
- fsica e fsico-qumica: melhora a capacidade de reteno de gua, drenagem, aerao
e conserva a estrutura do solo. um dos grandes responsveis pela CTC e pela capacidade
tampo do solo. Participa tambm no processo de decomposio de agentes txicos, formando
compostos complexos com metais txicos e pesticidas, ajuda na reteno de calor
influenciando na germinao de sementes e desenvolvimento das razes (STEVENSON,
1994).

Captulo 2 Reviso de Literatura 12

2.5.1 Substncias Hmicas


Segundo ZECH et al. (1997), a humificao a transformao de reservas
macromorfologicamente identificveis em compostos hmicos amorfos. Com isso, as
principais transformaes que ocorrem durante a humificao, so a perda de polissacardeos
e de compostos fenlicos, a modificao das estruturas de lignina, e o enriquecimento em
estruturas aromticas no lignnicas recalcitrantes. A humificao, bem como a decomposio
de resduo, mediada primeiramente por processo microbiolgico, controlado principalmente
por variveis locais especficas, tais como temperatura, regime de gua no solo, pH e
disponibilidade de nutrientes.
As SH so diferentes de outros biopolmeros do hmus, como carboidratos e protenas,
pois no apresentam estrutura molecular e propriedades fsicas definidas e podem permanecer
por um longo perodo no solo (recalcitrncia). A presena de vrios grupos cromforos em
sua estrutura resulta em absoro de energia em uma ampla faixa do espectro
eletromagntico, o que lhe confere cores variando de marron-clara a escura. Desempenham
um papel significante na formao de agregados, no controle da acidez do solo e no ciclo de
elementos nutrientes. As SH so amorfas, escuras, com grande contedo de grupos orgnicos,
tais como, carboxlicos, fenlicos, enlicos, alcolicos, quinonas entre outros e quimicamente
complexas (STEVENSON, 1994; SAAB, 1999; MARTIN-NETO et al., 2004).
Ainda hoje no existe um modelo estrutural para as substncias hmicas que explique
totalmente sua composio qumica, estrutura, forma e tamanho, sendo que os modelos
existentes geram controvrsias e discusses (CLAPP e HAYES, 1999; BURDON, 2001;
HAYES e CLAPP, 2001; MACCARTHY, 2001; PICCOLO, 2001).
2.5.1.1 Modelo Macromolecular para as Substncias Hmicas
At pouco tempo as SH eram consideradas como polmeros macromoleculares, com
caractersticas similares s macromolculas biolgicas como protenas, polissacardeos,
cidos nuclicos e lignina. SCHULTEN e SCHNITZER (1993), a partir de tcnicas analticas
tais como pirlise, espectroscopia, degradao oxidativa e microscopia eletrnica, sugeriram a
estrutura esquemtica e macromolecular para os cidos hmicos (AH), mostrada na Figura
2.4. Nessa estrutura, os AH contm longas cadeias alifticas, grupos OH fenlicos livres e
ligados, nitrognio e oxignio como ponte de ligao dos grupos COOH localizados de
diferentes formas nos anis aromticos. De acordo com a solubilidade em funo do pH, as
SH podem ser divididas operacionalmente, em cidos hmicos, cidos flvicos e humina. Os

Captulo 2 Reviso de Literatura 13


cidos flvicos (AF) so solveis em toda faixa de pH, os cidos hmicos so solveis em
meio alcalino e a humina (HU) insolvel em toda faixa de pH (STEVENSON, 1994).

FIGURA 2.4 Modelo de estrutura para AH proposto por SCHULTEN e SCHNITZER (1993)

Em 1997, SCHULTEN e SCHNITZER propuseram a existncia de espaos vazios


(Figura 2.5) de diferentes tamanhos, onde poderiam alojar-se outros compostos orgnicos,
hidroflicos ou hidrofbicos, como carboidratos e materiais proteinceos, lipdeos, pesticidas e
outros poluentes.

Captulo 2 Reviso de Literatura 14

FIGURA 2.5 Modelo tridimensional de AH proposto por SCHULTEN e SCHNITZER (1997). Carbono : azul;
Oxignio: vermelho; Nitrognio: preto e Hidrognio: branco. As letras A, B e C indicam os espaos vazios
presentes, provavelmente, na estrutura das SH

2.5.1.2 Modelo Supramolecular para as Substncias Hmicas


A qumica supramolecular definida como a qumica dos arranjos e das ligaes
intermoleculares, envolvendo entidades de grande complexidade que resultam da associao
de duas ou mais espcies qumicas unidas por foras intermoleculares, que podem ser ligaes
secundrias, ligaes de hidrognio, interaes doador-aceptor (tipo cido-base de Lewis) ou
interaes inicas (OLENDZKI, 2006).
Segundo PICCOLO (2001), as SH seriam molculas pequenas e heterogneas, de
vrias origens e auto-organizadas em conformaes supramoleculares. As superestruturas
hmicas no estariam associadas por ligaes covalentes, mas sim seriam estabilizadas por
foras fracas, tais como interaes hidrofbicas do tipo van der Waals e ligaes de
hidrognio, estas ltimas sendo mais importantes quanto menor o valor de pH.

Estas

interaes determinariam a estrutura conformacional nas supramolculas de SH.


Considerando o modelo supramolecular, os cidos flvicos so associaes de
pequenas molculas hidroflicas dispersas em soluo devido repulso eletrosttica das
cargas negativas provenientes da dissociao dos grupos cidos, como por exemplo, os
carboxlicos, a qualquer valor de pH. Os cidos hmicos so constitudos por associaes de

Captulo 2 Reviso de Literatura 15


estruturas predominantemente hidrofbicas (cadeias polimetilnicas, cidos graxos e
esterides), que so estabilizadas em pH neutro por foras dispersivas hidrofbicas (van der
Waals, -, e ligaes CH-). Os cidos hmicos crescem gradualmente em tamanho com o
decrscimo do pH at a sua precipitao. Segundo PICCOLO (2001), a influncia do pH
ocorre por meio da protonao da molcula e conseqente aumento das ligaes de
hidrognio intermoleculares. O modelo supramolecular foi reforado pelos resultados obtidos
por SIMPSON, 2002 e SIMPSON et al., 2002. Estes autores demonstraram que as substncias
hmicas extradas de solos so formadas por uma mistura de substncias agregadas de massa
molecular em torno de 2000 Da e propuseram um esquema (Figura 2.6) para ilustrar como as
principais estruturas identificadas nas substncias hmicas poderiam formar um agregado na
presena de ctions metlicos de ocorrncia natural nos ecossistemas terrestres.

FIGURA 2.6 Esquema de estrutura das SH proposto por SIMPSON et al. (2002), unidades vermelhas: ctions
metlicos; unidades pretas: polissacardeos; unidades azuis: polipeptdios; unidades verdes: cadeias alifticas e
unidades marrons: fragmentos aromticos

2.6 Disponibilidade de Nutrientes no Solo


A disponibilidade de nutrientes no solo leva em conta trs fatores, considerando as
interaes entre os nutrientes e a matria orgnica do solo. Eles so (1) resduos de plantas e
animais no solo, os quais sob decomposio liberam N, P, S e micronutrientes para o
crescimento das plantas; (2) a biomassa microbiana, a qual serve como estoque temporrio de
nutrientes (com tempo mdio de residncia de meses a poucos anos); e (3) a frao hmica da
matria orgnica, que tem um longo tempo mdio de residncia (250 a 1000 anos).
A converso de formas orgnicas de N, P e S para formas minerais disponveis (NH4+,
NO3-, PO43-, SO42-) ocorre atravs da atividade de microrganismos e influenciada por fatores

Captulo 2 Reviso de Literatura 16


que afetam a atividade microbiana (temperatura, umidade, pH, entre outros) bem como pelas
razes C/N, C/P e C/S de resduos de plantas em decomposio. Este processo conhecido
como mineralizao e sempre acompanhado pela converso de formas minerais de
nutrientes

em

formas

orgnicas,

sendo

este

processo

denominado

imobilizao

(STEVENSON, 1986).

2.7 Disposio de Resduos no Solo


Os trabalhos cientficos sobre a utilizao de esgotos tratados em prticas agrcolas
tm demonstrado que sua disposio no solo adiciona uma srie de substncias que podem
alterar suas propriedades fsicas, qumicas, fsico-qumicas e biolgicas, afetando em geral,
positivamente o desenvolvimento das plantas (MELO et al., 1994; SOUSA et al., 2001;
FONSECA et al., 2005; HUSSAR et al., 2005; NGOLE et al., 2006; FONSECA et al., 2007).
Os resduos de esgotos gerados aps tratamento so constitudos essencialmente por
matria orgnica, de acordo com o tipo de tratamento ao qual foi submetido. Isso significa que
sua disposio no solo permite a incorporao de uma quantidade aprecivel de matria
orgnica (MO) nos horizontes superficiais do solo.
A MO, como sabido, desempenha um importante papel na definio de certos
atributos do solo, determinando algumas de suas mais importantes propriedades fsicas,
qumicas, fsico-qumicas e biolgicas. Indiretamente, sua presena condiciona tambm a
dinmica das solues no interior do solo, afetando, dessa forma, o prprio funcionamento do
sistema pedolgico (MELFI e MONTES, 2001).
O uso de efluentes provenientes do tratamento de esgotos na agricultura uma prtica
comum em muitos pases (SAADI et al., 2006; FONSECA et al., 2007). Em pases de clima
tropical como o Brasil, esse tipo de prtica apresenta aspectos positivos em funo da
temperatura a qual o solo exposto, o que favorece a uma intensa atividade intemprica,
proporcionando uma rpida mineralizao da MO e tambm disponibilizando nutrientes ao
meio. A principal vantagem na utilizao de efluentes reside na recuperao de um recurso de
grande importncia para a agricultura a gua; alm disso, os constituintes desses efluentes
so produtos que podem aumentar a fertilidade dos solos por conter nutrientes essenciais s
plantas. Por outro lado, melhoram tambm a aptido agrcola dos solos, devido MO que lhe
adicionada, com a conseqente formao de hmus.
A reutilizao de efluentes oferece, ainda, vantagens do ponto de vista da proteo do
ambiente na medida em que proporciona a reduo ou mesmo a eliminao da poluio dos
meios hdricos habitualmente receptores desse material. Paralelamente d-se a recarga dos

Captulo 2 Reviso de Literatura 17


aqferos, beneficiada com a melhoria da qualidade da gua derivada da depurao
proporcionada aos efluentes atravs da percolao no solo (MIRANDA, 1995).

2.8 Efeito da Adio de Resduos Orgnicos nas Caractersticas Qumicas


e Fsicas do Solo
A adio de resduos orgnicos provoca importantes alteraes nos atributos fsicos,
qumicos e fsico-quimicos do solo, em decorrncia do aumento do contedo de MO. Vrios
autores mostraram os efeitos positivos que a adio de matria orgnica provoca no estado de
agregao das partculas, na porosidade, na densidade, na capacidade de reteno e infiltrao
de gua, na temperatura, na capacidade de troca catinica (CTC), no pH e na fertilidade do
solo (METZGER e YARON, 1987; MARCIANO et al., 1999, FONSECA et al., 2005).
Alteraes nas propriedades fsico-qumicas do solo afetam de forma acentuada sua
funcionalidade, pois alteram a circulao das solues no interior do solo. O pH uma
propriedade qumica essencial do solo, visto que a concentrao hidrogeninica define o
comportamento dos elementos qumicos no solo e tambm o comportamento dos seres vivos
(fauna e flora). De uma maneira geral, a adio de resduos orgnicos provoca um aumento no
valor do pH e tambm nas cargas negativas do solo (BATAGLIA et al., 1983), sendo que a
existncia de cargas eltricas condiciona a reatividade fsico-qumica dos constituintes do solo
com os ons que se encontram na soluo do solo ou nos outros constituintes minerais,
polmeros orgnicos ou minerais, que possuam cargas na superfcie (MELFI e MONTES,
2001).
Normalmente, o valor de pH de guas residurias usados em irrigao, no tem
afetado significativamente o pH do solo, por causa do seu poder tampo. Dessa forma, no
de se esperar efeito direto do efluente no pH do solo, mesmo com a ocorrncia de HCO3(uma das formas presentes de alcalinidade) nas guas residurias. No entanto, existe a
possibilidade dessa alcalinidade associada s altas concentraes de Na+ e CO32- em guas
alcalinas, ocasionar um aumento no valor de pH do solo (BOUWER e IDELOVITCH, 1987).

Captulo 2 Reviso de Literatura 18

2.9 Mtodos Espectroscpicos


2.9.1 Espectroscopia de Infravermelho com Transformada de Fourier
(FTIR)
A radiao infravermelha corresponde parte do espectro eletromagntico entre as
regies do visvel e das microondas. A espectroscopia no infravermelho uma das
ferramentas mais teis para o qumico na identificao de compostos orgnicos e inorgnicos,
pois, com exceo de poucos compostos homonucleares tais como as molculas de O2, N2 e
Cl2, todas as espcies moleculares absorvem radiao infravermelha (SKOOG et al., 2002). A
regio do infravermelho de maior utilidade para os qumicos orgnicos est localizada entre
4000 e 400 cm-1. H tambm uma regio de 14290-4000 cm-1, chamada de infravermelho
prximo e outra em 700-200 cm-1, denominada infravermelho distante.
A interao da radiao infravermelha com uma molcula envolve a interao de um
componente oscilante do campo eltrico da radiao com o momento dipolo oscilante da
molcula. Assim, para as molculas absorverem radiao infravermelha como energia de
excitao vibracional necessrio haver mudana em seu momento de dipolo, e quando h
esta modificao, os compostos absorvem energia em certas regies do espectro. As
molculas diatmicas homonucleares no apresentam mudana em seu momento dipolo,
conseqentemente no possuem absoro no infravermelho (SILVERSTEIN, 2000).
A absoro de radiao infravermelha pela molcula resulta em movimentos
rotacionais e vibracionais dos grupos moleculares e de suas ligaes qumicas. As vibraes
podem ocorrer tanto na forma de estiramento, na qual os tomos permanecem no mesmo eixo
de ligao, variando-se o comprimento da ligao, como tambm na forma de deformao
angular, onde as posies dos tomos mudam em relao ao eixo de ligao original
(SILVERSTEIN, 2000).
A espectroscopia vibracional na regio do infravermelho muito utilizada para
identificar grupos funcionais presentes em compostos orgnicos, sendo de grande importncia
na avaliao da taxa de degradao de compostos de lodo de esgoto (GRUBE et al., 2006) e
tambm na caracterizao das substncias hmicas presentes no solo (STEVENSON, 1994).
As informaes obtidas na identificao de grupos funcionais como hidroxlicos, carboxlicos,
carboxilatos, alifticos, amnicos, entre outros, auxiliam a descrever a natureza dos AH das
mais diferentes origens. Na Tabela 2.2 so apresentadas algumas bandas tpicas das
substncias hmicas.

Captulo 2 Reviso de Literatura 19

TABELA 2.2 Bandas no infravermelho do cido hmico descritas por NIEMEYER et al., (1992)

Regio (cm-1)

Origem

3380

Estiramento OH do grupo fenlico (contribuio de OH aliftico, H2O e


possivelmente NH)

3030

Estiramento CH aromtico

2930

Estiramento CH assimtrico

2840

Estiramento CH simtrico

2600

Estiramento OH de H-ligado a COOH

1720

Estiramento C=O de COOH

1610

Estiramento C=C aromtico e/ou estiramento COO- assimtrico

1520-1525

Estiramento C=C aromtico, deformao NH e estiramento C=N de amidas

1450

Deformao CH de CH3 e dobramento CH de CH2

1350

Estiramento COO simtrico e/ou dobramento CH de alifticos

1270

Estiramento C-O de fenlico

1225

Estiramento C-O e deformao OH de COOH

1170

Estiramento C-OH de alifticos OH

1050 e 1040

Estiramento CO de polissacardeos ou derivados de polissacardeos e SiO de


impurezas silicatadas

830

Vibrao CH fora do plano. Impurezas argilosas

775

Vibrao CH fora do plano

A espectrometria com transformaes de Fourier (FTIR), que se desenvolveu muito


nos ltimos anos, tem vrias vantagens sobre os instrumentos de disperso. Como no se
usam monocromadores, a totalidade da faixa de radiao passa simultaneamente pela amostra
com enorme ganho de tempo. Isto permite resolues extremamente altas ( 0,001 cm-1).
Alm disto, o resultado de vrias varreduras combinado para diminuir os rudos, gerando
espectros com excelentes relao sinal/ rudo com relativamente pouca amostra
(SILVERSTEIN, 2000).

Captulo 2 Reviso de Literatura 20

2.9.2. Espectroscopia de Ressonncia Paramagntica Eletrnica (RPE)


A RPE refere-se absoro de energia de eltrons desemparelhados de um tomo,
molcula ou on quando estes se encontram sujeitos aplicao de um campo magntico.
Assim, a condio necessria para se utilizar essa tcnica que o sistema em estudo apresente
ao menos um eltron desemparelhado (WEIL et al., 1994).
O fenmeno de RPE baseado no efeito Zeeman eletrnico, ou seja, na capacidade de
desdobrar o estado de energia do nvel de spin, o que obtido por meio da aplicao de
campo magntico. Em seguida, com a aplicao de uma radiao eletromagntica, possvel
gerar transio dos eltrons em diferentes estados de spin de menor energia para o estado
excitado. No retorno ao estado fundamental, essa energia devolvida ao meio e pode ser
detectada. No caso do spin eletrnico, o estado de menor energia ms = - e o estado
excitado ms = +, conforme ilustrado na Figura 2.7, a qual ilustra o fenmeno de RPE.

A.

B.

C.

FIGURA 2.7 A. Esquema simplificado do fenmeno de RPE, mostrando o efeito Zeeman para um sistema com
I = ; B. caracterstica do espectro de absoro; e C. a primeira derivada do espectro de absoro, a qual
normalmente detectada nos espectrmetros de RPE, indicando os parmetros: fator g, largura de linha do sinal
(H) e intensidade do sinal (I)

Captulo 2 Reviso de Literatura 21


As SH possuem radicais livres produzidos por grupos semiquinonas, formados pela
deidrogenao oxidativa de compostos fenlicos (Figura 2.8), os quais so observveis pela
RPE (Figura 2.9).

FIGURA 2.8 Esquema da estabilizao do radical livre do tipo semiquinona (SENESI e SCHNITZER, 1977)

A tcnica de RPE tem sido muito usada em estudos cerca do grau de humificao
das SH (RIFFALDI e SCHNITZER, 1972; SENESI e SCHNITZER, 1977; MARTIN-NETO
et al., 1991; MARTIN-NETO et al., 1994a). O grau de humificao est associado
estabilidade e complexidade das molculas de SH, o que significa que cadeias maiores, com
maior contedo de grupos aromticos apresentaro maior grau de humificao. Assim, a RPE
tem se mostrado til na caracterizao da matria orgnica de solos submetidos a diferentes
formas de manejo (GONZLEZ-PREZ et al., 2004), sendo possvel observar a diminuio
do grau de humificao da matria orgnica natural do solo quando so tratados com resduos
orgnicos (SANTOS, 2006).

Captulo 2 Reviso de Literatura 22

FIGURA 2.9 Espectro tpico de RPE de cido hmico mostrando o sinal do radical livre do tipo semiquinona

A tcnica de RPE possibilita tambm informaes estruturais sobre a complexao dos


ons metlicos paramagnticos, grande parte micronutrientes (Fe, Cu, Cr, Mn, Mo) com as
substncias hmicas (MARTIN-NETO et al., 1991). Resultados obtidos por OLENDZIK
(2006) mostraram que os ons Fe3+ esto ligados a MOS atravs de grupos oxigenados,
enquanto que os ons Mn2+, observados na frao humina formavam complexos de esfera
externa com ela.

2.9.3 Espectroscopia de Ressonncia Magntica Nuclear (RMN)


As tcnicas de RMN fundamentam-se na absoro seletiva de radiofreqncias por
ncleos presentes em amostras colocadas em um campo magntico. Os ncleos assim
excitados, apenas de forma muito tnue devido pequena diferena de energia entre os
estados energticos, regressam ao estado fundamental emitindo energia radiante no domnio
temporal, que aps transformao matemtica (aplicao de uma transformada de Fourier)
apresentam variaes no domnio das freqncias. A determinao precisa dos valores destas
radiofreqncias especficas emitidas, que variam dependendo do campo magntico sentido
pelos ncleos, e a velocidade de regresso ao estado fundamental (relaxao) constituem a
essncia das tcnicas de RMN, permitindo no s a elucidao estrutural como tambm
estudos da dinmica molecular.
A absoro funo de determinados ncleos da molcula. Ncleos que possuem um
nmero de spin, I, igual a (por exemplo, 1H, 3H,

13

C,

15

N,

19

F,

31

P) apresentam uma

distribuio de carga esfrica e uniforme, o que facilita a obteno dos espectros de RMN.

Captulo 2 Reviso de Literatura 23


Segundo a mecnica quntica, o nmero de spin I, determina o nmero de orientaes
diferentes que um ncleo pode assumir quando colocado em um campo magntico uniforme,
de acordo com a frmula 2I + 1. Na Figura 2.10 esto apresentados dois nveis de energia,
com um pequeno excesso de populao dos ncleos (com I = ) no estado de energia mais
baixa (N > N) de acordo com a distribuio de Boltzmann. Os estados so identificados
como e - (SILVERSTEIN, 2000; ATKINS, 2004).
O fenmeno da RMN ocorre quando se coloca a amostra em um campo magntico B0
e os ncleos com I > 0 se orientam na direo de campo gerando 2I + 1 nveis de energia
(Figura 2.10), a qual representada pela equao
E = hB0I
2
onde h a constante de Planck e a razo giromagntica. Esse desdobramento em
nveis de energia o efeito Zeeman. A diferena de energia entre os dois nveis dada por
E = h = h
2
onde denominada freqncia de Larmor e igual a -B0. A espectroscopia de
RMN consiste, ento, em detectar a freqncia ( = 2) em que ocorre a transio entre os
dois nveis de energia.

Spin = -

I=

Spin = +
N

B0

FIGURA 2.10 Dois nveis de energia dos hidrognios, como descritos pela mecnica quntica, em um campo
magntico de magnitude B0. N a populao. A direo do campo magntico () est para cima, paralelo
ordenada, e B0 aumenta para a direita

Captulo 2 Reviso de Literatura 24


A RMN tornou-se relevante na identificao de compostos orgnicos, uma vez que
grupos de um dado ncleo ocupando posies diferentes numa molcula podem ser
distinguidos em regies diferentes do espectro, possibilitando dessa forma estudos cerca da
estrutura molecular em funo, principalmente, dos ncleos de 1H e de 13C. O ncleo de 12C
no magneticamente ativo (o nmero de spin I, igual a zero). O ncleo de 13C, porm,
tem como o ncleo de 1H, nmero de spin igual a . Como, entretanto a abundncia natural
de 13C s 1,1 % da de 12C e sua sensibilidade apenas 1,6 % da do hidrognio, a sensibilidade
total do ncleo de 13C, em comparao com 1H, cerca de 1/5700 (ATKINS, 2004).
Em virtude da baixa abundncia natural do istopo 13C, a atividade na espectroscopia
de RMN de

13

C somente desenvolveu-se, efetivamente, a partir do comeo dos anos 1970

(vinte anos aps o rpido desenvolvimento da espectroscopia de 1H) quando foi introduzida a
tcnica pulsada com transformada de Fourier, a qual possibilitou a irradiao simultnea de
todos os ncleos de 13C. A medida espectroscpica de RMN de 13C, pode ocorrer tanto com
amostras na forma lquida quanto na slida (SILVERSTEIN, 2000).
Na espectroscopia de RMN de

13

C com amostras no estado lquido, elas so

usualmente dissolvidas em solventes deuterados e o sinal de 13C do tetrametilsilano (TMS)


usado como referncia interna. Os deslocamentos qumicos observados vo at cerca de 240
ppm a partir do TMS, uma faixa aproximadamente 20 vezes maior do que a dos espectros de
1

H comuns (~12 ppm). Em conseqncia desta larga faixa e de os sinais desacoplados serem

agudos, as impurezas so facilmente detectadas e espectros de misturas podem ser analisados


(SILVERSTEIN, 2000).
Para aplicao RMN de

13

C aos slidos, a principal dificuldade encontrada reside na

baixa resoluo caractersticas das amostras slidas. Para obter um espectro com melhor
resoluo, problemas como o alargamento de linha devido tanto s interaes dipolares
heteronucleares (13C,

H) como anisotropia do deslocamento qumico, e a baixa

sensibilidade devido aos longos tempos de relaxao spin-rede dos ncleos de 13C devem ser
resolvidos. No estado liquido estas interaes anisotrpicas esto presentes, mas so
eliminadas pelo rpido movimento isotrpico das molculas. Com o desenvolvimento de
tcnicas novas e sofisticadas tais como: desacoplamento de alta potncia, tcnica de rotao
segundo o ngulo mgico (MAS, do ingls Magic Angle Spinning) e polarizao cruzada (CP,
do ingls Cross Polarisation) estas limitaes da RMN no estado slido tm sido melhoradas
(ATKINS, P. e PAULA, J. 2004).
Utilizando o desacoplamento de alta potncia possvel eliminar o alargamento das
linhas no espectro RMN de 13C provocado principalmente pelas interaes dipolares entre os

Captulo 2 Reviso de Literatura 25


ncleos de

13

C e 1H. Estas interaes surgem devido influncia dos hidrognios que so

abundantes e originam um campo local sob os ncleos de

13

C. O desacoplamento feito

atravs da reduo do momento magntico dos ncleos de 1H que so abundantes, pela


aplicao de sua radiofreqncia de ressonncia, que mantm o momento dipolo magntico
em alta rotao.
A tcnica de MAS elimina os vestgios da interao dipolar

13

C 1H e minimiza os

efeitos da anisotropia sobre o deslocamento qumico atravs da rotao da amostra segundo o


ngulo de 54,74 , denominado ngulo mgico, em relao ao campo aplicado (Figura 2.11).
A CP permite aumentar a sensibilidade dos ncleos de 13C e reduzir os longos tempos
de relaxao spin-rede, mediante transferncia da magnetizao de spins de ncleos
abundantes como 1H para os spins de ncleos pouco abundantes como os de 13C, contribuindo
tambm para o aumento da resoluo pelo incremento de magnetizao total.

B0
FIGURA 2.11 Na rotao no ngulo mgico, a amostra gira fazendo um ngulo de 54,74 com a direo do
campo magntico (B0) aplicado. O movimento rpido sobre este ngulo promedia em zero as interaes dipolodipolo e as anisotropias do deslocamento qumico (ATKINS, P. e PAULA, J. 2004)

Atravs da RMN de 13C podem-se identificar as diferentes vizinhanas dos respectivos


ncleos, frente a um campo magntico aplicado e, que possibilitam caracterizar a estrutura das
SH. No entanto, os espectros caractersticos das SH (Figura 2.12) apresentam bandas largas e
sobreposio, o que impede uma atribuio exata. Porm, existe a possibilidade de se obter
informao semiquantitativa mediante a integrao dos picos largos e a associao com
grupos funcionais caractersticos das SH. As principais regies do espectro semiquantificadas
por RMN de

13

C no estado slido em AH, mostrados na Figura 2.12, so pertinentes aos

grupos alifticos (0-45 ppm), N-alifticos e metoxlicos (45-60 ppm), O-alifticos (60-110
ppm), aromticos (110-140 ppm), O-aromticos (140-160 ppm), carboxlicos (160-185 ppm)
e carbonlicos (185-230 ppm).

Captulo 2 Reviso de Literatura 26

FIGURA 2.12 Espectro RMN de 13C tpico de AH mostrando os grupos funcionais associados s bandas
correspondentes (SKJEMSTAD et al., 1998)

2.9.4 Espectroscopia de Fluorescncia em Soluo


Luminescncia a emisso de luz por uma substncia quando submetida a algum tipo
de estmulo. A luminescncia formalmente dividida em duas categorias, fluorescncia e
fosforescncia, dependendo da natureza do estado excitado. O processo de luminescncia de
uma molcula est diretamente relacionado com os processos de absoro e dissipao de
energia da mesma. A energia absorvida dependente da diferena de energia entre o estado
fundamental e o estado excitado (LAKOWICZ, 2004).
Quando a energia absorvida pela molcula no suficiente para sua ionizao ou
dissociao, ela permanecer no estado excitado por um determinado tempo, chamado tempo
de vida do estado excitado. Logo em seguida, ela emite energia na forma de calor e/ ou luz.
Essa luz emitida por esse processo o que chamamos de luminescncia. Dependendo do
tempo de vida do estado excitado o processo denominado fluorescncia ou fosforescncia
(Figura 2.13). Estados excitados com tempos de vida curtos (10-7-10-9 s), no qual envolvem
transies singleto-singleto, levam a processos chamados de fluorescentes. Os processos
denominados fosforescentes requerem um estado intermedirio tripleto, devido a reverso do
spin entre o estado fundamental e o excitado, o qual retarda a emisso levando a estados
excitados com tempo de vida longo (> 10-6 s) (LAKOWICZ, 2004).
No estado excitado singleto, o eltron excitado est emparelhado ao eltron que
permaneceu no estado fundamental. Dessa forma, o spin retorna ao estado fundamental com a
emisso de um fton. Esse processo de transio eletrnica possui um tempo caracterstico

Captulo 2 Reviso de Literatura 27


prximo a 10 ns (10 x 10-9 s) sendo denominado fluorescncia. Para que ocorra determinada
transio, a energia absorvida deve ser equivalente diferena entre o estado eletrnico inicial
e o excitado. Este valor representa o de excitao e caracterstico de uma estrutura
molecular em particular. No retorno ao estado fundamental, o eltron emite energia que pode
manifestar-se em forma de calor ou emisso de ftons com um especfico, chamado de
emisso, logo a energia emitida menor que a absorvida por causa das perdas na forma de
calor ou vibraes moleculares (LAKOWICZ, 2004).

S1

Absoro

T1

Decaimento
no radioativo

Fluorescncia

Decaimento
no radioativo

Fosforescncia

S0
FIGURA 2.13 Nveis vibracionais e eletrnicos de uma molcula orgnica, e caminhos de decaimento
radiativos e no radiativos (NARIMOTO, 2006)

Na fluorescncia, transies tpicas envolvem a promoo de eltrons no ligantes (n)


ou ligantes () para orbitais antiligantes *. Esses so altamente provveis em compostos
denominados fluorforos, os quais so sistemas moleculares contendo tomos com pares de
eltrons no compartilhados, tais como, oxignio e nitrognio e em estruturas aromticas e/ ou
alifticas conjugadas de insaturaes com alto grau de ressonncia, isto , deslocalizao
eletrnica, como observado para as SH do solo (SENESI et al., 1991).
No existe uma definio clara com respeito composio qumica e estrutural da
MO presente no solo. Sabe se, por exemplo, que os principais constituintes desse material so
as SH. Porm, a estrutura qumica dessas substncias ainda indefinida, pois existem grandes
variaes com relao a sua composio elementar, massa molecular, e concentrao e tipos
de grupos funcionais.

Captulo 2 Reviso de Literatura 28


O uso da fluorescncia nos estudos das SH est apoiado pela presena de vrias
estruturas fluorescentes intrnsecas molcula hmica e seus precursores, particularmente
aromticos, fenis e grupos quinona (SENESI et al., 1991). Estruturas fluorescentes nativas
ou incorporadas s SH constituem apenas uma pequena poro da macromolcula hmica,
entretanto, sua variedade e a dependncia de suas propriedades do meio de origem, permitem
a obteno de informaes sobre seu comportamento fluorescente e sobre a natureza qumica
da SH (SENESI e LOFFREDO, 1999). O comportamento fluorescente mdio da molcula o
resultado da soma de todos os espectros individuais dos diferentes fluorforos da molcula.
A espectroscopia de fluorescncia tem sido usada para avaliar o ndice de humificao
da matria orgnica do solo (ZSOLNAY et al., 1999; KALBITZ et al., 2000; OHNO, 2002;
ZOLNAY, 2002; MILORI et al., 2002; CARVALHO et al., 2004). Para tal, tm sido
propostas metodologias utilizando modalidades de emisso e de varredura sincronizada.

2.9.4.1 Modalidade de Emisso


Em um espectro de emisso costuma-se definir um comprimento de onda especfico
para excitao das molculas da amostra. O comprimento de onda da radiao incidente
definido a partir do espectro de absoro da amostra, sendo aquele no qual houve maior
intensidade de radiao absorvida. Mantendo-se fixo o comprimento de onda de excitao
possvel obter os comprimentos de onda e as intensidades das emisses provenientes da
relaxao dos componentes da amostra.
ZSOLNAY et al., (1999) propuseram uma metodologia para avaliar o ndice de
humificao da matria orgnica do solo, utilizando um espectro de emisso de fluorescncia
com excitao em 240 nm. O ndice de humificao, foi avaliado com base na rea do
espectro, a qual foi dividida em quatro partes. Dividindo-se a quarta parte do espectro pela
primeira, obteve-se o ndice, denominado A4/A1. Os autores utilizaram essa relao a despeito
de que molculas mais aromticas fluorescem em comprimentos de onda maiores do que
molculas com estruturas mais alifticas, as quais necessitam de maior energia para
fluorescer. Dessa forma, a razo entre essas duas reas um indicativo de quo humificada
(maior aromaticidade) est a MOS. Um espectro de fluorescncia de emisso de uma soluo
de AH, segundo a metodologia de ZSOLNAY et al., (1999), apresentado na Figura 2.14.

Captulo 2 Reviso de Literatura 29

450

Intensidade de fluorescncia (u.a.)

400
350
300
250
200
150
100
50
0
300

350

400

450

500

550

600

650

700

Comprimento de onda (nm)

FIGURA 2.14 Espectro de emisso de fluorescncia de AH extrados de solo tratado com lodo de esgoto,
obtido segundo metodologia de ZSOLNAY et al., (1999). Comprimento de onda de excitao exc= 240 nm
(NARIMOTO, 2006)

MILORI et al., (2002) propuseram utilizar como ndice de humificao a rea do


espectro de emisso medido com o maior comprimento de onda correspondente ao mximo de
intensidade de fluorescncia obtido no espectro de excitao. Esta seria uma medida relativa
quantidade de compostos mais condensados e mais aromticos. Denominou-se A465 o ndice
de humificao determinado segundo MILORI et al., (2002), que neste caso igual a integral
da regio total do espectro de emisso (Figura 2.15) da amostra com comprimento de onda de
excitao exc= 465 nm.

Captulo 2 Reviso de Literatura 30

Intensidade de fluorescncia (u.a.)

400
350
300
250
200
150
100
50
0
460

480

500

520

540

560

580

600

620

640

660

Comprimento de onda (nm)

FIGURA 2.15 Espectro de emisso de fluorescncia de AH extrados de solo tratado com lodo de esgoto,
obtido segundo metodologia de MILORI et al., (2002). Comprimento de onda de excitao exc= 465 nm
(NARIMOTO, 2006)

2.9.4.2 Modalidade Sincronizada


O espectro de varredura sincronizada obtido monitorando-se os comprimentos de
onda de excitao e emisso de forma sincronizada com um intervalo constante entre ambos,
onde = em - exc. Ao utilizar a modalidade de emisso sncrona para estudar amostras
contendo uma grande variedade de compostos orgnicos, tais como as SH, aumentam-se as
chances de ocorrncia de sobreposio de picos, podendo gerar distores no sinal de
fluorescncia. No entanto, a resoluo de um espectro de fluorescncia pode ser comprimida
ou expandida conforme diminui-se ou aumenta-se o valor de (VO-DINH, 1978).
KALBITZ et al., (2000) sugeriram um valor de = 55 nm para avaliar o ndice de
humificao da matria orgnica do solo. Nesta metodologia, os espectros de fluorescncia
sincronizados das SH apresentam dois picos em torno de 360 e 400 nm e um ombro prximo
a 470 nm. Esse perfil muda dependendo do ndice de humificao da matria orgnica,
podendo ser avaliado medindo-se a razo entre a intensidade de fluorescncia em 400 e 360
nm ou em 470 e 360 nm. A Figura 2.16 mostra um espectro de fluorescncia sincronizada
obtido para uma soluo de cido hmico extrado de solo tratado com lodo de esgoto.

Captulo 2 Reviso de Literatura 31

450

Intensidade de fluorescncia (u.a.)

400
350
300
250
200
150
100
50
0
300

350

400

450

500

550

Comprimento de onda (nm)

FIGURA 2.16 Espectro de varredura sincronizada de AH extrados de solo tratado com lodo de esgoto, obtido
segundo metodologia de KALBITZ et al., (2000). = 55 nm (NARIMOTO, 2006)

2.9.5 Espectroscopia de Fluorescncia Induzida por Laser (FIL)


O princpio bsico da FIL o mesmo exposto para fluorescncia na sesso anterior. A
diferena consiste apenas no fato da excitao do material fluorescente ser feita atravs de um
laser. O uso do laser apresenta vantagens como a intensidade de luz mais alta num
comprimento de onda de excitao especfico produzindo assim melhor relao sinal-rudo
quando comparada fluorescncia induzida por lmpada, e maior seletividade na excitao
tendo portanto, menos fatores de interferncia no sinal da fluorescncia.
Na Figura 2.17 tem-se um esquema bsico da montagem experimental para realizar
anlises de FIL em amostras opacas usando um laser de argnio (Ar) como fonte de
excitao. O prisma na sada do laser possibilita a separao da emisso laser da fluorescncia
de fundo do gs, permitindo uma excitao limpa da amostra.

A lente coleta o sinal de

fluorescncia e focaliza sobre a fenda do monocromador. O filtro elimina a excitao


espalhada pela superfcie da amostra. O chopper serve para modular a luz numa freqncia
definida que serve de referncia para o amplificador lock-in. Um sistema de aquisio
controla o passo do monocromador e a leitura do sinal do lock-in gerando o espectro de
emisso da amostra.

Captulo 2 Reviso de Literatura 32

FIGURA 2.17 Montagem experimental para realizao de anlises de fluorescncia induzida por laser
(NARIMOTO, 2006)

A espectroscopia de fluorescncia induzida por laser tem se mostrado eficiente na


anlise da matria orgnica de solos, fornecendo resultados satisfatrios de forma gil, limpa
e em condies prximas das naturais, visto que as amostras de solo no precisam ser
submetidas a um tratamento prvio, como necessrio em outras tcnicas tais como RMN e
RPE entre outras (MILORI et al., 2003; MILORI et al., 2004; MILORI et al., 2006). Para a
anlise de FIL so utilizadas pastilhas de solo (aproximadamente 1 cm de dimetro e 2 mm de
espessura) prensadas em molde de ao, como apresentado na Figura 2.18A.

Captulo 2 Reviso de Literatura 33

A.

B.

FIGURA 2.18 A. Pastilhas de solo usadas para obteno dos espectros. B. laser incidindo sobre uma pastilha
de solo

A fluorescncia do solo tem origem na MO, pois essa possui grupos funcionais ricos
em ligaes insaturadas contidas em sistemas rgidos. Esses grupos, denominados fluorforos,
esto presentes principalmente na MO mais humificada, tais como OH fenlicos livres e
ligados, estruturas de quinona, grupos carboxlicos ligados e anis aromticos.
Utilizando a FIL, MILORI et al., (2004) propuseram para obteno do ndice de
humificao, a razo entre o valor da rea sob a curva de fluorescncia (ACF) com excitao
em 458 nm e a porcentagem de carbono orgnico total (COT) presente na amostra de solo,
HFIL= ACF/COT
a qual visa normalizar a relao entre intensidade de emisso e a concentrao de
grupamentos fluorforos presentes na matria orgnica da amostra.

2.10 Espectrometria de Emisso tica com Plasma Acoplado


Indutivamente (ICP OES)
A espectrometria de emisso tica com plasma acoplado indutivamente (ICP OES)
uma tcnica analtica que pode ser usada para determinao de elementos em nveis de traos,
baseada nos espectros de emisso dos mesmos (VANDECASTEELE e BLOCK, 1993).

Captulo 2 Reviso de Literatura 34


O princpio fundamental da emisso atmica envolve a medida da intensidade da
radiao eletromagntica na forma de luz emitida por tomos excitados e ou ionizados (ou
tambm por molculas). Nesse caso, tomos so excitados e/ ou ionizados e ao retornar ao
estado fundamental emitem radiao em comprimento de onda especfico.
A espectrometria ptica de emisso utiliza esse fenmeno para a determinao
quantitativa de elementos (metais e alguns no metais) em uma ampla variedade de amostras
(guas, materiais biolgicos, clnicas, ambientais, alimentos, geolgicos) IDE &
NAKAMURA, 2002, TREVIZAN et al., 2003. A amostra pode ser introduzida no plasma nas
formas gasosa, lquida ou suspenso. Quando a amostra introduzida na forma lquida ou de
suspenso, geralmente usa-se o princpio de nebulizao pneumtica.
No nebulizador, ou na sada desse, um gs em alta vazo carrega a amostra para a
cmara de nebulizao onde as pequenas gotculas (aerossol) formadas so arrastadas e
passam atravs do plasma, onde ocorrem os processos de secagem, atomizao, excitao e
ionizao dos tomos.
O plasma uma mistura gasosa condutora de eletricidade, parcialmente ionizado que,
dependendo da fonte de radiofreqncia empregada, pode atingir temperaturas da ordem de
6000 a 11000 C, sendo esses valores de temperatura elevados, os responsveis pelos
processos de atomizao, excitao e ionizao citados anteriormente.
A radiao na forma de luz emitida pelos tomos ou ons no plasma direcionada para
o sistema ptico do equipamento onde ser separada nos comprimentos de onda especficos
que so detectados e quantificados.
Esse mtodo tem sido bastante atrativo ao possibilitar anlises multielementares em
uma ampla faixa de concentrao em uma mesma amostra. A alta temperatura e atmosfera
inerte do gs argnio, usado no plasma, diminuem as interferncias qumicas da matriz,
resultando em boa sensibilidade e com baixos limites de deteco (SANTOS, 1999).

2.11 Composio Elementar


A determinao percentual dos elementos carbono, hidrognio, nitrognio e enxofre
em compostos orgnicos e organometlicos uma das aplicaes quantitativas mais
importantes da cromatografia com fase gasosa. Usualmente, as amostras (1,0 mg) so pesadas
em recipientes de estanho e introduzidas automaticamente em um tubo vertical de quartzo
mantido a 1030 oC, pelo qual passa uma corrente constante de hlio. Quando a amostra

Captulo 2 Reviso de Literatura 35


penetra no tubo, a corrente de hlio enriquecida temporariamente por oxignio e ocorre
combusto rpida da amostra. A mistura de gases obtida passa sobre Cr2O3 para que a
combusto seja quantitativa e sobre cobre, em 650 oC, para remover o excesso de oxignio e
reduzir os xidos de nitrognio a N2. A mistura de gases passa, finalmente, por uma coluna
cromatogrfica mantida a 100 oC aproximadamente. Os diversos componentes (N2, CO2,
H2O) so separados e eludos at um detector de condutividade trmica.
A anlise elementar muito utilizada na tentativa de identificar alteraes na
composio de SH extradas de solos sob diferentes tratamentos e manejos, incluindo adio
de lodo de esgoto tratado (SENESI et al., 1989; NARIMOTO, 2006; SANTOS, 2006).
Valores elevados da razo atmica H/C sugerem estruturas mais alifticas, enquanto que
valores baixos podem ser devidos a estruturas mais aromticas.
A partir dos valores de composio elementar possvel calcular a razo atmica
C/N, a qual indica o grau de incorporao do nitrognio na estrutura hmica, o estado de
humificao da MOS, e tambm tem sido utilizada para verificar a taxa de degradao de
resduos orgnicos no solo e em compostos orgnicos produzidos a partir de resduos vegetais
(DA SILVA et al., 2004).
O processo de degradao de resduos orgnicos no solo acompanhado pela
converso de C e N em tecido microbiano. Neste processo, parte do carbono liberada como
CO2. O teor de N em resduos orgnicos, refletido pela razo C/N, de grande importncia na
magnitude de dois processos opostos: mineralizao e imobilizao. Resduos com razo C/N
superiores a 30 resultam em baixas reservas de N mineral, devido imobilizao por
microrganismos. Por outro lado, resduos com razo C/N inferiores a 20 possibilitam um
aumento no nvel de N mineral atravs de sua mineralizao (STEVENSON, 1986).

36

CAPTULO 3 OBJETIVOS
O objetivo deste trabalho foi de analisar a composio do efluente gerado pela fossa
sptica biodigestora e sua ao fertilizante no solo, visando:
- compreender melhor a variabilidade da composio do efluente gerado em diversos
locais e perodos do ano;
- compreender de forma mais precisa os processos de transformao da matria
orgnica, assim como a sua composio final;
- avaliar a influncia do inoculante (bovino e ovino) nas caractersticas do efluente e;
- avaliar o impacto gerado na matria orgnica e a disponibilidade de nutrientes para
as plantas aps a aplicao do efluente no solo.

Captulo 4 Material e Mtodo 37

CAPTULO 4 MATERIAIS E MTODOS


Nesse trabalho analisaram-se amostras de material proveniente das trs caixas do
sistema da fossa sptica biodigestora; amostras de solo adubados com efluente, com adubao
mineral e solos de mata. Foram tambm analisados os cidos hmicos extrados do solo.

4.1 Parte 1: Amostras de Efluente


4.1.1 Amostragem e Preparo do Material da Fossa Sptica Biodigestora

O efluente analisado neste trabalho foi coletado em trs sistemas da Fossa Sptica
Biodigestora, instalados no Stio Aparecida, na Fazenda Morro Verde e na Fazenda Santa
Cndida.
O Stio Aparecida uma pequena propriedade rural, localizada na cidade de So
Carlos-SP, na qual desenvolvem-se atividades agrcolas familiares como cultivo de laranjas, e
tambm pecurias como a criao de gado bovino. Neste Stio, em 2001, foi instalado o
sistema da Fossa em substituio fossa negra. O sistema, mostrado na Figura 4.1
composto por trs caixas de mil litros, as quais so adequadas para promover o tratamento do
esgoto domstico dos habitantes do stio. Neste sistema usado esterco bovino como
inoculante.

FIGURA 4.1 Sistema da fossa sptica biodigestora instalado no Stio Aparecida So Carlos/SP

Captulo 4 Material e Mtodo 38


A Fazenda Morro Verde localiza-se na cidade de Itirapina-SP. Nesta Fazenda, em abril
de 2005, foi instalado no local um sistema da Fossa (Figura 4.2), de carter experimental, no
qual substitui-se o esterco bovino usado como inoculante, por esterco ovino, visando avaliar e
comparar a eficincia do processo de desinfeco. Esse experimento foi feito no intuito de
atender as necessidades de tratamento de esgoto em propriedades rurais que no possuem
criao de gado bovino, como freqentemente, encontradas na regio nordeste.

FIGURA 4.2 Sistema da fossa sptica biodigestora instalado na Fazenda Morro Verde Itirapina/SP

Na Fazenda Santa Cndida, pertencente a Sobloco Construtora S.A., foi instalado um


sistema da Fossa Sptica Biodigestora em 2003. O sistema foi redimensionado para promover
o tratamento do esgoto gerado por quatro famlias (Figura 4.3), sendo utilizadas quatro caixas
de cinco mil litros cada, ao invs de trs caixas de mil litros, a qual apropriada para uma
famlia de no mximo cinco pessoas.

FIGURA 4.3 Sistema da fossa sptica biodigestora instalado na Fazenda Santa Cndida So Carlos/SP

Captulo 4 Material e Mtodo 39


No sistema instalado na Fazenda Santa Cndida coletou-se somente o material da
caixa 3 para avaliar e comparar suas caractersticas com o efluente gerado nos sistemas de
dimenses menores (composto de trs caixas de 1000 litros), no sendo feita portanto, a
anlise do material presente nas demais caixas deste sistema.
Para os outros dois sistemas (da Fazenda Morro Verde e Stio Aparecida) foram feitas
trs coletas, em outubro de 2005, julho e outubro de 2006. Coletaram-se dois litros do
material de cada caixa (Figura 4.2) para anlise da matria orgnica, um litro para anlise de
parmetros fsico-qumicos (Tabela 5.1, p. 51) realizada no Laboratrio de Saneamento da
Universidade de So Paulo (USP).
As amostras destinadas anlise de matria orgnica foram congeladas e liofilizadas.
O slido obtido foi ento modo em moinho criognico e reservado.
As amostras foram nomeadas de acordo com o tipo de esterco usado como inoculante,
com a poca de coleta e tambm com relao as trs caixas do sistema da fossa. A Tabela 4.1
apresenta a nomenclatura adotada para as amostras de efluente.

TABELA 4.1 Nomenclatura adotada para as amostras de efluente


Nomenclatura

Data da coleta

1O1
1
1O2
Outubro/2005
1O3
2O1
2
2O2
Julho/2006
2O3
3O1
3
3O2
Outubro/2006
3O3
1B1
1
1B2
Outubro/2005
1B3
2B1
2
2B2
Julho/2006
2B3
3B1
3
3B2
Outubro/2006
3B3
2Julho/2006
2FSC3*
*Fazenda Santa Cndida

Inoculante

Esterco ovino

Esterco bovino

Caixa
1
2
3
1
2
3
1
2
3
1
2
3
1
2
3
1
2
3
3

Local de Coleta

Itirapina

So Carlos

Em julho de 2006 fez-se tambm uma coleta do lodo de esgoto presente nas trs caixas
do sistema. O lodo foi congelado, liofilizado e posteriormente modo em moinho criognico.
A nomenclatura adotada para as amostras de lodo descrita na Tabela 4.2.

Captulo 4 Material e Mtodo 40

TABELA 4.2 Nomenclatura adotada para as amostras de lodo de esgoto


Nomenclatura

Data da coleta

L2O1
L2O2
L2O3
2
L2B1
Julho/2006
L2B2
L2B3
L2FSC3*
*Fazenda Santa Cndida

Inoculante

Caixa

Esterco Ovino

Esterco Bovino

1
2
3
1
2
3
3

Local de Coleta
Itirapina

So Carlos

4.1.2 Anlises do Efluente


4.1.2.1 Parmetros Fsico-qumicos
Os parmetros fsico-qumicos (Tabela 5.1, p.51) foram determinados segundo
metodologias descritas no Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater
no Laboratrio de Saneamento da USP em So Carlos.

4.1.2.2 Condutividade e pH
Uma estimativa do teor total de sais em soluo obtida pela medida de sua
condutividade eltrica (CE). A CE do efluente foi obtida aps sua filtrao. Para tal, calibrouse o condutivmetro (Condutivmetro Horiba, modelo ES-12E) com soluo de KCl 0,01 mol
L-1, sendo que a condutividade eltrica dessa soluo de 1,41 dS m-1 a 25 oC. Lavou-se a
clula de condutividade trs vezes com gua e encheu-a com o efluente filtrado. Usou-se um
termostato para manter a temperatura a 25 oC.
Foram feitas anlises de pH das amostras de efluente filtrado, utilizando eletrodo de
vidro combinado.

4.1.2.3 Anlise Elementar e Teor de Cinzas


Foram feitas as anlises qumicas de C, N e H das amostras do slido obtido aps
liofilizao do efluente, usando equipamento Fisons - Modelo: EA1108/CHNS-O pertencente
ao Departamento de Qumica da Universidade Federal de So Carlos. O oxignio foi obtido
por diferena %O = 100 - (%C + %N + %H + %S + %Cinzas).

Captulo 4 Material e Mtodo 41


O clculo da razo C/N e H/C foi efetuado a partir dos percentuais de C, N e H
divididos pelas suas respectivas massas atmicas.
Para a determinao de cinzas, aproximadamente 20 mg de amostras de efluente
liofilizado foram calcinados durante duas horas a 700 oC em cadinho de platina, pr-seco e
pesado. O teor de cinzas foi calculado, aps a queima da matria orgnica, por diferena entre
a massa final do cadinho (cadinho calcinado) e inicial (cadinho tarado).
4.1.2.4 Determinao de Macro e Micronutrientes no Efluente por Espectrometria de
Emisso tica com Plasma Acoplado Indutivamente (ICP OES)
O contedo mineral foi obtido atravs da digesto por via seca de 0,10 g de efluente
liofilizado pesadas em cadinho de porcelana. As amostras foram calcinadas em mufla
elevando-se a temperatura at 550 oC, na qual permaneceu por duas horas. Aps resfriamento
at a temperatura ambiente, foram adicionados 10 mL de cido clordrico concentrado e
aqueceu-se em banho de areia at completa evaporao do cido. Novamente esperou-se
alcanar a temperatura ambiente. Lavaram-se os cadinhos com 5 mL de HCl 1,0 mol L-1, e em
seguida com mais 5 mL de gua deionizada, transferindo a soluo para tubos plsticos com
tampa. O volume final de extrato foi de 10 mL, em soluo cida 0,05 mol L-1. A digesto foi
feita em duplicata. As amostras digeridas foram quantificadas em espectrmetro de emisso
tica com plasma de argnio induzido marca VARIAN, modelo Vista RL.

4.1.2.5 Anlises Espectroscpicas


4.1.2.5.1 Espectroscopia de Infravermelho com Transformada de Fourier (FTIR)
As medidas foram feitas segundo metodologia bem conhecida na literatura
(STEVENSON, 1994) utilizando um espectrofotmetro de FTIR Perkin Elmer, Paragon 1000
PC, da Embrapa Instrumentao Agropecuria . Os espectros de pastilhas das amostras do
efluente liofilizado, preparadas com 1,0 mg de amostra e 100 mg de KBr, foram obtidos a
partir de 64 varreduras, com resoluo de 4 cm-1, no intervalo de 4000 a 400 cm-1. Para
preparar as pastilhas foi utilizada uma presso de 10 toneladas

4.1.2.5.2 Espectroscopia de Ressonncia Paramagntica Eletrnica (RPE)


As medidas de RPE foram feitas segundo metodologia de MARTIN-NETO et al.,
(1991). A potncia de microondas utilizada foi de 2,0 mW para o material da fossa liofilizado.
Usou-se amplitude de modulao de 1Gpp (Gauss pico a pico), freqncia de modulao de

Captulo 4 Material e Mtodo 42


100 KHz e 64 varreduras para obteno dos espectros. Utilizou-se aproximadamente 20 mg
de amostra para efetuar ao experimento, as quais foram inseridas em tubos de quartzo com
dimetro interno de 3,5 mm.
As medidas do nvel de radicais livres do tipo semiquinona foram feitas utilizando-se
mtodo do padro secundrio (CHIEN et al., 1997). A concentrao desses radicais (spin g-1)
foi obtida atravs da integral dupla do espectro de RPE, utilizando a aproximao I x H2,
onde I corresponde a intensidade do sinal e H a largura de linha tomadas pico a pico
(POOLE e FARACH, 1972). Posteriormente comparou-se a um padro Strong Pitch com
concentrao de spins conhecida (3 x 1015 spins cm-1) fornecido pela Bruker, utilizando rubi
sinttico como padro secundrio (SINGER, 1959; MARTIN-NETO et al., 1994a). A
quantidade de radicais livres do tipo semiquinona foi normalizada pela massa de cada
amostra.
Para efetuar as medidas utilizou-se um espectrmetro RPE de onda contnua da
Bruker, modelo EMX de cavidade retangular, banda X (~ 9,0 GHz), pertencente a Embrapa
Instrumentao Agropecuria.

4.1.2.5.2 Espectroscopia de Ressonncia Magntica Nuclear


Fizeram-se medidas de RMN de 13C com amostras slidas, aproximadamente 300 mg
de efluente liofilizado, utilizando-se as tcnicas de rotao segundo o ngulo mgico (MAS),
amplitude varivel (VA) e polarizao cruzada (CP) monitorando os ncleos do istopo 13C.
Foi utilizado um espectrmetro Varian 400 MHz Unity Inova, empregando uma sonda para
amostras slidas da marca Doty, pertencente a Embrapa Instrumentao Agropecuria. A
freqncia de ressonncia foi 100,58 MHz (13C), a banda espectral utilizada para a CP foi de
50 KHz, tempo de contato de 1 ms, tempo de repetio de 500 ms, tempo de aquisio de
0,0128 ms. A janela espectral foi de 0-230 ppm. As amostras foram medidas em rotores de
zircnia de 5 mm, com MAS de 6,4 KHz. A rampa no canal de 1H foi de 110-60% (em KHz)
da condio de Hartman-Hahn (NOVOTNY, 2002). Os deslocamentos qumicos foram
expressos em ppm em relao ao TMS e referenciados em relao ao hexametilbenzeno.
As porcentagens de alifaticidade e aromaticidade foram calculadas a partir das reas dos
espectros, segundo STEVENSON (1994):
Alifaticidade (%)= rea dos sinais de C aliftico 0-110 ppm x 100%
rea dos sinais de C 0-160 ppm

Captulo 4 Material e Mtodo 43


Aromaticidade (%)= rea dos sinais de C aromticos 110-160 ppm x 100%
rea dos sinais de C 0-160 ppm

4.2 Parte 2: Amostras de Solo


4.2.1 Amostragem e Preparo de Solo
O solo utilizado no experimento foi coletado na Fazenda Santa Cndida em So
Carlos. Nesta fazenda, em 2003, foi instalado o sistema da Fossa Sptica Biodigestora para
promover o tratamento do esgoto domstico gerado pelas famlias locais.
Todo o efluente gerado aps o processo de desinfeco usado como adubo orgnico
em uma plantao de goiaba da Fazenda. O solo analisado classificado como Latossolo
Vermelho Amarelo fase arenosa. A rea de cultivo compreende aproximadamente nove
hectares, os quais recebem aplicao de efluente trs vezes ao ano, exceto em uma rua do
goiabal, que adubada somente com adubo do tipo NPK. Em toda a rea cultivada feita
correo da acidez do solo com calcrio.
A coleta foi feita em agosto de 2006. Coletaram-se as amostras na rea de projeo da
copa das frutferas utilizando trado holands, nas camadas de 0-10, 10-20 e 20-40 cm, de
solos submetidos adubao mineral do tipo NPK, solos adubados com efluente e de solo de
uma mata nativa prxima ao goiabal. Foram coletadas amostras simples em cinco pontos
diferentes para se obter a amostra composta representativa da rea. Os solos foram
acondicionados em bandejas plsticas, e secos sombra. Em seguida foi realizada a limpeza
manual para retirada das razes e restos de plantas e posteriormente passado em peneira de 0,5
mm. A nomenclatura adotada para as amostras de solo descrita na Tabela 4.3.
TABELA 4.3 Nomenclatura adotada para as amostras de solo
Nomenclatura
CE1
CE2
CE4
NPK1
NPK2
NPK4
M1
M2
M4

Descrio
Solo adubado com efluente
Solo com adubao mineral
NPK
Solo de mata

Profundidade
(cm)
0-10
10-20
20-40
0-10
10-20
20-40
0-10
10-20
20-40

Todas as amostras de solos foram submetidas a um processo de extrao e


fracionamento qumico das substncias hmicas por diferena de solubilidade, seguindo a

Captulo 4 Material e Mtodo 44


metodologia descrita pela Sociedade Internacional de Substncias Hmicas (IHSS) descrito
no item 4.3.1. p.47.

4.2.2 Anlises do Solo

4.2.2.1 Condutividade e pH do Extrato do Solo


Para determinar a condutividade das amostras de solo usou-se um mtodo
desenvolvido pelo Laboratrio de Salinidade dos EUA, o qual extrai sais solveis em gua
com base na relao gua /solo (VAN RAIJ, 2001).
Para a obteno dos extratos, adicionou-se 100 cm3 de solo seco. Em seguida
adicionou-se gua deionizada at o ponto de saturao. Deixou-se em repouso por uma hora.
Utilizando um funil de Buchner, filtrou-se a mistura recolhendo a soluo em um frasco
plstico com tampa. O condutivmetro foi calibrado com soluo de KCl 0,01 mol L-1, sendo
que a condutividade eltrica dessa soluo de 1,41 dS m-1 a 25 oC. Lavou-se a clula de
condutividade trs vezes com gua e encheu-a com o extrato do solo. Usou-se um termostato
para manter a temperatura a 25 oC. As medidas foram feitas em duplicata.
Para a determinao do pH do solo foi misturado 10 cm3 de terra fina seca ao ar
(TFSA) com 25 mL de CaCl2 0,01 mol L-1. As amostras foram agitadas por 15 minutos e
deixadas em repouso durante duas hora. Em seguida, procedeu-se a leitura utilizando um
eletrodo de vidro combinado.

4.2.2.2 Anlise de Macro e Micronutrientes Disponveis no Solo


A determinao dos nutrientes disponveis no solo foi feita segundo a metodologia
adotada pelo Instituto Agronmico de Campinas, descrita por VAN RAIJ (2001).

4.2.2.3.1 Extrao de Macronutrientes (Ca, Mg, K, P) com Mistura de Resinas Trocadora de


ons
a) Preparo de Solues-padro

Captulo 4 Material e Mtodo 45


Foi preparada uma soluo-padro-estoque de clcio, magnsio, potssio e fsforo.
Essa soluo contm, por litro, 50,0 mmolc de Ca2+, 10,0 mmolc de Mg2+, 3,0 mmolc de K+ e
40,0 mg de P dissolvidos em soluo 0,8 mol L-1 de NH4Cl e 0,2 mol L-1 de HCl.
Transferiu-se 0, 1, 2, 3, 4 e 5 mL da soluo-estoque para bales volumtricos de 50
mL, identificados, respectivamente, por A, B, C, D, E e F. Completou-se os volumes com
soluo de NH4Cl 0,8 mol L-1 em HCl 0,2 mol L-1.

b) Preparo dos Extratos


Transferiu-se 2,5 cm3 de terra para um frasco plstico cnico de 80 mL. Acrescentouse 25 mL de gua e uma esfera de vidro; tampou-se o frasco e agitou-o durante 15 minutos
para promover a desagregao do solo. Em seguida, retirou-se a esfera de vidro e
adicionaram-se 2,5 cm3 de resina, medida com cachimbo provida de fundo de malha de
polister. Fechou-se o frasco e agitou-o durante 16 horas, em agitador circular horizontal, a
uma velocidade de 220 rpm. No dia seguinte, abriram-se os frascos e transferiu-se, com um
jato de gua, a suspenso de solo e resina para uma peneira com malha de polister de 0,4 mm
de abertura. Lavou-se a resina com um mnimo de gua possvel, at parar de sair argila.
Virou-se a peneira sobre um funil colocado em cima de um frasco plstico, de 100 mL.
Transferiu-se toda a resina da peneira para o frasco, usando exatamente 50 mL de soluo de
NH4Cl 0,8 mol L-1 em HCl 0,2 mol L-1. Transferiram-se tambm os 50 mL das soluespadro A, B, C, D, E e F, para frascos plsticos de 100 mL e adicionou-se 2,5 cm3 de mistura
de resinas a cada uma delas (essas solues foram empregadas na construo da curva de
calibrao para cada elemento). Deixaram-se as suspenses em repouso por 30 minutos, para
permitir a evoluo do gs carbnico. Em seguida, fecharam-se os frascos e agitou-se por uma
hora, a 220 rpm.
Os extratos foram utilizados para as determinaes de clcio, magnsio, potssio e
fsforo. As quantificaes de Ca, Mg foram feitas utilizando Espectrmetro Absoro
Atmica por chama - marca VARIAN, modelo EspectraAA 800; o potssio foi medido em
Fotmetro de Chama , marca Micronal modelo B262 e o fsforo foi quantificado em sistema
FIA com Espectrofotmetro VIS, marca FEMTO , modelo 432, sendo esses equipamentos
pertencentes Embrapa Pecuria Sudeste-So Carlos.

4.2.2.3.2 Extrao de Micronutrientes (Cu, Fe, Mn, Zn) Usando Soluo de DTPA em pH
7,3

Captulo 4 Material e Mtodo 46

a) Preparo da Soluo Extratora DTPA cido dietilenotriaminopentaactico


(DTPA 0,005 mol L-1) + trietanolamina (TEA 0,1 mol L-1) + cloreto de clcio (CaCl2.2H2O
0,01 mol L-1), a pH 7,30
Adicionou-se em um Becker aproximadamente 200 mL de gua deionizada, 1,96 g de
DTPA e 14,9 mL de trietanolamina; agitou-se at completa dissoluo. Em seguida,
adicionou-se 1,47 g de CaCl2.2H2O. Transferiu-se a soluo para um balo volumtrico de 1
L e completou-se o volume com gua deionizada. Corrigiu-se o pH para 7,30 0,05 com
cido clordrico 4,0 mol L-1.

b) Preparo dos Extratos


Mediu-se 20 cm3 de solo, com auxlio de um molde tipo cachimbo, em frascos cnicos
de polietileno e adicionou-se 40 mL da soluo extratora de DTPA. Os frascos foram
tampados e agitados durante duas horas a 220 rpm. Aps a filtragem da suspenso os extratos
estavam prontos para as anlises dos metais.
Os micronutrientes (Cu, Fe, Mn, Zn) disponveis no solo foram quantificados em
espectrmetro de absoro atmica por chama - marca VARIAN, modelo EspectraAA 800,
pertencente a Embrapa Pecuria Sudeste-So Carlos.

4.2.2.3 Determinao do Carbono Orgnico Total


Para a determinao da porcentagem do carbono orgnico total (COT) presente nos
solos utilizou-se o equipamento Total Organic Carbon Analyzer, modelo TOC-V, marca
Shimadzu, acoplado ao Solid Sample Module SSM-500A, marca Shimadzu, pertencente ao
laboratrio de Qumica Ambiental do Instituto de Qumica de So Carlos da USP.

4.2.2.4 Espectroscopia de Fluorescncia Induzida por Laser (FIL)


Para as anlises de FIL, as amostras de solo foram colocadas em um porta amostra
com janela de quartzo com 1 cm de dimetro.
A excitao da fluorescncia foi feita com um laser de argnio (Coherent modelo
Innova 90C-458nm 300 mW), sintonizado na linha de 458 nm com uma potncia de 300
mW. A fluorescncia das amostras foi coletada por uma lente convergente e focalizada sobre

Captulo 4 Material e Mtodo 47


a fenda do monocromador da marca CVI (120 g mm-1 e blaze em 500 nm). A deteco
feita atravs de uma fotomultiplicadora Hamamatsu com pico de resposta espectral em 530
nm. O sinal da fotomultiplicadora foi amplificado e retificado por um amplificador Lock-in e
em seguida enviado para o sistema de aquisio de dados, controlado por um
microcomputador.
Os espectros foram obtidos com janela espectral de 470-650 nm e resoluo igual a
0,5 nm.
As medidas foram feitas em duplicata, utilizando um Instrumento de FIL pertencente
Embrapa Instrumentao Agropecuria.

4.3 Parte 3: Amostras de cidos Hmicos Extrados do Solo


4.3.1 Extrao e Fracionamento de cidos Hmicos do Solo

As substncias hmicas (SH) do solo foram extradas segundo SWIFT et al., (1996),
partindo-se de 200 g de TFSA de amostra, aps ter sido passada em peneira de 0,5 mm.
O valor de pH de cada amostra foi ajustado para 1-2 com adio de HCl 1mol L-1. O
volume da soluo foi ajustado com HCl 0,1 mol L-1 at atingir uma concentrao final com
uma relao de 10 mL de lquido por 1g de TFSA. A soluo foi agitada eventualmente
durante uma hora e, aps deixar a soluo em repouso, separou-se o sobrenadante por
sifonao. O sobrenadante separado que seria utilizado para extrao de cidos flvicos (AF),
foi descartado aps neutralizao.
Ao solo residual foi adicionado NaOH 0,1 mol L-1, resultando no final uma relao
solo-soluo 1:10. A soluo foi agitada durante 4 horas. A seguir, a suspenso ficou em
repouso por 16 horas e o sobrenadante foi isolado atravs de uma centrifugao (10000 rpm
10 min) e reservado para posterior acidificao. O material insolvel, denominado humina,
tambm foi descartado.
O sobrenadante isolado foi acidificado com HCl 6,0 mol L-1, com agitao simultnea
at atingir pH 1,0 e mantido novamente em repouso por 16 horas. Em seguida, a soluo foi
centrifugada (10000 rpm 10 min) para separar o AH (precipitado) e as fraes de AF, sendo
que as fraes de AF foram descartadas.
A frao de AH foi redissolvida atravs da adio de um pequeno volume conhecido
de KOH 0,1 mol L-1. Adicionou-se 1,5 g KCl slido, atingindo uma concentrao de 0,3 mol

Captulo 4 Material e Mtodo 48


L-1[K+]. Aps, centrifugou-se a soluo sob alta velocidade (15000 rpm 10 min) para que os
slidos suspensos fossem removidos.
O AH foi ento reprecipitado, adicionando-se HCl 6,0 mol L-1 com agitao
simultnea at que fosse atingido pH 1,0-1,5, e aps, a suspenso foi mantida em repouso por
16 horas. Centrifugou-se a soluo (10000 rpm 10 min) e o sobrenadante foi ento
descartado. O precipitado (AH) foi suspenso em soluo HCl 0,1 mol L-1 + HF 0,3 mol L-1
num recipiente plstico e agitado durante 16 horas a temperatura ambiente.
A seguir a soluo foi centrifugada (10000 rpm 10 min) e o precipitado foi
transferido para uma membrana de dilise (Spectra/Por 6000 8000Da), preparada segundo a
metodologia de MC PHIE (1971), utilizando gua deionizada. Procedeu-se a dilise contra
gua deionizada at que a gua de dilise apresentasse teste negativo de Cl- com nitrato de
prata (AgNO3). Para isso, tal procedimento foi mantido durante aproximadamente cinco dias,
fazendo-se a troca da gua deionizada duas vezes por dia.
Aps a dilise, as amostras foram congeladas e liofilizadas e o slido obtido (AH) foi
reservado para posteriores anlises.

4.3.2 Anlises dos cidos Hmicos


4.3.2.1 Anlise Elementar e Teor de Cinzas
A anlise elementar e o teor de cinzas para as amostras de AH foram feitos conforme
descrito no item 4.1.2.3.

4.3.2.2 Anlises Espectroscpicas


4.3.2.2.1 Espectroscopia de Infravermelho com Transformada de Fourier (FTIR)

As anlises de infravermelho das amostras de AH foram feitas conforme descrito no


item 4.1.2.5.1.

4.3.2.2.2 Espectroscopia de Ressonncia Paramagntica Eletrnica (RPE)


As medidas de RPE foram feitas segundo metodologia de MARTIN-NETO et al.
(1991). A potncia de microondas utilizada foi de 0,2 mW para as amostras de AH. Usou-se

Captulo 4 Material e Mtodo 49


amplitude de modulao de 1Gpp (Gauss pico a pico), freqncia de modulao de 100 KHz e
16 varreduras para obteno dos espectros. Utilizou-se aproximadamente 20 mg de amostra
para efetuar ao experimento, as quais foram inseridas em tubos de quartzo com dimetro
interno de 3,5 mm.
As medidas do nvel de radicais livres do tipo semiquinona nos cidos hmicos foram
feitas utilizando-se mtodo do padro secundrio (CHIEN et al., 1997). A concentrao
desses radicais (spin g-1) foi obtida atravs da integral dupla do espectro de RPE, utilizando a
aproximao I x H2, onde I corresponde a intensidade do sinal e H a largura de linha
tomadas pico a pico (POOLE e FARACH, 1972). Posteriormente comparou-se a um padro
Strong Pitch com concentrao de spins conhecida (3 x 1015 spins cm-1) fornecido pela
Bruker, utilizando rubi sinttico como padro secundrio (SINGER, 1959; MARTIN-NETO
et al., 1994). A quantidade de radicais livres do tipo semiquinona foi normalizada pela massa
de cada amostra.
Para efetuar as medidas utilizou-se um espectrmetro RPE de onda contnua da
Bruker, modelo EMX de cavidade retangular, banda X (~ 9,0 GHz), pertencente a Embrapa
Instrumentao Agropecuria.

4.3.2.2.3 Espectroscopia de Ressonncia Magntica Nuclear (RMN)


As anlises de RMN de

13

C das amostras de AH foram feitas conforme descrito no

item 4.1.2.5.2.

4.3.2.2.4 Espectroscopia de Fluorescncia em Soluo


Solues estoque de 200 ppm foram preparadas dissolvendo-se 2,0 mg de AH em 10,0
mL de soluo de NaHCO3. Em seguida, a partir destas, foram preparadas solues de
concentrao 20 ppm, sendo que o pH da soluo resultante ficou em torno de 8. As amostras
foram colocadas em cubeta de quartzo multifacetada com tampa de teflon e analisadas a
temperatura ambiente utilizando um espectrmetro de luminescncia Perkin Elmer LS50B
pertencente a Embrapa Instrumentao Agropecuria. As anlises foram feitas em duplicatas.
Os espectros de fluorescncia foram adquiridos nos modos de emisso e varredura
sincronizada, segundo as metodologias propostas por ZSOLNAY et al., (1999), MILORI et
al., (2002) e KALBITZ et al., (2000).

Captulo 4 Material e Mtodo 50


a) Modalidade de Emisso
Na metodologia proposta por ZSOLNAY et al., (1999), obtiveram-se os espectros de
emisso com excitao em 240 nm, com intervalo de varredura entre 300 e 700 nm e filtro de
290 nm. Para determinar o ndice de humificao denominado A4/A1, o espectro foi dividido
em quatro partes. A rea sob o maior quarto, entre 570 e 641 nm (A4) foi dividida pela rea do
menor quarto, entre 356 e 432 nm (A1).
Na metodologia proposta por MILORI et al., (2002), foram obtidos os espectros de
emisso com excitao em 465 nm, intervalo de varredura entre 480 e 700 nm e com filtro
aberto. O ndice de humificao denominado A465 foi determinado a partir da integral da
regio total dos espectros de emisso das amostras com comprimento de onda de excitao
exc= 465 nm.
b) Modalidade de Sincronizada
Utilizando a metodologia de KALBITZ et al., (2000), foram obtidos espectros de
varredura sincronizada entre 300 e 520 nm simultaneamente com excitao e emisso com
filtro aberto e diferena de comprimento de onda = 55 nm para as amostras de cidos
hmicos extrados do solo. A determinao do ndice de humificao foi feita a partir da razo
entre as intensidades de fluorescncia em 456 e 374 nm.

Captulo 5 Resultados e Discusso 51

CAPTULO 5 RESULTADOS E DISCUSSO

5.1 Caracterizao do Efluente


5.1.1 Parmetros Fsico-qumicos
Na Tabela 5.1 esto listados os dados obtidos para o efluente (caixa 3 do sistema da
fossa), das coletas 2 e 3, feitas em julho/2006 e outubro/2006, respectivamente.
TABELA 5.1 Parmetros fsico-qumicos das amostras de efluente da caixa 3*

Parmetros

2O3

3O3

2B3

3B3

2FSC3

pH

8,05

8,14

8,67

8,61

7,73

DQO
(mgO2 L-1)
DBO5
(mgO2 L-1)
N-NO3
(mgN L-1)
N-NH4
(mgN L-1)
N.Total
(mgN L-1)
Fosfato Total
(mgPO4-3 L-1)
leo / Graxa
(mg L-1)
SST
(mg L-1)
SSV
(mg L-1)
SSF
(mg L-1)
Condutividade
(dS cm-1)

638

576

605

528

252

411

344

191

316

153

0,86

2,02

0,66

3,27

3,31

562

517

517

427

269

614

672

568

541

287

32

12

78

14

44

34

67

28

39

96

117

134

130

66

88

89

122

120

64

28

12

10

5,35

4,24

4,63

2,98

2,62

* Amostras: O Sistema inoculado com esterco ovino, Fazenda Morro Verde; B Sistema inoculado com
esterco bovino, Stio Aparecida; FSC Fazenda Santa Cndida (inoculante esterco bovino); os nmeros iniciais
2, 3 referem-se, respectivamente ordem das coletas (07/2006 e 10/2006). DQO Demanda Qumica de
Oxignio; DBO5 Demanda Bioqumica de Oxignio; SST Slidos Suspensos Totais; SSV Slidos
Suspensos Volteis; SSF Slidos Suspensos Fixos

A Resoluo N357 do CONAMA de maro de 2005 estabelece as condies e


padres de lanamento de efluente em corpos de gua. No entanto, o efluente analisado neste
trabalho indicado para uso como adubo orgnico sendo, portanto, disposto em solo. Para
efluentes dispostos em solo, a Resoluo N357 no estabelece valores para tais parmetros,

Captulo 5 Resultados e Discusso 52


somente faz meno no Artigo 29, de que A disposio de efluentes no solo, mesmo
tratados, no poder causar poluio ou contaminao das guas. Para que o efluente seja
lanado em corpos de gua necessrio antes, passar por um filtro de areia para remoo do
material suspenso e tambm reduo da DBO (NOVAES et al., 2002).
Na Tabela 5.1 pode-se observar que o processo de biodigesto ao longo das caixas do
sistema gera efluente, de carter alcalino, com valores de pH superiores a 7,70.
Os valores para as concentraes de N-NH4 (Tabela 5.1) variaram de 269 a 562 mg N
L-1 e para os teores de matria orgnica, representados pela DQO e DBO5, os valores
encontram-se na faixa de 153 a 658 mg O2 L-1. Esses resultados so superiores aos obtidos por
METCALF e EDDY (1991) e SOUSA et al. (2001), nos quais efluentes de esgotos tratados
utilizados em irrigao continham concentraes de nitrognio amoniacal de 56 a 37 mg NNH4 L-1 e de matria orgnica (428 mg L-1 de DQO e 155 mg L-1 de DBO5). No entanto,
segundo SOUSA et al., (1998), quando o solo apresenta certa capacidade de armazenamento
de nitrognio (presena de matria orgnica) pode parecer vantajoso utilizar-se, como adubo
orgnico, efluente contendo mais nitrognio amoniacal que na forma de nitrato, pois as
plantas assimilam nitrognio nas formas de nitrato e on amnio. Dessa forma, o uso de
efluente em culturas tem o mesmo efeito do nitrognio aplicado na forma de fertilizante.
Os teores de slidos suspensos fixos e suspensos volteis so um indicativo da frao
mineral e orgnica, respectivamente, presente no efluente. Os valores de SSV apresentaram-se
praticamente constantes entre as amostras de um mesmo inoculante. No entanto, quando se
comparam as amostras inoculadas com esterco ovino e bovino, nota-se que as amostras 2B3 e
3B3 tm concentrao de SSV mais alta. J a concentrao de SSF variou de 8 a 28 mg L-1. A
amostra 2FSC3 apresentou teores de slidos bem inferiores aos observados para as demais
amostras, possivelmente devido as maiores dimenses deste sistema, o que favorece a
diluio desses slidos.
A formao do efluente influenciada por vrios fatores dentre os quais esto a
utilizao do esterco (inoculante) recm coletado, sendo que este afeta diretamente o processo
de biodigesto, e a mudana na alimentao humana, observada em especial, em pocas mais
frias do ano, onde h maior tendncia de consumir alimentos gordurosos. A influncia deste
ltimo pode ser observada nos teores de leo e graxas provenientes das gorduras e leos
usados na alimentao. Para as amostras 2O3 e 2B3, coletadas em agosto de 2006, esses
teores so superiores aos das 3O3 e 3B3 coletadas em outubro de 2006. No geral, a anlise
dos parmetros listados na Tabela 5.1 revela uma composio varivel do efluente em virtude
dos fatores mencionados.

Captulo 5 Resultados e Discusso 53

5.1.2 Anlise Elementar


Os valores obtidos para composio elementar das amostras dos slidos obtidos aps
liofilizao do efluente e os respectivos teores de cinzas so apresentados na Tabela 5.2.

TABELA 5.2 Composio elementar e teor de cinzas em amostras de efluente liofilizado*

Amostras

C (%)

N (%)

H (%)

O (%)

Cinzas (%)

17
3
3
52
26
1O1
15
3
3
51
28
1O2
16
2
3
53
26
1O3
17
3
2
29
49
2O1
25
3
4
30
38
2O2
12
3
2
34
49
2O3
12
2
2
30
54
3O1
14
4
2
33
47
3O2
14
3
2
28
53
3O3
21
3
3
54
19
1B1
20
3
3
38
36
1B2
19
3
3
53
22
1B3
14
3
2
34
47
2B1
17
3
2
30
48
2B2
12
2
2
31
53
2B3
13
3
3
32
49
3B1
14
2
3
44
37
3B2
15
2
2
28
53
3B3
9
2
1
34
53
2FSC3
*O inoculado com esterco Ovino; B inoculado com esterco Bovino; Os nmeros iniciais 1,2 e 3 referem-se,
respectivamente, ordem de coleta das amostras (10/2005; 07/2006 e 10/2006) e os seguintes letra, s caixas 1,
2 e 3 do sistema. Oxignio determinado por diferena.

A anlise elementar proporcionou informaes sobre a distribuio dos elementos


qumicos principais (C, N, H e O) na matria orgnica do efluente, na qual no foram
observadas diferenas nas concentraes desses elementos com relao ao inoculante
utilizado.
Os teores de carbono ao longo das trs caixas do sistema variaram de 12 a 25 %,
considerando as trs coletas analisadas. Os percentuais obtidos para N e H nas amostras foram
bastante similares, encontrando-se na faixa de 2-4 %. J nos teores de O e cinzas observam-se
variaes significativas, conforme pode ser visto na Tabela 5.2. Os valores obtidos por anlise
elementar / cinzas variaram aleatoriamente, no sendo observada qualquer tendncia ao longo
do processo de biodigesto ou mesmo nas trs coletas analisadas.
Na Tabela 5.3 esto apresentadas as razes C/N calculadas a partir dos dados obtidos
por anlise elementar. O material apresenta concentrao elevada de compostos nitrogenados,
resultando em uma relao C/N baixa. Em virtude disto espera-se que haja uma rpida

Captulo 5 Resultados e Discusso 54


mineralizao do N-orgnico do efluente e que o N-efluente faa parte do ciclo do nitrognio
to logo ele atinja o solo (FEIGIN et al., 1991). Assim, a relao C/N deste resduo
modificada de tal forma a atingir no final a relao C/N da matria orgnica do solo,
geralmente entre 9-14 (LUCHESE, 2002).
A degradao de resduos orgnicos no solo acompanhada pela converso de C e N
em tecido microbiano. Esta biomassa, juntamente com os resduos em decomposio,
representa a fase ativa da matria orgnica do solo e atua diretamente no desenvolvimento das
plantas ao liberar N durante o processo de mineralizao.
TABELA 5.3 Razes atmicas C/N e H/C das amostras de efluente liofilizado*

Amostras

C/N

H/C

6,6
1,9
1O1
5,8
2,1
1O2
9,3
2,0
1O3
6,6
1,7
2O1
9,7
1,9
2O2
4,7
2,0
2O3
7,0
1,6
3O1
4,1
2,0
3O2
5,4
2,1
3O3
8,2
2,0
1B1
7,8
1,8
1B2
7,4
1,8
1B3
5,4
2,0
2B1
6,6
1,4
2B2
7,0
2,3
2B3
5,1
2,4
3B1
8,2
2,3
3B2
8,8
1,7
3B3
5,25
1,3
2FSC3
*O inoculado com esterco Ovino; B inoculado com esterco Bovino; Os nmeros iniciais 1,2 e 3 referem-se,
respectivamente, ordem de coleta das amostras (10/2005; 07/2006 e 10/2006) e os seguintes letra, s caixas 1,
2 e 3 do sistema

Captulo 5 Resultados e Discusso 55


A razo H/C representa uma estimativa do grau de saturao das molculas, sendo que
para cidos hmicos de solo esta razo em torno de 1,0 (STEVENSON, 1994). Na Tabela
5.3 podem-se observar valores superiores a 1,0 para todas as amostras de efluente analisadas,
indicando, dessa forma o carter aliftico da matria orgnica do efluente.

5.1.3 Macro e Micronutrientes do Efluente


Uma estimativa da composio mineral do efluente apresentada na Tabela 5.4. O
efluente possui quantidades significativas de macronutrientes (K, P, Ca e Mg) e menores de
micronutrientes (Fe, Mn, Zn e Cu). Esses nutrientes possivelmente se encontram ligados
matria orgnica do efluente, sendo liberados de forma gradual para o solo.

TABELA 5.4 Composio mineral das amostras de efluente liofilizado da caixa 3*

Elementos
(mg L-1)

Na
K
P
Ca
Mg

1O3

2O3

3O3

1B3

2B3

3B3

2FSC3

179,55

214,94

239,25

210,74

273,19

222,17

231,71

(0,39)

(5,88)

(2,70)

(0,40)

(6,11)

(30,43)

(3,63)

134,48

134,06

143,07

109,67

126,93

109,66

117,78

(4,52)

(6,69)

(2,03)

(0,41)

(2,30)

(12,46)

(0,10)

44,26

43,00

39,31

43,45

41,13

43,03

67,95

(0,78)

(1,48)

(0,18)

(0,30)

(1,63)

(7,26)

(0,04)

42,51

36,82

30,14

23,46

17,95

17,24

38,25

(0,42)

(1,29)

(0,57)

(0,00)

(0,27)

(2,92)

(1,24)

14,57

10,78

8,12

7,62

2,06

4,13

19,47

(0,15)

(0,35)

(0,27)

(0,06)

(0,26)

(0,60)

(0,43)

Fe

0,70

0,30

0,47

0,84

0,15

0,38

0,55

(0,03)

(0,02)

(0,02)

(0,20)

(0,02)

(0,24)

(0,06)

Mn

0,11

0,04

0,02

0,11

0,02

0,06

0,15

(0,00)

(0,01)

(0,00)

(0,00)

(0,00)

(0,01)

(0,00)

Zn

0,26

0,07

0,17

0,40

0,08

0,25

0,15

(0,01)

(0,01)

(0,01)

(0,01)

(0,01)

(0,05)

(0,01)

Cu

0,05

0,03

0,04

0,10

0,04

0,09

0,08

(0,01)

(0,00)

(0,01)

(0,01)

(0,00)

(0,03)

(0,00)

*O inoculado com esterco Ovino; B inoculado com esterco Bovino; FSC Fazenda Santa Cndida. Os
nmeros iniciais 1,2 e 3 referem-se, respectivamente, ordem de coleta das amostras (10/2005; 07/2006 e
10/2006) e os seguintes letra, s caixas 1, 2 e 3 do sistema. () desvio mdio das medidas, n =2

Observaram-se tambm altas concentraes de sdio, quando comparados com as


obtidas para os nutrientes. No entanto, essas concentraes esto dentro da faixa de 50-250
mg L-1 observada para efluentes secundrios de esgoto tratado no mundo, segundo FONSECA
(2001), com exceo da amostra 2B3 que apresentou valor superior a 250 m L-1. Geralmente,
pelo fato do efluente ser salino (Tabela 5.4), o seu uso como adubo orgnico pode provocar
aumento na salinidade no solo. O excesso de sais na zona radicular (independentemente das
espcies inicas presentes) prejudica a produtividade das plantas. Isso ocorre porque a maior

Captulo 5 Resultados e Discusso 56


concentrao da soluo ir exigir da planta mais energia para conseguir absorver gua (efeito
osmtico), uma energia que ser desviada dos processos metablicos essenciais (BIEROLAI
et al., 1984).

5.1.4 Anlises Espectroscpicas


5.1.4.1 Espectroscopia de Infravermelho com Transformada de Fourier (FTIR)
A anlise da matria orgnica do efluente por infravermelho forneceu informaes a
respeito dos grupos funcionais presentes no material. Analisando os espectros das Figuras 5.1
e 5.2 observa-se que ocorre variao nos grupamentos funcionais da matria orgnica do
efluente, no entanto essa variao no segue uma tendncia ao longo do processo de
biodigesto (da caixa 1 a 3).
A interpretao dos espectros de FTIR foi feita de acordo com vrios estudos
encontrados na literatura (SCHNITZER e KHAN, 1978; SILVERSTEIN e WEBSTER, 2000;
NAKANISHI, 1962; PICCOLO e STEVENSON, 1982; BLOOM e LEENHER, 1989;
CANELLAS et al., 2001; POLAK et al., 2005).

1108
1008
834
702
620

1410

1654
1624

2934
2854

3400

Captulo 5 Resultados e Discusso 57

3O 3

1558

3O 2

3O 1

2O 3

2O 2

2O 1

1O 3

1O 2

1O 1
4000

3500

3000

2500

2000

1500

1000

500

-1

N m e ro d e o n d a (c m )

FIGURA 5.1 Espectros de FTIR do material liofilizado das trs caixas do sistema da fossa sptica biodigestora.
O inoculado com esterco Ovino; Os nmeros iniciais 1, 2 e 3 referem-se, respectivamente, ordem de coleta
das amostras (10/2005; 07/2006 e 10/2006) e os seguintes letra, s caixas 1, 2 e 3 do sistema

620

834

1108
1560
1402

2924
2854

1664

Captulo 5 Resultados e Discusso 58

996
704

1624

3B3

3B 2

3B 1

2B 3

2B 2

2B 1

1B 3

1B 2

1B 1
4000

3500

3000

2500

2000

1500

1000

500

-1

N m e ro d e o n d a (c m )

FIGURA 5.2 Espectros de FTIR do material liofilizado das trs caixas do sistema da fossa sptica biodigestora.
B inoculado com esterco bovino; Os nmeros iniciais 1,2 e 3 referem-se, respectivamente, ordem de coleta
das amostras (10/2005; 07/2006 e 10/2006) e os seguintes letra, s caixas 1, 2 e 3 do sistema

Captulo 5 Resultados e Discusso 59


Os espectros das amostras apresentaram na regio de 3000 a 3500 cm-1 uma banda
forte e larga centrada em aproximadamente 3400 cm-1, que pode ser atribuda ao estiramento
(O-H) da gua ligada e a vrios grupos contendo OH. Nessa mesma regio, observou-se ainda
uma segunda banda centrada em torno 3270 cm-1, que atribuda ao estiramento (N-H) de
grupos aminas presentes nas molculas.
Na regio de 2934 e 2854 cm-1 encontram-se os estiramentos assimtrico e simtrico,
respectivamente, de estiramento C-H de grupos CH2CH3 (CELI et al., 1997), o que revela a
presena de grupos alifticos da matria orgnica presente no efluente. No entanto, para as
amostras da coleta 3 (Figuras 5.1 e 5.2) essa banda somente observada na amostra 1B3.
Uma banda centrada em 1660 cm-1 pode ser atribuda ao estiramento (C=O) de
grupos

cetonas e a

presena de ons carboxilatos (deformao axial assimtrica)

(CANELLAS et al., 2001). Para a amostra 2O3 e as da coleta 3 tambm foi observado uma
banda em 1624 cm-1, atribuda ao estiramento de ons COO- ligados a metais (PICCOLO,
1982).
Uma outra banda, em 1400 cm-1 atribuda aos estiramentos (COO-) de grupos
carboxilatos, sendo estes resultados coerentes com o carter alcalino do efluente (Tabela 5.1).
Em 1560 cm-1, observada (exceto nas amostras da coleta 3) uma banda devido s
vibraes do esqueleto em anis aromticos (C=C). Nota-se uma tendncia diminuio na
intensidade relativa dessa banda (1560 cm-1) quando se comparam as amostras no decorrer do
processo de biodigesto (da caixa 1 a 3).
Na regio de 1100 a 1000 cm-1 observaram-se bandas provenientes do estiramento CO de polissacardeos. A forte intensidade nessa regio praticamente constante nas amostras
durante todo o processo, em virtude de muitos polissacardeos apresentarem alta resistncia
degradao biolgica (PICANO et al., 2000).
A regio de baixa freqncia entre 800 a 400 cm-1 de difcil identificao,
geralmente atribuda a compostos aromticos. No entanto, nessa regio tambm ocorre
absoro de compostos silicatados. Dessa forma, sendo o material analisado no submetido a
qualquer processo de purificao pode-se atribuir as bandas observadas nos espectros a
impurezas do tipo silicatadas.

Captulo 5 Resultados e Discusso 60


5.1.4.2 Espectroscopia de Ressonncia Paramagntica Eletrnica (RPE)
A RPE tem sido muito usada na anlise da matria orgnica do solo, fornecendo
informaes cerca da concentrao de radicais livres do tipo semiquinona (Figura 5.3),
sendo esta concentrao usada como parmetro para avaliar o ndice de humificao da
matria orgnica.
NOVAES et al., (2006) observaram um aumento na concentrao dos radicais
semiquinonas para amostras do lodo presente nas caixas do sistema da fossa, indicando assim
um aumento na humificao da matria orgnica. Porm, os fatores envolvidos na formao
do efluente, dentre eles o processo de degradao anaerbia e o curto espao de tempo do
material no sistema, sugerem no haver processo de humificao considerado significativo na
parte lquida do sistema. Sendo assim, buscou-se avaliar a concentrao desses radicais na
matria orgnica do efluente de forma a compreender as alteraes na frao hmica do solo
causadas pela sua adio.
Na Tabela 5.5 esto apresentados os resultados obtidos para as concentraes de
radicais livres do tipo semiquinona observadas para as amostras do slido obtido aps
liofilizao do material das caixas.

Captulo 5 Resultados e Discusso 61


TABELA 5.5 Concentrao de radicais livres do tipo semiquinona nas amostras de efluente liofilizado*

Amostras

Radicais livres do tipo semiquinona


(spin g-1 de C (1017))
0,94 0,05
3,17 0,11
2,12 0,04
1,61 0,00
1,72 0,03
2,15 0,00
1,83 0,01
2,19 0,35
2,07 0,13
0,60 0,03
1,89 0,00
1,17 0,06
nd
1,60 0,08
2,00 0,02
1,95 0,22
1,16 0,16
1,11 0,06
1,52 0,05

1O1
1O2
1O3
2O1
2O2
2O3
3O1
3O2
3O3
1B1
1B2
1B3
2B1
2B2
2B3
3B1
3B2
3B3
2FSC3
*O inoculado com esterco Ovino; B inoculado com esterco Bovino; FSC Fazenda Santa Cndida. Os
nmeros iniciais 1, 2 e 3 referem-se, respectivamente, ordem de coleta das amostras (10/2005; 07/2006 e
10/2006) e os seguintes letra, s caixas 1, 2 e 3 do sistema. Potncia 2mW. nd no detectado

Analisando a Figura 5.3, observou-se que no h uma tendncia entre as concentraes


de radicais livres do tipo semiquinona, as quais variaram aleatoriamente ao longo de processo
de biodigesto e tambm entre as diferentes coletas do efluente. As amostras apresentaram
baixas concentraes de radicais semiquinonas, sendo que para a amostra 2B1 no foi
detectado sinal quantitativo.
A RPE uma tcnica extremamente sensvel e sob condies favorveis o limite de
deteco para centros paramagnticos encontra-se no intervalo de 1011 a 1012 spin g-1, o que
equivale parte por bilho (NOVOTNY, 2002). Essa alta sensibilidade o que possibilita a
anlise de materiais complexos como resduos orgnicos no purificados. Considerando o fato
de que a intensidade do sinal dos espectros de RPE proporcional raiz quadrada da potncia
(WEIL et al., 1994), aplicou-se potncia de 2,0 mW para as amostras de efluente, em virtude
da baixa relao sinal / rudo (s/r), visando obter um sinal quantitativo (apropriada relao s/r)
de radicais livres do tipo semiquinona. Isto se deve, provavelmente, heterogeneidade de
compostos orgnicos, bem como minerais presentes no efluente. Portanto, os resultados
apresentados na Tabela 5.5 no so diretamente comparveis aos obtidos para os cidos
hmicos (Tabela 5.10), pois para esses, utilizou-se potncia de 0,2 mW em virtude da

Captulo 5 Resultados e Discusso 62


abundncia de centros paramagnticos e, conseqentemente maior relao s/r, presentes nos
cidos hmicos.

17

Caixa 1
Caixa 2
Caixa 3

3,5x10

17

3,0x10

17

2,5x10

-1

Spin g C

-1

17

2,0x10

17

1,5x10

17

1,0x10

16

5,0x10

0,0
1O

2O

3O

1B

2B

3B

2FSC3

FIGURA 5.3 Concentrao de radicais livres do tipo semiquinona em spin g-1C-1 obtida para as amostras do
material liofilizado das trs caixas do sistema da fossa sptica biodigestora. O inoculado com esterco Ovino; B
inoculado com esterco Bovino; 2FSC3 - Fazenda Santa Cndida. Os nmeros iniciais 1, 2 e 3 referem-se,
respectivamente, ordem de coleta das amostras (10/2005; 07/2006 e 10/2006)

5.1.4.3 Espectroscopia de Ressonncia Magntica Nuclear (RMN)

Experimentos de RMN de

13

C foram feitos, a fim de se obter informaes sobre a

composio de grupos funcionais do material presente nas trs caixas do sistema da fossa.
Como mencionado no Captulo 2, a principal dificuldade da aplicao da RMN de 13C
aos slidos reside na baixa resoluo caractersticas das amostras slidas. Problemas como o
alargamento de linha devido tanto s interaes dipolares heteronucleares (13C, 1H) como
anisotropia do deslocamento qumico, e a baixa sensibilidade devido aos longos tempos de
relaxao spin-rede dos ncleos de

13

C devem ser resolvidos. As tcnicas MAS e CP tm

possibilitado melhores resultados, diminuindo estas limitaes da RMN no estado slido.


Contudo, os espectros observados para amostras slidas, como os analisados neste
trabalho, apresentam bandas largas e sobrepostas, o que inviabiliza a identificao de linhas
da forma que feita para a RMN no estado lquido. Tambm so observadas bandas laterais
que podem comprometer a quantificao do sinal. Estas bandas ocorrem quando a velocidade
de rotao da amostra em torno do ngulo mgico (54,74o) menor que a anisotropia do
deslocamento qumico (CSA) (PEURAVOURI et al., 2003). Para grupos carbonlicos e

Captulo 5 Resultados e Discusso 63


aromticos, as bandas laterais so ditas de primeira ordem, apresentando valores de
intensidade usualmente <10 % da intensidade observada para a banda central. Ainda, so
geradas bandas de segunda e terceira ordens, no entanto, estas podem ser negligenciadas, pois
apresentam intensidade <1,0 % da banda central. Uma das formas de se minimizar a
interferncia das bandas laterais integrando sua rea e subtraindo-a da rea do espectro.
Contudo, neste trabalho no foi feito subtrao dessas bandas laterais nos espectros,
somente uma estimativa de sua rea, a qual representa em mdia 2,8 % para as amostras de
efluente e lodo.
Porm, existe a possibilidade de se obter informao semiquantitativa mediante a
integrao de regies especficas e a associao com grupos funcionais caractersticos das SH.
Os principais grupos detectados por RMN de

13

C no estado slido em AH, mostrados na

Figura 2.12, so grupos alifticos (0-45 ppm), N-alifticos e metoxlicos (45-60 ppm), Oalifticos (60-110 ppm), aromticos (110-140 ppm), O-aromticos (140-160 ppm),
carboxlicos (160-185 ppm) e carbonlicos (185-230 ppm).
Nas Figuras 5.4, 5.5, 5.6, 5.7 e 5.8 esto apresentados os espectros de RMN de 13C das
amostras liofilizadas de efluente inoculados com esterco bovino ou ovino, e de lodos,
coletados no fundo de cada caixa. Os espectros obtidos para as amostras de efluente foram
muito similares, apresentaram bandas largas e sobrepostas. A intensidade do pico em
aproximadamente 164 ppm, atribudo a C-carboxlico, apresentou grande variao entre as
coletas, tanto para esterco ovino quanto bovino. Pde-se observar ainda, que a matria
orgnica do efluente rica em carboidratos (pico ~72 ppm), protenas (~55 ppm) e em outros
compostos de carter aliftico indicado pelos picos em aproximadamente 30 e 23 ppm. Baixa
intensidade foi observada para carbonos aromticos, os quais absorvem em torno de 130 ppm.
Os espectros obtidos para os lodos apresentaram menor intensidade nas bandas
observadas para os compostos alifticos (0-45 ppm) em comparao com os obtidos para os
slidos suspensos do efluente. Para o lodo, tanto do sistema inoculado com esterco ovino
quanto para bovino, foi observado maior intensidade para o pico referente a carboidratos (~74
ppm) em relao aos demais grupos ao longo do espectro.
As porcentagens obtidas para os grupos funcionais presentes nas amostras de efluente
e lodo, calculadas a partir dos espectros de RMN de

13

C (PRESTON, 1996), esto

apresentadas nas Figuras 5.9, 5.10, 5.11 e 5,12. As amostras de efluente apresentaram carter
fortemente aliftico, enquanto que para o lodo a porcentagem de grupos alifticos obtida
menor e de grupos aromticos, ligeiramente maior.

Captulo 5 Resultados e Discusso 64


No foi observada tendncia na variao do percentual dos grupos funcionais nas
amostras de efluente, o que reforou os dados obtidos por RPE, os quais indicaram haver
composio varivel do material ao longo do sistema, assim como nas diferentes coletas.
Analisando os valores mdios das porcentagens dos grupos funcionais em cada coleta
(Figura 5.10), observou-se que esses valores so muito similares estatisticamente. Dessa
forma, no foram observadas variaes na matria orgnica presente no efluente em funo
do inoculante utilizado (esterco ovino ou bovino) ou mesmo da poca em que foram
coletados.

23

30
55

128

71

173
164

Captulo 5 Resultados e Discusso 65

3O 3

3O 2

3O 1

2O 3

2O 2

2O 1

1O 3

1O 2

1O 1
300

250

200

150

100

50

-5 0

-1 0 0

D e slo c a m e n to q u m ic o (p p m )
FIGURA 5.4 Espectro de RMN de 13C de amostras de efluente liofilizado. O inoculado com esterco Ovino;
Os nmeros iniciais 1, 2 e 3 referem-se, respectivamente, ordem de coleta das amostras (10/2005; 07/2006 e
10/2006) e os seguintes letra, s caixas 1, 2 e 3 do sistema

130

154

175

64
56

32

74

Captulo 5 Resultados e Discusso 66

L2O3

L2O2

L2O1
300

250

200

150

100

50

-50

-100

Deslocamento qumico (ppm)


FIGURA 5.5 Espectro de RMN de 13C de amostras de lodo liofilizado. L2O lodo do sistema inoculado com
esterco Ovino coletado em 07/2006; Os nmeros seguintes letra referem-se s caixas 1, 2 e 3 do sistema

129

164

55

175

72

3
23

Captulo 5 Resultados e Discusso 67

3B 3

3B 2

3B 1

2B 3

2B 2

2B 1

1B 3

1B 2

1B 1
300

250

200

150

100

50

-5 0

-1 0 0

D e slo c a m e n to q u m ic o (p p m )
FIGURA 5.6 Espectro de RMN de 13C de amostras de efluente liofilizado. B inoculado com esterco Bovino;
Os nmeros iniciais 1, 2 e 3 referem-se, respectivamente, ordem de coleta das amostras (10/2005; 07/2006 e
10/2006) e os seguintes letra, s caixas 1, 2 e 3 do sistema

64
56
32
130

175
154

74

Captulo 5 Resultados e Discusso 68

L2B3

L2B2

L2B1
300

250

200

150

100

50

-50

-100

Deslocamento qumico (ppm)

30

74

FIGURA 5.7 Espectro de RMN de 13C de amostras de lodo liofilizado. L2B lodo do sistema inoculado com
esterco Bovino coletado em 07/2006; Os nmeros referem-se s caixas 1, 2 e 3 do sistema

24

A.

64
56
22

174
154
135

129

104

174

71
55

B.

2FSC3
300

250

200

150

100

50

Deslocamento qumico (ppm)

-50

-100

L2FSC3
300

250

200

150

100

50

-50

-100

Deslocamento qumico (ppm)

FIGURA 5.8 Espectro de RMN de 13C de amostras de efluente (A) e lodo (B). 2FSC3 Fazenda Santa
Cndida, caixa 3, coleta 2; L2FSC3 lodo da caixa 3 do sistema da Fazenda Santa Cndida coletado em
07/2006

Captulo 5 Resultados e Discusso 69

40

45

1O1
1O2
1O3

35

35
30

25

Porcentagem

20
15
10

20
15

2O1
2O2
2O3

25

25

Cca
rb
on
.

C-

ca

rb

rb
o

on

x.

-a
ro
m

Cca

-a
lif
.
N

CO

Cal

if.

Car
om
.

om

Car

CO

CO
-a
ro
m
.
Cca
rb
ox
.
Cca
rb
on
.

CO
-a
lif
.

10

-a
lif
.

15

10

Cal
if.
N
-a
lif
./m
et
ox
.

Cca
rb
ox
.

20

ox
.

Porcentagem

30

15

2B1
2B2
2B3

35

30

20

CO
-a
ro
m
.

40

/m
et

35

Car
om
.

N
-a
lif
./m
et
ox
.

Cal
if.

Cca
rb
on
.

Cca
rb
ox
.

Nali
f./

Cal
if.

COar
om
.

0
Car
om
.

0
CO
-a
lif
.

m
et
ox
.

CO
-a
lif
.

10

40

3O1
3O2
3O3

40
35

45

3B1
3B2
3B3

40
35

30

30

20

n.
ar
bo
Cc

Cc

ar
bo

x.

.
om
-a
r

CO

om
.
Car

lif
.

om
.
Car

-a
l
CO

/m
et

if.
-a
l
N

-a

CO

CO
-a
ro
m
.
Cca
rb
ox
.
Cca
rb
on
.

if.

ox
.

10

Cal
if.

10

et
ox
.

15

if.
/m

15

25

-a
l

20

Porcentagem

25

if.

Porcentagem

25

Cal

Porcentagem

30

Porcentagem

1B1
1B2
1B3

40

FIGURA 5.9 Porcentagem dos grupos funcionais obtidas atravs dos espectros de RMN de 13C com
VACP/MAS das amostras de efluente de cada caixa e nas trs coletas. O inoculado co esterco ovino; B
inoculado com esterco Bovino; Os nmeros iniciais 1, 2 e 3 referem-se, respectivamente, ordem de coleta das
amostras (10/2005; 07/2006 e 10/2006) e os seguintes letra, s caixas 1, 2 e 3 do sistema

Captulo 5 Resultados e Discusso 70


45

1O
1B

40
35

Porcentagem

30
25
20
15
10
5

Cali
Nf.
ali
f./
m
eto
x.
COali
f.
Car
om
.
COar
om
.
Cca
rb
ox
.
Cca
rb
on
.

45
40

2O
2B

35

Porcentagem

30
25
20
15
10
5

Cali
Nf.
ali
f./
m
eto
x.
COali
f.
Car
om
.
COar
om
.
Cca
rb
ox
.
Cca
rb
on
.

45

3O
3B

40
35

Porcentagem

30
25
20
15
10
5

Car
om
.
COar
om
.
Cca
rb
ox
.
Cca
rb
on
.

Cali
Nf.
ali
f./
m
eto
x.
COali
f.

FIGURA 5.10 Mdia da porcentagem dos grupos funcionais obtidas atravs dos espectros de RMN de 13C com
VACP/MAS das amostras de efluente em cada coleta. O sistema inoculado com esterco ovino; B sistema
inoculado com esterco Bovino; Os nmeros iniciais 1, 2 e 3 referem-se, respectivamente, ordem de coleta das
amostras (10/2005; 07/2006 e 10/2006)

Captulo 5 Resultados e Discusso 71

L2O1
L2O2
L2O3

40
35

35

30

30

20

.
on
rb
Cca

ox
.
rb
Cca

-a
r

om

.
CO

-a
lif
.

om

ar
bo

Cal
if.

n.

x.
Cc

rb
o
Cca

om
-a
r

CO

CO
-a
l

Car

Car
om
.

if.

10

-a
lif
.

15

10

CO

15

25

et
ox
.

20

/m

Porcentagem

25

Cal
if.
N
-a
lif
./m
et
ox
.

FIGURA 5.11 Porcentagem dos grupos funcionais obtidas atravs dos espectros de RMN de 13C com
VACP/MAS das amostras de lodo coletado em 07/2006. L2O lodo do sistema inoculado com esterco ovino;
L2B lodo do sistema inoculado com esterco Bovino; Os nmeros seguintes letra referem-se s caixas 1, 2 e 3
do sistema

55

2FSC3
L2FSC3

50
45
40
35

Porcentagem

30
25
20
15
10
5

COar
om
.
Cca
rb
ox
.
Cca
rb
on
.

Car
om
.

Nali
f./
m
eto
x.
COali
f.

Cali
f.

Porcentagem

L2B1
L2B2
L2B3

40

FIGURA 5.12 Porcentagem dos grupos funcionais obtidas atravs dos espectros de RMN de 13C com
VACP/MAS das amostras de efluente e lodo. 2FSC3 Fazenda Santa Cndida, caixa 3, coleta 2; L2FSC3 lodo
da caixa 3 do sistema da Fazenda Santa Cndida coletado em 07/2006

Na Tabela 5.6 esto apresentados os dados referentes s porcentagens de grupamentos


aromticos e alifticos observadas para as amostras de efluente e lodo. Observando-se os
valores isolados, nota-se que ocorreu variao no percentual de grupos aromticos e alifticos
ao longo do processo de biodigesto. No entanto, quando se analisaram os valores mdios
obtidos para cada coleta, no foram observadas mudanas no grau de aromaticidade /

Captulo 5 Resultados e Discusso 72


alifaticidade das amostras, possivelmente, devido ao pequeno nmero de amostras analisado,
o que resultou em valores estatisticamente iguais.
A porcentagem de aromaticidade /alifaticidade observada para as amostras de efluente
foram similares s obtidas para o lodo, indicando um baixo grau de aromaticidade do material
presente na Fossa Sptica.

TABELA 5.6 Porcentagem dos grupos aromticos e alifticos nas amostras de efluente e lodo obtidas atravs
dos espectros de RMN de 13C*

Aromaticidade (%)
Amostras

Valor em
cada caixa

Mdia entre
as caixas

Alifaticidade (%)
Valor em
cada caixa

Mdia entre
as caixas

16
84
1O1
15,3

0,6
84, 7 0,6
15
85
1O2
15
85
1O3
14
86
2O1
12
88
14,7 3,0
85,3 3,0
2O2
18
82
2O3
14
86
3O1
16
84
14,3 1,5
85,7 1,5
3O2
13
87
3O3
15
85
1B1
13
87
14,0

1,0
86,1 1,0
1B2
14
86
1B3
16
84
2B1
14
86
16,3 2,5
83,7 2,5
2B2
19
81
2B3
13
87
3B1
14
86
12,0

2,6
88,0 2,6
3B2
9
91
3B3
19
81
LO1
15
85
84,3 3,0
LO2
15,7 3,0
13
87
LO3
17
83
LB1
18
82
83,7 2,1
LB2
16,3 2,1
14
86
LB3
16
84
2FSC3
16
84
LFSC3
*O inoculado com esterco Ovino; B inoculado com esterco Bovino; Os nmeros iniciais 1, 2 e 3 referem-se,
respectivamente, ordem de coleta das amostras (10/2005; 07/2006 e 10/2006) e os seguintes letra, s caixas 1,
2 e 3 do sistema; L lodo

Na Tabela 5.3 podem-se observar valores superiores a 1,0 para todas as amostras de
efluente analisadas, indicando, dessa forma o carter aliftico da matria orgnica do efluente,
sendo essa informao coerente com os dados obtidos por RMN de 13C e FTIR.

Captulo 5 Resultados e Discusso 73

5.2 Impacto Causado pela Adio de Efluente no Solo


5.2.1 Condutividade e pH
Os valores de pH obtidos para as amostras de solo so mostrados na Tabela 5.7.
Analisando esses resultados pode-se observar que o solo analisado possui carter bastante
cido, isso mais ntido se compararmos os solos de mata, que no recebem qualquer tipo de
corretivo de acidez, com os demais solos que so tratados com calcrio. O solo adubado com
efluente apresentou valor de pH ligeiramente superior ao solo com adubao mineral em
especial na primeira camada. Segundo YAN et al., (1996) a adio de resduos orgnicos
pode ocasionar aumento no pH do solo devido, principalmente a dois diferentes processos:
descarboxilao de nions orgnicos consumindo H+ e liberando CO2 (R-CO-COO- + H+
R-CHO + CO2) e desaminao de aminocidos. Porm, a contribuio deste ltimo processo
provavelmente de menor importncia, pelo fato de o grupo aminocido encontrar-se
predominantemente protonado.

TABELA 5.7 Valores de pH e condutividade para as amostras de solo*

Amostras de
solo
CE
NPK
M

Condutividade a 25 oC (dS m-1)

pH
0-10 cm

10-20 cm

20-40 cm

0-10 cm

10-20 cm

5,15 0,01
4,59 0,01
4,68 0,01
0,18 0,01
0,14 0,01
4,81 0,01
4,40 0,01
4,47 0,01
0,20 0,00
0,11 0,01
3,57 0,01
3,64 0,01
3,73 0,01
0,33 0,00
0,20 0,01
*CE: solo adubado com efluente; NPK: solo com adubao mineral base de nitrognio, fosfato
solo de mata

20-40 cm
0,12 0,01
0,10 0,01
0,19 0,01
e potssio; M:

A condutividade est relacionada com o contedo de sais na soluo do solo. Na


Tabela 5.7 possvel observar um decrscimo nesse contedo conforme aumenta a
profundidade no solo. Dentre os solos analisados, o de mata apresentou maiores
concentraes de sais. Pde-se observar tambm que o solo adubado com efluente desde o
segundo semestre de 2003, no apresentou excesso de salinidade, visto que seus valores de
condutividade esto na faixa de 0,0-2,0 dS m-1 e dentro desta faixa os efeitos da salinidade so
geralmente negligenciveis (TOM Jr., 1997).

Captulo 5 Resultados e Discusso 74

5.2.2 Macro e Micronutrientes Disponveis no Solo


As concentraes de nutrientes disponveis no solo so mostradas na Figura 5.12.
Verificou-se um aumento nas concentraes dos macronutrientes quando adicionado o
efluente, em relao ao solo adubado com NPK, j os teores de micronutrientes para esses
dois solos foram semelhantes.

50

A.

16

B.

14

40

K
Ca
Mg

30

mmolcdm-3

mg dm-3

12

20

10
8
6
4

10

2
0

140

0
CE 1 CE 2 CE 4 NPK 1NPK 2NPK 4 M 1 M 2 M 4

C.

120

--

D.

Fe
Mn

2,0

100

--

Cu
Zn

1,6

mg dm-3

80

mg dm-3

CE 1 CE 2 CE 4 NPK 1NPK 2NPK 4 M 1 M 2 M 4

60

1,2

0,8

40

0,4

20
0

CE 1 CE 2 CE 4 NPK 1NPK 2NPK 4 M 1 M 2 M 4

--

0,0

CE 1 CE 2 CE 4 NPK 1NPK 2NPK 4 M1 M2 M4

--

FIGURA 5.12 Concentrao de macro e micronutrientes disponveis no solo. A e B macronutrientes; C e D


micronutrientes; CE: solo adubado com efluente; NPK: solo com adubao mineral base de nitrognio, fosfato
e potssio; M: solo de mata. As numeraes referem-se s profundidades amostradas 1: 0-10 cm; 2: 10-20 cm
e 4: 20-40 cm

O solo de mata apresentou baixas concentraes de nutrientes, exceto de ferro e


mangans, que foram superiores aos demais solos analisados. Possivelmente, devido ao

Captulo 5 Resultados e Discusso 75


carter cido deste solo, o qual favorece a disponibilidade de ferro e mangans, abundantes no
solo analisado.
Esse aporte de nutrientes no solo, ocasionado pela adio do efluente, importante,
pois possibilita a diminuio do uso de fertilizantes qumicos. Na Fazenda Santa Cndida,
onde foi instalado este experimento, faz-se, normalmente, uso de fertilizante mineral a base de
nitrognio, fosfato e potssio trs vezes ao ano. Em 2006, foi feita somente uma aplicao,
visto que as concentraes de nutrientes no solo foram consideradas satisfatrias.

5.2.3 Carbono Orgnico Total (COT)


Na Figura 5.13 so mostradas as porcentagens de carbono total obtidas para as
amostras de solo. Os solos analisados apresentaram percentuais de carbono variando de 0,63 a
2,16 % C. Para as amostras pertinentes ao solo de mata observou-se maior teor de carbono
que os demais solos analisados, em virtude de esse solo no ter sido submetido a qualquer
forma de manejo. Comparando os solos adubados (Figura 5.13), pode-se observar que o solo
que recebeu aplicao de efluente apresentou maior teor de carbono. Esse aporte
proporcionado importante, pois dessa forma o efluente se torna mais uma alternativa para a
elevao dos teores de matria orgnica no solo.

2,5

0-10 cm
10-20 cm
20-40 cm

2,0

%C

1,5

1,0

0,5

0,0
CE

NPK

FIGURA 5.13 Porcentagem de carbono total em amostras de solo. CE: solo adubado com efluente; NPK: solo
com adubao mineral base de nitrognio, fosfato e potssio; M: solo de mata

O aporte de matria orgnica provocado pela adio de efluente pequeno se


comparado diretamente com o solo que recebeu adubao mineral. No entanto, deve-se

Captulo 5 Resultados e Discusso 76


considerar que o foram feitas poucas aplicaes de efluente no solo desde que o sistema da
fossa foi instalado, no ano de 2003. Dessa forma, os resultados obtidos indicam uma
tendncia ao aumento dos teores de carbono no solo com efluente. Contudo, a elevao e
posterior manuteno de teores elevados de carbono no solo depender de aplicaes
sucessivas do resduo (OLIVEIRA et al., 2002), visto que os efeitos sobre os teores de
carbono podem ser temporrios (MELO et al., 1994) em decorrncia da decomposio da
matria orgnica.
Corroborando com LEITE et al., (2004), os resultados obtidos para os teores de
carbono apresentaram maiores concentraes na camada superficial (0-10 cm), e diminuem
linearmente conforme se aumenta profundidade.

5.2.3 Espectroscopia de Fluorescncia Induzida por Laser (FIL)


As anlises de FIL foram feitas a fim de se obter informao a respeito do ndice de
humificao (HFIL) da matria orgnica do solo, usando amostras de solo intacto. A proposta
de clculo deste ndice de humificao a razo entre o valor da ACF e o valor de COT
presente na amostra de solo intacto (MILORI et al., 2004), ou seja:
HFIL= ACF/COT
O ndice de humificao obtido atravs da FIL est representado na Figura 5.14. Nela
pode-se observar que as amostras de 0-10 e 10-20 cm para os solos CE e NPK apresentaram
valores bem prximos para o ndice de humificao. J para a amostra na profundidade de 2040 cm, observou-se que o solo com adubao mineral do tipo NPK obteve maior ndice de
humificao. Os menores valores no solo CE representam um aporte de MO recente
proveniente do efluente ou da atividade microbiana. As amostras de AH do solo de mata
apresentaram grau de humificao HFIL bem inferior aos demais solos, sendo que esse
comportamento no foi observado nos outros ndices de humificao avaliados. Essa grande
diferena pode ser atribuda ao fato de a FIL analisar solos intactos, sem qualquer processo de
extrao das SH, estando presentes todos os grupamentos fluorforos da matria orgnica do
solo, podendo ocorrer dessa forma, um efeito de diluio da matria orgnica humificada,
diminuindo o sinal de fluorescncia.

Captulo 5 Resultados e Discusso 77

0-10 cm
10-20 cm
20-40 cm

700
600

HFIL

500
400
300
200
100
0
CE

NPK

FIGURA 5.14 ndice de humificao (HFIL) obtido atravs da fluorescncia induzida por laser de amostras de
solo dividido pela porcentagem de carbono orgnico das mesmas. CE: solo adubado com efluente; NPK: solo
com adubao mineral base de nitrognio, fosfato e potssio; M: solo de mata

5.3 Matria Orgnica do Solo (cidos Hmicos)


5.3.1 Anlise Elementar
Os valores obtidos para a composio elementar dos AH e os teores de cinzas esto
apresentados na Tabela 5.8.

TABELA 5.8 Composio elementar (carbono, nitrognio, hidrognio, enxofre e oxignio) e teor de cinzas em
amostras de AH extrados do solo*

Amostras

C (%)

N (%)

H (%)

S (%)

O (%)

Cinzas (%)

2
48
4
5
37
4
CE1
2
47
4
5
36
6
CE2
2
48
4
4
36
5
CE4
2
48
4
5
37
4
NPK1
2
48
4
5
36
5
NPK2
2
49
4
5
36
3
NPK4
2
49
4
3
40
1
M1
3
50
4
5
38
1
M2
2
M4
50
4
4
38
2
*CE: solo adubado com efluente; NPK: solo com adubao mineral base de nitrognio, fosfato e potssio; M:
solo de mata. As numeraes referem-se s profundidades amostradas 1: 0-10 cm; 2: 10-20 cm e 4: 20-40 cm.
Oxignio determinado por diferena

Captulo 5 Resultados e Discusso 78


A anlise elementar proporcionou informaes sobre a distribuio dos elementos
qumicos principais (C, N, H, S e O) nos AH, sendo que no foram observadas diferenas
significativas nos percentuais desses elementos nos trs solos analisados.
A razo C/N (Tabela 5.9) obtida para as amostras de AH variaram de 13,7 a 16,0.
Dados na literatura indicam que a razo obtida est dentro da faixa esperada para AH
extrados de solo. (NICOLARDOT et al., 2001). Para as amostras de solo de mata observouse um aumento dessa razo ao longo do perfil do solo, indicando um aumento no ndice de
humificao dessas amostras.

TABELA 5.9 Razes atmica C/N e H/C das amostras de amostras de AH extrados do solo

Amostras*

C/N

H/C

14,2
1,29
CE1
13,7
1,27
CE2
14,3
1,11
CE4
14,1
1,22
NPK1
14,0
1,25
NPK2
14,5
1,23
NPK4
14,7
0,82
M1
15,3
1,12
M2
M4
16,0
1,02
*CE: solo adubado com efluente; NPK: solo com adubao mineral base de nitrognio, fosfato e potssio; M:
solo de mata. As numeraes referem-se s profundidades amostradas 1: 0-10 cm; 2: 10-20 cm e 4: 20-40 cm

De acordo com STEVENSON (1994), a razo H/C pode ser usada para avaliar o grau
de insaturao dos cidos hmicos. Quanto maior esta razo menor o grau de insaturao
das molculas. Na Tabela 5.9, observa-se que os AH dos solos CE apresentaram maiores
valores de H/C, indicando que essas amostras possuem maior grau de saturao que os demais
AH, possivelmente devido incorporao da matria orgnica presente no efluente. A razo
H/C observada para as amostras de AH de mata mostrou que este material possui alto grau de
insaturao.

Captulo 5 Resultados e Discusso 79

5.3.2 Anlises Espectroscpicas


5.3.2.1 Espectroscopia de Infravermelho com Transformada de Fourier (FTIR)
As anlises de infravermelho foram feitas visando obter informaes sobre a
composio de grupos funcionais, dos cidos hmicos extrados dos solos.
As possveis atribuies dos sinais foram baseadas no conhecimento acumulado pela
RMN de 13C em solos e cidos hmicos nos trabalhos descritos na literatura WILSON 1984 e
1987; SCHNITZER e PRESTON, 1986; PRESTON et al., 1994ab, 1996; KGEL-KNABER,
1997; SCHULTEN e SCHNITZER, 1997; VEEMAN, 1997; ZECH et al., 1997; CELI et al.,
1997.
Os espectros de infravermelho para as amostras de AH so apresentados na Figura
5.15.

1060

1236

1420

1618

2918
2850

1718

Captulo 5 Resultados e Discusso 80

M4

M2

M1

N PK 4

N PK 2

N PK 1

CE4

CE2

CE1

4000

3500

3000

2500

2000

1500

1000

500

-1

N m e ro d e o n d a (c m )

FIGURA 5.15 Espectros de FTIR de AH extrados de amostras de solos adubados com efluente (CE), solo com
adubao mineral a base de nitrognio, fsforo e potssio (NPK) e solo de mata

Uma banda larga na regio de alta freqncia, entre 3600 e 3070 cm-1 presente em
todos os espectros atribuda s vibraes de estiramentos O-H, indicando a abundante

Captulo 5 Resultados e Discusso 81


presena de grupos hidroxilas nos AH obtidos. Na regio de 2918 e 2850 cm-1 encontram-se
os estiramentos assimtrico e simtrico, respectivamente, de CH alifticos (CELI et al., 1997).
A banda em 1718 cm-1 atribuda a vibraes (O-C=O) de steres ou (C=O) de
cetonas (NAIDJA et al., 2002), enquanto que em torno de 1620 cm-1 tem-se (C=O) de grupo
amida banda de amida I, C=C de anel aromtico, deformao axial de C=C, C=N, absoro
anti-simtrica de C=O de COO- e deformao angular de H2O (NIEMEYER et al., 1992;
BAES e BLOOM, 1989; GUIMARES, 1997).
Uma banda fraca em torno de 1420 cm-1 refere-se ao estiramento assimtrico C-O e
/ou a deformao C-O-H dos COOH e estiramento simtrico dos ons COO-. A banda
prxima a 1236 cm-1 atribuda deformao axial C-O dos COOH (BAES e BLOOM,
1989) e estiramento simtrico C-O. Ainda, as absores observadas entre 1200-1100 cm-1
podem ser atribudas ao (C-O) de polissacardeos (STEVENSON, 1994; NIEMEYER et al.,
1992) provavelmente celulose ou hemicelulose residual (INBAR et al., 1989) ou impurezas se
silicatos relacionadas ao (Si-O) (GUIMARES, 1997).
Analisando os espectros obtidos para os AH extrados do solo, observou-se que todos
eles apresentaram perfis semelhantes, indicando a presena dos mesmos grupos funcionais,
no sendo observada, atravs desta tcnica, qualquer alterao nestes grupos, em virtude da
adio da matria orgnica do efluente.

5.3.2.2 Espectroscopia de Ressonncia Paramagntica Eletrnica (RPE)


O sinal do radical livre orgnico das substncias hmicas, detectvel por RPE,
atribudo a radicais livres do tipo semiquinona. Quanto maior a concentrao de radicais
livres do tipo semiquinona, maior a humificao da matria orgnica (SENESI, 1990a;
MARTIN-NETO et al., 1991, 1998). Normalmente a maior humificao est relacionada
formao de compostos mais aromticos (KGEL-KNABER et al., 1991). No entanto, pela
complexidade da MOS, temerrio assumir um nico tipo de radical como responsvel pelo
sinal, e na literatura internacional no se descarta a possibilidade de envolvimento de outros
tipos de estruturas (SENESI, 1990b; CHESHIRE e MCPAHIL, 1996; WATANABE et al.,
2005).
Para quantificao de espcies paramagnticas, a concentrao de spins diretamente
proporcional integral dupla do espectro de RPE (Figura 2.9). Uma aproximao
normalmente muito utilizada para a obteno da concentrao de spins feita utilizando-se a

Captulo 5 Resultados e Discusso 82


frmula I H2 (POOLE, 1967), onde I a intensidade do sinal e H a largura do sinal
tomada pico a pico.

TABELA 5.10 Concentrao de radicais livres do tipo semiquinona e largura de linha das amostras de AH
extrados do solo CE, NPK e M, fornecidas por RPE*

Amostras

Radicais livres do tipo semiquinona

Largura de linha

(spin g-1 de C (1017))


(Gauss)
1,92 0,02
4,52 0,10
CE1
1,36 0,13
4,84 0,07
CE2
2,59

0,10
4,30 0,07
CE4
1,74 0,03
4,42 0,10
NPK1
1,82

0,01
4,59 0,00
NPK2
2,03 0,06
4,77 0,03
NPK4
2,05

0,04
4,25
0,07
M1
2,66 0,13
4,25 0,00
M2
M4
4,37 0,04
4,01 0,07
*CE: solo adubado com efluente; NPK: solo com adubao mineral base de nitrognio, fosfato e potssio; M:
solo de mata. As numeraes referem-se s profundidades amostradas 1: 0-10 cm; 2: 10-20 cm e 4: 20-40 cm.
Potncia 0,2 mW

Os resultados obtidos para a concentrao de radicais livres do tipo semiquinona para


as amostras de solos esto descritos na Tabela 5.10. A concentrao desses radicais foi
avaliada em dois solos sob cultivo e diferentes tipos de adubos (CE e NPK) e em um solo de
mata (M). Nos trs solos analisados observou-se um aumento na concentrao de radicais
semiquinona conforme se aumenta profundidade.
No solo de mata foi observada maior concentrao desses radicais, indicando maior
ndice de humificao dessas amostras. A adio do efluente no solo alterou
significativamente a concentrao dos radicais semiquinona no solo. Comparado ao solo com
adubao NPK, observou-se que o solo com CE apresentou nas camadas de 0-10 e 20-40 cm
maiores ndices de humificao, no entanto, ocorreu uma diminuio neste ndice na camada
de 10-20 cm (Figura 5.16). Dessa forma, nota-se uma contribuio dos radicais do tipo
semiquinona, presentes em baixas concentraes no efluente (Figura 5.3, amostra 2FSC3), na
alterao da matria orgnica natural do solo.

Captulo 5 Resultados e Discusso 83

17

4,5x10

17

4,0x10

0-10 cm
10-20 cm
20-40 cm

17

3,5x10

17

-1

Spin g C

-1

3,0x10

17

2,5x10

17

2,0x10

17

1,5x10

17

1,0x10

16

5,0x10

0,0
CE

NPK

FIGURA 5.16 Comcentrao de radicais livres do tipo semiquinona em spin g-1C-1 obtida para as amostras de
AH extrados de solos adubados com efluente (CE), com adubao mineral a base de nitrognio, fsforo e
potssio (NPK) e de solo de mata (M)

Caractersticas adicionais dos radicais livres semiquinona podem ser obtidas usando a
largura de linha do sinal de RPE (POOLE e FARACH, 1972; MARTIN-NETO et al., 2001).
MARTIN-NETO et al., (2001) observaram que a largura de linha dos radicais livres do tipo
semiquinona era diretamente proporcional diminuio do pH para Latossolos e cidos
hmicos de turfa, fornecendo evidncias de que o tempo de relaxao do estado excitado do
sinal semiquinona dessas substncias hmicas seja maior em meio cido, devido s mudanas
conformacionais das SH, o que resulta em uma interao menos efetiva com o meio externo.
Geralmente, as amostras de cidos hmicos com maior concentrao de radicais livres
do tipo semiquinona, so associadas a sinais com menor largura de linha, devido ao maior
grau de humificao e radicais mais protegidos com relao ao meio externo (MARTINNETO et al., 2001; SPOSITO et al., 1996).
Corroborando com SANTOS (2006), MARTIN-NETO et al., 2001; SPOSITO et al.,
1996, os cidos hmicos com maior concentrao de radicais livres do tipo semiquinona
apresentaram menor largura de linha (Tabela 5.10). Observou-se que os cidos hmicos
extrados do solo de mata apresentaram maior concentrao de radicais livres semiquinona e
menor largura de linha, sendo que para este solo foi observado maior carter cido (Tabela
5.7).

Captulo 5 Resultados e Discusso 84


5.3.2.3 Espectroscopia de Ressonncia Magntica Nuclear (RMN)
Os espectros de RMN de

13

C para as amostras de AH esto apresentados na Figura

5.13.

M4

M2

M1

NPK4

N PK 2

N PK 1

CE4

CE2

CE1
300

250

200

150

100

50

-5 0

-1 0 0

D e s lo c a m e n to q u m ic o ( p p m )

FIGURA 5.17 Espectros de RMN de 13C dos AH extrados do solo. CE: solo adubado com efluente; NPK: solo
com adubao mineral base de nitrognio, fosfato e potssio; M: solo de mata. As numeraes referem-se s
profundidades amostradas 1: 0-10 cm; 2: 10-20 cm e 4: 20-40 cm.

Captulo 5 Resultados e Discusso 85

As mesmas consideraes feitas para o efluente da fossa com relao s limitaes da


RMN de 13C no estado slido, citadas no item 5.1.4.3, tambm so aplicveis para as de AH.
Na Figura 5.18 esto apresentadas as porcentagens relativas aos grupamentos
aromticos e alifticos presentes nas amostras de AH. Nos AH do solo CE ocorreu uma
diminuio no teor de carbono aliftico com o aumento da profundidade, semelhante ao
observado para os de solo de mata. Com o uso do efluente, o solo recebe matria orgnica de
carter mais simples devido ao processo de biodegradao a qual foi submetida no
biodigestor, sendo dessa forma incorporada ao solo mais facilmente. Em contraposio, para o
solo de mata, tem-se um sistema fechado, no qual adiciona-se ao solo matria orgnica fresca,
proveniente de folhas de rvores e tambm de origem animal. Este material degradado pela
ao dos microrganismos e lentamente incorporado matria orgnica do solo, sendo que nas
camadas de 10-20 e 20-40 cm no ocorreu alterao no teor desses grupos alifticos (Figura
5.18C), indicando uma possvel estabilizao dessa matria orgnica.

Captulo 5 Resultados e Discusso 86

A.

CE1
CE2
CE4

35
30

Porcentagem

25
20
15
10
5

30

B.

Cca
rb
ox
.
Cca
rb
on
.

om
.

COar

Car
om
.

Cal
if.
Nal
if.
/m
et
ox
.
COali
f.

NPK1
NPK2
NPK4

25

Porcentagem

20
15
10
5

COar
om
.
Cca
rb
ox
.
Cca
rb
on
.

Car
om
.

Cali
f.
Nali
f./
m
eto
x.
COali
f.

C.

M1
M2
M4

35
30

Porcentagem

25
20
15
10
5

CO
-a
ro
m
.
Cca
rb
ox
.
Cca
rb
on
.

Car
om
.

Cal
if.
Nali
f./
m
et
ox
.
CO
-a
lif
.

FIGURA 5.18 Porcentagem da rea total das bandas nos espectros de RMN de 13C com VACP/MAS das
amostras de AH. CE: solo adubado com efluente; NPK: solo com adubao mineral base de nitrognio, fosfato
e potssio; M: solo de mata. As numeraes referem-se s profundidades amostradas 1: 0-10 cm; 2: 10-20 cm e
4: 20-40 cm

Captulo 5 Resultados e Discusso 87


Na Tabela 5.11 esto apresentados os dados referentes s porcentagens de
grupamentos aromticos e alifticos observadas para as amostras de AH. Para as amostras de
AH do solo com efluente observou-se que a adio do efluente provocou um aumento na
alifaticidade na matria orgnica se comparado com o solo adubado com NPK. Resultados
semelhantes ao observado por SANTOS, (2006) ao avaliar o grau de aromaticidade de
amostras de Latossolo submetidos adio de lodo de esgoto.

TABELA 5.11 Porcentagem dos grupos aromticos e alifticos nas amostras de AH obtidas atravs dos
espectros de RMN de 13C

Amostras*

Aromaticidade (%)

Alifaticidade (%)

21
79
CE1
21
79
CE2
27
73
CE4
26
74
NPK1
25
75
NPK2
26
74
NPK4
20
80
M1
24
76
M2
M4
27
73
*CE: solo adubado com efluente; NPK: solo com adubao mineral base de nitrognio, fosfato e potssio; M:
solo de mata. As numeraes referem-se s profundidades amostradas 1: 0-10 cm; 2: 10-20 cm e 4: 20-40 cm

5.3.2.4 Espectroscopia de Fluorescncia em Soluo


A fluorescncia tem sido amplamente reconhecida como uma tcnica relativamente
simples, sensvel e til para o estudo estrutural e funcional relativo s amostras tal como o
cido hmico.
As principais vantagens desta tcnica so, a alta sensibilidade e seletividade, pois
somente aqueles grupos funcionais que fluorescem podem ser observados. Com isso, o uso da
tcnica de fluorescncia nos estudos sobre substncias hmicas est apoiado pela presena
estvel de vrias estruturas fluorescentes intrnsecas a molcula hmica e a seus precursores,
particularmente anis aromticos, fenis e grupos quinona (SENESI et al., 1991).
5.3.2.4.1 Modalidade de Emisso
Os espectros de emisso foram obtidos utilizando metodologias propostas por
MILORI et al., (2002) e ZSOLNAY et al., (1999), as quais propem a excitao das amostras
em 465 e 240 nm, respectivamente.

Captulo 5 Resultados e Discusso 88


Os espectros das amostras de AH pertinente s metodologias, assim como os
respectivos ndices de humificao so mostrados nas Figuras 5.19, 5.20, 5.21 e 5.22.

M 0-10 cm
M 10-20 cm
M 20-40 cm

Intensidade de fluorescncia (u.a.)

240
200
160
120
80
40
0
500

550

600

650

700

Comprimento de onda (nm)

Intensidade de fluorescncia (u.a)

320

NPK 0-10 cm
NPK 10-20 cm
NPK 20-40 cm

280
240
200
160
120
80
40
0
500

550

600

650

700

Comprimento de onda (nm)

Intensidade de fluorescncia (u.a.)

280

CE 0-10 cm
CE 10-20 cm
CE 20-40 cm

240
200
160
120
80
40
0
500

550

600

650

700

Comprimento de onda (nm)

FIGURA 5.19 Espectros de emisso de fluorescncia de AH extrados do solo, medidos com comprimento de
onda de excitao ex = 465 nm. CE solo adubado com efluente; NPK solo com adubao mineral a base de
nitrognio, fsforo e potssio; M solo de mata

Captulo 5 Resultados e Discusso 89


Os espectros de emisso obtidos com ex = 465 nm apresentaram-se como uma nica
banda com um mximo de emisso centrado em torno de 524 nm. Observou-se um mesmo
perfil para os trs solos analisados, no qual a intensidade de fluorescncia aumentou conforme
se aumentava profundidade no solo.
Segundo MILORI et al. (2002), uma boa estimativa do ndice de humificao para
amostras de AH pode ser obtida integrando-se a rea sob a curva dos espectros de emisso
com ex = 465 nm, sendo denominado A465.

0-10 cm
10-20 cm
20-40 cm

24000
20000

A465

16000
12000
8000
4000
0

CE

NPK

FIGURA 5.20 ndice de humificao, A465, obtido segundo metodologia de MILORI et al., (2002) para os AH
extrados do solo. CE solo adubado com efluente; NPK solo com adubao mineral a base de nitrognio,
fsforo e potssio; M solo de mata

Os ndices de humificao, A465, obtidos para as amostras de AH esto apresentados


na Figura 5.20. Observou-se que as amostras para os solo CE e NPK apresentaram ndices de
humificao bem semelhantes, no sendo observada qualquer mudana em funo da adio
do efluente. Para as amostras de M, foram observados maiores ndices de humificao nas
camadas de 0-10 e 10-20 cm e na camada de 20-40 cm apresentou carter menos humificado
que os solos sob cultivo.
Utilizando a metodologia proposta por ZSOLNAY et al., (1999) obtiveram-se os
espectros de emisso com ex = 240 nm. Os espectros apresentaram uma banda com as
maiores intensidades de fluorescncia deslocadas para maiores comprimentos de onda. A
fluorescncia de cidos hmicos em comprimentos de onda longos, como neste caso,
associada a sistemas insaturados conjugados (hidrocarbonetos aromticos condensados tipo
tetraceno de estrutura linear ou pirileno de estrutura cclica), e/ ou a ncleos aromticos

Captulo 5 Resultados e Discusso 90


altamente substitudos por C=O e COOH (LUMB, 1978; SENESI, 1992; RIVERO et al.,
1998; OLK et al., 1999).

Intensidade de fluorescncia (u.a.)

300

M 0-10 cm
M 10-20 cm
M 20-40 cm

250
200
150
100
50
0
300

400

500

600

700

Intensidade de fluorescncia (u.a.)

Comprimento de onda (nm)


NPK 0-10 cm
NPK 10-20 cm
NPK 20-40 cm

250

200

150

100

50

0
300

400

500

600

700

Comprimento de onda (nm)

Intensidade de fluorescncia (u.a.)

300

CE 0-10 cm
CE 10-20 cm
CE 20-40 cm

250
200
150
100
50
0
300

400

500

600

700

Comprimento de onda (nm)

FIGURA 5.21 Espectros de emisso de fluorescncia de AH extrados do solo, medidos com comprimento de
onda de excitao ex = 240 nm. CE solo adubado com efluente; NPK solo com adubao mineral a base de
nitrognio, fsforo e potssio; M solo de mata

Captulo 5 Resultados e Discusso 91


A proposta de ZSOLNAY et al., (1999) que, se as molculas fluorescentes tornam-se
mais condensadas tendero a exibir um deslocamento sobre comprimentos de onda maiores.
A partir da excitao de diferentes amostras com radiao ultravioleta em 240 nm, foi
possvel observar no espectro de emisso da matria orgnica dissolvida, um deslocamento
para comprimentos de ondas maiores, demonstrando progresso no processo de humificao.
Deste modo, segundo ZSOLNAY et al., (1999) a rea sobre o ltimo quarto da emisso (562650 nm) dividido pela rea do primeiro quarto (300-387 nm), denominado A4/A1, pode ser
usada como ndice de humificao.
Na Figura 5.22 so apresentados os ndices de humificao, A4/A1, obtidos segundo
metodologia de ZSOLNAY et al., (1999) para as amostras de AH.

0-10 cm
10-20 cm
20-40 cm

2,0

A4 / A1

1,6

1,2

0,8

0,4

0,0

CE

NPK

FIGURA 5.22 ndice de humificao, A4/A1, obtido segundo metodologia de ZSOLNAY et al., (1999) para os
AH extrados do solo. CE solo adubado com efluente; NPK solo com adubao mineral a base de nitrognio,
fsforo e potssio; M solo de mata

As amostras de AH dos solos sob cultivo (CE e NPK) apresentaram o mesmo


comportamento ao longo do perfil do solo, com valores de A4/A1 semelhantes. Segundo a
metodologia de ZSOLNAY et al., (1999) as amostras de AH extrados do solo de mata
apresentaram carter menos humificado do que as demais analisadas.

Captulo 5 Resultados e Discusso 92


5.3.2.4.2 Modalidade Sincronizada
O espectro de varredura sincronizada, medida com diferena constante entre excitao
e emisso ( = 55 nm), permitiu avaliar o grau de humificao atravs da metodologia
proposta por KALBITZ et al., (2000). De acordo com essa proposta, os espectros de
fluorescncia sincronizados das substncias hmicas apresentam dois picos, um em torno de
360 e outro em 465 nm, e um ombro em torno de 470 nm. Esses picos podem apresentar
deslocamento no mximo de intensidade de fluorescncia de menores para maiores
comprimentos de onda, o que est associado com um aumento no nmero de ncleos
aromticos altamente substitudos e/ ou com um sistema conjugado insaturado capaz de exibir
alto grau de ressonncia. Ento, a razo da intensidade de fluorescncia em 400 e 360 nm, ou
470 e 360 nm pode ser usada para medir o grau de humificao das substncias hmicas.
Nos espectros da Figura 5.23, identificaram-se os dois picos mdios, um em 456 e
outro em 374 nm, os quais foram usados na determinao do ndice de humificao, medindose a razo I456/ I374.

Captulo 5 Resultados e Discusso 93

Intensidade de fluorescncia (u.a.)

280
240

M 0-10 cm
M 10-20 cm
M 20-40 cm

200
160
120
80
40
0
300

350

400

450

500

Comprimento de onda (nm)

Intensidade de fluorescncia (u.a.)

320

NPK 0-10 cm
NPK 10-20 cm
NPK 20-40 cm

280
240
200
160
120
80
40
0
300

350

400

450

500

Comprimento de onda (nm)

Intensidade de fluorescncia (u.a.)

280
240

CE 0-10 cm
CE 10-20 cm
CE 20-40 cm

200
160
120
80
40
0
300

350

400

450

500

Comprimento de onda (nm)

FIGURA 5.23 Espectros de varredura sincronizada de AH extrados do solo, medidos com diferena de
comprimento de onda de emisso e excitao = 55 nm. CE solo adubado com efluente; NPK solo com
adubao mineral a base de nitrognio, fsforo e potssio; M solo de mata

Captulo 5 Resultados e Discusso 94


2,0

0-10 cm
10-20 cm
20-40 cm

I456 / I374

1,6

1,2

0,8

0,4

0,0

CE

NPK

FIGURA 5.24 ndice de humificao, I456/I374, obtido segundo metodologia de KALBITZ et al., (2000) para os
AH extrados do solo. CE solo adubado com efluente; NPK solo com adubao mineral a base de nitrognio,
fsforo e potssio; M solo de mata

De forma semelhante ao observado pelas metodologias de MILORI et al., (2002) e


ZSOLNAY et al., (1999), o ndice de humificao I456/I374, mostrou que as amostras de AH
dos solos CE e NPK apresentaram o mesmo comportamento, revelando o mesmo ndice de
humificao (Figura 5.24).
A anlise de correlao mostrou que os ndices de humificao A4/A1 e I456/I374
apresentaram boa correlao (R: 0,9249) enquanto que para o ndice A465 obtiveram-se
valores de R inferiores a 0,900, conforme pode ser visto na Figura 5.25.

1,9

A.

2,0
1,8

I456/ I374

A4 /A1

1,6
1,4
1,2

1,9

B.

1,8

1,8

1,7

1,7

1,6

1,6

1,5

1,5

I456/ I374

2,2

1,4
1,3
1,2

1,0

R: 0,8772
P: 0,0020

0,8
0,6

10000 12000 14000 16000 18000 20000 22000 24000 26000 28000

A465

C.

1,4
1,3
1,2

1,1

R: 0,9249
P:<0,0000

1,0
0,4

0,6

0,8

1,0

1,2

1,4

A4 /A1

1,6

1,8

2,0

2,2

1,1

R: 0,7759
P: 0,0140

1,0

10000 12000 14000 16000 18000 20000 22000 24000 26000 28000

A465

FIGURA 5.25 Correlao entre as metodologias de fluorescncia propostas para avaliar o ndice de
humificao das substncias hmicas: A. MILORI e ZSOLNAY; B. ZSOLNAY e KALBITZ e C. MILORI e
KALBITZ

________________________________________________________________________95

CAPTULO 6 CONCLUSES
Os resultados obtidos mostraram que o efluente gerado pelo sistema da fossa sptica
biodigestora apresentou composies variveis, considerando as diferentes coletas e o tipo de
inoculante utilizado.
A anlise elementar e teor de cinzas indicaram no haver diferenas no percentual dos
elementos que possa ser atribuda aos inoculantes bovino /ovino. O teor de cinzas observado
para as amostras das trs caixas do sistema foi alto, indicando que o material da Fossa Sptica
Biodigestora possui uma frao mineral significativa. Esta frao mineral foi avaliada
somente para o material da terceira caixa e revelou que, de fato, o efluente possui quantidades
significativas de nutrientes que podem ser disponibilizados para as plantas. Tambm foram
encontrados altos teores de Na em relao aos teores de nutrientes, no entanto, no foram
observados efeitos de salinizao no solo.
A anlise da matria orgnica do efluente por mtodos espectroscpicos indicou no
haver diferenas em sua composio com relao ao inoculante usado. No processo de
biodegradao ao longo do sistema da fossa sptica biodigestora observou-se que no
ocorreram alteraes significativas na composio dos grupos funcionais da matria orgnica
do efluente. O efluente possui carter bastante aliftico e ao ser incorporado no solo, observase que modifica a matria orgnica do solo.
A adio do efluente ao solo provocou modificao em suas propriedades fsicoqumicas. Foi observado um aumento no pH do solo, ocasionado em funo do carter
alcalino e da ao da matria orgnica do efluente. A anlise de condutividade eltrica do
extrato do solo mostrou que a adio do efluente no provocou efeitos de salinizao no solo,
visto que as concentraes de sais no efluente so altas.
Foi possvel observar que a adio do efluente ao solo aps 3 anos de aplicao,
provocou significativas alteraes na parte hmica da matria orgnica do solo.
A anlise elementar dos AH revelou que as amostras extradas do solo CE
apresentaram maior grau de saturao que os demais solos analisados, em funo do carter
aliftico da matria orgnica do efluente que foi incorporada ao solo.

Captulo 6 Concluses 96
Os espectros de FTIR obtidos so tpicos para AH. Neles as principais bandas esto
associadas a grupos hidroxilas, alifticos, carboxilatos, carbonila e amina. Os espectros no
mostraram diferenas significativas para os trs solos analisados.
Os resultados obtidos atravs da RPE e RMN de

13

C indicaram uma diminuio no

ndice de humificao das amostras de AH do solo CE comparado ao solo com adubao


NPK, nas camadas de 0-10 e 10-20 cm.
A reutilizao do efluente, alm de ser uma alternativa mais adequada sob o aspecto
ambiental tambm muito til do ponto de vista agrcola, pois este demonstrou ser uma fonte
de macro e micronutrientes para as plantas, alm de matria orgnica para o solo. As tcnicas
qumicas e espectroscpicas mostraram que o benefcio proporcionado pela adio de efluente
ao solo, mesmo em um experimento de curta durao, pode ser significativo.

97

CAPTULO 7 REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS


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