MICOLOGA

CARACTERSTICAS
Reino fungi.
Clulas eucariotas inmviles (cuerpo o soma:
thallo o talo) y osmtrofos (no poseen tubo
digestivo).
Pueden ser unicelulares o pluricelulares
(incapaces de formar tejidos, cada clula
mictica
aislada
tiene
independencia
metablica).
Requieren
material
orgnico
para
desarrollarse. Son hetertrofos no fotosintticos.
SAPRFITOS: Material orgnico inerte o en
descomposicin. SIMBITICOS: Se nutren de
seres vivos de mayor complejidad biolgica.

Utilizan la GLUCOSA como fuente de carbono ms

usada y NITRGENO ORGNICO o compuestos de
AMONIO como fuentes de nitrgeno.
Las especies micticas patgenas para el hombre son
AEROBIAS.
Llevan a cabo su ciclo de vida en ambiente con rangos
de t entre 10 y 60C (mesfilos: 10-50C y termfilos:
20-58C).
El PH de crecimiento vara entre 4.5 y 8.0 y necesitan
cierto grado de humedad

ASOCIACIONES SIMBITICAS
MUTUALISMO.
Asociacin obligatoria. Beneficio mutuo. Ej: Lquenes
y micorrizas.
COMENSALISMO.
Asociacin NO obligatoria. Hongo vive a expensas de
otro ser vivo sin perjudicarlo. Ej: Candida,
Trichosporon, Malassezia (flora humana normal en
piel o mucosas). Pueden causar cuadros infecciosos
OPORTUNISTAS.
PARASITISMO.
Asociacin heteroespecfica, no obligatoria. Uno de los
integrantes se hospeda y nutre del otro. Ocasionan
perjuicio. Causan MICOSIS.

ESTRUCTURA DEL HONGO

Pared mictica: Constituda por carbohidratos (quitina,
quitosano, glucanos y manano, galactano y N-acetil
glucosaminay glucoprotenas.
Funcin: Mantenimiento de la forma celular, protegiendo
al hongo del shock osmtico frente a medios hipotnicos.
Membrana citoplasmtica fosfolipoproteica. Dentro de
los lpidos la conforman los esteroles: ergosterol y
zimosterol.
Funcin: Participa de la formacin de la pared, en la
absorcin de nutrientes, el contenido lipdico vara de
una especie a otra y determina la susceptibilidad a
antimicticos que actan como detergentes polinicos.
Presencia de mitocondrias y retculo endoplsmico en el
citoplasma.
Tienen membrana nuclear y cromosomas.

MORFOLOGA DE LOS HONGOS

Unicelulares: (Talo unicelular) o Levaduras.
Pluricelulares: (Talo filamentoso) o Mohos, formados
por estructuras tubulares denominadas HIFAS. Se
forman a partir de una ESPORA que da lugar a un
TUBO GERMINAL y este a un FILAMENTO
TUBULAR. Cuando se ramifican forman el MICELIO
(masa algodonosa).

Espora

Tubo germinal

Filamento tubular: Hifa

Micelio

TUBO GERMINAL DE
Candida albicans.

Levaduras

Hifa sin tabiques: Cenoctico

Micelio
Levaduras: Gemacin

Hifa tabicada

MICELIO
Vegetativo: Fija al hongo al medio y se responsabiliza
de su nutricin y crecimiento. Asegura la absorcin y
asimilacin de elementos nutritivos y energticos.
Hifa del sustrato o sumergida (en medio de cultivo
slido).
Areo
o reproductor: de fructificacin, son
responsables de la diseminacin y conservacin de la
especie. Posibilitan su reproduccin local y a
distancia (esporos). Hifa rampante o superficial (en
medio de cultivo slido).

ESPORAS
Mecanismo de reproduccin (sexuados y asexuados).
Membrana interna: ENDOSPORIA.
Membrana externa: EXOSPORIA.
Identificacin de hongos:
La estructura, formacin y pigmentacin de esporas
ayuda mucho.
Algunos hongos se originan a partir de la separacin de
parte del micelio gemacin: LEVADURAS.
Otros hongos son DIMRFICOS: pueden aparecer en
forma de levaduras o micelial, depende de las
condiciones de desarrollo.

MECANISMOS DE REPRODUCCIN
Reproduccin sexuada.
Reproduccin de ESPORAS por fusin de 2 ncleos
haploides sexualmente diferentes. Se forma una
clula diploide: ZIGOTO. Por divisin meitica
forma 4 clulas haploides: ESPORAS.
Se los llama HONGOS PERFECTOS. No es comn en
hongos que producen patologas en humanos.
Esporas sexuales: ZIGOSPORAS (gametos similares
en el extremo de las hifas, OOSPORAS (gametos
diferentes en tamao), ARCOSPORAS (unin de dos
hifas: ASCO con 4 a 8 esporas), BASIDIOSPORAS
(Fusin de 2 ncleos de una hifa, haploides. Forman
basidiosporas).

OOSPORA

ASCOSPORA

BASIDIOS TETRA Y HEXASPRICOS

ZIGOSPORAS

Reproduccin asexuada:
1. No existen fusin de ncleos. Se generan los esporos
por un proceso mittico de clulas haploides.
2. Hay un crecimiento de Micelio.
3. Se denominan HONGOS IMPERFECTOS.
Existen varios tipos:
FRAGMENTACIN.
Fragmentacin de hifas segmentadas dan lugar a una
nueva colonia.
GEMACIN.
Formacin de una yema por la clula madre y da lugar
a una clula hija.
ESPORULACIN.
Se forman esporas que germinan posterirmente.

TIPOS DE ESPORAS ASEXUALES

TALOSPORAS: Si se desarrollan directamente de la clula
vegetativa.
Existen tres tipos:
ARTROSPORAS.
Se forman por segmentacin de las hifas.
BLASTOSPORAS.
Se forman por gemacin sin separarse. Forman pseudohifas o
pseudomicelios.
CLAMIDOSPORAS.
Esporas grandes rodeadas de una pared gruesa. Son tambin
formas de resistencia.

TIPOS DE ESPORAS ASEXUALES

Otras esporas se originan de estructuras especializadas:
ESPORANGIOSPORAS.
Se forman dentro de estructuras saculares que se
encuentran en los extremos de las hifas no tabicadas.
CONIDIAS.
Se originan a partir de hifas por gemacin, separndose
luego de ellas.
ALEURISPORA.
Similares a las anteriores pero se separan por ruptura del
septo.

ESPORANGIOS

CONIDIOS

CLASIFICACIN
ZYGOMYCOTINA. Hongos filamentosos no tabicados. Se
reproducen por Zigosporas o por Oosporas. Ej: Mucor
(pan hmedo) y rhizospus (medio ambiente, alergias y
patgeno oportunista).
ASCOMYCOTINA. Presentan micelios septados con:
Ascosporas sexuales, Conidias como esporas asexuadas.
Ej: Penicillium (saprfito), Microsporum (micosis
superficial), Histoplasma capsulatum (micosis profunda),
etc.
BASIDIOMYCOTINA.
Micelio
septado.
Produce
Basidiosporas. Ej: Cryptoccocus (en tierra pero puede
causar patologa).
DEUTEROMYCOTINA u HONGOS IMPERFECTOS.
Hongos filamentosos tabicados y levaduras. Se
reproducen de forma asexual por conidios. (algunos
causan patologa y otros no).

HONGOS DE IMPORTANCIA CLNICA

Micosis cutneas o superficiales (Piel, uas o pelo).
Micosis subcutneas (Tejido subcutneo).
Micosis profundas o sistmicas (cualquier rgano,
fundamentalmente Pulmn).
Micosis oportunistas (pacientes inmunodeprimidos,
causadas por hongos no patgenos en individuos
inmunocompetentes).

MICOSIS
MICOSIS CUTNEAS O SUPERFICIALES:
Pitiriasis o tia versicolor. Malasezzia fufur. Dx:
Microscopa de escamas de la piel. Hongo de forma
oval e hifas pequeas.
Tia negra. Exophiala werneckii. Lesiones negroparduzcas en palmas de mano y pies. Cultivo:
colonias negras y brillantes. Microscopio: clulas
levuriformes verdes oliva.
Dermatomicosis. Producidas por hongos dermatofitos.
En piel, pelo y uas. Penetran el tejido subcutneo y
utilizan como fuente de nitrgeno la QUERATINA.
Tinea capitis, barbarea, unguium, cruris, corporis.

MICOSIS
MICOSIS SUBCUTNEAS: Causadas por hongos que
se encuentran en forma saprfita en la naturaleza y de
forma accidental penetran al hombre.
Esporotricosis. Sporothrix schenckii. Penetra en el
hombre por pinchazos o espinas (esporas). Cultivo:
colonias de color crema, luego pardas o negras.
Crecimiento rpido.
Micetoma. Causada por diferentes especies de hongos
(actinomicetos por ej.). Puede diseminarse a otros
tejidos internos. Puede llegar a la amputacin de la
extremidad afectada.
Cromoblastomicosis. Causada por diversos hongos de
pared
pigmentada
(dermaticeos).
Dermatitis
verrugosa. Afeccin crnica caracterizada por placas
verrugosas y tumefacciones subcutneas blandas.

MICOSIS
MICOSIS SISTMICAS: Afecta a cualquier rgano.
Son DIMRFICOS (caracterstica).
Histoplasmosis. Causada por Histoplasma capsulatum.
Afecta fundamentalmente a los pulmones. Inhalacin.
Cultivo de crecimiento lento. Colonias blanco-grisceas
y aspecto cremoso. Hifas pequeas y entrelazadas.
Blastomicosis. Inhalacin de conidios o hifas de
Blastomyces dermatitis. Afecta pulmones, piel y otros
tejidos. Cultivo: colonias blanquecinas con aspecto creo.
Proyectan penachos hacia arriba (hifas tabicadas).
Coccidiomicosis. Causada por el hongo Coccidioides
immitis. Se transmite por inhalacin. Afecta a los
pulmones principalmente. Se visualizan colonias
micelianas, brillantes, grises y hmedas

MICOSIS

MICOSIS
OPORTUNISTAS:
inmunosuprimidas.

Afecta

personas

Candidiasis. Candida albicans. Infeccin en varios rganos.

Microscopa: clulas levuriformes y/o pseudohifas.
Aspergilosis. Aspergillus fumigatus. Ampliamente distribudos.
Ingresan por inhalacin. Se disemina por todo el organismo.
Colonias esponjosas o granulares. De crecimiento rpido.
Blancas o azul-verdosas. Al microscopio se ven hifas tabicadas
con conidiforos.
Criptococosis. Cryptococcus neoformans. Produce meningitis en IS.
Ingresa por via inhalatoria. Puede provocar otras infecciones. Dx:
tincin con tinta china. Crecimiento rpido. Colonias blancas.
Zigomicosis. Causada por diversos tipos de hongos del suelo.
Inhalacin de esporas. Necrosis de la zona afectada. Microscopa:
hifas sin tabicar. Cultivo: Crecimiento rpido. Colonias
blanquecinas, esponjosas y con hifas grandes, gruesas y
grisceas.

FROTIS DE MICOSIS SUPERFICIAL DE UNA MUESTRA DE

CANDIDIASIS OROFARNGEA Y OTRA DE FLUJO VAGINAL. A LA
DERECHA SE VE UN CORTE HISTOLGICO EN EL CUAL SE VEN
LEVADURAS; EN EL CENTRO, ABAJO, UN EXAMEN DIRECTO DE UNA
LEVADURA CON CPSULA, CON UNA PREPARACIN DE TINTA
CHINA, QUE CORRESPONDE A CRYPTOCOCCUS; ES UN CORTE
HISTOLGICO REALIZADO CON UNA TINCIN ESPECIAL PARA
CRYPTOCOCCUS, LLAMADA MUCICARMIN MAYER.

Corte histolgico

Levadura con cpsula

Mucicarmin Mayer

HONGO FILAMENTOSO, HIALINO, SEPTADO, EN MUESTRA DE

MATERIAL PURULENTO; SE VEN ELEMENTOS CELULARES
POLIMORFONUCLEARES. SE PUEDE VER LA HIFA.

IMAGEN DE TIA INFLAMATORIA DEL CUERO

CABELLUDO (KERION DE CELSO) LAS TIAS DEL
CUERO CABELLUDO, ESPECIALMENTE EN SU FORMA
INFLAMATORIA PUEDEN DAR LUGAR A UNA ALOPECIA
CICATRICIAL.

MUESTRAS

Secreciones respiratorias. Esputos, lavados bronquiales, aspirados

traqueales. Sembrar lo que ms se pueda en presencia de
antibacterianos y antimicticos (cicloheximida).
LCR. Filtrado. Medio de cultivo sin antibacterianos ni antimicticos.
Si es poco centrifugar y usar sedimento. Revisar todos los das.
Sangre. Hemocultivos: Sist. Bifsico agar y caldo infusin cerebro
corazn. Lisar los hemates y leucos y concentrar por centrifugacin.
30 das a 30C.
Orina. Frecuentemente contaminada. Centrifugar y sembrar en
medio con antibiticos. Muestra fresca.

Tejidos. Homogeneizados y sembrados a 30C durante 30 das.

Mdula sea. Se inocula directamente en el medio.

Lquidos estriles. Concentrar por centrifugacin y se siembra al

menos 1 ml.
Piel, pelo y escamas de uas. Raspado o pinzas para obtencin de
muestras. Muy contaminadas. Incubar en medios con antibacterianos
y antimicticos (Agar Mycosel) durante 30 das a 30C.

MEDIOS DE CULTIVO

Para el aislamiento de los Hongos se recomiendan:

1.

Medios con y sin sangre.

2.

Medios con y sin antimictico (cicloheximida).

3.

Medios con antibiticos.

AGAR SABOURAUD: Muy utilizado.

Se utilizan placas de petri o tubos con agar inclinado. Examinar 2 o 3
veces por semana a 30C o TA durante 30 das para informar
NEGATIVOS.
Cultivos ms empleados:
Medios para aislamiento primario: Agar cerebro-corazn con
antibiticos y agar extracto levadura. Ailamiento hongos patgenos
(tambin se usa agar sangre y Sabouraud) excepto dermatofitos
(Agar Mycosel o Sabouraud con atb).
Medios diferenciales: Agar maz con Tween 80 y azul triptano
(Candidas), agar semilla (criptococos), otros.

MICROSCOPIA

KOH. Muy utilizado para deteccin rpida de hongos. Aclara las

muestras.
Tinta china. Pone de manifiesto las cpsulas.
Coloracin de mucicarmn. Tie de rosa brillante el polisacrido
capsular de algunos hongos.
Tincin de metanamina plata. Mejor para muestras histolgicas.
Tie las paredes de los hongos de color marrn oscuro.
Tincin de cido perydico de Schif. Una de las mejores. Tie la
mayora de los hongos. Distingue entre hifas y levaduras.
Blanco de calcoflor. Produce fluorescencia.
Tincin de Papanicolau. Adems de identificar clulas malignas
tambin visualiza hongos.

Tincin de Wright. Histoplasma capsulatum en MO y SP.

Tincin de Gram. Hongos se tien como gram +

ASPECTOS GENERALES DEL DIAGN.

En general son de crecimiento lento.
No se puede usar como nico criterio de identificacin la
caracterizacin macroscpica de las colonias.
Microscpicamente se puede procesar la muestra de
diferentes maneras:
1. Examen en fresco. Porta y cubre objetos (desventaja).
Gota de azul de lactofenol.
2. Cinta adhesiva de celofn. Portaobjeto, cinta adhesiva y
azul de lactofenol. Permite ver la forma microscpica del
cultivo.
3. Cultivo microscpico. Porta y cubre objetos y pedazo de
agar con la colonia.

IDENTIFICACIN DE LEVADURAS

Mtodos convencionales:

1.

Prueba del tubo germinativo.

2.

Morfologa en el agar harina de maz. Permite ver

blastoconidios.

3.

Utilizacin de carbohidratos.

4.

Deteccin de fenol oxidasa con agar semilla de nger (la

mayora de Cryptococcus neoformans la produce).

Mtodos rpidos:

1.

Ureasa (Detecta levaduras que producen ureasa: Cryptococcus,

Rhodotorula).

2.

Nitrato reductasa.

3.

Levodopa-citrato frrico (Cryptococcus neoformans da positivo).

Sistemas comercializados:

La mayora se basan en utilizacin de sustratos. Otros se basan

en la degradacin de carbohidratos o hidrlisis de sustancias.

COLONIAS DE HONGOS FILAMENTOSOS, LOS QUE SE

IDENTIFICAN PRINCIPALMENTE POR
MICROMORFOLOGA. EN EL MICROCULTIVO SE VE LA
ESTRUCTURA.

IDENTIFICACIN DE HONGOS
FILAMENTOSOS.

Cultivos de levaduras que originan distintos tipos de colonias. Se muestra el medio

agar cromognico; en este caso, es una fotografa del cromoagar, donde algunas especies
presentan colores particulares, caracterstica muy importante cuando se quiere
determinar si ms de una especie causa el cuadro clnico o coloniza a un paciente. El
tiempo en relacin al agar Sabouraud es el mismo, pero es mucho ms fcil de trabajar.

Flujograma para Cryptococcus.

La visualizacin y el aislamiento del hongo son el gold

standard.
El examen microscpico directo es rpido, tarda media
hora y la sensibilidad depende del observador.
El cultivo permite obtener mayor positividad, pero es
ms lento; si es levadura demora 24 horas y, si es
filamentoso, varios das. Es importante la correlacin
entre exmenes directos y cultivos; si se ven hifas,
deben crecer hongos peludos y, si se ven pseudohifas,
deben crecer levaduras.
El diagnstico molecular y PCR para hongos estarn
disponibles en un futuro prximo. Hasta ahora no hay
ningn sistema comercial, pero van a ser una
herramienta ms de apoyo diagnstico; no van a
reemplazar lo anterior. En cuanto a la visin de
futuro, lo ideal es que se pueda llegar a hacer de
inmediato inmunodiagnstico o PCR en el paciente y
complementarlos con lo que tenemos disponible hoy
en nuestro laboratorio.