LABORATORIO DE INMUNOLOGA DIAGNSTICA

DETERMINACIN DE ANTICUERPOS ANTI-HELICOBACTER PYLORI DE

CLASE IgG

Pre reporte:
1.- explique el fundamento de la prueba.
La prueba Helicobacter pylori Ab es una prueba rpida de inmunoensayo
cromatogrfico de membrana para la deteccin cualitativa de anticuerpos de H.
pylori en suero, plasma o sangre total. En este procedimiento el IgG anti-humano
es inmovilizado en la regin de prueba de la placa. Tras la adicin de la muestra,
est reacciona con las partculas recubiertas de antgeno H. pylori presentes en la
prueba. Esta mezcla migra cromatogrficamente a travs de la tira de prueba e
interacta con el IgG anti-humano inmovilizado. Si una muestra contiene
anticuerpos de H. pylori aparece una lnea de color en la regin de prueba,
indicando un resultado positivo. Si la muestra no contiene anticuerpos de H. pylori
no aparece una lnea de color en la regin de prueba, indicando un resultado
negativo. Para controlar el procedimiento, aparecer una lnea de color en la
regin de control.

2.- cul es la respuesta del sistema inmune ante la infeccin H. pylori?

Frente a una infeccin por Helicobacter pylori (H. pylori), el husped desarrolla una
respuesta inmune que es inefectiva en eliminar la bacteria. El sistema inmune
innato, juega un rol central procesando y presentando antgenos de H. pylori. La
presencia de citoquinas reguladoras (IL-10 o IL-12) podran modular una
respuesta linfoctica (Th) tipo 1 estableciendo una gastritis crnica, o una
respuesta Th2 con produccin de anticuerpos y la erradicacin de la bacteria. IFNg (respuesta Th1) podra mediar la induccin y la expresin de protenas que
pertenecen al complejo de histocompatibilidad tipo II (HLA-II) en clulas epiteliales,
aumentando la adherencia de H. pylori al epitelio gstrico e induciendo apoptosis.
IL-4 (respuesta Th2) podra aumentar la expresin del HLA-II, la produccin de
IgG e IgE, el crecimiento de clulas T. Finalmente estudios recientes se han
focalizado en la induccin de apoptosis celular como un mecanismo de

proliferacin celular balanceada y como mtodo de defensa del husped frente a

la infeccin por H. pylori.
3.- por qu en ocasiones esta infeccin puede ocasionar cncer gstrico?
Las infecciones con la bacteria Helicobacter pylori (H pylori) parece ser la causa
principal de cncer de estmago, especialmente cnceres en la parte inferior
(distal) del estmago. La infeccin por mucho tiempo del estmago con este
germen puede conducir a inflamacin (llamada gastritis atrfica crnica) y cambios
precancerosos del revestimiento interno del estmago.
Las personas con cncer de estmago tienen una tasa ms alta de infeccin
con H pylori que las personas que no tienen cncer. La infeccin con H pylori se
asocia tambin con algunos tipos de linfoma de estmago. Aun as, la mayora de
la gente que es portadora de este germen en el estmago nunca desarrolla
cncer.

Significado clnico
Helicobacter pylori (H. pylori) es una bacteria con forma espiral que se encuentra
en la mucosa gstrica o adherida a la capa epitelial del estmago. Se estima que
esta bacteria es el causante de ms del 90% de las lceras duodenales y por
encima del 80% de los carcinomas gstricos.
Caractersticas diagnosticas
Sensibilidad Lmite de deteccin: Un cultivo de H. pylori fue sonicado,
centrifugado y se determin la concentracin de protena presente. Esta
preparacin de antgeno de referencia de H. pylori se diluy en un tampn PBSBSA y se hizo la prueba siguiendo las instrucciones de uso. Obteniendo que el
lmite de deteccin de la prueba de Helicobacter pylori es de 4-8 ng/mL.
Especificidad Se han realizado estudios y evaluaciones para comparar la eficacia
del test Helicobacter pylori Ag se evalu en paralelo con un test ELISA del
mercado.
La deteccin de Helicobacter pylori muestra 95% de concordancia en
especificidad en comparacin con la prueba ELISA.
El uso de anticuerpos monoclonales en la elaboracin de Helicobacter pylori Ag
asegura un alto grado de especificidad para los antgenos de H. pylori. Los
anticuerpos utilizados para elaborar esta prueba reconocen eptopos presentes en

los antgenos encontrados en las muestras de heces de los pacientes, tanto como
en las preparaciones provenientes de cultivos de la bacteria in vitro.
La posibilidad de interferencia con anticuerpos humanos anti-antgenos de ratn o
con niveles elevados de RF en las muestras, no se han evaluado, algunas
muestras podran producir lneas de control con un color verde brillante.

Metodologa analtica:
Linear Helicobacter pylori Ag es una prueba cualitativa inmunocromatogrfica para
la deteccin de Helicobacter pylori en muestras de heces. Durante la prueba, la
muestra diluida de heces reacciona con el conjugado coloreado (anticuerpos
monoclonales anti antgeno-partculas de ltex coloreadas) secado previamente
en la membrana de la tira de reaccin. Este complejo avanza por capilaridad a
travs de la membrana. Para dar el resultado como positivo, una lnea de color
rojo aparecer en la zona de resultado de la membrana. La ausencia de esta lnea
roja sugiere un resultado negativo. Independientemente de que haya presencia o
no de antgenos de Helicobacter pylori, la mezcla de conjugado va avanzando por
la membrana hasta la regin de control donde se han inmovilizado anticuerpos y
siempre aparecer una lnea de color verde (lnea de control). La aparicin de esta
lnea se utiliza: 1) para verificar que se ha aadido el volumen de muestra
suficiente y 2) que el flujo ha sido apropiado; y 3) como control interno de los
reactivos.

Resultados:
Paciente:
Carlos Olvera Lpez
Edad y sexo: 22 aos, H

Nuestro resultado fue negativo ya que se compar con los controles positivo,
negativo y las muestras de nuestro dems compaeros, es decir que no hay
presencia de helicobacter pylori en nuestro suero de muestra.
Interpretacin de los resultados:
Se puede interpretar de la siguiente manera:
Se compar con la hoja de control y segn si presentaba los dos puntos de color
morado o color lila era un resultado positivo, as mismo se comparaba su tonalidad
para saber a qu dilucin perteneca.
Para un resultado negativo solo se coloreaba un circulo de color lila pero solo uno
de ellos que era el del control negativo.
Conclusin:
La prctica de anticuerpos anti-helicobacter pylori de clase IgG es una de las
pruebas fundamentales para el diagnstico de helicobacter pylori dnde se
comprob el fundamento y la utilidad de dicha prueba as como su principal uso en
los laboratorios de diagnstico clnico.

Bibliografa:
1. Bruce E. Dunn, Hartley Cohen & Martin J. Blaser. Helicobacter pylori. Clin.
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3. John L. Telford, Antonello Covacci, Rino Rappuoli & Paolo Ghiara.

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4. Anderson, L.P. and Nielsen, H., (1993). Peptic ulcer: an infectious disease?
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5. Evans, D.J. et al. (1989). A sensitive and specific serologic test for detection of
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