CUANTIFICACIN DE GLUCOSA EN SANGRE

OBJETIVOS
Identificar el ndice de glucosa en la muestra
OBSERVACIONES
Utilizaremos una muestra de suero sanguneo del paciente que
previamente ha sido tomado de la obtencin previa de la muestra de
sangre correspondiente y esto es lo que analizaremos en el
laboratorio.
La glucosa va a estar presente en dos sistemas: sea la muestra
problema o sea el standar del laboratorio.
Mi standar en esta ocasin debe ser referencial a los valores de
glucosa en sangre, este valor va a ser representativo en el rango de
60 a 120 mg/dl de sangre y este es el valor que se espera encontrar
en un individuo sano.
El estndar tiene concentracin de 100 mg/dl de glucosa
FUNDAMENTO
Para entender el fundamento tenemos a la glucosa en el medio que
va a reaccionar con el agua del reactivo enzimatico y el oxigeno en el
ambiente. Hay una primera enzima en el sistema y esta es la glucosa
oxidasa, producto de esta reaccin la glucosa va a generar estos dos
primeros productos: Acido glucnico y perxido de hidrogeno.
Glucosa + H2O + O2 ----glucosa oxidasa----> Acido gluconico + H2O2
El que contina reaccionando es el perxido con otros excipientes del
reactivo enzimtico. Dentro del reactivo encontramos fenol es por eso
que no se miden las muestras con la pipeta usando la boca.

El complejo coloreado va a ser identificado a una longitud de onda en

esta ocasin a 500 nm.
La prueba a ser indirecta ya que se est midiendo quinona coloreada
que va a ser directamente proporcional a la cantidad de glucosa que
hay en el medio.
Para tener una mejor referencia de la cantidad de glucosa el paciente
debe cumplir ciertas condiciones:
Ayuno, ya que no tiene sentido que le mida la glucemia a
alguien que ha venido por ejemplo bebiendo una taza de
quaquer, debido a que este contiene almidon y el amidon

contiene glucosa lo que nos dara como resultado una

hiperglucemia lo cual es un dato errneo.
Tampoco se recomienda realizar esta prueba a quienes han
ingerido medicamentos, como minimo se debe esperar 72 horas
luego de esto. Porque la ingesta de medicamentos va a
influenciar en los niveles de glucemia, ya que los medicamentos
tienen la propiedad de inhibir enzimas de carbohidratos, lo que
significa que si la glucosa no se oxida esta tiende a
almacenarse entonces vamos a encontrar una hiperglucemia.
La persona debe de estar libre de alcohol en su sangre como
mnimo 48 horas, ya que el alcohol hace que la glucosa se oxide
con mayor frecuencia y por ende en el individuo se produzca
una hipoglucemia.

PROCEDIMIENTO
Trabajaremos con dos estndar: uno del kit enzimtico y otro que fue
preparado en el laboratorio.
TUBO 1
BL
SUERO
----ST 100 mg/dl
----RVO. ENZ.
2000 ul
Bao maria a 38C por 5 minutos
500 nm.

TUBO 2
TUBO 3
ST
MP
----20 ul
20 ul
----2000 ul
2000 ul
y leer a una longitud de onza de

Luego de hacer la homogenizacin se hace la calibracin del

espectrofotmetro para poder cuantificar la glucosa.

RESULTADOS
Al ser colocados los preparados en el espectrofotmetro obtuvimos
los siguientes resultados:
BL 0,000 A
ST 1 (preparado del laboratorio) 0,390 A
ST 2 (kit enzimtico) 0,491 A
MP 0,238 A
Clculos:
a) Abs(MP) / Abs(ST) x (STp) = 0,238/0,390 x 100 = 61,03 mg/dl
b) Abs(MP) / Abs(ST) x (STk) = 0,238/0,491 x 100 = 48,47 mg/dl

DISCUSIN
Los ndices de glucemia puede resultar modificada por alteraciones
que varen el natural recambio de los glbulos rojos, tales como por
hemorragias, anemia hemoltica, transfusiones, embarazo etc.,
situaciones que produciran falsos descensos. Tambin se puede ver
alterada por la ingestin de dosis elevadas de cido acetil saliclico,
vitamina C, alcohol, altas cifras de lpidos en sangre, etc., que
produciran falsos aumentos.
La prueba de hemoglobina glicosilada es muy importante, sin
embargo no puede sustituir al monitoreo de glucemias, ya que sta
no puede medir su control diario y por lo tanto no le permite ajustar
sus dosis de medicamentos orales, de insulina, de actividad fsica, de
ingesta de alimentos en el da a da.
Hay que tener cuidado al momento de quere suministrarle suero a un
paciente diabtico debido a que muchos de estos contienen dextrosa
lo que producira un alza del ndice de glucemia.

CALCULOS SIGNIFICADO CLINICO

En condiciones fisiolgicas, la concentracin de glucosa plasmtica no
debe sobrepasar los 120 mg/dl, incluso tras la ingesta de grandes
cantidades de hidratos de carbono. Tras la ingesta de alimentos, la
absorcin intestinal de carbohidratos hace que las concentraciones de
glucosa en sangre aumenten con rapidez y ello estimula la secrecin
pancretica de insulina. Gracias a la actividad hormonal, los
adipocitos, las clulas musculares y los hepatocitos captan la glucosa
sangunea. La insulina controla el consumo y la movilizacin de
compuestos energticos en el estado postprandial, gracias a sus
diversos efectos sobre las clulas sensibles a la hormona. Su efecto
central es permitir la entrada de glucosa a las clulas, en particular
del hgado, tejido graso y msculo, para su utilizacin ya sea en la va
oxidativa, en la cual da lugar a energa, agua y dixido de carbono, o
no oxidativa, en la que la glucosa es almacenada como glucgeno
heptico o muscular.
Se considera que hay una intolerancia a la glucosa cuando se
sobrepasa esta concentracin en condiciones postprandiales, e
hiperglucemia basal si la concentracin de glucosa en ayunas est
por encima de los valores normales. Si la alteracin es grave, se
excretan cantidades elevadas de glucosa por la orina ya que se
sobrepasa la capacidad de los tbulos renales para reabsorberla. Esto

lleva unido una sintomatologa caracterstica de polidipsia, polifagia y

poliuria. En una fase ms avanzada, si el control no es adecuado
pueden aparecer micro o macroangiopatias. Este sndrome es
definido como DIABETES y es el ms comn de los desrdenes
metablicos, afectando al 5-10% de la poblacin en las paises
occidentales.
Las normas de la Asociacin Americana de Diabetes (ADA) y de la
organizacin mundial de la Salud (OMS) recomendaron las siguientes
categoras de diabetes:

Diabetes tipo 1
Diabetes tipo 2
Diabetes mellitus gestacional (DMG)
Otros tipos de diabetes

Si bien existen varios tipos de diabetes, la gran mayora de casos

corresponde a dos clases principales; la diabetes mellitus tipo 1 y la
tipo 2. En la primera, el evento patognico ms relevante es la
destruccin masiva de las clulas del pncreas, de manera que la
secrecin de insulina es nula o insignificante. En la diabetes tipo 2, la
deficiencia hormonal no es tan marcada y el trastorno principal es la
resistencia de los tejidos perifricos a la accin de la hormona.
Patologas relacionadas:
Puede aparecer la glucemia aumentada (hiperglucemia) en:

Diabetes mellitus
Enfermedades renales
Feocromocitoma
Hipertiroidismo
Glucagonoma
Pancreatitis aguda
Sndrome de Cushing
Tumores de pncreas
Otras situaciones antes explicadas (estrs,sueros, embarazo,
medicamentos)

Puede aparecer la glucemia disminuida (hipoglucemia) en:

Dietas excesivas
Enfermedades hepticas
Enfermedad de Addison
Exceso de insulina en diabticos
Hipopitituarismo
Hipotiroidismo
Insulinoma

CONCLUSIONES
A mayor concentracin de glucosa mayor es la absorbancia.
Los resultados obtenidos utilizando el estndar del preparado de
laboratorio nos dio un resultado de 61 mg/dl de glucosa en sangre lo
que significa que el ndice de glucemia esta entre los valores
normales. Mientras que el resultado obtenido con el estndar del kit
enzimtico nos dio un valor de 47 mg/dl de glucosa lo que precisa una
hipoglucemia.

CRITICAS

Sera bueno si los tip de las micropipetas nos lo entregaran

limpios para evitar contaminar nuestra muestra.