FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA

TEMA:
STAPHYLOCOCCUS EPIDERMIDIS
ASIGNATURA:

MICORBIOLOGA MDICA

DOCENTE:

EDITH PAREDES BACA DE FERNANDEZ

ALUMNO:

PEREZ VILLAFUERTE, FREDDY

RENZO
RODRIGUEZ CAMINO, SHANY
NOHELI

CDIGO:

014200952K
013300012K
CUSCO - PERU - 2016

Contenido
I.

RESEA HISTRICA.........................................................................................4

II.

ESTAPHYLOCOCCUS EPIDERMIDIS...............................................................4
INTRODUCCIN....................................................................................................4
TAXONOMIA..........................................................................................................4
HBITAD................................................................................................................5
MORFOLOGA MICROSCPICA..........................................................................5
MORFOLOGA MACROSCPICA.........................................................................5
METABOLISMO......................................................................................................5
RESISTENCIA A AGENTES FISICOS Y QUMICOS............................................6
IMPORTANCIA CLNICA........................................................................................6
IDENTIFICACIN...................................................................................................8
1. PRUEBA DE LA CATALASA........................................................................8
2. PRUEBA DE LA COAGULASA....................................................................9
3. AGLUTINACIN CON PARTCULAS DE LTEX......................................11
4. PRESENCIA DE DESOXIRRIBONUCLEASA (DNASA)............................11
5. PRESENCIA DE NUCLEASA TERMOESTABLE.......................................11
6. SUSCEPTIBILIDAD A LA NOVOBIOCINA.................................................12
7. SISTEMAS DE IDENTIFICACIN COMERCIAL.......................................12
ANTIBIOGRAMA DE STAPHYLOCOCCUS EPIDERMIDIS................................13
1. RESULTADOS............................................................................................14

III.

CONCLUSIONES..........................................................................................16

IV.

BIBLIOGRAFIA..............................................................................................17

I.

RESEA HISTRICA

Los cocos se asociaron por primera vez a enfermedades humanas cuando fueron
observados en materiales purulentos provenientes de abscesos humanos. En
1880 el cirujano escocs Sir Alexander Ogston demostr que cocos agrupados en
forma de racimo eran la causa de ciertos abscesos pigenos en humanos. Louis
Pasteur arrib a una conclusin similar al mismo tiempo, pero en Pars. En el ao
1882, Ogston llamo a estos cocos Staphylococcus, derivando el nombre de los
trminos griegos staphile (racimo de uvas) y kokkus (frutilla).
Morfolgicamente,

Ogston

propuso

este

trmino

de

manera

de

poder

diferenciarlos de los estreptococos, formadores de cadenas. Ogston demostr que

la inyeccin a ratones de pus conteniendo estos cocos produca los mismos
sntomas observados en el humano. Tambin observ que si calentaba el pus y lo
trataba con fenol, la enfermedad se prevena.

II.

ESTAPHYLOCOCCUS EPIDERMIDIS

INTRODUCCIN
El Staphylococcus epidermidis es integrante de la flora normal de la piel de ah
epidermidis, pero esta bacteria produce infecciones crecientes en la piel y sus
anexos, colonizando cuerpos extraos y tambin es causa de infecciones
proundas en huspedes inmunocomprometidos.

TAXONOMIA
Los miembros del gnero Staphylococcus son taxonmicamente catalasa positivo.
Este gnero se coloc dentro de la familia Bacillaceae junto a otros generos,
Bacillus, Gamella, Listeria, Planococcus, etc.
Los estafilococos son cocos Gram positivos, catalasa positivos y el diamino cido
en el peptidoglicano es la L-lisina. El gnero Staphylococcus posee alrededor de
30 especies, de las cuales destacan S. aureus, S. saprophyticus y S. epidermidis.

REINO:
FILO:
CLASE:
ORDEN:
FAMILIA:
GNERO:
ESPECIE:

Bacteria
Firmicutes
Cocci
Bacillales
Staphylococcaceae
Staphylococcus
S.epidermidis
(Winslow & Winslow 1908)
Evans 1916

HBITAD
El Staphylococcus epidermidis es integrante de la flora normal de la superficie
corporal donde sobrevive gracias a sus lipasas.

MORFOLOGA MICROSCPICA
Se trata de cocos Gram positivos que poseen tendencia a agruparse en racimos.
Tienen una forma esfrica y un dimetro de alrededor de una micra.

MORFOLOGA MACROSCPICA
Para apreciarla debemos contar con un aislamiento de la cepa a estudfiar en una
placa de Petri. Este aislamiento nos permitir observar las caractersticas de las
colonias. El S. epidermidis presenta colonias generalmente de tamao pequeo y
no presentan pigmentacin.

METABOLISMO
En cuanto a su forma de obtener energa es tanto a travs de la fermentacin
como de la respiracin. En cuanto a los requerimientos de cultivo, son no
exigentes desde el punto de vista nutricional, creciendo en medios pobres y
simples. En su relacin con el oxigeno son aerobios-anaerobios facultativos.

RESISTENCIA A AGENTES FISICOS Y QUMICOS

Es muy resistente a las condiciones ambientales normales. Es capaz de sobrevivir
hasta tres meses en un cultivo a temperatura ambiente. Muere expuesto a
temperaturas mayores de 60 C por una hora. En cuanto a los agentes qumicos,

es sensible a la mayora de los desinfectantes y antispticos, que lo matan en

pocos minutos.

IMPORTANCIA CLNICA
Con respecto a la patogenicidad, S. epidermidis es capaz de producir
macromolculas de superficie y extracelulares, que inician y luego aumentan la
adhesin bacteriana a la superficie plstica de cuerpos extraos. La adherencia
inicial de S. epidermidis parece estar mediada por una adhesina polisacrida
llamada PS/A y otras protenas de superficie. La PS/A se trata de un polmero de
galactosa-arabinosa de alto peso molecular. Los anticuerpos dirigidos contra PS/A
bloquean la adherencia de S. epidermidis. Luego de la adherencia inicial, hay otra
fase llamada de adherencia intracelular que es mediada por un polisacrido
llamado PIA y una protena extracelular. Esto permite la formacin de varias capas
de clulas bacterianas adheridas entre si que forman el llamado slime o biofilm.
Este slime sirve para proteger a los microorganismos de los agentes
antimicrobianos y de las clulas fagocticas. En general, es necesaria la remocin
del cuerpo extrao para lograr la cura de la infeccin. El slime parece tener otras
actividades biolgicas, dentro de las cuales se cuentan la inhibicin de la
proliferacin de linfocitos T y un efecto adverso sobre la opsonizacin y
fagocitosis.

Las infecciones causadas por S. epidermidis se relacionan con la colonizacin de

cuerpos extraos, especialmente en el paciente hospitalizado. En el caso de la
colonizacin de catteres intravenosos, puede aparecer flebitis y fiebre, y
eventualmente se produce una bacteriemia y sepsis. La colonizacin de vlvulas
cardacas protsicas puede producir endocarditis precoces y tardas. Estas
infecciones conducen, en casos graves, a la retirada de la vlvula contaminada. La
utilizacin de otros dispositivos como prtesis osteoarticulares, catteres
peritoneales y derivaciones de lquido cefalorraqudeo, tambin pueden ser
susceptibles a contaminacin por S. epidermidis. Ya que la mayora de estos
cuadros se producen dentro del mbito hospitalario, las cepas de S. epidermidis
aisladas frecuentemente son resistentes a meticilina. Estas cepas, adems,
pueden presentar los mismos genes de resistencia ya comentados para S. aureus.
La mayora de las veces que se aisla S. epidermidis de una muestra clnica en el
laboratorio de microbiologa, este constituye un contaminante. Esta especie, al ser
flora normal de piel, muchas veces contamina las muestras en el momento de la
toma, creando dificultades para interpretar los resultados de los cultivos. Es el
contaminante ms importante en muestras de hemocultivo, lquidos biolgicos o
exudados de herida, donde su aislamiento debe ser interpretado con precaucin,
teniendo en cuenta las condiciones de extraccin de la muestra y la condicin
clnica del paciente.
Puede producir, adems:

Infecciones por cateter.

Infeccin por implante de prtesis.
Infeccin por o de herida.
Cistitis
Septicemia
Endocarditis
Edoftalmitis

IDENTIFICACIN
Las pruebas o ensayos bioqumicos son aquellas reacciones que ponen en
evidencia la existencia de una enzima o pasos metablicos determinados, y que

muchas veces nos permiten llegar a la identificacin a nivel de especie. Ahora

enumeraremos las pruebas bioqumicas necesarias para la identificacin de los
estafilococos.
1. PRUEBA DE LA CATALASA

Objetivo: separar Staphylococcus y Micrococcus (catalasa positivos) de los

gneros Streptococcus y Enterococcus (catalasa negativos).
Fundamento: la enzima catalasa descompone el perxido de hidrgeno (H2 O2 )
en agua y oxgeno bajo la frmula
2 H2 O2 ----2 H2 O + O2 .
De esta manera las bacterias se protegen del efecto txico del H2O2, que es un
producto final del metabolismo aerobio de los azcares.
Procedimiento: se coloca una gota de H2 O2 al 3% sobre un portaobjetos y luego
se transfiere una porcin de colonia sobre el H2 O2 realizndose una emulsin. En
lo posible debe tomarse la colonia a partir de un medio sin sangre, ya que los
eritro citos tienen actividad de catalasa y pueden falsear los resul tados. Esta
prueba tambin puede realizarse a partir de un cultivo en tubo, simplemente
colocando unas gotas de H2 O2 dentro del mismo.
Interpretacin de resultados: el desprendimiento de burbujas se considera una
prueba positiva.
Para diferenciar Staphylococcus de Micrococcus se realizan distintas pruebas
bioqumicas que se mencionan en la tabla 5. La lisostafina es una endopeptidasa
que cliva los puentes de pentaglicina presentes en la pared de lo estafilococos, por
eso el gnero Staphylococcus es sensible a su accin.

Dentro del gnero Staphylococcus existen tres especies que se consideran de

mayor importancia mdica: S. aureus, S. saprophyticus y S. epidermidis. Estas se
diferencian segn las pruebas bioqumicas que se detallan en la tabla 6.

2. PRUEBA DE LA COAGULASA

Objetivo: permite separar S. aureus, que posee coagulasa, de las otras especies
de estafilococos que genricamente se las denomina estafilococos coagulasa
negativos (ScoN).
Fundamento: S. aureus posee dos tipos de coagulasa:
a) Una endocoagulasa o coagulasa ligada o clumping factor, que est unida a la
pared celular. Esta acta directamen te sobre el fibringeno provocando la
formacin de cogu los o grumos cuando se mezcla una suspensin bacteriana
con plasma citratado (test en lmina).

b) Una exocoagulasa o coagulasa libre que acta mediante la activacin de un

factor srico (CRF), formndose un complejo coagulasa-CRF, el cual reacciona
con el fibringeno pro ducindose un cogulo de fibrina (test en tubo).
Mientras el test en tubo es definitivo, el test en lmina nos sirve como una rpida y
econmica tcnica de tamizaje (screening). Entre un 10 a 15% de las cepas de S.
aureus se mostrarn negativas en el test en lmina, por lo cual en esos casos se
hace necesario realizar un test en tubo.
Test en lmina
Procedimiento: se emulsionan sobre un portaobjetos una o ms colonias en una
gota de suero fisiolgico hasta formar una suspensin lechosa. Luego se agrega,
al lado, una gota de plasma citratado de conejo y se mezclan.
Interpretacin de resultados: debe realizarse dentro de los primeros diez
segundos. Un test positivo se evidencia por la formacin de grumos. Los test
negativos deben ser confirmados por test en tubo.
Test en tubo
Procedimiento: se emulsionan varias colonias en un tubo con 0,5 ml de plasma
citratado de conejo. Se incuba a 35 C y se chequea la formacin del cogulo a las
4 horas. Si es negativo se reincuba toda la noche y se procede a su lectura a las
18 horas. La lectura a las 4 horas es fundamental porque en alguna oportunidad
puede suceder que las fibrinolisinas de S. aureus lisen el cogulo luego de 18
horas de incubacin y de esta manera se produzcan un test falso negativo.
Interpretacin de resultados: se observa la formacin de un cogulo total o parcial
si el test es positivo.
3. AGLUTINACIN CON PARTCULAS DE LTEX

Objetivo: permite separar S. aureus de otras especies de estafilococos. Es un test

alternativo para detectar la presencia de la coagulasa y la protena A.

Fundamento: se utilizan partculas de ltex cubiertas con plasma. El fibringeno se

une al ltex y detecta el clumping factor. Adems, las inmunoglobulinas presentes
en las partculas detectan la protena A, capaz de unirse a la porcin Fc de la IgG.
Procedimiento: se trata de test comerciales por lo cual cada formulacin tiene su
procedimiento especfico. Generalmente se mezcla el reactivo del test con una
porcin de la colonia.
Interpretacin de resultados: la formacin de grumos indica un test positivo.
4. PRESENCIA DE DESOXIRRIBONUCLEASA (DNASA)

Objetivo: permite diferenciar S. aureus que posee DNAsa de otras especies del
gnero Staphylococcus.
Fundamento: se basa en la presencia de la enzima DNAsa que es capaz de clivar
los enlaces fosfodiester internos de la molcula de DNA. Se utiliza un medio slido
que contiene verde de metilo, el cual se combina con DNA altamente polimerizado.
Cuando la combinacin no ocurre, por accin de la enzima DNAsa, se produce
una decoloracin del medio. Existen otros tipos de medios de cultivo como el que
contiene azul de toluidina metacromtico en vez de verde de metilo.
Procedimiento: se siembra una colonia de estafilococo en forma de moneda en
una placa de medio slido que contiene DNA y verde de metilo. Se incuba 18
horas a 35 C.
Interpretacin de resultados: la formacin de un halo transpa rente alrededor de la
siembra indica presencia de DNAsa.
5. PRESENCIA DE NUCLEASA TERMOESTABLE

Objetivo: permite diferenciar S. aureus, que posee esta enzima, de otras especies
que no.
Fundamento: se basa en la presencia de nucleasa termoestable, que es una
enzima con propiedades endo y exonucleolticas y capaz de clivar DNA y RNA.
Existen varias formas de investigar la presencia de esta enzima. Se utilizan

cualquiera de los medios slidos mencionados en la prueba anterior pero en estos

se realizan hoyos de aproximadamente 3 mm de dimetro.
Procedimiento: cada hoyo se llena con un cultivo en caldo de la cepa en estudio,
que ha sido previamente llevado a 100 C por 15 minutos. Se incuba 18 horas a
35-37 C.
Interpretacin de resultados: se interpreta igual que la prueba anterior.
6. SUSCEPTIBILIDAD A LA NOVOBIOCINA

Objetivo: separar S. saprophyticus (resistente a la novobioci na) de los dems

estafilococos coagulasa negativos.
Fundamento: varias especies del gnero Staphylococcus son resistentes a la
novobiocina (disco de 5 g.) dentro de las cuales se encuentra S. saprophyticus.
Procedimiento: se siembra una placa de agar sangre o agar Mueller-Hinton como
si se fuera a realizar un antibiograma. Se utiliza un hisopo embebido en una
suspensin, con una turbidez equivalente a un Mc Farland 0,5, de la cepa a
estudiar. Luego se aplica el disco de novobiocina y se incuba a 35 C por 18
horas.
Interpretacin de resultados: un halo de inhibicin de creci miento menor o igual a
16 mm corresponde a S. saprophyticus. Un halo de inhibicin mayor de 16 mm
corresponde a otros estafilo cocos coagulasa negativos.

7. SISTEMAS DE IDENTIFICACIN COMERCIAL

Las pruebas anteriormente descritas se utilizan en forma manual pero existen

sistemas de identificacin comercial para identificar las especies dentro del gnero
Staphylococcus. Los kits comerciales disponibles utilizan, para la identificacin,
test de fermentacin de azcares modificados, adaptacin de test manuales
estndar y substratos enzimticos cromognicos. Estos sistemas de identificacin
son adaptados a un formato particular utilizado por el fabricante (por ej.: tira con
microcpulas, tarjetas plsticas, pequeas bandejas, etc.). Existen tambin

sistemas de identificacin a nivel molecular. Para S. aureus existen sondas

genticas para su deteccin rpida con un 100% de especificidad.

ANTIBIOGRAMA DE STAPHYLOCOCCUS EPIDERMIDIS

Se realiz una revisin retrospectiva de los registros microbiolgicos realizados de
raspados conjuntivales, obtenidos de forma consecutiva de la base de datos del
Departamento de Microbiologa y Protemica Ocular del Instituto de Oftalmologa
"Conde de Valenciana", de enero de 2011 a diciembre de 2011.
Las muestras de raspados conjuntivales se obtuvieron mediante la utilizacin de
un hisopo de algodn o dacrn (DuPont, Wilmington, DE), y fueron tomados del
fondo de saco conjuntival. Las muestras fueron sembradas en los siguientes
medios de cultivo:
Agar chocolate, agar sangre, sabouraud, tioglicolato, salmanitol e infusin cerebro
corazn (BHI). Todas las muestras fueron incubadas en 5% de CO 2, a 25C o 37C
por 24-72 horas.
Los cultivos fueron determinados como positivos cuando hubo crecimiento en la
lnea de inoculacin en al menos un medio slido. Se utiliz el sistema
automatizado VITEK Jr (bioMrieux, Mxico) para identificacin bacteriana y
sensibilidad antimicrobiana para 12 antibiticos: polimixina B (300 UI), oxacilina (1
g), neomicina (30 g), sulfametoxazol (200 g), vancomicina (30 g),
gentamicina (10 g), ciprofloxacino (5 g), ofloxacino (5 g), ceftriaxona (30 g),
cefazolina (30 g), ceftazidima (30 g) y tobramicina (10 g).
Los patrones de susceptibilidad se realizaron mediante el mtodo de difusin en
disco en agar, siguiendo los lineamientos del Clinical and Laboratory Standards
Institute (CLSI).7
El anlisis estadstico fue realizado con el software SPSS versin 17.0. Se realiz
estadstica descriptiva mediante la determinacin de frecuencias y proporciones.

1. RESULTADOS

Durante el periodo comprendido entre enero de 2011 a diciembre de 2011, 68

muestras de raspado conjuntival y secrecin conjuntival fueron recolectadas.
Todas las muestras se cultivaron. Estas muestras provinieron de 33 varones (49%)
y 35 mujeres (51%).
La edad promedio de los pacientes fue de 47.23 aos (rango 2-89 aos). El cultivo
fue positivo en 51 de las muestras tomadas (75%), identificndose 11 diferentes
microorganismos, sin reportarse infecciones polimicrobianas. El Staphylococcus
epidermidis fue el microorganismo que se cultiv con mayor frecuencia, seguido
de Staphylococcus aureus.
TABLA 1

En su conjunto, los estafilococos coagulasa negativos fueron sensibles

principalmente a vancomicina, ciprofloxacino y gentamicina, y fueron resistentes a
cefazolina, sulfametoxazol y la oxacilina (Tabla 1). Asimismo, el microorganismo
ms frecuente dentro de este grupo, el Staphylococcus epidermidis fue sensible a
vancomicina, ciprofloxacino y gentamicina, y resistente a cefazolina, oxacilina y
sulfametoxazol (Tabla 2). El 97% de los aislados de estafilococos coagulasa
negativos fueron resistentes a dos o ms antibiticos, encontrando que la
proporcin ms alta fue la multirresistencia a cinco o ms antibiticos (Tabla 3)

TABLA 2

TABLA 3

RESISTENCIA A LOS ANTIBITICOS

S. epidermidis adquiridas en el hospital a menudo muestran resistencia contra

muchos antimicrobianos en uso hoy en da, tales como la meticilina y
aminoglucsidos .
Acerca de 70-90% de todos los inconvenientes, tanto en Noruega y en el resto del
mundo son resistentes a la meticilina.
La meticilina resistencia en estafilococos est mediada por el gen mecA que
codifica una protena de unin a penicilina (PBP2a) con afinidad reducida para
todos los antibiticos betalactmicos.

El gen mecA es integrado en el elemento de SCCmec .

Resistencia a glucopptidos en S. epidermidis es siendo relativamente rara, y la
vancomicina es el frmaco de eleccin para los resistentes a la meticilina S.
epidermidis . Un aumento de la prevalencia de la resistencia a los antibiticos en
S. epidermidis es en parte debido al creciente uso de antibiticos de amplio
espectro, que animan a la seleccin de cepas multirresistentes.

III.

CONCLUSIONES

1. El S. epidermidis y otros estafilococos coagulasa negativos representan los

mayores componentes de la microflora de la piel y mucosa humana. A
pesar de su alta frecuencia como contaminante, el S. epidermidis se ha
convertido en un importante patgeno nosocomial, en parte probablemente
debido al uso incrementado de dispositivos mdicos como catteres
endovenosos de permanencia prolongada, injertos vasculares, vlvulas
cardiacas y articulaciones protsicas, representando el 24% de los
patgenos nosocomiales encontrados en la sangre.
2. Los pacientes neutropnicos e immunosuprimidos, as como los portadores
de catteres endovenosos o dispositivos protsicos son los que se
encuentran en los grupos de mayor riesgo. En un estudio de infecciones
postoperatorias despus de injertos seos, el mayor nmero de infecciones
del lecho operatorio fueron causadas por S. epidermidis, y el 30% de los
pacientes con estas infecciones no tenan comorbilidad ni presentaban
factores predisponentes que podan ser correlacionados estadsticamente
con un riesgo incrementado de infeccin.
3. A diferencia del S. aureus, se conoce poco sobre el mecanismo de
patognesis del S. epidermidis. Sin embargo, se reconoce como
caracterstica de muchas cepas la formacin de un biofilm fabricado en
base al cido teicoico, el cual normalmente forma parte de la pared del
estafilococo. Esta capa los protege de la accin de los neutrfilos y a su vez
disminuye la penetracin de los antibiticos.

4. Las manifestaciones clnicas de las infecciones causadas por S.

epidermidis difieren marcadamente de aquellas causadas por el S. aureus.
Los sntomas suelen ser sutiles e inespecficos; y el curso clnico es ms
subagudo e incluso crnico, sin signos fulminantes de infeccin, como fue
el caso descrito, ya que el paciente siempre presento buen estado general,
no luciendo txico. Tambin se describen casos de sepsis severa franca,
especialmente en pacientes inmunosuprimidos
5. El S. epidermidis, dado que es un microorganismo de transmisin
nosocomial, tiene una alta tasa de resistencia a mltiples antibioticos. Cerca
del 90% producen beta lactamasas, mientras que 60% al 80% son
resistentes a la meticilina. Adems, stas bacterias suelen ser resistentes a
macrlidos, lincosaminas, aminoglicsidos y fluoroquinolonas. El frmaco
de eleccin es la vancomicina y la duracin del tratamiento varia de
acuerdo al tipo de infeccin. Se han descrito en Estados Unidos cepas con
sensibilidad disminuida a la vancomicina, por lo que la emergencia de
resistencia a los glicopptidos mostrada por el S. epidermidis se convertira
en un serio problema de salud publica. Si existen dispositivos mdicos
involucrados en el proceso infeccioso, se proceder al retiro de stos,
cuando sea posible. El paciente evolucion clnicamente en forma muy
favorable despus de iniciado el tratamiento con vancomicina, no
presentando complicaciones durante la administracin de sta.

IV.

ANEXOS

V.

BIBLIOGRAFIA

Staphylococcus epidermidis - virulence factors and innate immune response .

(2008). UNIVERSITY OF TROMSO, 29-43.
(2013). Etiopatogenia microbiolgica. En TEMAS DE BACTERIOLOGA Y
VIROLOGA MDICA (pgs. 257- 271).
Chirinos-Saldaa, P. (2012). Perfil microbiolgico y sensibilidad a antibiticos de
microorganismos aislados de infecciones conjuntivalesen el Instituto de
Oftalmologa Fundacin Conde de Valenciana. REVISTA MEXICANA DE
OFTALMOLOGA, 1-8.
GARCIA APAC Coralith*, P. V. (2003). Bacteremia por Staphylococcus
epidermidis y abceso de partes blandas en un paciente postoperado:
reporte de un caso. Med Hered, 1-3.
Mara Elena Moreno-Gonzlez, E. R.-G. (2007). Staphylococcus epidermidis.
REVISTA MEDICA DEL HOSPITAL GENERAL DE MEXICO, S.S., 1-6.