Professional Documents
Culture Documents
,2002,24(2):111-125
Klumb C.E. et al
Reviso / Review
Avaliao dos mtodos de deteco das alteraes do gene e protena P53 nas
neoplasias linfides
1
Claudete E. Klumb
2
Geraldo B. Cavalcanti Jnior
Introduo
1 - Mdica Hematologista. Lab. de Hematologia Celular e Molecular/ Servio de Hematologia. Hospital do Cncer/
Instituto Nacional de Cncer. Doutoranda e estagiria do Lab. de Bioqumica e Biologia Molecular do Squistosoma
Mansoni / Depto de Bioqumica Mdica da UFRJ
2 - Professor Assistente da Disciplina de Imunologia Clnica do Depto de Anlises Clnicas e Toxicolgicas da UFRN.
Doutorando e estagirio do Lab. de Hematologia Celular e Molecular/ Servio de Hematologia Hospital do Cncer/
Instituto Nacional de Cncer
Correspondncia para: Claudete E. Klumb
Praa da Cruz Vermelha, 23 Centro. Rio de Janeiro/RJ - Brasil - CEP 20230-130
Telefone: (21) 506-6198 E-mail: klumb@uol.com.br
111
Klumb C.E. et al
Rev.bras.hematol.hemoter.,2002,24(2):111-125
Figura 1. Heterogeneidade das vias de sinalizao utilizadas pela protena p53 em seu papel de guardi
do genoma
112
Rev.bras.hematol.hemoter.,2002,24(2):111-125
Klumb C.E. et al
113
Klumb C.E. et al
Rev.bras.hematol.hemoter.,2002,24(2):111-125
PCR-Heteroduplex
Seqenciamento
114
Rev.bras.hematol.hemoter.,2002,24(2):111-125
Klumb C.E. et al
Imunohistoquimica
Figura 3. Mutao no codon 248 (Exon 7) do gene p53 em um caso de linfoma de Burkitt. a) PCR-SSCP
mostrando alterao de migrao indicativa de mutao (seta); b-1 e b-2) Seqenciamento das fitas
sense e antisense respectivamente, mostrando a troca do nucleotdeo guanina por timina e conseqente
substituio do aminocido arginina por serina
(Resultados dos autores)
115
Klumb C.E. et al
Rev.bras.hematol.hemoter.,2002,24(2):111-125
Figura 4. Estabilizao da protena p53 por mutao e deteco imunohistoqumica com Ac Mo antip53 DO-7 no mesmo paciente com Linfoma de Burkitt ilustrado na figura 2.
Cortesia: Dra Lidia Magalhes Cordeiro de Resende
Imunocitoqumica (ICQ)
Citometria de fluxo
116
Rev.bras.hematol.hemoter.,2002,24(2):111-125
Klumb C.E. et al
Western Blot
O western blotpara deteco da p53, embora
seja um mtodo de alta especificidade e
sensibilidade, pouco utilizado. Este mtodo alm
de demorado, tem muitas etapas que dificultam
sua aplicao principalmente em um nmero
grande de amostras (35).
Discusso
p53 e neoplasias linfides
117
Klumb C.E. et al
Rev.bras.hematol.hemoter.,2002,24(2):111-125
Tabela 1. Sumrio dos resultados da pesquisa de mutaes do gene p53 por PCR-SSCP
e seqenciamento em linfoma no Hodgkin
Referncia
N
pacientes
Tipo
Histolgico
Estgio
Tratamento
Anlise
Multivariada
Koduru et al.46
237
L. Clulas B
baixo e alto grau
NR
NR
NR
Ichikawa
43
Et al.
102
L. Difuso de
grandes clulas B
Todos
QT
Hernandez
40
Et al.
43
L. Clulas do manto
III e IV
QT
Greiner et al.41
53
L. Clulas do manto
NR
NR
Louie et al.42
23
L. Clulas do manto
NR
QT ou
QT + RT
Preudhomme
Et al.44
48
L. Burkitt/ LLAL3
Todos
QT
NS
S
Gutierrez
Et al.45
21
L. Burkitt-like e L.
alto grau B
II e III
QT
118
Rev.bras.hematol.hemoter.,2002,24(2):111-125
Klumb C.E. et al
59
Sanchez et al
60
Navaratnam
58
Et al.
Pires et al
66
Moller et al
67
Korkolopoulou
65
et al
Pagnano et al
72
Adamson et al
57
Hernandez
40
et al
Louie et al
42
Greiner et al
41
Cordone et al
31
Brito-Babapulle
62
et al
Classificao
Tratamento
IH/ICQ
(%)
372
LNH difuso de
grandes clulas
QT
17%
141
LNH difuso de
grandes clulas
QT, RT ou
QT/RT
30%
50
LNH difuso de
grandes clulas
QT
40%
119
LNH difuso de
grandes clulas
QT, RT
ou QT/RT
26%
199
LNH Baixo e
alto grau, B e T
QT, RT
ou QT/RT
21%
91
QT, RT
QT/RT
47%
61
LNH difuso de
grandes clulas,
T perifrico
QT
30%
38
LNH Baixo e
alto grau
NA
4%
43
Linfoma do manto
QT
2%
23
Linfoma do manto
QT ou
QT/RT
22%
53
Linfoma do manto
NA
13%
181
LLC
QT
15% *
24
Leucemia
prolinfoctica T
e Sindrome de Szary
NA
63% *
Anlise
Estatstica
NS
NS
NA
S
S
NA
119
Klumb C.E. et al
Rev.bras.hematol.hemoter.,2002,24(2):111-125
120
Rev.bras.hematol.hemoter.,2002,24(2):111-125
Klumb C.E. et al
Abstract
Referncias Bibliogrficas
121
Klumb C.E. et al
Rev.bras.hematol.hemoter.,2002,24(2):111-125
122
Rev.bras.hematol.hemoter.,2002,24(2):111-125
Klumb C.E. et al
123
Klumb C.E. et al
Rev.bras.hematol.hemoter.,2002,24(2):111-125
124
62.
63.
64.
65.
66.
67.
68.
69.
70.
Rev.bras.hematol.hemoter.,2002,24(2):111-125
71.
72.
73.
74.
Klumb C.E. et al
125
Agradecimentos
As ilustraes deste trabalho foram
resultado dos estudos realizados no Laboratrio
de Hematologia Celular e Molecular / Servio
de Hematologia do Hospital do Cncer e
Laboratrio de Bioqumica e Biologia Molecular
do Departamento de Bioqumica Mdica da
Universidade Federal do Rio de Janeiro.
Agradecemos a Dra Raquel C. Maia pela reviso
do texto e anlise crtica deste estudo e ao
Professor Franklin David Rumjanek pela
orientao nos experimentos na rea de biologia
molecular.
Recebido 04/02/2002
Aceito 28/04/2002