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MICRORGANISMOS PRODUCTORES DE ETANOL Y SUS CARACTERSTICAS MICROBIANAS:

Caractersticas de la levadura vnica de la especie Saccharomyces Cereviciae:

Morfologa elptica u ovoide


Alta capacidad fermentativa
Formadora de esporas (ascosporas con 4 esporas)
No asimila nitratos ni escinde arbutina
Crecimiento en presencia de etanol
Fermenta y asimila glucosa, galactosa, maltosa, sacarosa y rafinosa.
No fermenta ni asimila lactosa
Hidroliza la sacarosa de la caa de azcar para su conversin hasta glucosa y
fructosa, dos hexosas fcilmente asimilables.
Convierte hexosas como la glucosa o la fructosa en alcohol etlico en condiciones
anaerbicas (metabolismo fermentativo).
Puede manifestar un metabolismo de tipo respiratorio en condiciones aerbicas
lo que se traduce en un mayor rendimiento energtico que conlleva a un mayor
crecimiento de biomasa celular. (base para la produccin industrial de levaduras
de panificacin.)
Puede crecer en condiciones anaerbicas, se requieren pequeas cantidades de
oxgeno para la sntesis de sustancias como cidos grasos y esteroles. El oxgeno
tambin se puede suministrar al medio adicionando algunas sustancias como el
perxido de carbamida que adems reduce la presencia de bacterias
contaminantes, procedimiento que ha sido patentado.
En el caso de cultivos continuos, la inhibicin del crecimiento celular por etanol
disminuye en condiciones microaeroflicas (bajas concentraciones de oxgeno
disuelto en el caldo de cultivo) en comparacin con condiciones completamente
anaerbicas. S. cerevisiae tiene la ventaja de presentar una tolerancia al etanol
relativamente alta en comparacin con otras levaduras o bacterias la cual puede
llegar a 150 g/L de alcohol.
Emplea la ruta de Embden-Meyerhoff-Parnas (es decir, la va glucoltica)
formando dos molculas de ATP.

Caractersticas de la levadura vnica de la especie Schizosaccharomyces pombe:

Morfologa : Clulas alargada o cilndricasaisladas o en parejas (3-5 X 6-16) m


Divisin por fisin
Esporulada
No asimila nitratos ni escinde la arbutina
Buena capacidad fermentativa
Capacidad para degradar cido mlico a etanol y CO2 (fermentacin
maloalcohlica)
Tolera altas presiones osmticas (alto contenido de sales en el medio de cultivo)
y contenidos elevados de slidos. De hecho, se ha patentado un proceso de
fermentacin que emplea una cepa silvestre de esta levadura.

Algunas bacterias tienen la capacidad de producir etanol en cantidades significativas para su potencial
aplicacin industrial.
Caractersticas de la bacteria gram-negativa Zymomonas mobilis:

Bastn gramnegativo de 1 a 5 m de ancho y de 2 a 6 m de largo.

Inmvil o mvil debido a la presencia de 1 a 4 flagelos loftricos.


Arreglo celularpleomrfico (cadenas, rosetas, filamentos).
Ausencia de esporas, de cpsulas y de constituyentes de almacenamiento
celular.
Catalasa positiva y oxidasa negativa.
Anaerbico y microaeroflico.
La utilizacin de sacarosa es inducible y puede ir acompaada de informacin de
levanas.
Las nicas fuentes de carbono que metaboliza son: glucosa, fructosa y sacarosa.
Es anaerobio facultativo y presenta mayores rendimientos de etanol que las levaduras lo que est
relacionado con las rutas metablicas involucradas en su obtencin.
Usa la ruta de EntnerDeudoroff que convierte una molcula de glucosa en dos de etanol pero
formando slo una molcula de ATP.
Esta bacteria tiene una fermentacin ms rpida debido a su mayor velocidad de produccin de etanol
(3 a 5 veces ms alta que en S. cerevisiae) y de consumo de sustrato.
Otra ventaja importante de este microorganismo es que presenta una tolerancia alta al etanol, lo cual
es una propiedad virtualmente nica entre las bacterias.
Esta bacteria no requiere una adicin controlada de oxgeno y es mucho ms susceptible a las
manipulaciones genticas para aumentar su rendimiento o conferirle nuevas propiedades que las
levaduras.
En la produccin de etanol limita el rango de sustratos fermentables (glucosa, fructosa, sacarosa) y su
cultivo en jugo o melazas de caa conlleva a la formacin del polisacrido levano, un polmero
conformado por unidades de fructosa, y de sorbitol, un producto de la reduccin de la fructosa, lo que
hace disminuir los rendimientos a etanol. Adems, la presencia de levano en el caldo de cultivo
incrementa su viscosidad.

Uno de los principales problemas en la produccin de etanol a partir de biomasa lignocelulsica es que S.
cerevisiae y Z. mobilis slo pueden fermentar ciertos mono y disacridos como la glucosa, la fructosa, la
maltosa y la sacarosa. Sin embargo estos microorganismos no tienen la capacidad natural de asimilar ni la
celulosa o la hemicelulosa directamente. Adems no asimilan tampoco las pentosas que se obtienen durante el
pretratamiento de los materiales lignocelulsicos como resultado de la hidrlisis de la hemicelulosa
(principalmente xilosa, aunque tambin arabinosa). Por esta razn se ha propuesto la utilizacin de
microorganismos que fermenten tambin estas pentosas como algunas especies de levaduras.
Entre las levaduras ms estudiadas para la produccin de etanol a partir de biomasa lignocelulsica que tengan
esta capacidad de asimilar pentosas y hexosas se cuentan:
Caractersticas de las levaduras Pichia stipitis, Candida shehatae, Pachysolen tannophilus:

El cultivo de estas levaduras requiere por tanto un cuidadoso control para garantizar bajos niveles de
oxgeno en el medio necesarios para el metabolismo respiratorio oxidativo.
Como regla, este tipo de microorganismos prefiere la glucosa sobre la galactosa seguida de la xilosa y
la arabinosa, lo que se explica por la represin catablica que ejerce la glucosa sobre la velocidad de
consumo de xilosa y de otras pentosas como en el caso de C. shehatae.
Adicionalmente, la productividad de etanol alcanzada con levaduras asimiladoras de pentosas es
menor que la de los microorganismos que slo fermentan hexosas.
La tolerancia de estas levaduras al etanol es reducida comparada con la de S.cerevisiae.
La mayora de las levaduras que asimilan pentosas son mesfilas, es decir, se cultivan a temperaturas
cercanas a los 30C, como en el caso de S. cerevisiae, aunque existen reportes de la levadura
metilotrfica Hansenula polymorpha cultivada a 37C en un medio que contena xilosa.

Otro grupo de microorganismos que estn siendo investigados para la implementacin de procesos de
conversin directa de biomasa lignocelulsica en etanol son los clostridios termfilos y sacarolticos entre los
que se destacan Clostridium thermohydrosulfuricum, Thermoanaerobacter (antes llamado Clostridium)
thermosaccharolyticum, C. thermocellum y C. cellulolyticum, los cuales pueden sintetizar hasta dos moles de
etanol por cada mol de hexosa consumida. Adems, algunas de estas bacterias pueden transformar pentosas y
aminocidos en etanol.

Pueden sintetizar sus propias enzimas celulolticas con el fin de degradar la celulosa contenida en los
materiales lignocelulsicos. Esto hace que el rango de sustancias en las que estas bacterias se pueden
cultivar sea muy amplio, en especial en el caso de residuos agroindustriales. De esta manera se puede
obtener etanol directamente de la biomasa lignocelulsica pretratada sin necesidad de adicionar las
costosas celulasas. Adicionalmente, el cultivo de estos microorganismos a elevadas temperaturas
ofrece la posibilidad de una remocin ms fcil del etanol y la reduccin de los gastos de
enfriamiento.
El clostridio termfilo ms estudiado para la produccin de etanol ha sido C. thermocellum que tiene
la capacidad de producir celulasas, hidrolizar la celulosa y fermentar la glucosa formando alcohol
etlico.
El T. thermosaccharolyticum para la obtencin de etanol a partir de pentosas resultantes de la
degradacin de la hemicelulosa durante el pretratamiento de la biomasa.
Los clostridios tienen una baja tolerancia al etanol en comparacin con las levaduras,
Los clostridios tienen un rendimiento reducido de etanol debido a la formacin de cido actico y
lactato lo que hace que las concentraciones finales de etanol sean bajas y que los tiempos de cultivos
sean muy grandes (3-12 das).

http://mediorural.xunta.gal/fileadmin/arquivos/investigacion/transferencia_tecnoloxica/c
alidademb.pdf

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