4

Fecundacin in vitro
Hugo Hernndez Fonseca, MV, MSc, PhD
Ctedra de Fisiologa Animal, Departamento de Biologa Animal
Facultad de Ciencias Veterinarias. Universidad del Zulia.
Maracaibo-Venezuela ~ hjhernan@cantv.net

El fenmeno o proceso a travs del cual el espermatozoide o clula masculina es

capaz de unirse y penetrar la clula femenina u vulo para formar un nuevo individuo
bajo condiciones de laboratorio (fuera del organismo animal) se conoce como fecundacinin vitro (FIV). La habilidad de imitar exitosamente este proceso biolgico en el
laboratorio esta basada en aos de estudio y experimentacin. En la actualidad, luego de
la produccin de Virgilio (primer becerro in vitro del mundo en EEUU por el equi-po de
Benjamn Brackett en 1981) y a 4 aos de los primeros becerros in vitro nacidos en
Venezuela logrados por el equipo de Hugo Hernndez, podemos afirmar que han
existido suficientes experiencias experimentales, a campo y comerciales, que permi-ten
al FIV comenzar a asistir al productor agropecuario en la difcil tarea de incre-mentar la
produccin de protenas de origen animal.
La fecundacin in vitro permite que el semen del toro o sementales de casi cualquier especie domstica, pueda penetrar y fecundar el vulo de la vaca u otra hembra. El
semen del toro debe ser preparado al igual que el vulo de la vaca para que ocurra la
fecundacin dentro de envases plsticos estriles (placas de petri) en el laboratorio. Los
embriones resultantes permanecen embebidos en medios de cultivo lquidos enriquecidos con nutrientes que el embrin necesita para desarrollarse y crecer. Debe-mos
entender que el producto de estas fecundaciones en el laboratorio es un conceptus o
embrin que permanecer en la placa de petri por 7 a 8 das, antes de ser utilizado
(congelado, transferido, desechado o estudiado).
En los actuales momentos, no existe la tecnologa suficiente para lograr la capacidad de mantener el embrin en condiciones in vitro ideales como para permitir al
embrin que se desarrolle hasta que este se convierta en feto o en un becerro. De manera tal, que esta tecnologa solo nos permite ejercer un control sobre las condiciones de
formacin, crecimiento y desarrollo de embriones bovinos durante la primera se-

616 / Hugo Hernndez Fonseca

mana de vida, donde se han comprobado signos de viabilidad de este embrin antes de
transferirlo a una vaca. La FIV nos permite adems, masificar el proceso de pro-duccin
de embriones (200-400 embriones/semana/tcnico). La FIV fcilmente se acopla a otras
tecnologas como la aspiracin de vulos de vacas seleccionadas (OPU), para de esa
forma, multiplicar los beneficios en cuanto a la calidad gentica de los em-briones
obtenidos.

ETAPAS DE LA FIV
La FIV comprende tres etapas:
1. Maduracin del vulo o gameto femenino.
2. Fecundacin propiamente dicha.
3. Cultivo embrionario
Maduracin. Consiste en propiciar la progresin en el desarrollo del vulo de la
vaca o novilla, una vez obtenido de ovarios de matadero o animales vivos por aspiracin transvaginal. Esto se logra colocando estos vulos en medios enriquecidos y suplementados con hormonas, como la hormona folculo estimulante (FSH), la hormona
luteinizante (LH) o los estrgenos (E ) durante un periodo de 24 horas.
Fecundacin. Consiste en incubar los vulos madurados (producto de la fase
anterior) con espermatozoides vivos y mviles durante un periodo de 6 a 24 horas, luego
de un proceso de seleccin y capacitacin espermtica que nos permitir a su vez de
deshacernos de componentes del plasma seminal, crioprotectores y espermato-zoides
muertos o con escasa vitalidad. La capacitacin espermtica generalmente se logra
exponiendo los espermatozoides vivos a concentraciones de heparina y cafena, entre
otras. Estas sustancias logran estimular el proceso de capacitacin del esperma-tozoide
que lo prepara para interaccionar y fecundar el vulo.
Cultivo. Aquellos embriones de 4 o ms clulas resultantes de la FIV son cambiados del medio de fecundacin a un medio de cultivo embrionario donde los embriones continan su divisin celular a 8, 16 y 32 clulas hasta llegar a mrulas y
blastocistos. Al llegar a estos estadios, los embriones pueden ser transferidos a vacas
receptoras (en fresco) o congelados para su posterior uso. Durante esta etapa destacan la
presencia en el medio de cultivo de diversas fuentes de energa como la glucosa y
aminocidos esenciales y no esenciales.

APLICABILIDAD DE LA FECUNDACIN IN VITRO EN LA GANADERA

El establecimiento y la adopcin de una nueva tecnologa en nuestros sistemas de
produccin bovina de leche y carne estarn probablemente determinados por la
existencia de condiciones y prerrequisitos, entre los cuales se contaran los siguientes:
Tecnologa Eficiente. La FIV ha venido superando obstculos desde los aos 70.
Hoy da por cada 100 vulos colocados a madurar se puede esperar
que ms del 90% alcance el estadio de Metafase II o estadio en el que
puede ser fecundado por el es-permatozoide. De esos maduran ms
de 90 vulos para luego de la fecundacin inicia-

Manual de Ganadera Doble Propsito. 2005

Fecundacin in vitro

/ 617

rn su divisin celular aproximadamente de 50 a 70 vulos. De estos vulos fecundados,

20 a 40 llegan a ser embriones (blastocistos) transferibles.
Costos por debajo de ingresos. La FIV garantizara bajos costos en la medida que
el nmero de vulos sea alto, constante y de apropiado valor gentico, de manera de
masificar la produccin de embriones por semana (400 embriones/tcnico). La
combinacin de FIV con otras tecnologas como el sexaje de embriones, semen sexa-do,
ICSI (inyeccin intracitoplasmtica de espermatozoides) o la aspiracin transva-ginal de
vulos aunque aumentan los costos, en general, incrementar mucho ms el valor del
embrin producido.
Tcnica probada bajo condiciones comerciales. Aun cuando la FIV no se aplica
ampliamente a nivel mundial (slo el 7% de los embriones transferidos son pro-ducidos
in vitro), ha demostrado ser comercialmente aplicable en pases como Canad y Brasil.
Simplicidad en su aplicacin. La aplicacin de la FIV no impone exigencias
adicionales sobre el sistema de produccin diferente a las exigidas por otras tecnolo-gas
como la inseminacin artificial y la transferencia embrionaria.
Flexibilidad para insertarse en el sistema. La produccin in vitro de embrio-nes
se podra llevar a cabo usando vulos provenientes de ovarios de matadero, de vulos
aspirados de animales lite sin necesidad de sacrificarlos o con vulos adquiri-dos a
empresas especializadas a nivel mundial. Los espermatozoides pueden provenir de
semen fresco o congelado. La FIV puede producir embriones con gametos de cual-quier
raza y suele obedecer la seleccin del productor.
Accesibilidad de equipos, asesoramiento tcnico y repuestos. Todos los equipos
y reactivos utilizados en FIV son normalmente utilizados en laboratorios cl-nicos y de
investigacin, y aunque no son normalmente producidos en el pas, si pue-den ser
adquiridos a travs de representaciones locales.
Publicidad y Educacin. Es vital que el potencial usuario y la comunidad don-de
ha de insertarse conozcan las expectativas reales de su aplicacin.

BENEFICIOS DE LA APLICACIN DE FIV

Los beneficios de alguna tecnologa siempre deben cuantificarse econmica-mente
cuando se aspira que la misma tenga impacto en la ganadera nacional, aspecto
este que en ocasiones los investigadores olvidan y que termina perjudi-cndolos
con las dificultades para la consecucin de fondos para la investiga-cin cientfica.
Sin embargo, cuando se habla del aspecto econmico no necesariamente hay que
referirse a la inversin inicial, sino a los flujos de caja a ser generados en los aos
subsiguientes.

La FIV posee nichos de aplicacin donde su xito ser ms probable. Por supuesto, que las empresas agropecuarias o fincas donde ya se aplique alguna otra
tecnologa como la inseminacin artificial o se lleve un control reproductivo
confiable, y exista a la vez una gerencia entusiasta y comprometida con el proceso productivo, probablemente constituyan lugares apropiados para la aplicacin de
esta tecnologa.

618 / Hugo Hernndez Fonseca

La FIV realmente no tiene exigencias adicionales a las establecidas por la IA o la

Transferencia Embrionaria (TE), dado que el embrin in vitro se realiza en un

laboratorio de FIV y slo se lleva el embrin a la finca dentro de una pajuela
idntica a las usadas para semen. Este embrin ser almacenado en tanques de
nitrgeno lquido igual que el semen.
En conclusin, podemos sealar que la fecundacin in vitro (FIV):

Constituye una tecnologa que abre las puertas a la produccin masiva de em-

briones bovinos doble propsito, sin mayores exigencias sobre el sistema

productivo mejorado, actualmente en funcionamiento.

Se apoya sobre tecnologas ya utilizadas en nuestro entorno (como por ejem-plo: la

transferencia embrionaria, y el procesamiento y congelacin de se-men), lo cual
resulta ventajoso porque se aprovecha la infraestructura ya existente, as como el
personal especializado y la familiaridad del productor con la tecnologa.
Igualmente, la FIV puede perfectamente apoyarse en nue-vas tecnologas que sern
aplicadas en el futuro, como el sexaje de semen y de embriones, para imprimir un
mayor valor comercial a los embriones produ-cidos.

GLOSARIO
Gameto: Clula sexual femenina (vulo) o masculina (espermatozoide) que
unidas forman un nuevo individuo de la especie (zigoto o embrin).

vulo: Gameto o clula sexual femenina encontrada en pequeas vesculas o folculos a nivel de la corteza de los ovarios de las vacas y dems especies.

Espermatozoide: Gameto o clula sexual masculina producida a nivel de los

testculos del macho y que junto con el plasma seminal forman parte del eyaculado.

Capacitacin Espermtica: Proceso de alteracin de las membranas del espermatozoide que lo preparan para fertilizar un vulo.

Heparina: Glicosaminoglicano utilizado para inducir la capacitacin del espermatozoide.

Fecundacin: Unin y penetracin del vulo por parte del espermatozoide para
dar origen a un nuevo ser.

Embrin: Ser vivo en las primeras etapas del desarrollo desde la fecundacin
hasta que adquiere las caractersticas morfolgicas de la especie.

Blastocisto: Embrin que ha formado una cavidad llena de lquido conocida como
el blastocele, la cual constituye una etapa crucial del normal desarrollo. Esta etapa
es corta y transitoria que generalmente ocurre entre el da 6 y 9 en caso de las
vacas.

Aspiracin transvaginal de vulos: Aspiracin del contenido de

folculos ov-ricos a travs de la pared de la vagina con el fin de
recoger vulos de animales vi-vos.

Manual de Ganadera Doble Propsito. 2005

Fecundacin in vitro

/ 619

OPU. Abreviatura utilizada para denominar el procedimiento anterior de aspi-

racin transvaginal de vulos (Ovum Pick Up). Estos vulos pueden ser fecundados mediante FIV.

ICSI: Colocacin mecnica de un espermatozoide dentro del citoplasma de un

vulo (Inyeccin Intracitoplasmatica de espermatozoides, del ingls: IntraCytoplasmic Sperm Injection).

Medio de Cultivo: En el caso de FIV, el medio es generalmente lquido y con-

tiene todos aquellos nutrientes (aminocidos, protenas, cidos grasos, carbohidratos, vitaminas, buffer, y sales) que el embrin requiere para su normal
desarrollo.

LECTURAS RECOMENDADAS
Hernndez H. Fertilizacin in vitro. En: Reproduccin Bovina. C. Gonzlez-Stagnaro (ed).
Fundacin GIRARZ, Maracaibo-Venezuela. Cap. XXVI: 411-426. 2001.
Tanaka H, Ballarales P, Masaka J, Kanaga H. Teora y practica de la fecundacin in vi-tro.
Agencia de Cooperacin Internacional de Japon Chile, 190 pp. 1997.
Palma G. Produccin in vitro de embriones bovinos. En: Biotecnologa de la Reproduccin. G. Palma (Ed), p 225-289. 2001.

IN VITRO

'

"

!
!

# $%

'( ) *

++$

& "