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INDICE
1. GENERALIDADES
2. REPLICACIN
2.1 REPLICACIN THETA
2.2 REPLICACIN POR DESPLAZAMIENTO DE HEBRAS
2.3 REPLICACIN RC (ROLLING CIRCLE)
3. SISTEMAS DE PARTICIN
4. CONJUGACIN
5. CLASIFICACIN
1. Generalidades
Son molculas circulares de ADN de doble cadena que
se encuentran naturalmente todos los tipos de bacterias
estudiadas hasta la fecha. Se han hallado tanto en
bacterias Gram positivas como Gram negativas, as como
en levaduras y algn otro tipo de hongo. Pueden alcanzar
hasta el 10% del material gentico celular total.
Estos elementos genticos son extracromosomales, se
replican de manera independiente del cromosoma
bacteriano y dependiendo del tamao de estos pueden
codificar desde unas cuantas protenas hasta unos
cientos. Sin embargo raramente codifican productos
esenciales para el crecimiento celular, tales como el ARN polimerasa o enzimas del ciclo
de los cidos tricarboxlicos.
Los estudios indican que los plsmidos estn asociados con protenas de la membrana
plasmtica. Suelen contener entre 5 y 100 genes que en condiciones ambientales
normales no son indispensables para la supervivencia de la
bacteria. En ciertas condiciones los plsmidos presentan una
ventaja para la clula porque pueden aportar informacin gentica
relacionada con diversas actividades celulares.
BACs
YACs
Algunas caractersticas
Origen de ColE1, bla, tet
seleccin de recombinantes por
color
Vector de expresin; purificacin Origen de pBR322, bla, trc
de protenas recombinantes
Promotor, histidinas, pptido
seal
Generacin de plantas
Contiene los bordes del T-DNA
transgnicas; transformacin con del plsmido Ti y secuencias de
A. tumefaciens
pBR322
Plsmido conjugativo
Ori T, tra, eex
Plsmido multifuncional con
Plsmido:, tet, tnp; Transposn:
caractersticas de transposn,
origen de ColE1, cat (sin promotor),
para mutagnesis, identificacin
neo, regin Mob
de promotores y conjugacin
Plsmidos con elementos del
BAC's: OriS, repE, parA,B y C
cromosoma para conferir
YAC's: Ori, ARS1, Amp, TRP1,
estabilidad mittica en bacterias
CEN4
(BAC) y levaduras (YAC)
2. Replicacin
Un sistema sencillo de clasificacin de los plsmidos consiste en determinar si su
replicacin se encuentra sometida a un control restringido o relajado. Los plsmidos
sometidos a control restringido (como el pSC101 y derivados) se encuentran en pequeo
nmero en clulas en crecimiento activo, mientras que los de control relajado (ColE1 y
derivados) pueden encontrarse en gran nmero.
Los plsmidos que pueden replicarse de forma autnoma, se les ha denominado
replicones, es decir, estructuras de cidos nucleicos con capacidad de autorreplicacin, al
igual que los los cromosomas y el ADN de los fagos. Los plsmidos que no poseen esta
capacidad y que se integran de forma reversible en el cromosoma bacteriano para
replicarse bajo su control, se les denominan episomas.
El inicio de la replicacin de un plsmido es un proceso especfico, y de vital importancia
para su herencia, para el nmero de copias en el interior celular y para las propiedades de
incompatibilidad plasmdica.
Tipos de replicacin
Hay tres tipos de mecanismos bsicos de replicacin para los plsmidos circulares:
1) replicacin (theta)
2) replicacin por desplazamiento de hebras
3) replicacin RollingCircle (RC)
Cada tipo de plsmido se replica por uno de estos mecanismos, lo cual viene determinado
junto a otras propiedades, por los genes localizados en una regin especfica y esencial
para el plsmido que se encarga del proceso de replicacin y su control. Dentro de esta
regin esencial se agrupan genes y secuencias fundamentales, como son:
3. Sistemas de particin
La forma de evitar la prdida del plsmido en la herencia vertical es responsabilidad de
los sistemas de particin. Estos sistemas se aseguran de que al menos una copia vaya en
cada clula hija por cada ciclo celular. Por el simple hecho de que una clula se divida en
dos, no implica que se repartan equitativamente las copias que contenga de un plsmido
determinado.
Los sistemas de particin requieren de tres elementos:
a. Una serie de secuencias cis repetidas, a modo de centrmero, llamadas
genricamente parS
b. El gen de una ATPasa: parA
c. El gen de la protena que se une al centrmero: parB
Estas dos ltimas protenas se unen en el sitio parS formando un complejo ncleoproteico. El ParB se une al sitio. Este complejo se puede agrandar gracias a la unin no
especfica de ms molculas ParB al ADN de alrededor. Las ATPasas ParA reconocen su
plsmido interactuando especficamente con ParB en el complejo. Ese hecho provoca que
ParA forme uniones metaestables que empujan cada copia hacia uno de los polos,
quedando situados en regiones celulares concretas.
4. Conjugacin
Permite la transferencia de ADN entre diferentes clulas, a diferencia de la transformacin
que es una captacin exgena de ADN del entorno. Tanto la conjugacin como la
transformacin, implican el transporte de ADN monocatenario a travs de una o ms
5.Clasificacin
En funcin de la caracterstica a la que se atienda, los plsmidos pueden clasificarse de
diversos modos:
Segn el sistema de replicacin y segregacin de copias, se pueden clasificar por
grupos de incompatibilidad.
Segn el fenotipo que codifiquen, hablamos de plsmidos de resistencia si portan
genes de resistencia a antibiticos y metales pesados (Plsmidos R), plsmidos
bacteriocinognicos (ColE1), plsmidos de virulencia.
Bibliografa
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