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POLTICA EDITORIAL FITOPATOLOGA COLOMBIANA


La revista FITOPATOLOGA COLOMBIANA es una publicacin de la Asociacin Colombiana de Fitopatologa y Ciencias Afines
ASCOLFI con circulacin semestral a nivel Nacional e Internacional. Est dirigida a todos los profesionales interesados en el estudio de las
enfermedades de las plantas, su control y manejo (Ingenieros agrnomos, investigadores, fitopatlogos, profesores, tcnicos, extensionistas,
etc) . Tambin, se incluye a otros profesionales de ciencias afines, tales como bilogos, microbilogos, botnicos, fitomejoradores, etc, y a
entidades representativas del sector agropecuario, centros educativos y a los centros de investigacin nacionales e internacionales.
Est orientada hacia la publicacin de artculos originales de carcter cientfico y tcnico de inters fitopatolgico. Incluye tambin notas
cientficas de alta calidad, revisiones bibliogrficas de naturaleza crtica, cartas al editor sobre informacin publicada, opiniones e ideas,
recomendaciones y resmenes de congresos.
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Fitopatologa Colombiana, se debe solicitar por escrito al editor.

FITOPATOLOGA COLOMBIANA
ISSN 0120-0143

VOLUMEN 35

NMERO 1

JUNIO 2011

JUNTA DIRECTIVA ASCOLFI 2009-2011


Principales

Suplentes

Presidencia
Rodrigo O. Campo A.
Vicepresidencia
Benjamn Pineda L.
Celsa Garca
Secretara
Gustavo Adolfo Prado
Nancy Arciniegas
Tesorera
Juan Carlos ngel S.
Cristian Norea
Vocales
Bertha Lucia Castro
Gabriel Andrs Torres L.
.
Revisora Fiscal
Jos Albeiro Arias

CONTENIDO

Cristian Olaya

Representantes Internacionales
Francisco J. Morales
Fernando Correa V.
Gabriel Cadena
Revista
FITOPATOLOGA COLOMBIANA
RGANO DE DIFUSIN DE LA ASOCIACIN
COLOMBIANA DE FITOPATOLOGA Y CIENCIAS
AFINES- ASCOLFI
ISSN 01120-0143
Licencia de Min. Gobierno No 001808, Cali, Apartado Areo
5004, Nit. : 891 301.725-6
Sociedad sin nimo de lucro, Personera Jurdica 1097 de abril
1 de 1977
Editor
Benjamn Pineda L, Ing. Agr. M Sc.
b.pinedalopez@gmail.com

Poltica Editorial ........................................................................... i

Efecto del mildeo aerolado (Ramularia areola Atkinson)


en el rendimiento de dos genotipos de algodn en el
departamento de Crdoba
Nelson E. Villarreal y Rodrigo O. Campo

Eficacia del tratamiento de semillas de frjol (Phaseolus


vulgaris L.), sobre la erradicacin de microorganismos
Claudia Nohemy Montoya Estrada y Jairo Castao Zapata

Evaluacin del potencial antagnico de bacterias aisladas


de la rizsfera de papa criolla (Solanum phureja) sobre
Phytophthora infestans (Mont.) de Bary.
David Granada, Gina F. Pasaje H., Eliana M. Zuluaga R.,
Felipe A. Gmez V., Carlos Pelez J. y E. Antoni Rueda L . 11

COMIT EDITORIAL
Benjamn Pineda Lpez Ing .Agr. M Sc Fitopatologa
Elizabeth lvarez C.
Ing. Agr. Ph D Fitopatologa
Francisco J. Morales G. Ing. Agr. Ph D Virologa
Jorge I. Victoria K.
Ing. Agr. Ph D Bacteriologa
Rodrigo O. Campo A.
Ing. Agr. Ph D Fitopatologa

Representante de publicidad
Gabriel Robayo V., Ing Agr, M.Art
Contacto Revista: Oficina Ascolfi, Km 1 Via al Penal Granja
Corpoica C.I. Palmira, cel +57- 3164303079
Palmira - Valle del Cauca Colombia
Apartado Areo 5004- Cali- Valle del Cauca -Colombia
Correos electrnicos: ascolfi.colombia@gmail.com
Pgina web:

contacto@ascolficolombia.org
http://www.ascolficolombia.org/

Suscripciones y Canje: publicaciones@ascolficolombia.org


ascolfi.colombia@gmail.com
Diseo y Diagramacin: Benjamn Pineda L
Impresin: COMPUIMAGEN, Tel 2716528
Fecha de impresin: Junio de 2011
Tiraje 300 ejemplares

Evaluacin de la respuesta fitoalexnica en papa


(Solanum tuberosum) y determinacin preliminar de
priming en tomate (Solanum lycopersicum)
David Granada, Jennifer Salguero, Walter Murillo,
Carlos Pelez y E. Antoni Rueda... 15
Manejo integrado de la bacteriosis causada por
Xanthomonas axonopodis Starr & Garcs en el cultivo
de gulupa (Passiflora edulis Sims.)
Eugenio Guerrero-Lpez, Luz Mery Velandia
y Lilliana Hoyos-Carvajal.. 21
Manejo integrado del mildeo velloso (Peronospora
sparsa Berkeley) de la rosa
Nathali Lpez-Cardona y Jairo Castao Zapata.... 27
Fitopatologa Colombiana, normas para la
elaboracin de artculos...... 33

Publicacin Indexada por COLCIENCIAS en la


Categora C del ndice Nacional de Publicaciones
Seriadas Cientficas y Tecnolgicas de Colombia
(Publindex). Referenciada internacionalmente por el
ndice Latinoamericano de Publicaciones Cientficas y
Tecnolgicas (Latindex).
2010 Fitopatologa Colombiana /Volumen 34 No 2

Editorial
Las plantas para defenderse de sus enemigos no pueden correr como nosotros o los animales, estn
ancladas en el suelo con su sistema de races. No les queda otra alternativa que enfrentar al
enemigo de pie y firmes porque tiene que vivir. Para hacerlo su sistema defensivo es diferente al de
los miembros del reino animal, pero es efectivo y trasciende. Indudablemente, para que el sistema
funcione debe incluir un subsistema de alertas tempranas que activen todos los mecanismo
responsables de la defensa, segn la posible magnitud del ataque. En este orden de ideas, entendiendo
los mecanismos del sistema defensivo es posible aplicarlos oportunamente para que la planta
reacciones y neutralice la accin de los organismos patognicos de manera que el efecto de estos sobre
la salud de las plantas sea menor y por ende se obtengan mayores rendimientos, siempre y cuando en
los sistemas productivos se utilicen de manera integral las buenas prcticas agrcolas.
Quiero, en esta nota, destacar dos artculos, relacionados con el sistema defensivo de las plantas,
que aporta informacin til para comprender y aplicar los principios de la resistencia inducida. En
uno de ellos se hace referencia al efecto de inductores en la produccin del estado Fisiolgico llamado
Priming (an sin una palabra equivalente en espaol?) segn el cual las plantas se preparan,
de acuerdo a los autores, para un posterior ataque por patgenos, insectos o en respuesta a estreses
abiticos, sin todava desencadenar las respuestas de defensa celular y mostrando dicha activacin de
manera ms fuerte y rpida que las no inducidas, solo hasta la llegada del estrs. En el otro, se
evala el efecto de inductores de resistencia para el manejo integrado de la bacteriosis en el cultivo de
la Gulupa, un frutal promisorio para los pequeos, medianos y grandes fruticultores colombianos
Recomiendo a nuestros lectores la lectura de los artculos mencionados, si descuidar tambin los
dems documentos del fascculo que contienen informacin relacionada con algodn, frijol,
ornamentales y el potencial antagnico de bateras de la rizsfera de papa.
Benjamn Pineda Lpez
Editor Revista Fitopatologa Colombiana

2010 Fitopatologa Colombiana /Volumen 34 No2

EFECTO DEL MILDEO AEROLADO (Ramularia areola Atkinson) EN EL RENDIMIENTO DE


DOS GENOTIPOS DE ALGODN EN EL DEPARTAMENTO DE CORDOBA*
Nelson E. Villarreal1 y Rodrigo O. Campo2
1

Instituto Colombiano Agropecuario, Laboratorio de Diagnstico Fitosanitario CISA-Ceret


2
Universidad de Crdoba, Departamento de Ingeniera Agronmica y Desarrollo Rural

Correos electrnicos de contacto : nelson.villarreal @ica.gov.co ; rcampo@sinu.unicordoba.edu.co


*Artculo cientfico, recibido para publicacin el 09/02/2011; aceptado el 14/04/2011

RESUMEN

SUMMARY

En el Departamento de Crdoba, Colombia, se evalu el efecto del


mildeo aerolado, causado Ramularia areola Atkinson, en la produccin de fibra del algodonero, para lo cual se establecieron dos experimentos en la temporada 2004-2005, en el municipio de Ceret. El
primero fue sembrado en septiembre 2004 (poca temprana) y el segundo a finales de octubre 2004 (poca tarda) en un diseo de bloques
completos al azar en un arreglo de parcelas divididas, con cuatro repeticiones. Durante el estudio se utilizaron las variedades Delta Opal y
Delta Pine 90 con y sin aplicacin de fungicida. Se realiz el estudio
temporal de la severidad de la enfermedad y se estimaron las prdidas
econmicas de la produccin. Las curvas de progreso de la enfermedad, en los dos experimentos, se ajustaron al modelo Gompertz con
una tasa aparente de infeccin baja entre 0,029 y 0,032 unidades por
da. La enfermedad afect significativamente los rendimientos cuando
se sembr en la poca tarda, reducindolos en 18,46% en la variedad
Delta Opal y en 10,56% en Delta Pine 90. El uso de fungicidas increment los rendimientos de la fibra en las dos pocas de siembra dando
una tasa marginal de retorno (TMR) en la poca temprana de 14,50%
en Delta Pine 90 y 16,65% en Delta Opal. En la poca tarda la TMR
fue 50,59% para Delta Pine 90 y 133,17% para Delta Opal. Se concluye que el mildeo areolado afecta la produccin de la fibra, especialmente cuando se siembra tardamente, siendo importante establecer
un plan de manejo de la enfermedad.

Aerolate mildew (Ramularia areola Atkinson) disease effect in the


yield of two cotton genotypes at Cordoba Department

Palabras claves: Gossypium hirsutum, enfermedades del algodonero,


epidemiologa, prdidas

INTRODUCCIN
El cultivo del algodn en Colombia, ha sido
incluido dentro de las polticas de gobierno
en razn a la demanda de mano de obra que
genera todo el ciclo vegetativo del cultivo
(Cano, 2004). En el departamento de Crdoba
el algodn se siembra principalmente en el
Valle de Sin, en suelos aluviales generando
130 jornales por hectrea/ao y aportando al
Producto Interno Bruto (PIB) departamental,
aproximadamente 76 mil millones de pesos
anuales segn el Comit Regional de la Cadena Productora Algodn Textil (CRC PAT,
2003).
En los ltimos cinco aos ha preocupado
a los agricultores, las incidencias tempranas
de Ramularia areola Atkinson, a tal punto
que algunos realizan hasta tres aplicaciones
de fungicidas que representan un costo adicional equivalente a 150 Kg de algodn

The influence of aerolate mildew disease on cotton yield was evaluated in two experiments on 2004-2005 crop seasons at Cerete, (Cordoba department of Colombia). The first trial was planting on September (normal planting date) and the second one on October (late planting date). The experiments were conducted using a random complete
block in split plot design with four repetitions. In the treatments were:
used the varieties Delta Opal and Delta Pine 90 with and without
fungicides. The seed cotton yield was evaluate on the two central rows
by each treatment and makes it an economic analysis. The disease
progress curves were transformed and adjust to Gompertz`s model,
using statistical program SAS, with apparent infection rate the 0.029
by days with fungicides and 0.032 without fungicides. The aerolate
midew showed significant differences in the yield when was planting
out of time on October causing yield loss the 18,46% in Delta Opal
and 10,56% in Delta Pine 90, respectively. The fungicides use increment the seed cotton yield in the two planting date; where the marginal
return rate TMR in the early date was 14,50% in Delta Pine 90 and
16,65% in Delta Opal. In the late planting date the TMR was 50.59%
in Delta Pine 90 and 133,17% in Delta Opal. As a conclusion the
aerolate mildew disease affect the seed cotton yield, specialty which it
planting in late date
Key words: Gossypium hirsutum, cotton diseases, epidemiology, yield
loss

semilla por hectrea (estimado con base a tres


aplicaciones a $ 93.152 cada una a precios de
2005). Las aplicaciones de fungicidas en
Crdoba no obedecen a trabajos realizados en
la regin; sino con base en recomendaciones
que hacen las casas comerciales de semillas
tomadas de investigaciones hechas en otros
pases como el Brasil.
El hongo R. areola pertenece al orden
Moniliales, familia Moniliaceae y presenta
como Teliomorfo: Mycosphaerella areola (J.
Ehrlich y F. A. Wolf) (Alexopoulos, 1996).
La enfermedad es conocida como Ramularia,
Mildeo areolado, Tizn escarchado. En condiciones de campo Ramularia areola, se
manifiesta en tres fases distintas durante su
ciclo. En la fase asexual o conidial el hongo
se desarrolla sobre tejido vivo; la fase espermogonial ocurre en las hojas que caen al
suelo y la fase sexual, las ascosporas, se
desarrolla sobre los restos del cultivo tales
2011 Fitopatologa Colombiana /Volumen 35 No 1

como las hojas secas. Esta capacidad reproductiva, convierte a R. areola en un patgeno
capaz de generar epidemias devastadoras en
variedades susceptibles (Lamamoto, 2003).
La enfermedad es favorecida por temperaturas entre 12 a 32 C, siendo la optima entre
22-26 C; humedad relativa mayor del 80%
(Bell, 1981). El hongo se disemina a travs
del viento, el agua de lluvia o de riego, por
personas y maquinarias que transitan por el
rea afectada segn la Federacin de Algodoneros (FEDERALGODON, 1980).
Los sntomas tpicos de la enfermedad se
caracterizan por presentar crecimiento blanquecino o amarillento del hongo sobre el
envs de las hojas, los cuales producen una
escarcha con apariencia harinosa. Las manchas son angulares y delimitadas por las
venas de las hojas. Observadas desde arriba
las lesiones presentan coloracin verde brillante a verde amarillento y generalmente se
1

observa una capa blanquecina tpica en el


envs de las hojas afectadas. En las brcteas
que recubren las cpsulas se pueden observar
lesiones similares (Blank, 1953; Araujo,
2000).
En el Brasil, el Mildeo Aerolado o mancha Ramularia es considerada de importancia
econmica al manifestarse en la fase vegetativa de la planta en las nuevas variedades
cultivadas (EMBRAPA, 2000). La enfermedad ha ocasionado defoliaciones precoces en
los tercios inferiores y medios de la planta y
como consecuencia se presenta una apertura
prematura de cpsulas, y reducciones de la
productividad hasta del 35%(Araujo, 2000).
El manejo de la enfermedad en Brasil se
realiza con aplicaciones de fungicidas del
grupo de los bencimidazoles, triazoles y
estrobilurinas y se inician los controles cuando la enfermedad alcanza a afectar un 25%
del rea foliar en el tercio inferior de las
plantas (Andrade et al., 1999; Cassetari y
Machado, 2005; Prade et al., 2000).
En Argentina el Instituto Nacional de
Tecnologa Agropecuaria (INTA, 2004)
recomienda tratamientos qumicos foliares
mediante el uso de fungicidas sistmicos,
siempre que la enfermedad ataque antes de la
apertura de capsulas y con cpsulas verdes
todava en desarrollo iniciando las aspersiones al follaje tan pronto se observen los
sntomas en el cultivo. La segunda aspersin,
si fuera necesario, se recomienda efectuarla
dos semanas despus de la primera. En cambio en la India el National centre for integrated pest management(NCIPM, por sus siglas
en Ingls) recomienda un manejo integrado
con la remocin y quema de residuos de
cosecha; rotar el cultivo con cereales, utilizar
variedades resistentes en las zonas endmicas
y aplicaciones foliares con fungicidas a base
de sulfuro, benomil o carbendazim (NCIPM,
2004). En Colombia, la Federacin Nacional
de Algodoneros (1980) recomienda el tratamiento de semillas, fertilizacin adecuada y
eliminacin de residuos.
En Crdoba no se han realizado estudios
epidemiolgicos que orienten al agricultor
para el manejo de la enfermedad, lo que se
hace ms evidente con el ingreso de nuevos
genotipos de algodn. Debido a lo anterior, se
plante evaluar los niveles de dao ocasionados por R. areola en el cultivo del algodonero
en el Valle del Sin Medio a partir de la
etapa de prefloracin, y relacionar la incidencia y severidad del dad del Mildeo aerolado
con la produccin y la rentabilidad.

MATERIALES Y MTODOS
El trabajo se realiz en condiciones de campo
en predios del ICA-CISA ubicado en el retiro
de los Indios, Ceret a 8 56 25 de Latitud
Norte 75 49 07 de Longitud Oeste, a 14
msnm, con 28C de temperatura promedio;
una precipitacin anual promedio de 1.200
mm y el 80% de humedad relativa.
2

Se establecieron dos experimentos, uno


en poca temprana (de finales de Agosto a
finales de Septiembre) y el otro en poca
tarda (de finales de Septiembre a finales de
Octubre) de la temporada algodonera de los
aos 2004-2005. Cada experimento se estableci en un diseo de bloques completos al
azar con arreglo en parcelas divididas, con
cuatro repeticiones. En las parcelas principales se establecieron las variedades Delta Opal
(DO) y Delta Pine 90 (90) y en las subparcelas los tratamientos con fungicidas (T) y sin
fungicidas (NT).
Las subparcelas constaron de cuatro surcos de cinco metros de largo, las cuales se
sembraron en forma manual con una densidad
de 55 mil plantas/hectrea para la poca
temprana y de 99 mil plantas /hectrea para la
poca tarda. Las labores agronmicas fueron
las mismas que utiliza el agricultor en Crdoba.
El efecto de la R. areola en cada variedad
se determin con el mtodo de parcela experimental comparando parcelas protegidas con
fungicidas y parcelas no protegidas (Campbell y Madden, 1990). Las parcelas protegidas con fungicida fueron asperjadas cada tres
semanas con Carbendazim en una dosis de
400cm3 de producto comercial/ hectrea
(200g de ia/ha) a partir de los 40 das despus de la germinacin (ddg); para un total de
cinco aplicaciones en la primera poca y
cuatro en la segunda poca.
En los dos surcos centrales de cada subparcela se marcaron cinco plantas a las cuales
semanalmente se les cuantific la severidad
de la enfermedad con base a porcentaje del
rea foliar afectada en cada planta, empleando la escala de Horrsfall y Barrat (Osada y
Mora, 1997).
Con los datos de severidad se construyeron curvas de progreso de la enfermedad, se
estim la tasa aparente de infeccin (r), la
mxima severidad (Y max) y el rea bajo la
curva de la enfermedad (ABCPE). Las curvas
de progreso se ajustaron a los modelos Exponencial, Monomolecular, Logstico y Gompertz, usndose el programa estadstico SAS.
La seleccin de modelo que explicara en
mejor forma la epidemia, se hizo con base al
que present mayor coeficiente de determinacin (R2), la menor desviacin estndar de la
tasa aparente de infeccin (r), el menor cuadrado medio del error y el menor residuo del
error estndar (Cambell y Madden, 1990).
El efecto de la enfermedad en la produccin se estim por hectrea con base al peso
de las motas obtenidas en los dos surcos
centrales de cada parcela. Se realiz anlisis
de varianza por experimento, por poca de
siembra y un anlisis combinado entre pocas
de siembra, al rea bajo la curva de progreso
de la enfermedad ABCPE y a la produccin.
Adems, se hizo la comparacin de medias
empleando la prueba de Duncan (P=0,05) a
travs del programa estadstico SAS.
2011 Fitopatologa Colombiana /Volumen 35 No 1

En cada experimento se realiz un anlisis econmico determinando la rentabilidad


de cada tratamiento mediante el mtodo del
presupuesto parcial y dominancia marginal
(CIMMYT, 1988). Los costos de produccin
y rentabilidad de los tratamientos fueron
ajustados a precios de 2005.

RESULTADOS Y DISCUSIN
El Mildeo aerolado se present epidmicamente en los dos experimentos. Los sntomas
iniciales fueron manchas foliares, azuladas de
0,5 mm de dimetro en el envs de las hojas.
La enfermedad progres de las hojas bajeras
del tercio inferior hacia arriba y de las hojas
internas hacia las externas. El periodo transcurrido desde la aparicin de manchas azules
hasta formar los primeros conidiforos (crecimiento blanquecino algodonoso) en el
envs de las hojas, oscil entre 25 y 28 das.
Anlisis de la Epidemia
poca temprana. La aplicacin de fungicidas influy en el desarrollo de la epidemia
(Figura 1a). En las variedades Delta Opal y
Delta Pine 90 no tratadas con fungicidas, la
enfermedad se inici 60 das despus de
germinacin (ddg), en los comienzos de la
produccin de flores y cpsulas, comenzando
la fase epidmica en la poca de mayor produccin de cpsulas (70 ddg); mientras que
en las variedades protegidas los primeros
sntomas se observaron en etapa de mxima
produccin de cpsulas, 70 ddg, y la epidemia se inici en la etapa de produccin de
cpsulas maduras en los tercios inferiores, a
los 92 ddg.
La mxima severidad de la enfermedad se
alcanz una severidad del 50% a los 137 ddg
(etapa de apertura de primeras cpsulas) en
las variedades no protegidas y del 34% en
Delta Opal y 25% en Delta Pine 90, protegidas.
El rea de progreso de la enfermedad bajo
la curva (ABCPE) fue mayor para Delta Opal
cuando no se protegi con respecto al Delta
Opal tratado; igualmente fue mayor en Delta
Pine 90 no protegido con respecto a la tratada
con fungicida.
El anlisis de varianza para la variable
ABCPE mostr diferencias altamente significativas entre las variedades (P=0,01), siendo
la variedad Delta Pine 90 la menos afectada.
Esta variable tambin present alta significancia al comparar el efecto del fungicida, sin
tener en cuenta la variedad, en el desarrollo
de la enfermedad, son ms sanas las plantas
tratadas con fungicidas con un ABCPE de
557 unidades; mientras que las no tratadas
presentan un ABCPE de 1613 unidades.
La tasas aparentes de infeccin ajustadas
al modelo de Gompertz (rG) fueron bajas
tanto en las variedades tratadas con fungicidas como en las no tratadas; siendo para
Delta Opal tratada 0,027, Delta Opal no

tratada 0,032; Delta Pine tratada 0,023 y


Delta Pine no tratada 0,029. Esto indica que
el desarrollo de Ramularia en las dos variedades present una baja velocidad en el progreso de la enfermedad.
poca tarda. La aplicacin del fungicida
influy en el desarrollo de la epidemia (Figura 1b). En las variedades Delta Opal y Delta
Pine 90 no tratadas con fungicidas los primeros sntomas de la enfermedad se observaron
a los 54 ddg (Etapa de floracin y cpsulas
pequeas en el tercio inferior) inicindose la
fase epidmica a los 70 ddg (mayor produccin de cpsulas); mientras que, cuando las
variedades fueron protegidas los primeros
sntomas se presentaron a los 54 ddg (etapa
de mxima produccin de cpsulas) y la
epidemia se inici a los 88 ddg (etapa de
produccin con cpsulas maduras en el tercio
inferior).
La mxima severidad de la enfermedad se
alcanz a los 100 ddg (etapa de apertura de
primeras cpsulas) en las variedades no protegidas con el fungicida con una severidad
del 41,1% en Delta Opal y 42,1% en Delta
Pine 90. En las variedades tratadas con el
fungicida la mxima severidad se alcanz a
los 126 ddg con severidad de 21,2% en Delta
Opal y 29,3% en Delta Pine 90.
El rea bajo la curva de progreso de la enfermedad, ABCPE, fue significativamente
mayor en las variedades no protegidas con un
promedio de 1500 unidades; mientras que,
cuando se protegi con fungicida la variedad
Delta Opal redujo el rea foliar afectada en
49% y la Delta Pine en 57%.
El anlisis de varianza para la variable
ABCPE mostr diferencias altamente significativas entre las variedades (P=0,01), siendo
la variedad Delta Pine 90 la menos afectada.
Esta variable tambin present alta significancia al comparar el efecto del fungicida, sin
tener en cuenta la variedad, en el desarrollo
de la enfermedad, siendo menos afectadas las
plantas tratadas con fungicida con un ABCPE
de 816 unidades mientras que las no tratadas
presentaron un ABCPE de 1.521 unidades.
El anlisis de varianza de la variable
ABCPE mostr diferencias altamente significativas entre variedades y entre tratamientos.
La prueba de Duncan al 5% de significancia
mostr que hubo diferencias entre los tratamientos y entre las variedades, siendo la ms
tolerante a R. areola la Delta Opal.
Las tasas aparentes de infeccin ajustadas
al modelo de Gompertz (rG) fueron bajas
tanto en las variedades tratadas con fungicida
como las no tratadas. Las tasas de Delta Opal
y Delta Pine tratadas fueron de 0,021 y 0,022,
respectivamente, mientras que para las mismas variedades no tratadas fueron del 0,024.
Esto indica que la epidemia en las dos variedades tuvo una baja velocidad y desarrollo.

Anlisis de la poca de siembra

La curva de progreso de la epidemia en la


poca temprana (Septiembre 17) muestra que
la enfermedad se inici a partir de los 60 das
despus de germinado (ddg), mientras que,
en la poca de siembra tarda (Octubre 28)
inici a partir de los 47 ddg . Esta diferencia de 17 das es importante para explicar
prdidas en la produccin ya que trabajos
realizados en Brasil han demostrado que la
enfermedad es limitante si se presenta antes
del desarrollo de las cpsulas de algodn
(Araujo, 2000).
La severidad de la enfermedad en la poca temprana, en todos los tratamientos a los
80 ddg (produccin de cpsulas) no super el
10%; caso contrario, en la poca tarda
donde se observ que las variedades no
tratadas con fungicida presentaron severidades de 12 y 18% en Delta Opal y Delta Pine

90 , respectivamente, siendo considerada esta


la fase crtica en la cual se define la produccin.
El desarrollo de la epidemia tuvo relacin
con el dficit hdrico, manifestndose en la
poca temprana a los 70 ddg, momento en la
cual finalizaron las lluvias. En la poca tarda, la sequa se inici a los 20 ddg, por lo cual
el Mildeo areolado se manifest ms temprano, 44 ddg (Figura 1). Estos resultados concuerdan con los trabajos de Lamamoto (2003)
quien encontr que la enfermedad es favorecida por bajas precipitaciones y alta humedad
relativas.
En relacin a la resistencia de las variedades y al efecto de carbendazim sobre R.
areola se concluye en que en ambas pocas
de siembra hubo mayor porcentaje de severidad en las variedades no tratadas y que la

Figura 1. Curvas de desarrollo del Mildeo aerolado en algodn en las variedades Delta Opal y DP 90
tratadas con carbendazim y sin tratar. a. poca de siembra temprana (Septiembre de 2004) b. poca de
siembra tarda (Octubre de 2004).
2011 Fitopatologa Colombiana /Volumen 35 No 1

variedad Delta Pine 90 fue la ms afectada


presentando respuesta positiva al tratamiento
con el fungicida.
Produccin
poca Temprana. El anlisis de varianza no
mostr diferencia significativa entre los
tratamientos ni entre variedades. Sin embargo, al compararse las variedades no tratadas
(NT) con las tratadas con el fungicida (T), en
stas ltimas se not un incremento en el
rendimiento de algodn semilla, siendo para
la variedad Delta Opal de 173 kg/ha y en la
variedad Delta Pine 90 de 168 kg/ha. La ms
productiva fue la Delta Opal con 2.803 Kg de
algodn semilla/ha, superando a la Delta Pine
90 en 26,14%.
poca tarda. El anlisis de varianza mostr
diferencia significativa entre los tratamientos;
indicando que la enfermedad afect significativamente los rendimientos de algodn semilla. La prueba de Duncan (P 0,05) indic
que hubo diferencias significativas entre
variedades tanto en las tratadas con el
fungicida como en las no tratadas. La
enfermedad afect significativamente, los
rendimientos
causando prdidas de 548
Kg de algodn semilla/ha (18,46%) en Delta
Opal y de 250 Kg de algodn semilla /ha
(10,56%) en Delta Pine 90.
Anlisis Combinado
Los rendimientos de algodn semilla no
fueron afectados por la poca de siembra,
pero si por la presencia del Mildeo aerolado ,
permitiendo los mayores rendimientos en las
dos variedades evaluadas cuando se trataron
con fungicida. La severidad de la enfermedad
medida como ABCPE present diferencia
altamente significativa entre variedades,
tratamientos, poca de siembra y entre las
interacciones variedad x tratamiento y tratamiento x poca de siembra. La prueba de
Duncan (P 0,05) mostr diferencia altamente significativa
entre variedades siendo
Delta Opal la de mayor rea afectada con
1.185 unidades, superando a Delta Pine 90 en
116 unidades.
Anlisis Econmico
En la poca normal de siembra los tratamientos con el fungicida fueron los de mayor
eficiencia presentando una tasa marginal de
retorno TMR en la variedad Delta Opal de
16,65% y en Delta Pine 90 de 14,50% (Tabla
1). En la poca tarda, el comportamiento de
las variedades protegidas con el fungicida
permiti altas TMR siendo para Delta Opal
de 133,17% y para la Delta Pine 90 de
50,59% (Tabla 2), lo cual indica que cuando
se siembra el algodn tardamente la enfermedad afecta econ micamente la produccin
tenindose que establecer medidas de manejo
preventivas.
4

Tabla 1. Anlisis marginal en el manejo de Ramularia areola Atkinson para la poca de siembra temprana.
Tratamiento

TCV ($/ha)

CM($/ha)
TCVSTTCVAT

BN ($/ha)

TRM (%)
BNM($/ha)
(BNM/CM)
BNST-BNAT
x100

Delta Pine 90 sin aplicacin de


945.970,03
267.275,91
carbendazin
Delta Pine 90 con aplicacin de
1.181.372,66
235.402,63 301.409,27 34.133,36
14,49999518
carbendazin
Delta Opal sin aplicacin de
130.592,97
124.549,31 875.659,97 574.250,7
461,062932
carbendazin
Delta Opal con aplicacin de
1.542.932,27
237.010,3 915.129,67 39.469,7
16,.65315811
carbendazin
TCV: TotCostos Variables, CM: Costo Marginal, BN: Beneficio Neto, BNM: Beneficio Neto Marginal,
TRM: Tasa de Retorno Marginal
Tabla 2. Anlisis marginal en el manejo de Ramularia areola Atkinson para la poca de siembra tarda
CM($/Ha)
TRM (%)
BNM($/Ha)
Tratamiento
TCV($/Ha)
TCVSTBN ($/Ha)
(BNM/CM) x
BNST-BNAT
TCVAT
100
Delta Pine 90 sin aplicacin de
948.990,69
135.007,25
carbendazin
Delta Pine 90 con aplicacin de
1.214.598,18 265.607,93
269.399,32 134.392,07
50,5979132
carbendazin
Delta Opal sin aplicacin de
1.230.980,42 16.381,81
338.009,51 68.610,19
418,819349
carbendazin
Delta Opal con aplicacin de
1607139,06 376.338,8
839.174,68 501.165,17
133,168616
carbendazin
TCV: Total Costos Variables, CM: Costo Marginal, BN: Beneficio Neto, BNM: Beneficio Neto Marginal,
TRM: Tasa de Retorno Marginal

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
CONCLUSIONES
En ambas pocas de siembra analizadas
las variedades que no fueron tratados con
fungicida presentaron mayor severidad de la
Mildeo areolado, mostrando diferencias
estadsticas significativas con respecto a las
variedades tratadas.
El modelo de Gompertz result ser el ms
apropiado para describir el progreso y desarrollo del mildeo areolado (Ramularia areola
Atkinson), en los distintos tratamientos y
pocas estudiadas
Los rendimientos en trminos de algodn
semilla por hectrea no presentaron diferencias estadsticas significativas en la poca
temprana. En la tarda la variedad Delta Pine
90 no tratada, estadsticamente y econmicamente, mostr que requiere de un manejo del
mildeo areolado pues fue la ms afectada
(reduccin del rendimiento en 10,56%)
El anlisis combinado, mostr que la
variedad Delta Opal present los mayores
rendimientos (P =,001) de algodn semilla,
no requiriendo control contra el mildeo areolado en ninguna de las pocas estudiadas y
superando a la variedad Delta Pine 90 en
592,4 Kg.

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ASOCIACIN COLOMBIANA DE FITOPATOLOGIA


Y CIENCIAS AFINES, ASCOLFI

XXX Congreso Colombiano y XVI Latinoamericano de Fitopatologa


Bogot (Colombia), Hotel Crowne Plaza Tequendama del 16 al 19 de agosto de 2011.

Actividad conjunta con la


ALF, Asociacin Latinoamericana de Fitopatologa

Informes
Sede Congreso
http://concolfi.com/
ascolfi2011@gmail.com

Sede ASCOLFI
www.ascolficolombia.org
ascolfi.colombia@gmail.com
Cel. +57- 316-4303079
22

EFICACIA DEL TRATAMIENTO DE SEMILLAS DE FRJOL (Phaseolus vulgaris L.)


SOBRE LA ERRADICACIN DE MICROORGANISMOS*
Claudia Nohemy Montoya Estrada y Jairo Castao Zapata
Facultad de Ciencias Agropecuarias, Universidad de Caldas
Correos electrnicos de contacto: claudia_montoyaestrada@hotmail.com; jairo.castano_z@ucaldas.edu.co
*Artculo Cientfico, recibido para publicacin el 13/02/2011; aceptado el 14/04/2011

RESUMEN

SUMMARY

La semilla es el principal medio de dispersin de patgenos a grandes


distancias. Mucha de la semilla de frijol utilizada por los agricultores
de escasos recursos econmicos es de mala calidad y transporta
fitopatgenos que inciden sobre su germinacin. Por esta razn se hace
necesario implementar tcticas efectivas para producir semilla de
buena calidad. Esta investigacin tuvo como objetivo principal erradicar los microorganismos presentes en semillas de frijol mediante
productos con diferente mecanismo de accin, como Benomil, Captan,
Carboxin+Captan y Burkholderia cepacia. Se utiliz agar-agua al 2%.
Se sembraron cinco semillas por caja Petri, con cinco replicas, para un
total de 25 semillas por tratamiento, en un diseo de bloques completamente al azar. Por cada producto se emplearon cuatro dosis. Las
semillas se incubaron entre 20 y 25C, durante 14 das. Despus de
siete das, Benomil en dosis de 100, 200 y 400 ppm, permiti una
germinacin superior al 90% y se mantuvo estable despus los 14 das.
Despus de Benomil, la mezcla de Carboxin+Captan en las mismas
dosis, fue el mejor tratamiento, obtenindose una germinacin entre
80 y 92%. La germinacin en los testigos oscil entre el 48 y 68%.
Benomil en dosis de 200 ppm, erradic totalmente los hongos presentes en las semillas an despus de 14 das, contrastando con el testigo
que a los siete das tena una incidencia del 100%. Se identificaron
cinco gneros de hongos: Fusarium, Penicillium, Rhizopus, Rhizoctonia y Alternaria y, dos de bacterias: Xanthomonas y Bacillus.
Fusarium, fue el microorganismo ms frecuente. El fungicida Benomil, es una alternativa eficaz para la erradicacin de microorganismos presentes en semillas de frjol.

Efficacy of seed treatment of bean (Phaseolus vulgaris L.) on the


eradication of microorganisms

Palabras clave: leguminosas, hongos, bacterias, fungicidas, eliminacin

Key words: legumes, fungi, bacteria, fungicides, elimination

INTRODUCCIN
En Colombia predomina el uso de variedades
criollas de frjol (Phaseolus vulgaris L.), tales
como el Cargamanto, del cual se han identificado muchos tipos: C. blanco, C. comn, C.
ombligo amarillo, C. rojo, C. gigante, entre
otros. El frjol Cargamanto es cultivado en
condiciones de clima fro y clima fro moderado en la subregin del Oriente antioqueo.
Estas variedades son de hbito voluble o de
enredadera (hbito IV) (Arias et al., 2007).
Una caracterstica desfavorable de los
frjoles tipo Cargamanto es su susceptibilidad a enfermedades (Arias et al., 2007). La
Antracnosis, causada por el hongo Glomerella lindemuthiana Shear [anamorfo, Colletotrichum lindemuthianum (Sacc. & Magnus)
Lams.-Scrib], es probablemente la enfermedad ms importante de P. vulgaris y puede

The seed is the main dissemination mean of pathogens to long distances. Most of the bean seed used by farmers of scarce economic
resources is of low quality and transport plant pathogens that affect its
germination. For this reason it is necessary to implement effective
practices to produce good quality of seed. This research had as main
objective to eradicate those microorganisms presented in seeds of bean
through products with different mechanism of action, such as Benomil,
Captan, Carboxin+Captan and Burkholderia cepacia. It was used agarwater at 2%, plating five seeds per Petri dish, with five replications
and 25 seeds per treatment, in a completely randomized block design.
For each product were used four doses. The seeds were incubated
between 20 and 25C, during 14 days. After 7 days, Benomil at 100,
200 and 400 ppm, allowed germination higher than 90% and kept up
stable after 14 days. After Benomil, the mixture of Carboxin+Captan
at the same doses was the best treatment, with germination between 80
and 92%. The germination in the controls ranged between 48 and 68%.
Benomil at 200 ppm, totally eradicated the fungi presented in the seeds
even after 14 days, contrarily with the control, in which after 7 days
reached an incidence of 100% of fungi. It was identified five genera
of fungi: Fusarium, Penicillium, Rhizopus, Rhizoctonia and Alternaria
and, two of bacteria: Xanthomonas and Bacillus. Fusarium, was the
most frequent microorganism. Fungicides, such as Benomil, offer an
effective alternative to eradicate microorganisms in seeds of bean.

llegar a causar prdidas en rendimiento hasta


del 95%. Su severidad induce a muchos
agricultores a la utilizacin de varios fungicidas, lo cual representa altos costos en la
produccin, adems de la contaminacin
ambiental (Santana y Mahuku, 2002).
Los hongos causan el mayor nmero de
enfermedades en plantas y ocurren con mayor
frecuencia en semillas que los virus, las
bacterias, o nematodos (Castao-Zapata y
Zepeda, 1987). Por lo tanto, las semillas de
frjol pueden ser un medio ideal para el transporte de inculo de patgenos de origen
fungoso, viral, bacterial o viral e inclusive de
nematodos. Por ejemplo, Richardson (1979),
reporta 32 hongos, 12 virus, siete bacterias y
un nematodo, que se transmiten a travs de la
semilla.
Las semillas que portan hongos patognicos son importantes para la agricultura debido
2011 Fitopatologa Colombiana /Volumen 35 No 1

a que: pierden viabilidad, lo que resulta en


una disminucin significante de la germinacin; pueden portar inculo, el cual bajo
condiciones apropiadas puede iniciar una
epidemia; pueden introducir patgenos exticos, no obstante que son tratadas con agroqumicos; pueden portar patgenos viables
resultando en cualquiera de las situaciones
anteriores; y el ataque de la semilla por diversos microorganismos antes de la cosecha
puede causar una reduccin en la calidad y
rendimiento del grano (Baker, 1972). La
semilla se convierte de esta manera en el
principal medio de dispersin de patgenos a
grandes distancias, incluyendo pases y continentes.
Algunos hongos causantes de Antracnosis, como la del frjol, se dispersan principalmente por semilla, por lo que el uso de
semilla de calidad, puede conducir a la au7

sencia de esta enfermedad, aun cuando la


variedad sea susceptible (Villalobos y
Hernndez, s. f.).
En una semilla de mala calidad, se pueden transportar hongos habitantes del suelo,
que una vez introducidos al campo, son muy
difciles de manejar, como por ejemplo,
Fusarium oxysporum Schlechtend.:Fr, Sclerotium rolfsii Sacc, Sclerotinia sclerotiorum
(Lib.) de Bary, Macrophomina phaseolina
(Tassi) Goidanich y Rhizoctonia solani Khn.
La sobrevivencia de los patgenos que
atacan al frijol y se transmiten por semilla
como Phaeoisariopsis griseola (Sacc.) Ferrais, Glomerella lindemuthiana Shear, Thanatephorus cucumeris (A. B. Frank) Donk
(anamarfo, Rhizoctonia solani Khn),
Xanthomonas campestris pv. phaseoli Pammel, y Pseudomonas syringae pv.. phaseolicola Van Hall, pueden permanecer en el
suelo o residuos de cosecha hasta tres aos
(Jara, 2006; Godoy, 2007). Se sabe que para
Thanatephorus cucumeris (A. B. Frank)
Donk, la semilla es un medio muy efectivo de
sobrevivencia (hasta dos aos) y fuente de
inculo para la parte area (Schwartz y
Glvez, 1980).
Groenewold et al. (2003), encontraron
que patgenos como: Rhizoctonia solani
Khn, Sclerotium rolfsii Sacc, Fusarium Link
ex Grey., Colletotrichum lindemuthianum
(Sacc. & Magnus) Briosi & Cavara, Uromyces appendiculatus (Pers:Pers) Unger,
Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli Smith,
Pseudomonas syringae pv. phaseolicola Van
Hall y el virus del Mosaico comn del frijol,
BCMV, (Stewart & Reddick) Pierce, constituyen un problema de gran impacto en la
produccin de semilla de frjol de calidad.
Enfermedades bacteriales, como el Tizn
de halo (Pseudomonas syringae pv. phaseolicola Van Hall), la Mancha parda (Pseudomonas syringae pv. syringae Van Hall), el Tizn
comn (Xanthomonas campestris pv. phaseoli Smith), y la Marchitez (Curtobacterium
flaccumfaciens subsp. flaccumfaciens (Hedges) Dowson, afectan al cultivo de frijol y
reas de produccin. Debido a que estas
bacterias se transmiten por semilla, la presencia de plantas enfermas en los campos de
semillas afecta la elegibilidad de certificacin
de la cosecha, segn la definicin de las
normas de certificacin y los reglamentos.
Los ataques de enfermedades bacteriales
reducen el rendimiento y la calidad de la
cosecha (Franc, 1998).
El tratamiento de semillas probablemente
es la medida ms antigua, econmica y ms
segura en el manejo de patgenos transmitidos por semillas, especialmente hongos. El
tratamiento qumico es el ms difundido y
consiste en la aplicacin de fungicidas, insecticidas, antibiticos y/o nematcidas a las
semillas. Para que el tratamiento qumico sea
eficiente, se debe seleccionar un producto
capaz de erradicar los patgenos presentes en
las semillas, el cual no debe ser txico a las
8

plantas, a humanos y al ambiente, debe presentar alta estabilidad, adherencia y proteccin, no ser corrosivo ni de alto costo,
adems de ser compatible con otros productos
(Lucca, 2009).
Existe un gran nmero de productos en el
mercado aptos para ser usados en el tratamiento de semillas, presentando caractersticas diferentes. Los productos llamados protectantes son aquellos que actan superficialmente, y tienen poca capacidad de penetrar en la semilla, restringiendo su accin a
los patgenos localizados en el tegumento o
debajo de ste, an sin penetrar en los tejidos
embrionarios. Como ejemplo clsico de este
grupo estn los fungicidas Thiram y Captan.
Los productos sistmicos son aquellos que
son absorbidos por la semilla junto con el
agua y translocados en la planta, confiriendo
cierta proteccin en los estados iniciales de
desarrollo de las plntulas, tales como Benomil, Carboxin, Tiofanato metilico, etc. (Diccionario de Especialidades Agroqumicas,
2010; Lucca, 2009).
Este estudio tuvo como objetivo principal
evaluar la eficacia de tres fungicidas y una
bacteria sobre la germinacin y erradicacin
de microorganismos presentes en semillas de
frjol variedad Cargamanto blanco.

MATERIALES Y MTODOS
La investigacin se llev a cabo en el laboratorio de Fitopatologa, del Departamento de
Fitotecnia, Facultad de Ciencias Agropecuarias, Universidad de Caldas (Manizales,
Colombia). Se analizaron semillas de frijol
variedad Cargamanto blanco, procedentes de
un supermercado Tipo B. Se utilizaron cuatro
productos: Benomil (Zellus), Captan (Orthocide 50%), Carboxin+Captan (Vitavax
300) y Burkholderia cepacia Burkholder
(Botrycid).
Para el tratamiento de la semilla se utiliz
la metodologa descrita por Castao-Zapata
(1998). Las semillas se trataron en grupos de
25 con Benomil, Captan, Carboxin+ Captan a
concentraciones de 0, 50, 100, 200 y 400 ppm
y B. cepacia en dosis de 0, 1, 1,5, 2 y 2,5 de
mL i.a./ 100 mL de agua. El tratamiento se
hizo en bolsas de plstico, mediante agitacin constante y durante un minuto. Luego
se extendieron las semillas sobre papel y con
la ayuda de unas pinzas, se sembraron cinco
semillas por caja Petri conteniendo agar agua
al 2%. Cada concentracin tuvo cinco replicas (25 cajas por fungicida), para un total de
125 semillas por producto. Se incubaron a 2025C en una incubadora WTB Binder durante 14 das.
Se realizaron observaciones a los cuatro,
siete y 14 das evaluando la germinacin y
nmero de semillas con presencia de hongos,
bacterias, o ambos.
La identificacin de hongos se realiz
con base a la descripcin taxonmica de
Streets (s.f) Barnett y Hunter (1987) y Casta2011 Fitopatologa Colombiana /Volumen 35 No 1

o-Zapata y Salazar (1998). Los montajes se


hicieron en azul de lactofenol (azul de algodn 0,05 g, cido lctico 20 g, cristales de
fenol 20 g, glicerina 40 g, agua destilada 20
mL) y posteriormente con la ayuda de un
microscopio compuesto marca Boeco se
realiz la identificacin. La identificacin de
bacterias se realiz siguiendo algunas pautas
del esquema de Schaad (1988), complementado con pruebas morfolgicas, fisiolgicas y
bioqumicas.
Los porcentajes de germinacin de semillas e incidencia de hongos y de bacterias, de
acuerdo al tratamiento, fueron sometidos a
anlisis de varianza, complementado con la
prueba de comparacin de Duncan al 5%.

RESULTADOS Y DISCUSIN
Germinacin de semillas.
El anlisis de varianza indic diferencias
significantes entre tratamientos a los 4, 7 y
14 das (p= 0,0002 y p= 0,0116 y p= 0,0813,
respectivamente).
A los 4 das de evaluacin, Benomil en
las dosis de 100, 200 y 400 ppm, permiti
una germinacin superior al 80%. Despus de
7 das, la germinacin con estas dosis, fue
superior al 90% y se mantuvo estable despus
de 14 das (Tabla 1). Esto confirma los resultados de Castao-Zapata y Zepeda (1987),
quienes demostraron que Benomil en dosis
de 1.000 ppm, permiti la germinacin de
semilla de frjol significativamente, llegando
hasta el 98%. Despus de Benomil y en los
mismos periodos de tiempo, la mezcla de
Carboxin+Captan en las dosis de 100, 200 y
400 ppm, fue el mejor tratamiento, con el
cual se obtuvo una germinacin que vari
entre 80 y 92%, la cual fue incrementando a
travs del tiempo. La germinacin en los
testigos oscil entre el 48 y 68%, lo que
demuestra el efecto benfico del tratamiento
de semilla de frjol con estos productos (Tabla 1).
Incidencia de hongos
Hubo diferencias altamente significativas a
los 4, 7 y 14 das despus del tratamiento (p=
0,0098, p= <0,001, p= <0,001, respectivamente). Benomil en dosis de 200 ppm, fue el
nico que erradic totalmente los hongos
presentes en las semillas al cabo de los 14
das, contrastando con el testigo que al cabo
de los siete das ya tena una incidencia del
100% de hongos (Tabla 2), lo que demuestra
la gran eficacia de este producto para la
erradicacin de hongos en semillas. CastaoZapata y Zepeda (1987), demostraron previamente este efecto en semillas de frjol, el
cual es atribuido a la actividad sistmica de
Benomil y a su amplio espectro de accin.
Esto destaca la gran importancia que tiene el
tratamiento de semillas destinadas para siem-

Tabla 1. Germinacin (%) de semillas de frijol


Cargamanto blanco de acuerdo con el tratamiento
Incidencia (%) de
Tratamiento
hongos
(ppm o mL)
4 DDT 7 DDT 14 DDT

Benomil 50

0c

0f

40 cd

Benomil 100

0c

4 ef

16 de

Benomil 200

0c

0f

0e

Benomil 400

0c

4 ef

8e

Captan 50

8 abc

32 cdef 48 bc

Captan 100

4 bc

36 cde 48 bc

Captan 200

0c

32 cdef 40 cd

Captan 400

0c

20 def 40 cd

Carboxin+Captan 50

4 bc

52 cd

88 a

Carboxin+Captan 100

4 bc

60 bc

88 a

Carboxin+Captan 200

12 abc 88 ab

96 a

Carboxin+Captan 400

0c

52 cd

100 a

Burkholderia cepacia 1,0

28 a

44 cd

100 a

Burkholderia cepacia 1,5

8 abc

36 cde 100 a

Burkholderia cepacia 2,0

24 ab

40 cd

Burkholderia cepacia 2,5

8 abc

28 cdef 76 ab

92 a

28 a
100 a 100 a
DDT = Das despus del tratamiento. *Letras
iguales denotan que no existen diferencias significativas al 5% de probabilidad
Testigo absoluto

Identificacin de microorganismos. Se
identificaron cinco gneros de hongos: Fusarium Link ex Grey, Penicillium Link, Alternaria (Fries) Keissler, Rhizoctonia Khn y
Rhizopus (Ehrenberg: Fries) Vuillemin y dos
de bacterias Xanthomonas Smith y Bacillus
Cohn. Schanathorst (1954) identifico varias
especies de Bacillus en semillas de frijol,
entre ellos B. subtilis (Ehrenberg) Cohn, B.
cereus Frankland & Frankland y B. megaterium Cohn y estos fueron el grupo de microorganismos ms frecuentes encontrados en
semillas. Ninguna de las bacterias fue patognica para P. vulgaris. var. Black Valentine. La evidencia indica que no hay bacterias
presentes en tejidos embrionarios, pero son
comunes bajo la testa de las semillas de frijol.
Lo anterior confirma que la colonia de Bacillus Cohn encontrada en la semilla de frijol
pudo estar presente como un controlador
biolgico o como un contaminante ms no
como una bacteria patognica.
El producto que tuvo la menor incidencia
de microorganismos fue Benomil, con el cual
a dosis bajas (50 y 100 ppm) tuvo presencia

Bacillus

Xanthomonas

Rhizopus

Rhizoctonia

Alternaria

Penicillium

Producto

Fusarium

Tabla 2. Incidencia (%) de hongos en semillas de frijol Cargamanto blanco de acuerdo con el tratamiento.
Tratamiento
(ppm o mL)

bras con producto de accin sistmica.


El tratamientos con Carboxin+Captan no
reflej los resultados esperados, aunque se
obtuvo germinaciones entre 76 y 92% a los
14 das despus del tratamiento, con una
incidencia de hongos que oscil entre 88 y
100%. Resultados similares obtuvo Mora
(1996) quien al tratar semilla de frjol con
Carboxin + Captan obtuvo una incidencia
alta de hongos (57%) a los 18 das de evaluacin en comparacin con el testigo (37%), y
una germinacin del 86%.

Benomil

50
20
20
100
8
8
200
4
400
4
Captan
50
20
16
100
4
4
8
200
20
400
32
20
Carboxin+Captan
50
88
100
60
8
20
200
76
16
400
24
20
24
20
Burkholderia cepacia
1,0
68
4
28
1,5
84
12
4
2,0
40
20
32
2,5
60
4
4
Testigo
0
80
20
DDT = Das despus del tratamiento *Letras iguales denotan que no existen diferencias significativas al 5%
de probabilidad.

de Fusarium sp. (20%), Rhizopus sp. (20%) y


Alternaria sp. (8%), pero, a dosis altas (200 y
400 ppm), no crecieron hongos, slo
Xanthomonas sp. y Bacillus sp. con 4%.
Por el contrario, los productos que tuvieron la mayor incidencia de hongos y en las
cuatro dosis empleadas fueron Carboxin+Captan y B. cepacia, en un rango de
24 y 88% (Tabla 3).

poblacin de plantas, o bien causar problemas


patolgicos en los cultivos una vez establecidos. Por esto se requiere emplear prcticas
que eliminen el inculo presente en la semilla. Los fungicidas, en particular sistmicos,
como Benomil, ofrecen una alternativa eficaz para la erradicacin de hongos, si no se
dispone de semilla certificada.

Tabla 3. Incidencia (%) de gneros de hongos y bacterias presentes en semillas de frijol Cargamanto
blanco.
Tratamiento
Germinacin (%) de semillas
4 DDT
7 DDT
14 DDT
Producto
(ppm o mL)
Benomil
50
72 abc*
80 abcd
88 abc
100
88 ab
92 ab
92 ab
200
92 a
96 a
96 a
400
84 abc
96 a
96 a
Captan
50
44 cde
84 abc
92 ab
100
64 abc
88 abc
96 a
200
60 abc
92 ab
92 ab
400
52 abcde
92 ab
92 ab
Carboxin+Captan
50
72 abc
72 abcd
76 abc
100
76 abc
88 abc
88 abc
200
76 abc
88 abc
88 abc
400
80 abc
92 ab
92 ab
Burkholderia cepacia
1,0
20 de
68 bcd
76 abc
1,5
60 abc
92 ab
92 ab
2,0
56 abcd
80 abcd
80 abc
2,5
16 e
64 cd
64 c
Testigo
48 bcde
56 d
68 bc
DDT = Das despus del tratamiento *Letras iguales denotan que no existen diferencias significativas al
5% de probabilidad.

De acuerdo a estos resultados, el tratamiento que produjo el mayor porcentaje de


semillas sanas fue Benomil con 96% en las
dosis de 200 y 400 ppm. Por el contrario, B.
cepacia, en las dosis de 1,0 y 1,5 mL, tuvieron una incidencia de microorganismos del
100%, igual al testigo (Figura 1).
Los resultados demostraron que las semillas de frjol pueden ser un medio ideal para
el transporte de microorganismos, en particular de hongos, que afectan la germinacin y
2011 Fitopatologa Colombiana /Volumen 35 No 1

CONCLUSIONES
El tratamiento ms eficaz para erradicar
hongos presentes en la semilla de frijol
variedad Cargamanto blanco fue Benomil
a una dosis de 200 ppm, incrementando
significativamente la germinacin.
El hongo ms frecuente en las semillas
fue Fusarium sp.
9

Figura 1. Porcentaje de semillas sanas segn el tratamiento.

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EVALUACIN DEL POTENCIAL ANTAGNICO DE BACTERIAS AISLADAS DE LA


RIZSFERA DE PAPA CRIOLLA (Solanum phureja) SOBRE Phytophthora infestans
(Mont.) de Bary*
David Granada1., Gina F. Pasaje H1., Eliana M. Zuluaga R1., Felipe A. Gmez V1., Carlos Pelez J2. y E. Antoni Rueda L.1
1

Unidad Fitosanidad y Control Biolgico Corporacin para Investigaciones Biolgicas (CIB), 2 Grupo GIEM Universidad de Antioquia
Correo electrnico de contacto: antonyrueda@yahoo.es
*Artculo cientfico, recibido para publicacin el 21-04-2011; aceptado el 18/05/2011

RESUMEN

SUMMARY

El oomiceto Phytophthora infestans (Mont.) de Bary es el causante


del tizn tardo en cultivos de papa (Solanum spp.). Su control qumico genera altos costos con poca efectividad y alta residualidad. El
objetivo de este estudio fue evaluar la capacidad antagnica de diez
aislamientos bacterianos, obtenidos de suelos cultivados con Solanum
phureja como controladores potenciales de Phytophthora infestans.
Para demostrar su capacidad de restriccin del crecimiento del patgeno. se emplearon pruebas de antagonismo in vitro por enfrentamiento directo y evaluaciones de la actividad extractos, obtenidos a
partir de fermentaciones del antagonista. Cinco de los aislamientos
evaluados mostraron actividad antagnica; de los cuales, tres exhibieron actividad antimicrobiana en sus extractos. Al evaluar la actividad
inhibitoria a concentraciones del 1; 0,8; 0,6; 0,4; 0,2 y 0,05 %, se
observ la inhibicin total de P. infestans con los extractos de los
aislamientos 4-ant-04 y 7-ant-04 a concentraciones de 0,4 y 0,2 %,
respectivamente. Este resultado se correlacion directamente con los
ensayos de antagonismo donde 4-ant-04 y 7-ant-04 presentaron los
mximos valores de inhibicin (79 y 69 %, respectivamente). Los
resultados revelan la importancia de la produccin de compuestos
activos con la capacidad antagnica y sugieren que algunos de los
aislamientos bacterianos empleados en este estudio, al igual que sus
extractos crudos, tienen un enorme potencial en el control de P. infestans.

Evaluation of the antagonistic potential of the bacteria isolated


from rhizosphere of native potato (Solanum phureja) on Phytophthora infestans (Mont.) de Bary.

Palabras clave: tizn tardo, antagonismo, extracto crudo, aislamientos bacterianos

INTRODUCCIN
En Colombia el cultivo de papa constituye
una de las actividades agrcolas de mayor
importancia a nivel econmico y social, por
su aporte a la seguridad alimentaria del pas y
por el nivel de empleo rural que genera (Canter, 1999; Rivera et al., 2010).
El sistema productivo de la papa presenta
ataques de plagas y enfermedades que obligan a los agricultores a realizar labores de
prevencin, manejo y control, acordes con la
disponibilidad de recursos tcnicos y financieros (Bernal y Hernn, 2001).
La enfermedad que ocasiona ms prdidas econmicas en cultivos de papa es el
tizn tardo, causada por el Oomycete (Phytophthora infestans) (Zoteyeba y Patrikeeva,
2010; Boonekamp et al., 2008; Cruz, 2002;
Lozoya et al., 2006a; Fry y Goodwin 1997..
En Colombia, es especialmente importante, debido a la ubicacin de los cultivos en

Phytophthora infestans (Mont.) de Bary is the causal agent of the late


blight disease on potato crops (Solanum spp.). Its chemical control
generates high costs, low efficiency and high residual effect on the
environment. The objective of this work was to evaluate the antagonistic capacity of ten bacterial isolates, obtained from soil cultivated with
Solanum phureja, against Phytophthora infestans. In vitro antagonistic
determinations by direct confrontation were used and crude extracts,
obtained by fermentation processes of the isolates, were assessed
through bioassay. Five of the isolates showed antagonistic activity.
The extracts of three of them exhibited biological activity. Moreover,
the inhibitory activity of the extracts at different concentrations (1, 0.8,
0.6, 0.4, 0.2 y 0.05 %) showed a 100 % inhibition for the isolates 4ant-04 and 7-ant-04 at concentrations of 0.4 y 0.2 %, respectively.
Since a maximum inhibition for de antagonism test was observed for
4-ant-04 and 7-ant-04 (79 y 69 %, respectively), there was a direct
correlation between this result and the crude extracts bioassay. Active
compounds production has been found vital for the antagonist capacity. The results suggest that some bacterial isolates employed in this
study, as well as their bacterial crude extracts, have great potential to
control P. infestans.
Keywords: late blight, antagonism, bacterial crude extracts

regiones con condiciones climticas favorables para el desarrollo del patgeno (zonas
altas y fras de la regin andina) y a la siembra de materiales altamente susceptibles,
condiciones que contribuyen a que el patgeno tenga un ciclo muy corto y de mayor
agresividad (Vega, 2004). Por otra parte, sus
caractersticas reproductivas generan cepas
con alta variabilidad gentica, las cuales
pueden ser ms agresivas y resistentes a los
fungicidas empleados para su manejo (Daayf
et al., 2003; Jaramillo, 2004; Lozoya et al.,
2006b).
Para controlar la enfermedad en los cultivos de papa, los agricultores colombianos
realizan aplicaciones de fungicidas protectantes y/o sistmicos de manera intensiva, lo
cual representa un costo que oscila entre el 10
y el 30 % del valor total de la produccin de
los cultivos de papa (Jaramillo, 2004). donde
los ms empleados son el Metalaxil y Manzate. El uso excesivo de estos pesticidas genera
2011 Fitopatologa Colombiana /Volumen 35 No 1

problemas ambientales, sobre la salud humana y otros seres vivos, a lo que se le suma la
aparicin de genotipos del patgeno resistentes a los fungicidas (Maldonado et al., 2002;
Solange, 2007).
El control biolgico mediante el uso de
microorganismos antagonistas es una de las
alternativas que ms atencin ha recibido en
los ltimos aos (Rivera et al., 2010; Valdir,
2006; Daayf et al., 2003). La existencia de
microorganismos asociados de forma natural
a las plantas, los hace ideales para seleccionar
entre estos a aquellos que tienen la capacidad
de inhibir patgenos. As, el control biolgico
mediante el uso de microorganismos antagonistas, surge como respuesta a la bsqueda de
nuevas formas de control de patgenos en la
produccin agrcola, en las que prima la
calidad de las cosechas y el respeto a los
recursos naturales y humanos (Ezziyyani,
2006).

11

La presente investigacin se enfoc en


evaluar la capacidad antagnica de diez
aislamientos bacterianos obtenidos de suelos
cultivados con Solanum phureja y en la
determinacin de la actividad antimicrobiana
de sus productos metablicos sobre P. infestans, bajo condiciones de laboratorio, como
fundamento para la generacin de alternativas de control del Tizn tardo, basadas en el
desarrollo de productos eficaces y de bajo
impacto ambiental para su uso en el sistema
productivo de la papa.

MATERIALES Y MTODOS
Material biolgico

de P. infestans. Cada aislamiento cont con


cinco rplicas.
El efecto antagnico de las bacterias se determin mediante mediciones del radio de
crecimiento del fitopatgeno en comparacin
con un control no tratado en un intervalo de
tres das.
El antagonismo se expres como el porcentaje de inhibicin, calculado a partir del rea
bajo la curva (ABC) de la cintica de crecimiento de P. infestans enfrentado a los aislamientos con respecto al ABC de su control no
enfrentado. El ABC se determin mediante el
conteo de nmero de pxeles en el programa
de fotografa GIMP, a partir de los grficos
de la cintica de crecimiento

tractos bacterianos, de los cinco aislamientos


que presentaban mayor inhibicin se seleccionaron tres, a los cuales se les realiz diluciones sucesivas (1:9) de los extractos inciales para obtener 6 concentraciones diferentes
de los mismos (8000, 6000, 4000, 2000 y
500 ppm) posteriormente se sirvieron en
cajas de petri. Luego se sembr un disco del
fitopatgeno del cultivo base en cada caja y
se incubaron durante 20 das a 18 C en
oscuridad.
Se realizaron mediciones del dimetro de
crecimiento del fitopatgeno (mm) en comparacin con un tratamiento control donde no se
aplic ningn extracto bacteriano.
Anlisis Estadstico

Se emplearon diez aislamientos bacterianos


correspondientes a bacilos Gram negativos,
codificados como 4-ant-04, 4-ant-08, 4-ant10, 6-ant-04, 7-ant-03, 7-ant-04, 7-ant-05, 7ant-08, 7-ant-09, 7-ant-10, con capacidad
antagnica, suministrados por el grupo de
investigacin en Microbiologa Agrcola del
Instituto de Biotecnologa (IBUN), adscrito a
la Universidad Nacional de Colombia, sede
Bogot. La cepa del fitopatgeno, Phytophthora infestans, fue proporcionada por el
laboratorio de Micologa y Fitopatologa de la
Universidad de los Andes..
Determinacin de las condiciones de crecimiento y cultivo de P. infestans (Mont.)
de Bary, y los aislamientos bacterianos
El crecimiento del patgeno y de los aislamientos bacterianos se evalu en los medios
de cultivo Papa Dextrosa agar (PDA)
Merck, agar Sabouraud, Merck y agar
Centeno (agar 16 g.L-1 + harina de centeno al
2 % (p/v)). Este crecimiento se evalu a 18 y
30 C, bajo condiciones de luz o oscuridad
(Slininger, 2007). Para las pruebas de antagonismo se evaluaron los medios Sabouraud,
Merck ms Centeno y Luria Bertani (LB)
BD; ambos suplementados con harina de
centeno al 2% (p/v).
Determinacin de antagonismo in vitro
Para evaluar la actividad antagnica de los
aislamientos bacterianos se realizaron ensayos de enfrentamiento en cajas de Petri,
utilizando como medio de cultivo agarSabouraud ms Centeno al 2 %. A partir de
una una caja cultivada con Phytophthora
infestans en agar Centeno e incubada en
oscuridad a 18 C durante 20 das, se tom un
disco de 6 mm y se ubic en la periferia de
varias cajas de Petri. Despus de trece das de
incubacin a 18 C, se inocularon los aislamientos bacterianos, previamente incubados
en agar LB durante 48 horas a 25 C. La
inoculacin de la bacteria se realiz a partir
de una colonia aislada, sembrando mediante
una lnea recta en el lado opuesto a la siembra

Evaluacin del efecto inhibitorio de los


extractos bacterianos
Basados en los ensayos de antagonismo, se
seleccionaron los aislamientos que presentaron mayor efecto inhibitorio. Las bacterias
seleccionadas se multiplicaron en medio
lquido, inoculando un mL de suspensin en
250 mL de medio Tripticasa de Soya (TSB),
Merck. Despus de inoculacin el medio se
ferment en un agitador orbital a 30 C, 150
rpm, durante seis das.
Posterior a la incubacin, los caldos fermentados se filtraron para extraer su biomasa
y los sobrenadantes se congelaron a -20 C y
luego se liofilizaron. El slido obtenido se
extrajo empleando tres porciones de 30 mL
de metanol.
El solvente se elimin por evaporacin
bajo presin reducida, obtenindose de este
modo el extracto crudo para cada aislamiento.
Los extractos obtenidos se diluyeron en
agua destilada estril, llevndose a concentraciones de 10, 8, 6, 4, 2 y 0,5 %, y se trataron
con radiacin UV durante 30 minutos.
Para evaluar la actividad antimicrobiana,
se realiz una dilucin 1:10 de los extractos
(1 mL de extracto en 9 mL de medio) en agar
Sabouraud con centeno a 45 C, para una
concentracin final de 1; 0,8; 0,6; 0,4; 0,2 y
0,05 %. Luego de una rpida agitacin en un
Vortex, se sirvieron en cajas de Petri de 5,3
cm de dimetro. Una vez solidificado el agar,
se sembr un disco del fitopatgeno en el
centro de cada caja y se incubaron durante 20
das a 18 C en oscuridad. Cada tratamiento
cont con cinco rplicas.
La inhibicin de los extractos se calcul
a partir del ABC de la cintica de crecimiento
de P. infestans en presencia del extracto, con
respecto al ABC de un control sin tratamiento. La evaluacin de las diferentes concentraciones se llev a cabo nicamente con los
aislamientos que presentaron la mayor inhibicin a una concentracin de 1% de extracto.
Evaluacin de la concentracin de los
extractos bacterianos
En la evaluacin antimicrobiana de los ex-

12

2011 Fitopatologa Colombiana /Volumen 35 No 1

Todos los experimentos se realizaron bajo un


diseo completamente al azar, se establecieron dos ensayos independientes en el tiempo,
que fueron evaluados mediante un anlisis de
varianza (Anova). Para cada ensayo se realiz
un Anova con un nivel de significancia del
0,05 mediante el paquete estadstico SAS,
complementariamente se realiz una prueba
de comparacin de medias de Tukey.

RESULTADOS
Determinacin de las condiciones de crecimiento y cultivo de P. infestans (Mont.)
de Bary, y de los aislamientos bacterianos
El medio de cultivo agar centeno, entre los
tres medios evaluados, fue el que permiti el
mejor desarrollo de P. infestans, mientras que
las mejores condiciones de crecimiento se
dieron a 18 C en oscuridad. Para los ensayos
de antagonismo, el medio con mejor desempeo fue Sabouraud suplementado con Centeno, ya que favoreci el crecimiento, tanto
de P. infestans como de los aislamientos
bacterianos
Determinacin de antagonismo in vitro
Se encontr que cinco de los aislamientos
bacterianos utilizados, 7-ant-04, 4-ant-04, 4ant-08, 4-ant-10 y 7-ant-10, mostraron efecto
antagnico frente P. infestans, con un porcentaje de inhibicin superior al 45 % en el
ensayo No 1 y al 49 % en el ensayo No 2,
destacndose los aislamientos 7-ant-04, 4ant-04, 4-ant-08 y 4-ant-10, con inhibiciones
de 49,3; 57,4 y 45,3 % respectivamente (ensayo No 1) , y 65,6; 69,8; 58 y 49 % respectivamente (ensayo No 2).
El aislamiento 4-ant-04 present la mejor
actividad durante los dos ensayos (Figura 1).
Adicionalmente, se observo variabilidad en la
actividad en los aislamientos 7-ant-05 y 7ant-10 (Figura 2).
El anlisis de varianza mostr diferencias
estadsticas altamente significativas entre los
aislamientos con una p <0,0090 para el ensayo No 1 y p<0,0001 para el ensayo No 2.

Evaluacin de los extractos bacterianos


De manera concordante con los ensayos No 1
y No 2, independientes en el tiempo, de los
extractos obtenidos a partir de los cinco
aislamientos con actividad antagnica, los
provenientes de las bacterias 7-ant-04, 4-ant04 y 4-ant-10 presentaron actividad frente a
P. infestans, mientras que los de las bacterias
4-ant-08 y 7-ant-10 no mostraron inhibicin.
Adicionalmente, se evidenci efecto significativo de la concentracin sobre la actividad
inhibitoria (p <0,0001) (Figura 3).
Se destacan los extractos de los aislamientos 7-ant-04 y 4-ant-04, los cuales mostraron inhibicin del 100 % a partir de las
concentraciones de 0,2 y 0,4 %, respectivamente (Figura 3).

Figura 1. Ensayo antagnico. a. Control. b. Aislamiento 4-Ant-04 contra P. infestans, c. Aislamiento 7Ant-04 contra P. infestans. Ntese la diferencia entre las zonas de inhibicin del crecimiento por efecto de
los aislamientos antagnicos

DISCUSIN
Cinco de los diez aislamientos bacterianos
evaluados tuvieron efecto antagnico sobre P.
infestans. La capacidad de inhibicin fue
notoria, ya que los aislamientos presentaron
inhibiciones por encima del 45,3 % y con un
mximo de 69,8 %. Este resultado es muy
promisorio, segn el criterio definido por
Bentez et al (2004), quin sugiere una inhibicin mnima 40 % para ser considerada
significativa. Los resultados del antagonismo,
obtenidos por enfrentamientos duales, muestra que los aislamientos 7-ant-04 y 4-ant-04
fueron los mejores inhibidores del crecimiento de P. infestans, con valores de inhibicin
del 65,6 % y 69,8 %, en el ensayo No 2, y de
57,4 % y 49,3 %, en el ensayo No 1. Las
diferencias en los porcentajes de inhibicin
entre los aislamientos bacterianos pueden
estar directamente relacionadas con diferencias taxonmicas y genotpicas entre estos
microorganismos, lo cual se refleja en la
expresin diferencial de su potencial antagnico.
Por otra parte, se encontr que los extractos de los aislamientos bacterianos 7-ant-04 y
4-ant-04 tuvieron alta capacidad de inhibicin sobre P. infestans a concentraciones
relativamente bajas (0,2 y 0,4 %, respectivamente); resultados que estn en concordancia
con reportes de investigaciones que emplean
extractos de bacterias como Bacillus subtilis
o extractos de plantas como Solidago canadensis, con actividad promisoria sobre P.
infestans (Worasatit et al., 1994).
La actividad mostrada por los extractos,
especialmente los provenientes de los aislamientos 7-ant-04, 4-ant-04 y 4ant-10, sugiere que el control ejercido sobre el fitopatgeno se debe principalmente a un mecanismo de
antibiosis.
La produccin de compuestos con actividad antimicrobiana, por parte del antagonista,
se puede soportar con la presencia de halos de
inhibicin, el hecho de que el medio tenga la
cantidad de nutrientes suficientes para descar-

Figura 2. Ensayos de antagonismo (repetidos en el tiempo) de los aislamientos bacterianos sobre Phytophthora infestans. Letras diferentes indican diferencias significativas entre los tratamientos a un nivel
de significancia del 0,05

Figura 3. Porcentaje de inhibicin de los extractos de los aislamientos bacterianos sobre Phytophthora
infestans

tar la competencia como un posible modo de


accin y las evidencias que reportan diferentes autores sobre el potencial de las bacterias
como prolficos productores de compuestos
antimicrobianos (Landa et al, 1997; Mizubuti
et al., 2007).
A pesar de que las pruebas de antagonismo in vitro no representan necesariamente el
grado de expresin de un biocontrolador en
condiciones naturales, s reflejan la capacidad
y variabilidad gentica del antagonista, y la
del fitopatgeno para resistirlo, lo que indica
el potencial que tienen estos aislamientos
para ser evaluados a nivel de campo (De
Costa et al, 2008).
Adicionalmente, se resalta una importante
correlacin entre los resultados obtenidos
para los enfrentamientos duales y la inhibicin mediante el uso de los extractos, donde
los aislamientos 7-ant-04 y 4-ant-04 fueron
los ms destacados por su alta inhibicin
2011 Fitopatologa Colombiana /Volumen 35 No 1

tanto en los ensayos de antagonismo como en


los ensayos de actividad antimicrobiana.

CONCLUSIONES
La evaluacin de la capacidad antagnica de
los aislamientos bacterianos de rizsfera de
papa frente a Phytophthora infestans mediante enfrentamiento directo permiti determinar
que los aislamientos con mayor capacidad
inhibitoria fueron: 7-ant-04, 4-ant-04, 4-ant08, 4-ant-10 y 7-ant-10.
La capacidad de inhibicin, medida en
porcentaje, fue notoria, ya que los aislamientos con actividad presentaron inhibiciones por
encima del 45,3% y con un mximo de
69,8%, siendo resultados de inhibicin promisorios segn el criterio sugerido por Bentez et al. (Bentez et al., 2004).
Se han reportado hallazgos de aislamientos bacterianos para el control del Tizn
13

tardo por parte de autores como Daayf et al.


(2003), quienes, a partir de filsfera y rizoplano de papa, encontraron grupos bacterianos con capacidad inhibidora de P. infestans.
De igual forma, El-Sheikh et al. (2002),
trabajando en papa, evaluaron, in vitro, 83
aislamientos bacterianos, de los cuales catorce tuvieron la capacidad de restringir el crecimiento de P. infestans. Esto permite destacar la importancia de los microorganismos
asociados a los propios cultivos como alternativa potencial para el control del Tizn tardo
(Cao y Forrer, 2001; Tran et al., 2007).
A partir de los ensayos de actividad antimicrobiana de los extractos fue posible determinar que los productos metablicos de
excrecin, o secrecin, de las bacterias antagonistas tienen un aporte importante en la
actividad antagnica.
Adicionalmente, los experimentos realizados, permitieron determinar un efecto
diferencial de la actividad antimicrobiana de
los extractos obtenidos de los diferentes
aislamientos, encontrndose que los provenientes de 7-ant-04 y 4-ant-04 tuvieron la
mayor capacidad de inhibicin sobre P. infestans, resultados que estn en concordancia
con reportes en los que se emplearon extractos de bacterias como Bacillus subtilis, o
extractos de plantas como Solidago canadensis, con promisoria actividad sobre P. infestans (Worasatit et al., 1994). Igualmente, a
partir de los hallazgos de Tan et al. (2007),
donde se evaluaron molculas de Pseudomonas sp. con resultados sobresalientes en la
inhibicin de P. infestans, se destacaron
mecanismo de antibiosis por produccin de
metabolitos bacterianos. En nuestro caso, el
mecanismo de antibiosis por parte de las
rizobacterias se hizo evidente debido a la
correspondencia entre los resultados obtenidos en los enfrentamientos duales y la inhibicin mediante el uso de los extractos, los
cuales a su vez demostraron un efecto sobre
el fitopatgeno dependiente de la concentracin.
La importancia del presente estudio radica en la seleccin preliminar y tipificacin de
aislamientos con uso potencial como bioconroladores, de modo que puedan usarse, ya sea
de manera directa en cultivos con el fin de
enriquecer la microflora edfica y de la filsfera o a travs de la aplicacin de un principio activo aislado a partir del microorganismo
antagonista.

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EVALUACIN DE LA RESPUESTA FITOALEXNICA EN PAPA (Solanum tuberosum) Y


DETERMINACIN PRELIMINAR DE PRIMING EN TOMATE (Solanum lycopersicum)*
David Granada1, Jennifer Salguero1, Walter Murillo3, Carlos Pelez2 y Antoni Rueda1
1

Unidad de Fitosanidad y Control biolgico, Corporacin para Investigaciones Biolgicas. Medelln, Antioquia, Colombia;
2
Grupo GIEM Universidad de Antioquia; 3Grupo GIPRONUT Universidad del Tolima
Autor para correspondencia: Ever Antoni Rueda Lorza, correo electrnico: arueda@cib.org.co
*Artculo cientfico, recibido para publicacin el 21/04/2011; aceptado el 18/05/2011

RESUMEN

SUMMARY

La produccin de fitoalexinas de tipo sesquiterpnicas en la familia


Solancea ocupa un lugar muy importante en los mecanismos de
defensa al interior de este grupo taxonmico. En esta investigacin se
evalu la induccin de la respuesta fitoalexnica en dos Solanceas de
importancia econmica en Colombia, como fundamento para comprender aspectos fisiolgicos y bioqumicos de las respuestas de defensa. Se realiz la induccin abitica en papa, variedad Diacol, y una
aproximacin a la induccin del estado fisiolgico de priming en
tomate con radiacin ultravioleta frente a la infeccin con Fusarium
oxysporum. La induccin de papa con CuCl2 mostr un aumento en la
biosntesis de metabolitos de estrs con actividad antifngica de manera diferencial al control no inducido, el cual no present dicha
actividad. El anlisis conjunto de los resultados cromatogrficos,
espectroscpicos y de los bioensayos muestran que la inoculacin de
tomate con F. oxysporum evidencia la activacin de la respuesta fitoalexnica y la induccin previa con radiacin UV sugiere la activacin
de un mecanismo de priming.

Evaluation of phytoalexin response in potato (Solanum tuberosum)


and preliminary determination of priming in tomato (Solanum
lycopersicum)

Palabras clave: fitoalexinas, induccin abitica y abitica, Fusarium


oxysporum.

The production of like-sesquiterpene phytoalexins in the family Solanaceae has an important place in the defense mechanisms inside this
taxonomic group. The induction of phytoalexin response in two economically important Solanaceae in Colombia was evaluated, as a basis
for understanding physiological and biochemical defense responses.
The abiotic induction in potato variety Diacol and an approach to the
induction of physiological state called priming with ultraviolet radiation in tomato against Fusarium oxysporum infection was carried out.
The CuCl2 induction of potato showed an increase in the biosynthesis
of stress metabolites with antifungal activity compared with untreated
control, which did not show such activity. The joint analysis of the
chromatographic results, spectroscopic and bioassays showed that
inoculation of tomato with F. oxysporum induced the phytoalexin
response activation. A mechanism of priming activation after induction with UV radiation is suggested.
Keywords: Potato, tomato, phytoalexins, biotic and abiotic induction,
Fusarium oxysporum

INTRODUCCIN
La familia Solancea rene especies de
importancia econmica en el mundo y en
Colombia en donde se destacan los cultivos
de tomate de rbol, papa, tomate de mesa y
tabaco (Hawkes, 1999). El potencial productivo de estas especies se ve afectado por el
ataque de fitopatgenos que influyen negativamente sobre su produccin (Anderson et
al, 2004). Un enfoque de la investigacin
dirigido hacia la bsqueda de alternativas
para el control de las enfermedades tiene que
ver con el potencial gentico y bioqumico
para activar respuestas de defensa frente a
estreses biticos y abiticos. Dentro de
dichas respuestas, la produccin de fitoalexinas ha sido uno de los mecanismos que
ms ha llamado la atencin de investigadores, debido a las actividades antimicrobianas
directas sobre los fitopatgenos (Grayer
2001; Jeandet et al, 2003).
Las fitoalexinas se consideran fundamentalmente como un tipo especial de metabolitos de estrs, cuya sntesis de novo es
inducida por factores qumicos, fsicos,

microbiolgicos (Walters et al, 2007) y que


desempean un papel importante y activo en
la resistencia de las plantas a los patgenos
(Woodward y Pegg, 1986)..
La familia Solancea ocupa histricamente un lugar importante en la investigacin relacionada con las fitoalexinas si se
considera que el primer reporte de la presencia de estos compuestos se realiz precisamente en papa (Poiatti et al, 2009). La evaluacin sobre varias especies de la familia
Solancea identific fitoalexinas sesquiterpnicas (Kawauchi et al, 2010; Harborne,
1999), destacndose, la rishitina que fue
aislada de Lycopersicon esculentum despus
de inocularse frutos de tomate con Phytophthora infestans (Elgersma, 1980).
Un enfoque que han tenido los trabajos
con fitoalexinas es la posibilidad de asperjar
los cultivos con elicitores para inducir respuestas preventivas de defensa a varias
enfermedades en los cultivos (Hammerschmidt, 1999. Sin embargo, se ha mencionado
que esta aproximacin tiene como inconveniente el hecho de que la aplicacin repetida
de elicitores podra causar un gasto marcado
2011 Fitopatologa Colombiana /Volumen 35 No 1

de energa y fuente de carbono de los procesos vitales, ya que se conoce que las plantas
cuando desarrollan reacciones de defensa
disminuyen su metabolismo productivo y se
centran en la defensa (lvarez y Espinosa,
2004). Por lo tanto el rendimiento de plantas
elicitadas, sin saber cundo se va a producir
un ataque de un patgeno, redundara en un
gasto innecesario de energa (Grayer y Kokubun, 2001).
No obstante, investigaciones recientes
en resistencia inducida plantean un nuevo
enfoque en el tema de inductores que permitira atacar la dificultad mencionada. Al
respecto, se afirma que ciertos inductores
causan la produccin de un estado fisiolgico llamado priming en el cual las plantas
inducidas se preparan para un posterior
ataque por patgenos, insectos o en respuesta a estreses abiticos, sin todava desencadenar las respuestas de defensa celular y
mostrando dicha activacin de manera ms
fuerte y rpida que las no inducidas, solo
hasta la llegada del estrs. Aunque el fenmeno ha sido conocido por dcadas, los
mayores progresos en el entendimiento de
15

priming solo se han logrado en los ltimos aos (Conrath et al, 2006).
En el presente trabajo se determin el
efecto de la induccin abitica en papa sobre
la respuesta fitoalexnica y la induccin de
priming en tomate, asistida por radiacin
ultravioleta. La actividad de los extractos y
sus fracciones se evalu sobre F. oxysporum.
Adems, se emple cromatografa lquida de
alta eficiencia (HPLC) y resonancia magntica nuclear de protn (RMN1H) para realizar inferencias sobre la biosntesis de fitoalexinas.

MATERIALES Y MTODOS
Reactivos, microorganismos y material
vegetal
Se utilizaron tubrculos de papa (Solanum
tuberosum) variedad Capira, de tipo comercial. Para los ensayos de actividad, se emple el hongo fitopatgeno Fusarium oxysporum ATCC 15648 cultivado en agar extracto de malta (Sigma) a 25 C. y como
reactivos cloruro de cobre pentahidratado
(CuCl2.5H2O), metanol y diclorometano
(Sigma)
Evaluacin de la respuesta fitoalexnica en
papa
Induccin: Se tomaron 15 kg de tubrculos
de papa, los cuales se cortaron en rodajas
entre 0,6 y 1 cm de espesor y se dispusieron
en canastas plsticas, en porciones de dos
kilogramos aproximadamente. Se asperjaron
con una solucin de cloruro de cobre 10 mM
cada 24 h y se mantuvieron a temperatura
ambiente durante 48 h. Posteriormente, las
rodajas se secaron en estufa a 45 C por 48 h
y luego se procesaron en un molino de discos.
Extraccin de metabolitos secundarios: A
500 g del material seco y molido proveniente
del ensayo de induccin se le agreg 1 L de
metanol y se dejo en agitacin por 24 h.
Luego se filtro en algodn y el residuo slido se someti nuevamente al mismo proceso
de extraccin dos veces ms. La solucin
metanlica obtenida se filtr nuevamente
con papel y se someti a evaporacin con
vaci hasta eliminar por completo el solvente. El extracto resultante se lav tres veces
con porciones de 30 mL de diclorometano.
Se filtr el material insoluble en el solvente
y se someti a evaporacin con vaco hasta
que quedo completamente seco.
Evaluacin in vitro de la actividad antifngica de los extractos: La actividad
antifngica se evalu mediante el mtodo de
difusin en agar en cajas de Petri de 5,3 cm
de dimetro, a diferentes concentraciones.
Para ello se prepararon emulsiones al 7,2 %
con los extractos crudos de los tubrculos
16

inducidos y no inducidos y a partir de ellas


se realizaron diluciones a 0,9, 0,6 y 0,3 % en
agar. Como inculo, se tomaron trozos de
cinco mm de dimetro F. oxysporum crecido
en PDA y se determin la actividad antifngica mediante la medicin cintica del
crecimiento del fitopatgeno a 25 C cada 24
horas, durante 10 das, con respecto al control no tratado.
Caracterizacin qumica de los metabolitos activos: A los extractos crudos, tanto
inducido como no inducido, se les realiz
una caracterizacin preliminar cualitativa
para terpenoides mediante la reaccin de 0,5
mL de solucin diclorometalica de extracto
con 0,5 mL de anhdrido actico y una gota
de H2SO4.
Fraccionamiento del extracto inducido
crudo: Se aplic cromatografa de columna
empleando slica 60 (Merck) como fase
estacionaria (5x50cm) y sistemas de solventes compuestos por hexano: acetato de etilo
(4:1, 3:1, 2:1, 1:1), acetato de etilo:diclorometano (1:1, 2:1) y metanol
(100%) (Merck).
Aislamiento de la rishitina: La fraccin
ms activa obtenida a partir del extracto de
material inducido (fraccin 2) fue sometida a
un posterior fraccionamiento mediante cromatografa de columna hasta obtener un
compuesto puro con el Rf reportado para la
rishitina (D'harlingue et al, 1995). La purificacin final se realiz por cromatografa en
capa delgada en un sistema de solventes
ciclohexano: acetato de etilo 1:1. Se visualiz la placa a 254 nm y aplic revelado en
los bordes con vainillina. Al compuesto
aislado se le realizaron anlisis preliminares
por resonancia magntica nuclear de protn
(RMN1H).
Resonancia magntica nuclear de protn
(RMN1H): Se tom una cantidad inferior a
tres mg del compuesto puro y se disolvi en
cloroformo deuterado. Los espectros de
RMN1H registraron a 300 MHz (frecuencia
de 1H), en un espectrmetro Bruker, a 25 C.
Los desplazamientos qumicos () se expresados en ppm.
Induccin de priming en tomate asistido con radiacin ultravioleta
Se tomaron dos kg de tomate y de manera
aleatoria se dividieron en dos grupos. A uno
de ellos se le aplic luz UV-C por 10 min en
una cmara de flujo laminar. Tanto el material inducido por UV como el no inducido
fueron almacenados en recipientes diferentes
a temperatura ambiente y en oscuridad por
48 h.
Induccin bitica con Fusarium oxysporum: Trascurridas 48 h, tanto el material
inducido por UV como el no inducido se
2011 Fitopatologa Colombiana /Volumen 35 No 1

sometieron a desinfestacin de su superficie


con etanol al 96 %. Una vez desinfestado se
tom el material inducido por UV, se dividi
en dos subgrupos al azar y a uno de ellos se
inocul con F. oxysporum mediante 20
punciones empleando una asa estril y posterior aspersin con una suspensin de conidias a una concentracin de 1x105 conidias/mL. Se aplic el mismo procedimiento
al material no inducido por UV obtenindose
cuatro tratamientos denominados: SUSI =
sin UV, sin inculo; SUCI = sin UV, con
inculo; CUSI = con UV, sin inculo;
CUCI = con UV, con inculo. Finalmente
los materiales obtenidos se almacenaron en
diferentes recipientes en oscuridad por 72 h
a 25 C.
Obtencin de extractos y ensayos de actividad antifngica: Transcurrido el tiempo
total de induccin, a cada tratamiento, por
separado, se les extrajo el endocarpio, se
agreg nitrgeno lquido y se llevaron a -20
C. El material se someti a liofilizacin y
posterior extraccin con metanol (2 x 150
mL). El solvente se evapor por vaco para
obtener finalmente los extractos crudos
SUSI, SUCI, CUSI y CUCI. La actividad de
estos extractos se evalu por mediciones de
densidad ptica, empleando un lector de
microplacas a 595 nm, donde el aumento en
la densidad ptica es proporcional al crecimiento del microorganismo.
Perfiles cromatogrficos: Para la obtencin
de los perfiles se emple cromatografa
lquida de alta eficiencia (HPLC) usando un
equipo Agilent serie 1200 con deteccin
UV-DAD (ultravioleta con arreglo de diodos). Las muestras se llevaron a una concentracin de 1000 ppm en metanol:agua (metanol grado HPLC, Merck; agua MiliQ) en
proporcin 20:80 y se pasaron por un filtro
de 0,45 m. Se emple una columna C18
(150 x 2 mm, 5 m), un flujo de 0,5 mL/min
y un volumen de inyeccin de 20 L.

RESULTADOS Y DISCUSIN
Evaluacin de la respuesta fitoalexnica en
papa
El extracto obtenido a partir de los tubrculos de papa inducidos con CuCl2 present
diferencias en la actividad sobre F. oxysporum con respecto al extracto de los no tratados los cuales carecieron de actividad. El
anlisis de varianza de los ensayos dosisrespuesta mostr diferencias con respecto a
los controles, observndose que el efecto
sobre el hongo se increment a medida que
se aument la concentracin del extracto
(Figura 1). Se observaron diferencias estadsticamente significativas de la tasa de
crecimiento en funcin de la concentracin
para las fracciones dos y tres del material

inducido con cobre, con una mayor actividad


por parte de la fraccin dos.
Caracterizacin qumica
Los anlisis mostraron un perfil qumico
diferencial entre los extractos obtenidos del
material inducido y no inducido. Las pruebas
fitoqumicas cualitativas sobre las fracciones
que mostraron actividad biolgica fueron
positivas para alcaloides y terpenoides (datos
no mostrados). Igualmente la cromatografa
en capa delgada present un compuesto con
Rf de 0,2 (banda de coloracin rojiza al
revelar con vainillina) acorde con el reportado para el revelado de fitoalexinas sesquiterpnicas (D'harlingue et al, 1995)..
Adicionalmente, el espectro de RMN1H
de un compuesto purificado a partir de la
fraccin dos del extracto de material inducido mostr un patrn de seales compatible
con el ncleo de una fitoalexina tipo sesquiterpnica (Stoessl et al, 1978).
Aunque, en el espectro no se aprecia adecuadamente la multiplicidad de las seales debido a la poca cantidad de muestra purificada,
se pueden observar las carcterticas espectrales del ncleo de la rishitina como son los
protones allicos entre 1-2 ppmm, protones
vecinales a carbonos oxigenados (seal alrededor de 3,5 ppm) y protones metilnicos
entre 4-5.5 ppm (Figura 2) (Oliveira et al,
2000).

Figura 1. Efecto de la concentracin de las fracciones de los extractos de papa inducida y no inducida,
sobre el crecimiento de Fusarium oxysporum. No elicitada (), elicitada extracto crudo (), fraccin
1(), fraccin 2 (), fraccin 3 ().

A
HO

Induccin de priming en tomate


HO

El ensayo de induccin de priming en


frutos de tomate, asistido con radiacin
ultravioleta en respuesta a la inoculacin con
F. oxysporum, mostr que hubo biosntesis
de metabolitos secundarios por efecto de la
induccin con F. oxysporum y la induccin
con luz ultravioleta (Charles et al, 2008;
Brindle et al, 1983).
Los bioensayos de actividad antifngica,
expresados como porcentajes de inhibicin y
la tasa de crecimiento, demuestran la activacin de la respuesta fitoalexnica en los
frutos de tomate (Figura 3).
Los cromatogramas obtenidos de las
fracciones de los frutos tratados y no tratados confirman la biosntesis de metabolitos,
previamente evaluados por su actividad
antifngica (Figura 4).
Para los extractos inoculados con el
hongo no hay diferencia entre el inducido
con UV y el no inducido en trminos de la
actividad biolgica. Sin embargo, esta s se
manifiesta en la actividad de los extractos no
inoculados (Figura 3). Adems, los perfiles
cromatogrficos exhiben diferencias entre
los inoculados y los no inoculados, observndose la desaparicin de picos en el
material control, sin ningn tipo de induccin (Figura 4. SUSI), y los materiales inducidos, principalmente los que se inocularon
con F. oxysporum, los cuales se destacan por
mostrar un pico con tiempo de retencin de

Figura 2. Espectro de RMN1H de un compuesto obtenido a partir de la fraccin 2 de las muestras de


papa inducidas con cobre. (A) Estructura de la fitolalexina rishitina

1,2 min, cuyo espectro UV coincide con el


reportado para la rishitina (205 nm) (Mureau
et al, 1992)
Respecto a la induccin de priming,
los cromatogramas confirman la biosntesis
de fitoalexinas, no solamente por efecto de la
inducin con el hongo, sino tambin por la
induccin previa con radiacin ultravioleta.
Esto se evidencia en la similitud que presenta este perfil con los perfiles de los extractos
ms activos, aunque mostrando claramente
una menor concentracin con respecto a
estos
Aunque, el bioensayo no muestra claramente el efecto de la induccin de priming
con la luz UV, el perfil cromatogrfico si
demuestra el efecto sobre la biosntesis de
fitoalexinas. Lo anterior se debe probable2011 Fitopatologa Colombiana /Volumen 35 No 1

mente a que a determinada concentracin de


la fitoalexina ya no se detecte un efecto en la
respuesta antifngica debida a la concentracin.
CONCLUSIONES
Los ensayos con los extractos de tubrculos
de papa inducidos y no inducidos con CuCl2
10 mM muestran una actividad antifngica
por parte de los extractos de los tubrculos
inducidos, y que no es observada en los
extractos de los tubrculos sin inducir, sugiriendo que la induccin es capaz de generar
una respuesta en los tejidos de papa, que se
manifiesta en un aumento de la biosntesis
de metabolitos con actividad antifngica.
17

% Inhibicin

Tasa de crecimiento (UA/h)

Figura 3. Actividad antifngica de extractos provenientes de de frutos de tomate tratados con radiacin ultravioleta (CUSI), inoculacin con F. oxysporum (SUCI), radiacin ultravioleta + inoculacin
con F. oxysporum (CUCI) y testigo no tratado (SUSI). Las barras representan el porcentaje de inhibicin mientras que los cuadros vacos representan la tasa de crecimiento del hongo.

SUSI
SUCI
CUSI
CUCI

Figura 4. Perfiles cromatogrficos de extractos provenientes de frutos de tomate tratados con radiacin
ultravioleta (CUSI), inoculacin con F. oxysporum (SUCI), radiacin ultravioleta + inoculacin con F.
oxysporum (CUCI) y testigo no tratado (SUSI)

Durante la caracterizacin fitoqumica


cualitativa preliminar de los extractos activos se resalta, la prueba positiva para terpenoides, lo cual es de importancia si se considera que las fitoalexinas de la familia solancea poseen un ncleo sesquiterpnico.
Las observaciones realizadas a travs de
cromatografa en capa delgada y el espectro
de resonancia magntica nuclear de protn
de un compuesto purificado sugieren que se
trata de un compuesto compatible con un
ncleo sesquiterpnico.
Los perfiles qumicos diferenciales entre
extractos inducidos y no inducidos, las caractersticas estructurales del compuesto
purificado del extracto activo y el evidente
18

efecto dosis respuesta de los extractos inducidos en funcin de la actividad antifngica


demuestran la activacin de la respuesta
fitoalexnica en los tubrculos de papa.
Los ensayos de induccin bitica en tomate con F. oxysporum, asistida por radiacin ultravioleta, sugieren que se pueden
activar mecanismos de priming en la
planta, los cuales pueden potenciar la aparicin de metabolitos con actividad antifngica como un mecanismo de defensa frente al
ataque de patgenos.
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Univ. Reading, Reading/Berkshire, UK.
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19

Diagnstico Fitosanitario

Contacto

La Clnica de Plantas UN es un laboratorio de la Facultad de

c l i p l a n t a s J a b o g @ u n a l edu.co

Agronoma de la Universidad Nacional, Sede Bogot, dirigido a

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la prestacin de servicios de diagnstico vegetal

Servicios
La Clnica de Plantas se

bacterias (2 cajas o tubos por

Indexacin de esquejes de

Anlisis microbiolgico de

realizan actividades de

espcimen).

clavel (5 esquejes).

semillas con identificacin

travs de la prestacin de

Diagnstico de una alteracin

servicios de:

de origen presumiblemente
bitico o abitico.

Montajes permanentes
de hongos, bacterias y
nemtodos (2 lminas).

de hongos, bacterias y

Determinacin de unidades

Deteccin molecular de virus


fitopatgenos.

investigacin y extensin a

(gnero) de hongos y
bacterias.

Cuantificacin de poblaciones
hematodos en suelos (sin

formadoras de colonias

especificar gnero, ni

(ufe) de hongos y bacterias

Cortes histolgicos de

patogenicidad).

sin identificacin (suelo y

vegetales.

Cultivos puros de hongos y

sustratos).

Cmo solicitar ei servicio?


Las muestras se reciben en el laboratorio 321 de la Facultad de Agronoma (Edificio 500), Universidad Nacional de Colombia,
Ciudad Universitaria (Carrera 30 No. 45-03), sede Bogot, de lunes a viernes de 9 am - 12 am y 2 pm - 4pm, acompoadas del
Formato de Recepcin de Muestras, correctamente diligenciado, el cual se encuentra en la pgina web de la Clnica de Plantas
www.clinicadeplantasun.unal.edu.co

MANEJO INTEGRADO DE LA BACTERIOSIS CAUSADA POR Xanthomonas axonopodis


Starr & Garcs EN EL CULTIVO DE GULUPA (Passiflora edulis Sims.)
Eugenio Guerrero-Lpez1, Luz Mery Velandia2 y Lilliana Hoyos-Carvajal1
1

Departamento de Agronoma, Facultad de Agronoma, Universidad Nacional de Colombia, Bogot (Colombia). 2Facultad de Ciencias Agropecuarias, Universidad de Cundinamarca, Fusagasug (Colombia).
Correo electrnico de contacto: limhoyosca@unal.edu.co
Artculo Cientfico, recibido para publicacin el 9/05/2011; aceptado el 13/06/2011

RESUMEN

SUMMARY

Se evalu la eficacia de los inductores de resistencia Acibenzolar-smetil(0,05 g L-1) y cido saliclico (0,025 g L-1), al igual que Sulfato
de cobre (0,75 g L-1) y la prctica de deshoje manual para el control de
la Bacteriosis en el cultivo de gulupa en dos localidades del departamento de Cundinamarca (Colombia). Los productos fueron asperjados
solos y dentro de un plan de rotacin en forma peridica sobre el
follaje de plantas. Estas medidas de saneamiento fueron comparadas
con Oxicloruro de cobre (2,5 g L-1) usado convencionalmente por los
productores de la regin y un testigo absoluto. En cada tratamiento se
evalu la incidencia de la enfermedad, la longitud de ramas centrales,
el nmero de hojas, botones florales y frutos. Como parmetros poscosecha se midi el dimetro ecuatorial y polar, peso fresco y seco y los
slidos solubles en frutos maduros. Se observ que los inductores de
resistencia en las dosis evaluadas impiden el desarrollo de sntomas de
bacteriosis y disminuyen sntomas causados por virus y roa. El nmero de estructuras vegetativas y reproductivas es afectado negativamente por la aplicacin de los inductores como consecuencia de un desgaste energtico producido en la planta. El deshoje por s solo no es efectivo para el control de la enfermedad y tampoco el sulfato de cobre,
que por el contrario mostr fitotoxicidad en la dosis aplicada.

Integrated management of bacterial spot caused by Xanthomonas


axonopodis Starr & Garces in purple passion fruit (Passiflora
edulis Sims.)

Palabras clave: resistencia sistmica adquirida, rotacin, prcticas


culturales, desgaste energtico.

There was evaluated the efficacy of the resistance inductors Acibenzolar-s-metil (0,05 g L-1) and Acid salicilic (0,025 g L-1), as Sulphate of
copper (0,75 g L-1) and the practice of manual falling of leaves for the
control of the bacterial spot in the crop of purple passion fruit in two
localities of the department of Cundinamarca (Colombia). The products were sprayed alone and inside a plan of rotation in periodic form
on the foliage of plants. These measurements of sanitation were compared with Copper oxychloride (2,5 g L-1) used conventional by the
producers of the region and the untreated control plants. In every
treatment there was evaluated the incidence of the disease, the length
of central branches, the number of leaves, floral buttons and fruits. As
parameters postharvest there measured itself the equatorial and polar
diameter, fresh and dry weight and the soluble solids was valued for
mature fruits. It was observed that the resistance inductors in the evaluated dosages prevent the development of symptoms of like bacterial
spot and diminish symptoms caused by virus and scab. The number of
vegetative and reproductive structures is affected negatively by the
application of the inductors as consequence of an energy expense
produced in the plant. The falling of leaves for yes is not only effective
for the control of the disease or the sulphate of copper, which on the
contrary showed phytotoxicity in the applied dosage.
Keywords: systemic acquired resistance, rotation, cultural practices,
energy expense

INTRODUCCIN
El cultivo de la gulupa (Passiflora edulisSims.) se ha convertido en una opcin agrcola atractiva para pequeos, medianos y grandes productores, debido a su alta productividad, su gran potencial de uso y su buena
rentabilidad (Isaacs, 2009). En los ltimos
aos se han incrementado los volmenes
exportados, as como el rea cultivada en
Colombia; llegndose a exportar 1860,89
toneladas de gulupa en fresco en el ao 2010,
por un valor de 7,54 millones de dlares,
principalmente hacia los pases de la Comunidad Europea (MADR, 2010). Una de las
principales limitantes en la produccin y
comercializacin de este cultivo y otras pasifloras es su susceptibilidad al ataque de diversas enfermedades, como es el caso de la
Bacteriosis o Mancha de aceite, causada por
la bacteria Xanthomonas axonopodis Starr &

Garcs Este patgeno ataca la parte area de


la planta afectando hojas, tallos y frutos, en
forma sistmica (Bentez, 2010). Actualmente
el manejo de la enfermedad es limitado
debido a que este se basa principalmente en la
utilizacin de antibiticos, los cuales no han
sido eficaces para el control de la bacteria
(Farfn y Hoyos-Carvajal, 2010).
Lo anterior ha conducido a que se propongan diversas medidas de control de la
Bacteriosis, bajo el esquema del manejo
integrado, utilizando todas las herramientas
de manejo disponibles, las cuales son de
carcter preventivo y ninguna de ellas por si
sola es efectiva para controlar la enfermedad
(Miranda, 2004 citado por Brancaglione et
al., 2009). Dentro de stas, est la resistencia
inducida en plantas con el uso de agentes
qumicos (Riveros, 2010); en razn de que las
plantas disponen de una gran cantidad de
seales, que les permiten reconocer agentes
2011 Fitopatologa Colombiana /Volumen 35 No 1

extraos y activar todos sus mecanismos de


defensa, que incluye reacciones qumicas y/o
bioqumicas, para alertar a las clulas, y
activar la produccin de sustancias txicas,
enzimas u otros compuestos, que inhiban la
penetracin y posterior colonizacin de la
planta por parte del patgeno (Dangl y Jones,
2001 citado por Riveros, 2010). En teora, las
plantas poseen en forma constitutiva, todos
los genes necesarios para responder a la
agresin y estn de manera permanente en la
planta, pero en ciertos casos conviene inducirla o activarla a travs del uso de la resistencia sistmica inducida (RSI) y la resistencia sistmica adquirida (RSA) (Riveros,
2010). Mientras la RSI consiste en un proceso de proteccin activa (sistmica) de una
planta, donde actan como inductores las
rizobacterias promotoras de crecimiento; la
RSA se presenta por la mediacin activa de
un inductor (aplicacin exgena) que hace
21

que se desencadenen uno o varios mecanismos de defensa contra ese patgeno en particular o inespecfico contra otros potenciales
agresores, produciendo una seal sistmica,
protegiendo diferentes rganos de la misma
planta, en un amplio espectro y duracin.
Entre los inductores de RSA se encuentra el
cido saliclico (AS) sus derivados y sus
anlogos funcionales, el cido nicotnico y el
acibenzolar-S-metil(ASM), el cual fue el
primer qumico sinttico desarrollado que
funciona estrictamente como activador de
RSA (Ruess et al.,1996, citado por Riveros
et al., 2004). Se considera que el cido
jasmnico (AJ) y el etileno (E) potencian la
sealizacin para la RSA por vas diferentes a
la dependiente del AS (Riveros, 2010; Pieterse y Loon, 1999).
En varios trabajos se han demostrado las
bondades del uso del AS y el ASM para el
control de hongos, bacterias, virus y algunas
plagas en cultivos de tomate chonto (Lycopersicun esculentum), pepino (Cucumis sativus), tabaco (Nicotiana tabacum), frjol caup
(Vigna unguiculata), girasol (Helianthus
annuus), soya (Glycine max), canola (Brassica napus), crcuma (Curcuma longa), meln
(Cucumis melo), pera (Pyrus communis),
tomate de rbol (Solanum betacea) y plantas
ornamentales como el ciclamen (Cyclamen
persicum) (Cole, 1999; Pappu et al., 2000;
Latunde-Dada y Lucas, 2001; Amborab et
al., 2002; Prats et al., 2002; Prez et al.,
2003; Smith-Becker et al., 2003; Soylu et al.,
2003; Sparla et al., 2004; Gurgel et al., 2005;
Pradhanang et al., 2005; Elmer, 2006; Malolepsza, 2006; Hacisalihoglu et al., 2007;AboElyousr y El-Hendawy, 2008; Roberts et al.,
2008; Wu et al., 2008; Debona et al., 2009;
LaMondia, 2009;Mandal et al., 2009; Meja
et al., 2009;Moraes et al., 2009; Vronsi et
al., 2009; Radhakrishnan et al., 2010).
El objetivo de este trabajo fue evaluar el
grado de control que ejerce la aplicacin de
los inductores de RSA, AS, ASM, productos
cpricos (Sulfato y Oxicloruro de Cobre) y la
prctica del deshoje sobre la incidencia de la
Bacteriosis en el cultivo de gulupa, para
poder incluirlos como una alternativa o
herramienta de manejo adicional de esta
enfermedad.

MATERIALES Y MTODOS
Localizacin
El ensayo se realiz en dos localidades de la
regin del Sumapaz, en el departamento de
Cundinamarca (Colombia), en cuatro parcelas
experimentales: dos en la vereda de San
Francisco en el municipio de Tibacuy, (altura: 1800 msnm, temperatura promedio: 18C,
humedad relativa promedio: 85%, precipitacin: 1300 mm/ao) y dos parcelas en la
vereda de Aposentos en el municipio de
Venecia (altura: 1900 msnm, temperatura
22

promedio: 17,7C, humedad relativa: 77%,


precipitacin:1700 mm/ao);en cultivos
comerciales de gulupa entre los 12 y 24
meses de edad, dentro de estos se seleccion
una parcela de780 m2. En cada una de las
parcelas experimentales, se aplicaron nueve
tratamientos.
Tratamientos
T1: cuatro aplicaciones de Sulfato de cobre
(SC) en dosis de 0,75 g L-1cada ocho das
T2: cuatro aplicaciones de Acibenzolar-SMetil (ASM) en dosis de 0,05g L-1 cada 20
das.
T3: cuatro aplicaciones de Acido saliclico
(AS) en dosis de 0,025g L-1 cada 20 das.
T4: dos ciclos de rotacin de Sulfato de
cobre, Acibenzolar-S-Metil y cido saliclico
(SC/ASM/AS)en las mismas dosis y frecuencias mencionadas anteriormente
T5: dos ciclos de rotacin (SC/ASM/AS) en
las mismas dosis y frecuencias mencionadas
anteriormente ms recoleccin semanal de
hojas enfermas con Bacteriosis antes de cada
aplicacin.
T6: recoleccin semanal de hojas afectadas
por Bacteriosis nicamente
T7: testigo comercial realizando cinco aplicaciones de Oxicloruro de cobre (OC) en
dosis de 2,5 g L-1, ms recolecciones semanales de hojas afectadas por Bacteriosis.
T8: testigo comercial realizando cinco aplicaciones de OC en dosis de 2,5 g L-1, sin
recolecciones manuales de hojas afectadas.
T9: testigo absoluto (Plantas sin ningn tipo
de deshoje, ni aplicacin).
Aplicacin de Inductores y productos
cpricos
El AS utilizado, se extrajo a partir del cido
acetil saliclico de acuerdo con el protocolo
sugerido por Patio (2009).El ASM al
50%,proviene de un producto comercial. El
SCse adquiri en la presentacin de fertilizante foliar con un contenido de cobre del
24%. Se emple el mismo OC utilizado por
los productores al 58.8%. Cada uno de los
productos se disolvi en el volumen de agua
calculado para cada planta (0,75 L) y fueron
aplicados con atomizador a cada una de las
plantas segn el tratamiento realizando un
buen cubrimiento del follaje total de la planta.
Parmetros monitoreados
Se realizaron mediciones semanales durante
18 semanas (semana 17 a 35 del 2010), registrando datos antes y despus de la aplicacin
de los diferentes tratamientos, partiendo de
infecciones naturales.
Se registraron variables relacionadas con
la enfermedad, fisiologa de la planta y calidad poscosecha del fruto:
2011 Fitopatologa Colombiana /Volumen 35 No 1

Parmetros relacionados con la enfermedad. Semanalmente se cuantific el nmero de individuos enfermos sobre el total de la
poblacin (Incidencia).
Parmetros fisiolgicos. Se cuantificaron tres variables, segn se describe a continuacin:
Longitud de ramas: Se midi el crecimiento semanal de las mismas ramas en
donde se evalu la severidad. Para esto se
utiliz un flexmetroque fue desplegado
desde la base de cada rama hasta el pice para
calcular la longitud.
Nmero de hojas: Se cont semanalmente el nmero de hojas emitidas en las mismas
ramas del tercio medio marcadas previamente
en cada tratamiento.
Nmero de botones florales y frutos: En
las mismas ramas, se realiz el conteo semanal de estas estructuras.
Parmetros poscosecha de frutos maduros. Se tuvieron en cuenta cuatro variables
tal como se describe a continuacin:
Dimetro ecuatorial y polar: medido
con un calibrador pie de rey. Peso fresco
determinado en una balanza electrnica marca Kern 440-33.
Peso seco: los frutos se sometieron a una
temperatura de 100C durante tres das en un
horno marca Thelco Precision Scientific y se
pesaron en una balanza electrnica marca
Startorius Laboratory L310.
Slidos solubles: determinados a travs
de los grados Brix medidos con un refractmetro marca Carlzeiss Jena.
Calidad externa y presentacin de cada
uno de los frutos cosechados en cada tratamiento: en donde se tuvo en cuenta la presencia de daos mecnicos en la epidermis y
lesiones por ataque de patgenos o insectos
para finalmente clasificarlos como fruto
nacional o exportacin.
Diseo experimental
Los tratamientos se distribuyeron en un diseo completamente al azar con tres repeticiones. Cada repeticin const de una planta de
gulupa en edad productiva. En cada parcela
se aleatoriz la distribucin de los tratamientos, dejando plantas intermedias para separar
los tratamientos.
Los datos fueron sometidos a un anlisis
de varianza (ANOVA) y a prueba de comparacin mltiple de Duncan (P0,05). El anlisis estadstico se realiz con el programa
SAS versin 9.0 (SAS Institute Inc., Cary,
NC).

RESULTADOS Y DISCUSIN
Incidencia de la enfermedad

Durante las primeras semanas de desarrollo


de los experimentos, el comportamiento de la
incidencia se mantuvo igual, no encontrando
plantas con sntomas de la enfermedad en
ninguno de los tratamientos evaluados. A
partir de la semana 23 del ao, se empezaron
a observar lesiones tpicas de Bacteriosis en
hojas bajeras e internas de las plantas que
conformaban el testigo absoluto (Figura 1A)
y el tratamiento T1 en donde se aplic SC,
muy posiblemente debido a que este producto
es el menos efectivo para el control de la
bacteria; adems de facilitar el ingreso del
patgeno por las heridas causadas a las plantas con la quemazn.
Dos semanas despus se present un
comportamiento similar de la incidencia, pero
adems se empezaron a observar lesiones en
el tratamiento T8 en el que se realizaron
aplicaciones de OC (Figura 2).
En la semana 27 la enfermedad se empez a presentar en el tratamiento T6 el cual
consisti en el deshoje semanal. Esto sugiere
que el deshoje retrasa la aparicin de sntomas con respecto al testigo absoluto, como
consecuencia de una mejor aireacin y penetracin de luz al interior de la planta, pero no
implica el control del patgeno.
En la semana 28 se empez a observar la
aparicin de la enfermedad en el tratamiento
T7 en donde se aplic OC combinado con
deshojes semanales.
En las semanas siguientes y hasta la ltima semana de realizacin de los ensayos
(semana 35) la incidencia de la enfermedad
aument gradualmente en los tratamientos
T1, T6, T7, T8 y T9; llegndose a presentar el
mayor porcentaje de incidencia acumulada en
la semana 32 (Figura 2).
Los tratamientos en los que se aplicaron
productos qumicos inductores de resistencia
(AS y ASM) solos (T2 y T3) y en rotacin
(T4 y T5) no permitieron la colonizacin de
la bacteria ni la progresin de sntomas durante el transcurso de tiempo en el que se
desarrollaron estos ensayos (Figura 1B y
Figura 2). Solo en el tratamiento T4 se present un bajo porcentaje de incidencia de la
enfermedad a partir de la semana 29, la cual
se detuvo por completo en la semana 33 en
donde ya no se observaron sntomas ni avance de los mismos en la planta (Figura 3). Lo
anterior sugiere que el uso de AS y ASM
solos y en un plan de rotacin controla y
suprime eficientemente la enfermedad porque
impide la penetracin y posterior colonizacin de la bacteria en la planta, gracias al
desencadenamiento de los mecanismos de
defensa a travs de la RSA.
Es necesario resaltar que las aplicaciones
de los inductores de resistencia se hicieron
antes de la aparicin de los primeros sntomas
de la enfermedad; es decir en forma preventiva.
La eficacia encontrada en el presente trabajo de los inductores de resistencia AS y su

Figura 1. Comportamiento de la incidencia de bacteriosis en la semana 28 de 2010. A, Testigo absoluto


(T9). B, cido saliclico (T3).

Figura 2. Comportamiento semanal del porcentaje de incidencia de bacteriosis en plantas de gulupa para
cada tratamiento a travs de las semanas del ao. SC (Sulfato de Cobre), ASM (Acibenzolar-s-Metil), AS
(cido Saliclico), R (Rotacin), R+DH (Rotacin + Deshoje), DH (Deshoje), OC+DH (Oxicloruro de
Cobre + Deshoje), OC (Oxicloruro de Cobre), TEST (Testigo absoluto).

Figura 3. Porcentaje de incidencia acumulada de bacteriosis en las 4 parcelas experimentales durante el


tiempo de evaluacin de los experimentos. * barras con letras distintas indican diferencia significativa
segn la prueba de Duncan (P0,05). Las barras sobre las columnas indican desviacin estndar

anlogo funcional el ASM para el control de


la Bacteriosis en cultivos de gulupa, lo convierte en una alternativa viable y ambientalmente sostenible para el control de dicha
enfermedad. Zuluaga et al., 2007 mencionan
2011 Fitopatologa Colombiana /Volumen 35 No 1

que el uso de estas sustancias inductoras de


resistencia para el control de Sigatoka negra
(Mycosphaerella fijiensis) en banano logr
reducir la aplicacin de fungicidas convencionales entre el 46 y el 100%. Adems,
23

Soylu et al., 2003 afirman que el ASM presenta bajo impacto para los humanos y el
medio ambiente por lo que es viable su uso
tanto en cultivos de campo, como en invernadero.
Por otro lado, la ineficacia de productos
cpricos empleados en este estudio para
detener la aparicin y la progresin de sntomas causados por X. axonopodis ha sido
ampliamente documentada en diversos trabajos en los que se reportan cepas de Xanthomonas tolerantes al cobre (Aguiar et al.,
2003; Martin et al., 2004; Voloudakis et al.,
2005), esto hace considerar el uso de productos inductores de resistencia, pues minimizan
el riesgo de generar tolerancia en los microorganismos fitopatgenos que atacan la gulupa, ya que stos tienen menos probabilidad de
vencer los mecanismos involucrados en la
resistencia sistmica adquirida (RSA) que
otros mtodos de control como la resistencia
gentica de plantas transgnicas o fungicidas
convencionales (Malamy et al., 1996 citado
por Cole, 1999; Riveros et al., 2002).
Observaciones de campo en los tratamientos con inductores de resistencia permiten notaruna reduccin de sntomas causados
por enfermedades como la Virosis y la Roa
causada por Cladosporium sp., mejorando as
la calidad comercial de los frutos de gulupa.
Esto se explica porque la resistencia sistmica
adquirida (RSA) es de amplio espectro causando proteccin a tejidos no infectados a un
amplio rango de patgenos dentro de los que
se encuentran hongos, bacterias, virus e
incluso algunas plagas como mosca blanca
(Ryals et al., 1995 citado por Hunt et al.,
1996; Moraes et al., 2009).
Comportamiento del nmero de estructuras vegetativas y reproductivas por rama
con la aplicacin de los productos qumicos
La prctica del deshoje, promovi significativamente un aumento de la longitud de la
rama, seguido por la aplicacin de OC ms
deshoje y el testigo absoluto. Por el contrario
este parmetro se reduce cuando se realiza la
rotacin de los inductores combinado con el
deshoje manual y la aplicacin de SC. La
aplicacin de ASM y AS no aumentan la
longitud de las ramas en gulupa (Tabla 1).
De igual forma, el nmero de hojas es
mayor cuando se emplea la prctica del deshoje manual y es menor cuando se aplic el
SC en forma individual. Esto pudo haber
sucedido por la fitotoxicidad que present la
aplicacin de este producto.
En los tratamientos (T1, T4 y T5) en
donde se aplic SC, se observaron sntomas
severos de fitotoxicidad; la cual se present
como quemazones blanquecinas en bordes y
distribuidas en toda la superficie de la hoja en
forma circular, en donde hubo contacto de las
gotas de la aspersin con el tejido. En frutos
se observaron sntomas similares, afectando
la calidad comercial de stos. Estos sntomas
24

se fueron acentuando cada vez ms en el


tratamiento T1 debido a la frecuencia de
aplicacin de SC (cada 8 das). Gilardi et al.,
(2010) al utilizar productos cpricos para el
control de Pseudomonas syringae en tomate,
tambin observaron problemas de fitotoxicidad, la cual se manifest como una reduccin
en la altura de las plantas.
Con respecto al nmero de botones florales, se observa un promedio muy bajo de
estos en todos los tratamientos; siendo el
valor ms alto el presentado en el testigo
absoluto, seguido por el tratamiento de deshoje; mientras que la rotacin de los inductores, combinado con deshojes y las aplicaciones SC presentan los menores promedios
(Tabla 1).

planta (Barbosa et al., 2008; Walters y Heil,


2007; Durrant y Dong, 2004).
Adems la acumulacin de los metabolitos secundarios a altas concentraciones causa
efectos fitotxicos. Este inconveniente ha
sido trabajado y solventado con la incorporacin de cationes (Cu, Mn y Zn) presentes en
enmiendas orgnicas o adicionadas externamente en el sustrato. Estos cationes atrapan y
reducen los radicales libres de oxigeno que
se acumulan durante el desarrollo de la enfermedad, coadyuvan al transporte de iones
calcio en el mbito celular, incrementa la
accin de hormonas de crecimiento y la
actividad del RNA, entre otras tareas celulares (Riveros et al., 2004).

Tabla 1. Prueba de comparacin de medias para las variables longitud de ramas, nmero de hojas, botones
florales y frutos por rama en las plantas de gulupa evaluadas.
No.
Trat.
1
2
3
4

Tratamiento

Estructuras Vegetativas y Reproductivas


Longitud rama
No. Botones
No. Hojas
No. Frutos
(cm)
florales
65,99 f*
12,91 e
0,37 c
0,07 bc
69,63 de
15,77 bc
0,52 bc
0,11 bac
67,08 fe
14,8 d
0,45 bc
0,06 dc
71,73 dc
15,32 dc
0,50 bc
0,04 d

Sulfato de cobre (SC)


Acibenzolar-s-Metil (ASM)
Acido saliclico (AS)
Rotacin (SC/ASM/AS)
Rotacin (SC/ASM/AS) + Des5 hoje
62,56 g
13,48 e
0,19 d
6 Deshoje
78,30 a
16,47 a
0,70 ba
Oxicloruro de cobre (OC) +
7 deshoje
75,36 ba
16,37 ba
0,62 bc
8 Oxicloruro de cobre (OC)
74,12 bc
15,79 bc
0,45 bc
9 Testigo absoluto
75,67 ba
16,1 ba
1,00 a
*Promedios con letras distintas en la misma columna indican diferencia significativa segn
Duncan (P0,05).

Finalmente, el nmero de frutos/rama


tambin presenta un bajo promedio, siendo el
tratamiento de OC ms deshoje el de mayor
nmero, mientras que la rotacin de los inductores presenta la ms baja produccin. En
trminos de parmetros fisiolgicos, el ASM
fue el que siempre present mayores valores
con respecto al AS cuando estos fueron aplicados en forma individual, pero los valores
obtenidos con estos inductores de resistencia
son muy inferiores a los dems tratamientos e
incluso al testigo absoluto.
Es de tener en cuenta que la induccin de
resistencia con el uso de inductores qumicos
tiene un costo fisiolgico para la planta (teora del costo de la defensa), pues la aplicacin de inductores de resistencia puede reducir el tamao de la planta, presentar prdida
de dominancia apical, producir entorchamiento de hojas, disminucin de la fertilidad,
reduccin en la produccin de la planta e
inclusive efectos negativos en la simbiosis de
las plantas con microorganismos benficos
como las micorrizas o Rhizobium(Barbosa et
al., 2008; Walters y Heil, 2007; Durrant y
Dong, 2004).
Hay que tener en cuenta que la activacin
de la resistencia tiene lugar a altas demandas
de energa o puede hacer que se desven
metabolitos y energa destinada para el crecimiento y otros procesos importantes en la
2011 Fitopatologa Colombiana /Volumen 35 No 1

0,01 e
0,10 bac
0,14 a
0,12 ba
0,09 bac
la prueba de

Comportamiento de parmetros poscosecha con la aplicacin de los productos


qumicos
El tratamiento T7 (OC + Deshoje) present
los valores ms altos de peso fresco, peso
seco y dimetro ecuatorial y polar en los
frutos cosechados con respecto a los dems
tratamientos; mientras que por el contrario el
tratamiento T4 (Rotacin (SC/ASM/AS) es el
que presenta el menor valor para estos mismos parmetros (Tabla 2). No se observan
diferencias significativas para estos mismos
parmetros entre los tratamientos T1(SC), T2
(ASM) y T3 (AS) pero si se observan diferencias entre estos tratamientos y el testigo
absoluto siendo este ltimo un poco superior
en estos parmetros a excepcin del peso
seco de los frutos (Tabla 2).
En cuanto a los slidos solubles, los tratamientos que presentaron la mayor concentracin de grados Brixfueronel T5 (Rotacin
(SC/ASM/AS) + Deshoje), T4 (Rotacin
(SC/ASM/AS)), T1 (SC) y T3 (AS),no
habiendo diferencias significativas entre estos
(Tabla 2).
El tratamiento en el que se obtuvo la menor concentracin de grados Brixes el T2
(ASM), seguido de los tratamientos con OC
(T7 y T8) y el deshoje (T6).
Se compararon estos mismos parmetros

Tabla 2. Prueba de comparacin de medias para las variables peso fresco, peso seco, dimetro ecuatorial,
dimetro polar y slidos solubles evaluadas en frutos maduros de gulupa.
No.
Trat.

Tratamiento

1
2
3
4

Parmetros Poscosecha
Dimetro
Peso Fresco
Dimetro
Peso Seco (g)
ecuatorial
(g)
polar (cm)
(cm)
54,59 ba*
9,45 ba
5,46 b
5,09 bac
53,36 ba
9,84 ba
5,45 b
5,06 bac
53,93 ba
9,67 ba
5,37 b
5,12 bac
50,65 b
9,06 b
5,37 b
4,87 d

Sulfato de cobre (SC)


Acibenzolar-s-Metil (ASM)
Acido saliclico (AS)
Rotacin (SC/ASM/AS)
Rotacin (SC/ASM/AS) +
55,19 a
5 Deshoje
52,64 ba
6 Deshoje
Oxicloruro de cobre (OC) +
56,58 a
7 deshoje
55,61 a
8 Oxicloruro de cobre (OC)
55,56 a
9 Testigo absoluto
Plantas enfermas con bacteriosis
52,61
*Promedios con letras distintas en la misma columna
Duncan (P0,05).

de poscosecha en frutos maduros cosechados


de plantas severamente afectadas por bacteriosis con los tratamientos aplicados y se
encontr que el peso seco de los frutos y los
slidos solubles son notoriamente reducidos
por la enfermedad.
Esto es muy importante porque aunque lo
que ms limita la comercializacin de los
frutos de gulupa es su calidad y aspecto
externo (presencia o ausencia de daos mecnicos o lesiones causadas por patgenos en la
epidermis como roa), en un futuro prximo
la calidad organolptica puede convertirse en
un requisito indispensable para la comercializacin de la gulupa, diferenciando el mercado
entre los pases productores de este frutal de
exportacin.

CONCLUSIONES
El uso de los inductores de resistencia
AS(0,025 g L-1) y su anlogo funcional el
ASM (0,05 g L-1)es una herramienta novedosa y viable para el control de la Bacteriosis en
el cultivo de gulupa, pero debe estar enmarcada dentro del manejo integrado. La aplicacin de estos productos se debe realizar en
forma preventiva antes de la aparicin de los
primeros sntomas de la enfermedad, ya que
estos productos no son biocidas y no van a
actuar directamente sobre la bacteria, sino
que van a activar los mecanismos de defensa
en la planta. Adems debe llevarse un estricto
manejo de la fertilizacin, con el fin de compensar los efectos adversos que tiene la aplicacin de estos inductores de resistencia
sobre el nmero de estructuras vegetativas y
reproductivas y algunos parmetros poscosecha, para no comprometer la produccin y
rentabilidad de los cultivos como consecuencia de un alto gasto energtico y una sobreproduccin de metabolitos secundarios indeseables para el ptimo desarrollo fisiolgico
del cultivo.

Slidos
Solubles
( Brix)
14,33 a
13,32 c
14,27 a
14,40 a

9,49 ba

5,38 b

4,97 dc

14,48 a

9,33 ba

5,56 ba

5,02 bdc

13,69 cb

10,11 a

5,74 a

5,23 a

13,72 cb

10,09 a
5,54 b
5,15 bac
13,48 cb
9,42 ba
5,56 ba
5,17 ba
13,79 b
7,86
5,45
5,10
12,05
indican diferencia significativa segn la prueba de

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MANEJO INTEGRADO DEL MILDEO VELLOSO (Peronospora sparsa Berkeley) DE LA ROSA *


Nathali Lpez-Cardona y Jairo Castao Zapata
Universidad de Caldas, Facultad de Ciencias Agropecuarias
Correo electrnico contactos: nathali.lopez.cardoaplicadona@gmail.com; jairo.castano_z@ucaldas.edu.co
*Artculo de Revisin de literatura, recibido para publicacin el 21/04/2011; aceptado el 18/05/2011

RESUMEN

SUMMARY

El Mildeo velloso (Peronospora sparsa) de la rosa, es una de las


enfermedades ms limitantes del cultivo de rosa en Colombia. Aunque
recientemente se han publicado algunos trabajos de investigacin
sobre la epidemiologa y manejo de la enfermedad, no existe un programa definido de Manejo integrado para la enfermedad. Esta revisin
pretende integrar resultados de investigaciones con diferentes prcticas
de manejo de la enfermedad, a fin de establecer un programa de Manejo Integrado para el Mildeo velloso de la rosa en Colombia.

Integrated management of the downy mildew (Peronospora sparsa


Berkeley) of rose

Palabras clave: exclusin, erradicacin, proteccin, inmunizacin.

The Downy mildew (Peronospora sparsa) of rose is one of the most


important diseases of the crop in Colombia. Although several papers
have been recently published about the epidemiology and management
of the disease, there is not a program of integrated management for the
disease. This review aims to integrate research results with different
management practices, to establish an integrated management program
for the Downy mildew of rose in Colombia.
Key words: exclusion, eradication, protection, immunization

INTRODUCCIN
El Manejo Integrado de Enfermedades, MIE,
es una tecnologa efectiva para los floricultores y ofrece una alternativa al uso excesivo de
fungicidas con el fin de disminuir la contaminacin ambiental, los riesgos a los operarios y
mejorar la rentabilidad de los sistemas de
produccin. El MIE involucra actividades en
programas de produccin que reducen las
enfermedades introducidas, y mantienen los
daos de tal manera que causen prdidas
econmicas mnimas (Engelhard, 1991).
ltimamente los compradores de flores
en todo el mundo estn interesados en adquirir flores producidas mediante prcticas sanas
desde un punto de vista ambiental. Por esto,
los programas de ECO-etiquetado como el
MPS (Milieu Project Sierteelt) de Holanda, el
programa Florverde de Colombia, el Flower
Label Program (FLP) de Alemania y el
Kenya Flower Label, se adoptan cada vez
ms en el mundo (Pizano, 2001).
Colombia posee una ventaja competitiva
importante para la produccin de flores tropicales. En los ltimos 30 aos el pas ha incrementado sus divisas, pasando de unos
cuantos miles de dlares anuales a ms de US
$1.114,11 millones de dlares en el 2007. En
la actualidad Colombia es el segundo exportador de flores del mundo, con una participacin del 14 % sobre el total de las exportaciones mundiales, con un rea cultivada de
7.290 ha (Asocolflores, 2007).
Peronospora sparsa Berkeley, es uno de
los patgenos ms limitantes en los cultivos
de rosa bajo invernadero en el mundo. El
primer reporte de este microorganismo fue
realizado en Inglaterra en1862, y al poco

tiempo se registr en Europa continental,


especficamente en los pases escandinavos y
la antigua Unin Sovitica. En 1880, se report en el medio oeste de los Estados Unidos, y desde all se dispers por el mundo.
Aunque la literatura registra a P. sparsa como
un patgeno endmico del rea norte del
trpico de Cncer, en la actualidad el patgeno causa daos significativos en pases tropicales y subtropicales como Brasil, Colombia,
Israel, Egipto y Nueva Zelanda (Horst, 1983;
Arbelez, 1999; Walter et al., 2004).
En Colombia existen registros de la ocurrencia del Mildeo velloso desde la dcada de
los 70`s (Martnez, 2002); y actualmente la
enfermedad es el principal problema fitosanitario de la rosa en la sabana de Bogot. En
1999, se estim en cinco millones de dlares
las prdidas por la enfermedad (Ziga,
2003) y actualmente se considera que ocasiona una disminucin del 10% en la produccin total de rosas en el pas, lo que corresponde a US$ 20.000 ha- en variedades susceptibles (Gmez, 2004; Surez, 1999).
Debido a la importancia del Mildeo velloso de la rosa y a la ausencia de un enfoque
de MIE para esta enfermedad, este trabajo
pretende integrar resultados de investigaciones con diferentes prcticas de manejo, a fin
de establecer un programa de Manejo Integrado para el Mildeo velloso de la rosa en
Colombia.
DIAGNSTICO OPORTUNO: CLAVE
DEL MANEJO INTEGRADO DE LA
ENFERMEDAD
El reconocimiento de los sntomas tpicos de
la enfermedad, esencialmente en sus primeros
2011 Fitopatologa Colombiana /Volumen 35 No 1

estados, es la clave para la realizacin del


manejo oportuno del patgeno. Cuando el
inculo inicial del patgeno es muy bajo, es
decir, cuando la enfermedad se encuentra en
las primeras fases de desarrollo, se puede
optimizar el beneficio del control qumico.
As mismo, la identificacin correcta de la
presencia del patgeno servir de base para la
eleccin correcta de los fungicidas ms efectivos, as como la planificacin de otras
prcticas compatibles de manejo de la enfermedad.
Sntomas del mildeo velloso y signos del
patgeno. Los sntomas se manifiestan sobre
hojas, tallos, pednculos, cliz y ptalos de
las plantas de rosa, aunque generalmente la
infeccin es restringida a los tejidos jvenes
de las plantas. Sobre la haz de las hojas se
desarrollan manchas irregulares de color
rojizo-prpura a pardo-oscuro, las cuales se
rodean de un halo clortico (Figura 1a),
mientras que en el envs se producen los
signos del patgeno. Una observacin a
simple vista, permite observar una esporulacin de color blanco en el envs de las hojas
u otros rganos afectados, que corresponden
al conjunto de esporangiforos y esporangios
del patgeno, que dan la apariencia vellosa
caracterstica de la enfermedad (Horst, 1983;
Arbelez, 1999; Hollier et al., 2001). Una
observacin al microscopio, permite la diferenciacin del patgeno, debido a que los
esporangiforos poseen una tpica ramificacin dicotmica, con pices agudos, y las
ramas forman un ngulo ms o menos agudo
(Figura 1b).
La enfermedad puede inducir defoliacin
severa (Flrez, 1996; Restrepo, 1996) y es
27

El manejo de la enfermedad puede ser logrado a travs de la integracin de cuatro


principios fundamentales, formulados por
Whetzel (1929): exclusin, erradicacin,
proteccin, e inmunizacin, los cuales se
detallan a continuacin:

Exclusin
Uno de los controles ms efectivos es mantener el patgeno lejos de la planta hospedante.
Esto se puede lograr mediante el empleo de
una o ms medidas generales, las cuales
involucran tcticas legales de control. Segn
Castao-Zapata (1994), la exclusin involucra:

Figura 1. a. Sntomas tpicos del Mildeo velloso.


b. Caractersticas del hongo. Fotografas: Cortesa
del Ing. Agr. Carlos Fernando Castillo.

comn que los sntomas foliares se confundan


con quemaduras o toxicidad inducidas por
pesticidas. Sobre los tallos, cliz y pednculos, la enfermedad se manifiesta como manchas prpuras a negras que varan en tamao
e incluso pueden coalescer produciendo la
muerte de ramas y momificacin de botones florales (Horst, 1983; Hollier et al.,
2001; Infoagro, 2004) propiciando la invasin secundaria por Botrytis cinerea Pers.:Fr.
(Aegerter et al., 2002).
Ciclo de vida de P. sparsa. Normalmente
sobrevive mediante oosporas, micelio en
tallos, hojas, brotes, spalos y coronas. En
Colombia se crea que el patgeno no produca oosporas, conocidas como estructuras de
resistencia sobrevivencia, sin embargo,
Gmez y Arbelez (2004), demostraron la
presencia de estas estructuras en cultivos
comerciales de rosa en el pas.
Los esporangios pueden ser producidos
por periodos largos de tiempo en condiciones
de humedad relativa alta (>85%) y condiciones frescas de temperatura (18C). Estos
pueden ser diseminados y depositados por el
viento por salpique de gotas de agua lluvia
de riego, germinan y penetran directamente
a travs de la cutcula y la epidermis; el microorganismo se alimenta de las clulas del
parnquima por medio de haustorios y una
profusa red de micelio intercelular (Michelmore et al., 1988).
Los esporangiforos y esporangios emergen por los estomas del envs de las hojas y
los esporangios son diseminados nuevamente
para iniciar un nuevo ciclo de infeccin
(Horst, 1983).
Epidemiologa. Las condiciones ms favorables para el desarrollo del patgeno bajo
invernadero corresponden a temperaturas que
oscilan entre 15 y 20 C durante el proceso de
28

infeccin y de 20 a 25 C para la colonizacin del patgeno. La infeccin es influenciada por la presencia de una lmina de agua
libre sobre la superficie del tejido por un
perodo mnimo de dos horas, sin embargo, el
proceso infectivo se incrementa cuando
dichas condiciones de humedad superan las
10 horas (Aegerter et al., 2003).
En la sabana de Bogot, la temperatura
ptima para la germinacin de los esporangios es 14 C, y se requiere un periodo mnimo de cuatro horas de agua libre sobre los
tejidos para que ocurra el proceso infectivo
del patgeno. La esporulacin del patgeno
ocurre principalmente cuando se presenta una
humedad relativa superior al 85% y temperaturas que oscilan entre 18 y 22 C (Gmez,
2004; Gmez y Arbelez, 2004). A 10 C el
periodo de latencia de P. sparsa oscila entre
6 y 7 das a, mientras que a una temperatura
de 18 a 22 C, el periodo se reduce a solo 3
5 das.
Con respecto al perodo de incubacin,
puede variar entre siete y ocho das bajo
condiciones de invernadero (Gmez y Arbelez, 2003). La infeccin de este patgeno se
produce tanto por la haz como por el envs de
las hojas (Filgueira, 2004).

PRINCIPIOS
INTEGRADO
(MIE)

DEL
MANEJO
DE ENFERMEDADES

Un programa sanitario de plantas ornamentales, debe garantizar la salud del material


vegetal, proporcionar los tratamientos culturales para evitar el desarrollo de enfermedades, y hacer los arreglos necesarios para
identificar y tratar correctamente los problemas que surgen. La integracin de estos
principios es el secreto de una gestin eficaz
(Daughtrey y Benson, 2005).
2011 Fitopatologa Colombiana /Volumen 35 No 1

Exclusin mediante intercepcin y


rechazo: Implica inspeccionar el material
vegetal. Las rosas para exportacin, son
inspeccionadas no solamente en el puerto de
entrada al pas, sino tambin en el mar abierto
an en el mismo sitio de origen para detectar la presencia de la enfermedad. S se encuentra la presencia del patgeno en el material, este puede ser rechazado y negrsele la
entrada al pas de destino o al rea dnde se
desea introducir. Por otra parte, el material
tambin puede ser rechazado si se sabe que
proviene de un rea dnde el patgeno es una
amenaza.
Exclusin mediante intercepcin y
eliminacin: Involucra el proceso anterior,
pero en lugar de rechazar todo el envo, se
remueve individualmente el material enfermo
y se destruye.
Prohibicin: Es una medida mediante la
cual se previene por Ley, la entrada de ciertos materiales al pas o rea de destino. Este
proceso incluye las Cuarentenas.

Erradicacin
Implica remover, eliminar o destruir el patgeno en un rea en una planta individual
donde sea establecido. En otras palabras se
trata de establecer estrictas medidas de
SANIDAD.
Uso de material de siembra libre del
patgeno. Otro punto clave del Manejo
Integrado es comenzar con material de siembra libre del patgeno. Debido a que la rosa
es propagada vegetativamente, existe un
mayor riesgo de transmisin de la enfermedad. La produccin de material de propagacin limpio, partiendo de plantas certificadas
producidas mediante tcnicas de multiplicacin in vitro, por termoterapia, se constituyen en una alternativa importante para el
establecimiento y/o renovacin de reas
productivas.
Aegerter et al. (2002), demostraron que
la inmersin de esquejes de rosa, variedad

'Manetti, en Metalaxil Mefenoxam


en
dosis de 100 a 10.000 mg i.a./L por 10 min, y
agua caliente a 44C por 15 min, redujo
significativamente la incidencia de la enfermedad (ABCPE) de 63 a 76. El xito del
control del Mildeo velloso de la rosa por la
inmersin de esquejes en fungicidas o agua
caliente, soporta los resultados previos de que
le patgeno puede sobrevivir en tallos. De
esta forma, los tratamientos con inmersin de
esquejes pueden retrasar el comienzo de una
epidemia y reducir la severidad de la enfermedad (Aegerter et al., 2002).
Erradicacin de tejido enfermo. El
tejido afectado puede ser eliminado mediante
la realizacin de podas sanitarias, y de esta
forma, se reduce la cantidad de inculo inicial
del patgeno que puede iniciar una epidemia.
Los restos de material vegetal deben ser
incinerados a fin de erradicar completamente
el patgeno.
Manejo de hospedantes alternos. P.
sparsa tiene un rango muy estrecho de hospedantes, puede afectar los gneros Rosa, y
Rubus como R. fruticosu L., R. arcticus L. y
R. chamaemorus L. (Lindqvist-Kreuze et al.,
2002; Walter et al., 2004); recientemente se
ha indicado que es el agente causante del
Mildeo velloso de la mora (Rubus glaucus
Bentham) en Venezuela (Montilla et al.,
2003) y Colombia (Tamayo, 2001). Hall et al.
(1992), reportaron que el patpogeno puede
atacar el Laurel Cerezo (Prunus laurocerasus
L.) cv. Rotundiflora.
El establecimiento de cultivos de rosa
cerca a plantaciones de mora puede proveer
una ventaja al patgeno para su sobrevivencia. La fuente de inculo puede incrementar
en plantas de mora en ausencia de plantas de
rosa viceversa, s el cultivo de inters es la
mora, tornando ineficiente cualquier medida
de manejo de la enfermedad debido a la
cantidad de inculo en el ambiente.
Erradicacin mediante rotacin de
cultivos. El ciclo de produccin de las flores
en Colombia depende de la variedad cultivada, en general, las rosas se cosechan cada 90
das y cada rosal tiene una vida til hasta de
15 aos (Tenjo et al., 2006). En Colombia
existen aproximadamente 7.290 ha cultivadas
en flores, representadas de la siguiente manera, 30,3% corresponde a rosas, 13,5% a claveles, 8% a miniclaveles, 8,2% a crisantemos,
26,4 % a ramos y el restante 6,6% a otro tipo
de flores, incluyendo en stos dos ltimos
porcentajes flores tropicales y dentro de stas
las heliconias (Asocolflores, 2007).
Aunque no existen reportes acerca del
beneficio de la rotacin de cultivos en el
manejo de esta enfermedad, el cambio de
cultivo con hospedantes no susceptibles como
clavel y crisantemo, aunque no se conducira
a una erradicacin completa de la enfermedad, permitira que las poblaciones del pat-

geno sean reducidas para evitar el desarrollo


de una epidemia en siembras futuras sin
afectar la produccin del sector floricultor.
Desinfestacin de herramientas. Las
herramientas empleadas en la injertacin,
recoleccin de flores y podas, debern esterilizarse en una solucin de formaldehido 2% y
de hidrxido sdico 2% durante 6 segundos.
Es recomendable utilizar dos juegos de
herramientas de corte y de guantes, trabajando con uno, mientras el otro permanece sumergido en la solucin hasta su uso
(INFOAGRO, s.f.). Esta prctica es efectiva
para disminuir la cantidad de inculo inicial
que puede ser diseminado ente plantas.
Proteccin
El concepto de proteccin implic originalmente colocar algn tipo de barrera entre el
hospedante y el patgeno con el fin de prevenir la infeccin. El concepto ha sido ampliado
para incluir otras medidas de prevencin de la
infeccin, tales como la manipulacin de los
factores ambientales que controlan el proceso
de infeccin, manejo del cultivo para disminuir o evitar la infeccin (Castao-Zapata,
1994).
A continuacin, se mencionan las principales medidas involucradas:
Proteccin mediante el uso de fungicidas. La eleccin del fungicida correcto es
la otra clave del MIE. Peronospora pertenece a la clase de los Oomycetes, incluidos
dentro del reino Straminipila que aagrupa
organismos que o producen quitina, pero
tiene celulosa como componente fibrilar de la
pared celular, y no sintetiza sus propios esteroles funcionales (por ejemplo, ergosterol)
sino que la toma de los tejidos del hospedante, antes de la conversin y su incorporacin
en sus membranas. La especificidad de los
compuestos antifngicos se basan en estas
diferencias metablicas entre esta clase de
pseudohongos y los hongos verdaderos (Gisi,
2002)
Oneill et al. (2002), encontraron que las
aspersiones foliares de Fluazinam, Fosetil-Al
y la mezcla de Cymoxanil + Mancozeb +
Oxadixil, reducen
significativamente la
severidad del Mildeo velloso y la cantidad de
cada de hojas. As mismo, la altura de la
planta mejora notablemente con estos fungicidas.
El conocimiento de la distribucin y preferencia de ataque del patgeno en la planta
es vital para dirigir las aplicaciones de fungicidas. En un estudio realizado por Quiroga y
Arbelez (2004), se encontr que la parte
inferior de los tallos evaluados (estrato uno)
exhibieron en promedio la mayor incidencia y
severidad del Mildeo velloso; seguido por el
estrato dos, el cual corresponde a la parte
media de los tallos. El estrato tres, es decir,
la parte ms joven de los tallos, fue el que
2011 Fitopatologa Colombiana /Volumen 35 No 1

present la menor incidencia y severidad de


la enfermedad. El mismo estudio indic que
Fosetil-Al en aplicaciones foliares es altamente efectivo para el manejo de la enfermedad, en contraste, el tratamiento que mostr
el mayor nmero de tallos afectados fue el
mismo producto, pero aplicado al suelo.
La mezcla de Metalaxil + Mancozeb, es
ampliamente utilizada para el control de
diversos Oomycetes en cultivos como papa,
hortalizas, tabaco, aguacate, entre otros (Gisi,
2002), pero en la investigacin realizada por
Quiroga y Arbelez (2004), no mostr un
control eficaz del Mildeo velloso, ni aplicado
al suelo ni al follaje. Una de las causas de la
posible ineficiencia de este fungicida puede
ser la resistencia del patgeno al producto, en
particular a Metalaxil, como ha ocurrido en
otros cultivos en el mundo (Viranyi, 1988).
Control biolgico. El concepto actual de
control biolgico en patologa vegetal incluye
la utilizacin deliberada de organismos vivos
introducidos o residentes, distintos de las
plantas hospedantes de la enfermedad objetivo, para suprimir las actividades y las poblaciones de uno o ms patgenos de plantas.
Esto puede implicar el uso de inoculantes
microbianos para suprimir un solo tipo
clase de enfermedades de plantas, , la utilizacin de organismos nativos del suelo para
la represin de patgenos causantes de enfermedades en plantas (Pal y McSpadden,
2006).
Los agentes de control biolgico de P.
sparsa han sido poco estudiados. Actualmente solo los trabajos de Chase (2005) con
Bacillus subtilis (Rhapsody) y las sales de
cobre (Camelot) estn publicados. Esta investigadora descubri que las sales de cobre
previenen el Mildeo velloso de la rosa eficazmente, mientras que B. subtilis por s solo
no tiene un efecto marcado en la prevencin
de la enfermedad, pero cuando se combinan
los dos, aunque el efecto es mucho menor que
las aplicaciones solas de cobre, se logra
reducir considerablemente la severidad del
Mildeo Velloso
Aunque los reportes de la eficacia de
controladores biolgicos sobre P. sparsa, son
limitados, una investigacin realizada por
Stefanova et al. (2007), con el Moho azul de
tabaco (Peronospora tabacina D.B. Adam)
indic que la aplicacin de Pseudomonas
aeruginosa (Schroeter) Migula, cepa PSS
(Gluticid), redujo la enfermedad en un 50%
comparado con el testigo. El producto biolgico aplicado cada siete das a la dosis de
0,09 kg / ha del ingrediente activo, mostr
efectividad sobre la enfermedad, y su eficacia
fue igual a la obtenida con Mancozeb.
Las rizobacterias del gnero Pseudomonas Migula, producen diferentes metabolitos
extracelulares, entre ellos siderforos, diversos antifngicos y cido saliclico, entre
otros, que contribuyen a la supresin de
fitopatgenos mediante la formacin de
29

quelatos de hierro que les confieren ventaja


competitiva como agentes biocontroladores
por la suplementacin limitada de minerales
esenciales en hbitats naturales, accin controladora y el aumento de la resistencia y
defensa de las plantas (Keel et al., 1990;
Maurhofer et al., 1994; Thomashow y Weller, 1995; Wipps, 2001).
Proteccin mediante manipulacin del
ambiente. El Mildeo velloso se desarrolla
mejor en condiciones hmedas. Debido a
esto, Beckerman (2009), del Servicio de
Extensin de la Universidad de Purdue y
Hausbeck (2007) de la Universidad Estatal de
Michigan, Estados Unidos, sugieren mantener las rosas tan secas como sea posible para
reducir el crecimiento del P. sparza; para
ello, se debe usar riego por goteo en vez de
riego por aspersin a fin de evitar agua libre
en el tejido. De igual forma, Gill (1977)
sugiere ventilar los invernaderos para reducir
la humedad relativa por debajo del 90% y
elevar las temperaturas por encima de 27C.
Sistema de pronstico de la enfermedad. En el ao 2003, Aegerter et al., desarrollaron el primer sistema de pronstico del
Mildeo velloso basado en la evaluacin de la
temperatura, la humedad foliar, y la humedad
relativa en el desarrollo de la infeccin y la
colonizacin de la rosa por P. sparsa en las
condiciones del Valle de San Joaqun del
estado de California, Estados Unidos. Usando
un modelo de regresin lineal, incorporaron
las variables ambientales calculadas como los
totales acumulados en un periodo de 10 das.
As, se pudo determinar un ptimo de infeccin de 8,4 h de duracin de la humedad
foliar por da en un total de 10 das acumulados cuando la temperatura es menor a 20C.
Estos resultados deberan ser validados para
las condiciones de la sabana de Bogot dnde
se concentra la produccin de rosas en Colombia. Una vez validados los datos, el sistema de pronstico servira para alertar sobre
la primera aplicacin de fungicidas y la
programacin en el tiempo de las mismas.
Distancias de siembra. Alterar la distancia de siembra de las plantas tiene efectos
directos e indirectos sobre el comportamiento
de la enfermedad. Para el primero, existen
dos factores relacionados: (a) un cambio en
el nmero de plantas hospedantes disponibles
para interceptar inculo diseminado a travs
del espacio el tiempo, y (b) variacin de los
espaciamientos entre plantas y por lo tanto la
dispersin espacial del inculo que tiene xito
para producir infeccin. Los efectos de a y b
se refuerzan mutuamente. Por lo tanto, un
aumento en la densidad de siembra, aumenta
el nmero de plantas susceptibles y con ello
la probabilidad de que una unidad de inculo
en el aire sea depositada en el tejido susceptible (Burdon y Chilvers, 1982).

Los resultados del trabajo de Oneill et al.


(2002), demuestran que la severidad de la
enfermedad disminuye considerablemente
cuando incrementa la distancia entre plantas
de 18 a 32 cm. El aumento del espaciamiento
entre plantas mejora la circulacin de aire y
aumenta tambin la exposicin de las hojas
inferiores a la luz, lo que reduce la senescencia prematura y la esporulacin de P. sparsa
(Hausbeck et al., 1996).
Mtodo de riego. Debido a que P. sparsa
es un patgeno dependiente del agua libre en
las hojas para su desarrollo, el mantenimiento
del follaje seco a travs de la estacin del
cultivo se convierte en una herramienta vital
para el manejo de la enfermedad. As, Oneill
et al. (2002), demostraron que el riego aplicado al suelo (subirrigacin en tnel) ayuda a
reducir el porcentaje de plantas afectadas a un
mnimo nivel comparado con el sistema de
riego por aspersin. Aunque mejores resultados se obtienen cuando se combinan la aplicacin de fungicidas con el riego apropiado
para el manejo de la enfermedad.
El porcentaje del rea afectada en las
hojas es reducido cuando se aplican fungicidas al suelo como Fosetil-Al, seguido por la
mezcla de Cimoxanil + Mancozeb + Oxadixil, la mezcla de Thiram + Metalaxil y
aspersiones foliares de Clorotalonil, alterando
aplicaciones cada 10 14 das; y cuando se
sigue un programa de riego por subirrigacin
al suelo, comparado con riego por aspersin.
Manejo de la fertilizacin. El vigor del
hospedante mediante una nutricin adecuada
es una prctica comn de manejo preventivo
de enfermedades y se hace con el fin de que
las plantas sean menos susceptibles a los
patgenos. Segn la literatura, algunos elementos nutricionales como: nitrgeno, potasio, calcio, boro, silicio y la relacin N: K son
importantes en el aumento de resistencia a
parsitos obligados como P. sparsa (Ivancovich, 1996; Krauss, 2001).
Un estudio realizado por Castillo et al,
(2010), demostraron que el aumento de la
concentracin de N, favoreci la incidencia y
severidad del Mildeo velloso, mientras que el
aumento de la concentracin de Si, Ca y Mn,
redujo la incidencia y severidad de la enfermedad.
Varios reportes han descrito la efectividad del fosfonato (sales de potasio) como
inductores de resistencia en varios patosistemas, por ejemplo, en los patosistemas
maz/Puccinia sorghi Schwein (Reuveni et
al., 1994), maz/Exserohilum turcicum
(Pass.)K.J. Leonard & Sugss., pepino/Sphaerotheca fuliginea (Schltdl.) Polacci
(Reuveni et al., 1993), pimentn/Leveillula
taurica (Lev.) Arnaud (Reuveni et al., 1998)
y coliflor/Peronospora parastica (Pers. ex
Fr.) Fr. (Becot et al., 2000).
Inmunizacin

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2011 Fitopatologa Colombiana /Volumen 35 No 1

Es el proceso mediante el cual, se cambia la


naturaleza fisiolgica y fsica del hospedante
con el fin de prevenir la infeccin, o permitirle a la planta rechazar la infeccin. En esencia, inmunizacin es mejoramiento de la
resistencia a enfermedades (Castao-Zapata,
1994).
El manejo del Mildeo velloso con variedades resistentes es difcil, debido a la alta
susceptibilidad de la mayora de las variedades comerciales de rosa cultivadas en el
mundo. En Colombia, el patgeno es altamente agresivo sobre las variedades Charlotte, Classy, Dolores, Frisco, Konfetti, Livia,
Mystique, Osiana, Pavarotti y Ravel (Flrez,
1996; Restrepo, 1996).
Con respecto al grado de susceptibilidad
de los patrones, Martnez (2002), evalu la
respuesta de tres materiales injertados: Charlotte, Livia y Aalsmeer Gold, sobre los patrones Manetti y Natal Brier, y logr determinar
que las plantas injertadas sobre Manetti presentaban mayor enfermedad en comparacin
con Natal Brier.
Gmez y Arbelez, (2005) demostraron
que la variedad Classy presenta los perodos
de latencia ms cortos y la mayor produccin
de esporangios en cuatro temperaturas evaluadas (10, 14, 18 y 22 C), mientras que los
perodos ms largos se presentan en First
Red con una produccin reducida de esporangios.
El conocimiento del nivel de variabilidad
de un patgeno y de su estructura poblacional
en una regin determinada, es fundamental
para el diseo de estrategias de manejo de la
enfermedad que causa, por cuanto ofrece
informacin valiosa sobre los linajes genticos del patgeno que deben incluir los programas de resistencia.
Actualmente, en la Universidad Nacional
de Colombia sede Medelln, existe una coleccin representativa de 34 aislamientos de P.
sparsa colectados en la sabana de Bogot y el
oriente antioqueo, principales zonas cultivadoras de rosas para exportacin en Colombia
(Ayala-Vsquez, et al., 2008).
INTEGRACION DE LAS PRCTICAS
DE MANEJO.
James Edward Van der Plank (1963), fue el
primero en incluir el modelo logstico en el
manejo de enfermedades de plantas. Este
modelo reconoce que la infeccin que causa
enfermedad produce ms propgulos despus
de un periodo de latencia y la velocidad de
desarrollo de la enfermedad depende de las
condiciones ambientales (Castao-Zapata,
2002).
A continuacin se describe el modelo
logstico para manejar exitosamente una
enfermedad:
X = X0ert
Donde X: cantidad de enfermedad final
inculo final, X0: cantidad de enfermedad
inicial inculo inicial; e: constante universal

(2,718281828); r: velocidad con la que se


desarrolla la enfermedad; y t: tiempo que
transcurre para la produccin final de enfermedad (X).
Examinando este modelo, se puede concluir que existen tres formas para reducir la
cantidad de enfermedad final en cualquier
punto de la epidemia, as:
reducir el inculo inicial,
reducir la velocidad de desarrollo de la
epidemia
reducir la duracin de la epidemia.
En la Tabla 1, se resumen las prcticas de
manejo integrado del Mildeo velloso de la
rosa y sus implicaciones epidemiolgicas,
desde el punto de vista del modelo logstico.

CONCLUSIONES
Esta revisin de literatura se convierte en la
base fundamental para el desarrollo de un
programa de manejo Integrado del Mildeo
velloso de la rosa en Colombia. Aunque
algunas investigaciones necesitan ser validadas para las condiciones de cultivo en el pas,
como por ejemplo, el sistema de pronstico
desarrollado en california, estados Unidos, la
mayora de las tcticas alternativas al manejo
qumico han demostrado ser altamente eficaces, seguras y fciles de implementar. Quiz
la razn ms importante para el desarrollo de
este enfoque, es la disminucin del riesgo de
resistencia por parte del patgeno al uso
indiscriminado de molculas qumicas de
accin especfica como Metalaxil FosetilAl.
Es necesario que la comunidad cientfica,
principalmente de fitopatlogos y fitomejoradores, propongan investigaciones en control
biolgico y desarrollo de variedades resistentes al Mildeo velloso de la rosa, debido a que
son los temas menos estudiados, no obstante
la gran importancia que tiene el cultivo de la
rosa en Colombia.
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Tabla 1. Integracin de las prcticas de manejo Integrado del Mildeo velloso de la rosa causado por P.
sparsa y su efecto epidemiolgico, de acuerdo al modelo logstico.
Mtodo de manejo

Factor epidemiolgico

Evitacin del patgeno


Seleccin del sitio de siembra
Uso de esquejes libre de la enfermedad
Exclusin del patgeno
Tratamiento de esquejes
Inspeccin y certificacin de material de propagacin
Erradicacin del patgeno
Destruccin de tejido enfermo
Destruccin de hospedantes alternos
Rotacin de cultivos
Desinfestacin de herramientas
Proteccin de la planta
Aspersiones con fungicidas
Control biolgico
Manejo de la fertilizacin
Manipulacin de ambiente
Arreglo de las distancias de siembra
Manejo del riego
Inmunizacin (resistencia gentica)
Resistencia monognica
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ExternalFile=873&name=Colombian
+Floriculture+by+E.Velez+Feb.+2007.pd
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biocontrol in the rhizosphere. Exp. Bot.
52:487-511.

REVISTA FITOPATOLOGA COLOMBIANA


Normas para la elaboracin de artculos
Presentacin del Trabajo
Para enviar el trabajo a la revista (original y tres copias), se deber aplicar el siguiente orden, comenzando cada tem en pginas independientes, segn
lo detallado a continuacin:

Cartula: Una pgina con el ttulo del artculo, el autor, su direccin y el tipo de publicacin y la entidad. (1 pgina).

Resumen y palabras claves (1 pgina)

Summary y palabras claves en ingls (1 pgina).

Cuerpo del trabajo (Texto). (Las necesarias sin sobrepasar los lmites de este reglamento).

Agradecimientos (si lo considera necesario).

Referencias Bibliogrficas.

Tablas (1 por pgina). (Con su respectivo ttulo ).

Figuras (una por pgina, debidamente numeradas).

"Leyendas" o pies de las figuras.

Estructura general, secciones


El artculo cientfico incluir las secciones que se indican ms adelante; en la nota cientfica se podrn unir algunas de las secciones y la revisin
bibliogrfica es de estructura libre. Los tres tipos de colaboraciones deben incluir siempre el resumen y el summary.
La estructura del artculo cientfico debe contener lo siguiente:

1. Ttulo
Deber reflejar adecuadamente el contenido de la publicacin con el menor nmero posible de palabras; estas no deben ser ms de veinte. El
ttulo no debe incluir abreviaturas ni frmulas qumicas (salvo para los istopos).

2. Autor(es)
Se describirn su nombre y apellidos debajo del ttulo, seguidos del nombre de la entidad donde se gener la investigacin y la direccin y la del
autor. Enseguida se coloca, si es el caso, toda la informacin correspondiente al personal tcnico que haya colaborado en la investigacin.
3. Resumen y Summary
El resumen debe hablar de la naturaleza e importancia del trabajo, la metodologa usada y los resultados sobresalientes. Debe tener un mximo de una
pgina (200 a 300 palabras) si corresponde a un artculo cientfico, o de media pgina si corresponde a una nota tcnica o cientfica.
4. El summary
Es la traduccin al portugus o al ingls del resumen, incluido el ttulo. Si se desea, se pueden adicionar resmenes en Portugus, Francs, o Alemn.

5. Palabras claves
Deber seleccionarse la palabra o palabras claves ms importantes, preferiblemente no contenidas en el ttulo, y colocarlas en un listado lo ms
breve posible.

6. Introduccin
Deber destacar la necesidad e importancia de la investigacin, mencionar las limitaciones del trabajo, y los resultados de otros trabajos similares o
relacionados (revisin de literatura breve referida a la informacin ms relevante).

7. Materiales y mtodos
2011 Fitopatologa Colombiana /Volumen 35 (1)

33

Se deben escribir en forma ordenada, clara y precisa, con detalles suficientes para que el lector pueda, si lo desea, repetir el experimento.

8. Resultados y discusin:
Ambos temas se pueden incluir preferiblemente en una sola seccin. Los resultados se deben escribir en forma precisa y ordenada. En la discusin se
explican los hechos y se relacionan con los resultados de otras investigaciones, debidamente sustentados con citas bibliogrficas entre parntesis,
utilizando el Sistema Autor, Ao.

9. Conclusiones
Deben ser breves y claras y basarse estrictamente en los resultados (no en conjeturas).

10. Agradecimientos
(Si se desea).

11. Referencias Bibliogrficas


Se debe limitar a la estrictamente necesaria y en relacin directa con la investigacin realizada. Todas las referencias citadas en esta seccin
deben ser citadas en el texto. Las referencias se deben colocar en la lista en orden alfabtico por los apellidos de los autores.
Cuando hay varias referencias encabezadas por un mismo autor, se escriben primero aquellas en las cuales ste aparece slo, y luego aquellas
en las que est seguido por coautores; dentro de cada grupo se sigue en orden cronolgico. No use la palabra Annimo para asignar autores
desconocidos; en su lugar, escriba el nombre del editor (seguido de un parntesis con la abreviatura ed. o eds.) o el de la editorial o, si no hay
ninguno comience con el ttulo de la obra.
No incluya en la bibliografa las referencias de informaciones personales, ni de trabajos sin publicar aunque estn aceptados. Estas fuentes se
pueden citar en el texto, entre parntesis. La referencia de una publicacin peridica se har en el siguiente orden: autor, ao, ttulo del artculo,
nombre abreviado de la revista, volumen, nmero (entre parntesis) y pginas.

Ejemplo:
Bowman, J.M., Delwiche, P.A., Brabiebson, R.L. y Williams, P.H. 1980. Lepthosphaeria maculans on cabbage in Wisconsin. Plant. Dis. 64(3):326328.
En los libros y folletos el orden general es: autor, ao, ttulo, nmero de la edicin, casa editora, lugar de la publicacin y nmero de pginas.
En caso de incluir referencias consultadas electrnicamente en Internet estas se pueden presentar en el siguiente orden:

Autor(es). Ao de publicacin. Ttulo del documento. Subttulo. El medio, en lnea [entre corchetes]. Nmero de la edicin (slo a partir de la
segunda). Editorial o entidad que publica en web. Lugar de publicacin. Fecha en que se consult el material, para los documentos en lnea [entre
corchetes].Serie, si la tiene (entre parntesis). Disponible en:

Ejemplos:

Dollar, D. y Kraay, A. 2000. Growth is good for the poor [en lnea]. World Bank. Washington, DC. [consultado 15 Septiembre 2001]. Disponible
en : http://www.worldbank.org/research/growth/pdfiles/growthgoodforpoor.pdf
Jimnez, C. (s.f.). Intervencin del hombre en los ecosistemas naturales [en lnea]. [citado 16 octubre 2001]. Disponible en:
http://www.monografias.com/trabajos7/ecna/ecna.shtml
Gottret, M.V. y Raymond, M. 1999. An analysis of a cassava integrated research and development approach: Has it really contributed to poverty
alleviation? [on line]. In: International Workshop Assessing the Impact of Agricultural Research on Poverty Alleviation (1999, San Jos,
Costa Rica). Centro Internacional de Agricultura Tropical (CIAT), Cali, CO. [consultado 21 Septiembre 2001]. Disponible en : http://ciatlibrary.ciat.cgiar.org/paper_pobreza/038.pdf

34

2011 Fitopatologa Colombiana /Volumen 35 (1)

Myers, M.P., Yang, J. y Stampe, P. 1999. Visualization and functional analysis of a maxi-K-channel (mSlo) fused to green fluorescent protein
(GFP). Electronic Journal of Biotechnology 2(3) [en lnea ]. [consultado 21 Marzo 2000]. Disponible en :
http://www.ejb.org/content/vol2/issue3/full/3/index/html
Dvila, M. y Coyne, D. 2000. Deteccin de genes de letalidad en caraota mediante el uso de la tcnica de anlisis de segregantes en grupos.
Agronoma Tropical 50(3):323-335 [en lnea]. [citado 12 octubre 2001]. Disponible en: http://www.redpav-fpolar.info.ve/agrotrop/index.html

Extensin y formato para los trabajos


La extensin mxima del artculo completo (Resumen, summary cuerpo, agradecimientos, referencias, tablas y figuras ) escrito con un tipo de letra de
12 cpi (caracteres por 2,5 cm o una pulgada) ser de 16 pginas a doble espacio si se trata de un "artculo cientfico" o una "revisin bibliogrfica"; 6
pginas si es una "nota cientfica" y una pgina si es una "carta al editor
Cualquier colaboracin para la revista debe estar mecanografiada o mecanotipiada en papel tamao carta, por una sola cara, a doble espacio y con
letra grande (no ms de 12 caracteres por pulgada). Los mrgenes superior, inferior, izquierdo y derecho tendrn 2,5 cm. Cada pgina se numerar en la
esquina inferior derecha.
Se prefieren los trabajos elaborados en computador utilizando el procesador de palabra "Word". A la copias del escrito impresas en texto de alta
calidad se anexar el disquete o el Disco compacto respectivo conteniendo exactamente lo presentado en el escrito..
Los ttulos de primer orden deben ser en maysculas; los ttulos de segundo orden deben ir en minsculas; los ttulos de tercer orden son en
minscula, dos puntos y seguido de texto, as:

TITULO DE PRIMER ORDEN

Ttulo de segundo orden

Ttulo de tercer orden: Seguido de texto como en este ejemplo.

Redaccin general y estilo


El trabajo se debe redactar en pasado impersonal y debe ser claro, conciso, coherente y exacto. Los nombres cientficos se deben escribir en itlicas y
completos la primera vez que se nombren; despus se pueden abreviar, escribiendo slo la inicial del gnero, pero dejando la especie completa.
Las referencias deben ser citadas en el texto utilizando el Sistema Autor, Ao, colocados en parntesis, por ejemplo (Arbelez, 1988). Cuando son
varios (ms de dos) los autores de la publicacin citada, debe colocarse el primer autor seguido del latn et al. y luego el ao respectivo, pero en el
listado de Referencias Bibliogrficas deben figurar todos los autores.
Al referirse a productos se deben preferir los nombres comunes a los comerciales. En el caso de nombres de marcas registradas, se deben escribir
seguidos de la letra R (mayscula) y de la direccin del fabricante.
Para las unidades de medida se debe usar el Sistema Internacional de Unidades (SI).
Tanto las tablas como las figuras se deben numerar en forma consecutiva con nmeros arbigos. Todos ellos, al igual que todas las referencias
bibliogrficas se deben citar en el texto.
En la medida de lo posible se deben evitar las notas de pie de pgina. Es preferible reemplazarlas por parntesis dentro del texto.

Elaboracin de tablas

Cada tabla o figura se debe presentar en una hoja aparte, al final del texto, pero debe estar nombrada dentro de ste.

2011 Fitopatologa Colombiana /Volumen 35 (1)

35

Las tablas deben ser sencillas y contener slo la informacin


indispensable para claridad del trabajo. Su formato puede o no llevar

Tabla 5. Incidencia y severidad de la Antracnosis en mango cultivar HadenICA, bajo diferentes medidas de manejo de la enfermedad, durante 1993.

lneas verticales; se recomienda dejar solamente las horizontales


necesarias para destacar el encabezamiento (ttulos y subttulos de las
columnas) y para cerrar los datos, al final de la misma. La tabla debe estar

Tratamientos
1
2
3

identificada por un nmero y por un ttulo, el cual debe ser claro y autoexplicativo. Los datos no deben ser una repeticin de los del texto o de

alguna figura y debern limitarse a aquellos indispensables para claridad

del artculo cientfico.

Ejemplo:
Los valores contenidos en las tablas deben usar el punto (.) para
separar los miles y la coma (,) para los decimales, ejemplo 1.545,20.

9
12
13

Aspersin floracin
Aspersin frutos alfileres
Aspersin frutos con 50% de
maduracin
Aspersiones floracin y frutos
alfileres
Aspersiones floracin y frutos con
50% maduracin
Aspersiones floracin a cosecha (8
aspersiones)
Podas floracin a cosecha
Aspersiones floracin a cosecha y
podas
Testigo absoluto

Incidencia
(%)

Severidad
(%)

81,7 AB
80,33 AB
73,33 B

50 A
50 A
40 AB

74,33 B

40 AB

72,66 B

38 AB

50,50 C

20 C

66,67 B
25,34 D

45 A
10 D

90,0

55 A

La tabla puede incluir abreviaturas y llamadas, las cuales se identificarn con letras minsculas (usadas a manera de exponentes para que no se
confundan con los correspondientes a diferencias estadsticas). Las llamadas se aclararn en las notas de pie. Cuando hay niveles de significacin
estadstica, se indican con asteriscos (uno a tres) y se explican en las notas del pie de la tabla.
El nmero de tablas a incluir en el artculo deben ser las estrictamente necesarias
Figuras
Por figuras se entienden diferentes ilustraciones como fotografas, grficas, mapas, dibujos, etc. Al igual que las tablas, deben tener un ttulo claro, y
estar numeradas en el orden en que se citan en el texto. Deben ser muy ntidas y de buen tamao, teniendo en cuenta que su calidad disminuye en el
proceso de impresin, y que en dicho proceso ellas no se ampliarn sino que muy probablemente se reducirn.
Las fotografas deben ser en papel brillante y con buen contraste, y estar bien enfocadas sin elementos distractores (etiquetas elaboradas a mano
con letras ms grandes que el sujeto a destacar); tambin se aceptan transparencias a color de buena calidad o imgenes electrnicas en formato JPG
entre 500 y 1000KB en su respectivo diskette o CD.
En cuanto al nmero de fotografas a incluir deben ser las estrictamente necesarias y preferiblemente en una composicin.
Las grficas deben ser sencillas en la medida que lo permita el trabajo y todos sus elementos deben estar identificados claramente. Cuando se
elaboren mediante el uso de computador debe incluirse los archivos en el disquete o un disco compacto, indicado en la etiqueta el programa y la
versin del mismo. Utilizar tramas y tonos de gris contrastantes. Se prefiere que las grficas no sean a color.
Las leyendas de las figuras y las convenciones, si las hay, deben quedar dentro del rea del grfico colocadas en una posicin conveniente de
manera que faciliten la interpretacin.
Los pies de figuras o ttulos de estas deben elaborarse en una pgina aparte y no dentro del rea de la grfica del archivo electrnico, el texto debe
ser lo suficientemente descriptivo como para que se pueda entender sin recurrir al texto.
Cada figura debe estar identificada al respaldo con su nmero correspondiente y con el nombre del autor del artculo. Figuras desalineadas, con
lneas borrosas o fotocopias no sern aceptadas.
Solamente incluir las estrictamente necesarias (los costos de separacin de color e impresin son muy altos). Nota: Para mayor ilustracin respecto a
estas normas se pueden consultar las guas para preparacin de artculos de Plant Disease, Phytopathology y especialmente las instrucciones para
los autores de la Revista Corpoica 2(1): 64-70, 1997

36

2011 Fitopatologa Colombiana /Volumen 35 (1)

FITOPATOLOGA COLOMBIANA

rgano de difusin de la Asociacin Colombiana de Fitopatologa y Ciencias


Afines- ASCOLFI

ISSN 01120-0143

Contacto Revista:
Oficina Ascolfi, Km 1 Va al Penal Granja Corpoica C.I. Palmira
Cel. +57- 3164303079
Palmira - Valle del Cauca Colombia
Apartado Areo 5004- Cali- Valle del Cauca -Colombia
Correos electrnicos: ascolfi.colombia@gmail.com
contacto@ascolficolombia.org
Pgina web:
http://www.ascolficolombia.org/

Suscripciones y Canje: publicaciones@ascolficolombia.org

26

ascolfi.colombia@gmail.com

ASOCIACIN COLOMBIANA DE FITOPATOLOGIA


Y CIENCIAS AFINES, ASCOLFI

Misin
Contribuir a la creacin y utilizacin del conocimiento cientfico en la fitosanidad para
facilitar soluciones a los problemas de la produccin de cultivos sanos con rentabilidad
social y econmica, protegiendo el medio ambiente
Visin
Ser una entidad lder, reconocida nacional e internacionalmente por su excelente labor
en beneficio de la promocin, divulgacin y consolidacin del conocimiento cientfico
de personas e instituciones allegadas a la fitosanidad y sus ciencias afines como
elemento esencial de la produccin de cultivos de alta calidad
Objetivos
Contribuir a la creacin de una conciencia nacional sobre la importancia de la
ciencia y tecnologa en la sanidad vegetal como aporte al desarrollo agropecuario
y econmico del pas
Promover el inters en todos los aspectos de la fitopatologa y ciencias afines
Contribuir a la creacin y difusin del conocimiento cientfico de la fitopatologa
y ciencias afines
Promover y estimular la publicacin de los resultados de los estudios y/o
investigaciones sobre fitopatologa y ciencias afines
Promover la cooperacin entre entidades del sector pblico y privado tanto
nacional como internacional que tengan inters en estas disciplinas
Promover el mejoramiento del nivel acadmico de sus asociados y de quienes
manifiesten inters en las reas de la fitopatologa y ciencias afines
Estrechar los vnculos de solidaridad y compaerismo entre sus afiliados
Informar y motivar a la opinin pblica y sus representantes sobre la
problemtica de las enfermedades de las plantas y su control

10

COMIT CIENTIFICO
Alberto Pez Redondo
Benjamn Pineda Lpez
Bernardo Villegas Estrada
Carlos Germn Muoz Perea
Diana Marcela Vanegas Villa
Edwinson Alberto Rojas Trivio
Elizabeth lvarez Cabrera
Francia Varn de Agudelo
Francisco Jos Morales Garzn
Gerardo Martnez Lpez
Gloria Mara Mosquera Cifuentes
Gustavo Adolfo Prado
Ivn Lozano Potes
Jairo Castao Zapata
Jess Eliecer Larrahondo Aguilar
Jess Humberto Gil Gonzales
Jhon Jairo Mndez Arteaga
Jorge Enrique Gmez Hurtado
Jorge Ignacio Victoria Kafure
Jos Mara Hernndez Murillo
Juan Carlos ngel Snchez
Juan Gonzalo Morales Osorio
Liliana Mara Hoyos Carvajal
Marina Snchez de Prager
Maritza Cuervo Ibaez
Mnica Betancourth Vsquez
Oscar Adrin Guzmn Piedrahita
Pedro Alfonso Alarcn Gmez
Rodrigo Orlando Campo Arana

Ing. Agr. M Sc Fitopatologa


Ing. Agr. M Sc Fitopatologa
Ing. Agr. M Sc Fitopatologa
Ing. Agr. Ph D in Plant Sciences
Adm.CAgr. M Sc. Biotecnologa
Microbilogo M Sc Fitopatologa
Ing. Agr. Ph D Fitopatologa
Ing. Agr. M Sc Fitopatologa
Ing. Agr. Ph D Virologa
Ing. Agr. Ph D Virologa
Bacteriloga Ph D Fitopatologa
Ing. Agr. M Sc Ciencias Agrcolas
Bilogo Genetista M Sc Ciencias
Ing. Agr. Ph D Fitopatologa
Qumico Ph D Fitoqumica
Quimico- Ph D Ciencias Qumicas
Lic. Bio-Qumica, - Ph D Ciencias Qumicas
Ing. Agr. M Sc. Fitopatologa
Ing. Agr. Ph D Bacteriologa
Ing. Agr. Espec. Fitopatologa
Ing. Agr. M Sc Fitopatologa
Ing. Agr, - Ph D
Ing. Agr. Ph D Biologa
Ing. Agr. Ph D Suelos y Aguas
Ing. Agr. - M Sc Rec. Fitogenticos
Ing. Agr. Ph D Biotecnologa
Ing. Agr. M Sc Fitopatologa
Ing. Agr. M Sc Fitopatologa
Ing. Agr. Ph D Fitopatologa

ARBITROS
Ana Cecilia Velasco Fernndez
Bernardo Villegas Estrada
Bertha Lucia Castro C
Diana Marcela Vanegas Villa
Jos Maria Hernndez Murillo
Maria Luisa Guzmn
Mauricio Castao Jaramillo
Nelson Bravo Otero
Octavio Montoya Estrada

Bacteriloga
Ing. Agr. M Sc Fitopatologa
Ing. Agr. M Sc.Fitopatologa
Adm. C Agr. M Sc. Biotecnologa
Ing. Agr. Espec. En Fitopatologa
Bacteriloga y Laboratorista Clnica
Ing. Agr.
Ing. Agr. M Sc Sistemas de Semilla
Ing. Agr.

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