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Pg.
SUBCOMPETENCIA 1 ....................................................................................................... 1
PRCTICA 1. COLORIMETRA ......................................................................................... 1
PRCTICA 2. DETERMINACIN COLORIMTRICA DE CLORO EN AGUA ............ 5
SUBCOMPETENCIA 2 ....................................................................................................... 9
PRCTICA 3. ESPECTRO DE ABSORCIN UV-VISIBLE ............................................. 9
PRCTICA 4. CURVA DE CALIBRACIN ..................................................................... 13
PRCTICA 5. CUANTIFICACIN ESPECTROFOTOMTRICA
DE GLUCOSA EN ALIMENTOS ...................................................................................... 17
ANEXOS ............................................................................................................................. 22
ANEXO I. INSTRUMENTOS DE EVALUACIN ........................................................... 23
ANEXO II. LINEAMIENTOS GENERALES EN MATERIA DE
SEGURIDAD E HIGIENE A SEGUIR EN LOS LABORATORIOS ............................... 27
SUBCOMPETENCIA 1
PRCTICA 1. COLORIMETRA
1.1 GENERALIDADES
La sensacin de color es la respuesta de una serie de estmulos combinados fsicos,
qumicos y biolgicos de ciertas partes de la retina del ojo para la energa radiante de
determinadas longitudes de onda o frecuencias. El ojo humano es sensible solamente a una
pequea porcin del espectro electromagntico total, es decir, desde unas 400 a 750 nm.
Una disolucin que contiene hierro (III) y tiocinato tiene color rojo, a causa de que el
FeCNS2+ en disolucin absorbe las radiaciones de longitudes de onda corta (azul) y
transmite las largas (rojo). Una disolucin que Cu(NH3)42+ es azul, a causa de que absorbe
las radiaciones de longitud de onda intermedia (verde, amarillo) y transmite las cortas
(azules). Una disolucin de permanganato es prpura porque absorbe las radiaciones de
longitud de onda intermedia (verde, amarillo) y transmite las cortas (azules) y las largas
(rojas).
1.2 OBJETIVO
Analizar colorimtricamente una sustancia problema para estimar su concentracin.
Colorantes vegetales
Agua destilada
1.4 PROCEDIMIENTO
1. Proporcionar una solucin patrn (C = 1,200 ppm) y una solucin problema para
determinar su concentracin.
2. Preparar una serie de soluciones patrones que comprendan la concentracin estimada del
analito: a partir de la solucin madre patrn realizar al menos diez diluciones (se
recomienda diluciones seriadas de diez unidades).
3. Con las soluciones obtenidas comparar la solucin problema para estimar su
concentracin de acuerdo a la intensidad de color.
4. La concentracin del analito estar comprendida entre las concentraciones de las
soluciones problemas cuya intensidad colorida se aproxim a la de la muestra problema
o la solucin patrn con la que coincida la intensidad del color de la muestra problema.
1.5 CUESTIONARIO
1. Qu es la luz y cul es su diferencia con otras radiaciones electromagnticas?
2. Describa brevemente el fenmeno del color y la interaccin con la luz blanca.
3. Dibuje el diagrama de orbital molecular de un flavonoide y explique porque presentan color
de acuerdo a la transicin HOMO-LUMO.
Solucin patrn
Preparacin de las
soluciones y
diluciones
Mediciones de la
concentracin
Solucin residual
D1
1.7 EVALUACIN
Ver Anexo 1: Instrumentos de evaluacin.
1.8 BIBLIOGRAFA
1. Seamus Higson; Patricia Bulderos. 2007. Qumica Analtica. Editorial Mc Graw Hill.
2. Skoog, Douglas. 2001. Qumica Analtica. Editorial Mc Graw Hill.
SUBCOMPETENCIA 1
PRCTICA 2. DETERMINACIN COLORIMTRICA DE
CLORO EN AGUA
2.1 GENERALIDADES
La determinacin de cloro residual es de gran importancia en los procesos de desinfeccin
de las aguas potables y residuales.Una buena prctica de cloracin indica que cuando la
concentracin de cloro residual es de 0.5 a 2.0 ppm como cloro libre, en un tiempo de
contacto de 15 a 30 minutos son suficientes para desactivar la mayora de las bacterias
patgenas.
En contraste, la presencia de cloro en aguas que se vierten en las aguas de ros y mares es
perjudicial ya que la mayora de las especies de peces mueren por efecto del cloro en las
aguas vertidas.En la industria de bebidas y alimentos, una vez desinfectadas sus aguas
empleadas como ingredientes en el producto, es necesario remover el cloro residual, ya que
ste puede impartir olores y sabores extraos y desagradables al producto elaborado.
La determinacin de cloro en este rango no es posible con una titulacin con tiosulfato ya
que la cantidad de cloro es mnima. Para esto se requiere de un mtodo que proporcione
mayor sensibilidad, los mtodos ms sensibles son los colorimtricos, por lo que en este
caso se emplea la tcnica de la ortotolidina. La ortotolidina reacciona con el cloro libre para
producir un complejo de color amarillo canario cuya intensidad es directamente
proporcional a la concentracin de cloro libre o residual.
2.2 OBJETIVO
Determinar colorimtricamente la concentracin de cloro en muestras de agua.
Colorantes vegetales
1 Gogless
2.4 PROCEDIMIENTO
1. Tomar 5 10 ml. de muestra de agua y colocar en un tubo de ensayo de esa capacidad.
2. Agregar 3-5 gotas de solucin de ortotolidina y de inmediato la solucin adquiere un
color amarillo en la presencia de cloro libre. Comparar el color de la muestra con la
escala de concentracin de cloro y de esta manera se estima su concentracin.
3. Obtener la escala de concentracin de cloro a partir de una solucin patrn de cloro y
hacer diez diluciones para abarcar una rango ms amplio
4. Comparar el color obtenido en la muestra problema con el de la serie de patrones para
estimar la concentracin de cloro.
5. Filtrar la muestra de agua si esta presenta turbidez para quede clara y cristalina y de esta
manera el color del agua no interfiera con el color adquirido con la ortotolidina.
2.5 CUESTIONARIO
1.- Dibuje la frmula de la ortotoluidina.
2.- Dibuje la reaccin entre la ortotoluidina y el cloro.
3.- De la estructura de la ortotoluidina seale los grupos cromforos y auxcromos.
4.- De acuerdo a la estructura molecular de la ortotoluidina y el producto de la reaccin con
el cloro, justifique cul presenta una menor energa en la transicin HOMO-LUMO.
5.- Qu otros mtodos se pueden para la determinacin de cloro en agua?
6.- Cul sera el rango de luz que absorbe el producto de la reaccin?
7.- Si el mtodo fuera espectrofotomtrico, a qu longitud de onda se medira la
absorbancia?
8.- Dibuje el espectro de absorcin de la ortotoluidina y discuta por qu es as.
Solucin
residual
D1
Figura 2. Diagrama ecolgico: Determinacin Colorimtrica de Cloro en Agua.
2.7 EVALUACIN
Ver Anexo 1: Instrumentos de evaluacin.
2.8 BIBLIOGRAFA
1. Seamus Higson; Patricia Bulderos (2007). Qumica Analtica. Editorial Mc Graw Hill.
2. Skoog, Douglas. (2001). Qumica Analtica. Editorial Mc Graw Hill.
SUBCOMPETENCIA 2
PRCTICA 3. ESPECTRO DE ABSORCIN UV-VISIBLE
3.1 GENERALIDADES
La radiacin absorbida por las molculas desde esta regin del espectro provoca
transiciones electrnicas que pueden ser cuantificadas.La espectroscopia UV-visible se
utiliza para identificar algunos grupos funcionales de molculas, y adems, para determinar
el contenido y fuerza de una sustancia.
3.2 OBJETIVO
Analizar los espectros de absorcin obtenidos de las sustancias problemas proporcionadas.
Colorantes vegetales
1 Gogless
Agua destilada
3.4 PROCEDIMIENTO
1. Preparar diversas soluciones de sustancias coloridas (de pigmentos vegetales), de una
concentracin adecuada, es decir, cuya intensidad de color permita el paso de la luz a
travs de la solucin.
2. Los colores que se analizarn debern ser amarillo, azul y rojo; adems se puede
analizar sustancias moradas, verdes o naranjas o cualquier otro color adicional.
3. Depositar en una cubeta una cantidad propicia de agua (de 1.0 a 3.0 mL dependiendo del
tamao y forma de la celdilla), limpiar con una gasa y blanquear el espectrofotmetro
UV-visible de escner.
4. Vaciar la cubeta, secar y llenar con la solucin colorida, limpiar la celdilla y determinar
el espectro UV-visible de la sustancia.
5. Guardar el espectro obtenido para su anlisis. En caso de no obtener un espectro
apropiado probar diferentes concentraciones (mayor o menor, segn sea el caso).
6. Imprimir los espectros obtenidos y adherir a la bitcora de trabajo para su conservacin
y anlisis posterior.
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3.5 CUESTIONARIO
1. Qu es un espectro de absorcin y qu informacin proporciona?
2. Explique a que se debe el color, por qu se ve coloreada ciertas sustancias y su relacin con la
luz absorbida.
3. Describa brevemente la ley de Beer.
4. Discuta por qu se debe mantener constante la concentracin del analito durante la elaboracin
de un espectro de absorcin.
5. Explique qu es el coeficiente de absortividad molar, cmo se determina y cmo influye en las
caractersticas del mtodo espectrofotomtrico.
Preparacin de las
soluciones y diluciones
Mediciones de la
concentracin
Solucin
residual
D1
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3.7 EVALUACIN
Ver Anexo 1: Instrumentos de evaluacin.
3.8 BIBLIOGRAFA
1. Seamus Higson; Patricia Bulderos (2007). Qumica Analtica. Editorial Mc Graw Hill.
2. Skoog, Douglas. (2001). Qumica Analtica. Editorial Mc Graw Hill.
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SUBCOMPETENCIA 2
PRCTICA 4. CURVA DE CALIBRACIN
4.1 GENERALIDADES
La espectrofotometra consiste en una tcnica que se basa en la capacidad para absorber una
serie de molculas para determinadas radiaciones. La dilucin en serie se hace usualmente
preparando seis o siete tubos con un volumen dado de solvente. Es muy importante mezclar
bien para distribuir uniformemente las molculas de la sustancia experimental. De otra
forma, habra incongruencias en las lecturas de absorbancia.
4.2 OBJETIVO
Obtener y Corregir una curva de calibracin espectrofotomtrica.
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Colorantes vegetales
1 Gogless
Agua destilada
4.4 PROCEDIMIENTO
1. Preparar una solucin patrn de concentracin 100 ppm (se dispondr en el laboratorio
segn la prctica).
2. Hacer una serie de diez diluciones a partir de la solucin madre dada.
3. Consultar la bitcora para analizar el espectro de absorcin de la sustancia problema
para determinar la longitud de onda de trabajo.
4. Leer la absorbancia de las soluciones patrones y medir la absorbancia de la solucin
problema.
5. Graficar en papel milimtrico y tabular para obtener los datos estadsticos (coeficiente
de regresin lineal y ecuacin de la recta).
6. Obtener la concentracin a partir de los datos grficos y comparar con la concentracin
obtenida de los datos analticos.
7. Apreciar igualmente la concentracin de la muestra problema por colorimetra.
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4.5 CUESTIONARIO
1. Qu parmetro estadstico sirve para ver la linealidad de una curva de calibracin?
2. Escriba la ecuacin de la recta y exprese la ecuacin de la recta para una curva de
calibracin en trminos de los parmetros medidos.
3. Qu valores puede tomar un coeficiente de correlacin lineal? Cul es un valor
aceptable para una curva de calibracin?
4. Explique cmo se obtiene una curva de calibracin?
5. Por qu es necesario calibrar un equipo o un mtodo?
Solucin patrn
Preparacin de las
soluciones y diluciones
Mediciones de la
concentracin
Solucin
residual
D1
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4.7 EVALUACIN
Ver Anexo 1: Instrumentos de evaluacin.
4.8 BIBLIOGRAFA
1. Seamus Higson; Patricia Bulderos (2007). Qumica Analtica. Editorial Mc Graw
Hill.
2. Skoog, Douglas. (2001). Qumica Analtica. Editorial Mc Graw Hill.
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SUBCOMPETENCIA 2
PRCTICA 5. CUANTIFICACIN
ESPECTROFOTOMTRICA DE GLUCOSA EN
ALIMENTOS
5.1 GENERALIDADES
Los alimentos pueden contener diversos compuestos muy semejantes entre s, por ello suele
utilizarse mtodos enzimticos para cuantificar especficamente un componente sin
interferencia. Un ejemplo tpico es el anlisis espectrofotomtrico enzimtico para la
valoracin de glucosa en alimentos (mieles y bebidas) para cuantificarlo especficamente y
diferenciarla de otros azcares como la sacarosa o galactosa.
5.2 OBJETIVO.
Cuantificar espectrofotomtricamente la concentracin de glucosa en un alimento dado.
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1 Gogless
enzimtica de glucosa
5.4 PROCEDIMIENTO
1. Preparar una solucin patrn de glucosa de concentracin de 10mg/dL y obtener una
serie de diluciones para la determinacin de la curva patrn considerando volmenes
de reactivo.
2. Incubar a temperatura ambiente por 15 minutos y se determina la absorbancia a 505 nm.
3. Determinar el coeficiente de regresin y la ecuacin de la recta, graficar y analizar la
curva de calibracin de glucosa obtenida.
4. Tomar una muestra de miel o bebida y diluir de acuerdo a la cantidad de glucosa
esperada para obtener una concentracin final de glucosa en el tubo de reaccin
comprendida entre el rango de concentracin de glucosa de la curva de calibracin
anterior.
5. Determinar la concentracin de glu
del alimento y mezclndola con 1.0 mL de reactivos.
6. Incubar 15 minutos a temperatura ambiente y leer a 505 nm. Calcula la concentracin de
glucosa en el alimento original si la absorbancia queda dentro del rango de linealidad.
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5.5 CUESTIONARIO
1. Cul es el fundamento de la determinacin espectrofotomtrica de la glucosa?
2. Describa dos mtodos alternos para determinacin de glucosa en alimentos.
3. Cules son las ventajas de la determinacin espectrofotomtrica de la glucosa?
4. Qu factores pueden afectar en la determinacin de glucosa en alimentos?
5. Explique cmo se determinara la concentracin de glucosa en un alimento con alta
concentracin de ella, como una melaza o una miel.
Solucin
patrn
Preparacin de las
soluciones y diluciones
Mediciones de la
concentracin
Solucin
residual
D1
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5.7 EVALUACIN
Ver Anexo 1: Instrumentos de evaluacin.
5.8 BIBLIOGRAFA
1. Seamus Higson; Patricia Bulderos (2007). Qumica Analtica. Editorial Mc Graw
Hill.
2. Skoog, Douglas. (2001). Qumica Analtica. Editorial Mc Graw Hill.
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BIBLIOGRAFA GENERAL
1. Seamus Higson; Patricia Bulderos. 2007. Qumica Analtica. Editorial Mc Graw Hill.
2. Skoog, Douglas. 2001. Qumica Analtica. Editorial Mc Graw Hill.
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ANEXOS
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Grado/grupo:
Matricula:
2
Escala
Acondiciona y prepara su
rea de trabajo
A veces
Con regularidad
Siempre
Prepara en forma
adecuada equipos y
materiales
A veces
Con regularidad
Siempre
Individual
Con su equipo
Colaborativamente
Escasamente
Medianamente
Totalmente
Inadecuada
Medianamente
adecuada
Adecuadamente
Demuestra conocimiento
al realizar las actividades
de la prctica
Insuficiente
Suficiente
Excelente
Emplea de forma
adecuada equipo(s),
reactivos y materiales
Poco cuidadoso
Cuidadoso
Muy cuidadoso y
meticuloso
Poco cuidadoso
Cuidadoso
Muy cuidadoso y
meticuloso
Inadecuadamente
Medianamente
adecuada
Adecuadamente
Con compaeros e
instructor
Con compaeros,
instructor y
sujeto/objeto de
estudio
En el equipo realiza de
adecuada las tareas que
se le encomiendan
Escasamente
Medianamente
Totalmente
En el desarrollo de la
prctica emplea el tiempo
eficientemente
Escasamente
Por intervalos
breves
En todo el desarrollo
de la prctica
Escasamente
Medianamente
Totalmente
Es organizado en su
forma de trabajo
Al concluir la prctica
colabora con el equipo
con la limpieza y entrega
de materiales
Ponderacin
Observaciones
y sugerencias
Total de puntos
Fuente: Martha Rosales Raya / Adecuado por comit de academia.
24
Forma 20%
EQUIPO No.
Puntos
4 3 2
Puntos
Ponderados
Criterio
Indicadores
Presentacin
x 0.2=
x 0.2=
x 0.2=
X 0.8=
X 0.8=
X 0.8=
X 0.8=
X 0.8=
X 0.8=
X 0.8=
X 0.8=
Organizacin
Introduccin
Contenido 80%
Procedimiento*
Registro de
observaciones*
Conceptos
cientficos
Total de
puntos
25
Forma 20%
EQUIPO No.
Puntos
4
3
Puntos
Ponderados
Criterio
Indicadores
Presentacin
X 0.2=
Fecha de
entrega
X 0.2=
Organizacin
X 0.2=
Ortografa
X 0.2=
Referencias
bibliogrficas
X 0.2=
X 0.8=
X 0.8=
X 0.8=
X 0.8=
X 0.8=
X 0.8=
X 0.8=
X 0.8=
X 0.8=
X 0.8=
X 0.8=
X 0.8=
Introduccin
Hiptesis
(En caso de
requerirse)
Contenido 80%
Procedimiento*
Registro de
observaciones*
Discusin y
Conclusin*
Conceptos
cientficos
Total de puntos
Fuente: Rafael Manuel de Jess Mex lvarez / Adecuado por comit de academia.
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SEGURIDAD
HIGIENE
SEGUIR
EN
LOS
LABORATORIOS
Las actividades de carcter docente e investigador que se llevan a cabo en las prcticas de
laboratorios del Programa Educativo de Qumico Farmacutico Bilogo de la Facultad de
Ciencias Qumico Biolgicas (FCQB) de la Universidad Autnoma de Campeche (UAC)
conllevan, en determinados casos, un riesgo dependiendo del tipo de trabajo que se
desarrolle.
Este documento recoge los lineamientos necesarios para llevar a cabo un trabajo seguro y
eficiente atendiendo a las indicaciones del Reglamento Federal de Seguridad e Higiene y
Medio ambiente de Trabajo, publicado en el Diario Oficial de la Federacin, el 21 de enero
de 1997, Normatividad en materia de Seguridad e Higiene de la Secretaria del Trabajo y
Previsin Social, Sistema de Gestin Ambiental Yum Kaax
ISO 14001:2004 de la
Hombres y mujeres con cabello largo debern portar el pelo recogido hacia atrs.
No llevar pulseras, colgantes, mangas anchas ni prendas sueltas que puedan trabarse en
montajes, equipos o mquinas.
No fumar, comer ni beber.
No realizar reuniones o celebraciones.
No guardar alimentos ni bebidas en los frigorficos del laboratorio.
Mantener el orden en las sesiones de laboratorio y tratar con respeto al laboratorista,
compaeros y profesores.
Verificar que el material y los equipos de laboratorio a emplear se encuentren en ptimas
condiciones de funcionamiento.
Antes de hacer uso de cualquier material y/o equipo consulte su operatividad con el
laboratorista.
Mantener las mesas de trabajo limpias y sin objetos personales en las superficies (libros,
cajas o accesorios innecesarios) para el trabajo que se est realizando.
Tener la autorizacin para el uso de un producto, equipo o instalacin concreta.
Lavar y enjuagar todo el material de vidrio con agua destilada y secarlo.
Leer la etiqueta o consultar las fichas de seguridad de productos qumicos antes de
utilizarlos por primera vez.
Para efectuar pipeteos utilice siempre propipeta o perilla
No tocar ni probar, sin el uso de guantes a los productos qumicos.
Calentar tubos de ensayo de lado y utilizando pinzas.
Por su seguridad utilizar gradillas y soportes.
Comprobar la temperatura de los materiales antes de sujetarlos directamente con las manos.
En caso de ser necesario utilizar las campanas de extraccin.
Etiquetar adecuadamente los frascos y recipientes a los que se haya transvasado algn
producto o donde se hayan preparado mezclas, identificando su contenido, a quin
pertenece y la informacin sobre su peligrosidad (reproducir el etiquetado original).
Reportar cualquier accidente o anomala ocurrida durante la prctica, de manera inmediata
al laboratorista.
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MARCO JURDICO
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