Ao de la consolidacin del mar de Grau

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA

FACULTAD DE INGENIERA

E. A. P. DE INGENIERIA AGROINDUSTRIAL

Practica N: 13
Tema: Accin de la bromelina e identificacin de aminocidos en la gelatina
Grupo: B
Docente: Carmen Izaziga Barrera
Asignatura: Bioqumica

Integrantes:
Egoavil Soto Mishel
Pasin Rodrguez Evelyn

Nuevo Chimbote 19 de julio del 2016

I.

INTRODUCCION

El cido desoxirribonucleico o ADN (DNA) es la molcula que guarda el

cdigo gentico de todas las clulas. Sin importar que el organismo sea
multicelular o unicelular, eucariota o procariota, todos tienen el DNA como
vehculo de su cdigo gentico.
Muchas de las tcnicas de biologa molecular incluyen algn tipo de
manipulacin del material gentico. Estos procedimientos han logrado
adelantar hasta tal grado el conocimiento del cdigo gentico, que ya es
posible clonar organismos enteros. Los procedimientos iniciales eran largos
y tediosos y podan pasar varios das antes de saber con certeza que se
haba logrado obtener DNA en calidad y cantidad suficiente para poder
manipularlo. Adems algunos de los reactivos usados para estos procesos
son txicos y mutagnicos. Hoy da podemos obtener suficiente DNA de
buena calidad en unas horas.
Durante el laboratorio de hoy estaremos utilizando un mtodo rpido
para aislar DNA a partir de tejidos animales. Este se llama "DNeasy Tissue
Kit" y es producido por QIAGEN. Este usa tecnologa avanzada de
membranas de silicato para purificar rpidamente DNA celular total sin usar
extracciones orgnicas ni precipitacin con etanol.
El sistema permite una lisis directa seguida de fijacin selectiva de
DNA a la membrana. Los contaminantes e inhibidores enzimticos son
removidos por centrifugacin. Luego de la lisis, el procedimiento toma unos
20 minutos. La lisis se logra usando proteinasa K. Luego se ajusta el pH con
amortiguadores para lograr mxima fijacin de DNA a la membrana, durante
una corta centrifugacin. Los contaminantes restantes son removidos en
dos lavados y el DNA es eludo en agua o amortiguador. El resultado es
DNA listo para usar.
El tamao de los fragmentos de DNA obtenidos varan entre los 0.1
a 50 kb, predominando fragmentos de ~ 30 kb de largo. Estos pueden ser
usados para PCR (reaccin en cadena de polimerasa), Southern Blotting,
RFLP (para determinar presencia de genes marcadores, tipificacin de
tejidos), etc.
La cantidad mxima de tejido para lograr aislar DNA vara, dependiendo
del tipo de dicho tejido. En caso de los tejidos animales, la cantidad mxima
es de 25 mg. Si se usa bazo, se reduce a 10 mg porque este tejido es
extremadamente denso. Si se usan cultivos microbiolgicos, deben usarse
durante la fase temprana de crecimiento logartmico a una concentracin no
mayor de 2 x 109 unidades formadoras de colonias (cfu) en caso de bacterias
y de 5 x 107 cfu en caso de levaduras.
II.
OBJETIVOS:
Extraer El ADN a partir de una muestra biolgica.
Reconocer microscpicamente el ADN, haciendo uso de un colorante.

III.

MATERIALES Y MTODOS

Preparacin de la muestra:
Se pes 6g. de gelatina de color claro y se disolvi en 30ml de agua caliente,
luego se dej enfriar en tres vasos descartables.
Accin de la bromelina sobre la gelatina
Se prepar el siguiente esquema:
MUESTRA
VASO 1
VASO 2
VASO 3
Gelatina
10
10
10
Extracto de pia fresco
--2
--Extracto de pia
----2
hervido
Luego se mezcl y se dej en repodo por 30 minutos para finalmente
refrigerarlo por 30minutos.
IV.

RESULTADOS
VASOS
1
2
3

OBSERVACIONES
No hubo digestin.
Si hubo digestin.
No hubo digestin.