UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN CRISTBAL DE

HUAMANGA
FACULTAD DE CIENCIAS BIOLGICAS
ESCUELA DE FORMACIN PROFESIONAL DE BIOLOGA

TEMA

REACCIN ANTGENO ANTICUERPO

PROFESOR: SAUL A. CHUCHN MARTINEZ

CURSO: MICROBIOLOGIA GENERAL

ALUMNO: MALDONADO VELENZUELA, Michael
GRUPO: mircoles 7:00 a 9:000
Viernes 8:00 a 9:00

AYACUCHO PER
2016
1

NDICE

INTRODUCCIN ............................................................................................................................ 3
MARCO TERICO .................................................................................................................... 4
PROPIEDADES DE LA UNIN ANTGENO-ANTICUERPO ................................. 4

I.
1.

ESPECIFICIDAD:................................................................................................... 4

2.

AFINIDAD: .............................................................................................................. 4

3.

AVIDEZ:................................................................................................................... 4
EXPRESIN DE LA UNION ANTIGENO - ANTICUERPO IN VITRO .................. 4

II.
1.

REACCIN DE NEUTRALIZACIN: ................................................................. 4

2.

REACCIN DE PRECIPITACIN....................................................................... 5

*Segn su clasificacin son:......................................................................................... 5

2.1.

INMUNODIFUSIN PASIVA: .............................................................................. 5

2.2.

INMUNODIFUSIN ACTIVA................................................................................ 6

III.

REACCIN DE AGLUTINACIN ........................................................................... 6

IV.

REACCIN DE INMUNOFLUORESCENCIA ....................................................... 7

a.

En el mtodo directo, .......................................................................................... 7

b.

En el mtodo indirecto,....................................................................................... 7
REACCIN DE FIJACIN DE COMPLEMENTO .................................................... 8

V.

ACCIONES DEL COMPLEMENTO ................................................................................ 8

VI.

PRUEBA DE FIJACIN DE COMPLEMENTO .................................................... 9

RESUMEN................................................................................................................................. 10
BIBLIOGRAFA........................................................................................................................ 11

INTRODUCCIN
El antgeno es una sustancia extraa que se introduce al interior de nuestro organismo
provocando una respuesta inmunitaria estimulando la produccin de anticuerpos, la
reaccin antgeno-anticuerpo es la especificidad en la que un antgeno solo puede
combinarse con el anticuerpo que lo induce a una estrecha relacin. La unin entre stos
se lleva a cabo en la formacin de un enlace entre la regin fijadora del antgeno de la
inmunoglobulina y el determinante antignico.

Esta reaccin antgeno-anticuerpo puede conducir in vivo a la neutralizacin del efecto

txico de una toxina bacteriana o a la inhibicin de la multiplicacin de un virus, tambin
puede ser observable directamente como la formacin de un precipitado o la
aglutinacin celular, a la vez puede presentar reacciones biolgicas subsiguientes a las
anteriores (lisis bacteriana).

MARCO TERICO
I.

PROPIEDADES DE LA UNIN ANTGENO-ANTICUERPO

1. ESPECIFICIDAD: capacidad de los anticuerpos para diferenciar entre
antgeno (epttopos) estructuralmente muy prximos o parecidos. Los
anticuerpos reaccionan de forma ms eficaz con los antgenos que
desencadenaron su produccin (antgenos homlogos), que con antgenos
similares u otros antgenos (antgenos heterlogos). Los elementos estructurales
del epitopo que destacan de la masa central del inmungeno se comportan como
inmunodominantes, y son particularmente significativos en la determinacin de
la especificidad. Estos anticuerpos son muy discriminadores y distinguen
fcilmente entre dos molculas que difieren en un carbono, o incluso entre
ismeros de la misma molcula.

2. AFINIDAD: fuerza de unin entre el antgeno y el anticuerpo en el

inmunocomplejo elemental definida por la suma de las fases de unin y repulsin
que concurren en los lugares de interaccin. Los complejos inmunitarios de
escasa afinidad son ms persistentes in vivo y tienden a inducir fenmenos de
autoinmunidad. Los complejos de alta afinidad son eliminados con ms eficacia
y no tienden a inducir fenmenos autoinmunitarios.

3. AVIDEZ: fuerza de unin de un antgeno polivalente con su poblacin de

anticuerpos de especificad mltiple; es decir, la afinidad global de todas las
molculas que constituyen el retculo o complejo antgeno-anticuerpo.

II.

EXPRESIN DE LA UNION ANTIGENO - ANTICUERPO IN

VITRO
Dependiendo de la naturaleza del antgeno y del anticuerpo y de las
condiciones de la reaccin se pueden observar diferentes tipos de reacciones
serolgicas:
1. REACCIN DE NEUTRALIZACIN:
Mediante anticuerpos especficos (sueros) se pueden neutralizar antgenos
como toxinas, virus o enzimas, su unin provocar la neutralizacin y hasta no
4

podr ejercer su efecto toxico. Los anticuerpos neutralizantes requieren un solo

tipo de combinacin con el antgeno para poder actuar y hasta pueden ser
univalentes, bivalentes o multivalentes. Un antisuero que contiene anticuerpos
neutralizantes contra una toxina se denomina "antitoxina".

2. REACCIN DE PRECIPITACIN
La reaccin de precipitacin ocurre cuando se combina un anticuerpo
divalente, con un antgeno soluble y conlleva a la formacin de agregados que
precipitan en un punto de concentracin ptima entre ambos. Estas
reacciones

de

especialmente

precipitacin
mide

son

fcilmente

concentraciones

de

observables

anticuerpos.

"in

Para

vitro",
que

la

precipitacin ocurra en forma mxima se necesita que tanto el antgeno como

el anticuerpo estn en concentraciones ptimas, cuando cualquiera de los
reaccionantes estn en exceso no se pueden formar grandes agregados
antgeno-anticuerpo.

*Segn su clasificacin son:

2.1.

INMUNODIFUSIN PASIVA:
a. Prueba del anillo o prueba de la interfase: se realiza deslizando unas
gotas de la solucin de antgeno sobre la superficie de un suero sin diluir,
si se produce la reaccin aparece un anillo de precipitacin en la interfase
suero.

b. Difusin en Gel: tcnica de uso frecuente y son:

Difusin simple en tubo: se realiza en un gel de Agar, que

contiene el anticuerpo o el antgeno solidificado en el interior del
tubo, sobre cuya superficie se aade, en fase lquida, una solucin
de antgeno o de anticuerpo segn el caso.
Doble difusin en tubo: idntica a la anterior con la diferencia
entre la columna de Agar que contiene el anticuerpo y la fase que

contiene el antgeno se interpone una columna de Agar, en cuyo

espesor se produce el encuentro de ambos reactantes.
Doble difusin en placa: se realiza en pocillos perforados en una
capa de Agar, en los que se vierten soluciones de antgenos o
anticuerpos y la difusin perifrica en el espesor del Agar de ambos
reactante se encontrar a cierta distancia de los pocillos,
produciendo bandas de precipitacin.

2.2.

INMUNODIFUSIN ACTIVA
a. Contrainmunoelectroforesis: se realiza en geles de Agar, en la placa
se abren dos pocillos; uno contendr antgeno y el otro anticuerpo, luego
la placa es sometido a un campo electrofortico, antgeno y anticuerpo
emigran uno hacia el otro hasta encontrarse y producir una banda de
precipitacin si existe especificidad entre los dos reactantes.
b. Electroinmunoanlisis

Electroinmunodifusin en dos dimensiones: los antgenos son

sometidos a un campo electrofortico en un gel que contiene el
anticuerpo. El anticuerpo permanece fijo y el antgeno emigra en el
gel formndose precipitados en forma de "cohetes".

Electroforesis cruzada de Laurell: se realiza una electroforesis de

las protenas a diferenciar. Una vez efectuada la separacin, la
placa de Agar se adhiere a otra que contiene los antgenos y se
somete

una

electroforesis

cruzada,

producindose

una

precipitacin en forma de cohetes.

III.

REACCIN DE AGLUTINACIN
Cuando un antgeno particulado (bacterias, clulas o hemates) reacciona
con su anticuerpo especfico (divalente por lo menos), se observa la
formacin de grumos o agregados de estas partculas, esto se conoce como
aglutinacin. En estas reacciones el determinante antignico est sobre la
superficie de una partcula o de una clula.

Estas reacciones son ms sensibles que las de precipitacin para detectar

pequeas cantidades de anticuerpos, debido a que relativamente pocas
molculas de anticuerpo pueden unir efectivamente un gran nmero de
partculas de antgeno en grumos gruesos macroscpicamente visibles. Es
por esto que cuando queremos aumentar la sensibilidad de una reaccin de
un antgeno soluble con su anticuerpo especfico, se transforma el antgeno
soluble en particulado adsorbindolo o unindolo qumicamente a partculas
como esferas de ltex o arcilla coloidal y de esta manera pueden ser
detectados los anticuerpos por reacciones de aglutinacin, conocido como
AGLUTINACIN PASIVA.

Tambin se pueden aglutinar glbulos rojos y este fenmeno se conoce

como HEMAGLUTINACIN.

IV.

REACCIN DE INMUNOFLUORESCENCIA
Es una tcnica donde las molculas de anticuerpos son convertidos en
sustancias fluorescentes, unindoles qumicamente a compuestos orgnicos
fluorescentes tales como isotiocianato de fluorescencia (fluorescencia
verdosa) o rodamina (fluorescencia rojiza). Esto no altera la especificidad del
anticuerpo pero hace posible su deteccin cuando est unido a clulas o
tejidos usando un microscopio para fluorescencia. Los anticuerpos
fluorescentes son de considerable utilidad en microbiologa diagnstica.

Para demostrar la presencia de antgenos o clulas bacterianas utilizando

anticuerpos fluorescentes, existen dos procedimientos: el mtodo directo y
el indirecto.

a.

En el mtodo directo, el anticuerpo marcado se utiliza para aadir

contra el antgeno especfico. La preparacin cubierta con una
solucin del anticuerpo fluorescente, se incuba durante un tiempo en
una estufa, para que se produzca la reaccin antgeno-anticuerpo. Se
lava y se observa en el microscopio de fluorescencia.

b.

En el mtodo indirecto, la presencia del anticuerpo especfico

sobre la superficie de la clula es detectada por el uso de otro
anticuerpo fluorescente dirigido contra el anticuerpo especfico.
7

V.

REACCIN DE FIJACIN DE COMPLEMENTO

Adems de las reacciones antgeno-anticuerpo ya descritas, existen otros
tipos de reacciones de gran importancia en inmunidad donde participa el
Complemento.

El complemento acta junto con los anticuerpos especficos para llevar a cabo
varios tipos de reacciones antgeno-anticuerpo que de otra manera no podran
ocurrir, tales como: lisis de clulas bacterianas, muerte de clulas
bacterianas, hemlisis, etc.

El complemento no es un anticuerpo (por lo tanto no aumenta con la

inmunizacin), sino una serie de enzimas que se encuentran en el suero
normal y que atacan a las clulas bacteriana su otros agentes extraos.
Estas enzimas, que se encuentran an en individuos no inmunizados, son
normalmente inactivas, pero se activan cuando ocurre una reaccin
Antgeno-anticuerpo. Una de las principales funciones del anticuerpo es
reconocer las clulas invasoras y activar el sistema del complemento para
que acte. Ciertos componentes del complemento son muy termolbiles, se
destruyen por calentamiento a 56C por 30 minutos, por otra parte los
anticuerpos son termoestables.

ACCIONES DEL COMPLEMENTO

Entre las principales acciones del complemento tenemos:
a.

Lisis de los glbulos rojos (hemlisis)

Si un antisuero contra glbulos rojos se mezcla con una suspensin
de glbulos rojos y se le aade suero normal como fuente de
complemento ocurre la lisis a los 30 minutos de incubacin a 37C.
La hemlisis se usa a menudo como prueba de la presencia de
complemento en sueros desconocidos o para medir la fijacin de
complemento.

b.

Lisis bacteriana
Especialmente de bacterias Gram negativas, cuando los
anticuerpos especficos se combinan con el antgeno de la
superficie bacteriana en presencia de complemento.

c.

Muerte microbiana
En ausencia de lisis ocurre la muerte microbiana cuando los
anticuerpos especficos se combinan con los antgenos de la
superficie bacteriana en presencia de complemento.

d.

Promocin de la accin fagocitaria:

Cuando se combinan bacterias capsuladas con el anticuerpo
especfico en presencia de complemento se promueve la accin
fagocitaria Este proceso en el cual los anticuerpos especficos
ms complemento hacen una clula susceptible a la fagocitosis
se llama OPSONIZACION.

VI.

PRUEBA DE FIJACIN DE COMPLEMENTO

Una propiedad importante del sistema del complemento es que sus
componentes son enzimticamente alterados durante la reaccin, de modo que
no reaccionarn en una nueva secuencia de reacciones, es decir si el
complemento es consumido durante las reacciones
Antgeno - anticuerpo esto es llamado FIJACION DE COMPLEMENTO y ocurre
cuando un anticuerpo de tipo IgG o IgM reacciona con el antgeno en presencia
de complemento, aun cuando ste no sea requerido en la reaccin.
La prueba de fijacin de complemento se lleva a cabo en dos fases. En la fase
primera se mezclan el suero del paciente (previamente calentado a 56C) y el
antgeno en presencia de una cantidad determinada de complemento; esta
mezcla es generalmente incubada durante 30 minutos a 37C. Si se forman los
complejos antgeno-anticuerpo, el complemento es fijado.
En la segunda fase se aade el sistema indicador que consiste en glbulos
rojos de carnero y anticuerpos contra glbulos rojos de carnero. La ocurrencia
de hemlisis indica que el complemento no fue utilizado por lo tanto, en la fase
1 no se ha producido una reaccin Ag-Ac especfica.
En cambio, la ausencia de hemlisis, indica que el complemento ha sido fijado
y por lo tanto que en la fase 1 se ha producido una reaccin Ag-Ac, en este
9

caso se considera una reaccin de fijacin del complemento positiva, mientras

que en el primer caso se considera negativa la reaccin de fijacin de
complemento. Utilizando un antgeno conocido, esta tcnica puede ser
empleada para detectar y medir anticuerpos presentes en sueros. Al ocurrir la
reaccin del antgeno con los anticuerpos del suero, sta reaccin Ag-Ac se
puede poner de manifiesto mediante una prueba de fijacin de complemento.

RESUMEN
Es la complementariedad de su estructura, que hace posible que un antgeno se una
con el anticuerpo especfico y forme el complejo antgeno-anticuerpo. En las reacciones
antgeno-anticuerpo se distinguen 2 fases: la primera consiste en la unin del antgeno
con el anticuerpo y la segunda es la manifestacin que resulta de dicha unin. La
primera fase se realiza por la combinacin de reas pequeas tanto del antgeno como
del anticuerpo, denominadas respectivamente determinante antignico y sitio activo,
que al unirse forman un complejo antgeno-anticuerpo. La reaccin es reversible
siguiendo la ley de accin de masas, existen factores externos que pueden modificar
dicha unin, como son: el pH, la temperatura y la fuerza inica.
Las tcnicas de identificacin de antgenos o de anticuerpos se basaron en la reaccin
de ambos elementos y en la medicin de sus manifestaciones fsicas como fenmenos
naturales de la unin entre antgeno y anticuerpo in Vitro.

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BIBLIOGRAFA
1. Libana J. Microbiologa Oral. Editorial Interamericana McGraw-Hill; 1995: pg.
164 -180.

2. Negroni

M.

Microbiologa

Estomatolgica.

2a

ed.

Editorial

Mdica

Panamericana; 2009: pag.165-212.

3. Romero Cabello R. Microbiologa y Parasitologa Humana. 10a ed. Editorial

Mdica Panamericana; 2007: pg. 157 - 166.

4. Garca J. A., Rodrguez J. J. Picazo. Compendio de Microbiologa Mdica. 5a ed.

Espaa. Editorial Hardcourt S.A.; 2005: pg. 99-101.

5. Rojas Espinosas scar. Inmunologa (memoria). 3o ed. Editorial Medica

Panamericana; 2006: pg. 211- 213.

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