Capitulo 41: Cultivos de muestras orgnicas Humanas

Autores:
Francisco Javier Lao Barn
o Correo: laobaron@supercable.es
o Titulacin acadmica: Diplomado en Enfermera
o Centro de Trabajo: Unidad de Cuidados Intensivos Adultos.
Hospital Torrecrdenas. Almera. Espaa

Cultivos de muestras orgnicas Humanas

INTRODUCCIN
Es un medio de estudio del que nos servimos para determinar la causa de una
infeccin. El procedimiento que se utiliza suele iniciarse con la toma de muestras de
los tejidos, exudados, lquidos corporales, etc. del paciente. A continuacin, estas
muestras se envan al laboratorio de microbiologa para su estudio posterior. El
microscopio nos permite observar los microorganismos (los presentes en esas
mismas muestras), tales como hongos o bacterias. El cultivo sirve para lograr una
proliferacin de esos microorganismos y de ese modo poder estudiarlos mejor. El
diagnstico etiolgico de la enfermedad infecciosa se establece desde el momento en
que se asla e identifica el agente causante.
Entre
los
microorganismos
que
podemos
encontrar,
tenemos: bacterias, micoplasmas y otros organismos de la clase mollicutes, clamidias
y rickettsias, parsitos, hongos, Virus.

Foto 1: recipientes para recoleccin y transporte de muestras

CULTIVO BACTERIANO
En condiciones normales, la piel, las membranas y las mucosas de nuestro
organismo estn colonizadas por diferentes especies de microorganismos. Entre ellos,

y de modo destacado, se encuentran distintos tipos de bacterias, generalmente

inofensivas, incluso algunas beneficiosas. Otras bacterias son capaces de causar
infecciones slo en determinadas circunstancias: cuando proliferan demasiado, o bien
en personas con problemas autoinmunes, o que estn tomando determinados
frmacos.
Finalmente, hay bacterias que son capaces de causar dao aun en circunstancias
normales.
Cuando se sospecha de una infeccin por una bacteria, se tomar una muestra del
lugar de la infeccin; por ejemplo un exudado (secrecin) de la conjuntiva del ojo, en
caso de conjuntivitis o bien una muestra de orina si hay una infeccin urinaria; o de
lquido cefalorraqudeo si se trata de una meningitis
Las muestras pueden proceder de prcticamente cualquier lugar del organismo.
Algunas de las bacterias (observacin directa por tincin de Gram.) importantes que
causan infeccin son:
1. Bacterias Gram. positivas:
o Estreptococos: pueden ser responsables de infeccin en la sangre,
faringitis, infeccin de las vlvulas del corazn, fiebre reumtica,
escarlatina, neumona, etc.
o Corinebacterias: difteria, infeccin de orina, etc.
o Clostridios: ttanos, botulismo, gangrena gaseosa, infeccin de la
sangre, etc.
o Bacillus: antrax.
o Estafilococos: pueden causar Neumona, infecciones supuradas (con
pus) en la piel y abscesos en otros lugares, sndrome del shock txico,
meningitis, artritis, osteomielitis, enteritis, etc.
2. Bacterias Gram negativas:
o Salmonella, Shigella y Campylobacter: pueden provocar infeccin en el
intestino.
o Escherichia coli y otras enterobacterias: pueden provocar neumona,
infeccin de orina, infeccin en la sangre, etc.
o Legionella: puede provocar una neumona grave y atpica (la
enfermedad del legionario)
o Meningococos: puede causar meningitis cerebroespinal.
o Haemophyllus: infeccin respiratoria, meningitis, etc.
o Gonococo: causa la gonorrea
o Brucella: brucelosis (fiebre de malta).
o Pseudomonas: infecciones de odo e infecciones en mltiples lugares
en personas debilitadas (neumonas en pacientes de UVI, infeccin en
los pies en diabticos, infeccin respiratoria en pacientes con fibrosis
qustica, etc.).
o Bordetella: tosferina
o Otras bacterias importantes no se tien bien con este mtodo y para
ellas se usan otros; por ejemplo, para las bacterias (micobacterias) que
causan la tuberculosis o la sfilis (treponemas).

REALIZACIN Y TRANSPORTE
La muestra se enva al laboratorio de microbiologa, para su estudio, y hasta que
sea procesada, se procurar que se altere lo menos posible. Los resultados que se
obtienen, dependen en gran medida de la calidad de la muestra, de la calidad de la
obtencin y de las condiciones de transporte, por lo que debemos:
Obtener las muestras preferentemente antes de comenzar la antibioterapia o
bien antes de introducir cualquier modificacin al tratamiento con
antimicrobianos.
La muestra obtenida no debe presentar contaminacin con flora habitual, o ser
la mnima posible.
Los sistemas de recoleccin deben ser apropiados al tipo y volumen de la
muestra que se desea obtener. El material usado debe ser estril y libre de
material residual, como detergentes o desinfectantes.
La muestra debe llegar al laboratorio tiempo determinado
Las muestras deben ser identificadas con una etiqueta adherida al envase, y
los datos anotados deben coincidir exactamente con los de la solicitud de
examen.
Deben incluirse aquellos datos del paciente que permitan al laboratorio elegir
el mejor procedimiento para el aislamiento de patgenos, tales como edad,
hiptesis diagnstica, tratamientos concomitantes (especialmente antibiticos)
enfermedades concomitantes, etctera.

Foto 2: Solicitudes para exmenes de muestras.

OBSERVACIN MACROSCPICA
1. Observacin directa sin tincin o preparacin al fresco:
o Para la bsqueda de hongos, bacterias y parsitos. La muestra se
suspende en suero fisiolgico, permite encontrar Tricomonas
Treponemas en solucin de KOH, preferentemente en la identificacin

de hongos o bien en tinta china. la visualizacin de Cryptococcus

neoformans.
2. Observacin directa con tincin:
o Tincin de Gram. La diferente coloracin que adquieren las bacterias
Grampositivas se basa en el menor contenido lpidos de la pared
celular y en la reducida permeabilidad a los solventes de estos
microorganismos, en comparacin con los gramnegativos. Las
bacterias grampositivas se tien violeta por la retencin del complejo
cristal violeta genciana/yodo, mientras que las grannegativas no
retienen el complejo y se tien rojas al usar la contratincin de
safranina.
La tincin de Gram ayuda a determinar rpidamente las caractersticas
morfolgicas , por lo
que es til en la indicacin de los antibiticos.
Esta tincin tambin permite establecer si el material enviado al
laboratorio para su cultivo posee la calidad adecuada. Por ejemplo, es
inadecuada una muestra de expectoracin en que se observan
abundantes clulas epiteliales, lo que indica que est constituida
principalmente por saliva y no secrecin del tracto respiratorio. La
presencia de polimorfosnuecleares (PMN) puede indicar infeccin. Los
hongos levaduriformes se observan formando pseudomicelios cuando
hay invasin y no slo colonizacin.
o Tincin de Giemsa y Wright. Es til en el diagnstico de algunos
parsitos como malaria y babesiosis . En las lesiones producidas por
virus Herpes simplex y virus varicela-zoster, se observan clulas
gigantes multinucleadas, propias de las lesiones virales, lo que permite
distinguirlas de las lesiones piodrmicas bacterianas.
o Tincin argntica (Gomori metenamina de plata, Dieterle). Es una
tcnica difcil de efectuar, reservada a los laboratorios especializados,
til en la deteccin de Pneumocytis carinii, Legionella.Treponema,
hongos, rickettsias, y microorganismos asociados a la enfermedad por
araazo de gato.
o Tincin cido peridico de Schiff (PAS). Permite la deteccin de hongos
en muestras de tejido.
o Tincin con anaranjado de acridina. Utiliza un fluorocromo que tie el
cido desoxirribonucleico (ADN). Es ms sensible que la tincin de
Gram , ya que an las bacterias daadas por los antibiticos pueden
ser visualizadas. Requiere de microscopio de fluorescencia.
o Tincin con azul de metileno. Es usada en la bsqueda de leucocitos
fecales, permitiendo una buena tincin de los ncleos de estas clulas.
Se visualizan en las infecciones intestinales invasoras de la pared del
tubo digestivo, como las producidas por Escherichia coli
enteroinvasora, Shigella, colitis ulcerosa, enfermedad de Crohn y
enterocolitis asociada a antibiticos.
ALGUNOS CULTIVOS

 Cultivo de Mycobacterium spp. Util en el diagnstico de tuberculosis pulmonar

pausibacilar y especialmente en las formas extrapulmonares. Actualmente est
indicado, adems del cultivo en medio slido, el cultivo en medios lquidos,
disminuyendo as los tiempos de desarrollo. En nuestro laboratorio utilizamos
el sistema MB/Bact semiautomizado para todo tipo de muestras, excepto
sangre.
Cultivo de hongos. La bsqueda puede ser de hongos levaduriformes o
miceliados. Es importante conocer hacia cul de ellos se inclina la sospecha,
dado que los tiempos de incubacin son diferentes. Los hongos levaduriformes
se incuban por plazos que oscilan entre 5 y 7 das, en cambio los filamentos
deben ser incubados por plazos ms largos, de 20 hasta 30 das.
Cultivo anaerobio. Algunas bacterias de importancia clnica son anaerbicas,
difciles de cultivar y oxgeno lbiles, por lo que en su recoleccin y transporte
deben usarse envases especiales que contengan una atmsfera reducida, es
decir, con un bajo potencial de oxidoreduccin. Es de extraordinaria
importancia que la muestra sea procesada de inmediato.
La muestra en lo posible debe ser obtenida por aspiracin. Deber evitarse la
contaminacin con flora residente, ya que en ella estn ampliamente
representadas las bacterias anaerbicas.
Los sitios anatmicos adecuados para la obtencin de muestras para estudio
de anaerobios son lquidos orgnicos estriles (Lquido pleural, sangre, bilis,
lquido peritoneal, liquido sinovial, (LCR), muestras quirrgicas obtenidas de
sitios estriles (Contenido de abscesos,
aspirado de heridas profundas) y
muestras de biopsias obtenidas en forma asptica (Transcutnea pulmonar,
aspiracin vesical suprapbica, lquido de culdocentesis , etctera).
Es importante tener presente que a toda muestra procesada para la bsqueda
de anaerobios, debe efectursele una tincin de Gram. Dado que los cultivos
tardan un tiempo en dar
resultados, el Gram puede proporcionar una
buena informacin temprana, til para iniciar tratamiento y, al mismo tiempo,
verifica la concordancia con los resultados de los cultivos.
Catteres intravenosos. Los catteres intravenosos son cultivados cualitativa o
semicuantitativamente, dependiendo de las tcnicas usadas en los
laboratorios. La tcnica de cultivo semicuantitativo (Maki) , consiste en hacer
rodar el extremo del catter sobre la superficie de una placa de medio cultivo,
e informar el nmero de colonias que se desarrollan en sta. La presencia de
15 o ms colonias se correlaciona con inspeccin.
Falta de desarrollo en el cultivo:
La falta de desarrollo de un cultivo puede deberse a:
Diagnstico incorrecto. La inspeccin es debida a microorganismos no
cultivables en los medios habituales, como virus, rickettsias, mycoplasmas y
chlamydias.
Interpretacin errada de la tincin de Gram. Se interpreta como
microorganismos la presencia de artefactos en la preparacin.

 Muestra inadecuada. La muestra clnica no es representativa del material

propio del sitio de la infeccin.
Transporte inadecuado o prolongado. Si esto sucede, algunos
microorganismos pueden no ser viables al momento de llegar al laboratorio.
Esto ocurre con anaerobios, estreptococos, Neisseria. Si el transporte es
prolongado, puede haber sobre crecimiento de flora residente que oculte la
presencia de patgenos, lo que pueden haber estado en menor nmero.
Terapia con antibiticos. Aunque sea una dosis nica, sta muchas veces es
suficiente para inhibir o retardar el crecimiento bacteriano.
Metodologa de cultivo inadecuada. Se requiere de tcnicas especiales para el
cultivo de determinados patgenos, como el caso de anaerobios,
micobacterias, hongos y ciertas bacterias exigentes en cuanto a sus nutrientes
y/o condiciones de vida. Por esto, el laboratorio debe conocer cul es la
sospecha diagnstica, para tener la oportunidad de cultivar al agente
etiolgico.
TCNICAS INMUNOLGICAS
El diagnstico rpido de las enfermedades infecciosas se ve facilitado por el
empleo de tcnicas inmunolgicas abreviadas, aunque ninguna de ellas es tan
especfica o sensible como el cultivo. Las tcnicas inmunolgicas pueden estar
orientadas a la bsqueda de anticuerpos o de antgenos. Las destinadas a la
bsqueda de anticuerpos necesitan del tiempo necesario para que se produzca un
alza significativa del ttulo de anticuerpos. Los antgenos en cambio, pueden ser
detectados desde el comienzo de la enfermedad. Constituye una ventaja el que an
durante el tratamiento con antibiticos, los antgenos sean detectables.
Entre las enfermedades infecciosas diagnosticadas por exmenes serolgicos
estn sfilis, rubola, leptospirosis toxoplasmosis, mononucleosis infecciosa,
etctera.
Existen diferentes exmenes que permiten su titulacin, entre los que se
cuentan aglutinacin, precipitacin, fijacin del complemento, hemaglutinacin,
neutralizacin,
inmunofluorescencia,
ensayo
inmunoenzimtico,
radioinmunoensayo, etctera.
Los exmenes serolgicos se usan en la determinacin del grado de
inmunidad que posee un sujeto para el diagnstico de infeccin aguda.
Diagnstico del estado inmune. Es de inters verificar el estado inmune del
sujeto. Una situacin de este tipo, por ejemplo, es determinar el grado de
inmunidad frente a rubola en una mujer en edad frtil.
Diagnstico de infeccin aguda. El diagnstico de infeccin aguda se
establece comparando los ttulos de dos sueros pareados, uno obtenido en la
fase aguda y otro en la fase de convalescencia, o 14 das despus de la
primera muestra. El suero de fase aguda debe obtenerse tan temprano como
sea posible en el transcurso de la enfermedad. El suero de la fase
convaleciente debe extraerse no antes de 10 das de comenzada la
enfermedad, de preferencia 2-4 semanas despus.

 Sueros pareados. Cuando se usan sueros pareados, la conversin de

seronegativo a seropositivo o un aumento de 4 veces o ms del ttulo de
anticuerpos obtenido inicialmente es indicador de infeccin reciente. Sera
altamente recomendable que en todo paciente hospitalizado con un estado
febril no diagnosticado, se guarde una muestra de suero congelado, para su
uso en eventuales estudios serolgicos. Para que las pruebas serolgicas
pareadas tengan validez ambas muestras de suero (fase aguda y fase de
convalecencia) deben procesarse simultneamente.
Muestra nica de suero (fase aguda). Una muestra nica de suero tambin
puede ser til para el diagnstico. Los anticuerpos tipo Igm aparecen
tempranamente durante la infeccin primaria y persisten por varias semanas.
Por lo tanto la presencia de anticuerpos Igm es indicadora de infeccin
reciente.
DETECCIN DE ANTGENOS
Son pruebas destinadas a la deteccin de antgenos en las muestras clnicas.
Estas reacciones inmunolgicas no dependen de la presencia de microorganismos
viables, sino que slo de sus antgenos, por lo que pueden ser usadas aun en sujetos
que estn recibiendo antibiticos. Estos exmenes son de gran apoyo al diagnstico
por su rapidez, pero no sustituyen a los cultivos, a la tincin de Gram ni a otras
tcnicas de diagnstico. Entre las tcnicas ms usadas est la aglutinacin mediante
partculas de ltex recubiertas con anticuerpos especficos, que pueden utilizarse para
demostrar en forma rpida la presencia de antgenos bacterianos y fngicos.
En el diagnstico de cryptococosis, por ejemplo, se usan partculas de ltex
recubiertas con anticuerpos antipolisacrido de la cpsula del Crytococcus neoformas,
que provocan una aglutinacin visible cuando est presente en el LCR o en el suero
del paciente. En casos de meningitis, se puede detectar en el LCR la presencia de
antgenos de Haemophilus influenzae (tipo b; Streptococcus pneumoniae (omnitipo);
Neisseria meningiditis (tipos A, B, C, W e Y) y de Streptococcus beta hemoltico grupo
B.
Ensayo inmunoenzimtico (ELISA). Esta tcnica detecta una amplia variedad
de agentes infecciosos. Se deja interactuar el suero del paciente, en el que se
encuentra el antgeno, con un anticuerpo especfico, luego se extrae el
anticuerpo no ligado sobrante y se agrega una inmunoglobulina anti-humana
conjugada con una enzima especfica (fosfatasa alcalina, peroxidasa).
Finalmente se agrega un sustrato para la enzima. La enzima ligada al
complejo acta sobre el sustrato, produciendo cambio de color, el que puede
leerse a simple vista o mediante un espectrofotmetro, permitiendo su
cuantificacin.El color que se produce es proporcional a la cantidad de
anticuerpo especfico que se fija al antgeno. El mtodo se utiliza en la
deteccin de virus sincial respiratorio. Chlamydia trachomatis, Neisseria
gonorrhoeae, rotavirus, adenovirus, virus hepatitis,virus varicela-zster,
etctera.
Inmunofluorescencia directa (IFD). Usa un anticuerpo marcado con
isotiocianato de fluorescena, que permite la identificacin de antgenos

bacterianos o virales en las muestras clnicas. Se usa en la deteccin de virus

respiratorios (influenza, parainfluenza, adenovirus, virus sincicial respiratorio),
virus herpes, sarampin y parotiditis, as como en bacterias como Bordetella
pertussis, Rickettsia rickettsia y Chlamydia trachomatis. Es una tcnica muy
sensible, que requiere de sueros de muy buena calidad y de personal
adiestrado.
Inmunofluorescencia indirecta (IFI). Usa el suero del paciente para investigar
anticuerpos. Este suero es incubado en presencia de un antgeno especfico.
Para la visualizacin del completo resultante, se utiliza un anticuerpo
antiglobulina humana, marcado con isotiocianato de fluorescena.
ESTUDIOS ESPECFICOS MAS REALIZADOS
UROCULTIVO
El urocultivo es el estudio microbiolgico de la orina para detectar la presencia de
microorganismos y la posibilidad o no de infeccin de las vas urinarias. Lo que debe
ser confirmado por un cultivo de orina con un recuento de colonias superior a 100 000
colonias por ml si la muestra es tomada con bolsa recolectora o de la parte media de
la miccin (segundo chorro). La Infeccin Urinaria (ITU) se define como la invasin,
multiplicacin y colonizacin del tracto urinario por grmenes que habitualmente
provienen de la regin perineal. La incidencia exacta en el nio no se conoce, en
recin nacidos se estima en 1% con una mayor proporcin de varones afectados
(relacin hombre y mujeres es 3:1), en lactantes 3 a 5% con igual proporcin hombremujer, y en preescolares y escolares una incidencia del 2% con una clara
preponderancia en mujeres (H:M = 1:5).
A los siete aos de edad, un 8,4% de las nias y 1,7% de los nios, habrn sufrido
al menos un episodio.
Objetivos:
Obtencin de una muestra con fines diagnsticos y / o teraputicos.
Utilizar mtodos adecuados para la validez de la muestra.
Manejo correcto de la muestra.

Foto 3: contenedores para orina

Material:
Guantes no estriles.
Gasas estriles.

Frasco recolector estril.

Material para la higiene genital.
Cua o botella.
Bolsa colectora en nios y en lactantes.
Si el paciente est sondado necesitar:
o Pinza de kocher.
o Torunda de gasa.
o Jeringa con aguja montada.
o Antisptico.
Procedimiento:
La muestra idnea es la primera miccin de la maana, ya que permite la
multiplicacin de bacterias durante la noche.
La recogida debe realizarse con absoluta asepsia, ya que si no es as podra dar
resultados errneos.
1. Tcnicas para mujeres:
o Se lavar las manos cuidadosamente con agua y jabn, las enjuagar
con agua y las secar con una toalla limpia.
o Se separarn los labios mayores y menores, y los mantendr
separados en todo momento hasta que se haya recogido la orina.
o Con una gasa enjabonada se lava bien la vulva pasndola de delante
hacia atrs, se repetir el proceso un total de 4 veces.
o Enjuagar cuidadosamente con agua hervida para eliminar los restos de
jabn.
o Se indicar a la paciente que orine desechando los 20-25 primeros
mililitros, tras lo cual y sin interrumpir la miccin, se recoger el resto de
la orina en el recipiente.
o El frasco debe sujetarse para que no tome contacto con pierna, vulva o
ropa del paciente. Los dedos no deben tocar el borde del frasco o su
superficie interior.
2. Tcnica para hombres:
o Lavado de las manos con agua y jabn.
o Retraer completamente el prepucio, que se mantendr as en todo
momento, hasta que se haya recogido la orina.
o Limpiar el glande con jabn neutro.
o Eliminar los restos de jabn enjuagndolo con agua hervida.
o Se pedir al paciente que orine desechando los primeros 20-25
mililitros para, sin interrumpir la miccin, recogerse el resto de la orina
en el recipiente estril.
3. Tcnica para nios.
o En nios y nias mayores la orina se recoge de forma similar a los
adultos.

o En nios y nias ms pequeos, la orina se recoger en colectores o

bolsas estriles especialmente diseadas para ellos de la siguiente
forma:
Lavado cuidadoso de los genitales y rea perineal igual que en
los adultos.
Colocar la bolsa de plstico o el colector.
Vigilar la bolsa cada 30 minutos y tan pronto como el nio haya
orinado, deben retirarse y enviarse al laboratorio para su
procesamiento.
Si la miccin no se ha realizado en una hora, se repite la
operacin colocando una nueva bolsa.
Una vez recogida la muestra, lave de nuevo la zona genital,
para evitar irritaciones.
o Enve la muestra al laboratorio junto con la peticin escrita.
o Registro en su hoja de evolucin de enfermera: tcnica, fecha, hora,
caractersticas de la orina, incidencias presentadas.
Transporte.
La orina debe llegar al laboratorio en el plazo de una hora. Cuando esto no sea
posible debe refrigerarse a 4C durante un tiempo mximo de 24 horas. El laboratorio
debe controlar el transporte, garantizndose el que las muestras han sido refrigeradas
desde el momento de su toma, siendo admisible, si no puede garantizarse el
transporte correcto, la utilizacin de algn conservante (cido brico al 2% o el
sistema comercial con brico-formiato).
Volumen de la muestra
BUSQUEDA
VOLUMEN DE ORINA CONSIDERACIONES
(ml)
Bacterias
0,5 1
Primera orina de la maana
Hongos
>20
Primera orina de la maana
Mycobacterias
>20
Primera orina de la maana, 3 das consecutivos
Anaerobios
1
Aspirado suprapbico
Virus
10 - 15
Primera orina de la maana, enviar con hielo al
laboratorio
En pacientes ingresados con imposibilidad de recoger la muestra por s
mismos, se realizar sondaje vesical por personal sanitario experto con las
medidas aspticas oportunas.
Para la investigacin de anaerobios es necesario que la orina se obtenga por
puncin suprapbica.
Para la bsqueda de micobacterias, la orina se recoge de la forma descrita
anteriormente durante tres das consecutivos. En este caso el volumen de
orina debe ser 100-150 ml. y se elegir preferentemente la primera miccin de
la maana. Cuando se sospecha la presencia de hongos y virus, el volumen
de orina ser superior a 20 ml. y en el caso de parsitos se recoger la orina
de 24 horas.

Observaciones:
Evitar fugas de orina al poner la parte adhesiva de la bolsa.
Despegar la bolsa con cuidado para no lesionar la piel.
El sondaje vesical en nios y lactantes es una tcnica que se reduce a lo
imprescindible por el gran riesgo de infeccin que entraa.
RECOGIDA DE MUESTRAS FECALES
Consiste en la recogida de heces para su estudio en el laboratorio.
Objetivos:
Obtener una muestra de heces con fines diagnsticos y/o teraputicos.
Utilizar mtodos adecuados para la validez de la muestra.
Manejo correcto de las muestras.
Utilidad:
o Coprocultivo. Se usa de preferencia en la bsqueda de patgenos
intestinales productores de enterocolitis aguda. La muestra se obtiene
directamente de la deposicin recientemente emitida o bien de un
hisopado rectal. Debe usarse un medio de transporte adecuado (CaryBlair) si sta no va a ser procesada de inmediato. La seleccin de los
medios de cultivo, as como el procedimiento de aislamiento a seguir,
dependen del agente etiolgico que se est investigando. Si no se
explicita otra situacin, rutinariamente, la bsqueda se concentra en los
patgenos habituales como Salmonella y Schigella. En los casos
especiales, debe indicarse si se sospecha de Escherichia Coli
enteropatgena, enteroinvasora, enterotoxignica, enterohemorrgica ,
o entero agregante; Campylobacter, SPP.,Vibriocholera, Yersinia
enteroclitica, etc.
o Estudios parasicolgicos.
o Estudio oxiuros.
Material
Guantes no estriles.
Recipientes estriles con cierres de rosca.
Cua.
Cucharilla estril.
Depresores estriles.
Hisopo.
Papel adhesivo transparente.
Procedimiento:
Informar al paciente de la tcnica.
Si el nio puede colaborar indquele que realice la higiene genital y la recogida
de la muestra en el cuarto de bao.
En los pacientes que no colaboran:

o Se les coloca en la posicin adecuada sedestacin o decbito supino,

sobre la cua si se mantienen en ella.
o Se les pondr un paal limpio (lactantes), que se ira cambiando cada
hora para evitar la contaminacin de la muestra por orina.
o Una vez realizada la deposicin, pngase los guantes, cubra la cua y
retrela, evitando la contaminacin y los malos olores.
o Si las deposiciones son lquidas o irritantes, inspeccionar la zona anal
en busca de microlesiones o irritaciones.
o Utilice dos depresores linguales para recoger la deposicin y
transferirla al recipiente. (una muestra como una castaa).
o Tape el frasco.
o Identificar el recipiente con la etiqueta del paciente y el tipo de muestra.
o Remita la muestra al laboratorio de inmediato, o mantngala a
temperatura ambiente hasta su envo, si este se demora ms de 30
minutos, se recurre a utilizar conservantes (10ml de alcohol polivinlico
PVA) y se mantiene en el frigorfico hasta su envo.
o Para detectar oxiuros en los nios:
o Colocacin de guantes estriles, y secado de la zona anal al nio.
o La toma se realiza por al maana, para ello se separan los glteos del
nio y se le aplica un trozo de cinta adhesiva en el ano hasta conseguir
la muestra.
o La muestra se deposita sobre un portaobjeto para ser enviada al
laboratorio.
COPROCULTIVO
Obtencin de la muestra
Si son formadas o pastosas se toma una porcin del recipiente donde hayan sido
emitidas y se transfieren al sistema elegido para el envo al laboratorio. Se
seleccionan zonas donde haya sangre, moco o pus. No son vlidas las muestras
contaminadas con orina. No debe utilizarse para la recogida papel higinico, porque
suelen tener sales de bario que inhiben algunas bacterias enteropatgenas.
Volumen mnimo de muestra
Heces formadas o pastosas: al menos 1 2 gr. para virologa, aadir de 2 a 4 gr.
ms. Muestras del tamao de una nuez son muy adecuadas pues permiten realizar la
mayora de las investigaciones posibles. Heces lquidas: entre 5 y 10 ml.
Transporte.
Para el estudio bacteriolgico es suficiente enviar la muestra en un recipiente estril
si se va a procesar en el plazo de 1 2 horas despus de su emisin. En caso
contrario se remite en un sistema de transporte para bacterias. En ambos casos se
mantiene en refrigeracin hasta el procesamiento, para evitar el sobrecrecimiento de
la flora normal que puede enmascarar o destruir a los enteropatgenos. El fro puede
afectar la viabilidad de Shigella spp. Para el estudio de toxinas de C. difficile, la
muestra se puede mantener hasta 48 horas en refrigeracin, congelada a -20C se
puede mantener indefinidamente. Este tipo de muestra, preferiblemente sin medio de
transporte, es indispensable para el examen en fresco, el ensayo de las toxinas de C.

difficile, deteccin por concentracin de huevos o parsitos y estudios virolgicos

(cultivos, inmunoelectromicroscopa, ELISA, o ltex para rotavirus).
Es preferible enviar las muestras para estudio virolgico sin medio de cultivo, pues
este diluye las partculas virales disminuyendo la sensibilidad. Si su envo se retrasa
mucho es necesario utilizar un medio de transporte. Se enviarn en recipientes
colocados en hielo. Para el estudio de parsitos es til adems, enviar una muestra
pequea en un medio fijador. Una parte en dos de fijador de alcohol polivinlico.
Las muestras para coprocultivo, debern tomarse antes de la administracin de
antimicrobianos o agentes antidiarricos. Es conveniente tambin evitar, sobre todo
para estudios parasitolgicos la utilizacin previa de anticidos y laxantes oleoso, as
como de los compuestos habitualmente utilizados para estudios radiolgicos
digestivos (bario, bismuto).
Indicar siempre el juicio diagnstico de presuncin y si el paciente es menor de un
ao.
Solicitar las investigaciones especiales explcitamente (C. difficile, C. perfringens, S.
aureus, etc.).
Si con la primera muestra no se detecta la presencia de enteropatgenos, es
necesario enviar en los das siguientes, dos tomas adicionales. En general, para los
estudios parasitolgicos, se deben enviar tres muestras tomadas en diferentes das.
Muestras inadecuadas.
Muestras de restos fecales.
Heces emitidas anteriores a dos horas y que no hayan sido refrigeradas.
Las tres tomas realizadas el mismo da.
Interpretacin de los coprocultivos:
El coprocultivo cumple con la metodologa adecuada para identificar las nuevas
bacterias enteropatgenas, adems contribuye al conocimiento de la etiologa de la
EDA infantil y al buen tratamiento.
La coleccin y preservacin adecuada de muestras de heces para coprocultivo es
a menudo dispendiosa pero necesaria para el aislamiento de microorganismos
causantes de procesos infecciosos gastrointestinales.
Recomendaciones para la recoleccin de las muestras:
Recoleccin en el estadio primario de la enfermedad (salmonella y shigella se
encuentran en nmero apreciable en las heces en el perodo agudo, por lo que
la muestra debe obtenerse en los tres primeros das), lo mismo que para tratar
de aislar E. Coli enteroinvasiva y/o E. Coli toxignica.
Si es posible, examinar varias muestras sucesivas de materia fecal para
mayores posibilidades de aislamiento.
No debe iniciarse tratamiento antibitico antes de tomar las muestras para
coprocultivo.
Muestras de heces recin emitidas, en recipientes estriles de tamao
adecuado.
Si hay sospecha de shiquellosis, un escobilleo rectal puede servir, ya que este
microorganismo se encuentra en la parte final del intestino.

 Los coprocultivos se piden en toda diarrea desinteriforme, mxime si cursa con

respuesta inflamatoria sistmica, o si hay pus o sangre en las heces.
Estadsticamente los ndices de positividad de estos coprocultivos puede llegar
hasta el 75%.
Hay disponibles en algunos laboratorios pruebas que intentan, por mtodos
directos o indirectos y de resultado rpido, la deteccin de antgenos de
diversos grmenes: ELISA para rotavirus, adenovirus y gardia lambia,PCR
para casi todas las bacterias, hongos y parsitos.
Observaciones:
Recogida de la muestra sin contaminar ya que puede alterar el resultado.
Informar a la familia si requiere preparacin previa (dieta, etc).
EL HEMOCULTIVO
Consiste en la extraccin de muestras sanguneas seriadas para su estudio y/o
cultivo en el laboratorio y as determinar los agentes patgenos causantes de algunas
infecciones.

Foto 4: frascos de hemocultivos (aerobios y anaerobios)

Procedimiento:
Retirar los tapones externos de los frascos.
Desinfectar los tapones de goma con alcohol iodado o con iodforo, dejndolo
secar al menos un minuto.
Localizar por palpacin la vena que se va a puncionar. Debe utilizarse una
vena distinta para cada extraccin.
o Cuando no haya venas accesibles puede realizarse la extraccin de
sangre arterial.
o No son adecuadas las muestras procedentes de catter, solamente en
caso de que se sospeche infeccin del propio catter y se complica su
retirada; se recomienda tomas del brazo opuesto y otras del brazo del
catter, para saber si es intra o extraluminal

 Desinfectar con alcohol una zona de piel de unos 10 cm de dimetro. Se

comenzar por el centro y se irn haciendo crculos concntricos hacia el
exterior.
Repetir el paso anterior pero con el alcohol iodado, dejndolo secar durante un
minuto.
Extraer la sangre sin tocar en ningn momento el campo desinfectado. Si fuera
necesario palpar nuevamente la vena se utilizarn guantes de goma estriles o
se desinfectarn los dedos de la misma manera que la piel del paciente.
La cantidad de sangre a introducir en cada frasco viene determinada por el
modelo utilizado en cada hospital, entre 15-20 ml por toma en adultos y 1-3 ml
en nios.
o Como norma general es adecuado que la sangre mantenga una
proporcin 1:10 con el medio de cultivo. Es decir, para un frasco de 100
ml, introducir 10 ml. de sangre.
o En caso de neonatos y nios pequeos en que no se pueden obtener
volmenes grandes de sangre es suficiente una cantidad de 1-5 ml,
que se introduce en un solo frasco.
Introducir la sangre en los frascos evitando que entre aire en el frasco para
cultivo en anaerobiosis. La ventilacin se realizar en el laboratorio de
Microbiologa. Mover los frascos para que la sangre y el medio de cultivo se
mezclen. Introducir los frascos a 37C.
Nmero de muestras: tres hemocultivos por paciente, previos al tratamiento
antimicrobiano.
El intervalo entre las extracciones debe ser superior a una hora cuando sea
posible, pero cuando exista una gran urgencia en iniciar el tratamiento, este
intervalo puede acortarse hasta 15 minutos.
En caso de sepsis y endocarditis subaguda las extracciones se reparten en 24
horas y en caso de que sean los hemocultivos negativos, obtener tres
muestras ms al da siguiente.
Transporte.
Deben enviarse al laboratorio. Hasta su envo mantener a 35-37C; cuando esto no
sea posible, mantener a temperatura ambiente. Nunca debe refrigerarse ni
congelarse.
.Mtodos de estudio.
Los mtodos para el estudio microbiolgico de los hemocultivos pueden ser
cuantitativos, semicuantitativos y cualitativos.
Los mtodos cuantitativos permiten establecer el nmero de bacterias por ml.
de sangre cultivada
En los mtodos semicuantitativos se sigue un procedimiento de lisis
centrifugacin. La sangre se centrifuga y el sedimento se siembra
directamente en las placas de cultivo. Este mtodo permite una valoracin
semicuantitativa por recuento de las colonias aisladas.

 Los mtodos cualitativos se realizan cultivando la sangre en frascos con medio

lquido o bifsico y son los utilizados de forma rutinaria en la mayoria de los
Laboratorios de Microbiologa.
Observaciones
En primer lugar, es necesario recordar que la sangre inoculada en los frascos
puede contener microorganismos, incluidos el virus de la hepatitis o el VIH, lo que
implica un riesgo de infeccin para las personas que los manipulan. En este sentido,
existen en todos los hospitales normas de prevencin en el manejo de sangre que
deben ser seguidas de forma estricta y que muy someramente se podran resumir en
la utilizacin de guantes, batas, mascarillas desechables, campanas protectoras y en
la no reinsercin de las agujas en su capuchn original, arrojndolas a los envases
preparados a tal efecto.
OBTENCIN DE ESPUTO PARA EXAMEN MICROBIOLGICO Y CITOLGICO
El estudio de esputo en el laboratorio, nos facilita una informacin esencial y rpida
de la evaluacin, evolucin y sobre el diagnstico en los pacientes con patologa
respiratoria.
Objetivos:
Determinar si el microorganismo es Gram + o Gram -: mediante tincin de
Gram, cuyos resultados estn disponibles en pocas horas, siendo til para
seleccionar la antibioterapia hasta que estn otros resultados.
Determinar presencia de bacilos de tuberculosis: mediante tincin
acidoalcoholresistente (BAAR). Resultado en pocas horas.
Determinar mediante cultivo especfico la evidencia o no de mycobacterium
tuberculoso: mediante cultivo de Lowestein. Resultado en 3-6 semanas; se
requieren
muestras de 3 das consecutivos.
Determinar la presencia de clulas malignas: muestra de esputo aislada con
solucin fijadora.

Foto 5: dispositivo de extraccin por aspiracin de esputo y/o secreciones bronquiales

(mucoextractor)
Procedimiento:
El esputo se recoge a primera hora de la maana (ms concentrado y ms
abundante por el acumulo que se produce con el sueo)
La muestra se recoge en un contenedor estril y se transporta de forma rpida
al laboratorio.
La recoleccin del esputo se puede realizar por:
1. Obtencin directa:
o El paciente tose de forma voluntaria,
o Si no se consigue producir una muestra (esputo inducido):
Enjuagar la boca con agua destilada estril o solucin salina.
Obtener el esputo tras una expectoracin profunda,
preferentemente matinal.
De no producirse expectoracin espontnea, puede inducirse el
esputo con nebulizaciones de suero fisiolgico estril (15 ml
durante 10 minutos), siendo til adems realizar un drenaje
postural o fisioterapia respiratoria.
Volumen mnimo.
De 2 a 10 ml, si es posible.
Transporte y conservacion.
Envo inmediato al laboratorio (no superior a 2 horas).
Si no es posible, conservar en frigorfico 4C.
Es preferible realizar la toma antes de instaurar el tratamiento
antibitico.
No es til para anaerobios.
No son inoculables las secreciones de sospechosa procedencia.
La expectoracin debe rechazarse hasta obtener un esputo de calidad
suficiente (mas de 25 leucocitos polimorfonucleares por campo 100x, y
de 10 clulas epiteliales por campo 100x).
Instruir al paciente para que expectore cualquier secrecin postnasal.
Explicar la mejor forma de obtener un esputo: realizar una inspiracin
profunda hasta su mxima capacidad y exahalar el aire con una
profunda tos expulsiva directamente en el contenedor estril y de boca
ancha.
Anotar el color, consistencia, olor y cantidad del esputo.
2. Obtencin indirecta:
o El esputo tambin se puede recoger en pacientes que son incapaces
de toser y expectorar, mediante aspiracin nasotraqueal o traqueal.
o El recipiente es estril y especial para adaptar una sonda de
aspiracin al mismo.
o La tcnica de aspiracin, es estril.

o Obtencin mediante lavado gstrico:

Especialmente indicada en pacientes que no cooperan, en
pacientes en fases agudas (proceso maligno o tuberculoso), o
en nios muy pequeos.
Este mtodo est basado en el hecho el paciente deglute
esputos mientras duerme y durante la expectoracin de las
primeras horas de la maana.
Para su obtencin se inserta una sonda nasogstica, que
retiraremos, una vez obtenida la muestra.
Es importante un mnimo de 8 horas de ayunas antes de la
extraccin.
Se aspira el contenido gstrico con una jeringa, se coloca en un
contenedor estril y se enva al laboratorio.
LQUIDO CEFALORRAQUDEO
Obtencin de lquido cefalorraqudeo por puncin lumbar con fines diagnsticos.
Se obtendr antes de instaurar cualquier teraputica antibitica
Procedimiento
Se localiza la zona elegida para la puncin lumbar mediante palpacin de los
espacios intervertebrales una vez colocado el paciente en la posicin
adecuada.
Se desinfecta con alcohol al 70% una zona de uso 10 cm. de dimetro en el
rea elegida, la aplicacin del desinfectante se hace de forma concntrica del
centro a la periferia. Se repite la operacin con povidona yodada que se deja
secar durante un minuto.
Realizar la puncin entre los espacios inter-vertebrales L3-L4, LA-L5 o L5-S1,
siguiendo las normas de la ms estricta asepsia.
Al llegar al espacio subaracnoideo retirar el estilete y dejar salir libremente el
lquido cefalorraqudeo que se recoger en tres tubos sin conservantes con
tapn de rosca.
Generalmente el primero para el estudio bioqumico, el segundo para el
estudio microbiolgico y el tercero para investigacin de clulas (este suele
ser el ms transparente aunque la puncin haya sido traumtica). No obstante,
el tubo ms turbio se enviar a Microbiologa.

Foto 6: recipientes estriles para LCR agujas para puncin lumbar

Observaciones.
Para el estudio bacteriolgico rutinario es suficiente 1 ml, aunque es preferible
disponer de volmenes superiores.
Para hongos o micobacterias se necesitan al menos 2 ml adicionales ms por
cada uno de los estudios, siendo deseable llegar a los 10 ml
Para estudio de virus se necesita al menos 1 2 ml ms.
El producto debe enviarse inmediatamente al laboratorio, pues alguno de los
agentes de hemocultivo que se mantendr en idnticas condiciones hasta
su procesamiento en
el laboratorio. Si no se dispone de estufas se
mantendr a temperatura ambiente. Nunca deber refrigerarse pues se
puede afectar la viabilidad de N. meningitidis y H. influenzae.
En el LCR no se estudian rutinariamente anaerobios. En caso de solicitar
una
investigacin se enviar en un medio de transporte de lquidos para
estudio de
anaerobios o en hemocultivo de anaerobios.
Las muestras para el estudio de virus se enviarn en hielo, si el envo se
retrasa ms de 24 horas, se deber de conservar a -70C.
Como la meningitis suele surgir por un proceso bacterimico se solicitarn
simultneamente hemocultivos, pudiendo ser as mismo estudiadas las
posibles lesiones metastsicas cutneas.
Es necesario que el mdico seale claramente las investigaciones
solicitadas
(bacterias habituales, micobacterias, anaerobios, hongos o
virus).
CULTIVO DE GARGANTA
Es una prueba de laboratorio que se hace para aislar e identificar organismos que
puedan causar una infeccin en la garganta.
Objetivos

 El examen se realiza cuando se sospecha de una infeccin en la garganta, en

particular, una infeccin de garganta por estreptococos.
Este examen se usa principalmente para identificar estreptococos en la
garganta, sin embargo, se pueden detectar otros organismos, dependiendo del
tipo de medio de cultivo utilizado.
Procedimiento
Lactantes y/o nios: la preparacin fsica y psicolgica que se puede brindar
para este o cualquier examen o procedimiento depende de la edad, intereses,
experiencias previas y grado de confianza del nio.
La persona debe inclinar la cabeza hacia atrs con la boca bien abierta. Se
deben resistir las nuseas y cerrar la boca mientras el cepillo toca la parte
posterior de la garganta cerca de las amgdalas. No se deben usar enjuagues
bucales antispticos antes del examen.
Se cepilla la parte posterior de la garganta con un aplicador de algodn estril
(hisopo), cerca del rea de las amgdalas y se coloca en un tubo con un medio
de cultivo.
Observaciones
Se pueden indicar antibiticos antes de conocer los resultados. Los
antibiticos deben tomarse segn las instrucciones mdicas, aunque los
sntomas hayan desaparecido.
Con el fin de mejorar las posibilidades de detectar bacterias, el aplicador se
puede utilizar para raspar la parte posterior de la garganta varias veces.
La presencia de bacterias normales de la boca de la garganta es un hallazgo
normal.
La presencia de ciertos organismos, como los estreptococos beta-hemolticos
del grupo A, que ocasionan infeccin de garganta por estreptococos, al igual
que otros organismos que causan difteria y gonorrea, es anormal y puede ser
indicio de la presencia de una infeccin.
Complicaciones
Esta prueba es segura y se tolera bien. En muy pocos pacientes, la sensacin
de nusea puede llevar a una urgencia de vomitar o toser.
CULTIVO DE LA NASOFARINGE; CEPILLADO PARA VIRUS RESPIRATORIOS;
CEPILLADO PARA ESTAFILOCOCOS
Consiste en la extraccin de una muestra de secreciones nasofarngeas es una
muestra de las secreciones nasofarngeas para observar y estudiar en el laboratorio y
as para detectar la presencia de posibles organismos patgenos.

Foto 7: hisopos o escobillones.

Objetivos
Con este examen se identifican los microorganismos que causan los sntomas del
tracto respiratorio superior. Los cultivos nasofarngeos sirven para identificar virus
respiratorios comoStaphyloccus aureus, Bordetella pertussis y Neisseria
meningitidis (tipos de bacterias). El cultivo puede usarse para verificar la terapia con
antibiticos apropiada.
Procedimiento
Se le pide al paciente que tosa antes de comenzar el examen y que incline su
cabeza hacia atrs. Se pasa un aplicador (hisopo) de algodn con suavidad a
travs de la fosa nasal hasta la nasofaringe, la porcin de la faringe que se
encuentra sobre el techo de la boca. Se hace rotar el aplicador (hisopo)
rpidamente y luego se retira.
o Adultos: no hay preparacin especial.
o Bebs y nios:La preparacin fsica y sicolgica que se puede brindar
para este o cualquier examen o procedimiento depende de la edad,
intereses, experiencias previas y grado de confianza del nio.
Observaciones
Es normal la presencia de los microorganismos que suelen encontrarse en la
nasofaringe.
Se encuentran patgenos (cualquier virus, bacteria u hongo que pueda causar
una enfermedad).
Complicaciones
El paciente puede experimentar una leve molestia y puede sentir nuseas.
No hay riesgos graves.
CULTIVO DE LQUIDO DEL ESPACIO PLEURAL

Es una prueba de laboratorio que se realiza en el lquido pleural (el lquido que se
encuentra en el espacio alrededor de los pulmones) y que se utiliza para aislar e
identificar los organismos que causan una infeccin.

Foto 8: material para PAF

Objetivos
Este examen se practica cuando se sospecha la presencia de una infeccin en el
espacio pleural o cuando en una radiografa de trax se observa una acumulacin
anormal de lquido pleural, pudiendo indicar la presencia de neumona, tuberculosis u
otro absceso pulmonar.
Procedimiento
La muestra se obtiene por medio de una toracentesis:
Desinfeccin de la zona del trax a puncionar.
Infiltracin de anestsico local.
Introduccin de aguja entre las costillas.
Aspiracin de una muestra de lquido en el espacio pleural.
Observaciones
Es importante evitar toser, respirar profundamente o moverse cuando se est
tomando la muestra. No se requiere ninguna otra preparacin especial para el
examen.
Se presenta una sensacin de puncin cuando se inyecta la anestesia e
igualmente se puede sentir algo de presin y dolor localizado leve cuando la
aguja de toracentesis entra en el espacio pleural. Generalmente, despus del
examen se toma una radiografa de trax para asegurarse de que el tejido
pulmonar no haya sido afectado.
El resultado normal de este examen es la ausencia de organismos.
Complicaciones

Existe el riesgo de sangrado pulmonar interno y de neumotrax (pulmn

colapsado). Las complicaciones serias son muy poco frecuentes.
CASOS ESPECIALES
Mtodos cuantitativos
En los pacientes policateterizados o portadores de catter central para tratamientos
prolongados o hemodilisis en los que se sospeche que son foco de infeccin es
posible hacer hemocultivos cuantitativos. Estos se realizarn a partir del catter y al
mismo tiempo por venopuncin. Se estima que la bacteriemia asociada a un catter
se produce entre el 1 y el 8% de las cnulas utilizadas. Por otra parte, el 33% de las
bacteriemias nosocomiales tienen este origen.
Procedimiento
Se extraen de 4 a 7 ml. de sangre a travs de cada catter que se quiera
estudiar y se introducen en un tubo que contenga anticoagulante, el ptimo es
el SPS. Se transportar al laboratorio rpidamente y se realizarn placas por el
mtodo de Schotmeller. En cada uno de los tubos se especificar de forma
muy clara la procedencia de la extraccin. Se procede de la misma manera
con la extraccin por venopuncin y a la vez se realiza un hemocultivo
convencional ya que la bacteriemia puede ser de muy bajo grado y no
detectarse con el mtodo cuantitativo, o no ser el catter el foco de la
bacteriemia.
Las placas se incuban a 35-37C durante 5 das con lectura diaria. El
procesamiento de los positivos es igual al de la tcnica convencional descrita.
Se considera que un catter es foco de bacteriemia cuando se asla la misma
bacteria en los dos hemocultivos cuantitativos y el nmero de UFC/ml. aisladas
en el del catter es 4 veces superior al obtenido por venopuncin.
Microorganismos especiales
Micobacterias
La sangre no es la muestra ms adecuada para diagnosticar una micobacteriosis.
No obstante, actualmente en pacientes portadores del VIH se ha observado que
presentan micobacteriemia con relativa frecuencia, generalmente con muy poca
sintomatologa o muy inespecfica. En estos casos puede estar indicado investigar la
presencia de micobacterias en sangre.
Leptospiras
La leptospirosis es una infeccin aguda producida por espiroquetas del gnero
Leptospira que se muestra a menudo con un amplio espectro de manifestaciones
clnicas. Generalmente, el microorganismo est presente en la sangre en la fase
aguda, durante la primera semana de la enfermedad. Leishmanias
Pacientes con infeccin por VIH
Cada vez es mayor el nmero de pacientes atendidos en los centros hospitalarios
portadores del VIH, un alto porcentaje de los cuales son adictos a drogas por va
parenteral (ADPV) y, al mismo tiempo han aumentado considerablemente los
enfermos con sida. Es bien conocido que el estado inmunitario de estos pacientes
condiciona una elevada incidencia de infecciones oportunistas, estimndose en este

grupo de poblacin un ndice de bacteriemia entre el 7,2 y el 30%, cuya etiologa ms

frecuente es Streptococcus pneumoniae, Staphylococcus auerus y Salmonella spp.
Adems, este tipo de enfermos presentan infecciones oportunistas diseminadas
causadas por micobacteria, hongos o parsitos que pueden detectarse mediante
hemocultivo. As, son frecuentes las infecciones diseminadas por Mycobacterium
avium, Criptococcus neoformans y Leishmania donovani y en nuestro pas, donde la
prevalencia de la tuberculosis es elevada, es habitual aislar Mycobacterium
tuberculosis. Por lo tanto, es aconsejable notificar siempre al Laboratorio de
Microbiologa si un paciente es portador de VIH porque puede ser conveniente
prolongar el perodo de incubacin de los frascos aerobios o hacer cultivos especiales
segn la orientacin diagnstica del proceso infeccioso actual.
Recomendaciones
1. La extraccin de los hemocultivos seguir unas medidas de asepsia muy
rigurosas. Se informar peridicamente al personal encargado de la extraccin
de la importancia de los hemocultivos, de los problemas que conlleva la
contaminacin de esta muestra y de las normas a seguir para una adecuada
recogida. Durante la extraccin y el procesamiento de los hemocultivos se
tomarn las medidas de proteccin adecuadas para evitar la adquisicin de
infecciones como hepatitis e infeccin por VIH.
2. Se extraern dos o tres hemocultivos por venopunciones diferentes, cada una
con un volumen de sangre de 10 ml. que se repartir a partes iguales en un
medio aerobio y en un medio anaerobio.
3. El frasco aerobio se ventilar y en el anaerobio se evitar la entrada de aire.
4. Los frascos se incubarn lo antes posible en estufa de 35-37C. Nunca se
mantendrn en nevera.
5. Entre las 18 y las 24 primeras horas de incubacin se realizar una lectura
macroscpica de los frascos. A los que no tengan signos de crecimiento se les
efectuar una tincin con naranja de acridina o un subcultivo ciego.
ANEXO
PREPARACIN GENERAL PARA UN EXAMEN O PROCEDIMIENTO DE NIOS
PREESCOLAR
La preparacin puede ser efectiva para reducir la angustia en los pacientes
peditricos que se someten a exmenes y/o pruebas por parte del personal
sanitario pudiendo minimizar la sensacin de dolor, el llanto y la resistencia al
procedimiento.
Antes del examen, es preciso entender que el nio probablemente llorar y
que la preparacin no cambia el hecho de que el nio sienta algn malestar o
dolor. Se puede tratar de demostrar lo que ocurrir durante el examen con
anticipacin para conocer los miedos y preocupaciones particulares del nio.
El uso de algn juguete u otro objeto para representar el procedimiento puede
ayudar a revelar las preocupaciones que el nio tal vez no quiera admitir
directamente.
Lo anterior puede ayudar a disminuir la ansiedad del nio debido a que la
mayora de las personas presenta ms temor ante lo desconocido que el que

se manifiesta cuando se sabe exactamente qu esperar. Si los temores del

nio son irreales, se le puede explicar lo que realmente suceder; si est
preocupado acerca de una parte inevitable del examen, no se deben minimizar
sus preocupaciones sino confirmarle que la persona estar con l tanto como
sea posible.
Es recomendable asegurarse de que el nio entienda que el procedimiento no
es un castigo.
PREPARACIN ANTES DEL PROCEDIMIENTO:
Las explicaciones sobre el procedimiento deben limitarse a 5 10 minutos,
pues los nios pequeos tienen un perodo de atencin limitado. La
preparacin debe realizarse justo antes del examen o procedimiento para que
el nio no se preocupe con das o semanas de anticipacin.
A continuacin se encuentran algunas pautas generales para preparar a un
nio para un examen o procedimiento:
o Utilizar un lenguaje que el nio entienda, usando trminos concretos y
evitando cualquier terminologa abstracta.
o Asegurarse de que el nio entienda cul es la parte exacta de su
cuerpo que est involucrada y que el procedimiento se va a limitar a
esa rea.
o Si el procedimiento afecta una parte del cuerpo que cumple una funcin
notoria (como el habla, la audicin o la miccin), se deben explicar los
cambios que se van a presentar despus.
o Se le debe permitir al nio gritar, llorar o expresar su dolor de cualquier
otra forma verbal.
o Ser honesto con el nio acerca de la molestia que se puede sentir.
o Preguntarle al nio si no ha entendido algo que el adulto ha explicado.
o Describir lo que se siente durante el examen lo mejor posible.
o Permitir al nio practicar diferentes posiciones o movimientos que son
necesarios para ese examen o procedimiento en particular, como la
posicin fetal para una puncin lumbar.
o Enfatizar los beneficios del procedimiento y todo lo que puede darle
placer al nio, una vez terminado el procedimiento, como sentirse
mejor o ir a casa. Se puede ofrecer al nio un helado u otra invitacin
despus, pero no condicionar esto a "sentirse bien" durante el examen.
o Practicar la respiracin profunda y otras actividades confortantes. Si es
posible, se debe permitir que el nio tome de la mano al acompaante
y pedirle que la apriete cuando sienta dolor.
DURANTE EL PROCEDIMIENTO:
La presencia del adulto, si es posible, ayuda al nio durante el procedimiento, sobre
todo si el examen permite que el nio mantenga un contacto fsico. Si el
procedimiento se realiza en el hospital o en el consultorio del mdico, lo ms probable
es que el adulto tenga la oportunidad de estar presente. Si al adulto no se le ha
preguntado si desea acompaar al nio y quisiera hacerlo, le debe preguntar al

mdico si esto es posible. Si el adulto cree que puede descomponerse o ponerse

ansioso, debe optar por quedarse a cierta distancia, pero siempre dentro del campo
visual del nio. Si no es posible que el adulto est presente, dejar un objeto familiar
acompaando al nio puede ayudarlo a sentirse mejor.
Otras consideraciones:
Limitar el nmero de personas extraas que entren y salgan de la habitacin
durante el procedimiento, pues su presencia puede aumentar la ansiedad.
Pedir que el personal sanitario que ha compartido ms tiempo con el nio que
est presente durante el procedimiento.
Solicitar el uso de anestesia, cuando sea adecuado, para reducir el nivel de
molestia que el nio pueda sentir.
Pedir que los procedimientos dolorosos no se realicen en la cama del hospital
para que el nio no asocie el dolor con el cuarto del hospital.
Si la persona est dentro del campo visual del nio, puede imitar el
comportamiento que el mdico necesita que tenga el nio, tal como abrir la
boca.
PREPARACIN INFANTIL PARA UN EXAMEN O PROCEDIMIENTO
Dado el nivel de desarrollo del nio (de 0 a 1 ao), hacer una pequea
preparacin antes del examen ser de poco beneficio, pero algunas
consideraciones pueden aliviar la ansiedad de los padres.
Antes del examen, se debe saber que el nio probablemente va a llorar y que
puede ser necesario inmovilizarlo. La mejor manera en que un padre puede
ayudar a su hijo durante el procedimiento es estar all y demostrarle su cario.
El llanto es una respuesta normal al ambiente extrao, a las personas que no
le son familiares, a la inmovilizacin y a la separacin de sus padres. El beb
puede llorar ms por estas razones que por la misma incomodidad del examen
o procedimiento.
Saber esto desde el principio, al igual que tener informacin especfica sobre
el examen, puede ayudar a disminuir posteriormente la ansiedad que siente un
padre en cuanto a lo que va a ocurrir. Para mayor informacin, ver el examen
apropiado.
LA IMPORTANCIA DE LA INMOVILIZACIN
A los bebs les falta control fsico, coordinacin y capacidad para seguir
instrucciones que los nios mayores y los adultos normalmente poseen. Se
puede usar la inmovilizacin durante un procedimiento o en otras situaciones
para garantizar la seguridad del beb. Al beb se lo puede inmovilizar con las
manos o con dispositivos fsicos.
Por ejemplo, si el beb necesita una radiografa, es necesario que no se
mueva para que los resultados sean claros. Adems, mientras se estn
tomando las placas en los estudios radiolgicos y nucleares, todo el personal
debe salir del cuarto temporalmente y, en estos casos, se hace la
inmovilizacin por seguridad del beb.

 Si se efecta una venopuncin para obtener una muestra de sangre o

empezar una va IV, la inmovilizacin es importante para prevenir una lesin al
beb, ya que si se mueve mientras le estn insertando la aguja, la lesin
puede lastimar el sistema venoso, algn hueso, tejido o nervios.
La mayora de los exmenes y procedimientos requieren una precisin
extrema para obtener los resultados deseados, ya sea para colocar una va IV
correctamente, asegurarse de los resultados exactos de un examen o evitar
lesiones al beb.
El personal sanitario debe hacer uso de cualquier medio para garantizar la
seguridad y bienestar del beb. Adems de la inmovilizacin, hay otras
medidas como los medicamentos, la observacin y los monitores.
DURANTE EL PROCEDIMIENTO:
La presencia de los padres puede ayudar al beb durante el procedimiento,
especialmente si es posible mantener el contacto fsico con el beb. En caso
de llevarse a cabo en el hospital o en el consultorio del mdico, los padres
tienen mayor oportunidad de estar presentes.
Si a los padres no se les ha pedido estar al lado de su hijo, pero les gustara
estar con el nio, se les recomienda preguntar al mdico si esto es posible. Si
los padres piensan que pueden indisponerse o sentirse muy ansiosos, lo mejor
es que traten de guardar las distancias, pero mantenindose a la vista del
nio. En caso de no sentirse en capacidad de estar presentes, pueden dejar
un objeto que le sea familiar al nio para que lo reconforte.
OTRAS CONSIDERACIONES:
Limitar el nmero de extraos que entran y salen del cuarto durante el
procedimiento, ya que esto puede aumentar la ansiedad.
Solicitar que el personal que ha pasado la mayor parte del tiempo con el nio
sea quien lleve a cabo el procedimiento.
Solicitar el uso de anestsico, cuando sea apropiado, para reducir el grado de
incomodidad que vaya a sentir el nio.
Solicitar que los procedimientos dolorosos no se realicen en la cuna del
hospital para que el nio no relacione el dolor con la cuna. Muchos hospitales
tienen salas de tratamiento especiales donde se llevan a cabo los
procedimientos.
Mostrar al beb lo que los padres o el mdico necesitan que el beb haga con
imitacin, como abrir la boca.
BIBLIOGRAFA:
1. Snchez M. Manual de procedimientos en bateriologa clnica. Editorial
Presencia Ltda. 3a. Edicin. Washington, 1992.
2. Pgina infecto-normas de bioseguridad del ministerio de salud pblicauruguay http://www.infecto.edu.uy/
3. Procedimientos en microbiologa clnica-sociedad espaola de enfermedades
infecciosas y microbiologa clnica. http://www.seimc.org/
4. Abraham, M. Rudolph, Julien. Rudolphs Pediatrics. Twentieth Edition, 1996.

5. R. Martnez y Martnez. La Salud del Nio y el Adolescente. Cuarta edicin,

2001. Manual Moderno. Paginas: 630, 648, 985.
6. Jess Kumate, Onofre Muoz. Manual de infectologa clnica. Decimosexta
edicin, 2001. Mndez Editores. Pginas 59-65.
7. James Larcombe.Urinary Tract Infection In Children. Clinical review. Clinical
evidence. BMJ 1999;319:1173-1175 ( 30 October )
8. Echeverri J. Enfermedad diarreica infecciosa. Infecciones en Pediatra. 2a.
Edicin. McGraw Hill, 1997: 289-306.
9. Behrman, Kliegman, Harbin. Tratado de Pediatria: Nelson. MacGraw-Hill. Ed.
2000. Pag: 867, 989, 922, 1904.
10.Medline: http://medlineplus.gov/spanish/
11. Imgenes propias.