Factores de transcripcin generales e iniciacin

de la transcripcin por la ARN polimerasa II

Dado que la ARN polimerasa II es responsable de la sntesis de ARNm a
partir de los genes codificantes de protenas, ha sido el objetivo de la
mayora de los estudios de transcripcin en eucariotas. Los estudios iniciales
de esta enzima indicaron que su funcionamiento es diferente de la ARN
polimerasa procaritica. En sistemas eucariticos no es posible obtener la
-transcripcin fidedigna de genes bacterianos conseguida in vitro con la
simple adicin de ARN polimerasa purificada a un ADN portador de un
promotor.
El fundamento de esta diferencia fue elucidado en 1979, cuando Robert
Roeder y sus colaboradores descubrieron que la ARN polimerasa II solo es
capaz de iniciar la transcripcin si se aaden protenas adicionales a la
reaccin.
Por tanto, la transcripcin en sistemas eucariticos precisa de distintas
factores de iniciacin que (en contraste con la subunidad a) no forman parte
de la polimerasa.
EJ fraccionamiento bioqumico de extractos nucleares ha llevado a la
identificacin de protenas especficas (denominadas factores de
transcripcin) que son necesarias para que la ARN polimerasa II inicie la
transcripcin.
Han sido definidos dos tipos de factores de transcripcin. Los factores de
transcripcin generales estn implicados en la transcripcin en toda los
promotores de la polimerasa II y se consideran entonces parte de la
maquinaria transcripcional bsica. Otros factores transcripcionales
(discutidos ms adelante en este captulo) se unen a secuencias de ADN
que controlan la expresin de genes individuales y son por tanto
responsables de regula la expresin gnica. Se estima que
aproximadamente el 10% de los genes genoma humano codifica factores de
transcripcin, lo que resalta la importancia de estas protenas.

Los promotores de los genes transcritos por la polimerasa II contienen varias secuencias
diferentes junto a los sitios de transcripcin (Fig. 7:10) primer elemento descrito de este
grupo era una secuencia semejante a TATAA situada a unos 25-30 nucletidos corriente
arriba del sitio de inicio de la transcripcin. Esta secuencia (denominada caja TATA) se
parece a la secuencia
-10 de los promotores bacterianos y en un primer momento se consider una
caracterstica general de los promotores de todos los genes transcritos por la polimerasa
II. No obstante, en los trabajos genmicos mal modernos se ha constatado que las
secuencias TATA solamente aparecen a el 10%-20% de los promotores de la ARN
polimerasa II
Otras secuencias presentes en los promotores de genes transcritos por esta polimerasa
son el elemento iniciador (Inr), que abarca el sitio de inicio de la transcripcin los
elementos de reconocimiento TFIIB (BRE), localizados corriente arriba de los sitios de

inicio de la transcripcin, y varios elementos promotores localizados corriente debajo

de los sitios de inicio de la transcripcin (DPE,DCE y MTE). Los promotores de genes
distintos contienen combinaciones diferentes de estos elementos promotores centrales
que parecen funcionan de manera conjunta para unirse a factores generales de
transcripcin.
Se requieren cinco factores generales de transcripcin para poner en marcha la transcripcin por la ARN polimerasa II en sistemas
reconstituidos in vitro (vase Fig. 7.11).

El primer paso en la formacin de un complejo de transcripcin consiste en la unin de

un factor general de transcripcin denominado TFIID al promotor (TF indica factor de
transcripcin; II indica polimerasa II). TDFIID se compone de varias subunidades,
como la protena de unin a TATA (TBP) y otros 14 polipptidos, denominados factores
asociados a TBP (TAF). TBP se une de manera especfica a la caja TAT.A
mientras que otras subunidades lo hacen a las secuencias Inr, DPE, DPC T
MTE. La unin de TFIID se sigue del reclutamiento de un segundo factor general de
transcripcin (TFIIB), que se une a TBP adems de a secuencias BRE. A su vez, TFIIB
acta como puente para la ARN polimerasa que se une al complejo TBP-TFIIB junto a
un tercer factor, TFIIF.
Tras el reclutamiento de la ARN polimerasa II por el promotor, se precisa
de la unin de otros dos factores adicionales (TFIIE y TFIIH) completa la
formacin del complejo de preiniciacin, un modelo molecular que aparea
en la Figura 7.12. El TFIIH es un factor con mltiples subunidades que p=-