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http://dx.doi.org/10.5935/0100-4042.20140240
STUDY OF SCOTT TEST USING SPECTROSCOPIC TECHNIQUES: AN ALTERNATIVE METHOD FOR DETECTING
COCAINE HYDROCHLORIDE AND ITS ADDULTERANTS IN STREET DRUGS. Cocaine is usually seized mixed with a wide
variety of adulterants such as benzocaine, lidocaine, caffeine, and procaine. The forensic identification of cocaine in these street drug
mixtures is normally performed using colorimetric testing kits, but these tests may suffer from interferences, producing false-positive
results. Here, we describe the use of analytical techniques including attenuated total reflection Fourier transforminfrared (ATRFTIR) and ultraviolet-visible (UV-VIS) spectroscopies to distinguish between cocaine and other adulterants (lidocaine, promethazine,
powdered milk and yeast) that yield positive results on the Scott test using the thiocyanate cobalt reagent. A further 13 substances
were also analyzed using the Scott test.
Keywords: colorimetric test; cocaine; ATR-FTIR; PLS.
INTRODUO
A cocana uma droga estimulante do Sistema Nervoso Central
(SNC) e um potente anestsico local, cujos efeitos apresentam curta
durao e dependem do modo de consumo, ocasionando posterior
estado de depresso. Ela definida como um alcaloide tropnico
(apresenta em sua estrutura o ncleo tropano e so agentes anticolinrgicos, inibindo a ao da acetilcolina em efetores autnomos
inervados pelos nervos ps ganglionares colinrgicos e da musculatura
lisa, que desprovida da inervao colinrgica1) e extrada das folhas
do vegetal Erytroxylum coca. A cocana pode ser consumida como
sal, cloridrato de cocana, ou na forma de base, o crack.2,3
O cloridrato de cocana um sal solvel em gua e obtido na
forma de p. Sua administrao pode ser por aspirao ou via intravenosa. J o crack apresenta-se como pedra e pouco solvel em
gua, mas facilmente volatilizado quando aquecido.2
Segundo o relatrio de 2011 da Organizao das Naes Unidas
sobre Drogas e Crimes (UNODC), a cocana a segunda droga
mais consumida em todo o mundo. Como consequncia, o trfico
de drogas vem desestruturando a sociedade moderna em relao aos
aspectos sociais e econmicos como a segurana, sade, violncia
e qualidade de vida.4 O consumo de cocana vem aumentando
significativamente na Amrica do Sul, onde estimativas de 2011
da UNODC mostram que a Amrica Latina, Caribe e a frica so
responsveis por 36% do total de usurios de cocana. A ONUDC
estima ainda que 17 milhes de pessoas usaram cocana em 2011.
Esse nmero corresponde a 0,37% da populao mundial com idade
entre 15 e 64 anos.5
O Brasil um pas de fronteira com os trs principais pases
produtores de cocana: Bolvia, Colmbia e Peru. Alm disso, a sua
longa costa litornea pode facilitar o acesso ao oceano Atlntico,
favorecendo, assim, o trfico de drogas para a Europa e a frica. O
Brasil ainda se destaca como sendo o pas com o maior nmero de
*e-mail: wandersonromao@gmail.com
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Materiais e reagentes
Anlises quimiomtricas
Uma soluo de tiocianato de cobalto (soluo de cloreto de cobalto hexahidratado e tiocianato de potssio, 99,0%, Vetec Qumica
Fina Ltda, Rio de Janeiro) foi adquirida para realizao do teste de
Scott. Uma soluo de acetato de etila (99,5%, UV/HPLC, Vetec
Qumica Fina Ltda, Rio de Janeiro) foi usado para as anlises de espectroscopia na regio do UV-VIS. Os padres usados foram fenacetina (98,0%, grau HPLC, Sigma-Aldrich, So Paulo); propilparabeno
Calibrao multivariada
Nesta anlise foram utilizadas 39 amostras de misturas binrias
de cocana com: fermento, leite em p, lidocana e prometazina. As
amostras foram separadas aleatoriamente em dois conjuntos: calibrao e previso, contendo respectivamente 31 e 8 amostras. Dessa
forma foi realizada a construo do modelo de PLS.
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Conceio et al.
Validao do modelo
O nmero timo de variveis latentes do modelo PLS foi determinado pelo mtodo de validao cruzada k-fold, onde o conjunto de
amostras de calibrao dividido em k subconjuntos disjuntos, um
destes subconjuntos retirado para validao enquanto os k-1 subconjuntos restantes so utilizados para construo do modelo, em seguida
as amostras do subconjunto retirado para validao tm seus valores
previstos. Todos os clculos foram realizados no software Matlab.23
Seleo de variveis
Cada espectro de infravermelho contm originalmente 3351
variveis (nmeros de onda espectrais). Assim, a primeira etapa
desta anlise estatstica foi reduzir o nmero de variveis utilizando
o algoritmo gentico (AG)24-26 com as configuraes: populao
inicial com 128 indivduos, mximo nmero de gerao de 100, taxa
de mutao de 1%, inicializao do algoritmo com 15% do total de
variveis, algoritmo utilizado PLS com nmero mximo de 8 variveis
latentes e otimizao do modelo PLS com validao cruzado em 5
blocos escolhidos aleatoriamente. O algoritmo gentico foi executado
10 vezes para reduzir a convergncia do algoritmo para mnimos
locais. Os clculos foram realizados no PLS Toolbox.27
RESULTADOS E DISCUSSO
Anlise por via mida Teste de Scott
O teste de Scott foi aplicado a uma amostra de cocana e 17 aditivos que poderiam ser encontrados em apreenses como adulterantes
e diluentes da cocana. A Tabela 1 sumariza os resultados dos ensaios
colorimtricos para todas as 18 substncias avaliadas. Note que resultados positivos foram encontrados para as amostras de cocana,
lidocana, prometazina, leite em p e fermento. Os resultados do teste
de Scott so ilustrados pela Figura 1a-j, onde imagens de tubo de
ensaios contendo o agente complexante [Co(SCN)2] na presena de
fenacetina (1a), cafena (1b), amido (1c), cido brico (1d), manitol
(1e), cocana (1f), prometazina (1g), lidocana (1h), fermento (1i) e
leite em p (1j) so destacados. A cor vermelha indica um resultado
negativo (1a-e) para o teste de Scott, enquanto que a variao da colorao para o azul indica um resultado positivo (1f-h). Um resultado
duvidoso foi observado para as amostras de fermento e leite em p
(1i,j), com o aparecimento de uma colorao lils. Entretanto, essa
Quim. Nova
Resultados Negativos
cido Brico
Cocana
Amido
Benzocana
Bicarbonato
Fermento*
Biscoito (Nestl)
Leite em P*
Carboximetilcelulose (CMC)
Cafena Anidra
Fenacetina
Lidocana
Lactose
Manitol
Metilparabeno
Prometazina
Propilparabeno
Trigo
*Uma colorao lils foi observada. Porm, em solvente orgnico como acetato
de etila, ela adquire uma colorao azulada.
Anlises UV/VIS
As anlises por espectroscopia na regio do UV/VIS foram realizadas para as amostras que mostraram resultados positivos (lidocana
e prometazina) e inconclusivos (leite em p e fermento) usando o
Figura 1. Imagens contendo o agente complexante [Co(SCN)2]2- na presena de (a) fenacetina, (b) cafena, (c) amido, (d) cido brico, (e) manitol, (f) cocana,
(g) prometazina, (h) lidocana, (i) fermento e (j) leite em p. A cor vermelha indica um resultado negativo (a-e) para o teste de Scott enquanto que a cor azul
indica um resultado positivo (f-j). A cor lils indica um resultado duvidoso (i-j) sendo transformada para azul, na presena de acetato de etila
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ATR-FTIR
Teste de Scott complexo [Co(SCN)4L2]2-, sendo L = prometazina,
cocana, lidocana, leite em p e fermento e misturas binrias
A Figura 3 apresenta os espectros obtidos por espectroscopia de
ATR-FTIR na regio de 4000 a 600 cm-1 do teste de Scott contendo o
complexo [Co(SCN)4]2- na presena de (3a) leite em p, (3b) prometazina, (3c) fermento, (3d) lidocana e (3e) cocana. Note que a banda
na regio de 2060 cm-1, caracterstica de estiramento de nitrila,31 til
para detectar a presena do complexo formado quando os compostos
prometazina (3b), lidocana (3d) e cocana (3e) esto presentes, corroborando com os ensaios colorimtricos, que indicaram a presena
de uma colorao azul. A banda intensa na regio de 2060 cm-1 foi
tambm relatada na literatura28 para a identificao de quetamina
na presena do complexo de [Co(SCN)4]2-. Diferentemente, para as
amostras de leite em p e fermento, que apresentaram uma colorao
lils, nenhuma banda foi observada na regio de 2060 cm-1.
Quando comparamos os espectros de ATR-FTIR entre os complexos contendo prometazina (3b), lidocana (3d) e cocana (3e),
as regies de 1800-1000 e 2200-2750 cm-1 se mostram promissoras
para quantificar as amostras em relao presena de cocana e seus
adulterantes em amostras de drogas ilcitas. A banda na regio de 3300
cm-1 poderia ser til para detectar a presena de cocana (ligaes do
tipo amina - 3400 cm-1), entretanto, a presena de gua omite essa
informao.22 Em todos os casos, as anlises de UV-VIS e ATR-FTIR
mostram-se eficientes para auxiliar os ensaios colorimtricos, eliminando, assim, a interpretao de resultados falso-positivos devido a
sua melhor seletividade analtica.
Os espectros de ATR-FTIR para as misturas binrias contendo
(4a) cocana/fermento, (4b) cocana/leite em p, (4c) cocana/
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Quim. Nova
Figura 4. Anlise de misturas binrias reveladas pelo teste de Scott: (a) cocana/fermento; (b) cocana/leite em p; (c) cocana/lidocana; e (d) cocana/prometazina
Tabela 2. Atribuies dos espectros de ATR-FTIR para as amostras de leite
em p, prometazina, fermento, lidocana e cocana10,31
Banda
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
cm-1
Atribuies
Leite em p
3524
Banda de O-H
3300-3500 (3331-3274)
Deformao axial de N-H
2911 e 2840
Estiramento C-H de C sp3
1743 e 1646
Carbonila de amida (C=O)
1535
Deformao angular simtrica de N-H
1436
Alcanos saturados (-C-H)
1250-1000
Estiramento axial C-O
Prometazina
2363
Vibraes de estiramento de grupos NH+
1600-1500
Estiramento C=C (confirmao de
aromticos)
1490-1440
Cloridrato
1460
Estiramento Ligao C-S
1275-1234
Amina terciria
1049, 759
Anel aromtico orto-substitudos
Fermento
3283
Banda de O-H
2912
C-H aliftico
1632
Amida (estiramento C=O)
1452
Deformao angular de CH2
992
Alquenos insaturados e aromticos
Lidocana
3460 e 3388
Deformao axial de N-H
3187
N-H associado a aminas secundrias
3000-2700
Vibraes N-H de cloridrato
1655
Estiramento de carbonila
1541
Ligao N-H no plano (usada para caracterizar amidas secundrias e aminas)
1490-1440
Cloridrato
1275-1234
Amina terciria
1033 e 785
Anel aromtico (1,2,3-trissubstitudos)
Cocana
2540
Ligao N-H
1728 e 1712
Vibrao de C=O
1273, 1227, 1107, 1068 C-H fora do plano do grupo Benzil e
e 1035
Acetato C-O
729 e 712
C-H fora do plano do grupo Benzil
1543
Figura 6. Espectros de ATR-FTIR para misturas binrias contendo: (a) cocana e fermento; (b) cocana e leite em p; (c) cocana e lidocana; (d) cocana e
prometazina
Figura 7. Este procedimento foi adotado para excluir eventuais variveis que no possuem informaes relevantes para o modelo PLS.
Observa-se que as variveis foram selecionadas ao longo de todo o
espectro de ATR-FTIR, entretanto, a regio em torno de 700 cm-1
bem caracterstica no espectro da cocana foi selecionada em quase
todas as vezes que o AG foi executado.
(4)
onde n o nmero de amostras de calibrao, yi o valor de concentrao de referncia e i o valor de concentrao estimado pelo modelo.
O nmero timo de variveis latentes do modelo determinado pelo
mnimo erro de validao cruzada (RMSECV).
Outro importante parmetro estatstico calculado o coeficiente
de determinao R2 dado por:
(5)
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