Santiago Benites de Pdua

Roney Nogueira de Menezes Filho

Doenas em peixes de criao:

Bases para o diagnstico

2014

Doenas causadas por protozorios

Vrios protozorios so responsveis por causar doenas em peixes de criao e
de vida livre em todo o mundo, estando entre os principais grupos de parasitos
responsveis por surtos epizoticos em fazendas de criao. O filo Protozoa rene
diversos organismos evolutivamente distintos que podem atuar como ecto ou
endoparasitos de peixes, alm de outros vertebrados e invertebrados. Estes agentes so
responsveis pela etiologia de vrias doenas na aquicultura global, alm de ocasionar a
fragilizao do hospedeiro tornando-o mais susceptvel s infeces secundrias,
especialmente pelas bacterioses, que em conjunto com as parasitoses pioram a evoluo
das enfermidades e aceleram as perdas econmicas devido mortalidade e diminuio
do desempenho produtivo dos animais.
A movimentao de peixes para compor o plantel de reprodutores entre
diferentes pases tambm favorece a disseminao e disperso geogrfica de parasitos
na aquicultura, sendo esta prtica responsvel pela introduo de novos patgenos em
reas anteriormente livres da doena. Alm disso, o impacto das parasitoses na
aquicultura mundial no se restringe em perdas econmicas somente para a indstria,
mas ocorre grande impacto social nos pases em desenvolvimento cuja atividade
aqucola est entre os principais alicerces da produo de alimento de alto valor
nutricional para a populao carente. Inmeras medidas profilticas e curativas tem sido
sugeridas, embora muitos dos produtos qumicos utilizados so empregados de forma
inadequada, levando resistncia droga pelo parasito com impacto negativo sobre o
ambiente aqutico. Dessa forma, deve-se enfatizar a importncia do impacto da doena
para a elaborao de estratgias para o diagnstico precoce e interveno rpida nas
prticas de gesto em fazendas de criao para se obter uma produo estvel e
sustentvel.
Neste captulo sero abordadas as protozoses causadas por ciliados, flagelados
e dinoflagelados que acometem os peixes de criao no Brasil. Os agentes causadores
de doenas, seus aspectos biolgicos, ciclo de vida, vias de transmisso da doena,
relao parasito: hospedeiro e tcnicas de diagnstico so discutidos e apresentadas para
adequada orientao durante os procedimentos de diagnstico e estudo das parasitoses.
Ciliophora
Os protozorios ciliados renem grande diversidade de parasitos de peixes de
criao, sendo responsveis por surtos epizoticos e grande impacto econmico na
piscicultura brasileira. So organismos que possuem clios como estrutura de
locomoo, bem como para captura de alimento, alm de utilizarem sua ciliatura para
realizar ao abrasiva ou perfurativa nos tecidos dos hospedeiros. Sero abordados os
seguintes ciliados neste captulo: Apiosoma, Chilodonella, Epistylis, Ichthyophthirius e
tricodindeos.
Apiosomase
Etiologia
Esta uma doena parasitria ocasionada por ciliados pertencentes ao gnero
Apiosoma. Compreendem espcies de protozorios pertencentes ao grupo dos
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peritrquios ssseis, com formato cnico que fixam-se sobre a pele, nadadeiras e
bnquias de peixes de criao, com notvel preferncia por animais jovens,
especialmente tilpia durante as fases iniciais de desenvolvimento enquanto mantidas
em hapas de baixa micragem. Estes ciliados so ssseis somente na fase adulta,
possuem vacolos contrteis e nutritivos, infundibulum que equivalente cavidade
oral, sendo compostas pela ciliatura em espiral que por sua vez emerge o disco
peristomial. Seu macroncleo compacto com formato oval ou levemente triangular,
sendo possvel observar a presena de microncleo em alguns espcimes. Para fixao,
estes ciliados utilizam a escpula, que no penetra as clulas dos hospedeiros. Na figura
1 esto indicados as principais caractersticas morfolgicas para identificao deste
ciliado

Figura 1. Caracteres morfolgicos necessrios para identificao do gnero

ApiosomaBlanchard, 1885. Colorao por Giemsa.
Biologia do parasito
Este ciliado, bem como o gnero Epistylis e Heteropolaria, possuem a
denominao de parasito questionada, uma vez que utilizam os peixes somente para
fixao e no penetram as clulas epiteliais durante este processo, alm disso,
alimentam-se por filtrao de partculas presentes na coluna dgua. Este estilo de vida
denominadoepibiose, na qual o ciliado atua como epibionte e o animal que fornece o
suporte para fixao denominado basibionte. No entanto, em altas densidades
populacionais destes ciliados podem ocorrer prejuzos aos animais basibiontes, podendo
caracterizar uma relao desarmnica, na qual a denominao de parasito ento
utilizada. De forma geral, quando trata-se de infestao em animais jovens que so mais
sensveis s enfermidades parasitrias e bacterianas, o diagnstico de Apiosoma
registrado como parasitismo.
Ciclo de vida
Este ciliado propaga-se por meio da fisso binria como forma assexuada e
conjugao como forma sexuada. Aliada a essa estratgia,possui a habilidade de
desenvolver formas no ssseis denonimadastelotrquios, os quais consistem em clulas
mveis que nadam livremente na coluna dgua.
Transmisso
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A transmisso de Apiosomaocorre por meio da forma infectante denominada

telotrquio, que por sua vez nada na coluna dgua em busca de novos hospedeiros para
fixao.Fmites de uso na rotina da piscicultura e gua de transporte de peixes vivos
tambm so potenciais vias de transmisso e disperso deste ciliado.
Diagnstico
Raspados de pele, nadadeiras e brnquias com pesquisa a fresco do parasito em
microscopia ptica a principal tcnica para diagnstico da infestao por
Apiosoma(Figura 1a,b), podendo ser notada sua contrao celular e batimento ciliar no
disco epistomial. Por se tratar de um protozorio robusto com comprimento entre 40 e
70 m, facilmente diagnosticado mesmo quando ocorre baixa densidade populacional
do parasito. Para visualizao detalhada das estruturas morfolgicas e denominao
especfica deste ciliado, podem ser empregadas tcnicas com impregnao pelo nitrato
de prata (Figura 1c), protargol para evidenciar o aparato ciliar e nuclear, ou ainda a
colorao com Giemsa (Figura 1d).
Patogenia
Como oparasito fixa-se sobre o hospedeiro por meio daescpula, e no ocorre a
penetrao das clulas epiteliais, as alteraes patolgicas ocasionadas so discretas e
at mesmo inexistentes em baixos nveis de infestao. Somente em altos nveis de
intensidade de parasitismo que este ciliado pode ocasionar a diminuio da superfcie
respiratria para trocas gasosas quando acomete os filamentos branquiais, situao esta
que ocorre devido sua permanncia sobre o tecido. No entanto, alevinos que
apresentam altos nveis de infestao sobre a pele podem apresentar o desprendimento
de escamas com maior facilidade, possivelmente devido infeces mistas com outros
agentes oportunistas.

Figura 2.Apiosoma fixado sobre o epitlio (a) e escama (b) de larva de tilpia analisada
em exame a fresco. Espcime impregnado com nitrato de prata exibindo suas estrias
transversais (c) e corado com Giemsa exibindo o aparato nuclear.

Sinais clnicos e alteraes macroscpicas

Os sinais clnicos que podem ser visualizados em peixes doentes no so
especficos, estando geralmente associados a comportamentos de dificuldade
respiratria, com hiperventilao e busca de oxignio na superfcie da gua. Alteraes
de colorao na pele, principalmente indicado pelo seu escurecimento, tambm podem
ser observadas. Pode haver ainda perda de equilbrio, natao lenta e na superfcie da
gua e perda de apetite.
Quilodonelose
Etiologia
Esta uma doena parasitria ocasionada por protozorios ciliados pertencentes
ao gnero Chilodonella.Soparasitos em forma de folha, ovais, achatados dorsoventralmente, ligeiramente assimtricos e mveis. Possuemmacro e microncleoe duas
bandas compostas por suas estrias ciliares, alm de dois vaclos contrteis (Figura
3).Existem vrias espcies deChilodonellaque so de vida livre, mas algumas so
parasitos de pele, brnquia e nadadeira de peixes que vivem em gua doce e salobra.
Somente duas principais espcies tm sido caracterizadas como parasitos de importncia
para peixes, sendo Chilodonellahexasticha, que acometem principalmente peixes
tropicais, e Chillodonellapiscicolaque acomete principalmente espcies subtropicais e
de guas temperadas. No Brasil recentemente foi realizado o primeiro registro de C.
hexasticha causando surtos de mortalidade em tilpia, pacu e tuviras de criao, no
havendo ainda registros de ocorrncia de C. piscicola.

Figura 3. Caracteres morfolgicos necessrios para identificao especfica de

ChilodonellaStrand, 1926.
Biologia do parasito
Os quilodoneldeos de importncia para a piscicultura encontram seu alimento
sobre os prprios peixes. Sua alimentao constitui-se basicamente de bactrias
pertencentes flora microbiana residente desses animais (Figura 4), alm de restos
celulares que desprendem da pele. Estes parasitos realizam ao abrasiva sobre a
superfcie corprea e branquial dos peixes por meio de sua rpida movimentao atravs
do batimento ciliar. Dessa forma, conseguem aumentar a descamao de clulas
epiteliais que, por sua vez, so utilizadas para sua alimentao eservem como substrato
para proliferao de bactrias que tambm so utilizadasem sua alimentao.

Figura 4.Chilodonella observado em raspado de pele de pacu. Pode-se observar grande

quantidade de bactrias em torno do protozorio. Colorao com Giemsa.
Ciclo de vida
Este ciliado possui ciclo de vida monoxeno, com fisso binria sobre o prprio
hospedeiro (Figura 4), alm de conjugao como forma de reproduo sexuada. No so
necessrias fases de desenvolvimento na gua ou sedimento dos viveiros para
manuteno deste parasito, embora alguns pesquisadores citam um estgio capaz de
formar cistos de resistncia para manuteno do parasito, no entanto, esta estratgia no
est bem documentada na literatura.

Figura 5.Chilodonellahexasticha em processo de fisso binria, mostrando a diviso

nuclear (a) e das estrias ciliares (b), ambos com estrangulamento transversal do corpo
celular.
Transmisso
A transmisso da quilodonelose ocorre principalmente pela via horizontal, por
meio do contato direto entre animais infestados com animais sadios. O carreamento do
parasito por meio de fmites de uso rotineiro nas pisciculturas, bem como a gua de
transporte de peixes vivos devem ser considerados como potenciais vias de disperso da
doena.
Diagnstico
O diagnstico da quilodonelose realizado tradicionalmente pelos raspados de
pele, nadadeiras e brnquia dos animais suspeitos, com pesquisa pelo parasito em
microscopia ptica. Durante o exame a frescoeste ciliado facilmente detectado devido
sua movimentao rpida, geralmente em uma nica direo (Figura 6 a-b). Em caso
de larvas de peixes, podem ser adicionados os animais inteiros entre lmina e lamnula,
comprensados, e ento analisados em microscopia ptica.Tcnicas de impregnao com
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nitrato de prata complementados com a colorao pancrmica com Giemsa ou

hematoxilina so necessrias para observao dos caracteres taxonmicos e designao
especfica do agente, no entanto, a principal caracterstica taxonmica utilizada para
diferenciao entreC. hexastichade C. piscicola o nmero e espaamento das estrias
nas bandas ciliares.C. hexasticha possui menor nmero de estrias nas duas bandas
ciliares, sendo estas mais espaadas em comparao com C. piscicola.
As tcnicas histolgicas tambm permitem o diagnstico definitivo da infestao
(Figura 6 c), alm de elucidar as alteraes teciduais ocasionadas pelo parasito. No
entanto, no possvel observar todos os detalhes taxonmicos nos cortes de tecidos
infestados, o que permite obter apenas a designao de gnero. Tcnicas moleculares
para deteco do DNA do parasito ainda so pouco exploradas na rotina de diagnstico
desta doena, assim como anlises de microscopia eletrnica de varredura dos tecidos
acometidos.
Patogenia
As infestaes por Chilodonella podem causar leses mais severas quando comparadas
com outros ciliados que possuem estilo de vida similar, como os tricodindeos. A
patogenia deste parasito est relacionada sua ao abrasiva sobre o epitlio do
hospedeiro, na qual o tecido branquial o mais sensvel e onde so observadas as
principais alteraes patolgicas que levam o peixe morte. Nos casos agudos da
doena podem ser observados aumento da produo do muco e congesto branquial,
porm em casos severos evoluem para intensa proliferao epitelial, degenerao e
necrose do epitlio, ruptura dos capilares sanguneos e presena de infiltrado
inflamatrio mononuclear (Figura 7). A evoluo da doena muitas vezes
acompanhada pela infeco oportunistas por bactrias, que geralmente causam infeco
sistmica, uma vez que o hospedeiro j encontra-se em quadro de debilidade do sistema
de defesa orgnica, e esta torna-se a causa final da morte do animal.

Figura 6.Exame de raspado branquial analisado a fresco positivo para presena de

Chilodonella (a,b) e diagnstico do parasito em seco histolgica de brnquia
mostrando o ciliado em meio a debris celulares(b cabea das setas).

Sinais clnicos e alteraes macroscpicas

A manifestao clnica da quilodonelose tambm envolve sinais clnicos no
especficos, como dificuldade respiratria, letargia, perda de equilbrio e reduo do
apetite. Entre as alteraes patolgicas macroscpicas esto leses esbranquiadas sobre
a brnquia (Fig. 8), perdas de escama, escurecimento da pele, alm de ulcerao de pele
e nadadeiras, com pequenas reas de hemorragia, que so comuns em casos de infeco
mista por bactrias oportunistas.

Figura 7. Alteraes patolgicas no tecido branquial de pacu infestado por

Chilodonella hexasticha. Moderada proliferao epitelial com fuso focal das lamelas
secundrias (a), intensa proliferao epitelial com fuso total das lamelas secundrias
(b-c), intenso infiltrado inflamatrio com edema e congesto (c), detalhe do processo
inflamatrio mostrando hemorragia branquial, degenerao e necrose epitelial (d).
Colorao HE.

Figura 8. Alteraes patolgicas macroscpicas em brnquia de tilpia com infestao

severa por Chilodonellahexasticha. Notar reas esbranquiadas coalescentes sugestivo
de necrose e palidez branquial difusa.
Epistilase
Etiologia
Esta uma doena parasitriaocasionada por protozorios ciliados pertencentes
aos gneroEpistylis. Representantes deste gnero compem ciliados coloniais que
apresentam forma do corpo semelhante a um sino, possuem um pednculo longo e no
contrtil em cujo pice se encontra uma clula denominada zoide, sendo esta composta
pelo ncleo, vacolos contrteis, vacolos alimentares,lbioepistomial, clios e
escpula. Da mesma forma como o gnero Apiosoma, este peritrquio sssil utiliza o
peixe como substrato para fixao o que caracteriza-se como epibiose, na qualsua
alimentao obtida por meio de filtrao das partculas presentes na gua, no entanto,
em alta densidade populacional e em conjunto com bactrias que colonizam seu
pednculo, este ciliado passa a causar prejuzos ao animal, sendo ento denominado
como parasito nestas circunstncias. No Brasil, a epistilase tem sido caracterizada
como doena emergente, com maior impacto na criao de bagres nativos.

Figura 9. Caracteres morfolgicos necessrios para identificao do gnero Epistylis.

Biologia do parasito
Protozorios como Epistylis geralmente utilizam os peixes apenas como
substrato para fixao, numa relao ecolgica conhecida como epibiose, onde os
peixes atuam como organismos basibiontes (Figura 10). Esta condio pode ser
facultativa ou obrigatria, dependente da espcie de peritrquio em questo; uma vez
que alguns destes protozorios podem se fixar em substratos inertes. Estes organismos
geralmente utilizam estruturas firmes do corpo dos peixes para fixao, portanto em
peixes sem escama as colnias so encontradas principalmente nos raios das nadadeiras
(peitoral e dorsal principalmente), bordas do oprculo, bordas dos lbios, alm da
superfcie da cabea. J os peixes com escama podem albergar as colnias nestes
mesmos locais, com adio do restante da superfcie corporal, uma vez que as escamas
proporcionam a sustentao necessria para a fixao e desenvolvimento das colnias.
Uma vez utilizando peixes ou outros animais aquticos tais como crustceos,
anfbios ou rpteis como basibiontes, estes ciliados se alimentam de materiais em
suspenso na gua, principalmente bactrias. importante salientar que Epistylissp. no
se alimenta das clulas dos peixes, nem causa leses, tampouco perfuram a pele durante
o processo de fixao. Fato este que torna questionvel a denominao de parasito para
estes protozorios, j que eles no dependem dos peixes para se alimentarem, nem
competem pelo mesmo alimento. No entanto, peixes que albergam muitas colnias de
Epistylis podem desenvolver uma doena com etiologia mista, ocorrendo assim, um
efeito negativo que, por sua vez, torna a denominao de epibiose para essa situao
tambm questionvel. Portanto, por convenincia, adotou-se o termo de parasito para
este protozorio quando diagnosticado em peixes de criao.

Figura 10. Juvenil de tilpia (organismo basibionte) exibindo colnias macroscpicas

de Epistylis (organismo epibionte).
Ciclo de vida
Este ciliado realiza a fisso binria de zoides(Figura 11a) como forma de
reproduo assexuada ainda na fase colonial, podendo realizar a conjugao como
forma de reproduo sexuada. Da mesma forma como no gnero Apiosoma, este
parasito regularmente desenvolve formas no ssseis denominadas telotrquios, sendo
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esta fase correspondente a clulas mveis que nadam livremente na coluna

dgua(Figura 11a).

Figura 11.Zoide de Epistylissp. em fisso binria (a) e telotrquio (b) observados em

microscopia de contraste interdiferencial. Barra= 50m
Transmisso
A transmisso da epistilase ocorre por meio da forma infectante denominada
telotrquio, que por sua vez nada na coluna dgua em busca de novos hospedeiros para
fixao e desenvolvimento de novas colnias.Em adio, Pdua et al. (2013b) sugerem
a possibilidade do envolvimento de crustceos zooplanctnicos como possveis
reservatrios deste patgeno no ambiente de cultivo, bem como sua participao no
processo de transmisso da doena, uma vez que estes ciliados possuem a habilidade de
fixar-se sobre estes organismos. Alm disso, prtica de rotina em muitas fazendas de
criao de bagres nativos a adubao de viveiros para aumentar a produtividade
primria resultando em maior produo de zooplncton; que por sua vez, sero
utilizados para alimentao das larvas dos peixes. No entanto, com a adio de
nutrientes na gua tambm ocorre o aumento da comunidade de protozorios que pode
implicar em riscos sanitrios para a criao animal.
Diagnstico
Para realizar o diagnstico da epistilasedeve-se proceder anlise macroscpica,
a partir da visualizao de colnias de aspecto esbranquiado ou amarelado sobre a pele,
nadadeiras, oprculo, cabea e lbio dos animais suspeitos, sendo necessria a
complementao com anlises microscpicas de fragmentos destas colnias. A partir da
avaliao a fresco no microscpio ptico pode ser detectado o protozorio exibindo sua
tpica movimentao de contrao dos zoides, com pednculo esttico, o que fornece o
diagnstico definitivo doparasito (Figura 12). O diagnstico da infestao por Epistylis
tambm pode ser realizado a partir de anlises histopatolgicas dos tecidos acometidos,
no entanto, por meio desta tcnica perdem-se as caractersticas importantes que so
visualizadas somente no exame a fresco, como a contratilidade do zoide. Em casos de
infestaes durante os estgios inicias, no possvel visualizar a presena de colnias a
olho n, sendo necessria a realizao de raspados de pele, nadadeiras e brnquias para
pesquisa do parasito em microscpio ptico.

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Figura 12. Anlise a fresco de colnias de Epistylis sobre escama de tilpia do Nilo (a),
com detalhe da colnia (b) (microscopia de luz), seguido pelo detalhe de um zoide (c)
e do pednculo colonizado por bactrias em formato de pequenos bacilos (d setas)
(microscopia de contraste diferencial).
Diagnstico diferencial
A confirmao da infestao por Epistylis deve ser realizada somente pelo uso
de anlises microscpicas, uma vez que a infeco pelo fungo Saprolegniasp.
desenvolve colnias muito similares s colnias de Epistylis sp. quando vistas somente
a olho n. Alm disso, o gnero Epistylis deve ser cuidadosamente diferenciado de
outros peritrquios ssseis, tais como Apiosoma e Ambiphrya, que no formam colnias
ramificadas. Por outro lado, raramente outros gneros de ciliados podem ser
encontrados em peixes, tais como Zoothamnium e Carchesium, que por sua vez formam
colnias ramificadas muito similares s colnias de Epistylis, mas a diferenciao se d
pela atividade contrctil ser exercida no somente pelo zoide, mas tambm pelo
pednculo.
Patogenia
A patogenia da infestao por Epistylis est intimamente relacionada com as
bactrias que colonizam seu pednculo (Figura 12 d - setas). Como este ciliado no
possui a habilidade de penetrar nas clulas do hospedeiro no processo de fixao, no
ocasiona alteraes patolgicas teciduais, tampouco secretam substncias que poderiam
agredir os tecidos utilizados como substrato. No entanto, Hazenet al. (1978) elucidou o
envolvimento da bactria Aeromonashydrophila como agente responsvel pela
colonizao e secreo de enzimas lticas que degradam o tecido adjacente colnia do
ciliado, sendo ento esta a causa das alteraes hemorrgicas associadas s colnias de
peritrquios ssseis que infestavam peixes norte americanos, na qual a doena foi
designada comored-sore disease.
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Em cortes histolgicos so observadas reas adjacentes colnia exibindo

extensas reas de degenerao e necrose epitelial, com intensa descamao de clulas,
ulcerao, bem como proliferao das clulas produtoras de muco, alm de presena de
infiltrado inflamatriomononuclear com presena de macrfagos policariontes. A morte
do animal ocorre somente com a invaso dos tecidos lesados por bactrias oportunistas
que se proliferam e causam infeco sistmica.
Sinais clnicos e alteraes macroscpicas
Em altos nveis de infestao por Epistylissp. observam-se principalmente as
colnias esbranquiadas ou amareladas sobre a pele, nadadeiras, cabea ou boca dos
animais. Muitas vezes, na regio em torno das colnias so observadas extensas reas
de ulcerao, perda de escama e desprendimento da pele com hemorragias. Estas leses
no so ocasionadas pelo parasito, mas sim pelas enzimas liberadas pelas bactrias que
colonizam o pednculo deste ciliado. Animais com estas alteraes apresentam-se
apticos, deslocados do lote e so facilmente capturados.

Figura 13. Seces histolgicas de pele de surubim hbrido infestado por Epistylissp.
Colnia do ciliado sobre a pele lesionada, sem evidncia de penetrao, exibindo
extensas reas de ulcerao (a). Viso panormica da colnia mostrando os zoides (b
ponta das setas) e tecido do hospedeiro (b asterisco) no havendo penetrao.
Bactrias associadas colnia (c). Degenerao hidrpica no epitlio (d) compresena
de macrfagos policariontes (d cabea das setas). Colorao HE. Barra= 100 m (b) e
20 m (c,d).

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Figura 14. Epistilase acometendo pele e nadadeiras de tilpia do Nilo (a) e surubim
hbrido (b-c), com tpica manifestao clnica da doena da ferida vermelha (Red-sore
disease) (c).
Ictiofitirase
Etiologia
A ictiofitirase uma doena parasitria ocasionada pelo protozorio ciliado
denominado Ichthyophthiriusmultifiliis, popularmente conhecido como ictio. A
enfermidade tambm conhecida como doena dos pontos brancos, devido aos sinais
clnicos caractersticos. Na figura 15 pode-se observar o parasito em diferentes fases:
trofonte maduro (Figura 15a), com formato circular e ncleo em forma de ferradura
bastante caracterstico cujo tamanho total do parasito pode chegar de 0,8 a 1,0 mm e
trofonte imaturo com ncleo em forma de basto (Figura 15b). Nesta fase, o parasito
possui formato esfrico ou oval e envolvido por ciliatura disposta longitudinalmente
(Figura 15c). J os pequenos terontes (Figura 15d), estgio em que o parasito
infectante ao peixe, geralmente so piriformes ou ovais com dimenses de 30 x 50 m e
tambm possuem ciliatura disposta longitudinalmente.

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Figura 15.Ichthyophthiriusmultifiliisobservado em microscopia ptica. Trofontematuro

com ncleo em forma de ferradura (a); trofonte imaturo com ncleo em forma de basto
(b); trofonte impregnado com nitrato de prata exibindo suas estrias ciliares (c) e terontes
(estgio infectante) observados em exame a fresco (d).
Este agente um dos principais patgenos parasitrios queocorremna criao de
peixes em todo mundo, e acomete principalmente espcies de peixes de gua doce nas
regies subtropicais e de clima temperado, causando a infeco de pele, nadadeiras,
brnquias e crnea dos animais. Alm disso, este ciliado no possui especificidade
parasitria, na qual todos os peixes de gua doce so potenciais hospedeiros para este
ciliado. No Brasil, este protozorio o principal patgeno que aflige a criao de bagres
nativos em todas as regies, inclusive no centro-norte do pas onde as oscilaes de
temperatura so menos frequentes e de menor intensidade. Bagres como jundi
(Rhamdiaquelen), surubins (Pseudoplatystoma spp.) e hbrido pintado amaznico so
peixes altamente susceptveis infeco pelociliado e tambm frequentemente
impactada por surtos de doena.
Biologia do parasito
Este protozorio possui o ciclo de vida um pouco complexo, quando comparado
aos tricodindeos, quilodoneldeos e Epistylis. Torna-se parasito obrigatrio somente na
fase de trofonte, portanto, o peixe essencial para que este ciliado sobreviva e consiga
completar seu ciclo de vida. Para isso, formas de vida livres denominadas terontes,
possuem um aparato na regio apical denominado perforatorium que responsvel pela
penetrao ativa na pele (tecido epitelial) por meio de ao mecnica. Assim, o teronte
se aloja entre as camadas de clulas epiteliais acima da derme, e inicia sua
transformao em trofonte.
Aps a penetrao do tegumento, que se d principalmente na pele (alojando-se
entre as escamas), nadadeiras, crnea, cavidade oral e tecido branquial, o teronte sofre
algumas mudanas estruturais, especialmente no aparato bucal primitivo, que passa a ter
tamanho suficiente para ingerir detritos celulares relativamente grandes, quando ento
passa a ser denominado trofonte. Nessa fase, alimenta-se de secrees, fragmentos
teciduais e clulas inflamatrias do hospedeiro, at completar seu desenvolvimento, que
varivel de acordo com a temperatura da gua. Temperaturas muito baixas (< 10 C) e
muito altas (> 28C) retardam o desenvolvimento deste ciliado.
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Ciclo de vida
O ciclo de vida do ictio direto, ou seja, para complet-lo necessrio apenas
um hospedeiro. No entanto, da mesma forma como Amyloodinium e Piscinoodinium,
seu ciclo trifsico e em somente um estgio que ocorre o parasitismo, como descrito
a seguir:
I. Teronte: forma de pequenas dimenses (30 x 50 m), com natao aqutica
livre, sendo o estgio infectante ao hospedeiro.
II. Trofonte: estgio em que realiza o parasitismo no epitlio do peixe, podendo
atingir 800 a 1000 m e move-se ativamente.
III. Tomonte: forma livre que possui um cisto de proteo. Fixa-se em plantas
aquticas ou bordas dos viveiros em substratos inertes. Realiza inmeras
divises e formam entre 500 a 1000 clulas-filhas, denominadas tomitos, que
por sua vez diferenciam-se em terontes infectantes para ganhar o ambiente
aqutico.

Figura 16.Ciclo de vida do Ichthyophthiriusmultifiliis. Todos os estgios desse

organismo so ciliados. O teronte de natao livre penetra atravs do muco e invade o
epitlio da pele, brnquias, entre outros. Ao entrar no hospedeiro ele se transforma em
trofonte, que se alimenta e cresce at 800-1000 m. O trofonte move-se ativamente
dentro do epitlio. O parasito sai do peixe como tomontematuro, que secreta um cisto de
proteo e ocorrem inmeras divises para formar de 500-1000 clulas-filhas (tomitos).
Os tomitos diferenciam-se em terontes infectantes, que perfuram a parede do cisto e
entram na gua com natao livre, em busca de um novo hospedeiro para completar o
ciclo novamente. Ilustrao modificada a partir de Dickerson (2012).
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Transmisso
A transmisso da doena ocorre a partir do contato de animais saudveis com a
forma infectante do parasito que de vida livre, o teronte. Fmites de uso rotineiro nas
pisciculturas e gua de transporte dos animais devem ser considerados como potenciais
formas de disperso deste ciliado. A liberao de terontes no ambiente aqutico est
intimamente relacionada com as condies ambientais, especialmente com a
temperatura da gua. Em temperaturas abaixo de 24 C o ciclo deste ciliado favorecido
e sua proliferao ocorre de forma rpida, porm, temperaturas muito baixas, menores
que 10C, ou muito altas acima de 28C o seu ciclo inibido. Contudo, excees so
frequentemente observadas a campo, especialmente na regio centro-norte do Brasil
onde foram registrados surtos por ictiofitirase em temperatura da gua em torno de 30
C. A possvel existncia de diferentes linhagens deste ciliado poderia elucidar melhor
essa variao de susceptibilidade s variaes trmicas do ambiente aqutico.
Diagnstico
Para realizar o diagnstico da ictiofitirase so necessrias avaliaes
macroscpicas, na tentativa de visualizar os pontos brancos (Fig. 17a) que esto entre os
sinais clnicos da doena, complementados com a anlise microscpica no exame a
fresco de raspado braquial, de pele e nadadeiras. O diagnstico definitivo obtido a
partir da visualizao de terontes, trofontes imaturos ou trofontes maduros com ncleo
tpico em formato de ferradura (Figura 17b), sendo observadosnos tecidos infectados
analisados durante o exame a fresco, bem como em anlises histolgicas (Fig. 17c,d).
Durante a anlise a fresco, pode-se detectar a presena da ciliatura do protozorio
revestindo toda sua membrana, o que lhe confere movimentao em crculo nos estgios
de trofonte, enquanto os terontes so piriformes e apresentam movimentao em uma
nica direo.
Diagnstico diferencial
O diagnstico diferencial da ictiofitirase deve ser realizado cautelosamente,
principalmente na infestao pelo dinoflagelado Piscinoodiniumpillulare. Este parasito
possui tamanho, colorao e formato semelhantes ao ictio, mas no possui
movimentao alguma, pois desprovido de ciliatura. Alm disso, P. pillulare possui
ncleo circular, e no em formato de ferradura.

17

Figura 17. Surubim hbrido com ictiofitirase apresentando inmeros pontos brancos
sobre a pele e nadadeiras (a). Ichthyophthiriusmultifiliis observado durante o exame a
fresco de raspado de pele, podendo ser notados trofontes maduros com ncleo em forma
de ferradura (b cabea da seta) e vrios trofontes imaturos em fase de
desenvolvimento (b setas contnuas). Em corte histolgico, os trofontes podem ser
diagnosticados sob o epitlio das lamelas branquiais (c), podendo ser notado marcante
presena de infiltrado inflamatrio (c asterisco), bem como a presena do
parasitoinserido na derme da peledo animal infectado (d cabea da seta), podendo ser
notada a proliferao das clulas de muco na regio adjacente insero do parasito (d
setas pontilhadas).Barra de escala 150m (c) e 100 m (d). A figura 17a foi obtida em
Pdua et al. (2012b), enquanto a figura 17d foi obtida em Pdua et al. (2014).
Patogenia
As alteraes patolgicas ocasionadas pela ictiofitirase esto relacionadas com a
penetrao do teronte nas camadas da derme com posterior desenvolvimento do estgio
de histofagia do trofonte. Este processo ocasiona intensa resposta inflamatria pelo
hospedeiro (Figura 17c), com proliferao epitelial e proliferao de clulas de muco,
em casos mais severos, ocorre fuso das lamelas secundrias do filamento branquial,
degenerao e necrose epitelial com formao de inmeras lceras no epitlio aps a
sada do trofonte maduro (Figura 18a), que ir se transformar em tomonte para dar
continuidade no ciclo de vida. Pode-se notar tambm a intensa migrao de leuccitos
PAS-positivos para o local onde oparasito se insere (Figura 18d). Alm disso, a
presena do parasito em peixes favorece infeces secundrias por bactrias (Xuet al.,
2012).

18

Figura
18.
Alteraes
patolgicas
ocasionadas
pela
infestao
por
Ichthyophthiriusmultifiliis em cachara. Extensas lceras epiteliais aps a sada do
trofonte maduro (a - setas), degenerao hidrpica e necrose epitelial (b), proliferao
de cluas de muco (c) e infiltrado de granulcitos-PAS positivos (d setas) no epitlio
onde se insere o parasito (asterisco), com granulcitos aderidos sobre a membrana do
ciliado (d cabea das setas). Colorao HE (a-b) e PAS (c-d). Barra= 150 m (a) 30
m (b, d), 10 m (c).
Sinais clnicos e alteraes macroscpicas
O principal sinal clnico da ictiofitirase a presena de inmeros pontos
brancos situados em toda superfcie corprea dos peixes parasitados, incluindo pele,
nadadeiras, crnea, cavidade bucal e brnquias. Alm disso, comum observar os
peixes exibindo dificuldade respiratria, bem como movimentos grosseiros de frico
contra as paredes, fundo ou tela dos viveiros ou tanques-rede, a ponto de turvar a gua
em criaes de viveiro escavado. Tal fato ocorre devido ao irritante determinada
pela movimentao do ciliado, possivelmente ocasionando prurido.
Tricodinase
Etiologia
Esta uma doena parasitria ocasionada por protozorios ciliados pertencentes
ao grupo dos tricodindeos, famlia Trichodinidae.So peritrquios mveis que cuja
principal caracterstica a presena de um disco adesivo na poro aboral da clula. O
corpo, coberto por uma fina membrana, circundado por linhas ciliares em espiral, tem
um macroncleo normalmente em forma de ferradura com microncleo oval e um disco
adesivo com anel esqueltico composto por dentculos (Figura 19). No Brasil, os
gneros Trichodina, Tripartilla,Paratrichodinae Trichodinella(Figura 20) tem sido
descritos causando infestao em peixes de diferentes regies.

19

Figura 19. Caracteres morfolgicos necessrios para identificao de ciliados

pertencentes famlia Trichodinidae.Trichodinacentrostrigeata observada em contraste
interdiferencial(a), disco adesivo (DA) de Trichodina magna impregnado pelo nitrato de
prata (b), ciliatura adoral (CA) em espiral de Trichodinaheterodentata impregnada pelo
nitrato de prata (c) e aparato nuclear, mostrando o macroncleo em formato de ferradura
(Ma) e microncleo oval (Mi), de T. heterodentata corada com Giemsa (d).

Figura 20. Representantes dos quatro gneros de tricodindeos que foram registrados
em peixes de criao no Brasil. Trichodina (a), Tripartiella (b), Paratrichodina (c) e
Trichodinella (d).
Biologia do parasito
Estes ciliados acometem animais de gua doce e de gua salgada, causando
infestao sobre toda a superfcie corporal externa dos animais, alm de cavidade bucal
e brnquias. No entanto, alguns representantes deste grupo de ciliados podem atuar
como endoparasitos, infectando intestinos, rins e vias urinrias. A proliferao dos
tricodindeos no ambiente de criao est intimamente relacionada com as condies de
qualidade ambiental e aspecto ecolgico de cada espcie, sendo sua alimentao
composta basicamente por debris celulares do hospedeiro, bactrias da microbiota do
peixe e da gua, alm de outros materiais particulados em suspenso na gua. Em
situaes de altas densidades de estocagem, com maior disponibilidade de matria
orgnica em suspenso e excreta dos animais, muitas vezes associados com o aumento
20

da temperatura da gua, so fatores que favorecem a proliferao destes parasitos. No

entanto, vale ressaltar que existem espcies de tricodindeos em que seu ciclo de vida
suprimido com o aumento da temperatura da gua.
Ciclo de vida
Estes ciliados possuem ciclo direto, ou monoxeno, realizando a fisso binria
como principal forma de replicao sobre o hospedeiro (Fig. 21a). Aps o processo de
diviso, as clulas filhas reabsorvem os dentculos velhos e formam novos dentculos
(21b). Com este processo, conseguem obter altos nveis da intensidade de parasitismo
em um curto espao de tempo, sob influncia da disponibilidade de alimento e
temperatura da gua. Outra forma de reproduo destes ciliados a conjugao.

Figura 21. Fisso binria de tricodindeo impregnado com nitrato de prata (a) e
formao de um novo anel denticular aps o processo de diviso (b). Barra= 10 m
Transmisso
A transmisso destes ciliados ocorre por via horizontal, pelo contato direto entre
animais doentes com animais sadios. A gua de criao tambm uma forma de
transmisso destes parasitos quando se desprendem em busca de novos hospedeiros.
Fmites e gua de transporte de animais vivos devem ser considerados como potenciais
vias de disperso destes parasitos.
Diagnstico
O diagnstico da tricodinase realizado tradicionalmente pelos raspados de
pele, nadadeiras e brnquia dos animais suspeitos, com pesquisa pelo parasito em
microscopia ptica (Figura 22a-b). Durante o exame a fresco este ciliado facilmente
detectado devido sua movimentao rpida em crculos. Tcnicas de impregnao
com nitrato de prata complementados com a coloraopancrmica com Giemsa ou
hematoxilina so necessrias para observao dos caracteres taxonmicos e designao
genrica e especfica do agente.As tcnicas histolgicas tambm permitem o
diagnstico definitivo da infestao pelos tricodindeos, porm no possvel obter a
designao de gnero com esta tcnica por omitir detalhes importantes na caracterizao
de cada gnero. Tcnicas moleculares para deteco do DNA do parasito ainda so
pouco exploradas na rotina de diagnstico desta doena, enquanto a microscopia
eletrnica de varredura permite realizar o diagnstico definitivo da doena alm de
revelar o mecanismo patognico do agente (Figura 22 c-d)

21

Figura 22. Diagnstico de tricodindeos em raspado de pele de tilpia severamente

parasitada. Aumento de 40 x (a) e 100 x (b).Trichodinaheterodentata observada em
microscopia eletrnica de varredura (c), com detalhe da microflora bacteriana em torno
do ciliado sobre uma lcera de pele (d) em larva de curimbat.
Patogenia
As alteraes patolgicas ocasionadas pela tricodinase esto relacionadas com a
ao abrasiva destes ciliados sobre o epitlio dos hospedeiros. A doena pode
apresentar-se de forma aguda, principalmente em larvas e alevinos com alta intensidade
de parasitismopodendo chegar a 299.100 parasitos por hospedeiro, na qual os peixes
apresentam lceras de pele, edema subepitelialcom deslocamento do epitlio das
lamelas branquiais secundrias, discreta hiperplasia e infiltrado inflamatrio
mononuclear. Por outro lado, infestaes crnicas induzem respostas proliferativas nas
brnquias dos animais infestados, havendo hiperplasia epitelial com fuso parcial ou
total das lamelas secundrias, descamao epitelial, proliferao das clulas de muco,
presena marcante de infiltrado inflamatrio, degenerao e necrose branquial (Figura
23). As microleses ocasionadas pela ao abrasiva por estes parasitos so colonizadas
por bactrias, que por sua vez, causam infeco oportunista e aceleram a evoluo da
doena causando ento os surtos de mortalidade.

22

Figura 23. Alteraes patolgicas em brnquias de tilpia infestadas por

Paratrichodina africana. Descamao epitelial (a asterisco), proliferao epitelial,
com proliferao de clulas de muco, presena de infiltrado inflamatrio mononuclear
com fuso total das lamelas secundrias (b), presena de infiltrado inflamatrio
composto por eosinfilos (c - setas), com degenerao hidrpica do epitlio, necrose e
descamao celular (c asterisco). Observao de tricodindeosentre os filamentos
branquiais (d cabea das setas). Colorao HE.
Sinais clnicos e alteraes macroscpicas
Os sinais clnicos da doena no so especficos, podendo haver escurecimento
da pele, reas esbranquiadas sobre as brnquias com sinais de dificuldade respiratria,
alm de animais raspando-se na borda dos viveiros. Letargia com nado a esmo,
principalmente na borda dos viveiros foram sinais clnicos descritos em larvas de peixes
doentes. Muitas vezes, quando ocorre infeco mista oportunista por outros patgenos
possvel verificar extensas reas de leso branquial, bem como perda de
escama,ulcerao de pele e corroso de nadadeiras (Figura 24).

23

Figura 24. Alteraes macroscpicas de peixes com tricodinase associada infeco

oportunista por agentes bacterianos. Brnquia de tilpia do Nilo parasitada por
Paratrichodina africana mostrando o rgo com aspecto leitoso (a) e reas
esbranquiadas multifocais e coalescentes sugestivo de necrose (b). Tilpia do Nilo com
tricodinase tegumentar exibindo perda de escama com ulcerao (c cabea das setas)
e corroso de nadadeiras (c - seta). Barra= 3 cm (a).

Flagellata e Dinoflagellata
Doenas causadas por flagelados e dinoflagelados so comuns na rotina de
diagnstico a campo. Estes filos so compostos por organismos que possuem um ou
mais flagelos, os quais renem importantes parasitos que acometem os peixes de criao
e so responsveis por surtos de mortalidade em diferentes regies. Neste tpico, sero
abordadosos seguintes parasitos: Amyloodiniumocellatum, Piscinoodiniumpillulare,
Cryptobia, Ichthyobodo e Trypanosoma.

Piscinoodinase
Etiologia
Esta

uma
doena
parasitria
ocasionada
pelo
dinoflageladoPiscinoodiniumpillulare, tambm conhecida como doena do veludo, e
possui caractersticas morfolgicas e de desenvolvimento similar ao A. ocellatum, alm
de tambm causar uma doena parecida, porm acomete peixes de gua doce na regio
tropical. Apresenta ampla distribuio mundial e no possui especificidade de
hospedeiro, sendo responsvel por grandes problemas sanitrios em todo o Brasil,
acomentendo principalmente espcies nativas como os peixes redondos tambaqui
(Colossomamacropomum),
pacu
(Piaractusmesopotamicus),
pirapitinga
(Piaractusbrachypomus), alm dos respectivos hbridos interespecficos e
intergenricos, bem como o piauu (Leporinusmacrocephalus), curimbat
(Prochiloduslineatus) e fase de larvicultura no pintado amznico (Silva, W.C.
informao pessoal), alm de peixes exticos como o bagre americano
24

(Ictaluruspunctatus) e menos frequentemente a tilpia (Oreochromisniloticus).

Apresenta forma arredondada a oval ou piriforme e cor mbar, embora em altas
infestaes possam ser visualizados parasitos em diferentes fases de desenvolvimento,
incluindo alguns trofontes grandes e escuros, que podem ser confundidos com
Ichthyophthiriusmultifiliis para os menos experientes.
Biologia do parasito
Este dinoflagelado possui o estilo de vida muito similar ao Amyloodinium, bem
como os mesmos estgios de desenvolvimento que compreendem o trofonte, tomonte e
dinsporo. Em todas as fases, o parasito possui cloroplastos e potencial para exercer
atividade fotossinttica, porm na fase de trofonte este dinoflagelado atua como um
parasito severo aos peixes de cultivo, penetrando as clulas epiteliais por meio dos
rizocistos e praticando o parasitismo. A fase de tomonte reprodutiva e atua como
reservatrio do patgeno na gua durante todo o ciclo produtivo.
Ciclo de vida
O ciclo de vida deste parasito muito similar ao A. ocellatum (ciclo trifsico),
compreendendo as mesmas trs fases de desenvolvimento sobre o hospedeiro e no
ambiente aqutico: Dinsporo, trofonte e tomonte. Os trofontes so imveis, aderem-se
aos hospedeiros por meio de rizocistos, possuem cloroplasto e um nico ncleo circular
ou oval. Os tomontes, no substrato, sofrem sucessivas divises simples e formam os
dinsporos, que possuem flagelos e nadam livremente na coluna dgua.
Transmisso
A principal forma de transmisso da piscinoodinase por meio do contgio
pelos dinsporos, uma vez que esta a forma infectante natante, sendo veiculado pela
gua, bem como por meio de fmites que foram utilizados em animais infectados ou em
gua contaminada sem a adequada higienizao e desinfeco aps o uso. Durante o
transporte de peixes vivos entre diferentes pisciculturas, a gua de transporte o
principal veculo de transmisso de doenas infecto-parasitrias, uma vez que pode
carrear formas infectantes ou estgios de resistncia de diferentes parasitos, bactrias e
vrus de importncia sanitria aos animais de criao.
Diagnstico
Para realizar o diagnstico da infestao por P. pillulare, a tradicional avaliao
a fresco de raspados branquiais, pele e nadadeiras analisados em microscpio ptico se
constitui no mtodo mais utilizado e rpido (Figura 28a-b). Neste exame, a visualizao
dos trofontes fornece o diagnstico definitivo para a infestao, podendo ser adotado
ainda a fixao do material em lmina (metanol durante 10 min) com posterior
colorao com Giemsa diludo (uma gota de corante para cada 1mL de gua destilada
durante 120 a 180 min) (Figura 28c), ou at mesmo colorao com lugoliodine para
visualizao dos grnulos amilides. Anlises histopatolgicas de rotina tambm so
exames laboratoriais que fornecem o diagnstico definitivo, a partir da visualizao de
trofontes fixados sobre o hospedeiro. No entanto, quando ocorrem baixas intensidades
de parasitismo, podem haver resultados falso-negativo com a utilizao destas tcnicas,
25

na qual exames com maior sensibilidade para deteco do DNA do parasito podem ser
mais eficientes.

Figura 25. Diagnstico da infestao por Piscinoodinium pillulare a partir de raspado

branquial de tambatinga severamente parasitada (a), mostrando os trofontes
apresentando pleomorfismo (ovais, piriformes e circulares) (b), com detalhe do
dinsporo (b seta), e trofontes corados com giemsa mostrando seu aparato nuclear (c).
Diagnstico diferencial
O diagnstico diferencial para Piscinoodinium pillulare deve ser realizado
cautelosamente para a presena do ciliado Ichthyophthirius multifiliis, uma vez que os
trofontes maduros de P. pillulare apresentam-se arredondados logo aps desprender-se
do hospedeiro, tornando difcil a observao do ncleo do parasito. Para diferenciao,
basta observar a presena de movimentao ou ciliatura, um vez que Piscinoodinium
desprovido de estruturas de locomoo nessa fase do ciclo (Trofonte), enquantoI.
multifiliispossui clios por toda a superfcie da membrana celular, alm de apresentar
movimentao em crculos e exibir o macroncleo em formato de ferradura.
Sinais clnicos e alteraes macroscpicas
Um dos principais sinais clnicos dos peixes com piscinodinaseque apresentam
altos nveis de intensidade de parasitismo a busca de oxignio na superfcie da gua de
abastecimento dos viveiros (Figura 29a), alm de apresentar apatia, nado a esmo e
hiperventilao.Quando ocorre alta infestao na pele, comum encontrar a gua dos
viveiros mais turvas, devido frico dos animais no talude e no fundo dos viveiros de
terra, como resposta ao irritante que o protozorio ocasiona durante o processo de
fixao. Alm disso, os animais podem apresentar manchas marrom sobre a pele, com
eriamento de escamas (Figura 29b), hemorragias do tipo petequial, alm de brnquias
com aspecto marrom (Figura 29c), sendo esta alterao patolgica determinada pela alta
infestao por P. pillulare.

26

Figura 26. Tambaqui exibindo sinais de dificuldade respiratria, buscando gua com
maiores nveis de oxignio na entrada de gua do viveiro (a). Tambatinga exibindo
eriamento de escamas e manchas de colorao marrom sobre o corpo (b), com aumento
da produo de muco branquial e filamentos branquiais de colorao marrom (c). As
imagens 28b e 28c foram gentilmente cedidas por Fernando F. Macedo e Wellington C.
Silva.
Patogenia
As alteraes patolgicas ocasionadas pela infestao por P. pillulare tambm
esto relacionadas com a ao mecnica do dinoflagelado ao fixar-se sobre o
hospedeiro. Neste estgio da infeco, o trofonte emite seus rizocistos a partir do disco
de fixao, que por sua vez invade o citoplasma das clulas epiteliais do hospedeiro
causando sua destruio. Os trofontes de P. pillulare fixam basicamente na lamela
primria do filamento branquial, preenchendo o espao entre as lamelas secundrias
(Fig. 30c), na qual so utilizados os rizocistos para fixao nas clulas epiteliais dos
hospedeiros (Fig. 30d).
Em infestaes com baixos nveis de intensidade de parasitismo os animais
podem no apresentar importantes alteraes patolgicas ou comportamentais, havendo
aumento da produo de muco e congesto branquial. No entanto, em casos de
infestaes severas, onde a doena encontra-se cronificada, so observadas alteraes
proliferativas que incluem a proliferao epitelial com fusionamento de lamelas
secundrias, proliferao de clulas de muco e presena de infiltrado inflamatrio,
muitas vezes associados com degenerao e necrose das clulas epiteliais, alm de
edema subepitelial, formao de lceras e hemorragia. A associao dos
distrbiosproliferativos branquial somado com a presena de muitos parasitos fixados
no espao interlamelar, ocasiona a obstruo respiratria dos animais.

27

Figura 27. Anlises microscpicas da brnquia de tambatinga com piscinodinase.

Presena de centenas de parasitos fixados nos filamentos branquiais observados em
estereoscpio (a), bem como em corte histolgico (b,c), exibindo o detalhe dos
rizoscistos penetrados nas clulas epiteliais do hospedeiro (d - seta). Barra de escala 200
m (b), 100 m (c) e 25 m (d).

Criptobiose
Etiologia
Esta uma doena parasitria causada por biflagelados pertencentes ao gnero
Cryptobia.Essesparasitospossuem forma do corpo triangular a alongada, um flagelo
anterior (mais curto) e outro aderente (responsvel pelo movimento), alm de um
cinetoplasto longo e delgado, um ncleo e outras organelas. Ocorrem tanto na brnquia
quanto em pele de peixes marinhos e dulccolas e a maior parte deles comensal, no
entanto, algumas espcies so patognicas principalmente para os peixes jovens.
Cryptobiabranchialis tem sido a principal espcie descrita em diferentes
continentes. No Brasil foram registradas vrias ocorrncias de Cryptobiasp., no entanto,
as espcies que acometem os peixes de criao e de vida livre ainda permanecem
desconhecidas. Altas infestaes por este biflagelado so frequentemente diagnosticado
em fazendas de criao de pacu, tambaqui, pirapitinga e respectivos hbridos, bem como
em tilpia do Nilo, surubim hbrido (Pseudoplatystoma spp.) e pintado amaznico
(Pseudoplatystoma sp. x Leiariusmarmoratus).
Ciclo de vida
O ciclo de vida deste flagelado monoxnico, ocorrendo a fisso longitudinal do
parasito sobre o hospedeiro. Logo aps este processo de diviso, o parasito recm
formado solta-se do tecido branquial e torna-se livre na coluna dgua.
Transmisso

28

A transmisso deste biflagelado ocorre por meio horizontal, pelo contato direto
entre animais infestados e animais sadios, na qual a gua tambm atua como veculo de
transmisso das formas livres nadantes. Fmites utilizados na rotina das fazendas de
criao, bem como a gua de transporte de peixes tambm atuam no ciclo de disperso
desta parasitose.
Diagnstico
A principal forma de diagnstico da cryptobiose realizada por meio de exames
tradicionais do raspado de pele e brnquia, com anlise em microscpio ptico ou por
microscopia de contraste de fase (Figura 33a). A observao dos dois flagelos,
disposio e movimentao de contrao com batimento flagelar observadas durante o
exame a fresco, so informaes essenciais para o correto diagnstico. A fixao de
lminas contendo o parasito para submeter aos procedimentos de coloraes adicionais
podem ser empregadas para anlises a posteriori. A combinao de fixao com
metanol (10 min) com posterior colocao com Giemsa diludo pode fornecer detalhes
da morfologia do corpo do parasito, porm os flagelos so pobremente evidenciados por
meio desta tcnica (Figura 33 b-d).

Figura 28. Diagnstico da infestao branquial por Cryptobia em tambacu por meio de
visualizao de raspado em microscopia de contraste de fase (a). Espcimes fixados
com metanol e submetidos colorao com Giemsa (b d). F: flagelo; N: ncleo; C:
cinetoplasto.
O diagnstico da infestao branquial por Cryptobiatambm pode ser realizado a
partir do exame histopatolgico de rotina, no entanto, requer experincia do patologista
em identificar adequadamente as estruturas morfolgicas deste pequeno protozorio.
Ferramentas de diagnstico molecular ainda so pobremente padronizadas para
identificar a infestao branquial por Cryptobia em peixes tropicais.
Diagnstico diferencial

29

A infestao branquial por Cryptobiasp. deve ser cuidadosamente diferenciada

pela infestao por Ichthyobodo sp., devido a semelhana morfolgica entre estes
parasitos e pelo fato de que os dois so biflagelados que infestam brnquias, no entanto,
Ichthyobodo sp. infesta tambm a pele dos peixes. A observao a fresco com ateno
sobre a disposio de flagelos e tipo de movimentao so anlises teis para a
diferenciao. O gnero Cryptobia sp. possui flagelos que emergem em plos distintos
da clula, com orientao oposta, e possui movimento vigoroso em serpentina; enquanto
Ichthyobodo sp. os dois flagelos emergem no mesmo local do corpo do protozorio e
possuem mesma orientao, fornecendo movimentao em rodopio ou em zigue-zague
quando observado no exame a fresco, Sendo impossvel realizar a avaliao a fresco dos
raspados branquiais, as tcnicas de fixao e colorao do parasito devem ser
empregadas para diferenciao adequada entre estes gneros de flagelados.
Sinais clnicos e alteraes macroscpicas
Esta doena no apresenta sinais clnicos caractersticos, sendo observados
ocasionalmente algumas alteraes comportamentais no especficas de larvas
infectadas, principalmente sinais de dificuldade respiratria e alterao de colorao do
tegumento, podendo ser observadas larvas com escurecimento do tegumento.
Patogenia
A patogenicidade da infestao branquial por Cryptobia ainda controversa.
Estudos com microscopia eletrnica de transmisso revelaram que este parasito no
penetra as clulas do hospedeiro durante o processo de fixao, tampouco causa
alteraes patolgicas diretas nas clulas epiteliais alvo. Contudo, em condies de altas
infestaes por este parasito em tilpias jovens que apresentavam mortalidade, foram
relacionadas com o aumento da produo de muco branquial, edema dos filamentos
branquiais e reduo das lamelas respiratrias. Respostas proliferativas no tem sido
encontradas em peixes com altos nveis de parasitismo, sendo de fato, uma parasitose
que acomete principalmente os peixes jovens de criao.
Ictiobodose
Etiologia
Esta uma doena parasitria ocasionada por biflagelados cinetoplastdeos
pertencentes ao gnero Ichthyobodo (anteriormente Costia). So pequenos protozorios
parasitos obrigatrios que acometem a pele, nadadeiras e brnquias tanto de peixes
marinhos quanto de dulccolas, selvagens e cultivados, de guas temperadas e tropicais.
Este parasito possui ampla distribuio mundial, sendo descrita a ocorrncia de
Ichthyobodo necator em diferentes espcies de peixes criadas no Brasil. Sua morfologia
se assemelha Cryptobia, porm seu par de flagelos emerge em uma mesma regio do
corpo do parasito (Figura 34), que possui formato piriforme quando fixado sobre o
hospedeiro, ou oval em fase de vida livre, na qual apresenta movimentao em rodopio
ou em zigue-zague.

30

Figura 29. Ichthyobodo sp. observado em raspado de pele de tilpia. Colorao Giemsa,
aumento de 1000 x.
Biologia do parasito
Ichthyobodo um parasito obrigatrio que apresenta duas principais formas:
Piriforme, que ocorre quando o flagelado est fixado sobre o hospedeiro; e Ovide, que
a forma de natao livre. Durante a fase fixa sobre o hospedeiro, alimenta-se a partir
do contedo das clulas epiteliais. Acredita-se que a fase ovide seja apenas um perodo
transitrio, possivelmente uma forma infectante necessria para disperso do parasito no
ambiente aqutico em busca de novos hospedeiros.
A infestao por Ichthyobodo spp. descrita como uma das principais
protozooses que aflige a criao de peixes de guas temperadas e algumas espcies de
peixes tropicais em diferentes regies do mundo. No entanto, no Brasil este parasito no
est entre as principais causas de mortalidade em fazendas de criao. Muitas vezes este
flagelado apresenta baixa taxa de infestao, exibindo mnimas ou insignificantes
alteraes patolgicas nos animais acometidos, embora possua predileo por larvas e
peixes jovens.
Ciclo de vida
Ichthyobodo apresenta ciclo de vida monoxeo, com reproduo assexuada na qual
ocorre a fisso longitudinal da clula do parasito. Clulas contendo dois pares de
flagelos podem ser observadas momentos antes da fisso binria do parasito.
Transmisso
A transmisso desta parasitose ocorre de forma horizontal, pelo contato direto de
animais infestados com animais sadios. Formas livres natantes do parasito so
responsveis pela infestao de novos hospedeiros. Fmites utilizados na rotina da
piscicultura bem como a gua contaminada utilizada durante o transporte de animais
vivos so importantes vias de disperso desta parasitose.
Diagnstico
A observao a fresco de raspados de pele e brnquia com o uso de microscpio
ptico constitui-se na tcnica mais empregada para o diagnstico definitivo de rotina
para este cinetoplastdeo. A observao dos flagelos, formato do corpo e tipo de
movimentao so informaes essenciais para a correta identificao do gnero, bem
como para realizar o diagnstico diferencial da infestao por Cryptobia, coforme
descrito anteriormente. Esfregaos de pele, brnquias e/ou nadadeiras previamente
fixados com metanol e corados com Hematoxilina, Feulgen ou Giemsa podem ser
utilizados para deteco e estudo do parasito em microscpio ptico.
31

Anlises histopatolgicas tambm so ferramentas de diagnstico eficientes para

o diagnstico definitivo da infestao por Ichthyobodo. No entanto, todas essas tcnicas
diagnsticas apresentam baixa sensibilidade para detectar infestaes em situaes de
baixa intensidade de parasitismo. Com isso, mtodos moleculares sensveis na deteco
do DNA do parasito so mais eficientes, no entanto, ainda pouco exploradas na rotina.
Sinais clnicos e alteraes macroscpicas
Sinais clnicos no especficos que indicam dificuldade respiratria e alteraes
de comportamento e de colorao da pele e brnquias podem ser ocasionalmente
observados em animais doentes, muitas vezes havendo infestao mista por outras
parasitoses.
Patogenia
Entre as alteraes patolgicas ocasionadas por peixes infestados por
Ichthyobodo spp., est a destruio das clulas epiteliais utilizadas para fixao do
parasito, bem como alteraes degenerativas e proliferativas do epitlio, com depleo
das clulas de muco.

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Doenas causadas por helmintos

As helmintases compreendem doenas parasitrias causadas por diferentes tipos

de vermes que infectam hospedeiros invertebrados e vertebrados em todo o mundo. Na
piscicultura brasileira, as doenas causadas por vermes esto entre as principais causas
de mortalidade, principalmente relacionadas s verminoses de pele e brnquia
ocasionada pelo grupo Monogenea. No entanto, vermes endoparasitos como os
nematdeos, cestdeos e acantocfalos so comumente diagnosticados em peixes de
criao, principalmente no cultivo de espcies nativas. Estes endoparasitos geralmente
causam um impacto silencioso sobre os aspectos produtivos e desempenho do plantel,
uma vez que os piscicultores dificilmente detectam sua presena pela carncia de um
programa de monitoramento de sade para o dagnstico precoce da doena. Dessa
forma, o diagnstico geralmente realizado de forma tardia, quando o problema
encontra-se completamente disseminado e com contaminao de todo o sistema de
criao.
O impacto das verminoses na sade do plantel de peixes pode depender de
inmeros fatores, bem como dos aspectos biologicos do verme em questo e
susceptibilidade dos hospedeiros e nvel da intensidade da infestao. Neste captulos
abordaremos os seguintes grupos de vermes que causam impacto na piscicultura
brasileira: monogenticos, digenticos, cestdeos proteocefaldeos, nematdeos e
cantocfalos.
Monogenase
Etiologia
Esta uma doena parasitria causada por vermes pertencentes classe
Monogenoidea, que reunem platelmintos (vermes achatados) que infestam
principalmente a pele e brnquias dos peixes de criao, havendo poucas espcies que
possam atuar como endoparasitos. Muitas espcies de Monogenea apresentam
especificidade parasitria, observado especialmente entre os membros da famlia
Dactylogyridae, embora outros apresentem menor restrio de hospedeiros, como os
membros pertecentes famlia Gyrodactylidae. Dactilogirdeos e girodactildeos so os
principais grupos de vermes monogenticos que infestam peixes de gua doce no Brasil.
Todas as espcies de peixes so susceptveis por este parasitos e, em relao aos peixes
hbridos, tornam-se susceptveis aos monogenticos de ambos parentais.
Vermes monogenticos esto entre as parasitoses mais comuns que acometem os
peixes em criao e de vida livre, de gua doce e salgada. Este grupo de parasito
altamente diversificado e durante sua evoluo desenvolveram diferentes estratgias de
fixao sobre seus hospedeiros, bem como diferentes estratgias reprodutivas. Essas
caractersticas os tornaram parasitos de importncia para a aquicultura, sendo
responsveis por causarem surtos de mortalidade especialmente em peixes jovens.
Muitas vezes, altas infestaes em peixes em fase de crescimento podem causar o
comprometimento das condies de sade desses animais, com reflexo negativo sobre o
desempenho zootcnico.
Biologia do parasito
Os aspectos biolgicos de cada espcie de Monogenea apresentam variaes. De
forma geral, atuam como ectoparasitos dos peixes de criao, onde os dactilogirdeos
so parasitos que apresentam preferncia por stio branquiais para sua fixao, enquanto
33

os dactylogirdeos so mais comuns em pele e nadadeiras. No entanto, infestao

concomitante pelo mesmo grupo em todos estes stios podem ser detectados com
frequncia. Os dactilogirdeos so vermes ovparos hermafroditas, que apresentam um
complexo conjunto de ganchos e barras em sua extremidade utilizados para fixao
sobre o hospedeiro. Por outro lado, os girodactildeos causadores de doenas em peixes
de criao so em sua maioria vivparos hermafroditas, que possuem estruturas
especializadas para fixao compostas por ganchos, ncoras e barras (Figura 1).
No Brasil recentemente foi registrada a ocorrncia de Enterogyrus cichlidarum
na regio sul, infectando o estmago de tilpias criadas em viveiros escavados. No
entanto, este monognea ainda no foi registrado em tilpias criadas tanques-rede pelo
Brasil, havendo apenas uma nova suspeita em tilpias criadas no nordeste, mas tambm
diagnosticado em animais provenientes de viveiros escavados (Bernardino, M.G.S.
comunicao pessoal).
Os vermes monogenticos parasitos de peixes obtem seu alimento a partir de
debris celulares obtido no tegumento de seus hospedeiros. As espcies de gua doce,
no so hematfagas, enquanto algumas espcies de gua salgada praticam a
hematofagia. O alimento capturada a partir de sua movimentao vigorosa na
superfcie epitelial. Fatores de qualidade ambiental geralmente esto fortemente
relacionados com a incidncia destes parasitos, uma vez que em ambientes com altos
nveis de matria orgnica em suspenso, com acmulo de compostos nitrogenados, so
condies propcias para a proliferao destes parasitos.
Ciclo de vida
O ciclo de vida dos monogenticos monoxnico, no sendo necessrio
hospedeiros intermedirios. Devido a esta caracterstica, estes agentes conseguem se
proliferar rapidamente nas pisciculturas. Os dactilogirdeos, botam ovos que so soltos
na gua ou aderentes, conforme a espcie, e aps a ecloso da larva ciliada, esta nada
livremente na coluna dgua em busca do hospedeiro susceptvel. Por outro lado, os
girodactildeos so vivparos, portanto, geram seus descedentes sobre o prprio
hospedeiro que constantemente repovoado por novas geraes do parasito.

34

Figura 30. Caracteres morfolgicos da famlia Dactylogyridae (oviparos) e

Gyrodactylidae (vivparos) que infestam peixes de criao no Brasil.

35

Doenas bacterianas
1. Doenas causadas por bactrias Gram negativas
Bactrias Gram negativas habitam comumente a microflora da gua, da
superfcie dos peixes, bem como do trato grastrintestinal destes animais. Esses
microrganismos podem tambem ser incorporados por outras vias, tais
comocontaminao da gua com dejetos de outros animais, esgoto de cidades ou at
mesmo agroindustrias que despejam seus efluentes nos corpos dgua. Entre as bactrias
Gram negativas que ocasionam problemas sanitrios na tilapicultura, destacam-se as
Aeromonas mveis, que incluem Aeromonas hydrophila, Aeromonas caviae, entre
outras espcies de aeromonas, bem como Pseudomonas, Edwardsiella e Citrobacter.
Essas bactrias so responsveis principalmente pela septicemia hemorrgica bacteria,
ou pela gastrinterite hemorrgica bacteriana, alm da eritrodermatite bacteriana. Neste
tpico discutiremos sobre essas bactrioses, bem como novos agentes emergentes que
tem aflingido a tilapicultura.
1.1.

Septicemia hemorrgica bacteriana

Esta uma sndrome clnica que pode ser causada por vrios grupos de
bactrias, na qual as vibronceas esto estre as principais causas, como Aeromonas
mveis. Tilpias com septicamia hemorrgica exibem disteno abdominal, corroso
em torno do anus e papila utogenital, hemorragias do tipo petequial ou sufuses
hemorrgicas pelo corpo e nadadeiras. Animais doentes exibem na necropsia sinais de
peritonite, com hemorragia difusa em todos os rgos da cavidade celomtica,
acometendo principalmente o estmago e os intestinos (Figura 12). Pode-se encontrar
ainda acmulo de lquido na cavidade com aspecto sanguinolento e com odor ftido.

Figura 31. Animal com septicemia hemorrgica bacteriana exibindo sufuso

hemorrgica na serosa (camada externa) do estmago (a) e hemorragia intestinal (b).
Em algumas ocasies, pode ocorrer somente infeco externa, com depreciao
da pele e nadadeiras dos animais (Figura 13). Essa condio clnica denominada
eritrodermatite bacteriana, sendo comum em tilpias na fase final de engorda. Falhas de
manejo, especialmente durante e aps a classificao dos animais favorece muito a
ocorrncia desta doena, que por sua vez pode ser multifatorial.

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Figura 32. Tilpia com eitrodermatite exibido perdas de escama e corroso de

nadadeiras, com pele hemorrgica.
1.2.

Columnariose
A columnariose uma doena causada pela bactria Gram negativa
Flavobacterium columnare. Esse agente causa uma doena ulcerativa no hemorrgica
nos alevinos, com corroso das nadadeiras, pele e necrose branquial (Figura 14). Surtos
por essa bactria so comuns quando as condies de qualidade ambiental esto
imprprias ou aps o manejo de classificao dos alevinos, com a perda do muco
protetor, associada ao estresse de manejo. Entre os mecanismos de virulncia dessa
bactria, est a produo da enzima condroitina AC liase que proporciona a invaso dos
tecidos do hospedeiro, sendo que a simples utilizao de sal durante e aps os manejos
de classificao j proporciona grande melhoria na produo de muco protetor, que por
sua vez diminui a incidncia desta bactria no plantel.

1.3.

Franciselose
A franciselose, tambm chamada de granulomatose viceral bacteriana, uma
bacteriose de evoluo crnica, cuja etiologia a bactria gram negativa Francisella
noatunensis. Esta bactria um organismo intracelular facultativo, que induz a
formao de granulomas situados principalmente no bao e rim, acometendo
ocasionalmente brnquias, fgado, corao e crebro. Esta uma doena sazonal, na
qual sua incidncia aumenta nos meses de outono e inverno, quando a temperatura da
gua alcana valores menores a 24C.
Os animais com franciselose em estgio avanado da doena exibem natao
errtica, escurecimento do corpo e, ocasionalmente, exoftalmia com natao em
rodopio. Na necropsia so observados aumento pronunciado do bao e rim, com a
presena de inmeros ndulos esbranquiados, muitas vezes sobresalientes no rgo
infectado (Figura 15). Recentes estudos revelaram que esta bactria pode viver dentro
de protozorios ciliados (Schrallhammer et al., 2011), o que refora a hiptese que esta
bacteriose possa ser transmitida na piscicultura por meio de parasitos ciliados
comumente encontrados nos peixes, tais como Trichodina, Chilodonella, Epistylis entre
outros. Portanto, o controle de parasitoses nos peixes em criao essencial para
alcanar o controle das doenas bacterianas.

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Figura 33. Tilpia com columnariose exibindo ulcerao no hemorrgica na pele e

nadadeiras (a b) e necrose branquial (c).

Figura
38

34.

Alteraes

patolgicas

de

tilpias

com

franciselose

(a

c).

2. Doenas causadas por bactrias Gram positivas

Vrios cocos gram positivos so responsveis por doenas sistmicas na
tilapicultura, onde as estreptococoses e lactococoses tem sido registrados como os
principais agentes causadoras de meningoencefalite infecciosa bacteriana. No Brasil,
trs espcies de Streptococcus e uma espcie de Lactococcus tem sido diagnosticadas
em tilpias de criao. Essas doenas sero discutidas neste tpico.
2.1.
Estreptococoses e Lactococoses
Streptococcus agalactiae, Streptococcus iniae, Streptococcus dysgalactiae so
as trs espcies envolvidas em infeces sistmicas e meningoencefalite infecciosa
bacteriana em tilpias criadas no Brasil, embora a espcie mais prevalnte e com maior
distribuio geogrfica seja Streptococcus agalactiae. No entanto, Lactococcus
garvieae tambm causa uma enfermidade muito similar, no sendo possvel diferenciar
essas doenas somente pelos sinais clnicos observados nos animais. A identificao
precisa do agente causador da infeco deve ser realizada somente por meio de tcnicas
de isolamento e identificao bacteriana em laboratrios especializados.
A incidncia dessas doenas maior em perodos de maior temperatura da gua,
acima de 26C. Os peixes que apresentam infeco por cocos gram positivos exibem
pronunciada inflamao das meninges (membranas que revestem o crebro) e encfalo,
o que recebe o nome de meningoencefalite infecciosa. Esta alterao facilmente
visualizada a olho nu, no momento da necropsia de animais doentes, na qual o crebro
apresenta aspcto hemorrgico e com ps (supurao). A infeco do encfalo
desencadeia uma srie de sinais clnicos neurolgicos, na qual a natao em rodopio e
contraes crnico-tnicas de toda a musculatora do peixe infectado so os principais
sinais. A infeco sistmica por cocos gram positivos induzem uma quadro de
pericardite supurativa. Em situaes como essa, observa-se aumento do corao e do
pericrdio, com acmulo de ps. Aumento do bao e rim tambm ocorrem nestes
animais, podendo haver ainda acmulo de lquido incolor ou esbranquiado na cavidade
celomtica. Outro sinal clnico bastante comum a exoftalmia, opacidade ocular e, nos
casos crnicos, emagrecimento progressivo dos animais (Figura 16).

Figura 35. Tilpias infectadas com cocos gram positivos exibindo exoftalmia (a b),
opacidade ocular (c), acmulo de lquido na cavidade celomtica (b), emagrecimento (a,
c).

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