Aula 2

ESPECTROFOTOMETRIA DE ABSORO
MOLECULAR NA REGIO DO UVVIS
META
Apresentar a natureza da energia radiante e as regies espectrais;
apresentar as medidas de transmitncia e absorbncia;
apresentar as fontes de radiao e monocromadores;
apresentar a lei de Beer Lambert;
apresentar a instrumentao: espectrofotmetros e fotmetros;
apresentar as aplicaes da espectrofotometria de absoro molecular no UV-VIS.

OBJETIVOS
Ao final desta aula, o aluno dever:
reconhecer as regies espectrais e seus respectivos comprimentos de onda;
diferenciar entre energia transmitida e absorvida;
interpretar a Lei de Beer Lambert;
identificar a instrumentao analtica relacionada a Espectrofotometria;
aplicar a Espectrofotometria de Absoro Molecular no UVVIS em anlises qualitativas e
quantitativas.

PR-REQUISITOS
Conhecimentos em estrutura atmica e molecular.

Elisangela de Andrade Passos

Mtodos Instrumentais de Anlise

INTRODUO
Na aula anterior foi introduzido o conceito sobre metodologias analticas e instrumentaes. Foi contextualizada a seleo de uma metodologia
analtica, a instrumentao envolvida e o processo de calibrao instrumental
para aplicao da metodologia em um processo analtico quantitativo.
Nesta aula trataremos da Espectrofotometria de absoro molecular
no UltravioletaVisvel (UVVIS), a qual utiliza as propriedades de interao da matria com a radiao eletromagntica (luz) para se determinar
caractersticas qualitativas e quantitativas de um analito. A toda tcnica que
empregue luz para determinar estas caractersticas de espcies qumicas
pode ser chamada de espectrofotometria. Das muitas interaes (fsicas e
em alguns casos qumicas) entre a matria e a luz estudaremos a absoro
e emisso.

NATUREZA DA RADIAO
A base da espectrofotometria foi a colorimetria. Inicialmente a cor de
uma soluo podia ser utilizada na identificao de uma espcie (anlise
qualitativa), enquanto que a intensidade da cor era utilizada na determinao
da concentrao desta espcie (anlise quantitativa). Esta tcnica foi empregada pela primeira vez para compreender a espectroscopia de absoro
em anlises qumicas. A tcnica est baseada na passagem de luz branca
atravs de uma soluo a qual, por exemplo, apresenta uma colorao vermelha. A luz branca que composta por uma gama enorme de radiaes,
de diferentes comprimentos de onda, e consequentemente diferentes cores,
tem as cores complementares ao vermelho, o amarelo e azul, absorvidas pela
espcie em soluo. Sendo assim, quanto maior a concentrao da espcie
em soluo, mais amarelo e azul ser absorvida e maior ser a intensidade
da colorao vermelha da soluo.
A radiao eletromagntica pode ser descrita como uma onda (Fig. 1),
com propriedades como comprimento de onda, frequncia, velocidade e
amplitude, a qual no requer suporte para propagar-se, sendo transmitida
pelo espao a velocidade superior a 1 milho de vezes mais rpida que o som.

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Espectrofotometria de Absoro Molecular na regio do UVVIS

Aula

Representao da radiao eletromagntica em relao ao campo eltrico.

A frequncia (), que representa o nmero de oscilaes da onda por

segundo, cuja unidade o Hertz (Hz), pode ser relacionada com o comprimento de onda () e a velocidade da luz no vcuo (c) (2,99792 x 108 m s-1)
da seguinte forma:
(01)
A absoro de radiao eletromagntica pela matria altera sua energia.
Esta interao entre a matria e a radiao eletromagntica melhor compreendida se considerarmos que a radiao eletromagntica composta
por partculas energticas, denominadas Ftons. Quando um fton atinge
a matria, ele destrudo, e sua energia (E) absorvida pela mesma. A energia de um fton, e consequentemente da radiao, proporcional a sua
frequncia, atravs da relao com a constante de Planck (h) (6,626 x 10-34
J s) como mostra a equao 02, com o comprimento de onda conforme
equao 03, e com o nmero de onda () conforme equao 04:
(02)

(03)

(04)

O nmero de onda outra forma de se descrever a radiao eletromagntica, e definido como o nmero de ondas por centmetro (unidade cm-1), o que
equivale ao inverso do comprimento de onda, sendo comumente empregado
para descrever a radiao na regio do infravermelho.

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Mtodos Instrumentais de Anlise

ATIVIDADES
Exemplo envolvendo Energia dos Ftons: Uma soluo contendo um
analito incidida com radiao eletromagntica com comprimento de onda
de 254 nm. Qual ser o ganho energtico por mol de analito?

COMENTARIO SOBRE AS ATIVIDADES

Sabemos que a energia de um fton dada por: E = h ; ento:

REGIES ESPECTRAIS
Os olhos humanos podem enxergar apenas a luz visvel (VIS), na qual
a radiao apresenta um comprimento de onda de 780 a 380 nm. A outra
faixa de radiao estudada, a Ultravioleta (UV), inicia em 380 nm e finaliza
em 180 nm. Ambas as radiaes possuem energia suficiente para excitar
eltrons de valncia de tomos e molculas, e consequentemente esto
envolvidas com excitaes eletrnicas.
A esta faixa de radiaes com diferentes energias (frequncias), e,
portanto, de comprimentos de ondas atribui-se o nome de espectro eletromagntico. O espectro eletromagntico (Fig. 2) engloba radiaes de
Ressonncia Nuclear Magntica (RMN), com energia na ordem de 10-3 J
mol-1, passando por Ressonncia de Spin Eletrnica (RSE), Microonda,
Infravermelho, Visvel e Ultravioleta, Raios X, chegando aos Raios , com
energia na ordem de 109 J mol-1.

Regies do espectro eletromagntico.

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Espectrofotometria de Absoro Molecular na regio do UVVIS

Aula

FONTES DE RADIAO E LEI DE

BEER LAMBERT
As fontes mais comuns de radiao eletromagntica so as lmpadas de
H2 e D2 (160 380 nm), tungstnio (320 2400 nm) e xennio (200 1000
nm). Fontes trmicas e qumicas tambm so aplicadas em casos especficos.
Quando um analito est sem a ao de nenhum estmulo, ele encontrase no seu estado fundamental. Quando ele submetido a uma radiao
eletromagntica e absorve um fton, algumas das espcies do analito sofrem uma transio para um estado de maior energia ou estado excitado.
Atravs deste processo obtemos informaes sobre o analito medindo-se
a radiao eletromagntica emitida quando ele retorna ao estado fundamental ou a quantidade de radiao eletromagntica absorvida decorrente
da excitao, sendo que a parte da molcula responsvel pela absoro
de luz chamada de cromforo. Aos dois processos descritos chamamos
de espectroscopia de fotoluminescncia ou emisso e espectroscopia de
absoro, respectivamente.
Na espectroscopia de absoro, a Absorbncia (A) de uma soluo est
relacionada com a transmitncia de forma logartmica (05).
(05)
A transmitncia definida como a frao da luz original que passa pela
amostra. Considere um feixe de radiao com potncia inicial P0 (Fig. 3),
este ao atravessar uma soluo contendo uma espcie, absorve ftons e a
potncia radiante decresce ao nvel P. A transmitncia ser expressa como
a equao 06, e a transmitncia percentual (%T) conforme equao 07.
(06)

(07)

Portanto a Absorbncia pode ser reescrita da seguinte forma:

(08)

Atenuao de um feixe de radiao por uma soluo absorvente.

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Mtodos Instrumentais de Anlise

Ento, quando nenhuma luz absorvida (P = P0), A ser igual a zero.

Se 90 % da luz absorvida, 10 % ser transmitida e P = P0/10. Para esta
razo, A = 1. Assim, se apenas 1
A este processo est atribuda a Lei de Absoro, tambm conhecida
como Lei de Beer Lambert. Esta lei nos diz quantitativamente como a
grandeza da atenuao depende da concentrao das molculas absorventes
(C) e da extenso do caminho (b) sobre o qual ocorre a absoro. A Lei de
Beer, como tambm chamada, est representada a seguir:
(09)
A grandeza (epslon) representa a absortividade molar, e expressa
em L mol-1 cm-1, o que torna a Absorbncia adimensional. A absortividade
molar indica qual a quantidade de luz que absorvida num determinado
comprimento de onda. O caminho ptico (b) expresso em cm, e a concentrao (C) expressa em mol L-1.

MONOCROMADOR
Como h a possibilidade de mais de um analito presente na amostra,
contribuir para absoro de radiao dentro de uma larga faixa de comprimento de onda, por esta razo usualmente tentamos selecionar um
comprimento de onda especfico, onde o analito apresente o maior valor
de absortividade molar e/ou que possa ser distinguido dentre os demais
interferentes da soluo. Para realizar esta seleo so mais comumente
empregados os monocromadores. A vantagem dos monocromadores est
na possibilidade de selecionar diferentes comprimentos de onda sem a
necessidade de modificaes fsicas no instrumento, diferente dos filtros
de absoro, alm da melhor resoluo e das limitaes de comprimentos
de ondas que os filtros podem apresentar. No monocromador (Fig. 4), a
luz policromtica direcionada por espelho para uma grade de difrao, a
qual separa a luz nos seus diferentes comprimentos de onda, enviando a
outro espelho que direcionar a fenda de sada. A seleo do comprimento
de onda feito atravs da rotao da grade de difrao.

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Espectrofotometria de Absoro Molecular na regio do UVVIS

Aula

Esquema tpico de monocromador com disperso de radiao por grade de difrao.

O primeiro detector em espectroscopia ptica foi o olho humano, que

naturalmente possui preciso e sensibilidade limitada quanto radiao
eletromagntica. Modernos detectores usam sensveis transdutores para
converter sinais baseados em ftons em sinais eltricos, sendo os mais
comuns os fototubos e os fotomultiplicadores.

ATIVIDADES
Exemplo envolvendo Absorbncia, Transmitncia e Lei de Beer:
Determine o percentual de luz que emerge (%T) de uma soluo 0,00240
mol L-1 de uma substncia com coeficiente de absortividade molar de 313
L mol-1 cm-1 numa clula com 20 mm de caminho ptico.

COMENTARIO SOBRE AS ATIVIDADES

Atravs da Lei de Beer ser possvel determinar a Absorbncia da
soluo. Para isto precisamos da concentrao molar da soluo, da
absortividade molar e do caminho ptico. Todos em unidades que
levem a um valor adimensional, como mostrado a seguir:
A = b C = (313 L mol-1 cm-1) (2 cm) (0,00240 mol L-1) = 1,50
Sendo:

A = - log T; T = 10-A = 10- 1,50 = 0,0316

Ento:

%T = T x 100 = 3,16 %

Apenas 3,16 % da luz incidente emergem da soluo.

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Mtodos Instrumentais de Anlise

OS LIMITES DA LEI DE BEER

Existem poucas excees para o comportamento linear entre a absorbncia e o caminho ptico a uma concentrao fixa. Contudo observamos
os desvios da proporcionalidade direta entre a absorbncia e a concentrao,
quando o caminho ptico b mantido constante.
Limitaes reais: A Lei de Beer descreve o comportamento da absoro
somente para solues diludas. Para concentraes que excedem 0,01 mol
L-1, a distncia mdia entre os ons ou molculas da espcie absorvente
diminui a ponto de que cada partcula afeta a distribuio de carga, e assim
a extenso da absoro das suas vizinhas, afetando diretamente na relao
linear absorbncia x concentrao. Efeito similar pode ocorrer em solues
diludas que apresentam altas concentraes de outras espcies, como por
exemplo, eletrlitos.
Limitaes aparentes:
Desvios qumicos - aqueles que ocorrem devido associao ou dissociao da espcie absorvente ou ento o constituinte no completamente
convertido em uma nica espcie absorvente;
Desvios Instrumentais - i) so desvios que ocorrem devido ao instrumento
utilizado na medio da absorbncia. ii) Largura finita da faixa espectral
escolhida; iii) Radiao estranha refletida dentro do equipamento que
alcanou o detector; iv) Variao da resposta do detector; v) Flutuao da
intensidade da fonte.

ESPECTROFOTMETROS E FOTMETROS
Os componentes bsicos dos instrumentos analticos para a espectroscopia de absoro, bem como para espectroscopia de emisso e fluorescncia, so notavelmente semelhantes em sua funo e nos seus requisitos
de desempenho, quer sejam desenhados para a radiao ultravioleta (UV),
visvel (VIS) ou infravermelha (IV), por isso, ambos so reconhecidos como
instrumentos pticos.
Em geral os instrumentos pticos que operam com UV-VIS e IV, apresentam 5 componentes bsicos: 1) uma fonte estvel de energia radiante;
2) um seletor de comprimento de onda que isola uma regio limitada do
espectro para a medida; 3) um ou mais recipientes para a amostra; 4) um detector de radiao; e 5) uma unidade de processamento e de leitura do sinal.
A Figura 5 apresenta um esquema para um espectrofotmetro de
varredura com feixe duplo.

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Espectrofotometria de Absoro Molecular na regio do UVVIS

Aula

Diagrama esquemtico de um espectrofotmetro de varredura com feixe duplo.

As fontes contnuas de radiao j foram discutidas anteriormente,

assim como o princpio de funcionamento do monocromador, que neste
caso se diferencia por realizar a seleo unitria de comprimento de onda
durante toda a extenso da regio do UV-VIS, num determinado intervalo
de tempo, fazendo com que a amostra seja submetida a anlise em toda a
extenso do espectro, o que conhecido como modo Scan.
O recipiente que ir conter a amostra, a Cubeta, assim como as demais
partes do instrumento que tero contato com a radiao, como lentes, espelhos, janelas e clulas, deve ser capaz de conduzi-la sem causar interferncias
ou que sejam interferncias sistemticas e controladas. As cubetas, por
exemplo, para aplicaes na regio do visvel, podem ser confeccionadas
em vidro silicato comum, devido seu baixo custo. J para aplicaes na
regio do UV devem ser substitudas por quartzo, j que o vidro comea a
absorver radiao com comprimento de onda inferior a 380 nm.
A funo do detector converter as informaes espectroscpicas,
como potncia radiante transmitida, fluorescente ou emitida em uma
quantidade mensurvel. Os sistemas mais empregados so os detectores de
ftons, como os fototubos, tubos fotomultiplicadores, fotodiodos de silcio
e o arranjo de fotodiodos. Nos dois primeiros, uma camada de material
fotoemissor que est sobre a superfcie cncava de um fotoctodo, emite
eltrons quando irradiado com luz de energia apropriada. Estes fotoeltrons na presena de um eletrodo carregado positivamente produzem uma
fotocorrente a qual pode ser amplificada e medida. Neste contexto, o tubo
fotomultiplicador mais sensvel que o fototubo, por apresentar diversos
eletrodos (dinodos) para captura dos fotoeltrons, como mostra a Figura 6.

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Mtodos Instrumentais de Anlise

Esquema de um tubo fotomultiplicador.

O Detector de Arranjo de Diodos, em funo da sua estrutura compacta

e miniaturizada, cerca de 1000 fotodiodos de silcio podem ser fabricados
lado a lado em uma nica lmina (chip) de silcio, proporcionam quando
um ou dois arranjos so colocados na extenso do plano focal do monocromador, analisar de forma simultnea todos os comprimentos de onda
incidentes na amostra. Alm dos sistemas mais usuais descritos acima,
outros sistemas de deteco podem ser encontrados em espectrmetros.
Assim, um espectrmetro um instrumento espectroscpico que
utiliza um monocromador (ou policromador) juntamente com um transdutor (detector) para converter as intensidades radiantes em sinais eltricos.
Os espectrofotmetros so os espectrmetros que permitem a medida
da razo entre as potncias de dois feixes, uma exigncia para se medir a
absorbncia. J os fotmetros empregam um filtro para a seleo do comprimento de onda ao invs do monocromador. Sua vantagem em relao
ao espectrofotmetro a simplicidade, robustez e baixo custo. A principal
desvantagem que o monocromador na espectrofotometria possibilita a
alterao contnua do comprimento de onda sendo possvel obter informaes a cerca do espectro de absoro da amostra (Scan), diferente da
limitao do filtro de absoro.

APLICAES DA ESPECTROFOTOMETRIA
Um fato importante antes de iniciarmos nossos estudos da aplicao
desta tcnica, lembrarmos que a absorbncia de uma soluo em qualquer
comprimento de onda, a soma das absorbncias de todas as espcies presentes em soluo, logo, devemos tomar cuidado quando estamos tratando
de uma soluo contendo mistura de espcies moleculares que absorvem
a radiao ultravioleta e visvel.
A absoro da radiao ultravioleta e visvel por molculas geralmente
ocorre em uma ou mais bandas de absoro eletrnicas, identificadas no
espectro como as regies de maior intensidade da absorbncia. Cada uma
das bandas constituda de muitas linhas discretas, mas prxima umas das

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Espectrofotometria de Absoro Molecular na regio do UVVIS

Aula

outras, originadas pela transio de um eltron de um estado fundamental

para um dos muitos estados vibracionais e rotacionais associados com cada
estado excitado de energia eletrnica.

ABSORO POR COMPOSTOS ORGNICOS

A absoro de radiao por molculas orgnicas na regio de comprimento de onda entre 180 e 780 nm resulta das interaes entre ftons e
eltrons que esto participando diretamente da formao de uma ligao
qumica (e so, assim, associados a mais de um tomo) ou esto localizadas
sobre tomos como os de oxignio, enxofre, nitrognio e halognios.
O comprimento de onda no qual uma molcula orgnica absorve depende
de quo fortemente seus eltrons esto ligados. Assim, a energia necessria
para deslocar o eltron de seu estado fundamental para um excitado, est
inversamente relacionada ao comprimento de onda, como j estudado.
Os eltrons compartilhados em ligaes simples carbono-carbono e
carbono-hidrognio, esto to fortemente ligados, que necessria uma
energia relacionada a radiao eletromagntica com comprimentos de ondas
inferiores a 180 nm, por isso, no tem sido amplamente explorados para
finalidades analticas. J os eltrons envolvidos em ligaes duplas e triplas
das molculas orgnicas so mais facilmente excitados exibindo picos de
absoro teis. Os grupos orgnicos insaturados que absorvem nas regies
do ultravioleta e visvel so conhecidos como cromforos, sendo os mais
comuns os alcenos, dienos, carbonila, aromticos, azo, entre outros. As
caractersticas de uma banda de absoro no so consequncia das caractersticas de um cromforo isolado, pois estes podem sofrer influncia
do solvente, bem como por outros detalhes estruturais da molcula, como
por exemplo, a conjugao entre dois ou mais cromforos, causando um
deslocamento do mximo do pico.

ABSORO POR COMPOSTOS INORGNICOS

Em geral, os ons e os complexos dos elementos das primeiras duas
sries de transio absorvem as bandas largas da radiao visvel em pelo
menos um de seus estados de oxidao e so como resultado, coloridos.
Estas absores esto relacionadas s transies eletrnicas entre os orbitais
d preenchidos e no-preenchidos, com energias que dependem dos ligantes
dos tomos metlicos.

APLICAES QUALITATIVAS
As medidas espectrofotomtricas com a radiao ultravioleta e visvel
so teis para identificar a presena dos grupamentos cromforos j cita27

Mtodos Instrumentais de Anlise

dos anteriormente, uma vez que a maior parte da estrutura das molculas
orgnicas no absorve nestas regies. Picos na regio de 200 a 400 nm
indicam a presena de grupos insaturados ou tomos como o de enxofre
ou dos halognios. Atravs do espectro (Scan) do analito possvel ter uma
idia da estrutura qumica, em funo dos grupos cromforos identificados
pelas relaes entre as absorbncias e os comprimentos de ondas, contudo,
os espectros no apresentam informaes suficientes para a identificao
inequvoca da molcula, sendo necessrio estar relacionada a outras tcnicas complementares como, ressonncia magntica nuclear, infravermelho,
espectrometria de massas, entre outras.

APLICAES QUANTITATIVAS
A espectroscopia de absoro apresenta algumas caractersticas que a
coloca como uma das tcnicas mais teis disponveis ao qumico para uma
anlise quantitativa. Dentre estas caractersticas podem ser citadas: Ampla
aplicabilidade um nmero enorme de compostos (orgnicos e inorgnicos) absorve na regio do UV-VIS, e parte das no-absorventes podem ser
convertidas em um derivado que absorve; Alta sensibilidade a tcnica
capaz de detectar concentraes da ordem de 10-5 mol L-1, podem chegar
a alguns casos at 10-7 mol L-1; Seletividade com frequncia pode se trabalhar em um comprimento de onda especfico ao seu analito, tornando
assim, desnecessrio qualquer mtodo prvio de separao, ou ainda, caso
ocorra sobreposio de bandas, medidas adicionais podem eliminar estas
interferncias; Boa exatido os erros relativos relacionados a esta tcnica
esto na faixa de 1 % a 5 %, podendo ser frequentemente reduzidos a
dcimos por cento; Acessibilidade as medidas espectrofotomtricas so
realizadas de forma fcil e rpida.
Uma primeira etapa em qualquer anlise espectrofotomtrica o
desenvolvimento de condies que produzam uma relao reprodutvel
(preferencialmente linear) entre a absorbncia e a concentrao do analito.
Para isto, deve-se trabalhar na seleo do comprimento de onda caracterstico ao analito e onde ocorra o mximo de absorbncia, que pode
ser obtido atravs de uma anlise prvia de varredura, o que dar maior
sensibilidade ao mtodo. A determinao da relao entre a absorbncia
e a concentrao, que estabelecer a curva de calibrao, deve abranger
uma faixa razovel de concentrao e englobar a composio da amostra.
Deve-se ficar atento as variveis que podem influenciar a absorbncia, tais
como, o pH, a temperatura, altas concentraes de eletrlitos e a presena
de interferentes. A adio de padro pode minimizar o efeito desta ltima.
A Figura 7 apresenta um resumo desta aplicao.

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Espectrofotometria de Absoro Molecular na regio do UVVIS

Aula

. a) cubetas contendo solues padro de diferentes concentraes; b) regio do espectro escolhida

para a anlise quantitativa por apresentar as caractersticas necessrias; c) curva de calibrao que
relaciona a Absorbncia x Concentrao do analito nas solues padro.

Atravs da curva de calibrao possvel obter uma equao da reta

do tipo y = ax + b, onde y = absorbncia; x = concentrao do analito na
soluo; a = coeficiente angular da reta; e b = coeficiente linear da reta.
De posse dos dados da equao da reta possvel submeter a amostra a
anlise nas mesmas condies, obtendo-se a absorbncia da soluo. Atravs
do valor da absorbncia pode-se aplicar na equao da reta e encontrar a
concentrao molar do analito na amostra analisada.

LEIA MAIS
Leiam o artigo intitulado Espectroscopia molecular que est disponvel na plataforma. Em seguida, faa um resumo sucinto das principais
idias do texto.

PARA SABER MAIS

Se voc se interessou pelo tema e deseja saber mais, consulte os captulos
24 e 26 do livro Fundamentos de Qumica Analtica, 8a Edio, Editora
Thomson, escrito pelos autores Skoog, West, Holler e Crouch.

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Mtodos Instrumentais de Anlise

CONCLUSO
Nesta aula foram apresentados os conceitos relacionados base da
espectrofotometria, suas caractersticas, instrumentao e aplicao.

RESUMO
A espectrofotometria est baseada na utilizao da radiao eletromagntica (luz) para obter informaes estruturais de compostos orgnicos
e inorgnicos, anlise qualitativa, e pode ser aplicada na determinao da
concentrao de um analito num determinado sistema, anlise quantitativa.
No modo qualitativo, a espectrofotometria de varredura (Scan), apresenta
um espectro referente a absobncia do analito em toda a extenso da regio
do UV-VIS, sendo empregado na identificao de grupos cromforos na
estrutura da molcula, e funcionando como uma prvia da anlise quantitativa para a seleo onde se encontra o mximo de absorbncia num
comprimento de onda especfico para o analito. Na anlise quantitativa, o
foco est na seleo da melhor regio do espectro que apresente uma relao
absorbncia x concentrao, que tenha preferencialmente uma relao linear
englobando uma ampla faixa de concentrao que atenda a concentrao
do analito na soluo problema. Para todas estas aplicaes importante
conhecer a natureza da energia radiante, suas regies e as energias envolvidas
em cada comprimento de onda, uma vez que a tcnica relaciona a energia
absorvida ou emitida para a excitao de eltrons.

ATIVIDADES
1. Qual a energia por fton da linha D do tomo de sdio ( = 589 nm)?
2. Uma amostra apresenta uma transmitncia de 50 %. Qual ser sua absorbncia?
3. Uma soluo 5,00 x 10-4 mol L-1 de um analito foi colocada em um cubeta
com caminho ptico igual a 1 cm. Quando submetido ao comprimento de
onda de 490 nm, a soluo do analito apresentou uma absorbncia igual a
0,338. Qual a absortividade molar do analito neste comprimento de onda?
4. Sabendo que a curva de calibrao, apresentada na Figura 7, representa
a determinao de Ferro em gua pelo mtodo da -Fenantrolina, e que a
curva apresenta uma equao da reta do tipo A = 200 M + 0; determine a
concentrao molar de Ferro em uma amostra que foi analisada nas mesmas
condies e apresentou absorbncia igual a 0,665.
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Espectrofotometria de Absoro Molecular na regio do UVVIS

Aula

COMENTARIO SOBRE AS ATIVIDADES

1. Sabemos que a energia de um fton dada por: E = h ; ento
substituindo a frequncia () pela relao entre a velocidade da luz /
comprimento de onda, temos:

Como sabemos este o valor da energia referente a um fton, caso

queiramos extrapolar para um mol de molculas devemos multiplicar
pelo nmero de Avogadro, 6,02 x 1023.
2. Vamos relembrar o como obtemos %T; O %T = T 100, logo a
transmitncia ser:
50 = T 100; T = 50 / 100; T = 0,500
Sabendo que a relao entre transmitncia e absorbncia dada por
A = - log T, a absorbncia ser:
A = - log 0,500; A = 0,301
3. Atravs da Lei de Beer possvel relacionar a Absorbncia da soluo,
a concentrao da soluo, o caminho ptico e a absortividade molar
como mostrado a seguir:
A=bC
Substituindo os valores que o enunciado fornece, temos:
A=bC
0,338 = (1 cm) (5,00 x 10-4 mol L-1)
= 676 L mol-1 cm-1
4. Como a equao da reta referente a curva de calibrao j apresenta
a relao Absorbncia x Concentrao, temos:
A = 200 M
M = A / 200 = 0,665 / 200 = 0,00332 mol L-1 de Ferro na amostra

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Mtodos Instrumentais de Anlise

AUTO-AVALIAO
- Consigo reconhecer as regies espectrais e seus respectivos comprimentos
de onda?
- Diferencio entre energia transmitida e absorvida?
- Sou capaz de interpretar a Lei de Beer Lambert?
- Consigo identificar a instrumentao analtica relacionada a Espectrofotometria?
- Sinto-me capaz de aplicar a espectrofotometria de absoro molecular no
UVVIS em anlises qualitativas e quantitativas?

PRXIMA AULA
Na prxima aula iremos trabalhar a espectroscopia de absoro atmica
na regio do UV-VIS.

REFERNCIAS
HARRIS, D. C. Anlise Qumica Quantitativa. 7 ed. Traduo de Bordinho, J. [et al.]. Rio de Janeiro: LTC, 2008.
SKOOG, D. A.; WEST, D. M.; HOLLER, F. J.; CROUCH, S. R. Fundamentos de Qumica Analtica. Traduo da 8 ed. Americana. Ed.
Thomson; So Paulo, 2007.
HARVEY, D. Modern Analytical Chemistry, 1st edition, McGraw Hill:
Boston, 2000.
ROBINSON, J.W.; FRAME, E.M.S; FRAME II, G.M. Undergraduate Instrumental Analysis, 6th edition, Marcel Dekker, New York, 2005.
OLIVEIRA, L.F.C. Espectroscopia molecular. Cadernos Temticos de
Qumica Nova na Escola, n. 4, 2001.

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