MDULOS DE ANLISE

INSTRUMENTAL

Prof. Doutor Rui Carlos da Maia

Mdulos de Anlise Instrumental

ndice
1. Introduo .............................................................................................................................. 3
2. Classificao dos mtodos instrumentais............................................................................... 4
2.1. Mtodos Electroqumicos................................................................................................ 4
2.2. Mtodos pticos ............................................................................................................. 7
2.3. Mtodos Cromatogrficos ............................................................................................. 12
2.4 Outros mtodos .............................................................................................................. 13
3. Mtodos utilizados em anlise instrumental para obteno de resultados analticos .......... 16
3.1 O mtodo de curva de calibrao (Standard Curve Method) ......................................... 16
3.2 Mtodos de adio padro (Standard addition method) ................................................. 18
3.3 Mtodos de Clculo matemtico .................................................................................... 20
3.4 Mtodos da Determinao do Ponto de Equivalncia nas titulaes instrumentais ...... 21
4. Bibliografia recomendada .................................................................................................... 22

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Esta brochura foi feita com o objectivo de dar aos alunos das diferentes especialidades uma
base de reflexo e estudo sobre uma rea tao complexa e multidisciplinar com a Analise
Qumica Instrumental.
Na sua elaborao foram tomadas em conta experiencias de lecionao da disciplina de Analise
Qumica aos mais variados cursos na Universidade Eduardo Mondlane (UEM), nos ltimos 15
anos. Alguns termos tcnicos so includos na verso em lngua inglesa para facilitar ao
estudante o seu estudo na literatura original inglesa.
Os mtodos aqui descritos encontram-se bem pormenorizados nas outras brochuras desta serie
assim na bibliografia no fim deste mdulo.
Recomenda-se aos estudantes interessados em aprofundar seus conhecimentos que consultem
a bibliografia recomendada, normalmente disponvel nas vrias bibliotecas da Faculdade de
Cincias da UEM.

O autor
Doutor Rui Carlos da Maia
Agosto de 2000.

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1. Introduo
A anlise instrumental surge da aplicao dos mtodos fsicos na anlise qumica da que o
conjunto dos mtodos que a constituem tambm se designe por mtodos fsico-qumicos de
anlise. A Qumica Analtica moderna sofre influncia com o progresso da Fsica e da qumica
Fsica. Os novos mtodos instrumentais de anlise qumica utilizam-se amplamente na cincia,
na tcnica, na medicina e na indstria j que podem aplicar-se na determinao de substncias
em condies onde falham os mtodos clssicos e com grande economia de tempo de anlise.
Mediante a anlise instrumental, a substancia que se analisa submetida a uma reaco qumica
a qual acompanhada por mudanas nas propriedades fsicas do sistema a analisar, por
exemplo mudana de cor ou da intensidade da mesma, ocorrncia de fluorescncia, variao
nas grandezas eltricas etc., podendo-se ento estabelecer uma relao entre a composio e as
propriedades do sistema de estudo. Os mtodos instrumentais caracterizam-se por:
a) Alta sensibilidade e rapidez;
b) Alta Selectividade, sendo mais selectivos que os mtodos clssicos;
c) Permitem a automatizao da tcnica analtica e so insubstituveis na determinao de
concentraes pequenas e ultrapequenas (traos-vestgios) de substncias orgnicas e
inorgnicas;
d) So extremamente teis no controlo analtico da produo e especialmente no controlo
dos processos industriais de substncias a altas temperaturas e presses, venenosas,
explosivas, radioactivas, etc.;
e) So de grande importncia na investigao analtica em geral das mais variadas
substncias qumicas e todo o tipo de materiais.
Devemos esclarecer contudo que muitos mtodos instrumentais baseam-se nos mtodos da
qumica analtica clssica pelo que estes devem ainda ser tomados em considerao.

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2. Classificao dos mtodos instrumentais

Os mtodos instrumentais de qumica analtica podem classificar-se em quatro (4) grandes
grupos:
a) Mtodos electroqumicos;
b) Mtodos pticos;
c) Mtodos cromatogrficos;
d) Outros mtodos.
Esta classificao agrupa mtodos que tem princpios de funcionamento de certa forma
semelhante ou comparada mas no deve ser entendida de forma absoluta uma vez que hoje em
dia dado rpido desenvolvimento da electrnica surgem vrios princpios de trabalho
englobados numa nica unidade. A ttulo de exemplo, existem cromatgrafos que usam o
mtodo de medio da conductividade para indicar o sinal do composto de interesse numa
anlise qumica de uma substancia orgnica, o que significa uma utilizao de princpios da
cromatografia combinados com princpios da electroqumica.
2.1. Mtodos Electroqumicos
Estes mtodos instrumentais so derivados da electroqumica. Para a classificao dos mtodos
electroqumicos podemos considerar o funcionamento de uma pilha electroqumica. Esta pilha
composta por dois elctrodos metlicos submersos numa soluo electroltica e ligados a um
sistema que troque energia com a pilha como exemplificado na figura 1.

Figura 1. Exemplo de uma pilha electroqumica

Fonte: Skoog, Holler e Nieman, 2001
Esta pilha tem um comportamento electroqumico que pode ser caracterizado medindo-se
diversas grandezas elctricas. Por exemplo para se descrever essa pilha poderemos:
a) Medir a quantidade de electricidade que flui nesse sistema;
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b) Medir a forca eletromotriz da pilha;
c) Medir a intensidade da corrente que circula na pilha;
d) Medir a resistncia a passagem de corrente, etc..
Os mtodos correspondentes de anlise podem classificar-se paralelamente da seguinte forma.
1. Mtodos analticos baseados na medio de uma quantidade de electricidade os quais
se designam com o nome de coulumbimetira ou coulometria. Este nome deriva de
Coulomb que a medida da quantidade de electricidade. Estes mtodos baseam-se na
proporcionalidade que existe entre a quantidade de electricidade e a quantidade de
substancia transformada durante uma electrlise;
2. Quando o resultado da anlise se deriva da variao do potencial que se produz numa
pilha electroqumica estamos em presena da Potenciometria. O resultado analtico
pode se obter directamente a partir desse potencial ou mais frequentemente deduzido
a partir do ponto de equivalncia de uma titulao onde se estuda a variao deste
potencial com a adio de um certo reagente ao sistema em estudo, o que normalmente
se designa titulao potenciomtrica;
3. Amperometria inclui os mtodos baseados na medio da intensidade da corrente.
Estes mtodos aplicam-se geralmente para detectar pontos de equivalncias nas
titulaes amperomtricas;
4. Quando se interpreta as caractersticas intensidade da corrente e potencial de uma
pilha eletroqumica surgem vrios mtodos muito uteis que se agrupam no termo geral
Voltammetria (Voltametria e Amperometria). Podem-se utilizar vrios tipos de
elctrodos indicadores nesses mtodos. Quando se utiliza um eltrodo indicador de
gotas de mercrio, esse mtodo designa-se de Polarografia;
5. A medio da resistncia de uma pilha emprega-se frequentemente na anlise qumica.
O seu reciproco, a conductividade ou conductncia emprega-se de forma geral num
mtodo que se designa Conductimetria. Esta tcnica aplica-se frequentemente na
determinao do ponto de equivalncia de titulaes conductimetricas;
6. Os mtodos conductimetricos que utilizam altas frequncias podem aplicar-se na
medio das constantes dieltricas das substncias em estudo e desse modo permitirem
a determinao de concentraes. Estes mtodos de alta frequncia mais aplicados
para solues no aquosas, caracterizam-se por utilizar uma fonte de corrente alterna
da ordem de megaciclos (MHz) e so muito uteis no controlo de qualidade da madeira
(na determinao do teor de humidade) e na determinao do teor de gua nos solventes
orgnicos;
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7. Na electrogravimetria utiliza-se a corrente eltrica para provocar a deposio selectiva
dos ies na soluo a investigar. Neste caso podemos considerar a corrente eltrica
como agente precipitante do componente que esta sendo analisado como acontece no
mtodo gravimtrico tradicional. Conhecendo-se o potencial de reduo do metal de
interesse pode-se selecionar este, dentre muitos outros metais presentes na soluo a
analisar.
Em geral as equaes mais aplicadas nos mtodos electroqumicos So:
I.

Equao de Nernst

A equao de Nernst relaciona o potencial de um sistema (medida da forca ou capacidade

oxidativa/redutiva de um sistema electroqumico) com concentraes das espcies envolvidas
nesse sistema, nomeadamente aquelas que se encontram no estado oxidado e aquelas no estado
reduzido. Para um sistema electroqumico do tipo:
Ox + ne = red

(1)

A sua forma geral corresponde a

E = Eo +

[Ox]
0.059
log
[Red]
n

(2)

Onde E indica o potencial do sistema, normalmente medido com um eltrodo indicador; Eo

um valor tabelado e obtido em condies ideias; n o numero de electres envolvidos na
reaco de oxidao-reduo, e finalmente [Ox] e [Red] indicam as concentraes das espcies
oxidadas e reduzidas, em moles por litro, respectivamente. Esta equao muito usada na
Potenciometria.
II.

Lei de Ohm e Leis de Faraday

Algumas tcnicas eletroqumicas como a electrogravimetria e outras So governadas pela lei

de ohm e pelas leis de Faraday. A lei de Ohm exprime a relao entre as trs grandezas
fundamentais; A corrente, o potencial e a intensidade e tem a forma:
I=

E
R

(3)

O que significa que a corrente I que flui num sistema directamente proporcional fora
electromotriz (potencial, E) e inversamente proporcional resistncia, R.
As leis de Faraday para a eletrolise (4) e (5) indicam que o grau da mudana qumica causada
por uma electrlise sempre directamente proporcional quantidade de electricidade que passa
atravs da clula de electrlise. Tal tem a forma:
=

QxM
nF

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(4)

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Onde:
W= massa da substancia oxidada ou reduzida durante a electrlise;
M=massa molar da substancia;
Q= o nmero de Coulombs que atravessa a clula (unidades=Ampere x seg =Coulombs);
n = numero de electres envolvidos;
F- constante de Faraday (96 485 Coulombs)
O Faraday a quantidade de carga que corresponde a permuta de um mole de 6.022. 1023
electres. Cada Faraday corresponde a 69485 Coulombs.
A determinao do numero de Coulombs (quantidade de electricidade) feita tomando-se em
conta a corrente I (Amperes) que circula na clula e o tempo t (segundos) que dura a electrlise
de tal maneira que:
Q=It

(5)

3. Equao de Ilkovic
Esta equao emprica valida para mtodos polarogrficos que estudaremos mais adiante. Ela
indica que a corrente que flui numa clula electroltica (id) directamente proporcional a
concentrao das espcies em anlise (C), e tambm depende de outros parmetros listados
abaixo, tendo a forma de:
id = K C

(6)

Onde a constante K o=integra termos muito complexos a serem esclarecidos ao se abordar o

capitulo da polarografia. Ainda assim indica-se abaixo (7) os termos que fazem parte da
1
2
2
3 xm 3 xt 6 xC

constante K: id = 708xnxD

(7)

Onde id a corrente medida pelo aparelho; n o nmero de electres permutados; D o

coeficiente de difuso das espcies electroactivas respectivas; T o tempo de gota do elctrodo
indicador; C a concentrao da espcie em estudo.
Nos mtodos electroqumicos em geral, a determinao das concentraes das substncias em
estudo pode ser feita tanto com base na determinao do volume de equivalncia obtido numa
titulao, como com base no mtodo da curva de calibrao, segundo se explica em detalhe no
ponto 3.
2.2. Mtodos pticos
Os mtodos pticos baseados na absoro e emisso das radiaes electromagnticas so das
mais uteis e variados em anlise qumica. Eles medem o resultado da interaco entre a energia
radiante (luz, foto) e a matria. A energia radiante usada pode variar de tipo desde os raios x,
a luz visvel, ate as ondas de radio. O parmetro mais utilizado para caracterizar a energia
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radiante o comprimento de onda que se representa a distncia entra cristas adjacentes da onda.
O comprimento de onda normalmente medido em Angstroms (1 = 108 cm) ou
nanmetros (1 nm = 109 m = 10 ).
A relao entre a energia de um foto e o comprimento de onda da radiao dada pela
expresso (8):
E=

hC

(8)

Onde h a constante de Planck (6.62.1034 J. s); C a velocidade da luz (3.1010 cm/s) e o

comprimento de onda da radiao. A figura 2 indica o intervalo de comprimento de onda nas
diferentes regies do espectro optico e serve para nos esclarecer sobre os diferentes tipos de
radiao existentes.

Fig. 2. Regies do espectro eletromagntico e respectivos intervalos de comprimento de onda

Fonte: Skoog, Holler e Nieman, 2001
Tomando-se em conta o intervalo de comprimentos de onda para diferentes tipos de energia
indicado na figura e interpretando a equao (8) podemos dizer que os raios x possuem e=um
comprimento de onda muito baixo e como tal uma energia muito alta podendo causar graves
mudanas na estrutura da matria. Por outro lado e usando mesmo raciocnio podemos declarar
que as ondas de radio e as micro-ondas so radiaes de alto comprimento de onda e baixa
energia e causam pequenas ou mesmo indetectveis danos a matria.
Os mtodos pticos podem ser executados para medir a habilidade de uma soluo absorver a
energia radiante ou de emitir a energia radiante quando excitados por uma fonte externa, ou
ainda de dispersar a radiao numa determinada direco. assim que dependendo da
habilidade a medir surge um grande nmero de tcnicas analticas descritas a seguir.
Nos mtodos de absoro, quando uma luz branca atravessa uma soluo, a componente que
vai passar (luz transmitida) vai ter uma intensidade mais baixa do que a do raio incidente. Se a
tal soluo no tiver partculas suspensas que provoquem a disperso da luz, ento a reduo
da intensidade ser basicamente causada por absoro. O grau de absoro proporcional a
quantidade de elemento de interesse presente na amostra a determinar. A absoro da radiao
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pode ser causada por molculas ou por tomos simples. A figura 3 indica o esquema tpico para
demonstrao da absoro de radiao.

Figura 1. Atenuao de um feixe de radiao por uma soluo absorvente.

Fonte: Skoog e West, 2005
A espectroscopia de absoro baseia-se na medio de absoro da radiao eletromagntica
pela matria. Esta absoro varia com da radiao incidente e as medies podem ser feitas
tanto a fixos como numa ampla gama de . A absoro de radiao pode ser realizada por
molculas e ai teremos os mtodos de absoro molecular ou por tomos neutros e ai falaremos
dos mtodos de absoro atmica.
Os mtodos mais conhecidos da espectroscopia de absoro molecular so espectrofotometria
no Ultravioleta e visvel (UV-Vis) a espectroscopia no infravermelho enquanto para a absoro
por tomos temos a espectroscopia de absoro atmica (AAS).
Estes mtodos so muito usados para analises qumicas inorgnicas na agricultura, indstria,
nas guas e meio ambiente, nos matrias geolgicos e nas anlises clinicas.
Nos mtodos de absoro so comuns os termos absorvncia e transmitncia. Designa-se
transmitncia a relao entre a intensidade da radiao Po e a intensidade da radiao
transmitida, P. designa-se Absorvncia (A) ao logaritmo negativo da transmitncia (T).
T=

P
Po

A = log

(9)
P
Po
= log = bCM
Po
P

(10)

A tabela 1 indica os termos tcnicos mais usadas nos mtodos de absoro.

Tabela 1. Importantes termos e smbolos usados nas medies por absoro.

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Termo e smbolo

Definio

Nome ou smbolo
alternativos

Energia radiante ,

Energia da radiao (em

Intensidade da radiao I, Io

ergs) incidida em uma rea

1-cm2 de um detetor por
segundo
Absorvncia (A)

log

Po
P

Densidade ptica (D);

extino (E)

Transmitncia

P
Po

Transmisso (T)

Caminho optico (b)

---

l,d

Absortividade

A
bC
A
bC

Coeficiente de extino k

Absortividade molar ()

Coeficiente molar de
extino

Em geral as anlises qumicas pelo mtodo de absoro baseiam-se na lei geral de Beer que
indica que a Absorvncia (A) directamente proporcional concentrao (C), isto , = bCM
sendo b, a largura do recipiente que tem a soluo a medir (em cm) a C a concentrao molar
(mol/L) da substancia a medir na soluo a analisar e Absortividade molar (L/mol.cm).
Os mtodos de emisso, baseiam-se no facto de ao se usar uma fonte de excitao em
condies controladas e intensidade das radiaes emitidas pela soluo em anlise
proporcional quantidade de substancia a determinar, presente na amostra. Utiliza-se o
espectro caracterstico produzido pela excitao de elementos qumicos numa amostra para
determinaes qualitativas e quantitativas. Podem-se usar vrios mtodos de excitao como
um arco de corrente alterna, a fasca, a chama e o plasma e dai resultam vrios nomes para cada
tcnica analtica. Por exemplo, quando se usa o calor de uma chama para excitar a amostra
temos o mtodo de Espectroscopia de emisso de chama antigamente chamado de
fotometria de chama.
Para alm da fotometria de chama, muito til a espectroscopia de emisso ptica nas suas
mais variadas verses (arco elctrico, fasca, plasma, etc.). Nestas verses a diferena principal
a energia de excitao dos tomos que vai desde uma simples fasca ate mesmo a formao
de um plasma de tomos, dependendo da fonte de calor usada.

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Nos mtodos de disperso estuda-se a capacidade de uma soluo dispersar a radiao numa
determinar a direco. O grau de disperso quando medido sobre certas condies
proporcional concentrao das substncias a ser analisadas.
Espectroscopia do Infravermelho
Quase todas as substncias orgnicas exibem uma absoro selectiva na regio de
comprimentos de onda do infravermelho eu desde 103 a 106 m, segundo o indicado na figura
2 onde se mostram os intervalo de comprimentos de onda para os diferentes tipos de emisses
de radiao. Os espectros de infravermelho resultam das vibraes de grupos funcionais,
ligaes-hidrognio, ligaes duplas, etc.. uma vez que tas espectros so muito complexos,
muito difcil que duas substncias diferentes possam ter as mesmas curvas espectrais. Sendo
assim, possvel usar tais espectros na identificao de substncias de estrutura complexa
como os pesticidas, drogas e outros compostos nas mais diferentes amostras. Entretanto em
termos analticos esta teoria s pode ser utilizada para concentraes relativamente altas
(104 103 ). No cas da presena de misturas de compostos na amostra a analisar por esta
tcnica, surgem muitas interferncias pelo que o seu valor na anlise quantitativa inferior ao
da espectrofotometria no UV-Vis.
Espectroscopia de Raman
Quando se submete uma soluo contendo o meio a analisar a uma fonte de luz, as espcies
presentes dispersam uma certa fraco do raio em todas as direces. Acontece que o
comprimento de onda das radiaes dispersas difere ligeiramente do comprimento de onda da
fonte de luz incidente de acordo com a estrutura das molculas responsveis pela disperso.
Espectroscopia de Raman baseia-se na medio da radiao dispersa por molculas num
determinado angulo, enquanto a Espectroscopia do infravermelho se baseia na medio da
radiao absorvida por molculas. Estas duas tcnicas so de certo modo semelhantes pois
ambas utilizam o efeito de vibrao e rotao de molculas quando submetidas a uma fonte de
excitao. Os espectros de Raman so bastante semelhantes aos do infravermelho e as duas
tcnicas so usadas como complementares e usando surgem problemas com uma delas adoptase normalmente a outra como alternativa uma vez que alguns grupos funcionais podem ser
activos na espectroscopia de Raman e no apresentam sinal na espectroscopia do
infravermelho. A vantagem da Espectroscopia de Raman sobretudo o facto de permitir o
registo de espectros de substncias orgnicas solveis em gua na medida em que no interfere
como acontece na tcnica do infravermelho.

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Fluorimetria
A absoro de luz por certas substncias (absoro molecular) muitas vezes acompanhada
por emisso posterior dessa luz num fenmeno conhecido por fluorescncia. Essas substncias,
orgnicas e inorgnicas tem a habilidade de absorver energia radiante (luz) num determinado
comprimento de onda (regio do ultravioleta) e a seguir emitir a radiao num outro
comprimento de onda, normalmente de maior valor (regio do visvel). A medio da
intensidade da fluorescncia muito utilizada na determinao de vestgios de compostos
orgnicos atravs de uma tcnica que se designa fluorimetria. A sua maior aplicao no estudo
do movimento de massas de gua (forma de circulao da poluio nos rios, e lagos,
controlando-se a concentrao de uma determinada substancia orgnica introduzida na corrente
e medida em vrios pontos).
Aplicaes na medicina
As tcnicas fluorimtricas so muito aplicadas no diagnostico medico, como acontece com as
determinaes de aminocidos tyrosine, tryptohan e phenylalanine no soro sanguneo.
Turbidimetria
Quando as determinaes analticas se fazem medindo-se a capacidade de um suspenso de
pequenas partculas variarem a intensidade de uma radiao estamos em presena da
Turbidimetria. Quanto maior for a turbidez da amostra mais baixa ser a radiao transmitida,
isto , menor ser a quantidade de radiao que vai atravessar a soluo em analise.
Nefelometria
Na Nefelometria mede-se a intensidade da luz dispersada da luz dispersada por uma suspenso
(nuvem) de pequenas partculas dai o nome de Nefelometria (do grego Nefel=nuvel).
2.3. Mtodos Cromatogrficos
Cromatografia um mtodo fsico de separao baseado na distribuio selectiva de uma ou
vrias substncias entre vrias fases; Uma das quais a fase estacionria com grande superfcie
e outa um fluido (gs ou lquido) que atravessa ou passa atravs da fase estacionria. Existem
diferentes variedades para a realizao dos processos cromatogrficos onde podemos
considerar:
a) Cromatografia de papel;
b) Cromatografia de camada fina (TLC);
c) Cromatografia lquida ou de coluna (HPLC) que a tcnica mais avanada para anlise
de medicamentos e outros compostos orgnicos poucos volteis;

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d) Cromatografia de gs que pode ser na vertente gs-slido, ou gs-lquido, amplamente
usada para anlise de petrleos, pesticidas, lcool, gases e perfumes (leos essenciais);
e) Cromatografia de Gs-Espectroscopia de Massas (GC-MS), que combina a separao
de substncias orgnicas volteis com a sua identificao com base no espectro de
massa. um dos mtodos mais amplamente avanados para o estudo da concentrao
de substncias orgnicas na rea ambiental;
f) Cromatografia de permuta inica muito utilizada na anlise de guas e solos para a
determinao de Na+, K+, Ca2+, Mg2+, 3 , 32 , 42 , 3 , 2 , , 43 .
Muitas vezes se incluem erradamente os mtodos de Electroferese dentro dos mtodos
cromatogrficos. Nestes mtodos aplica-se a influncia de campos elctricos na separao de
partculas coloidais carregadas que migram para os polos de carga oposta sua. A anlise
quantitativa ou pelo menos semi-quantitativa pode ser levada a cabo de maneira semelhante
tcnica d cromatografia de camada fina. Utiliza-se muito esta tcnica nos estudos clnicos, na
anlise de vitaminas e aminocidos assim como na determinao de compostos orgnicos de
interesse ambiental.
2.4 Outros mtodos
Existe presentemente um grande nmero de mtodos analticos o que toma praticamente
impossvel faze-se a listagem completa deles nesta brochura. Muitos so especficos para
determinadas reas como a medicina e a cincia de materiais, e, outros so de custo to alto ou
necessitam de um especialista de alta formao para a sua operao. Indica-se a seguir uma
abordagem breve desses mtodos, uma vez que eles no sero focados em profundidade ao
longo deste curso.
Espectrometria de Massas
Como foi referenciado acima nos mtodos cromatogrficos, a espectrometria de massa em
conjuno com a cromatografia gasosa GC-MS pode dar uma identificao positiva e ser usada
na quantificao de um grande nmero de compostos orgnicos individuais, presentes em
amostras de guas naturais. Um Espectrmetro de massa um instrumento que separa
molculas gasosas carregadas de acordo com a sua massa. A substncia a ser analisada
vaporizada e convertida a ies positivos por bombardeamento com electres de alta velocidade,
produzindo-se vrios fragmentos das molculas orgnicas em estudo. Os ies formados so
retirados da corrente de gs atravs de um campo elctrico. Os ies so acelerados e separados
de acordo com a razo a carga inica (massa/carga) e a sua quantidade relativa determinada.
Cada molcula tem o seu prprio perfil de fragmentao quando bombardeada sob certas

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condies. Comparando-se a razo massa-carga e a densidade dos fragmentos da substncia
desconhecida com a mesma informao obtida de uma amostra padro (amostra com
concentrao conhecida do elemento de interesse) consegue-se assim fazer a identificao
positiva da amostra desconhecida. Esta tcnica analtica bastante poderosa e hoje
praticamente imprescindvel no estudo de comportamento dos compostos orgnicos (ex:
pesticidas) no meio ambiente.
ICP-MS (Plasma Inductivamente Acoplado-Espectroscopia de Massa)
A combinao ICP-MS (Plasma Inductivamente Acoplado-Espectroscopia de Massa) hoje
um dos mtodos de excelncia na anlise de materiais geolgicos, guas e meio ambiente, ligas
metlicas e outros materiais inorgnicos nos grandes laboratrios de pesquisa. Trata-se de uma
combinao entre um mtodo de emisso onde a fonte energtica um plasma (ICP) que
garante uma excitao mais drstica do que uma simples chama ou arco elctrico, e a
espectroscopia de massa para a identificao e determinao quantitativa (MS). Trata-se de
uma tcnica moderna desenvolvida nos anos 1970s. As altas temperaturas do plasma garantem
baixa interferncia entre os elementos da amostra, uma grande selectividade nos espectros
produzidos permitindo a anlise simultnea de dezenas de elementos. Permite tambm a
determinao de concentraes pequenas e ultrapequenas dos elementos refratrios, bastante
resistentes decomposio, como so os casos de alumnio, fosforo, boro, tungstnio, uranio,
zircnio e nibio. Alm disso, pode tambm ser utilizada na anlise de no metais como cloro,
bromo, iodo e enxofre. Esta tcnica encontra ampla aplicao tambm na determinao de
elementos traos nas plantas, solos e lquidos biolgicos (urina, soro, plasma sanguneo).
Fluorescncia de Raios-X
Na ausncia de equipamentos to caros como um espectrmetro de ICP-MS pode-se ainda
recorrer tcnica de fluorescncia de Raios-X como o mnimo a dispor num laboratrio de
controlo de qualidade de produo de materiais inorgnicos. Os raios-X so radiaes
electromagnticas de alta energia e baixo comprimento de onda. Uma amostra bombardeada
com raios-X de alta energia que sero absorvidos por certos elementos e reemitidos como raiosX de energia mais baixa. A energia da radiao emitida (energia fluorescente, fluorescncia)
especfica para cada elemento qumico e isso usado como base para a anlise qumica. A
tcnica de anlise por fluorescncia de raios-X bastante til na anlise de guas (determinao
de matais pesados), e no controlo da qualidade de cimentos, alumnio, ligas metlicas e
materiais cermicos.

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Difraco de raios-X
Uma outra tcnica que tambm utiliza os raios-X, designada por Difraco de raios-X
tambm muito utilizada para o estudo da estrutura dos materiais cristalinos. Nesta tcnica os
raios-X so refletidos pela superfcie dos cristais e estudando-se o perfil dessa reflexo durante
a rotao de material ao longo da zona de movimentao dos raios-X, obtm-se muita
informao sobre a estrutura do material em estudo. Esta tcnica pode ser utilizada na anlise
quantitativa na indstria do alumnio e no controlo de qualidade de materiais cermicos.
Espectroscopia de Ressonncia Magntica Nuclear (RMN)
Esta ferramenta analtica usada para detectar e distinguir as partculas nucleares presentes
numa amostra. Mede as mudanas nos ncleos de materiais quando colocados num campo
magntico fixo e a seguir sujeitos a um campo magntico varivel. Esta tcnica pode ser usada
para fazer anlises qumicas especficas como no caso do estudo da composio de leos
vegetais (girassol, amendoim) ou para se determinar a frmula estrutural de compostos
orgnicos. Trata-se de uma tcnica que exige um alto nvel de formao e treino do tcnico
operador.
Mtodos Nucleares
Existem mtodos instrumentais de anlise que fazem uso de marcadores radioactivos (tracesrs)
e que se baseiam na mediao de diferentes tipos e radiaes e ou da frequncia das emisses
(raios-Beta, raios-Gama, raios-X). A radioactividade fisicamente introduzida na amostra a
analisar adicionando-se uma quantidade conhecida de uma substncia radioactiva designada
de marcador (tracer). Aps a boa mistura para homogeneizao, isola-se uma fraco do
componente de interesse, e analisa-se. Esta tcnica designa-se mtodos de diluio de istopos.
As radiaes podem tambm ser introduzidas por via de activao da amostra por
bombardeamento com neutres produzidos por um reactor nuclear. A radioactividade
resultante pode ser ento medida e o seu valor usado para o clculo dos elementos presentes
na amostra em estudo. Esta tcnica congrega os chamados mtodos de anlise por activao,
sendo a designada comum e Neutron activation analysis nos livros em lngua inglesa.
As radiaes podem ser tambm originrias do material em estudo (no caso de elementos
radioactivos) e tal ser usada para o clculo da concentrao dos elementos radioactivos como
o radio em amostra do ar atmosfrico ou de uranio presente em amostra de materiais cermicos.
Tais mtodos tem grande aplicao na indstria minera, particularmente no processamento de
misturas de NaCl KCl nas minas de sal, ou ainda anlise de materiais geolgicos e amostras
em estudo ambiente. Os especialistas em qumica orgnica utilizam tambm compostos

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orgnicos marcadores com tracer para elucidar-se sobre o mecanismo das reaces qumicas
complexas. Uma discusso profunda destas tcnicas est fora dos objectivos desta brochura.
Em geral a determinao da concentrao utiliza-se mtodos pticos faz-se a quase sempre
base da radiao A = k x C ou K x C, A e E representam um sinal d Absorvncia e Emisso de
radiao electromagntica, respectivamente, k em coeficiente que engloba parmetros
qumicos e instrumentais e C a concentrao que se deseja conhece. costume graficar-se
Absorvncia ou Emisso em funo de concentrao e a partir do grfico obter-se por
interpolao ou extrapolao, os valores desejados segundo indicado no ponto 3.

3. Mtodos utilizados em anlise instrumental para obteno de resultados

analticos
A determinao da concentrao das substncias de interesse nas solues baseada na
dependncia entre a sua concentrao e as diferentes propriedades fsicas. Normalmente
deseja-se obter uma dependncia linear mas, utilizam-se a relao logartmica ou outros tipos
de dependncia funcional. O mtodo escolhe-se de acordo com as condies experimentais.
Existem vrios mtodos para a determinao da concentrao de uma soluo de acordo co as
propriedades fsicas que so:
a) O mtodo de curva de calibrao;
b) O mtodo de adio padro;
c) O mtodo de clculo matemtico;
d) O mtodo da determinao do ponto de equivalncia na titulao.
3.1 O mtodo de curva de calibrao (Standard Curve Method)
A relao directa entre as propriedades fsicas e a concentrao da substncia de interesse numa
soluo pode se determinar atravs da relao;
P = a + bxC

(11)

Onde: P representa o sinal indicado pelo instrumento na medio de uma determinada

propriedade fsica; C representa a concentrao da substncia de interesse na soluo em
estudo; a e b representam valores de constantes normalmente conhecidos ou graficamente
determinveis
Se atravs de um instrumento analtico conhecemos o valor do sinal da propriedade (P) podese por via da equao (11) graficamente, determinar o valor de (C) que corresponde
concentrao de um elemento desejado numa amostra em estudo.
Para isso prepara-se uma srie de solues padro de concentraes conhecidas do elemento
de interesse; C0, C1, C2, C3, C4 tal que C4> C3> C2> C1> C0. A seguir, procede-se ento

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medio das respectivas propriedades P0, P1, P2, P3, P4 que podem ser valores de resistncia,
condutncia, tempo, potencial, corrente, absorvncia, comprimento, largura ou qualquer outa
unidade arbitrria desde que esse sinal varie no sistema proporcionalmente concentrao da
substncia em estudo, pelo menos no intervalo de concentrao desejado.
Com estes dados constri-se uma curva de calibrao graficando-se P (nas ordenadas) e C (nas
abcissas). Desta forma e ligando-se os pontos obtem-se uma linha recta que cumpre com a
equao (11). Os valores a e b podem ser obtidos directamente do grfico pois a a interseco
da recta que liga os pontos com o eixo das ordenadas, enquanto b o coeficiente angular que
pode ser calculado como a diferena das alturas a dividir pela diferena das larguras num
determinado ponto escolhido a meio do intervalo de concentraes em estudo. A fig. 4 indica
o mtodo de se determinar as constantes a e b.

Fig. 4. Determinao das constantes a e b.

Se o elemento a determinar na amostra que por sua vez foi preparada de modo completamente
anlogo s solues padro omitindo-se somente a adio do elemento a determinar, nos der
um sinal de resposta Px, ento podemos projetar este valor paralelamente ao eixo das abcissas
at ao cruzamento com a recta de unio dos vrios pontos e da projectamos verticalmente at
tocarmos no eixo das concentraes. Este mtodo de cruzamento representa a concentrao Cx
desconhecida na soluo em anlise. Este mtodo no s utilizado quando existe dependncia
linear entre a propriedade e a concentrao uma vez que possvel construir uma curva de
calibrao para qualquer tipo de dependncia funcional entre o sinal da propriedade e a
concentrao deo elemento de interesse na soluo. A fig. 5 indica um exemplar de uma curva
de calibrao e a forma de determinar a concentrao Cx a partir de um sinal Px.

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Fig. 5. Exemplo da aplicao da curva de calibrao

3.2 Mtodos de adio padro (Standard addition method)
As desvantagens da curva de calibrao surgem quando h outros elementos interferentes e no
possvel repetir a experincia com os mesmos resultados. Isso acontece muitas vezes porque
existe certa diferena entre a composio das solues padro utilizadas na preparao de curva
de calibrao e a composio das amostras a analisar.
Por outro lado, muitas vezes a propriedade que queremos medir no depende somente da
concentrao do componente que queremos analisar na soluo mas tambm de outros factores
como:
Presena de agentes interferentes e impurezas;
Ocorrncia de reaces de hidrlise, oxidao e outras;
Diferena de viscosidade entre as solues padro e as amostras.
A presena de tais factores pode provocar erros grosseiros na anlise. Nesses casos recomendase a utilizao do mtodo de adio de padro.
No mtodo de adio de padro preparam-se vrias alquotas da soluo a analisar (preparamse vrios recipientes com o mesmo volume de amostra). Na primeira introduz-se uma
concentrao C0 do componente a determinar. A seguir introduz-se C1 na segunda alquota, C2
na terceira, e sempre assim por diante sendo normalmente suficiente a preparao de trs a
quatro solues. A adio de C0 significa normalmente que no se juntou nenhuma quantidade
do elemento a determinar. C2 deve ser bem maior que C1 entre por sua vez tambm maior do
que C0 e assim por diante. A seguir leva-se essas solues ao instrumento analtico e mede-se
o sinal da propriedade resultando assim, P0, P1 e P3.
muito importante saber como preparar as solues C0 a C3 para no se obterem grandes erros
com o mtodo de adio padro. Deve-se fazer injeces da soluo padro de tal maneira que
o aumento do sinal esteja num factor de 3 a 10 vezes mais em relao ao sinal da propriedade
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obtido na leitura da soluo C0. Tal significa que se ao lermos a soluo C0, e se por exemplo
obtivermos um sinal P0 = 3 em unidades arbitrrias, temos que colocar na prxima alquota C1
uma quantidade do componente de interesse de tal modo que o sinal P1 seja aproximadamente
igual a 9 no mnimo, enquanto para C2 deveramos fazer as coisas de tal modo que o aumento
do sinal P2 situa-se por volta de 15. Isso faz-se aumentando correspondentemente os valores da
concentrao do elemento a determinar nas solues padro C1, C2, C3 etc. no recomendvel
usar muitos pontos como acontece nas curvas de calibrao. A fig. 6 referente ao mtodo de
adio padro.

Fig. 6. Exemplo de aplicao de mtodo de adio padro

Deve-se tomar em conta que a determinao da concentrao do componente de interesse, (Cx,
concentrao da soluo C0) faz-se prolongando a recta de unio entre os pontos at se cruzar
com o eixo das concentraes no seu lado negativo. A est tcnica se chama de extrapolao
da recta de unio entre os pontos.
Em resumo:
Queremos por exemplo analisar a concentrao de um iao metlico Mn+ existente numa amostra
de gua.
Para isso podemos preparar 3 bales de 50 mL de capacidade a que chamaremos de C 0, C1 e
C2. Em cada um deles introduzimos 10 mL da soluo a analisar. A seguir juntamos por
exemplo 0 mg/L (C0), 3 mg/L (C1) e 10 mg/L (C2) de uma soluo de concentrao conhecida
(soluo standard) do iao Mn+. Adicionamos a seguir os reagentes apropriados para a reaco
qumica desejada e juntamos gua bidestilada at a marca. Levamos cada uma das solues
para o instrumento analtico e determinamos os sinais P0, P1 e P2. Graficamos P em funo de
C, e unimos os pontos com uma linha recta que ento prolongada at se cruzar com o lado
negativo do eixo das concentraes. Esse ponto deve ainda ser multiplicado pelos factores de
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diluio apropriados (5 neste caso particular) para que corresponda concentrao do io Mn+
na amostra de gua em estudo.
Recorde-se que adicionar C0 mesmo que no adicionar o composto de interesse. A soluo
C0 tem entretanto que dar certo sinal P0, (diferente de zero) pois no nos esqueamos que a
soluo C0 contm tambm 10 mL da amostra tomando-se em conta o exemplo anterior.
Na sua execuo e dependendo da quantidade de amostra a analisar, e do mtodo de anlise a
aplicar (electroqumico ou ptico) o mtodo da adio padro toma vrias formas, podendo-se
por exemplo fazer-se injeces consecutivas sobre uma mesma alquota que dever ser
imediatamente analisada antes de nova injeco da soluo padro do componente a
determinar, como acontece nos mtodos volumtricos e polarogrficos, uma vez que no existe
consumo da amostra durante o processo da anlise.
tambm possvel a utilizao de frmulas matemticas para o clculo da concentrao do
elemento de interesse desde que haja garantia da existncia de uma relao linear entre a
propriedade P medida pelo instrumento e a concentrao C adicionada nas alquotas.
Comparao entre o mtodo da curva de calibrao e o mtodo de adio padro
A deciso de se aplicar o mtodo de adio padro s pode ser tomada se tal vier recomendado
na tcnica de anlise ou somente quando se comprovar laboratorialmente que a tcnica de curva
de calibrao no est produzindo resultados correctos. Se no existem interferncias aparentes
o analista deve adoptar sempre como primeira escola o mtodo da curva de calibrao uma vez
que para alm de uma execuo mais rpida, provoca um erro menor do que o da adio padro
(foram j publicados erros de +/- 30 % nas determinaes com o mtodo de adio padro).
Este assunto muito controverso e alvo de uma pesquisa internet durante as aulas de
exerccios prticos no leccionamento da disciplina de anlise Instrumental na Universidade
Eduardo Mondlane.
3.3 Mtodos de Clculo matemtico
Se existe uma equao que expressa a dependncia ente a propriedade que se mede e a
concentrao de um composto numa amostra desconhecida, mediante ao uso dessa equao
pode-se calcular a concentrao por simples substituio das incgnitas na equao
matemtica. Por exemplo, na anlise por Espectrofotometria no Visvel e Ultra Violeta a
concentrao de uma substncia na soluo em anlise calculada fazendo-se uso da lei de
Lambert-Bouger-Beer (Lei de Beer) que se expressa na forma:
A = lg

I0
= abC
Ir

Onde:
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A representa a Absorvncia da soluo (Propriedade medida pelo aparelho);
Ir fora da radiao transmitida (intensidade da luz que atravessa o recipiente de anlise);
I0 fora da radiao incidente (intensidade da luz que chega ao recipiente com soluo de
anlise);
C representa a concentrao do io metlico na soluo em anlise.
Conhecendo-se os valores de A, a e b podemos calcular directamente o valor desejado de C.
este mtodo directo do clculo matemtico raramente utilizado na prtica j que muitas vezes
a lei de Lambert Beer sofre desvios nas condies experimentais o que traz muitos erros.
3.4 Mtodos da Determinao do Ponto de Equivalncia nas titulaes instrumentais
Mediante a variao de uma ou outra propriedade fsica de uma soluo durante a titulao
com a utilizao de um mtodo instrumental podemos determinar o volume de equivalncia
necessrio para a realizao de determinada reaco qumica seja ela de neutralizao,
complexao, precipitao ou oxidao-reduo. Obtido o volume de equivalncia a
determinao da concentrao poder ser feita conhecendo-se a reaco qumica envolvida e
aplicando-se a lei geral da volumetria nas suas mais diferentes formas a saber:
CM x V(titulante) = CM x V(titulado) x Factor estequiomtrico
m

CM x V(titulante) = PM
m

CN x V(titulante) = Peq

(13)
(14)
(15)

Onde CM representa a concentrao molar, CN a concentrao normal, V o volume gasto na

titulao at se atingir o ponto de equivalncia, m a massa da substncia em estudo, PM e Peq
os valores das massas molar e da massa equivalente respectivamente.

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4. Bibliografia recomendada
Espinosa, Burgos Gil, Gome e Solarana. Temas de Analisis Qumico Instrumental.
Universidade de Camaguey, 1978.
Vogel. Anlise Qumica Quantitativa. Editora Guanabara Kogan SA. 1992.
Thompson & Reynolds. Atomic Absoption, Fluorescence and Flame Emission Spectroscopy.
A practical approach. 2a ed. Charles Griffin & Co. 1978.
Skoog and Leary. Principles of Analysis. 4th. Ed. 1992.
Bauer, Christian an OReilly. Instrumental Analysis. Allyn and Bacon, Inc. 1978.
Skoog, West and Holler. Fundamentals of Analytical Chemistry. 7-th-. Ed. 1997.

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