BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR

ENZIMAS
Elaborado por P. Chuna M. & E. Larco L.

ENZIMAS

Cumplen con las siguientes caractersticas:

a) Son termolbiles .
b) Su actividad depende, en ciertos casos , del pH del medio.
c) Posee un elevado grado de especificidad de substrato.
d) Son muy eficientes.

e) Estn sujetas a una gran variedad de controles celulares, genticos y alostricos.

f) Aceleran notablemente la velocidad de una reaccin qumica y cumplen con las
siguientes caractersticas:
Son efectivas en pequeas cantidades.
No se consume ni sufren cambios permanentes de su estructura durante el
proceso cataltico.
No afectan las concentraciones finales en equilibrio, sino que nicamente
disminuyen la E de activacin.

P. Chuna M. & E. Larco L.

REACCION CATALIZADA POR UNA ENZIMA

La energa de activacin es el nivel de energa que requieren los reactantes para ser transformadas
en productos; es decir, representa una barrera a vencer por las molculas del reactante. En la cima
de la barrera, el reactante est en su estado de transicin, una especie energtica (inestable) de corta
duracin y con la misma probabilidad de regresar al material de partida o de transformarse en
producto. La energa de activacin para una reaccin catalizada por un enzima es mucho menor en
relacin a la misma reaccin pero en ausencia de enzima.

P. Chuna M. & E. Larco L.

NOMENCLATURA DE LAS ENZIMAS

En muchos casos, el nombre termina en asa
El nombre comun para una hidrolasa es derivado del sustrato
Urea: remueve -a, se reemplaza con -asa = ureasa
Lactosa: remueve -osa, se reemplaza con -asa = lactasa
Otras enzimas se nombran por el sustrato y la reaccin catalizada
Lactato deshidrogenasa
Piruvato descarboxilasa
Algunos nombres son histricos (no directamente relacionados al sustrato
o tipo de reaccin).
Catalasa
Pepsina
Quimotripsina
Tripsina
P. Chuna M. & E. Larco L.

CLASIFICACION DE LAS ENZIMAS

CLASE 1: OXIDORREDUCTASA (E. C. 1)

Catalizan reacciones de oxido-reduccin, y con frecuencia utilizan coenzimas

como el NAD, FAD o lipoato.
Ejemplos:
- Deshidrogenasas
- Oxidasas
- Oxigenasas
- Reductasas
- Peroxidasas
- Hidroxilasas

P. Chuna M. & E. Larco L.

CLASE 2: TRANSFERASAS (E.C. 2)

Catalizan la transferencia de un grupo de tomos desde un sustrato a otro.
Los grupos que con ms frecuencia son transferidos son grupos: amino, acilo,
fosfato, etc.
Ejemplos:
- Transaminasas
- Transmetilasas
- Transcarboxilasas
- Quinasas

P. Chuna M. & E. Larco L.

CLASE 3: HIDROLASAS (E.C. 3)

Cataliza reacciones en la que el sustrato es escindido siendo sus

fragmentos transferidos a los componentes del agua (OH y H).
Implican la rotura hidroltica de enlaces C-O, C-N, O-P y C-S.
- Carbohidrasas
- Esterasas
- Fosfatasas
- Peptidasas

P. Chuna M. & E. Larco L.

CLASE 4: LIASAS (E.C. 4)

Catalizan reacciones en la que se eliminan grupos (por ej, H2O, NH3, CO2,
para formar un doble enlace o se aaden a un doble enlace C-C, C-N y C-O, y
con prdida de grupos funcionales simultnea a la aparicin de dobles
enlaces.
Ejemplos :
- Descarboxilasas
- Hidratasas
- Desaminasas
- Liasas
- Sintasas

P. Chuna M. & E. Larco L.

CLASE 5: ISOMERASAS (E.C. 5

Catalizan la interconversin de ismeros de cualquier tipo, pticos, geomtricos

o de posicin.
Ejemplos:
- Epimerasa
- Racemasa
- Mutasa

P. Chuna M. & E. Larco L.

CLASE 6: LIGASAS (E.C. 6)

Participan en reacciones en las que se unen dos molculas a expensas de

un enlace fosfato de alta energa procedente del ATP.
Ejemplos
- Tiocinasa
- Carboxilasa
- Sintetasa

P. Chuna M. & E. Larco L.

NATURALEZA QUIMICA DE LAS ENZIMAS

Casi todas las enzimas son de
naturaleza proteica
Algunas
enzimas
requieren
cofactores para su funcionamiento.
Las coenzimas se va a unir a la
enzima bien de forma dbil y
temporal o en otros casos de
forma permanente
y covalente
(grupo prosttico).

Holoenzima = Apoprotena + Cofactor (Coenzima o in metlico)

Peso molecular Peso molecular
Termolbil

Termoresistente

No dializa

Dializa

P. Chuna M. & E. Larco L.

Fe+
Mg+
Mn+
Zn+

Moleculas orgnicas complejas

Los iones metlicos son importantes en la catlisis porque:

1. Proporcionan una concentracin elevada de cargas positivas que es especialmente til para la
unin de molculas pequeas.
2. Ayudan al sustrato a orientarse dentro del sitio cataltico.
3. Como los metales de transicin (p.ej. Fe2+ y Cu2+ ) tienen dos o ms estados de valencia, pueden
actuar como mediadores en las reacciones de xido-reduccin.
ION METALICO

ENZIMA

Cu 2+

Citocromo oxidasa

Fe 2+ o Fe 3+

Ctalasa, peroxidasa

Mg 2+

Hexoquinasa,
Glucosa 6- fosfatasa

Mn

Arginasa,
Ribonuclotido
reducatasa

Ni 2+

Ureasa

Se

Glutation peroxidasa

Zn 2+

Alcohol deshidrogenasa,
Anhidrasa carbnica,
Carboxipeptidasa

P. Chuna M. & E. Larco L.

CATALISIS ENZIMATICA
La enzima se une efectivamente al o a los
sustratos, formando un complejo transitorio (ES),
mediante una reaccin reversible, cuya energa de
activacin es menor que la de la reaccin no
catalizada.
Las modificaciones que puede experimentar la
molcula de la enzima durante dicha unin son
pasajeras, ya que aparece inalterada al final de la
reaccin.
El proceso puede representarse con la ecuacin:
E + S ES EP E + P

P. Chuna M. & E. Larco L.

E + S ES EP E + P

P. Chuna M. & E. Larco L.

P. Chuna M. & E. Larco L.

SITIO CATALITICO

La interaccin entre la E y el S exige una

conformacin
tridimencional
altamente
especfica a nivel del sitio cataltico, en el cual las
cadenas laterales de los restos aminoacdicos de
la enzima aportan grupos funcionales reactivos
que establecen interacciones reversibles no
covalente con el sustrato.
Los aminocidos que estn frecuentemente
presentes son: Glutamato, histidina, cistena,
lisina, aspartato, Arginina, treonina, etc.

P. Chuna M. &. E. Larco L.

MECANISMOS DE ACCIN ENZIMTICA

1. Efectos de proximidad y orientacin
Las enzimas logran en su centro activo una concentracin local de reactivos mucho mayor que
cuando stos estn en solucin (efecto de proximidad). Adems, la fijacin al centro activo se hace
en la orientacin correcta.
2. Efectos de torsin distorsin
Una vez unido el S, la E es forzada a modificar su estructura y a adoptar una ms prxima al estado
de transicin.
3. Existencia de grupos funcionales catalticos en el centro activo del enzima

P. Chuna M. & E. Larco L.

ESPECIFICIDAD DE LAS ENZIMAS

Las enzimas muestran dos tipos de especificidad: absoluta (tripsina, trombina) o de grupo
(carboxipeptidasa).
Muchas enzimas aceptan un tipo de molcula, y a veces pueden discriminar entre un ismero
D o L de un sustrato. Ej. Enzimas de va glucoltica catalizan la interconversin de los Dfosfoazcares pero no de los L-fosfoazcares.
P. Chuna M. & E. Larco L.

TEORAS DE LA ACCIN ENZIMTICA

MODELO DE LLAVE Y CERRADURA (Emil Fischer)
El sustrato y la enzima se acoplan
de forma estereoespecfica, de la
misma manera que una llave se
ajusta a su cerradura.

TEORIA DEL AJUSTE INDUCIDO (Koshland))

Considera a la enzima como una estructura dotada de plasticidad y flexibilidad.
Cuando el sustrato se une a la enzima,
induce cambios conformacionales en la
molcula de sta, que recin entonces
acomoda los grupos funcionales crticos
para asegurar la ubicacin ms efectiva..

P. Chuna M. & E. Larco L.

FACTORES QUE MODIFICAN LA ACTIVIDAD ENZIMTICA

1. CONCENTRACIN DEL SUSTRATO
Si se mantiene constante la [E] y se
varia la [S] se obtiene una curva
hiperblica.
Al principio un aumento de la [S]
produce un aumento rpido de la
velocidad de reaccin, pero si se sigue
aumentando la [S], la velocidad
comienza a disminuir y a muy altas
concentraciones de sustrato se observa
que no cambia la velocidad de reaccin,
se dice que los sitios catalticos de la
enzima se encuentran saturados.

P. Chuna M. & E. Larco L.

2. EFECTO DE LA TEMPERATURA
Si bien el aumento de la temperatura incrementa la velocidad de una reaccin catalizada por una
enzima esto resulta vlido slo en un intrevalo de T estrictamente limitado. Inicialmente, la
velocidad de reaccin se incrementa conforme la T aumenta, debido al incremento de la energa
cintica de las molculas reactantes. Finalmente, sin embargo, la E cintica de la enzima excede la
barrera energtica, para la ruptura de los enlaces dbiles, los cuales conservan la estructura
secundaria, terciaria de dicha enzima, provocando la desnaturalizacin.
Temperatura ptima para una
tpica enzima humana

Temperatura ptima para

enzima de termfila

Actividad

(Bacteria termotolerante)

20

40

Temperatura (C)

Temperatura ptima para dos enzimas

P. Chuna M. & E. Larco L.

80

100

EFECTO DEL PH
ENZIMA

Para la mayora de las enzimas, la actividad ptima se encuentra

entre valores de pH de 6 a 8. Por debajo o por encima de esos
valores, la velocidad de reaccin cae ms o menos rpidamente.
Se sabe que los cambios de pH del medio afectan el estado de
ionizacin de ciertos grupos funcionales en la molcula de la
enzima y tambin en la del sustrato.
Por otra parte, los pH extremos provocan desnaturalizacin de la
molcula enzimtica, con la consiguiente inactivacin.
pH ptimo para pepsina
(enzima del estmago

Actividad

pH ptimo para
tripsina
(enzima
intestinal)

3
4
0
2
1
pH ptimo para dos enzimas

P. Chuna M. & E. Larco L.

Fosfatasa alcalina
Lipasa pancretica
Quimotripsina
Tripsina
Catalasa
Carboxipeptidasa
Amilasa salival
Fosfatasa cida
Pepsina

pH
9.5
8.0
8.0
7.9
7.6
7.5
6.8
5.0
1.5

INHIBICIN ENZIMTICA
INHIBICIN REVERSIBLE NO COMPETITIVA.
El inhibidor se une a la enzima en un lugar de la molcula diferente del sitio cataltico, a
menudo deformndola de modo que sta no forme el complejo ES a su velocidad normal.
No existe competencia entre el sustrato y el inhibidor.
El Inhibidor presenta poco parecido estructural o ninguno con el S.
Ej. Isoleucina que acta sobre enzima treonina deshidratasa

P. Chuna M. & E. Larco L.

INHIBICIN REVERSIBLE: INHIBICION COMPETITIVA:

El inhibidor puede combinarse con la enzima libre, de tal modo que compite con el sustrato
normal por unirse al sitio cataltico.
La estructura qumica de un inhibidor (I), por lo general es semejante a la del sustrato (S).
El inhibidor se combina de manera reversible, con la E para formar un complejo EI.
Una caracterstica de este tipo de inhibicin est dada por el hecho de que puede ser revertida
aumentando la concentracin de sustrato.

P. Chuna M. & E. Larco L.

La sulfamida compite con el cido para amino benzoico (PABA) por la enzima dihidropteroato
sintetasa, lo que produce como resultado la formacin de un producto que contiene sulfanil-amida,
que no puede ser transformado en cido flico.

P. Chuna M. & E. Larco L.

Metotrexato (antileucmico)

Anlogo estructural del tetrahidrofolato.

Inhibe la dehidrofolato reductasa, una

enzima esencial en la va de la biosntesis
de bases nitrogenadas (timidina
monofosfato).

Se une 1000X mejor que el sustrato

natural.

Las clulas leucmicas no se pueden

dividir.

P. Chuna M. & E. Larco L.

INHIBICION IRREVERSIBLE
El inhibidor irreversible forma un enlace covalente estable con la enzima (ej. alquilacion or
acilacion de la cadena lateral de un sitio activo)
Nombre

Estructura

Fuente

Accin Inhibitoria

Cianuro

Almendras
amargas

Se une a iones metlicos de

enzimas de la cadena respiratoria

Sarin

Gas nervioso

Similar a Diisopropilfluorofosfato

Paratin

Insecticida

Similar a Diisopropilfluorofosfato

Penicilina

Hongo
Penicillium

Inhibe enzima que participa en

sntesis de la pared celular
bacteriana

P. Chuna M. & E. Larco L.

PROENZIMAS

Varias enzimas se sintetizan y almacenan

en forma de precursores inactivos
denominados proenzimaso zimgenos.
Los zimgenos se convierten en enzimas
activas por la rotura irreversible de uno o
varios enlaces peptdicos.

Zimgeno

Activador

Enzima

Proelastasa

Tripsina

Elastasa

Tripsingeno

Tripsina

Tripsina

Quimotripsingeno A

Tripsina + quimotripsina

Quimotripsina

Pepsingeno

pH cido + pepsina

Pepsina

Procarboxipeptidasa

Tripsina

Carboxipeptidasa

P. Chuna M. & E. Larco L.

ENZIMAS NO CONVENCIONALES
RIBOZIMAS
Son molculas de RNA que pueden tener capacidad cataltica y
comportarse como biocatalizadores muy activos.

ABZIMAS
Son anticuerpos que tienen propiedades catalticas.

SINZIMAS
Son enzimas artificiales.
P. Chuna M. & E. Larco L.

IMPORTANCIA DE LAS ENZIMAS EN EL

DIAGNOSTICO

Las enzimas que son utilizados en el diagnstico clnico

presentan ciertas caractersticas:
Son intracelulares, cuya concentracin en plasma es muy baja
(Su relacin plasma/ tejidos es < 1:1000).
La presencia de niveles elevados de enzimas en el suero
implica que ha habido lesin (muerte?) celular lo que permite
la salida a la circulacin de enzimas normalmente confinados
en el interior de las clulas.
Se trata de enzimas (o isoenzimas) que se expresan mayoritariamente en un determinado tejido, pudiendo servir de marcador tisular especfico.

P. Chuna M. & E. Larco L.