Instituto Politcnico Nacional

Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas Laboratorio de

Bioqumica y Biologa molecular
Curva tipo de azucares reductores.
Morales Ramrez Tania, Vela Vzquez Valeria/ Grupo: 3IM2/ Seccin
3

Introduccin

Los azcares
reductores son
aquellos
azcares
que
poseen
su grupo
carbonilo (grupo funcional) intacto, y que a
travs del mismo pueden reaccionar
como reductores con otras molculas. Una
curva tipo o curva de calibracin es una
representacin grfica entre la relacin de
concentracin (eje de las abscisas) y
absorbancia (eje de las ordenadas).
Es necesario ensayar varias soluciones de
concentracin conocida y determinar sus
respectivas absorbancias, construyndose la
curva tipo, cuya apariencia es una recta.
Para medir la absorbancia se emplea un
espectrofotmetro que realice lecturas a 540
nm.
El mtodo DNS (tcnica de Miller) es una
tcnica colorimtrica que emplea cido
3,5dinitrosalicilico para la hidrolisis de
polisacridos presentes en una muestra.
Esta tcnica sirve para cuantificar los
azucares reductores producidos en una
reaccin enzima generando un producto
coloreado. La intensidad de color que se
mide por mtodos espectrofotomtricos es
proporcional a la concentracin de azucares.

Objetivo

Obtener una curva de calibracin para

transformar las lecturas de absorbencia.
Obtener la actividad de la enzima
invertasa.
.

Resultados

Tabla 1. Curva tipo de azucares reductores

mL Glucosa
Azcar reductor
0.005M /
(moles/2mL)
Fructosa
0.0005M
Blanco
0
0
1
0.1
1
2
0.2
2
3
0.4
4
4
0.8
8
5
1.0
10
Tabla 2. Valores de Glucosa + Fructosa en
moles/2mL.
Tubo No.

Clculo de los moles/2mL

Glucosa ( 0.005 M )+ Fructosa ( 0.005 M ) =0.01 M

0.01 mol=1000mL

x mol=0.1 mL

por lo tanto x=0.00001mol=1 x 106 moles=1 mol /2mL

Figura 1. Resultados Curva tipo azucares
reductores

necesario para que las recciones de xidoreduccin se lleven a cabo.

Cuando se aade el 3,5 DNS a la Glucosa +
Fructosa ocurre una reaccin de xidoreduccin en la cual el DNS es reducido por
la Glucosa a cido 3-amino-5-nitrosaliclico,
mientras que la glucosa se oxida a cido Dglucnoico.

Grfica 1. Curva tipo de azucar reductor.

Al realizar la grfica se obtuvo una lnea recta

por lo que podemos decir que la
concentracin de un azcar reductor es
directamente proporcional a la absorbancia
obtenida en el espectrofotmetro, es decir
que a mayor cantidad de glucosa y fructosa
se obtiene una mayor absorbancia.

Discusin
Se llev a cabo la preparacin de tubos como
se muestra en la tabla 1 se comenz a
observar la presencia de color cuando estos
se sometan a calentamiento a bao mara, el
color va dependiendo de la cantidad de
azcar reductor (glucosa-fructuosa) que se
le haya colocado. La sacarosa es un
disacarido no reductor, que no se oxida con
facilidad debido a que sus tomos de
carbono anomericos esta unidos a un enlace
glicosidico. El cido 3,5-dinitrosalisilico
reacciona solo con azucares reductores,
cuando la sacarosa se hidrolizo se libero
Glucosa y Fructosa (ambos son azucares
reductores) que reaccionarn con el 3,5 DNS
a una temperatura dada durante un tiempo
marcado para generar coloracin y
posteriormente ser observado en un
espectrofotmetro a una longitud de onda de
540nm. Adems de permitir el desarrollo de
color (un tono amarillo representa una
oxidacin y un tono rojo cuando presenta una
reduccin) el DNS proporciona el nivel de pH

1.

2.

Conclusines

A mayor cantidad de

mol

de azcar

reductor mayor absorbencia reflejada.

El cido 3,5-dinitrosalisilico nos permite
observar el poder reductor de los
zucares.

Bibliografa

Thomas M. Delvin, Bioqumica, Ed.

Reverte S.A, 4 edicin en Esp., PP.
110-125 (2004)
Lehninger, A.L., Principios de
Bioqumica, 2 Edicin, Ed. Worth
Publiserhs, Inc., PP. 138-146 (1993)