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caliente que los rodea. Existen tres formas principales de esterilizacin por calor seco:
flambeado, incineracin y mediante la utilizacin del horno Pasteur: consiste en un recinto
metlico de doble pared con aislante entre ambas (para evitar la prdida de calor) y una
puerta. La fuente de calor suele ser elctrica y est incorporada. Posee un ventilador que
facilita la circulacin del aire caliente, para homogeneizar la temperatura. Un termmetro
(con alcance mnimo de 200C) visible desde afuera, registra la temperatura del interior
del recinto.
Por calor seco se pueden esterilizar: materiales de inyectables, vidrios, instrumentos
quirrgicos y objetos metlicos, as como aceites, vaselinas y polvos, que como ya se
ha dicho son impermeables al vapor.
Controles de esterilizacin: Existen tres tipos: fsicos, qumicos y biolgicos.
Controles fsicos: estn relacionados al operario que realiza el procedimiento y la
vigilancia de ciertos parmetros como: presin, tiempo, temperatura, etc.
Controles qumicos: consiste en tiras de papel con una sustancia que cambia de color al
ser expuesto a la temperatura correspondiente. La ventaja de este mtodo, es la rapidez
con que se sabe el resultado, ya que es inmediato. La gran desventaja es que dice poco
sobre el tiempo de exposicin, por lo que no asegura un procedimiento correcto.
Estos controles deben utilizarse en todos los ciclos de esterilizacin.
Controles biolgicos: consisten en exponer esporas bacterianas al ciclo de esterilizacin
y luego verificar su viabilidad.
B. POR RADIACIONES
Con este fin pueden utilizarse tanto las radiaciones ultravioletas (UV) como las ionizantes
y rayos infrarrojos.
RADIACIONES UV:
Mecanismo de accin: el principal mecanismo del efecto letal de la luz UV sobre las
bacterias, se atribuye a su absorcin por el ADN y el resultante dao de este. As
provocan la formacin de uniones covalentes entre los residuos de pirimidina adyacentes
pertenecientes a la misma cadena, lo que provoca la formacin de dmeros de pirimidina
de tipo ciclobutano. Esto produce distorsiones en la forma del DNA e interfiere en el
apareamiento normal de las bases. El resultado final es la inhibicin de la sntesis de ADN
y secundario a esto, inhibicin del crecimiento y la respiracin.
C. ESTERILIZACION POR METODOS
MECANICOS: FILTRACION: Existen distintos tipos de filtros: de asbesto-celulosa, de
vidrio, de cermica y de steres de celulosa o membranas. Las membranas estn
compuestas por steres de celulosa biolgicamente inertes. Los poros varan desde
0.025m a 25m de dimetro, siendo los de 0.22m los ms utilizados ya que son lo
suficientemente pequeos para detener a todas las bacterias. Con este mtodo se
esterilizan: azcares, urea, sueros, antibiticos, etc
3. Cules son las unidades de concentracin ms utilizadas en las soluciones
empleadas en las prcticas de este manual?
mM, M, M y porcentual (p/v y v/v).
4. Realice los clculos para preparar las siguientes soluciones, consulte la forma de
preparacin en las prcticas 2 y 5 de este manual.
Es importante que se use material que no contenga residuos qumicos ni biolgicos. Para
lavar el material primero se remoja en una solucin de hipoclorito de sodio, enjuagar con
agua, lavado con escobilln y detergente no inico, luego se enjuaga con agua y se
sumerge por 5 min. en agua destilada y se deja secare, finalmente se prepara para su
esterilizacin.
6. Qu caractersticas de esterilidad debe tener el material empleado en Gentica
Molecular?
Libre de agentes patgenos as como de partculas de cualquier otro material que puedan
interferir con las pruebas empleadas, que preferentemente sea nuevo y que tengan las
caractersticas necesarias para cada prueba.
Bibliografa
http://www.higiene.edu.uy/cefa/Libro2002/Cap%2027.pdf