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Diagnstico de laboratorio de las enfermedades bacterianas

El diagnstico de laboratorio de las enfermedades bacterianas requiere la recogida de una


muestra apropiada, que sea remitida con rapidez al laboratorio en un medio de transporte
apropiado y que sea procesada de modo que aumente al mximo la deteccin de los
patgenos ms probables. La recogida de la muestra apropiada y su rpida remisin al
laboratorio clnico son responsabilidad principalmente del mdico del paciente, mientras que
el microbilogo clnico selecciona los sistemas de transporte apropiados y el mtodo de
deteccin (p. ej., microscopia, cultivo, deteccin de antgenos o de anticuerpos, pruebas de
cidos nucleicos). Estas responsabilidades no son mutuamente excluyentes. El microbilogo
ha de estar preparado para alertar al mdico sobre el tipo de muestras que se deben
recoger en caso de sospecha de un diagnstico concreto, y el mdico debe proporcionar al
microbilogo la informacin relacionada con el diagnstico clnico de modo que se
seleccionen las pruebas apropiadas. Este captulo est concebido para proporcionar una
visin de conjunto de la recogida de muestras y de su transporte, as como de los mtodos
utilizados en el laboratorio de microbiologa para la deteccin e identificacin de las
bacterias. Dado que queda fuera del mbito de este captulo cubrir el tema de modo
exhaustivo, remitimos al estudiante a las citas de la Bibliografa y a los captulos concretos
que siguen para obtener una informacin ms detallada.

Recogida, Transporte y Procesamiento de las muestras

1.1 OBTENCIN DE LA MUESTRA:


Sitio exacto de la lesin con las mx. asepsia.
No poner en contacto con antispticos / desinfectantes.
Lo ms precoz posible.
Productos frescos lquidos Vs muestras con hisopos.
Recoger antes del tto ATB.
1.2 RECOGIDA DE LA MUESTRA:
Una muestra
un material.
Todas son potencialmente infecciosas.
Usar siempre guantes y lavado de manos.
Tubos que contienen sangre
Fluidos voluminosos

biopeligrosos.
WC.

En el texto que sigue a continuacin y en la tabla se resumen las pautas para una recogida y
un transporte apropiados de las muestras.

Sangre

El hemocultivo es uno de los procedimientos ms importantes que se llevan a cabo en el


laboratorio de microbiologa clnica. El xito de esta prueba se relaciona directamente con
los mtodos utilizados para recoger la muestra de sangre. El factor ms importante que
determina el xito del hemocultivo es el volumen de sangre procesada. Por ejemplo, un 40%
ms de los cultivos son positivos en relacin con microorganismos si se cultivan 20 ml en
vez de 10 ml de sangre, porque ms de la mitad de todos los pacientes spticos tienen
menos de un microorganismo por mililitro de sangre. Se deben recoger aproximadamente 20
ml de sangre de un adulto por cada frasco de hemocultivo, y se deben recoger volmenes
proporcionalmente ms pequeos de nios y de neonatos. Dado que muchos pacientes
hospitalizados son susceptibles a infecciones por microorganismos que colonizan la piel, es
importante realizar una desinfeccin cuidadosa de la piel del paciente. La bacteriemia y la
fungemia se definen como la presencia de bacterias y hongos, respectivamente, en la
sangre, y estas infecciones reciben colectivamente la denominacin de septicemia. Se ha
demostrado en estudios clnicos que la septicemia puede ser continua o intermitente. La
septicemia continua se produce principalmente en pacientes con infecciones intravasculares
(p. ej., endocarditis, tromboflebitis sptica, infecciones asociadas con un catter
intravascular) o con una sepsis fulminante (p. ej., shock sptico). La septicemia intermitente
se produce en pacientes con infecciones localizadas (p. ej., pulmones, tracto urinario, tejidos
blandos). El momento de la recogida de la muestra de sangre no es importante en el caso
de los pacientes con septicemia continua, pero s es importante en el caso de los pacientes
con septicemia intermitente. Adems, y dado que los signos clnicos de de la sepsis (p. ej.,
fiebre, escalofros, hipotensin) constituyen una respuesta de la liberacin de endotoxinas o
exotoxinas a partir de los microorganismos, estos signos se dan hasta 1 hora despus de
que los microorganismos se hayan introducido en la sangre. Por ello, puede que en el
momento en que el paciente se vuelve febril haya pocos microorganismos, o ninguno, en la
sangre. Por ello, se recomienda la recogida de dos o tres muestras de sangre en momentos
aleatorios durante un perodo de tiempo de 24 horas. La mayora de las muestras de sangre
se inoculan directamente en frascos que contienen caldos nutrientes enriquecidos. Para
asegurarse la mxima recuperacin de microorganismos importantes, se debe inocular dos
frascos de medios para cada cultivo (10 ml de sangre por frasco). Cuando se reciben en el
laboratorio estos frascos inoculados, se incuban a 37 C y se inspeccionan a intervalos
regulares en busca de signos de crecimiento microbiano. En la mayora de los laboratorios
se lleva a cabo con instrumentos automatizados para hemocultivos. Cuando se detecta
crecimiento, se subcultivan los caldos para aislar el microorganismo con el fin de proceder a
su identificacin y a las pruebas de sensibilidad antimicrobiana. La mayora de los aislados
clnicamente significativos se detectan entre el primer y el segundo da de incubacin; sin
embargo, todos los cultivos deben incubarse durante un mnimo de 5 a 7 das. Por lo
general no se requiere una incubacin ms prolongada. Dado que por lo general hay

escasos microorganismos en la sangre de un paciente sptico, no merece la pena realizar


una tincin de Gram de la sangre para un anlisis microscpico.

Lquido cefalorraqudeo

La meningitis bacteriana es una enfermedad grave que se asocia con una alta morbilidad y
mortalidad si se retrasa el diagnstico causal. Debido a la labilidad de algunos patgenos
comunes (p. ej., Neisseria meningitidis, Streptococcus pneumoniae), las muestras de lquido
cefalorraqudeo deben ser procesadas inmediatamente despus de su obtencin. Bajo
ningn concepto se debe refrigerar la muestra o colocarla directamente en una incubadora.
Se procede a desinfectar la piel del paciente antes de realizar la puncin lumbar, y se recoge
el lquido cefalorraqudeo en tubos estriles con tapn de rosca. Cuando se reciba la
muestra en el laboratorio de microbiologa, se concentra por centrifugacin y se utiliza el
sedimento para inocular medios bacteriolgicos y preparar una tincin de Gram. El tcnico
del laboratorio debe notificar inmediatamente al mdico si se observan microorganismos por
microscopia o en cultivo.

Otros lquidos normalmente estriles


Se puede recoger una variedad de otros lquidos normalmente estriles para cultivo
bacteriolgico, que incluyen los lquidos abdominal (peritoneal), torcico (pleural), sinovial y
pericrdico. Si se puede recoger un gran volumen de lquido por aspiracin (p. ej., lquido
abdominal o torcico), se debe inocular en frascos para hemocultivo que contengan medios
nutrientes. Tambin se debe remitir al laboratorio una pequea porcin en un tubo estril de
modo que se puedan preparar tinciones apropiadas (p. ej., Gram, cido-alcohol resistencia).
Muchos microorganismos se asocian con infecciones en estas localizaciones, incluidas las
mezclas polimicrobianas de microorganismos aerobios y anaerobios. Por dicho motivo, la
tincin biolgica es til para identificar los organismos responsables de la infeccin. Dado
que en la muestra puede haber una cantidad relativamente escasa de microorganismos (por
la dilucin de los microorganismos o por eliminacin microbiana por la respuesta inmunitaria
del hospedador), es importante cultivar un volumen de lquido tan grande como sea posible.
Sin embargo, si slo se recogen pequeas cantidades, se puede inocular la muestra
directamente en medios con agar y en un tubo con medio en caldo enriquecido. Dado que
tambin puede haber anaerobios en la muestra (sobre todo en muestras obtenidas de
pacientes con infecciones intraabdominales o pulmonares), la muestra no debe quedar
expuesta al oxgeno.

Muestras del tracto respiratorio superior

La mayora de las infecciones bacterianas de la faringe estn causadas por Streptococcus


del grupo A. Otras bacterias que pueden causar faringitis son Corynebacterium diphtheriae,
Bordetella pertussis, Neisseria gonorrhoeae, Chlamydophila pneumoniae y Mycoplasma
pneumoniae. Sin embargo, por lo general se requieren tcnicas especiales para recuperar
estos microorganismos. Otras bacterias potencialmente patgenas, como Staphylococcus
aureus, Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae, enterobacterias y
Pseudomonas aeruginosa, pueden estar presentes en la orofaringe pero rara vez causan
faringitis. Se debe utilizar una torunda de dacrn o de alginato de calcio para recoger
muestras farngeas. Se deben obtener muestras de las reas amigdalinas, de la faringe
posterior y de cualquier exudado o rea ulcerativa. Se debe evitar la contaminacin de la
muestra con saliva porque las bacterias de la saliva pueden crecer en exceso o inhibir el
crecimiento de los estreptococos del grupo A. En caso de haber una seudomembrana (p. ej.,
infecciones por C. diphtheriae), se debe separar una porcin y remitirla para cultivo. Los
estreptococos del grupo A y C. diphtheriae son muy resistentes a la desecacin; por tanto,
no se requieren precauciones especiales en cuanto al transporte de la muestra al
laboratorio. Por el contrario, las muestras recogidas para el aislamiento de B. pertussis y de
N. gonorrhoeae se deben inocular en medios de cultivo inmediatamente despus de su
obtencin y antes de que se remitan al laboratorio. Las muestras obtenidas para el
aislamiento de C. pneumoniae y M. pneumoniae deben ser transportadas en un medio de
transporte especial. Se pueden detectar directamente los estreptococos del grupo A en la
muestra clnica por el empleo de inmunoensayos en relacin con el antgeno especfico de
grupo. Aunque estas pruebas son muy especficas y estn fcilmente disponibles, no
presentan la suficiente sensibilidad para excluir con fiabilidad el diagnstico de faringitis
estreptoccica A. En otras palabras, un ensayo negativo ha de ser confirmado por cultivo.
Otras infecciones del tracto respiratorio superior pueden afectar a la epiglotis y a los senos.
Se puede precipitar una obstruccin completa de las vas respiratorias al intentar obtener un
cultivo de la epiglotis (sobre todo en nios); por ello, nunca se debe realizar este tipo de
cultivos. El diagnstico especfico de una infeccin sinusal requiere 1) la aspiracin directa
del seno, 2) un transporte anaerbico apropiado de la muestra al laboratorio (con empleo de
un sistema que evite la exposicin de los anaerobios al oxgeno y a la desecacin) y 3) un
rpido procesamiento de la muestra. El cultivo de la nasofaringe o de la orofaringe carece de
utilidad y no debe realizarse. S. pneumoniae, H. influenzae, Moraxella catarrhalis, S. aureus
y los anaerobios son los patgenos ms frecuentes causantes de sinusitis.

Muestras del tracto respiratorio inferior


Se puede utilizar una variedad de tcnicas para recoger muestras del tracto respiratorio
inferior; stas incluyen la expectoracin, la induccin con solucin salina, la broncoscopia y
la aspiracin directa a travs de la pared torcica. Dado que las bacterias de las vas
respiratorias superiores pueden contaminar el esputo expectorado, se deben inspeccionar
las muestras microscpicamente para valorar la magnitud de la contaminacin oral. Las
muestras que contengan muchas clulas epiteliales escamosas y en las que no haya un
predominio bacteriano en asociacin con neutrfilos no deben ser procesadas para cultivo.
La presencia de clulas epiteliales escamosas indica que la muestra ha quedado
contaminada con la saliva. Puede evitarse dicha contaminacin si se obtiene la muestra con
broncoscopios especialmente diseados o por medio de una aspiracin pulmonar directa. Si
se sospecha una infeccin pulmonar por anaerobios, hay que utilizar estos procedimientos
invasivos porque la contaminacin de la muestra con microbios del tracto respiratorio
superior hara que la muestra perdiera todo su valor. La mayora de los patgenos del tracto
respiratorio inferior crecen rpidamente (en 2 o 3 das); sin embargo, algunas bacterias de
crecimiento lento, como las micobacterias o nocardias, requieren una ampliacin de la
incubacin.

Odo y ojo

Se precisa la timpanocentesis (es decir, la aspiracin de lquido del odo medio) para
conseguir el diagnstico especfico de una infeccin del odo medio. Sin embargo, en la
mayora de los pacientes no es necesario, porque la mayora de los patgenos ms
frecuentes que causan estas infecciones (S. pneumoniae, H. influenzae y M. catarrhalis)
pueden ser tratados de modo emprico. Las infecciones del odo externo estn causadas por
lo general por P. aeruginosa (odo de nadador) o S. aureus. La muestra apropiada que
debe obtenerse para cultivo es un raspado del rea auditiva afectada. Es difcil la recogida
de muestras para el diagnstico de las infecciones oculares porque por lo general la muestra
obtenida es muy pequea y puede haber en ella una cantidad relativamente pequea de
microorganismos. Las muestras de la superficie ocular deben ser recogidas con una torunda
antes de la aplicacin de anestsicos tpicos, seguido de raspados corneales cuando sea
necesario. Las muestras intraoculares se recogen por aspiracin directa del ojo. Se deben
inocular los medios de cultivo cuando se recojan las muestras y antes de que se remitan al
laboratorio. Aunque la mayora de los patgenos oculares crecen rpidamente (p. ej., S.
aureus, S. pneumoniae, H. influenzae, P. aeruginosa, Bacillus cereus), algunos pueden
precisar una incubacin prolongada (p. ej., estafilococos coagulasa-negativos) o el empleo
de medios de cultivos especiales (N. gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis).

Heridas, abscesos y tejidos

Con frecuencia, las heridas abiertas que drenan pueden estar contaminadas con
microorganismos potencialmente patgenos que no guardan relacin con el proceso
infeccioso especfico. Por consiguiente, es importante recoger muestras de la profundidad
de la herida despus de haber limpiado la superficie. Cuando sea posible, debe evitarse el
empleo de una torunda porque es difcil obtener una muestra representativa sin
contaminacin con microorganismos que colonizan la superficie. Igualmente, se deben
recoger aspirados a partir de un absceso cerrado tanto del centro como de la pared del
absceso. Recoger sencillamente pus de un absceso por lo general es improductivo porque
la mayora de los microorganismos se replican activamente en la base del absceso ms que
en el centro. Se puede recoger por aspiracin material de drenaje de infecciones de los
tejidos blandos. Si no se obtiene material de drenaje, se puede infundir una pequea
cantidad de suero salino en el tejido y a continuacin retirarla para proceder a cultivarla. No
se debe emplear solucin salina que contenga un conservante bactericida. Se deben
obtener los tejidos a partir de porciones representativas del proceso infeccioso, y cuando
sea posible se recogern mltiples muestras. Se debe transportar la muestra de tejido en un
recipiente estril con tapn de rosca, y se debe aadir solucin salina para evitar la
desecacin si se ha recogido una muestra de pequeo tamao (p. ej., muestra de biopsia).
Tambin debe remitirse una muestra de tejido para examen histolgico. Dado que la
recogida de muestras tisulares requiere procedimientos invasivos, se debe hacer todo lo
posible para recoger la muestra apropiada y asegurarse de que se cultiva para todos los
microorganismos clnicamente significativos que puedan ser responsables de la infeccin.
Ello requiere una estrecha comunicacin entre el mdico y el microbilogo.

Orina

La orina es una de las muestras que con mayor frecuencia se remiten para cultivo. Debido a
que la uretra est colonizada por bacterias potencialmente patgenas, debe desecharse la
primera porcin de la orina recogida por miccin o cateterizacin. Los patgenos del tracto
urinario pueden crecer tambin en la orina; por tanto, no debe producirse retraso en el

transporte de las muestras al laboratorio. Si no puede cultivarse inmediatamente la muestra,


debe ser refrigerada o colocada en un bolsa con conservante bacteriosttico de orina. Una
vez se haya recibido la muestra en el laboratorio, se inocula de 1 a 10 ml en cada medio de
cultivo (por lo general un medio de agar no selectivo y un medio de agar selectivo). Se hace
para que se pueda cuantificar el nmero de microorganismos presentes en la orina, lo cual
es de utilidad para valorar la significacin de un aislado, aunque unas pequeas cifras de
microorganismos en un paciente con piuria pueden ser clnicamente significativas. Son
numerosas los procedimientos elaborados de cribado de orina (p. ej., pruebas bioqumicas,
tinciones microscpicas) y se utilizan ampliamente; sin embargo, no se pueden recomendar
los procedimientos actuales porque son invariablemente insensibles para detectar una
bacteriuria de bajo grado clnicamente significativa.

Muestras genitales
A pesar de la variedad de bacterias que se asocian con enfermedades de transmisin
sexual, la mayora de los laboratorios se concentran en la deteccin de N. gonorrhoeae y C.
trachomatis. Tradicionalmente se ha venido haciendo inoculando la muestra en un sistema
de cultivo selectivo en relacin con estos organismos. Sin embargo, se trata de un proceso
lento, que lleva 2 o ms das para obtener un cultivo positivo e incluso ms tiempo en
relacin con la identificacin definitiva de los aislados. Se ha observado tambin que los
cultivos son insensibles porque los microorganismos son extraordinariamente lbiles y se
mueren rpidamente durante el trnsito en condiciones subptimas. Por estas razones, se
utiliza en la actualidad una variedad de mtodos sin cultivo. Los mtodos ms populares son
los procedimientos de amplificacin de cidos nucleicos (p. ej., amplificacin de secuencias
de cido desoxirribonucleico [ADN] especficas de especie por la reaccin en cadena de la
polimerasa u otros mtodos) en relacin con ambos microorganismos. La deteccin de estas
secuencias amplificadas con sondas es sensible y especfica. Sin embargo, puede
producirse una contaminacin cruzada si no se controlan cuidadosamente los
procedimientos de la prueba. Si se utiliza la orina para estas pruebas, se debe analizar la
primera porcin de la orina miccionada y no la porcin media del chorro de orina, como se
emplea en relacin con el cultivo de orina. La otra bacteria importante que causa
enfermedad de transmisin sexual es Treponema pallidum, el agente causal de la sfilis.
Este microorganismo no puede ser cultivado en el laboratorio clnico, de modo que el
diagnstico se efecta con empleo de la microscopia o de la serologa. Debe examinarse el
material de las lesiones con empleo de la microscopia de campo oscuro porque el
microorganismo es demasiado fino para ser detectado con la microscopia de campo claro.
Adems, el microorganismo se muere rpidamente cuando se expone al aire o a
condiciones de desecacin; por consiguiente, ha de efectuarse el examen microscpico en
el momento de la recogida de la muestra.

Muestras fecales

Una amplia variedad de bacterias puede producir infecciones gastrointestinales. Para poder
aislar estas bacterias en cultivo ha de recogerse una muestra fecal adecuada (por lo general
no constituye problema alguno en un paciente con diarrea), transportarse al laboratorio de
modo que se asegure la viabilidad del organismo infeccioso y se inocule en medios
selectivos apropiados. No deben remitirse muestras rectales obtenidas con torunda porque
han de inocularse mltiples medios selectivos para aislar los diversos patgenos posibles.
La cantidad de heces recogida con una torunda sera insuficiente. Las muestras de heces
deben ser recogidas en un recipiente amplio y limpio y luego ser transferidas a un recipiente
impermeable muy bien cerrado. Se deben transportar las muestras rpidamente al
laboratorio para evitar cambios cidos en las heces (causados por el metabolismo
bacteriano), que son txicos para algunos microorganismos (p. ej., Shigella). Si se prev un
retraso en el envo, las heces deben ser mezcladas con un conservante, como amortiguador
fosfato mezclado con glicerol.
En general, no obstante, un transporte rpido de la muestra al laboratorio es siempre
superior al empleo de cualquier medio de transporte. Es importante notificar al laboratorio la
sospecha de un patgeno intestinal particular porque con ello se ayudar al laboratorio a
seleccionar el medio de cultivo especializado apropiado. Por ejemplo, aunque las especies
de Vibrio pueden crecer en medios comunes utilizados para el cultivo de las muestras de
heces, el empleo de un medio selectivo para Vibrio facilita el rpido aislamiento y la
identificacin de este microorganismo. Adems, algunos microorganismos no se aslan de
modo rutinario por los procedimientos de laboratorio. Por ejemplo, Escherichia coli
enterotoxignica puede crecer en medios de cultivo de rutina pero no sera fcilmente
distinguible de E. coli no patgeno. Igualmente, no se esperara la presencia de otros
microorganismos en una muestra fecal porque la enfermedad est causada por la toxina
producida en el alimento y no por el crecimiento del microorganismo en el tracto
gastrointestinal (p. ej., S. aureus, B. cereus). El microbilogo debe poder seleccionar la
prueba apropiada (p. ej., cultivo, ensayo de toxina) si se indica el patgeno especfico.
Clostridium difficile es una causa significativa de enfermedad gastrointestinal asociada a
antibiticos. Aunque puede cultivarse el microorganismo a partir de muestras fecales, si se
remiten con celeridad al laboratorio, el modo ms especfico para diagnosticar la infeccin
es por la deteccin de las toxinas de C. difficile en extractos fecales responsables de la
enfermedad o de los genes que codifican estas toxinas. Dado que son muchas las bacterias,
tanto patgenas como no patgenas, que se hallan presentes en las muestras fecales, con
frecuencia el aislamiento y la identificacin del patgeno llevan ms de 3 das. Por ello, se
utilizan los coprocultivos para confirmar el diagnstico clnico, y el tratamiento, en caso de
estar indicado, no debe retrasarse a la espera de los resultados de los cultivos.

Deteccin e identificacin Bacterianas


La deteccin de bacterias en muestras clnicas se lleva a cabo por medio de cinco
procedimientos generales: 1) microscopia, 2) deteccin de antgenos bacterianos, 3)
deteccin de cidos nucleicos bacterianos especficos, 4) cultivo y 5) deteccin de la
respuesta de anticuerpos a las bacterias (serologa).

Pruebas de sensibilidad antimicrobiana


Los resultados de las pruebas de sensibilidad a los antimicrobianos son valiosos para
seleccionar los agentes quimioterpicos activos frente al microorganismo infeccioso. Son
numerosos los trabajos realizados para conseguir unos mtodos estandarizados y mejorar el
valor predictivo clnico de los resultados. A pesar de estos esfuerzos, las pruebas in vitro son
sencillamente una determinacin del efecto del antibitico frente al microorganismo en unas
condiciones especficas. La seleccin de un antibitico y el desenlace del paciente se ven
influidos por una variedad de factores interrelacionados, como son las propiedades
farmacocinticas de los antibiticos, la toxicidad del frmaco, la enfermedad clnica y el
estado mdico general del paciente. As, algunos microorganismos que son sensibles a
un antibitico persistirn en la infeccin, y algunos microorganismos que son resistentes a
un antibitico sern eliminados. Por ejemplo, al requerirse oxgeno para que los
aminoglucsidos penetren en la clula bacteriana, estos antibiticos son ineficaces en un
absceso anaerbico. Igualmente, en la orina se pueden conseguir unas concentraciones
muy elevadas de antibiticos; por tanto, las bacterias resistentes responsables de
infecciones del tracto urinario pueden ser eliminadas por las concentraciones urinarias
elevadas de algunos antibiticos. En el laboratorio clnico se llevan a cabo dos formas
generales de pruebas de sensibilidad antimicrobiana: pruebas de dilucin en caldo y
pruebas de difusin en agar. En relacin con las pruebas de dilucin en caldo, se preparan
diluciones seriadas de un antibitico en un medio nutriente y a continuacin se inocula con
una concentracin estandarizada de la bacteria en estudio. Despus de una noche de
incubacin, la mnima concentracin de antibitico capaz de inhibir el crecimiento de las
bacterias recibe la denominacin de concentracin mnima inhibidora (CMI). En relacin con

las pruebas de difusin en agar, se vierte sobre la superficie del medio con agar una
concentracin estandarizada de bacterias y a continuacin se colocan sobre la superficie de
agar discos o tiras de papel impregnados con antibiticos. Despus de una noche de
incubacin se observa una zona de inhibicin del crecimiento que rodea los discos o las tiras
de papel. El tamao del dimetro de inhibicin se corresponde con la actividad del
antibitico; cuanto ms sensible sea el microorganismo al antibitico, mayor es el dimetro
de inhibicin del crecimiento. Al estandarizar las condiciones de la prueba en relacin con
las pruebas de difusin en agar, el dimetro de inhibicin corresponde al valor de la CMI. En
efecto, una compaa comercial ha desarrollado una prueba en la que se calcula el valor de
la CMI a partir de la zona de inhibicin del crecimiento alrededor de una tira con un
gradiente de concentraciones de antibitico desde el comienzo hasta la terminacin de la
tira. Las pruebas de dilucin en caldo fueron llevadas a cabo originalmente en tubos de
ensayo y eran muy laboriosas. En la actualidad se dispone de sistemas preparados
comercialmente en donde las diluciones de antibiticos se preparan en bandejas de
microtitulacin preparadas, y la inoculacin de las bandejas y la interpretacin de las CMI
estn automatizadas. Los inconvenientes de estos sistemas son que la gama de los
diferentes antibiticos viene determinada por la casa fabricante y que el nmero de
diluciones de un antibitico dado es limitado. Por ello, puede no disponerse de los
resultados en relacin con antibiticos recientemente introducidos en el mercado. Las
pruebas de difusin son laboriosas y la interpretacin del tamao del rea de inhibicin
puede ser subjetiva; sin embargo, la ventajas de estas pruebas es que puede probarse
prcticamente cualquier antibitico. La capacidad de ambos mtodos de sensibilidad para
predecir la respuesta clnica a un antibitico es equivalente; por tanto, la seleccin de las
pruebas viene determinada por consideraciones de tipo prctico.

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