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Universidad de Sonora

Unidad Regional Centro, Campus Cajeme

Reaccin de catalasa

Divisin: Ciencias Biolgicas y de la Salud


Alumnos: Flix Jacobo Consuelo G.
Garca Parra Joshua Micael
Rubio Gonzles Alan Daniel
Correo:qbc204m@gmail.com
Semestre: IV
Carrera: Qumico Bilogo Clnico
Profesor: Ramn G. Valdez Melchor
Materia: Laboratorio de bioqumica II

Cd. Obregn Sonora a martes 25 de enero de 2016


ndice
1

Introduccin

Objetivos

Marco terico

Materiales de mtodo

Resultados

Conclusin

Referencias

Anexos

Introduccin
2

La investigacin hace referencia en si a la enzima catalasa, que esta enzima la


podemos definir como la enzima que cataliza la reaccin de descomposicin del
perxido de hidrgeno en agua y oxgeno. Esta enzima est presente en la
mayora de los seres vivos y protege a los microorganismos del H 2O2 txico que se
acumula durante el metabolismo bacteriano y es liberado despus de la
fagocitosis.
Pero, Qu son las enzimas?
Las enzimas son importantes protenas cuya funcin es acelerar la velocidad de
las reacciones qumicas que se producen en el organismo y que son necesarias
para mantener su actividad biolgica, lo cual realizan al disminuir la energa de
activacin. (1)
Que para llevarse a cabo dependen de diversos factores, como por ejemplo el pH,
no tiene que ser ni muy cido ni muy bsicos. La temperatura, es decir que si se le
aumenta la temperatura a dicha reaccin enzimtica aumenta la energa cintica
de las partculas, pues entre ms temperatura su actividad comienza a disminuir
llegando a desnaturalizarse perdiendo totalmente sus propiedades catalticas.
Las reacciones catalizadas por enzimas ocurren a velocidades 10 10 a 1014 veces
ms rpidas que las no catalizadas. Por ejemplo, la ureasa acelera la hidrlisis de
la urea en la orina por un factor de 10 14. Este factor significa que una reaccin
catalizada que toma I segundo en producirse podra tomar un tiempo de 3 millones
de aos sin estar catalizada. (1)
Teniendo en cuenta lo anterior podemos enfocarnos solo en la reaccin de dicha
enzima problema, para comprender como es su reaccin, el por qu se lleva a
cabo y por qu no podra hacerlo.
Objetivo
Estudiar la actividad de la catalasa debido a la modificacin de diversos
factores en donde se desenvuelve.

Marco terico
Primero que todo hoy se sabe que la obtencin del pan y la cerveza fueron
resultado del proceso de fermentacin alcohlica, uno de los procesos enzimticos
ms antiguos. Y que la produccin del queso a partir de la leche, tambin se debe
a un proceso enzimtico. Antes del siglo XIX, se crea que estos fenmenos y
otros similares eran reacciones espontneas. No se conoca la existencia y
funcin de las enzimas.
La funcin que desempeaban las enzimas fue inicialmente establecida por el
mdico italiano Lazzaro Spallanzani. Este investigador estudiaba cmo digeran la
carne las aves carnvoras. Para ello, les daba un trozo de carne amarrado a un
cordel y, a distintos tiempos, retiraba el alimento desde el estmago del ave para
observar y describir los cambios que experimentaba.

(2)

En 1857 el qumico francs Louis Pasteur comprob que la fermentacin slo


ocurre en presencia de clulas vivas. Ms tarde, en 1897, el qumico alemn
Eduard Buchner descubri que un extracto de levadura, libre de clulas, puede
producir fermentacin alcohlica. Este descubrimiento demostr que las levaduras
producen enzimas y stas llevan a cabo la fermentacin. A partir del
descubrimiento de Buchner, los cientficos asumieron que, las fermentaciones y
las reacciones vitales eran producidas por enzimas. Sin embargo, todos los
intentos de aislar e identificar su naturaleza qumica fracasaron.

(2)

En 1926, el bioqumico estadounidense James B. Sumner consigui aislar y


cristalizar la ureasa. Cuatro aos despus su colega John Howard Northrop aisl y
cristaliz la pepsina y la tripsina y demostr tambin la naturaleza proteica de las
enzimas. (2)
En los ltimos aos, la investigacin sobre la qumica enzimtica ha permitido
aclarar algunas de las funciones vitales ms bsicas. Uno de los estudios ms
recientes sobre la enzima catalasa fue el aislamiento de dicha enzima a partir de
Staphylococus aureus, donde se utiliz un mtodo que involucra extraccin con

dioxano y posterior centrifugacin de la enzima sedimentada en forma no cristalina


y con actividad aparente mayor a la masa celular completa.
Esta enzima y otras se encuentran ancladas en la membrana citoplasmtica de la
clula del Staphylococcus aureus.

(3)

De donde se hizo un cultivo a partir de dicha

bacteria con actividad aparente con el perxido de hidrgeno mayor a la masa


celular intacta (presencia de burbujas).

(4)

Donde al final del experimento se obtuvo cristales de catalasa, dando as su


aislamiento como se muestra en la figura 1.
(5)

Figura 1 Cultivo Staphylococus aureus

Cristales de catalsa

Y despus de obtener dichos resultados sealan que la cantidad obtenida de


enzimas fu muy poca debido a la masa celular utilizada. Por otro lado el proceso
de aislamiento es muy lento ya que para lograr la sedimentacin de la enzima de
la extraccin con dioxano tom dos semanas de refrigeracin.
Con lo anterior expuesto podemos notar que la catalasa tiene una funcin
importante en los tejidos ya que es necesaria para eliminar la molecular de H 2O2
que se forman, para transformarla en agua y oxgeno solucionando el problema.

Materiales de mtodo
Tabla No. 1 Material, equipos y reactivos
Material
1 gradilla

Equipos
Bao
Mara

1 Vaso de precipitado de 500mL


1 Vaso de precipitado de 50mL

Reactivos
Cianuro de sodio al 5%

Muestra
Sangre
total

Nitrato de plomo al 5%
Perxido de hidrogeno
al 3%

1 Micro pipeta de 1mL


9 tubos de ensaye 15x150 mm
1 pinza para tubos de ensaye
1 mechero
1 tripi
Tela de asbesto
Kit Vacutainer con tubo de tapn rojo
Mtodos
Se llev a cabo la extraccin sangunea por puncin venosa con el kit vacutainer
hacia un tubo de tapn rojo sin anticoagulante. Al haber obtenido la muestra se
procedi a preparar un bao de agua hirviendo agregando 350mL de agua en un
vaso de precipitado de 500mL. Se prepararon tambin 4 tubos, limpios y
etiquetados con su nmero correspondiente. A los cuatro tubos se les agrego 3mL
de perxido de hidrogeno (H 2O2) al 3%. Al tubo 3 se agregaron 5 gotas de cianuro
de sodio (NaCN) al 5% y al tubo 4 cinco gotas de nitrato de plomo (Pb(NO3)2) al
5%. Seguidamente se prepar una dilucin 1:50 de sangre agregando 0.5mL de
sangre en 25mL de agua destilada. En un tubo de ensaye limpio se agregaron
3mL de la dilucin y se coloc en el agua hirviendo por 5 minutos. Al concluir el
tiempo se agreg el contenido al tubo 2. A los tubos 1,3 y 4 se agregaron 3 mL de
la dilucin, se agitaron y se colocaron en bao mara a 37C por 5 minutos. Al
concluir el tiempo se realizaron observaciones.

Resultados

Como se puede ver en la figura 2 se encuentran los tubos despus del bao mara
en el que se puede notar una mayor actuacin de la encima es en el tubo 1
(derecha) donde se ve ms claro el contenido del tubo, tambin se puede notar
una mayor cantidad de espuma, mientras que en el tubo 2 se puede apreciar un
color caf claro, el cual se debe a que fue llevado a punto de ebullicin en otro
bao mara, por lo cual las protenas contenidas en el lquido se desnaturalizaron
dndole esa coloracin. Por ltimo en los tubos 3 y 4 se puede apreciar una
coloracin parecida a la del primer tubo, slo que un poco ms fuerte, tambin se
puede

ver

menos

espuma.

Figura 2: Tubos de
ensaye con sangre
diluida despus del
bao Mara

Conclusin

Referencias
Thomas M. Devlin, Ph. D. 2004, Bioqumica con aplicaciones clnicas, Revert, 4ta
edicin, Barcelona Espaa.
Teijn Rivera Jos M. Garrido Pertierra Armando, 2006, Fundamentos de
bioqumica estructural, Trbar S.L, Madrid.
Recuperado en https://www.tplaboratorioquimico.com/quimica-general/quimica-delos-seres-vivos/que-son-las-enzimas.html (1)
Recuperado en http://enzimass.blogspot.mx/2011/06/historia-de-las-enzimas.html
(2)
Recuperado en http://www.oocities.org/capecanaveral/Lab/7839/catalasa.html (3)
Konneman; Allen; Dowell; 1992. Diagnstico Microbiolgico. 3 edicin. Editorial
Mdica Panamericana. (4)
Recuperada en http://www.oocities.org/capecanaveral/Lab/7839/catalasa.html (5)
Recuperada en http://quimica.laguia2000.com/conceptos-basicos/enzima-catalasa
(recopilacin de figura 3)
Recuperada

en

www.nature.com/eye/journal/v23/n6/fig_tab/eye2008284f1.html

(recopilacin de figura 4)

Anexos

Figura 3: Desnaturalizacin
de la enzima catalasa
mediante hgado de res.

continuacin en la figura 4 se muestra la actividad enzimtica de la


catalasa en presencia al H 2O2 cuando la enzima est en su forma
natural y cuando est desnaturalizada.

Figura 4: comportamiento de la
catalasa.

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